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TINO
CETOS
UNIVERSIDAD NACIONAL JOSE FAUSTINO SANCHEZ
CARRION
ACTINOMICETOS
CURSO: Microbiologa
PROFESOR: Blgo. Luis Alberto Huayna Dueas
ALUMNOS: Carhuapoma Nicho Alessio Bill
Mendoza Haro Valeria Naomy
Osorio Delgado Yomayra Sandra
Palacio Colan Danae Siare
Salinas Sarmiento Veraliz Mariana
Susanibar Espinoza Sonia
HUACHO PER
2017
DEDICATORIA:
Este trabajo va para nuestros padres que
sin su ayuda no podramos
desarrollarnos como futuros Ingenieros
Ambientales y al docente por sus
enseanzas brindadas ya que sin estos
trabajos no pondramos en prctica todo
lo aprendido en clase, espero sea de su
agrado este trabajo muchas gracias.
NDICE
1. Actinomicetos .. Pg. 5
2. Distribucin . Pg. 6
3. Caractersticas . Pg. 7
4. Clasificacin de los Actinomicetos . Pg. 10
5. Funciones Pg. 12
6. Importancia . Pg. 13
7. Habitat y poblacin Pg. 13
8. Poder antibitico . Pg. 15
9. Resistencia a los antibiticos .. Pg. 16
10. Funciones en el suelo .. Pg. 16
11. Aplicaciones .... Pg. 18
12. Trabajos basados en los actinomicetos Pg. 24
INTRODUCCIN
Los actinomicetos, son microorganismos del suelo caracterizados por ser organismos
intermedios entre los hongos y las bacterias. Tienen aspecto filamentoso y, al igual que
los hongos, la capacidad de segregar antibiticos (estreptomicina, aureomicina,
terramicina, cloromicetina y tetraciclina).
Por otro lado, como las bacterias, los actinomicetos realizan numerosas reacciones
bioqumicas y participan en el proceso de formacin de humus y en la alimentacin de
las plantas al mineralizar la materia orgnica. Algunas especies pueden fijar nitrgeno
atmosfrico en asociacin con algunas especies de rboles. Su nmero en el suelo
agrcola es elevado (un milln a cien millones por gramo de tierra). Su peso medio es de
una tonelada por hectrea.
Sin duda los actinomicetos son de gran importancia para la disolucin de la materia
orgnica del suelo y la liberacin de nutrientes de ella. Reducen a formas ms sencillas
los compuestos ms resistentes, como la lignina. La capacidad de los actinomicetos de
simplificar el humus es importante, especialmente respecto al nitrgeno. Considerables
cantidades de este elemento parecen estar relacionadas con formas hmicas complejas y
pueden quedar sin asimilar por las plantas superiores. Los actinomicetos tienen la
habilidad de volver a poner estas sustancias en circulacin, junto a los hongos y las
bacterias, como agentes fertilizantes en el suelo cultivable. Como antagonistas
microbianos los actinomicetos regulan la composicin de la comunidad en el ecosistema
del suelo, en parte porque excretan antibiticos y enzimas de lisis, lo que tiene utilidad
en el control biolgico de insectos, nematodos y otros patgenos vegetales.
1. ACTINOMICETOS
Puesto que son saprofitos, a medida que aumenta la materia orgnica aumenta la
poblacin de actinomicetos, sin embargo estos proliferan en las fases finales de
descomposicin de la materia. Degradan principalmente sustratos complejos a base de
celulosa, hemicelulosa, lignina, parafina y sobretodo quitina, siendo psimos
competidores a la hora de consumir sustratos fcilmente degradables (azcares simples,
protenas y cidos orgnicos), aunque tambin los degradan. Debido a que degradan
sustratos complejos, resultan ser organismos importantes en el proceso de
transformacin de la materia orgnica en humus, considerndose tambin muy buenos
agregadores del suelo, ya que son muy eficientes produciendo sustancias hmicas y, tal
y como sucede tambin con los hongos, con sus micelios unen partculas de suelo.
