Reacciones Bioqumicas y Accin Enzimtica de las Bacterias y Flora

Normal (Faringe, Boca, Odo, Ojos y Nariz)

Fundamentacin Terica

La flora microbiana normal denota la poblacin de microorganismos que habitan en

la piel y las mucosas de las personas sanas. La piel y las mucosas siempre albergan
algunos microorganismos que pueden clasificarse en dos grupos:
Flora Resistente: Esta consta de microorganismos relativamente fijos de
microorganismos presentes con regularidad en cierta regin a una edad
determinada; cuando se altera se reestablece por si misma prontamente.
Flora Transitoria: Consta de microorganismos no patgenos o parcialmente
patgenos, que habitan la piel o la mucosa durante horas, das o semanas; se
derivan del habiente y no produce enfermedad. Debido a su continua exposicin y
contacto con el ambiente, la piel es acta para alojar microorganismos transitorios.
Los microorganismos residentes predominantes de la piel son bacilos difteroiedes
aerobios y anaerobios. Entre los posibles factores ms importantes para la
eliminacin de microorganismos ms no residentes en la piel estn: pH bajo, cidos
grasos en la secrecin sebcea y presencia de lisozima. Con frecuencia las bacteria
aerobias y anaerobias se unen y causan infecciones sinrgicas en piel y tejido
blando. Es difcil identificar a un microorganismo como causante de la lesin
progresiva, puesto que generalmente participan mezclas de microorganismos.

Muchos factores determinan la distribucin y la composicin de la flora normal. Entre

ellos se encuentran los nutrientes, diversos factores fsicos y qumicos, las defensas
del husped y los factores mecnicos. Los microbios varan respecto de los tipos de
nutrientes que pueden utilizar como fuente de energa. En consecuencia, solo
colonizan los sitios del cuerpo que suministran los nutrientes adecuados. Estos
nutrientes pueden derivar de los productos de secrecin y excrecin de las clulas,
de las sustancias presentes en los lquidos corporales y las clulas muertas y de los
alimentos del tracto gastrointestinal.
Varios factores fsicos y qumicos afectan el crecimiento de microorganismos y en
consecuencia el crecimiento y la composicin de la flora normal. Entre ellos figuran
la temperatura, el pH, la disponibilidad de oxgeno y dixido de carbono, la salinidad
y la luz solar.
Las defensas del cuerpo incluyen diversas molculas y clulas activadas que
destruyen a los microbios, inhiben su crecimiento, impiden si adhesin a las
superficies celulares del husped y neutralizan las toxinas que producen. Si bien
estas defensas son muy importantes contra los patgenos, se desconoce su papel
en la determinacin y la regulacin de la flora normal (Gerard , Tortora, Berdell ,
Christine , & Case, 2007).
Materiales y Reactivos
MATERIALES
Autoclave Asas Bacteriolgicas
Microscopio Bajalenguas estriles
Incubadora Hisopos Escobillones estriles
Mechero Lminas o portaobjetos

REACTIVOS
Violeta de Gram
Lugol de Gram
Alcohol Acetona ( 3:1 )
Fucsina de Gram
Aceite de Inmersin
Agar TSI inclinado en tubo
Agar LIA inclinado en tubo
Medio SIM en tubo
Perxido de Hidrgeno
Tubos con Escherichia coli
Tubos con Klebsiella pneumoniae
Agar Sangre en cajas de petri
Agar Chocolate en cajas de petri
Medio Tioglicolato en tubo
Caldo Nutritivo en tubo
Agar Citrato inclinado en tubo
Caldo RMVP en tubo
Medio Gelatina en tubo
Agar Urea inclinado en tubo
Tubos con Salmonella spp.
Tubos con Staphylococcus aureus
Tubos con Enterobacteria

Procedimiento Experimental
Reacciones Bioqumicas
 En tubo
En el cultivo marcado con
Staphylococcus aureus, Observar formacin
sembrar con asa redonda de cogulo.
en plasma, e incubar por 2
Prueba horas.
Coagulasa En lmina:
En una lmina adicionar Mezclar y observar
una gota de plasma estril, formacin de
con una asa redonda grumos.
tomar un inculo de la
cepa indicada.

Tomar con la mano

izquierda el tubo con Retirar y sostener con
Prueba Catalasa agar nutritivo con la mano derecha el
Staphylococcus tapn del tubo.
aureus.

Calentar el asa
Adicionar una gota de redonda, enfriar
En una lmina limpia
perxido de hidrgeno contra las paredes del
adicionar el inculo
y observar formacin tubo y tomar un
del asa.
de burbujas. inculo de la
superficie del medio.
Flora Normal

Flora Normal

Boca Dientes Faringe

Tomar la muestra de
Tomar la muestra de caries, desinfectano Introducir un
encas, surcos a los previamente la zona aplicador en la
lados de los dientes. expuesta a cavidad bucal.
contamivnacin con
saliva.

