ENFERMEDADES MITOCONDRIALES

Las enfermedades mitocondriales son desordenes resultantes de la deficiencia

de una o ms protenas localizadas en las mitocondrias e involucradas en el
metabolismo. Hay descritas unas 150 mutaciones que acaban en enfermedades
de distinto tipo. 1

Las enfermedades mitocondriales pueden estar causadas por mutaciones en el

ADN mitocondrial, o bien por mutaciones en genes nucleares que codifican para
protenas implicadas en el correcto funcionamiento de la mitocondria. 1

Las enfermedades mitocondriales causan el mayor dao a las clulas del

cerebro, corazn, hgado, msculos esquelticos, riones y del sistema
endocrino y respiratorio, ya que los tejidos con mayor dependencia del
metabolismo mitocondrial (es decir, aquellos que requieren un mayor aporte
energtico) son los ms sensibles a las mutaciones mitocondriales.1

Sntomas

Encefalopata:2
o Convulciones
o Retraso en el Desarrollo o Regresin (incluyendo demencia
temprana o episodios tardos)
o Mioclono
o Desrdenes de Movimiento (distonia, disquinesias, corea, etc.)
 o Migraa Complicada
o Infartos
Neuropata2
Defectos en los Conductos Cardiacos: 2
o Cardiomiopatas
Deficiencias en la Audicin2
Estatura corta2
Desrdenes de Msculos Extraoculares2
o tosis
o estrabismo adquirido
o oftalmoplegia
Diabetes2
Enfermedad Renal Tubular2
Prdida de la Visin: 2
o retinitis pigmentosa
o atrofia ptica
Acidosis lctica (puede ser leve) 2
La caracterstica comn de casi todas las mitocondriopatas primarias es una
mutacin en el ADNmt o nuclear, que afecta al normal funcionamiento de la
mitocondria. 3

Se han identificado diferentes mecanismos patognicos, entre los que se

encuentran: 3

1. Alteraciones del ADNmt.

2. Alteraciones del ADN nuclear.

3. Alteraciones del trasporte de protenas del ncleo a la mitocondria.

4. Alteraciones del ensamblaje correcto de la cadena respiratoria.

5. Alteraciones de la dinmica de la mitocondria dentro de la clula.

6. Alteraciones de la morfologa mitocondrial.

7. Alteraciones en la osmolaridad y polaridad mitocondrial.

8. Fallos en el metabolismo mitocondrial.

Enfermedades mitocondriales primarias ms importantes

Enfermedad de Alpers

Nombre completo: Poliodistrofia Infantil Progresiva.4

La enfermedad de Alpers inicialmente se describi como una afectacin cerebral

difusa de presentacin infantil caracterizada por microcefalia, atrofia cerebral,
hipotona, mioclonas, espasticidad, ataxia, ceguera cortical, demencia y crisis
convulsivas, refractarias al tratamiento. 4

El sndrome se debe a una alteracin del metabolismo oxidativo en el que

aparece implicado una deplecin (menor cantidad de copias de ADNmt de las
necesarias) del ADNmt y una mutacin en el gen de la polimerasa. En algunos
pacientes se ha mostrado una deficiencia en el citocromo C oxidasa. 4

Sntomas:

Convulsiones, demencia, espaticidad, ceguera, disfuncin del hgado y

degeneracin cerebral4

Deficiencia del Complejo I

Nombre completo: Deficiencia NADH dehidrogenasa (NADH-Co! Reductasa)5

La deficiencia del complejo I se puede presentar de una forma neonatal severa

con muerte en los primeros das de vida. Estos pacientes siempre deben ser
tratados con riboflavina (40mg/da). En estos casos la mutacin se encuentra en
los genes que codifican las subunidades NDUFV1, NDUFS4, NDUFS7 o
NDUFS8 del complejo I. 5
Sntomas: Tres formas principales: 5

1. Desorden fatal infantil multisistmico, caracterizado por un retraso en el

desarrollo, debilidad muscular, enfermedad cardiaca, acidosis lctica
congnita y paro respiratorio.
2. Miopata que inicia en la infancia o en la vida adulta, manifestndose como
intolerancia al ejercicio o debilidad. Es comn la elevacin del cido
lctico.
3. Encefalomiopata mitocondrial (incluyendo MELAS), que puede comenzar
en la infancia o en la edad adulta y que consiste en combinaciones
variables de sntomas y signos, incluyendo oftalmoplegia, convulsiones,
demencia, ataxia, prdida auditiva, retinopata pigmentosa, neuropata
sensorial y movimientos incontrolables. Puede provocar el Sndrome de
Leigh

Deficiencia del Complejo III 5

Nombre completo: Deficiencia ubiquinona-citocroma c reductasa5

Sntomas: Cuatro formas principales: 5

1. Encefalomiopata mortal infantil, acidosis lctica congnita, hipotonia,

postura distrfica, convulsiones y coma. Es comn la fibrosis roja.
2. Encefalomiopata de brotes posteriores (desde la infancia hasta la edad
adulta): varias combinaciones de debilidad, estatura corta, ataxia,
demencia, prdida auditiva, neuropata sensorial, retinopata pigmentosa
y sntomas piramidales. Es comn la fibrosis roja. Posibilidad de acidosis
lctica.
3. Miopata, con intolerancia al ejercicio que deviene en debilidad continua.
Es comn la fibrosis roja. Posibilidad de acidosis lctica.
4. Cardiomiopata histiocitoide infantil.