2. DISTRIBUCIN
3. CARACTERSTICAS
Los rasgos morfolgicos que presentan las bacterias unicelulares y los hongos
filamentosos han permitido diferenciarlos y separarlos claramente en dos grandes
grupos. Sin embargo, un grupo de transicin, los actinomicetos, puede ser
considerado como la excepcin a la regla. Los rasgos distintivos por los cuales durante
algn tiempo se les consider como miembros del grupo de los hongos filamentosos
fueron: a) la similitud en su forma de crecer y desarrollarse, b) formacin de un
filamento denominado hifas con extensas ramificaciones (micelio), c) muchos de ellos
forman micelio areo y esporas, y d) su crecimiento en cultivo l- quido raramente
presenta la turbidez asociada con las bacterias unicelulares, sino que durante el
crecimiento se forman filamentos, grumos o esferas de micelio. No obstante, lo anterior,
los filamentos de los actinomicetos son mucho ms delgados que aquellos formados por
los hongos. Cabe mencionar que no todos los actinomicetos comparten estas
caractersticas, por ejemplo, algunos gneros como Mycobacterium y Corynebacterium
no producen micelio areo. La forma y ornamentacin de las esporas es diversa, as
como la manera en que se agrupan, siendo este criterio empleado para subdividir e
identificar algunos grupos de actinomicetos. Un aspecto relacionado con el desarrollo de
las esporas es la produccin y excrecin de metabolitos secundarios bioactivos que
pueden ser de varios colores y que se observan como pequeas secreciones en forma de
gotitas sobre la colonia microbiana. Del filo Actinobacteria, los actinomicetos son el
grupo con ms especies descritas, adems de ser un grupo de importancia para el
hombre debido a las aplicaciones biotecnolgicas que representa. Histricamente los
actinomicetos han sido descritos como microorganismos que habitan en el suelo, pero
actualmente se conoce que estn ampliamente distribuidos en ambientes acuticos como
ocanos, ros y lagos, donde tambin se encuentran asociados a los sedimentos, sobre
todo en el material orgnico que est en proceso de descomposicin. En el suelo, el
tamao y nmero de la comunidad de actinomicetos depende de diversos factores,
principalmente de las caractersticas fsicas y qumicas como pueden ser la textura,
humedad, pH y contenido de materia orgnica. Cuando se aslan actinomicetos del suelo
mediante medios de cultivo slidos, el gnero predominante suele ser Streptomyces, con
el 70 al 90% de las colonias, seguido por Nocardia con 10 a 30%, y el tercero puede ser
Micromonospora que constituye del 1 al 15% de actinomicetos.
Con relacin a sus hbitos de vida se puede mencionar que estos microorganismos son
generalmente saprfitos y participan activamente en la mineralizacin de la materia
orgnica. Aunque se conocen pocas especies patgenas, existen algunas que afectan
plantas, animales y humanos. Por ejemplo, Streptomyces scabies, que causa la roa de
la papa (Alexander, 1980). Diversas especies del gnero Streptomyces son
comercialmente muy atractivas porque producen una amplia gama de productos
naturales con actividad biolgica. Muchos de los antibiticos empleados en la
actualidad provienen de los actinomicetos; el trmino antibitico fue acuado por el
microbilogo del suelo Selman Waksman (1888-1973) quien trabajando con una cepa
de Streptomyces griseus descubri la estreptomicina, con actividad antimicrobiana
contra el bacilo de Koch, causante de la tuberculosis. Esto le vali a Waksman el Premio
Nobel en Fisiologa o Medicina en 1952. Actualmente la estreptomicina tambin es
empleada para combatir bacterias que afectan diversos cultivos de importancia agrcola,
por ejemplo, para tratar el tizn del fuego en el manzano, causado por la bacteria
Erwinia amylovora (Manulis y cols., 1998).