Con otro aplicador Llevar a Observar los frotis para

Sembrar en Agar tomar la muestra y incubar a 37C anlisis microcscpicos y
Sangre una realizar el frotis por 24 horas. cultivos con anlisis
parte masiva y ycolorear con Gram. macroscpicos
en tioglicolato.

Toma de muestra
Odos y Nariz.

Se realiza el mismo
Realizar anlisis
procedimiento
microscpico y
anterior,evitando lastimar
macroscpico.
conductos.

Tabla de Resultados
Reacciones Bioqumicas
Medio S. Observaciones
de Aureus Salmonella S. Aureus Salmonella
Cultivo

TSI + +

LIA + +

Citrato + +
 SIM + +

RMVP + +

Flora Normal
Muestra Medio Crecimiento Observaciones

Muestra 1
Crecimiento
Faringe Chocolat Abundante
e Muestra 2
Crecimiento
Masivo
 Muestra 1
Faringe Sangre Crecimiento
Abundante
Muestra 2
Crecimiento
Masivo

M1 Boca
Crecimiento
Boca (M.I.) Escaso
Pabelln Sangre M2 Pabelln Odo
Odo, y Crecimiento
Diente. Escaso
M3 Diente
Crecimiento
Masivo

M1 Ombligo
Crecimiento
Abundante
M2 Nariz
Ombligo, Crecimiento
Nariz, Pie Sangre Abundante
y Senos. M3 Pie
Crecimiento
Escaso
M4 Senos
Crecimiento
Escaso

Frotis
Muestra Observaciones
Diente
Axila
Pie
Axila

Anlisis de Resultados
 Cuestionario

1. Composicin y tipos de reacciones que se presentan en cada medio a trabajar.

Visualizacin de las
Medio Componentes Caractersticas Usos Colonias
Agar base (BHI, Aislamiento de la gran
Columbia, TSA, mayora de Distingue tres tipos de
Brucella) + 5% microorganismos, hemlisis: -hemlisis o
Agar Sangre sangre de oveja Diferencial, permite ver incluidos algunos muy hemolisis total -hemlisis
desfibrinada. distintos tipos de exigentes. No permite el o hemlisis parcial -
hemlisis. crecimiento de Neisseria hemlisis o no hemlisis.
y Haemophilus.
Agar sangre,
con la sangre
lisada (por Medio rico que permite el
calentamiento a crecimiento de una gran
80C). Los mayora de los
Agar eritrocitos Ya no es diferencial. microorganismos, ----------------------
Chocolate lisados liberan la incluidos los muy
hemoglobina y exigentes como
otros nutrientes Neisseria y Haemophilus
como factor X
(hemina) y factor
V (NAD)
Extracto de
carne con NaCl.
Caldo Se puede
Nutritivo suplementar con ---------------------- Para microorganismos ------------------------
extracto de no exigentes.
levadura,
peptonas,
glucosa, etc.
Caldo Favorece el crecimiento
suplementado de aerobios,
con casena, microaerfilos, y
extracto de anaerobios (capa de
levadura y de Caldo ms utilizado en parafina lquida), incluso
Caldo carne y microbiologa clnica. microorganismos
Tioglicolato tiglicolato. Para Bajo potencial redox. exigentes. Bajo --------------------------
anaerobios, potencial redox,
aadir adems favorece la recuperacin
hemina y de anaerobios.
vitamina K.
En el medio de cultivo, la
peptona y el extracto de
levadura aportan los
nutrientes para el
desarrollo bacteriano. La
 glucosa es el hidrato de
carbono fermentable, y
la lisina es el sustrato
utilizado para detectar la La produccin de sulfuro
Medio de cultivo presencia de las de hidrgeno, se visualiza
utilizado para enzimas decarboxilasa y por el ennegrecimiento del
diferenciar deaminasa. El citrato de medio debido a la
microorganismo hierro y amonio, y el formacin de sulfuro de
s, tiosulfato de sodio, son hierro.
especialmente los indicadores de la Las cepas de los gneros
LIA Salmonella spp., produccin de cido Proteus, Providencia y
basado en la sulfhdrico. El purpura de algunas cepas de
decarboxilacin bromocresol, es el Morganella, desaminan la
/ desaminacin -------------------- indicador de pH, el cual lisina, esto produce un
de la lisina y en es de color amarillo a pH cido alfa-ceto-carbnico,
la produccin de igual o menor a 5.2, y de el cual, con la sal de hierro
cido color violeta a pH igual o y bajo la influencia del
sulfhdrico. mayor a 6.8. oxgeno forma un color
Por decarboxilacin de rojizo en la superficie del
la lisina, se produce la medio
amina cadaverina, que
alcaliniza el medio y esto
produce el viraje del
indicador al color violeta.
La decarboxilacin de la
lisina, tiene lugar en
medio cido, por lo que
es necesario que la
glucosa sea
previamente
fermentada.
El triptfano es un Las cepas mviles
aminocido pueden apreciarse en
constituyente de este medio, por la
muchas peptonas, y turbidez que producen
particularmente de la alrededor de la puncin
Es un medio triptena, que puede de siembra, mientras
semislido ser oxidado por que aquellas cepas
destinado a algunas bacterias para productoras de Es til para diferenciar
SIM verificar la formar indol. En el sulfhdrico se distinguen miembros de la familia
movilidad, proceso interviene un por la formacin de un Enterobacteriaceae.
produccin de conjunto de enzimas precipitado negro de
indol y de sulfuro llamadas triptofanasa. sulfuro de hierro a partir
de hidrgeno en El indol producido se del tiosulfato siempre
un mismo tubo. combina con el que el medio se
aldehido del reactivo mantenga a un pH
de Kovacs o de Erlich, mayor a 7.2.
para originar un
compuesto de color
rojo.

En el medio de cultivo,
el extracto de carne y
la pluripeptona,
aportan los nutrientes
adecuados para el
 desarrollo bacteriano. Por fermentacin de
Medio La lactosa, sacarosa y azcares, se producen
universalmente glucosa son los cidos, que se detectan
empleado para hidratos de carbono por medio del indicador
la diferenciacin fermentables. El rojo de fenol, el cual vira
de tiosulfato de sodio es el al color amarillo en
enterobacterias, sustrato necesario medio cido. El tiosulfato -----------------------
TSI en base a la para la produccin de de sodio se reduce a
fermentacin de cido sulfhdrico, el sulfuro de hidrgeno el
glucosa, lactosa, sulfato de hierro y que reacciona luego con
sacarosa y a la amonio, es la fuente de una sal de hierro
produccin de iones Fe3+ , los cuales proporcionando el tpico
cido se combinan con el sulfuro de hierro de color
sulfhdrico. cido sulfhdrico y negro.
producen sulfuro de
hierro, de color negro.
El rojo de fenol es el
indicador de pH, y el
cloruro de sodio
mantiene el balance
osmtico.
En el medio de cultivo,
el fosfato
monoamnico es la
nica fuente de
nitrgeno y el citrato de
sodio es la nica fuente El metabolismo del
de carbono. Ambos citrato se realiza, en
componentes son aquellas bacterias
Medio utilizado necesarios para el poseedoras de citrato
para la desarrollo bacteriano. permeasa, a travs del
diferenciacin Las sales de fosfato ciclo del cido
de forman un sistema tricarboxlico. El
enterobacterias, buffer, el magnesio es desdoblamiento del
Citrato en base a la cofactor enzimtico. El citrato da
capacidad de cloruro de sodio progresivamente,
usar citrato mantiene el balance oxalacetato y piruvato.
como nica osmtico, y el azul de Este ltimo, en
fuente de bromotimol es el presencia de un medio
carbono y indicador de pH, que alcalino, da origen a
energa. vira al color azul en cidos orgnicos que, al
medio alcalino. El ser utilizados como
medio de cultivo es fuente de carbono,
diferencial en base a producen carbonatos y
que los bicarbonatos alcalinos.
microorganismos El medio entonces vira al
capaces de utilizar azul y esto es indicativo
citrato como nica de la produccin de
fuente de carbono, citrato permeasa.
usan sales de amonio
como nica fuente de
nitrgeno, con la
consiguiente
produccin de
alcalinidad.
 Esta prueba se realiza
para determinar la
Polipeptona 7,0 capacidad de un
g Glucosa 5,0 g microorganismo de
Fosfato fermentar la glucosa con
RMVP dipotsico 5,0 g --------------------- produccin de cido por -------------------------------
Agua destilada la va cido mixta o con
1000,0 mL. produccin de un
producto final neutro
(acetona) por la va
butanodilica.
(N.E., Medios Ricos y Enriquecidos, 2015)