Deficiencia del Complejo IV / Deficiencia COX 5

Nombre completo: La deficiencia citocroma c xidoreductasa es ocasionada por

un defecto en el Complejo IV de la cadena respiratoria. 5
Sntomas: Dos formas principales: 5

1. Encefalomiopata: normal durante los primeros 6 a 12 meses de vida;

despus presenta regresin en el desarrollo, ataxia, acidosis lctica,
atrofia ptica, oftalmoplegia, nistagmus, distonia, signos piramidales y
problemas respiratorios. Frecuentes convulsiones Puede provocar el
Sndrome de Leigh.
2. Miopata: dos variantes principales:
a. Miopata infantil mortal: puede empezar pronto despus del
nacimiento acompaada de hipotonia, debilidad, acidosis lctica,
fibrosis, paro respiratorio y problemas de rin.
b. Miopata infantil benigna: puede empezar pronto despus del
nacimiento acompaada de hipotonia, debilidad, acidosis lctica,
fibrosis, falla respiratoria, pero (si el nio sobrevive) le sigue un
mejoramiento espontneo.

Sndrome de Leigh o encefalomiopata necrotizante infantil

subaguda6

Est originado tanto por fallos en el ADNmt como en el ADN nuclear. Aunque
puede afectar a todos los complejos enzimticos de la cadena respiratoria, lo
hace preferentemente al complejo I20, y en menor grado a la CoQ y al complejo
piruvato deshidrogenasa.6

Se suele manifestar tras el primer ao de vida como21 encefalopata de inicio

infantil tardo con compromiso piramidal y extrapiramidal asociado a hipotona
axial severa, con afectacin ocular, trastornos del sueo y episodios recurrentes
de pseudooclusin intestinal. 6

Enfermedad de Leber, Neuropata ptica hereditaria de Leber (NOHL)

o Atrofia ptica de Leber 6

Se debe a una mutacin del ADNmt que afecta a 3 genes, cada uno de ellos
codificantes de una subunidad del complejo I, lo que provoca el fallo de ste. 6
Esta enfermedad se considera el paradigma de las neuropatas pticas de causa
mitocondrial. Expresiones clnicas de esta enfermedad se encuentran en una
amplia gama de neuropatas pticas asociadas a hipovitaminosis, exposicin a
txicos, alcohol y tabaco y uso de diferentes frmacos. 6

Neurohepatopata de Navajo 7

Enfermedad autosmica recesiva frecuente entre los nios del pueblo Navajo
caracterizada por hepatopata, neuropata perifrica, ulceracin y prdida de
sensibilidad corneal, mutilaciones acrales, leucoencefalopata, retraso en el
desarrollo, acidosis metablica recurrente e infecciones intercurrentes.7

El fallo subsecuente se encuentra en una mutacin del gen MPV17 el cual

codifica una protena de la membrana interna implicada en el metabolismo de
ROS y que conduce a un agotamiento del ADNmt.7

Sndrome NARP 8

Acrnimo de neuropata, ataxia y retinitis pigmentosa sin fibras rojas rasgadas

en la biopsia muscular. Se asocia a una mutacin en el gen para la ATPasa, en
la subunidad 6, en el ADNmt con transicin heteroplsmica T-G en la posicin
8993. Aunque este trastorno suele ser de inicio juvenil, hay una forma de inicio
infantil caracterizada por una encefalopata asociada a lesin bilateral y simtrica
de ganglios basales, que se denomina Sndrome MILS (Sndrome de Leigh de
Herencia Materna).8

Sndrome de Charcot-Marie-Tooth 9

La enfermedad de Charcot-Marie-Tooth (o neuropata sensorial Motora

Hereditaria tipo I y II, o atrofia muscular peroneal), es una neuropata hereditaria
progresiva que afecta ambos sexos, con ligera preferencia por los hombres y con
una prevalencia entre el 10 y 30 por 105 habitantes.9
Fue descrita por primera vez en 1886 como atrofia muscular peroneal.
Actualmente se consideran dos formas, segn la afectacin de la conduccin
nerviosa. 9

En el Tipo I (o neuropata hereditaria sensitivo motora tipo I, o 249 49 forma

hipertrfica y desmielinizante), la conduccin se encuentra enlentecida. Es la
forma ms prevalente y conocida y suele comenzar en la infancia tarda o
adolescencia. 9

En el tipo II (o neuropata hereditaria sensitivo motora tipo II o forma neuronal y

axonal) la conduccin nerviosa est conservada y suele presentarse en edades
ms tardas. 9

Clnicamente se caracterizan por la prdida sensorial progresiva, debilidad,

atrofia muscular, prdida de reflejos tendinosos profundos y deformidades del
pie. Desde el punto de vista gentico existe una gran heterogeneidad. Hasta la
fecha se han encontrado cerca de 40 genes implicados, algunos de ellos
codifican protenas mitocondriales, como la MFN2 (mitofusina 2) o la GDAP 1, lo
que resulta en alteraciones de la fisin mitocondrial y en una deficiente actividad
del complejo I. 9

ORIGEN DE LAS PROTENAS MITROCONDRIALES

La mitocondria es, indudablemente, uno de los organelos celulares ms

importantes para el correcto funcionamiento de la maquinaria celular eucariota.
Es la encargada de la produccin aerbica de ATP por medio de un proceso
denominado fosforilacin oxidativa, el cual es mediado por complejos
enzimticos multiprotecos en su membrana, encargados de transporte en
cadena de electrones (Saraste, 1999). De igual manera, la mitocondria juega un
papel fundamental en la apoptosis, la generacin de especies reactivas de
oxgeno y cuenta con funciones tejido especficas, como el metabolismo del
colesterol, la biosntesis del grupo hemo y la detoxificacin de derivados del
amonio en tejido heptico, entre otros (Skorecki et al., 2012). Sin embargo, a
pesar de su rol importante en el mantenimiento de la homeostasis y el
metabolismo, se conoce poco de la relacin entre la mitocondria y los
mecanismos epigenticos especficos que regulan su sntesis y funcionamiento
en mamferos, un campo novedoso conocido como mitoepigentica.
Dentro de la epigentica tradicional la mitocondria cumple un papel primordial
(van der Wijst y Rots, 2015). La mitocondria participa en la regulacin del
epigenoma al formar parte del metabolismo de un carbono a travs de la
produccin de ATP y folato (Taylor y Tumbull, 2005; Locasale, 2013). Las
mitocondrias regulan el cambio entre S-AdenosilMetionina (SAM), un donante de
grupos metilo, y la sntesis de nucletidos por la accin de la enzima mitocondrial
bifuncional, el cual es un paso fundamental en la metilacin del ADN.10

ADN MITOCONDRIAL: MECANISMOS MOLECULARES

El ADNmt es un ADN circular de 16,6 kb, el cual representa menos de 1% del

ADN total de una clula y es transmitido casi exclusivamente por linaje materno.
Su composicin consta de 2 cadenas, 1 ligera y 1 pesada (Figura 1), no contiene
intrones y codifica 13 protenas en total, todas parte de la cadena de transporte
de electrones. El ADNmt tambin contiene el bucle de desplazamiento (D-Loop),
una regin no codificante en el ADNmt que contiene elementos que regulan la
replicacin y la transcripcin en cis. En el D-Loop tambin se ubican las regiones
hipervariables 1 y 2 (HVR1 y HVR2), las cuales son los sitios de mayor acmulo
de mutaciones dentro de la secuencia (Gosh et al., 2015). El genoma
mitocondrial tambin transcribe 2 ARNr y 22 ARNt necesarios para la traduccin
del ADNmt (Minocherhomji et al., 2012). Otros estudios han encontrado un 14vo.
polipptido de 21 a 24 aminocidos, llamado humanina, factor protector para el
desarrollo de la enfermedad de Alzheimer, el cual es codificado por el gen MT-
RNR2 (Maximov et al., 2002). El resto de elementos necesarios para el correcto
funcionamiento de la mitocondria son codificados nuclearmente y son
transportados por complejos proteicos dentro y fuera de la membrana
mitocondrial. El ADNmt no contiene histonas, sin embargo, se encuentra
recubierto por protenas y empaquetado en agregados llamados nucleoides o
mitocromosoma . El factor de transcripcin mitocondrial A (TFAM) es el
componente ms abundante del nucleoide, es anlogo a las histonas y juega un
rol importante en el empaquetamiento y compactacin del ADNmt. Los datos
indican que la mayora de los nucleoides tienen slo una copia de ADNmt
(Manev et al., 2012).
La replicacin del ADNmt es mediada de manera exclusiva por la polimerasa ,
la cual cumple doble funcin: y reparar, por lo que existe una disminucin en la
fidelidad por una baja correccin de errores de la replicacin en comparacin con
el genoma nuclear (Skorecki et al., 2012). Sin embargo, debido al alto nmero
de copias de ADNmt (hasta 1.000 copias por clula), estas mutaciones no
conllevan necesariamente efectos fenotpicos, sino que aumentan el nivel de
heteroplasmia de la clula, definida como la divergencia entre las copias de
ADNmt dentro la misma; siempre que no se supere un umbral de heteroplasmia,
diferente para cada tejido y tipo de clula, no va a existir enfermedad o alteracin,
lo que se conoce como mitocheckpoint (Minocherhomji et al., 2012). Existe un
mayor nivel de heteroplasmia en clulas post-mitticas que en los tejidos que se
dividen rpidamente. 10

IMAGEN 1. Diagrama del mtDNA. Se representan la posicin de los 37 genes, la

regin de control (D-Loop) y los orgenes de replicacin de las cadenas pesada
(OH, PH) y ligera (OL, PL). Genes que han sido reportados con metilacin o
transcripcin diferencial se encuentran
subrayados.
MITOEPIGENTICA Y REGULACIN

En 1984, Pollack y su grupo publicaron reportes que indicaban la presencia de

5-Metilcitosinas (5mC) en ADNmt en tejido murino (Pollack et al., 1984). El
equipo de Pollack observ que, en comparacin con el ADN no codificante
(ADNnc), el ADNmt se encontraba generalmente submetilado, con slo un 1-5
% de las citosinas metiladas. Sin embargo, la presencia de metilacin en el ADN
mitocondrial fue controvertida en la comunidad cientfica (Manev et al, 2012;
Chinnery et al, 2012), hasta que los experimentos de Shock et al. (2011)
demostraron la translocacin de DNMT1 (ADN Metiltransferasa-1) nuclear a la
matriz mitocondrial (mtDNMT1) en fibroblastos murinos. En condiciones
normales la DNMT1 es la encargada del mantenimiento de los patrones de
metilacin en el ADN nuclear en mamferos.
La mtDNMT1 es una isoforma de la enzima que contiene tanto el dominio
cataltico de la DNMT1 como la secuencia diana mitocondrial. La migracin de la
DNMT hacia la mitocondria es un proceso regulado mediante la expresin de
una secuencia diana conservada corriente arriba del sitio de inicio de
transcripcin dentro del gen codificado nuclearmente. Estudios posteriores han
encontrado que la migracin de mtDNMT1 est regulada positivamente por
factores que responden al estrs oxidativo, como el PGC1 (Coactivador del
receptor activado por proliferadores peroxisomales ), el factor nuclear
respiratorio 1 (NRF1), y la liberacin de p53 a partir del promotor DNMT1
(Balinang, 2012). Bajo condiciones basales, la transcripcin de mtDNMT1
constituye alrededor del 2 % del total de la DNMT1. 10

Adicional a la presencia de mtDNMT1, estudios posteriores en fracciones

mitocondriales provenientes de cultivos murinos y sistema nervioso central
humano detectaron la presencia de DNMT3a, pero bajos niveles de mtDNMT1,
lo cual podra sugerir que la localizacin mitocondrial de DNMT3a es tejido-
especfica (Chestnut et al., 2011; Wong et al., 2013). Cabe recordar que la
DNMT3, en el ncleo, es la encargada de regular los patrones de metilacin de
novo. 10
En un estudio posterior, Bellizzi et al. (2013) reportaron citosinas metiladas e
hidroximetiladas en el D-Loop de las muestras analizadas, encontrando que la
 metilacin en el ADNmt se da principalmente en un patrn no-CpG en la regin
promotora de la cadena pesada y en bloques de secuencias conservadas, lo que
sugiere su implicacin en la regulacin de la replicacin y/o transcripcin del
ADNmt. 10
El inactivar las DNMTs 1, 3a y 3b en clulas madre embrionarias de ratn resulta
en una reduccin de la metilacin CpG, pero no la metilacin no-CpG, lo cual
sugiere que la modificacin epigentica del D-loop slo se establece
parcialmente por estas enzimas (Bellizzi et al., 2013). Ghosh et al. (2014)
Analizaron 39 conjuntos de datos presentes en bases de datos pblicas a fin de
caracterizar el metiloma mitocondrial, encontrando que el patrn y la distribucin
de 5mC son relativamente constantes a travs de la mitocondria, con la
excepcin de unos pocos loci metilados diferencialmente en diversos tejidos
durante diferentes puntos en el tiempo; coincidentemente, estos loci han sido
relacionados con enfermedades mitocondriales. Estos resultados muestran que
es plausible que la variabilidad en la metilacin puede influir potencialmente en
la regulacin gnica, con la consiguiente diversidad fenotpica. 10

TABLA 1. Recopilacin de los genes reportados con metilacin selectiva, transcriptos y funciones
correspondientes. Se listan los genes que codifican para las 13 protenas de la cadena de transporte de
electrones, las dos subunidades del ribosoma mitocondrial (uno de los cuales codifica para la protena
Humanina, factor neuroprotector e inhibidor de apoptosis) y los dos ARN de transferencia que han mostrado
metilacin diferencial. Los principales genes reportados con cambios epigenticos en diversas condiciones
son MT-ND2, MT-ND6, que codifican subunidades del complejo NADH Deshidrogenasa y MT-RNR1, que
codifica para la subunidad 12S del ribosoma mitocondrial. ECV (Enfermedad cardiovascular), NASH
(Esteatopata no alcohlica).
MUTACIONES EN EL ADN MITOCONDRIAL Y ENVEJECIMIENTO

El ADNmt es una molcula circular, de doble cadena. Contiene 13 genes que

codifican protenas que forman parte de los complejos de la CR: siete del
complejo I (subunidades ND1, ND2, ND3, ND4, ND4L, ND5 y ND6); el citocromo
b del complejo III; las subunidades I, II y III del complejo IV y dos del complejo V,
las ATPasas 6 y 8. Adems contiene los ARNs necesarios para la sntesis
proteica intramitocondrial (ARNr 12S y 16S, y 22 ARNt).11

Esta molcula se caracteriza por contener una informacin muy compactada.

Carece de intrones y prcticamente de secuencias no transcritas e, incluso,
algunos de sus genes estn solapados (los que codifican las subunidades ND4
y ND4L, subunidades 6 y 8 de la ATPasa). Existe una pequea regin no
codificante, conocida como D-Loop o lazo de desplazamiento, donde se
encuentran secuencias reguladoras y los promotores implicados en la
transcripcin de las dos cadenas. La replicacin del ADNmt, que en principio se
pens que transcurra de forma asincrnica y asimtrica, parece que ocurre de
forma convencional, segn las ltimas evidencias experimentales. 11

Por otra parte, el ADN mitocondrial posee una tasa de mutacin muy elevada.
As las mutaciones por sustitucin de nucletidos se fijan de 6 a 17 veces ms
rpido que en el ADNn. Es por ello, que a pesar de los pocos genes que son
codificados por el ADNmt, ste puede ser responsable de tantos cuadros clnicos
asociados a mutaciones en el mismo. La gentica del ADNmt tiene una serie de
caractersticas que difieren significativamente del ADNn. El genoma mitocondrial
es heredado por va materna, y parece que, salvo excepciones, el de origen
paterno no contribuye significativamente en la herencia. Cada mitocondria
contiene de 2 a 10 copias de ADNmt. Cada clula contiene cientos de
mitocondrias, por lo que existirn miles de copias de ADNmt y de los genes que
codifica (poliplasmia). Durante la mitosis, las mitocondrias segregan al azar a las
clulas hijas, fenmeno que se conoce con el nombre de segregacin mittica.
Por tanto, a partir de un zigoto, portador de ADNmt normal y mutado, en
sucesivas divisiones es posible obtener tres tipos de poblaciones celulares: 11

1. clulas que slo contienen ADNmt mutado (homoplasmia mutante).11

2. clulas que slo contienen ADNmt normal (homoplasmia normal).11
 3. clulas portadoras de ambos tipos de ADNmt (heteroplasmia). 11

Segn este hecho, en un paciente que hereda una mutacin en el ADNmt la

proporcin de molculas mutadas puede variar de un tejido a otro. Se denomina
umbral de expresin fenotpica el porcentaje mnimo de ADNmt mutado
necesario para que se exprese la patologa (Fig. 1).11

Este umbral es diferente para cada tejido, siendo menor para aqullos con
mayor requerimiento energtico (cerebro, msculo esqueltico y cardaco).
Adems, el porcentaje de mutacin puede ir cambiando a lo largo de la vida del
paciente, haciendo que la expresin de la enfermedad se produzca en cualquier
momento de la misma y afectando sucesivamente a distintos rganos y tejidos.
Ello tambin, en parte, es responsable de la distinta expresin clnica que
presentan distintos pacientes con la misma alteracin gentica. Incluso, en el
caso de tejidos con alto ndice de recambio, como el hemtico, una mutacin
puede llegar a desaparecer debido a un fenmeno de seleccin clonal
negativa.11

Fig. 1. a) Representacin esquemtica del efecto umbral dentro de un

mismo tejido
Las alteraciones ms frecuentes en el ADNmt son de dos tipos: 1) Deleciones
nicas, con o sin duplicaciones de la molcula2) Mutaciones puntuales, tanto en
genes que codifican los ARNmt como protenas.11

1. Deleciones nicas. Fueron descritas por primera vez en 1988. Desde

entonces se han publicado numerosos pacientes. En todos ellos se puede
ver que estas deleciones, que consisten en la prdida de un fragmento de
la molcula, se presentan siempre en heteroplasmia. El porcentaje de
ADNmt delecionado vara de unos pacientes a otros, e incluso en el
mismo paciente, de unos tejidos a otros. El grado de heteroplasmia,
adems, suele aumentar con el tiempo de evolucin, sobre todo en tejidos
postmitticos. En tejidos de alto ndice de recambio, como el hemtico,
tiende a desaparecer, por seleccin clonal negativa. No existe una
correlacin entre los tamaos o porcentajes de ADNmt delecionado y la
severidad del cuadro clnico. Los fenotipos donde se detectan
mayoritariamente son: el sndrome de Kearns-Sayre, el sndrome de
Pearson y las miopatas oculares (Ptosis y/o CPEO). En los dos primeros
cuadros es el hallazgo comn en cerca del 90% de los casos, y asociado
a la presencia de FRR en casi el mismo porcentaje. En el caso de las
miopatas oculares se asocia a ms del 50% de los casos, cuando
presentan FRR en su biopsia muscular. Las deleciones nicas se suelen
detectar en pacientes espordicos, por lo que se piensa que el evento
mutacional puede tener lugar en el oocito materno o durante la
embriognesis temprana. Parece que no existe riesgo de recurrencia
cuando la madre no presenta el cuadro clnico, pero si sta sufre la
enfermedad ese riesgo puede elevarse al 4,11%.11
2. Mutaciones puntuales en los ARNt. Existen publicadas cerca de 100
mutaciones puntuales, potencialmente patognicas, en los ARNt
mitocondriales. Al contrario que en el caso de las deleciones, usualmente
son heredadas por va materna. Estas mutaciones, que se dan en
heteromplasmia, suelen manifestarse fenotpicamente cuando se alcanza
un 80-90% de ADNmt mutado. El grado de afectacin entre distintos
individuos con la misma mutacin depender del porcentaje de ADNmt
mutado en cada tejido y probablemente de otros factores nucleares que
hoy en da se desconocen.11
Lo ms caracterstico de estas mutaciones es que una misma alteracin
puede dar lugar a distintos cuadros clnicos y un mismo fenotipo puede
ser debido a distintas mutaciones, en distintos genes. En general, estos
pacientes presentan FRR en la biopsia muscular.11
De todas las mutaciones encontradas se han descrito numerosas familias
en dos casos: A3243G del ARNtLeu(UUR) y A8344G del ARNtLys, mientras
que del resto se han detectado generalmente en casos aislados o en
pocas familias. El ARNtLeu(UUR) constituye el gen mitocondrial donde se
han descrito ms mutaciones puntuales causantes de patologa en
humanos. La primera mutacin encontrada en el mismo fue una transicin
A-G en la posicin 3243 del ADNmt. Estudios posteriores con grandes
series han confirmado que esta mutacin es la ms frecuentemente
asociada al sndrome MELAS, siendo responsable en nuestra experiencia
de ms del 80% de pacientes con este fenotipo y FRR. Es posible detectar
la mutacin en los individuos oligosintomticos y en gran parte de los
familiares asintomticos, existiendo una correlacin entre el porcentaje de
ADNmt mutado y la severidad del cuadro clnico. Esta mutacin, que sin
duda es la ms frecuente en el ADNmt, se encuentra tambin asociada a
otros cuadros clnicos como miocardiopata, intolerancia al ejercicio,
sndromes superpuestos MERRF-MELAS, encefalopatas infantiles con
rasgos clnicos de sndrome de Leigh, CPEO, de forma caracterstica a
cuadros familiares de transmisin materna de diabetes y sordera
neurosensorial e incluso hasta el 1% de pacientes con diabetes mellitus
no dependiente de insulina. En el ao 1990 se identific una transicin A-
G, en un nucletido altamente conservado del ARNt Lys en la posicin
8344, asociada al sndrome MERRF. Como sucede en la mutacin
A3243G del ARNtLeu(UUR), esta mutacin se encuentra tambin asociada
a otros fenotipos clnicos (CPEO, miopata, etc.) y sobre todo lipomatosis
simtrica mltiple. En cada uno de los ARNt restantes, se ha descrito
alguna mutacin en un paciente aislado o en algunas familias, con
distintos cuadros clnicos.11
ENVEJECIMIENTO

El envejecimiento es un proceso degenerativo que se caracteriza por una

disminucin en el tiempo fisiolgico funcin y un aumento en la posibilidad de
enfermedad y muerte. Los cambios nocivos con el tiempo ocurren en todos los
organismos que se cree que estn asociados con la actividad metablica y
factores genticos y ambientales.12

A principios de la dcada de 1950, Harman buco y consider factores que

impulsado envejecimiento capaces de causar la muerte que estaban presentes
en cada organismo vivo, y propuso la "teora de los radicales libres del
envejecimiento". l sostuvo que los radicales libres, producidos, podran ser la
causa del envejecimiento y las enfermedades degenerativas relacionadas con el
envejecimiento (Harman 1956 ). En 1972, modific su teora y propuso que las
mitocondrias son a la vez la fuente principal y una de las principales objetivo de
los radicales libres. En 1980, Miquel y asociados describieron la accin de los
radicales libres sobre las mitocondrias para producir el envejecimiento. Linnane
et al. ( 1989) adems propuso que la acumulacin de mutaciones somticas
en el ADN mitocondrial (ADNmt) es una contribucin importante para el
envejecimiento humano y las enfermedades degenerativas. 12

Las mitocondrias son las principales fuentes de energa celular que generan ATP
a travs del proceso de respiracin celular y fosforilacin oxidativa (OXPHOS)
en la membrana interna de las mitocondrias. La cadena respiratoria del sistema
OXPHOS es tambin la principal fuente intracelular de especies reactivas de
oxgeno (ROS) y radicales libres en condiciones fisiolgicas y patolgicas
normales. Adems, las mitocondrias desempean un papel central en una
variedad de procesos celulares, incluida la beta-oxidacin de cidos grasos, la
biosntesis de fosfolpidos, la sealizacin de calcio y la apoptosis. 12

La teora mitocondrial del envejecimiento propone que la acumulacin progresiva

de mutaciones somticas en el ADN mitocondrial durante la vida de un individuo
provoca un declive en la funcin bioenergtica mitocondrial y es un factor
contribuyente del envejecimiento. En condiciones fisiolgicas normales, los ROS
se generan a niveles muy bajos durante la respiracin mitocondrial. Los
complejos I y III de la cadena respiratoria son los sitios principales en los que los
electrones se filtran para generar aniones superxido, que pueden convertirse
adicionalmente en H2O2 y radicales hidroxilo. Se ha estimado que el 2-5% del
oxgeno consumido por las mitocondrias se puede convertir a ROS. La mayora
de estos ROS se puede eliminar con antioxidantes y enzimas que alteran los
radicales libres. Sin embargo, algunas fugas en la proteccin antioxidante
pueden daar el ADN, las protenas y los lpidos. El dao oxidativo al mtDNA
puede conducir a rupturas de cadena del ADN y la aparicin de mutaciones en
el mtDNA. La acumulacin de estas mutaciones del ADN mitocondrial podra dar
como resultado una disfuncin de la cadena respiratoria, lo que llevara a un
aumento de la produccin de ROS en las mitocondrias y a la posterior
acumulacin de ms mutaciones del ADN mitocondrial. Este crculo vicioso se
ha propuesto para explicar un aumento en el dao oxidativo durante el
envejecimiento, que conduce a la disminucin progresiva de las funciones
celulares y tisulares como resultado de un suministro insuficiente de energa y
una mayor susceptibilidad a la apoptosis. 12

Estrs oxidativo El radical hidroxilo (. OH)

Procede de la rotura del enlace covalente entre el oxgeno y el hidrgeno de una

molcula de agua, reaccin en la que tambin se genera otro oxidante, el H-. El
OH es el radical ms reactivo que nuestra qumica conoce. Puede interactuar
con las bases nitrogenadas de los cidos nucleicos (ADN y ARN) y alterar la
informacin gentica de las clulas, o estimular la peroxidacin lipdica, en la que
el -OH ataca a los cidos grasos poliinsaturados, convirtindolos a su vez en
oxidantes. Un slo radical -OH puede transformar cientos de molculas de cidos
grasos en hidroperxidos, que al descomponerse producen aldehdos,
autnticos venenos para las membranas celulares. El radical peroxilo (ROO.)
tiene una menor reactividad que el anterior. La molcula de H2O2 y la del cido
hipocloroso (HOCL) se comportan como oxidantes, al igual que la mayora de
los radicales libres, aunque sera ms correcto referirse a ellos como especies
reactivas de oxgeno (ERO). La unin de oxgeno con nitrgeno puede dar lugar
a la formacin de xido nitroso, capaz de inducir la peroxidacin lipdica. Los
iones Fe+++ y Cu++ actan como catalizadores en la formacin de radicales
hidroxilo. En presencia de estos iones, el perxido de hidrgeno (H 2O2 )
reacciona violentamente con molculas de oxgeno dando lugar a radicales
hidroxilo. Otras sustancias como el cido ascrbico son capaces de reducir el
ion frrico (Fe+++) a ferroso (Fe++), que cataliza la produccin de oxidantes. Es
muy importante mantener estos metales fuera del alcance de los oxidantes. 13

ESTUDIO BIOQUMICO DE LAS CITOPATAS MITOCONDRIALES

Las citopatas mitocondriales, tambin conocidas como miopatas mitocondriales

o enfermedades mitocondriales, son un grupo diverso de alteraciones que
resultan de la alteracin gentica, estructural o bioqumica de las mitocondrias. 14

Las alteraciones mitocondriales representan las patologas con presentacin

clnica ms diversa dentro de las enfermedades metablicas. La mayora de los
pacientes sufren encefalopata y muchos otros rganos pueden afectarse como
hgado, rin, msculo, corazn, retina, mdula sea, nervio perifrico y
pncreas.14

Las mutaciones en protenas mitocondriales pueden conducir a un descenso en

la produccin de ATP, formacin de radicales libres y alteraciones en la
homeostasis del calcio en la clula, por ejemplo: en la parapleja espstica
hereditaria se encuentra mutada la paraplegina, una metaloproteasa
mitocondrial que da lugar a defectos en la fosforilacin oxidativa.15

Prcticamente, cualquier sntoma o constelacin de sntomas relacionados con

afectacin de cualquier rgano o tejido puede ser reflejo de disfuncin
mitocondrial, siendo especialmente sugerentes los hechos siguientes: 15

1. Evidencia de trastorno multistmico progresivo, que afecte en proporcin y

cronologa variable al SNC, sistema nervioso perifrico, ojos, audicin,
musculatura estriada y corazn. 15

2. Oftalmopleja externa progresiva, en especial si va asociada a retinitis

pigmentaria. 3. Asociacin de polimioclonas y ataxia 15

4. Existencia de ataxia cerebelosa con trastornos sensoriales propioceptivos.

5. Debilidad muscular e intolerancia al ejercicio asociada a un sndrome

neurolgico. 15
6. Episodios neurolgicos recurrentes y parcialmente progresivos (stroke-like),
tales como hemiparesia, hemianopsia, ceguera cortical o migraa. 15

7. Sndrome de talla baja y dficit de audicin progresivo. 15

Sndrome de Alpers

El sndrome de Alpers es un trastorno de carcter multisistmica y de

presentacin infrecuente, caracterizada por la afectacin de la sustancia gris
cerebral y del hgado, conocida tambin como Poliodistrofia infantil progresiva.
15

El comienzo de esta enfermedad ocurre generalmente antes de los 2 aos de

edad. Las convulsiones y el retraso del desarrollo aparecen de forma insidiosa
en un nio que muestra un desarrollo y adquisicin de funciones algo lento. La
presencia de mioclonas y la epilepsia parcial continua pueden sugerir el
diagnstico. 15

La microcefalia progresiva y la ceguera son hallazgos frecuentes; esta ltima

puede deberse a atrofia ptica, o bien a la afectacin cortical occipital. 15

Sndrome de Pearson

Aparece en los primeros aos de vida y suele causar muerte precoz. Se

caracteriza por afectar al sistema hematopoytico, causando anemia macroctica
refractaria, vacuolizacin de los precursores de la mdula sea y disfuncin
pancretica exocrina y posteriormente heptica y renal. Al igual que en el SKS,
se encuentra implicada una deleccin en el ADNmt.16

Sndrome MELAS

El sndrome MELAS es un desorden neurodegenerativo progresivo,

caracterizado por miopata mitocondrial (M), encefalopata, (E), acidosis lctica
(LA) y episodios tipo stroke-like (S). En su origen aparece un amplio espectro de
mutaciones, tanto en la codificacin proteica como en la sntesis gentica,
localizndose el fallo, en el 80% de los casos, en una transicin del nucletido
adenina en la posicin 3243 por un nucletido de guanina, lo que provoca una
mutacin del ADNmt, que afecta concretamente al ARNt codificante de leucina.
16

Sndrome de Kearns Sayre

Fue descrito por Thomas Kearns y George Sayre en 1958 como una enfermedad
caracterizada por la trada de oftalmopleja externa progresiva crnica,
retinopata pigmentaria bilateral y bloqueos en la conduccin cardaca. El
fenotipo es variable en funcin de los tejidos afectados, comprometiendo tejidos
con mayor requerimiento energtico, caracterstico de las enfermedades que
alteran el ADN mitocondrial, que aparece usualmente antes de los 20 aos. 16

El sndrome de Kearns-Sayre (SKS) es un trastorno gentico neuromuscular

causado por delecin de un fragmento del ADN mitocondrial o duplicaciones de
novo, que varan en tamao y ubicacin. Sin embargo en algunas raras
ocasiones puede ser causado por alteracin de la transcripcin del ADNmt por
mutacin en el gen nuclear RRM2B que codifica para una subunidad pequea
necesaria para la sntesis de ADNmt, con transmisin autosmica recesiva.
Cuando el ADNmt delecionado sobrepasa el umbral determinado, se manifiesta
el fenotipo patognico de la enfermedad. 16

Las deleciones del ADNmt estn presentes en diferentes tejidos. En la

mitocondria se ve alterado su proceso de fosforilacin oxidativa necesario para
la produccin de ATP y generndose un dficit energtico, con compromiso de
tejidos que dependen sustancialmente de este proceso como: los msculos, el
tejido nervioso, clulas retinianas y cocleares. 16

Diagnstico

El estudio metablico inicial se orientar a la demostracin de una alteracin

en el estado de oxidorreduccin plasmtica, evidenciable en la mayora de los
casos. Incluir: 16
a) Determinacin de cido lctico y pirvico en sangre y, eventualmente, en
especial si predomina la afectacin del SNC, en LCR. Una muestra
aislada normal en ayunas no descarta una disfuncin mitocondrial y es
preferible la valoracin del comportamiento del cido lctico tras
maniobras de provocacin como: a) una hora despus de la ingesta del
desayuno habitual (en nuestra experiencia hemos encontrado significativo
un aumento de cido lctico superior a 5 mg/dL con respecto al basal); b)
tras la administracin de 1,5 g/Kg de glucosa por va oral o, c) tras la
realizacin de un ejercicio fsico leve-moderado (20 minutos de ejercicio,
con una FC de 130-140 lpm pueden triplicar el lactato basal en
condiciones normales, multiplicndose por 10 en algunos casos de
disfuncin mitocondrial). 16