El agregar restos de plantas en el suelo eleva la temperatura, tanto la biota fngica como
la bacteriana inicialmente proliferan, mientras que los Ac no se estimulan hasta el final
de la mineralizacin de la materia orgnica, lo que indica que este proceso depende de
la accin conjunta de bacterias y hongos, mientras que los Ac aparecen cuando los
compuestos fciles de degradar desaparecieron y ya no existe competencia:
Las principales funciones que presentan los actinomicetos, segn Waksman, son las
siguientes:
7. HBITAT Y POBLACIN
Este grupo de microorganismos constituye de un 10 a un 50% de la microbiota del suelo
(los segundos en abundancia, despus de las bacterias) con una densidad de poblacin
de 105 a 108 propgulos/gramo de suelo (siendo un propgulo cualquier parte de un
microorganismo capaz de crecer y reproducirse), pudiendo llegar a
1010propgulos/gramo en compost y en situaciones idneas. Los actinomicetos se suelen
encontrar en el compost y en sedimentos, y estn ms presentes en prados que en
campos cultivados. Visto que son saprofitos y requieren de materia orgnica para su
desarrollo, su poblacin mengua a mayor profundidad de suelo, aunque en menor
medida que otros grupos microbianos, probablemente debido a la resistencia de sus
esporas). As pues, los actinomicetos se pueden reproducir en la paja y los rastrojos
residuales del cultivo, por lo que se recomienda dejarlos en el suelo y no quemarlos (a
menos que estn contaminados, que entonces se recomienda sacarlos del cultivo y
quemarlos).
Los actinomicetos requieren de oxgeno para su crecimiento (son organismos aerobios),
aunque hay ciertas excepciones. As pues, en suelos hmedos no se desarrollan
adecuadamente, al igual que no toleran la sequa (sus esporas s que la toleran, lo que
puede reconstituir la poblacin de actinomicetos despus de una sequa).
Los actinomicetos soportan bien las condiciones alcalinas, sin embargo, no aguantan las
condiciones cidas a excepcin de algunas especies. En un pH inferior a 5, estos
microorganismos conforman menos de un 1% de la poblacin total microbiana del
suelo. Esta intolerancia al medio cido puede servir en ciertos casos, como es el
patgeno de la patata Streptomyces scabies que puede controlarse acidificando el suelo.
medios PDA (Agar de Dextrosa y Papa) y ACD (Agar con citrato deoxicolato),
actinomicetos antagnicos.
sembr en los cuatro puntos cardinales de una placa de Petri con PDA,
inhibicin.
ACTINOMICETOS:
(Cuadro 4)
PDA seguido del ACD, debido a las diferencias nutricionales entre los medios
de cultivo.
placa.
evaluados (Cuadro 3)
Siendo los mejores APC70 para Alternaria sp., con 57.6% de inhibicin en
para Fusarium sp., con 49.36% en PDA y AAH53 para Colletotrichum sp.,
voltiles por los agentes antagonista sin respuesta a los agentes patgenos.
(Sylvia, 2005).
12.2.1 PROBLEMTICA:
Incorporacin de metales pesados nocivos en los ecosistemas, particularmente en el rea
desarrollo de los cultivos. Cuando los metales pesados estn en los suelos en concentraciones
que rebasan los lmites permisibles afectan los procesos biolgicos de las plantas debido a que
estos poseen gran capacidad de unirse a las molculas orgnicas alterando protenas,
estrs oxidativo.
12.2.2 RESULTADO:
12.2.2.1 CARACTERIZACION MACROSCOPICA
La caracterizacin macroscpica de las 24 cepas se evalu a los 14 das en medios Agar
Glicerol Extracto de Levadura (XGAL), Agar Nutritivo (AN) y Medio Agar Almidn de
Sales Inorgnicas (AAI), hasta los 7 das algunas cepas todava no haban presentado un
crecimiento lento y por tal requirieron 4 das para empezar a presentar estas
las cepas fueron capaces de esporular en los tres medios de cultivo, produciendo un
micelio areo pulverulento, mientras que el porcentaje fue muy bajo para las cepas que
presentaron un aspecto costrosa. Todas las colonias de las cepas presentaron una
El medio XGAL y AAI fueron empleados debido a que permite una buena esporulacin,
areo (superficie) y de micelio del sustrato (anverso). Los resultados fueron comparados
los 6 metales trabajados, sin embargo a medida que las concentraciones de los
dbil. Con respecto a cada metal, se observ que la mayora de las cepas crecieron
las cepas, es decir, su capacidad de resistencia ante este metal fue alta. Por el
metal.
12.2.3 DISCUSIN:
cuales figuran en trabajos previos. Todas las cepas se sometieron a una variedad de
cultivo. Wendisch & Kutzner (1986) indicaron que la coloracin del micelio areo
dentro de las hifas areas del pigmento producido por el micelio de sustrato, el cual
que 127 estos microorganismos no son especficos para una sola fuente de carbono
cepas presentaron bordes con anillos concntricos, lo que indica que es una
familia Micromonosporaceae.
gnero Streptomyces.
tradicionales como los ensayos morfolgicos y fisiolgicos, pero estos no han sido
suficientes para lograr una completa y definida clasificacin e identificacin, por tal
estos, lo que significa alta proporcin de cepas sobrevivientes. Estas cepas fueron
diferentes concentraciones de Cu, Zn, Fe, Cd, Pb y Hg a 10, 50, 100, 200 ppm.
De los resultados obtenidos, se dedujo que las semillas de los dos tipos de plantas
100%, es decir, que todas las semillas haban dejado el estado de latencia,
con un brote por parte del embrin, el cual es llamado radcula, convirtindose
perjudicial del metal, sucede por la accin de estas bacterias de adherir iones
Por ltimo, actinomiceto produce la enzima ACC desaminasa, que contrarresta las
asociados a las plantas, ocurre en virtud de las acciones positivas que se sabe
asociacin con las races de las plantas, en la llamada rizosfera, estn involucrados
1999; Franco-Correa 2001; Orjuela et al. 2003; Martnez et al. 2003; Mrquez et al.
cultivadas forman micorrizas, siendo las llamadas micorrizas arbusculares (MA) las
cultivos, se acepta que el manejo apropiado de esta simbiosis puede permitir una
ecolgico en zonas con una alta explotacin agrcola. La finalidad ha sido estudiar
interaccin con hongos MA se han trabajado algunas plantas como trbol, frijol y
clavel, para luego continuar en un futuro, las pruebas en cultivos de alto inters
interaccin con los hongos MA y las plantas que permitan utilizarlos para el
seguimiento de los efectos del cambio ambiental global. A inicios del siglo XX,
Hiltner introdujo el trmino rizosfera para describir la zona del suelo afectada por el
desarrollo de las races, las cuales inducen la proliferacin de los microorganismos.
(Kloepper et al. 1991; Barea et al. 2005). Los hongos micorrizgenos y las bacterias
mutualistas. Los hongos de la micorriza, una vez que colonizan de forma biotrfica
la raz, desarrollan un micelio externo que la conecta con los microhbitats del
ciertas propiedades fisiolgicas que los hacen particulares (Ghanem et al. 2000). En
un principio los actinomicetos se incluyeron entre los hongos porque su morfologa
esto se les denomin hongos radiados. Sin embargo, hoy en da, y dado su
suelos, tanto o ms que las mixobacterias (Ben-Omar et al. 1997), sin embargo,
extracelulares con las que son capaces de degradar la materia orgnica de origen
vegetal y animal (Ezziyyani et al. 2004). Como la gran mayora de bacterias que
(Ben-Omar et al. 1997). En el suelo se encuentran en casi todos los tipos y bajo
suelos frtiles con concentraciones de 106 UFCg1 de suelo seco. Por lo general se
ambiente (Tate 2000). Los principales gneros que se aslan a partir de suelos son
conidias o como hifas vegetativas (Martin 1981). Sin embargo, los mtodos de
clase y no cultivable en suelos (Rheims et al. 1999). Algunos gneros han sido
(Valds et al. 2005; Franco-Correa 2008). Los actinomicetos tambin han sido
Correa 1999; Tokala et al. 2002; Mrquez et al. 2003). El gnero Streptomyces ha
En relacin con las MA, han sido descritos muchos ejemplos (Abdel-Fattal y
Mohamedin 2000; Barea et al. 2005; Artusson et al. 2006). Ciertos actinomicetos
que se asocian al micelio de hongos ectomicorrcicos (Burke et al. 2006), y solo hay
investigacin realizada dentro del grupo, apoyan, por tanto, interacciones tanto
(Barea et al. 2005) que promueve el crecimiento y nutricin de las plantas (Franco-
en el grupo, se puede concluir que los actinomicetos han demostrado ser unos
Material biolgico.
Muestras de rizsfera de cultivos de Solanum tuberosum sp. andigena papade
la provincia de Andahuaylas Apurmac, Per.
12.4.3. METODOS
Produccin de siderforos:
De las cepas que crecieron en el medio Agar Almidn Casena se
inocularon por triplicado en el medio descrito por Simon & Tessman
(1963) y se incubaron a 22C con agitacin a 250 rpm por 15 das.
Se centrifug 5 ml del cultivo a 4 000 rpm por 6min, colocando 100
L del sobrenadante de cada cultivo con 100 L de la solucin de
5mM de percloratofrrico (SIGMA-ALDRICH) en 0.14 M de cido
sulfrico, la lectura cualitativa se determin por el cambio de color de
la mezcla anterior a un caf rojizo. Con las cepas positivas se realiz
la evaluacin cuantitativa con el espectrofotmetro (UNICO
UV2102C) mediante la absorbancia a 480 nm segn la metodologa
recomendada por Atkin (1970). El blanco de la lectura se prepar con
medio de cultivo estril y el control positivo de reaccin se realiz
con una solucin patrn de siderforos.
CARACTERIZACIN FENOTPICA DE LAS CEPAS AISLADAS
Crecimiento a diferentes temperaturas
En placas de Agar Tripticasa Soya (TSA) (Anexo) y Agar Nutritivo
(AN) se sembraron 15 L (106 ufc/mL) de un cultivo de 5 das de las
cepas AND 13 y AND 16 (previamente seleccionadas), por
duplicado, incubndose a diferentes temperaturas: 5, 20, 30, 37 C,
tomando como control la cepa incubada a 28 C. La evaluacin se
realiz cada 48 horas durante 5 das comprobando as el crecimiento
y la adaptabilidad de cada aislamiento a las diferentes temperaturas a
las que se enfrenta el cultivo de papa en el Per (Calvo, 2008).
Crecimiento a diferentes pH
En placas con TSA y AN regulado a diferentes gradientes de pH se
sembraron 15 L (106 ufc/mL) de cultivo de 5 das de las cepas AND
13 y AND 16 por duplicado. Ambos medios fueron regulados a pH 5,
6, 7 (control) y 8. El crecimiento de las bacterias se evalu
diariamente por 8 das con el objetivo de determinar su capacidad
adaptativa a suelos de pH bajo que se presentan en algunas zonas alto
andinas (Calvo, 2008).
Confirmacin del gnero de las cepas PGPR por medio de
Caracterizacin Bioqumica
La identificacin del gnero de las cepas PGPR se llev a cabo a
travs de pruebas bioqumicas convencionales comparando los
resultados con caractersticas bioqumicas de actinomicetos
anteriormente reportados(MacFaddin, 2000).
Las pruebas utilizadas fueron las siguientes.
Prueba de la Oxidasa
Esta prueba permite saber si los actinomicetos en estudio presentan el
complejo citocromo oxidasa. Por lo que con un asa de siembra se
coloc una colonia de los actinomicetos en estudio en tiras de
Bactident Oxidasa. