UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

FARMACIA Y BIOQUIMICA

CROMATOGRAFA

DOCENTE: SONIA VARGAS MENESES

CURSO: FARMACOGNOSIA

INTEGRANTES:

1. PAUCAR GARCIA SOLEDAD

2. PACHECO ADRIANO IVON
3. TORRES ROJAS THAIS
4. VILLAZANA SALVADOR SUSI

HUANCAYO -2017 PERU

06/06/2017
OBJETIVOS
Analizar el fundamento del mtodo cromatografico.
Conocer el procedimiento para desarrollar una cromatografa.
Realizar una separacin y purificacin de drogas vegetales.
INTRODUCCIN
Una tcnica de separacin para los componentes de una mezcla es la
cromatografa, su nombre se debe a Mikhail Tswett, botnico ruso quien le
dio ese trmino a principios de la dcada de 1900.Tswett separo varios
pigmentos, haciendo pasar soluciones de la mezcla utilizada por una
columna de vidrio empacada por carbonato de calcio finamente dividido.
Cada pigmento recorri las columnas con distinta velocidad y termino
apareciendo como bandas de color.

En toda separacin cromatografca se presentan dos fases: una mvil y otra

estacionaria, que se mueven una en relacin con la otra manteniendo un
contacto ntimo. La muestra se introduce en la fase mvil y los componentes
de esta se distribuyen entre las dos fases de acuerdo a sus solubilidades o
afinidad diferencial.

Los componentes de la mezcla a separar invierten un tiempo diferente para

recorrer cada una de las fases, con la que se produce la separacin. Este
tiempo es conocido como tiempo de retencin o de residencia (Rf). Si un
componente esta la mayor parte del tiempo en la fase mvil el producto de
mueve rpidamente, mientras que si se encuentra la mayor parte en la fase
estacionaria, el producto queda retenido y su salida es mucho ms lenta.
Algunos tipos de cromatografa es la de papel, las fibras de la celulosa del
papel pueden actuar directamente como fase estacionaria o pueden ser un
soporte para la adsorcin de una fase estacionaria liquida. La cromatografa
de capa fina es un procedimiento que se basa en el principio de reparto
entre dos fases, esta es muy parecida a la cromatografa de papel, pero con
frecuencia permite hacer mejores separaciones y adems tiende a seguir un
comportamiento ms reproducible. La cromatografa en columna presenta
ventaja sobre las cromatografas en papel y encapa fina, ya que se puede
emplear a escalas mayores, como fase estacionaria se usa dentro de una
columna generalmente pequeas partculas de gel de slice o almina, ya
que son sustancias con propiedades absorbentes.
MARCO TEORICO
a) Cromatografa

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin en el que los componentes a

separar se distribuyen entre dos fases, una de las cuales est en reposo (fase
estacionaria o lecho estacionario) mientras que la otra (fase mvil) se mueve en
una direccin definida. El proceso cromatogrfico se da como resultado de la
mayor o menor capacidad para ser retenidos los diferentes componentes de una
muestra por la fase estacionaria, es decir, se basa en los repetidos procesos de
interaccin durante el movimiento de los componentes de una mezcla arrastrados
por la fase mvil a lo largo de la fase estacionaria (elucin), producindose la
separacin debido a las diferencias en las constantes de distribucin de los
componentes de la mezcla entre la fase estacionaria y la mvil.

b) Fase estacionaria

Es una de las dos fases que forman un sistema cromatogrfico. Puede ser un
slido, un gel o un lquido. Si es un lquido, puede estar distribuido en un slido, el
cual puede o no contribuir al proceso de separacin. El lquido puede tambin
estar qumicamente unido al slido (fase ligada) o inmovilizado sobre l (fase
inmovilizada). La expresin lecho cromatogrfico o sorbente se puede usar como
trmino general para designar cualquiera de las formas diferentes en que se use
la fase estacionaria. En particular, en la cromatografa de gases se usa el trmino
fase lquida, caso ms comn de fase estacionaria, frente a fase gaseosa para la
fase mvil. Sin embargo, en el desarrollo inicial de la cromatografa lquida se us
el trmino "fase lquida" para referirse a la fase mvil, frente a la "fase slida", es
decir, la estacionaria. Debido a esta ambigedad, se desaconseja utilizar el
trmino "fase liquida". Si se debe expresar el estado fsico de la fase estacionaria,
se propone el uso de adjetivos, tales como fase estacionaria lquida, fase
estacionaria slida, fase ligada slida o fase inmovilizada slida.

