PRCTICA N

DEMOSTRACIN DE LA RESPIRACIN CELULAR, ACCIN DE LA LACTATO DESHIDROGENASA Y

OSBERVACIN DE MITOCONDRIAS EN TUBO URINFERO DE RATN

1. INTRODUCCIN:

RESPIRACIN CELULAR

La respiracin celular constituye el proceso ms importante dentro de la clula, el cual

abordaremos en pequea medida pero de manera significativa.

Esta investigacin toma en cuenta a todos aquellos que de alguna manera participan aunque
sea de forma mnima en la respiracin celular.

Hablar de respiracin celular es referirnos a un proceso bioqumico del cual nos ramificaremos
a dos tipos de respiracin celular: aerbica y anaerbica.

En este proceso interfieren factores qumicos capaces de ser procesados dentro de las clulas,
y que en gran medida constituyen las bases para que la respiracin celular se lleve a cabo.

La respiracin celular es el conjunto de reacciones bioqumicas que ocurren en la mayora de

las clulas. Tambin es el conjunto de reacciones qumicas mediante las cuales se obtiene
energa a partir de la degradacin de sustancias orgnicas, como los azcares y los cidos
principalmente.

Comprende dos fases:

* PRIMERA FASE:

Se oxida la glucosa (azcar) y no depende del oxgeno, por lo que recibe el nombre de
respiracin anaerbica y glucolisis, reaccin que se lleva a cabo en el citoplasma de la clula.

* SEGUNDA FASE:

Se realiza con la intervencin del oxgeno y recibe el nombre de respiracin aerbica o el ciclo
de krebs y se realiza en estructuras especiales de las clulas llamadas mitocondrias.

Tanto que es una parte del metabolismo, concretamente del catabolismo, en el cual la energa
contenida en distintas biomolculas, como los glcidos (azcares, carbohidratos), es liberado
de manera controlada.

TIPOS DE RESPIRACIN CELULAR

RESPIRACIN ANAERBICA:

La respiracin anaerbica es un proceso biolgico de xido reduccin de azcares y otros

compuestos. Lo realizan exclusivamente algunos grupos de bacterias.

En la respiracin anaerbica no se usa oxgeno sino para la misma funcin se emplea otra
sustancia oxidante distinta, como el sulfato. No hay que confundir la respiracin anaerbica
con la fermentacin, aunque estos dos tipos de metabolismo tienen en comn el no ser
dependiente del oxgeno.

Todos los posibles aceptores en la respiracin anaerbica tienen un potencial de reduccin

menor que el O2, por lo que se genera menor energa en el proceso.

ETAPAS:

* Gluclisis

* Fermentacin

GLUCLISIS.- Tambin denominado gliclisis, es la secuencia metablica en la que se oxida en

la gluclisis, cuando hay ausencia de oxgeno, la gluclisis es la nica va que produce ATP en
los animales.

Est presente en todas las formas de vas actuales. Es la primera parte del metabolismo
energtico y en las clulas eucariotas en donde ocurre el citoplasma.

Por lo tanto es una secuencia compleja de reacciones que se efectan en el citosol de una
clula mediante las cuales una molcula de glucosa se desdobla en dos molculas de cido
pirvico. De manera que la glucolisis consta de dos pasos principales:

*Activacin de la glucosa.

* Produccin de energa.

FERMENTACIN.- Es un proceso catablico de oxidacin completa, siendo el producto final de

un compuesto orgnico. La fermentacin tpica es llevada a cabo por las levaduras. Tambin
unos metazoos y plantas menores son capaces de producirla.

El proceso de fermentacin anaerbica se produce en la ausencia de oxigeno como aceptor

final de los electrones del NADH producido en la gluclisis.

En los seres vivos la fermentacin es un proceso anaerbico y en el no interviene la cadena

respiratoria que son propios del micro organismo como las bacterias y levaduras.

Adems en la industria de la fermentacin puede ser oxidativa, es decir como presencia de

oxgeno, pero es una oxidacin aerbica incompleta, como la produccin de cido actico a
partir del etanol.

La fermentacin puede ser natural cuando las condiciones ambientales permitan la interaccin
del microorganismo, sustratos orgnicos susceptibles, o artificiales, cuando el hombre propicia
condiciones y en contacto referido.

USOS:

El conocimiento de la dieta a travs del desarrollo de una diversidad de sabores,

aromas y texturas en los substratos de los alimentos.
 Preservacin de cantidades substanciales de alimentos a travs del cido lcteo,
alcohlico, cido actico y fermentacin alcalinas.

La fermentacin tiene algunos usos exclusivos para los alimentos pueden producir nutrientes
importantes o eliminar auto nutrientes.

TIPOS DE FERMENTACIN:

Fermentacin actica

Fermentacin alcohlica

Fermentacin butrica

Fermentacin de la glicerina

Fermentacin lctica

Fermentacin ptrida

RESPIRACIN AERBICA:

Es un tipo de metabolismo energtico en el que los seres vivos extraen energa de molculas
orgnicas como la glucosa, por un proceso complejo en donde el carbono queda oxidado y en
el que el aire es el oxidante empleado.

La respiracin aerbica es propia del organismo eucariontes en general y de algunos tipos de

bacterias.

La sucesin de reacciones qumicas que ocurren dentro de las clulas mediante las
cuales se realiza la descomposicin final de las molculas en los alimentos y en la que
se produce CO2 y H2O.
Se realiza solo en el proceso de oxgeno. Consiste en la degradacin de los piruvatos
producidos durante la glucolisis hasta CO2 y H2O como obtencin de 34 a 36 ATP.

IMPORTANCIA:

Participa en la respiracin celular formando ATP.

REACCIONES AERBICAS.

Las reacciones aerbicas ocurre en la mitocondria y son:

Formacin del acetilo
Transferencia del acetilo Actividades en matriz
Ciclo de krebs

Cadena respiratoria

4. Transporte de electrones

5. Fosforilacion oxidativa (actividad de crestas)

 2. OBJETIVOS:

Discriminar los diferentes procesos moleculares de la respiracin celular.

Apreciar e identificar las mitocondrias en tubo urinfero de ratn.

3. MATERIALES Y PROCEDIMIENTO:

MATERIALES

ACCIN DE LA LACTATO DESHIDROGENASA

03 Tubos de ensayo.
Levadura viva y muerta (Saccharomyces cerevisiae) al 5%
2 ampollas de Lactato de Ringer.
Azul de metileno diluido.
Gradilla de metal
Vaselina liquida.

RESPIRACIN CELULAR

Un matraz baln de fondo plano.

Una manguera pequea de ltex.
Un vaso de precipitacin.
Tubo pequeo
Tampn de jebe.
Algodn.
Azul de metileno diluido.
30 semillas de frejol germinadas.
Hidrxido de Calcio.

OSBERVACIN DE MITOCONDRIAS EN TUBO URINFERO DE RATN

01 microscopio
Lmina montada con tubo urinfero de ratn
PROCEDIMIENTO

ACCIN DE LA LACTATO DESHIDROGENASA

Se utiliz 3 tubos de ensayo y lo rotulamos del 1 al 3. Luego se prepar el siguiente

sistema:

COMPONENTES I II III
Suspensin de 3ml - 3ml
levadura viva
Suspensin de - 3ml -
levadura muerta
Lactato de Ringer 15 gotas 15 gotas -
Azul de metileno 3ml 3ml 3ml

Luego se mezcl cada uno de los tubos con sus respectivas componentes.

Con una pipeta se agreg a cada tubo de ensayo 3ml de vaselina lquida

Se dej el sistema en reposo durante 20 minutos.

Despus del tiempo concluido, observamos el resultado.

RESPIRACIN CELULAR

En un matraz baln de fondo plano colocamos una capa de algodn, luego las 30
semillas de germinadas.

Se coloc dentro del matraz un tubo pequeo con Ca (OH)2

Cerramos el matraz con un tampn de jebe provisto de un agujero, en cuyo extremo

superior se conecta a una manguera de ltex.

Se introduce el extremo de la manguera en una solucin de azul de metileno diluido.

Dejar el sistema en reposo.

OSBERVACIN DE MITOCONDRIAS EN TUBO URINFERO DE RATN

Primeramente se tuvo ya la muestra montada en una lmina.

Luego se puso la muestra en el microscopio para su observacin.

 4. RESULTADOS:

.
 5. COMENTARIO:

La respiracin celular es una combustin biolgica y puede compararse con la combustin de

carbn, bencina, lea. En ambos casos molculas ricas en energa son degradadas a molculas
ms sencillas con la consiguiente liberacin de energa.

La respiracin ocurre en distintas estructuras celulares. La primera de ellas es la gluclisis que

ocurre en el citoplasma. La segunda etapa depender de la presencia o ausencia de O2 en el
medio, determinando en el primer caso la respiracin aerbica (ocurre en las mitocondrias), y
en el segundo caso la respiracin anaerbica o fermentacin (ocurre en el citoplasma).

Esta serie de reacciones son de importancia fundamental no solo para la degradacin de los
hidratos de carbono sino para el metabolismo de las protenas y lpidos.

6. REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:

Alberts, B et al; (1996) Biologa Molecular de la Clula. 3ra Edicin. Ediciones Omega
S.A. Barcelona.

Campbell, N; (1997) Biology. 4th Edition. the Benjamin Cummings Publishing Company.
Inc. California

Castro, Handel y Rivolta . Actualizaciones en Biologa. (1986). Ed. EUDEBA

Castro R. et al. Investigacin y Ciencia., N 39, Diciembre de 1979.

Curtis y Barnes (1992). Biologa. 5 Ed. Bs.As. Editorial Mdica Panamericana.

De Robertis(h); Hib; Ponzio. (1996).Biologa Celular y Molecular de De Robertis. 12

Edicin. El Ateneo. Bs.As.