2. Cul es la enzima que peptoniza la leche?

Peptona es un trmino qumicamente indefinido, usado para describir productos solubles en agua,
obtenidos despus de la hidrlisis de protenas. Contiene una mezcla de aminocidos libres y
polmeros de aminocidos (pptidos) incrementando su nmero como pptidos de mayor tamao
(proteasas), que pueden quedar en la solucin despus del calentamiento a 100C. Las peptonas se
fabrican por el uso de enzimas o cidos minerales fuertes, que hidrolizan las protenas. Los
problemas asociados a la produccin de peptonas fueron rpidamente identificados y los productores
de peptonas comenzaron a relacionarse con los proveedores comerciales. La peptona fue el primer
ingrediente de un medio de cultivo complejo provisto por la industria y el disparador de la gran
variedad de ingredientes de medios comerciales disponibles hoy. La variedad de peptonas
producidas refleja las diversas demandas de los microorganismos, con respecto a aminocidos y
pptidos. Las protenas usadas para la produccin de peptonas, pueden ser divididas entre protenas
de la carne (incluidas casena y gelatina) y protenas de plantas (como la protena de soja). Las
peptonas producidas a partir de estos productos, pueden a su vez ser subdivididas en aquellas
obtenidas por cidos, o por enzimas como pepsina, tripsina o papana. Las diferentes enzimas
rompen las uniones peptdicas en la molcula proteica en diferentes lugares, liberando una gran
variedad de pptidos y aminocidos libres. Dondequiera que la hidrlisis cida rompa cada unin
peptdica y produzca aminocidos libres, desafortunadamente tambin destruye algunos valiosos
aminocidos como el triptfano. Los aminocidos pueden ser usados por los microorganismos como
ladrillos para la construccin de las protenas o tambin pueden ser usados como fuente de energa,
formando compuestos como el sulfuro de hidrgeno, indol, aminas, etc. En los test diagnsticos las
peptonas pueden ser seleccionadas segn sus virtudes predominantes, as las peptonas ricas en
triptfano son seleccionadas para los test de indol. Las peptonas con alto contenido en sulfuro
pueden ser usados para test de hidrgeno sulfurado. En los desarrollos a gran escala de
microorganismos ellos mismos son cosechados (produccin de vacunas) o sus metabolitos son
retenidos (como la produccin de antibiticos o exotoxinas), por lo que se requieren peptonas
especiales para estos propsitos, y la investigacin constante va hacia la produccin de peptonas
que den mayor rendimiento en nmero de microorganismos o mayores concentraciones de
metabolitos. Las peptonas aportan otros factores adems de los aminocidos a los medios de cultivo;
fracciones de cidos nucleicos, minerales, vitaminas, que tambin es necesario suministrar. Las
peptonas de plantas proveern tambin carbohidratos que pueden estimular el crecimiento de los
microorganismos. Es la presencia de metales alcalino trreos y fosfatos en peptonas, lo que causa
precipitados, que aparecen cuando el pH es ajustado hacia la neutralidad. Por eso es la ventaja de
las peptonas fabricadas a pH neutro.

Leche Peptonizada: Es una peptona usada en medios para el aislamiento y cultivo de Lactobacilos,
y para el anlisis bacteriolgico de productos lcteos. Es un polvo soluble en agua preparado por la
digestin pancretica de leche en polvo descremada. Esta preparacin constituye una fuente ms
rpidamente disponible de N2 que la leche o la leche en polvo. Puede ser usada (como una solucin
simple, solidificada con agar, o como constituyente de medios ms complejos) para la investigacin
de bacterias cido-lcticas como Lactobacillus acidophilus y Lactobacillus bifidus (N.E., 2015).

3. Que son Exoenzimas y Endoenzimas?

Exoenzimas: Son la excretadas por las clulas microbianas al medio que les rodea. Agentes
importantes en la degradacin de restos vegetales hacia pequeos fragmentos que presentan gran
rea superficial, lo que favorece y estimula la actividad microbiana y exoenzimtica. Cuando las
colonias microbianas se desarrollan en un medio con agar que contiene partculas de una
macromolcula insoluble que es digerible, cada colonia se presenta rodeada de un rea clara en
expansin en la que el substrato ha sido hidrolizado por la accin de los exoenzimas. La mayora de
los Exoenzimas que tienen una funcin digestiva estn sometidos a represin por catablito es decir,
su sntesis se reprime si en el medio estn presentes fuentes de carbono y energa que sean ms
rpidamente metabolizables (Stainer, Ingraham, Wheelis , & Painter, 1992)

Endoenzimas: Las endoenzimas funcionan en el interior y son enzimas especficas asociadas con
los componentes insolubles de las clulas, como la membrana plasmtica, los mesosomas y los
ribosomas; se relacionan con la sntesis de protoplasma y el suministro de energa. Las enzimas
constitutivas se encuentran siempre presentes en las clulas, independientemente del medio
circundante (Cabello, 1999).

4. La amilasa, la coagulasa y enzimas proteolticas son exoenzimas o endoenzimas.

5. Cul es el objetivo de determinar el tipo de flora presente en un rea del cuerpo?

Es un medio de estudio del que nos servimos para determinar la causa de una infeccin. El
procedimiento que se utiliza suele iniciarse con la toma de muestras de los tejidos, exudados,
lquidos corporales, etc. del paciente. A continuacin, estas muestras se envan al laboratorio de
microbiologa para su estudio posterior. El microscopio nos permite observar los microorganismos
(los presentes en esas mismas muestras), tales como hongos o bacterias. El cultivo sirve para lograr
una proliferacin de esos microorganismos y de ese modo poder estudiarlos mejor. El diagnstico
etiolgico de la enfermedad infecciosa se establece desde el momento en que se asla e identifica
el agente causante.
Entre los microorganismos que podemos encontrar, tenemos: bacterias, mico plasmas y otros
organismos de la clase mollicutes, clamidias y rickettsias, parsitos, hongos, Virus.

Cultivo bacteriano
En condiciones normales, la piel, las membranas y las mucosas de nuestro organismo estn
colonizadas por diferentes especies de microorganismos. Entre ellos, y de modo destacado, se
encuentran distintos tipos de bacterias, generalmente inofensivas, incluso algunas
beneficiosas. Otras bacterias son capaces de causar infecciones slo en determinadas
circunstancias: cuando proliferan demasiado, o bien en personas con problemas autoinmunes, o que
estn tomando determinados frmacos.
Finalmente, hay bacterias que son capaces de causar dao aun en circunstancias normales.
Cuando se sospecha de una infeccin por una bacteria, se tomar una muestra del lugar de la
infeccin; por ejemplo un exudado (secrecin) de la conjuntiva del ojo, en caso de conjuntivitis o bien
una muestra de orina si hay una infeccin urinaria; o de lquido cefalorraqudeo si se trata de una
meningitis
Las muestras pueden proceder de prcticamente cualquier lugar del organismo.
Algunas de las bacterias (observacin directa por tincin de Gram.) importantes que causan infeccin
son:
1. Bacterias Gram. positivas:
o Estreptococos: pueden ser responsables de infeccin en la sangre, faringitis,
infeccin de las vlvulas del corazn, fiebre reumtica, escarlatina, neumona, etc.
o Corinebacterias: difteria, infeccin de orina, etc.
o Clostridios: ttanos, botulismo, gangrena gaseosa, infeccin de la sangre, etc.
 o Bacillus: antrax.
o Estafilococos: pueden causar Neumona, infecciones supuradas (con pus) en la piel
y abscesos en otros lugares, sndrome del shock txico, meningitis, artritis,
osteomielitis, enteritis, etc.
2. Bacterias Gram negativas:
o Salmonella, Shigella y Campylobacter: pueden provocar infeccin en el intestino.
o Escherichia coli y otras enterobacterias: pueden provocar neumona, infeccin de
orina, infeccin en la sangre, etc.
o Legionella: puede provocar una neumona grave y atpica (la enfermedad del
legionario)
o Meningococos: puede causar meningitis cerebroespinal.
o Haemophyllus: infeccin respiratoria, meningitis, etc.
o Gonococo: causa la gonorrea
o Brucella: brucelosis (fiebre de malta).
o Pseudomonas: infecciones de odo e infecciones en mltiples lugares en personas
debilitadas (neumonas en pacientes de UVI, infeccin en los pies en diabticos,
infeccin respiratoria en pacientes con fibrosis qustica, etc.).
o Bordetella: tosferina
o Otras bacterias importantes no se tien bien con este mtodo y para ellas se usan
otros; por ejemplo, para las bacterias (micobacterias) que causan la tuberculosis o
la sfilis (treponemas).
Realizacin y transporte
La muestra se enva al laboratorio de microbiologa, para su estudio, y hasta que sea procesada, se
procurar que se altere lo menos posible. Los resultados que se obtienen, dependen en gran medida
de la calidad de la muestra, de la calidad de la obtencin y de las condiciones de transporte, por lo
que debemos:
Obtener las muestras preferentemente antes de comenzar la antibioterapia o bien antes de
introducir cualquier modificacin al tratamiento con antimicrobianos.
La muestra obtenida no debe presentar contaminacin con flora habitual, o ser la mnima
posible.
Los sistemas de recoleccin deben ser apropiados al tipo y volumen de la muestra que se
desea obtener. El material usado debe ser estril y libre de material residual, como
detergentes o desinfectantes.
La muestra debe llegar al laboratorio tiempo determinado
Las muestras deben ser identificadas con una etiqueta adherida al envase, y los datos
anotados deben coincidir exactamente con los de la solicitud de examen.
Deben incluirse aquellos datos del paciente que permitan al laboratorio elegir el mejor
procedimiento para el aislamiento de patgenos, tales como edad, hiptesis diagnstica,
tratamientos concomitantes (especialmente antibiticos) enfermedades concomitantes, etc.

Observacin macroscpica
1. Observacin directa sin tincin o preparacin al fresco:
o Para la bsqueda de hongos, bacterias y parsitos. La muestra se suspende en
suero fisiolgico, permite encontrar Tricomonas Treponemas en solucin de KOH,
preferentemente en la identificacin de hongos o bien en tinta china. la visualizacin
de Cryptococcus neoformans.
2. Observacin directa con tincin:
o Tincin de Gram. La diferente coloracin que adquieren las bacterias Gram positivas
se basa en el menor contenido lpidos de la pared celular y en la reducida
permeabilidad a los solventes de estos microorganismos, en comparacin con los
gramnegativos. Las bacterias gram positivas se tien violeta por la retencin del
complejo cristal violeta genciana/yodo, mientras que las gram-negativa no retienen
el complejo y se tien rojas al usar la contratincin de safranina.
La tincin de Gram ayuda a determinar rpidamente las caractersticas morfolgicas,
por lo que es til en la indicacin de los antibiticos. Esta tincin tambin permite
establecer si el material enviado al laboratorio para su cultivo posee la calidad
 adecuada. Por ejemplo, es inadecuada una muestra de expectoracin en que se
observan abundantes clulas epiteliales, lo que indica que est constituida
principalmente por saliva y no secrecin del tracto respiratorio. La presencia de
polimorfosnuecleares (PMN) puede indicar infeccin. Los hongos levaduriformes se
observan formando pseudomicelios cuando hay invasin y no slo colonizacin.
o Tincin de Giemsa y Wright. Es til en el diagnstico de algunos parsitos como
malaria y babesiosis . En las lesiones producidas por virus Herpes simplex y virus
varicela-zoster, se observan clulas gigantes multinucleadas, propias de las
lesiones virales, lo que permite distinguirlas de las lesiones piodrmicas bacterianas.
o Tincin argntica (Gomori metenamina de plata, Dieterle). Es una tcnica difcil de
efectuar, reservada a los laboratorios especializados, til en la deteccin de
Pneumocytis carinii, Legionella.Treponema, hongos, rickettsias, y microorganismos
asociados a la enfermedad por araazo de gato.
o Tincin cido peridico de Schiff (PAS). Permite la deteccin de hongos en muestras
de tejido.
o Tincin con anaranjado de acridina. Utiliza un fluorocromo que tie el cido
desoxirribonucleico (ADN). Es ms sensible que la tincin de Gram , ya que an las
bacterias daadas por los antibiticos pueden ser visualizadas. Requiere de
microscopio de fluorescencia.
o Tincin con azul de metileno. Es usada en la bsqueda de leucocitos fecales,
permitiendo una buena tincin de los ncleos de estas clulas. Se visualizan en las
infecciones intestinales invasoras de la pared del tubo digestivo, como las
producidas por Escherichia coli enteroinvasora, Shigella, colitis ulcerosa,
enfermedad de Crohn y enterocolitis asociada a antibiticos.

6. Porqu es tan importante dar un diagnstico rpido en caso de sospecha de difteria?

Una enfermedad bacteriana aguda afecta de modo principal a las amgdalas, faringe, laringe, nariz
y en ocasiones a otras membranas mucosas o de la piel incluidas las conjuntivas o la vagina. La
lesin caracterstica, causada por la liberacin de una citotxica especfica, consiste en una
membrana blanco grisceo adherente asimtrico, con reaccin inflamatoria alrededor.

Las 3 formas de presentacin ms frecuente son:

Difteria faringoamigdala: hay dolor de garganta con agrandamiento y dolor al tacto de los ganglios
linfticos cervicales; en los casos moderados o graves hay hinchazn y adems del cuello con
grandes membranas trnquela es que pueden llegar a obstruir las vas respiratorias.

Difteria nasal: puede ser leve y crnica con secrecin y excoriaciones unilaterales; las lesiones no
manifiestas superan en nmero a los casos que se manifiestan en forma clnica. La toxina provoca
miocarditis y una semana despus de iniciar su ataque puede aparecer bloqueo cardiaco e
insuficiencia cardiaca congestiva progresiva.

Difteria Cutnea: las lesiones de la difteria cutnea son variables y pueden ser indistinguibles de
los del imptigo o pueden ser parte de ellas, normalmente no se advierten los efectos perifricos de
la neurotxica. El diagnstico diferencial de la faringitis bacteriana ha de hacerse, bsicamente, con
la angina estreptoccica y la vrica, angina de Vincent, mononucleosis infecciosa, sfilis y candidiasis
y sospechar siempre de una posible difteria.

7. Cules son los microorganismos que se encuentran normalmente en la faringe, odo, ojos,
nariz y boca?

Ubicacin Sitio anatmico especfico

Piel reas hmedas: regin inguinal, regin axilar, espacio interdigital
de los pies.
 Tracto Respiratorio Fosas nasales, faringe.
Tracto Digestivo Boca, intestino grueso.
Tracto Genitourinario Tercio anterior, uretra, vagina.

Microorganismos del Tracto Respiratorio

Microorganismos Ubicacin Enfermedad

Acinetobacter spp Nasofrinx Meningitis, neumona
bacteriana
Actinomyces spp Boca, amgdalas Actionomicosis, clculos
salivales
Arachnia propionica Boca Actinomicosis
Bacterionema matruchotti Sup. Dentaria gingival No determinada
Bacteroides spp Faringe Enfermedad crnica de las
meninges
Bifidobacterium spp Boca Actinomicosis
Campylobacter sputorum Nasofrinx, encas, superficie No determinada
dentaria, saliva.
Candida albincans Boca, nariz Endocarditis bacteriana
subaguda, absceso pulmonar
enterobacteriaceae Boca, faringe Neumona, abceso pulmonar
Enterococcus Boca, amgdalas, nariz Bacteremia, meningitis,
neumona, endocarditis
Eubacterium spp Boca No determinada
Fusobacterium spp Boca, amgdalas Angina de Vincent, abceso
pulmonar
Haemophilus spp Boca, nasofrinx Laringotraqueobronquitis,
meningitis, neumonitis,
bacteremia, conjuntivitis.
Lactobacillus spp Boca, saliva Endocarditis bacteriana
Leptotrichia buccalis Boca, Sup. dentaria No determinada
Micrococcus spp Boca, amgdalas No determinada
Moraxella spp Nasofrinx Conjuntivitis
Neisseria spp Boca, nasofrinx Meningivitis
Peptostreptococcus spp Boca, amgdalas Gangrena pulmonar, faringe
absceso pulmonar
Propionibacterium acnes Nariz Acn, endocarditis
Rothia dentocariosa Boca Absceso
Selenomonas sputigena Nasofrinx No determinada
Staphylococcus aureus Boca, Nasofrinx, nariz Neumona, otitis absceso
Treponema refringesns Boca Angina de Vincent
Veillonella spp Boca, amgdalas Endocarditis bacteriana
Vibrio sputorum Boca No determinada
Streptpcoccus grupo viridans Boca, faringe Endocarditis bacteriana
subaguda

Microorganismos del Tracto Gastrointestinal

Microorganismo Ubicacin Enfermedad

Achromobacter spp Intestino grueso, leon bajo Infecciones post-operatorias,
post-traumticas
Acidaminococcus frementans Intestino grueso No determinada
Acinetobacter calcoacetius Intestino grueso, leon Infecciones post-operatorias
 Aeromonas spp Intestino grueso, leon bajo Diarrea, septicemia,
osteomielitis
Alcaligenes faecalis Intestino grueso, leon Gastroenteritis bacteremia
Bacilus spp Intestino grueso Intoxicacin alimentaria,
infeccin herida
Bacteroides spp Intestino grueso, leon bajo Peritonitis, absceso,
colecistitis, enteritis
Campylobacter spp Intestino grueso Diarrea
Candida albicans Intestino grueso, leon bajo Complicaciones post-
operatorias

Corynebacterium spp Intestino grueso, leon bajo No conocida

Enterococcus Intestino grueso, leon bajo Peritonitis, colecistitis
complicaciones post-
operatorias
Eubacterium spp Intestino grueso Diverticulitis, peritonitis
Flavobacterium Intestino grueso, leon bajo Meningitis, peritonitis
Flavobacterium spp Intestino grueso, leon bajo Absceso, bacteremia
Lactobacillus spp Intestino grueso, leon bajo No conocida
Mycobacteria spp Intestino grueso, leon bajo ----
Pseudomas aeruginosa Intestino grueso, leon bajo Gastroenteritis, meningitis,
Ruminococcus bromii Intestino grueso No determinada
Sarcina spp Intestino grueso No determinada
Staphylococcus aureus Intestino grueso, leon bajo Absceso pancretico, enteritis,
intoxicacin alimentaria,
complicaciones de
enterocolitis.
Veillonella spp Intestino grueso No determinada
Strepcoccus grupo viridans Intestino grueso, leon bajo No conocida
Vibrio spp Intestino grueso, leon bajo No por bacterias habituales

Microorganismos del Tracto Genitourinario

Microorganismo Ubicacin Enfermedad

Acinetobacter spp Uretra anterior, vagina Uretritis, complicaciones de la
instrumentacin y de la ciruga
Bacteroides spp Genitales externos Complicaciones de la ciruga
Bifidobacterium sp Vagina No conocida
Candida albicans Genitales externos, vagina, Candidiasis
uretra anterior
Chamydia spp Uretra, vagina Uretritis, cervicitis, enfermedad
recin nacido, linfogranuloma
venreo
Clostridium sp Vagina Complicaciones de la ciruga,
aborto
Corynebacterium spp Genitales externos, vagina, No determinada
uretra anterior
Enterobacteriaceae Genitales externos, vagina, Pielonefritis, cistitis,
uretra anterior Bacteriuria
Enterococcus Genitales externos, vagina, Pielonefritis, cistitis,
uretra anterior Bacteriuria
Fusobacterium spp Genitales externos, vagina No determinada
Gardnerella vaginalis Uretras externos, vagina Vaginitis
Lactobacilus spp Vagina Ninguna
 Moraxella spp Vagina Complicaciones post-parto,
operatorias y del recin nacido
Mycobacteriumm spp Genitales externos, vagina, No por bacterias habituales
uretra anterior
Neisseria spp Genitales externos, vagina, No por bacterias habituales
uretra anterior
Sarcinna spp Genitales externos, vagina Complicaciones post-parto,
post-operatorias fiebre
puerperal
Staphylococcus aureus Genitales externos, vagina, Uretritis, furunculosis
uretra anterior
Staphylococcus Genitales externos No claramente establecida
Trichomonas vaginalis Uretra anterios, vagina Vaginitis
Strepcoccus grupo viridans Genitales externos, vagina, Ninguna
uretra anterior

Microorganismos de la piel, odos y ojo

Microorganismo Ubicacin Enfermedad

Acinetobacter sup. Piel Complicaciones en pacientes
inmunocomprometidos
Bacillus spp Piel Iridiciclitis, panoftalmitis,
meningitis
Candida albicans Piel Paroniquia
Chamydia trachomatis Incierta Tracoma, conjuntivitis por
inclusin
Corynebacterium spp Piel, odo, ojo Endocarditis bacteriana
Epidermophyton floccosum Piel Infecciones de piel, pie atleta
Haemophilus aegyptitus Ojo Enfermedades del ojo
Haemophilus influenzae Ojo Enfermedades de ojo
Micrococcus spp Piel No determinada
Moraxella spp Ojo Enfermedad del ojo
Mycobacterium spp Piel No determinada
Neisseria spp Ojo, piel No por bacterias habituales
Peptostreptococcus spp Piel No conocida
Pityrosporum ovale Piel Caspa
Propionibacterium spp Piel Acn, endiocarditis bacteriana
Sarcina spp Piel Complicaciones pacientes
inmunodeprimidos
Staphylococcus aureus Piel, odo, ojo Antrax, furnculos, imptigo,
mastitis
Staphylococcus epidermidis Piel, odo, ojo Acn, endocarditis,
complicaciones de la ciruga
cardiaca, tromboflebitis.
(Montiel, 2015)

8. Qu coloracin se utiliza para el frotis en caso de averiguar si hay presencia o no del bacilo
diftrico?
 Bibliografa
Cabello, R. (1999). Microbiologa y Parasitologa. Argentina : Panamericana S.A.

Montiel, F. (24 de Abril de 2015). Flora Bacteriana Habitual. Obtenido de Boletn Escuela de
Medicina. Pontificia Universidad Catlica de Chile:
http://escuela.med.puc.cl/paginas/publicaciones/boletin/html/laboratorio/laboratorio02.html

N.E. (22 de Abril de 2015). Obtenido de Peptonas e Hidrolizados:

http://www.ms.gba.gov.ar/sitios/laboratorio/files/2012/08/PEPTONAS-E-
HIDROLIZADOS.pdf

N.E. (24 de Abril de 2015). Medios de Cultivo Convencionales. Obtenido de

http://www.biomerieux.es/servlet/srt/bio/spain/dynPage?open=SPN_CLN_PRD&doc=SPN_
CLN_PRD_G_PRD_CLN_93&pubparams.sform=5&lang=es

N.E. (24 de Abril de 2015). Medios Ricos y Enriquecidos. Obtenido de

http://asignatura.us.es/mbclinica/docs/recursos/34/medios-de-cultivo.pdf

Stainer, R., Ingraham, J., Wheelis , M., & Painter, P. (1992). Microbiologa. Barcelona: Revert S.A.