c) Fase ligada

Una fase estacionaria que est unida de forma covalente a las partculas de
soporte o a la pared interior de la columna (lugar donde se produce la separacin).

d) Fase inmovilizada

Una fase estacionaria que est inmovilizada sobre las partculas del soporte o
sobre la pared interior de la columna, por ejemplo por polimerizacin in situ
(entrecruzamiento qumico) tras un recubrimiento.
e) Fase mvil

Fluido que se filtra a travs o a lo largo del lecho estacionario, en una direccin
definida. Puede ser un lquido (cromatografa cquida, LC), un gas (cromatografa
de gases, GC) o un fluido supercrtico (cromatografa con fluido supercrtico). En la
cromatografa de gases se puede usar la expresin gas portador para la fase
mvil. En la cromatografa de elucin se usa tambin para la fase mvil la
expresin eluyente.

f) Eluir

Proceso en el que la fase mvil se desplaza a lo largo de la fase estacionaria

transportando los componentes a separar. El proceso de elucin se puede detener
mientras todos los componentes de la muestra estn an en el lecho
cromatogrfico, o continuarse hasta que lo hayan abandonado (se prefiere el
trmino "Eluir" a "Desarrollar", trmino usado en nomenclaturas anteriores de
cromatografa plana).

g) Efluente

La fase mvil que abandona la columna.

h) Muestra

Mezcla consistente en cierto nmero de componentes, cuya separacin se

pretende en el lecho cromatogrfico al ser arrastrados o eluidos por la fase mvil.

i) Componentes de la Muestra

Los constituyentes qumicamente puros de la muestra. Pueden no ser retenidos

por la fase estacionaria (es decir, no retardados), retenidos parcialmente (es decir,
eluidos a tiempos diferentes) o retenidos permanentemente. Se aceptan tambin
los trminos eluito y analito para un componente de la muestra.

j) Soluto

Trmino que se refiere a los componentes de la muestra en la cromatografa de

reparto.

k) Disolvente

Trmino que en ocasiones se refiere a la fase estacionaria lquida en la

cromatografa de reparto.

Nota: En la cromatografa lquida, el trmino "disolvente" se ha usado a menudo

para la fase mvil. Este uso no se recomienda.
l) Zona

Regin del lecho cromatogrfico donde se localizan uno o ms componentes de la

muestra. Se puede usar para ello tambin el trmino banda.

m) Cromatograma

Una grfica u otro tipo de presentacin de la respuesta de un detector (la

concentracin de un analito en el efluente u otra magnitud usada como medida de
la concentracin en el efluente) frente al volumen de efluente o al tiempo. En la
cromatografa plana,"cromatograma" puede referirse al papel o capa con las zonas
separadas.

n) Cromatografiar

Separar por cromatografa.

o) Cromatgrafo

El instrumento empleado para realizar una separacin cromatogrfica.

MATERIALES
04 Vaso de precipitacin
01 Bureta 50 Ml.
01 Varilla
01 Cocinilla
01 Luna de reloj
Papel filtro
Alcohol
Benceno
Acetona
Pentanol
Droga vegetal: hoja de espinaca
METODO OPERATIVO
Cromatografa en papel

1. Lavar la droga vegetal espinaca.

2. Picar la droga vegetal en un vaso de precipitacin.

 3. Adicionar alcohol de 96 100mL.

4. Poner a hervir en una cocinilla hasta que la espinaca cambie de color.

5. Retirar del fuego y poner en tres vasos la muestra por igual.

6. En cada de los vasos colocar el papel filtro preparado. Esperar que el
lquido suba por el papel. Observar la separacin de los distintos
componentes de la solucin.

Cromatografa en columna

1. La misma solucin extrada se coloca en una bureta.

2. Se adiciona 5mL de cada sustancia pentanol, benceno, acetona.

3. Se observa la separacin de los diferentes componentes por su

solubilidad.
CONCLUSIONES
En cuanto a la cromatografa en papel, es uno de los mtodos ms usados,
por lo cual es necesario aprender y entender cmo realizarlo
correctamente.

Se observ la separacin de la solucin con las distintas muestras.

Se observ el cambio de color con cada muestra que se realiz.

RECOMENDACIONES
Leer el manual de laboratorio antes de ingresar a clases. Para un buen
trabajo.

Prestar mucha atencin en el momento de realizar la prctica.

Observar los cambios fsicos que se dan al elaborar la muestra.

Anotar las observaciones para realizar un buen informe.

Trabajar con mucho cuidado con los materiales y reactivos que se utilizan
dentro de la prctica.
BIBLIOGRAFA
D.A. Skoog, J.J. Leary, Anlisis Instrumental, McGraw-Hill, Madrid (1996)

H.H. Willard, L.L. Merritt Jr.,J.A. Dean, F.A. Settle Jr., Mtodos
Instrumentales de anlisis, Grupo Editorial Iberoamericana S.A. de
C.V.,Mxico (1991).

Cromatografa de exclusin por tamaos Prez Dorado, Angel, CEMAV,

Universidad Nacional de Educacin a Distancia [1997].

Manual de cromatografa Loro Ferrer, Juan Francisco Gobierno de

Canarias, Direccin General de Universidades e Investigacin (2001).

Wikipedia cromatografa en placa fina

Wikipedia cromatografa con sustancias organicas.

CUESTIONARIO
1. Explicar el fundamento de la cromatografa de alta resolucin HPLC.

La cromatografa lquida (HPLC), es una tcnica utilizada para separar los

componentes de una mezcla. Consiste en una fase estacionaria no polar
(columna) y una fase mvil. La fase estacionaria es slica que se ha tratado con
RMe2SiCl. La fase mvil acta de portador de la muestra. La muestra en solucin
es inyectada en la fase mvil. Los componentes de la solucin emigran de
acuerdo a las interacciones no-covalentes de los compuestos con la columna.
Estas interacciones qumicas, determinan la separacin de los contenidos en la
muestra. La utilizacin de los diferentes detectores depender de la naturaleza de
los compuestos a determinar.

APLICACIONES

Esta tcnica est indicada para la separacin de compuestos orgnicos

semivlatiles.

Hidrocarburos Poliaromticos (PAHs), Aminocidos: OTA, cido Flico,

Herbicidas.

Vitaminas, Acido tenuazonico, Formaldehdoetc.

Rango de trabajo para muestras lquidas: g L-1 - mg L-1

Rango de trabajo para muestras slidas: g Kg-1 - g g-1

2. Diga en qu casos es imposible usar la cromatografa como mtodo de

separacin y de identificacin?

Cromatografa lquida de alta presin

Instrumentacin costosa

Difcil anlisis cualitativo

No existe detector universal y sensible

-Elevado costo de operacin

-Experiencia indispensable.
3. Que sustancia sirve para la cromatografa en capa fina y Cul es su
funcin

La cromatografa en capa fina es una tcnica analtica rpida y sencilla, muy

utilizada en un laboratorio de Qumica Orgnica. Entre otras cosas permite:

Determinar el grado de pureza de un compuesto. Se puede determinar as, por

ejemplo, la efectividad de una etapa de purificacin.

Comparar muestras. Si dos muestras corren igual en placa podran ser idnticas.
Si, por el contrario, corren distinto entonces no son la misma sustancia.

Realizar el seguimiento de una reaccin. Es posible estudiar cmo desaparecen

los reactivos y cmo aparecen los productos finales o, lo que es lo mismo, saber
cundo la reaccin ha acabado.

La muestra a analizar se deposita cerca de un extremo de una lmina de plstico

o aluminio que previamente ha sido recubierta de una fina capa de adsorbente
(fase estacionaria). Entonces, la lmina se coloca en una cubeta cerrada que
contiene uno o varios disolventes mezclados (eluyente o fase mvil). A medida
que la mezcla de disolventes asciende por capilaridad a travs del adsorbente, se
produce un reparto diferencial de los productos presentes en la muestra entre el
disolvente y el adsorbente.