b) Relacin lctico/pirvico. Indicador del estado redox citoplasmtico. Un

valor inferior a 20 puede indicar defectos a nivel del complejo piruvato
deshidrogenasa o de las enzimas gluconeognicas, mientras que un
cociente sostenidamente elevado (mayor de 20 y especialmente de 25)
sugerirn una deficiencia de piruvato carboxilasa o un defecto de la
cadena respiratoria mitocondrial. 16

c) Relacin hidroxibutirato/acetoacetato. Indicador del estado redox

intramitocondrial; su elevacin tambin ser indicativa de disfuncin
mitocondrial. 16

d) Concentracin plasmtica de carnitina y sus fracciones. Un incremento en

la forma esterificada con descenso de la forma libre puede ser reflejo de
un deficiente metabolismo intramitocondrial de los cidos grasos. 16

e) Cuantificacin de aminocidos en sangre. Una alanina elevada en sangre

y/o LCR se encuentra en especial en los dficits de PDH. f) Acidos
orgnicos en orina. Puede poner de manifiesto la existencia de aciduria
dicarboxlica. 16
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Arenas J, Cabello A, Campos Y. Bioqumica e histoqumica de las

enfermedades mitocondriales. An Esp Pediatr 1996; 83: S290-292.

2. Campos Y, Arenas J. Gentica molecular de las citopatas mitocondriales.

An Esp Pediatr 1996; 83: S293-296.

3. Montoya J, Playn A, Solano A, Alcaine MJ, Lpez-Prez MJ, Prez-

Martos A. Enfermedades del ADN mitocondrial. Rev Neurol. 2000; 31:
324.

4. . Gordon N. Alpers syndrome: progressive neuronal degeneration of

children with liver disease. Developmental medicine & child neurology.
2006; 48: 1001-1003.

5. Munnich A, Rotig A, Chretien D, Cormier V, Bourgeron T, Bonnefont JP et

al. Clinical presentation of mitochondrial disorders in childhood. J Inherit
Metab Dis 1996;19:521

6. Carelli V, Ross-Cisneros F, Sadun A. Mitochondrial dysfunction as a cause

of optic neuropathies. Prog Retin Eye Res. 2004, 23:53-89

7. . Karadimas CL, Vu TH,. Holve SA, Chronopoulou P, Quinzii C, Johnsen

DS, et al. Navajo Neurohepatopathy Is Caused by a Mutation in the
MPV17 GeneJ Hum Genet. 2006; 79: 544-548

8. Alcaine MJ, Solano A, Playan A, Vilaseca MA, Mart M, Lpez-Prez MJ,

et al. Sndrome de NARP producido por una mutacin T ~G de novo en la
posicin 8993 del DNA mitocondrial humano. Qumica Clnica. 2001; 20:
64-66.

9. Cassereau J, Chevrollier A, Bonneau D, Verny C, Procaccio V, Reynier P,

et al. A locus-specific database for mutations in GDAP1 allows analysis of
genotype-phenotype correlations in Charcot-Marie-Tooth diseases type
4A and 2K. Orphanet Journal of Rare Diseases. 2011; 6:87
10. Serra - Delgado J.A; Contreras - Garca G.A. mechanisms for the
epigenetic regulation of mitochondrial dna. [Revista en linea] .2016.
[Consultado el 11 de noviembre del 2017]. 28(2) 7-15. Disponible en:
 https://www.researchgate.net/publication/315895762_Mechanisms_for_t
he_epigenetic_regulation_of_mitochondrial_DNA

11. Campos Y. Pineda M. Garca Silva MT. Montoya J. Antoni L. Andreu.

Enfermedades mitocondriales: Protocolo de diagnstico y tratamiento de
las enfermedades mitocondriales. [Articulo]. Espaa. [acceso 06 de
noviembre de 2017]. Disponible en:
http://ae3com.eu/protocolos/protocolo13.pdf

12. Mitochondria and Aging (PDF Download Available). Available from:

https://www.researchgate.net/publication/221685991_Mitochondria_and_
Aging [accessed Nov 6 2017].

13. Fernando Paredes. Juan Jos Roca Fernndez. BIOQUMICA: Influencia

de los radicales libres en el envejecimiento celular. [Articulo] VOL 21 NM
7 JULIO-AGOSTO 2002. [citado 06 de noviembre de 2017]. Disponible
en:
http://apps.elsevier.es/watermark/ctl_servlet?_f=10&pident_articulo=130
34834&pident_usuario=0&pident_revista=4&fichero=4v21n07a13034834
pdf001.pdf&ty=17&accion=L&origen=doymafarma&web=www.doymafar
ma.com&lan=es

14. Gallego M, Cobo M, Bornstein B, Hernndez A y Garca P.

Miocardiopatas mitocondriales asociadas a la mutacin en el gen MT-
TL1: dos caras de la misma moneda. Rev Esp Cardiol. 2015; 68 (02)

15. Gmez H, Espinosa E, Ardila S, Echeverri O y Barrera L. Sndrome de

Kearns Sayre: reporte de dos casos. Acta Neurol Colomb. 2017; 33(01).

16. Gamero L y Gamero E. Enfermedades mitocondriales. Med fam Andal

2012; 13(02)
 UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUMICA
ESCUELA DE FARMACIA Y BIOQUMICA

Seminario N 3: Enfermedades Mitocondriales

Curso:

Bioqumica II

Docente:

Alva Bazn, Salomn

Integrantes:

Asmat Garca, Shirley Dileyla

Avila Rodriguez, Wendy Lucia
Crespin Alvarado, Hady Esmeralda
Espinoza Caldern, Arturo Israel
Garca Guevara, Abigail Tehina
Lin De la Cruz, Ericka Lineyra

Ciclo/Seccin:

VI A

Ao:

2017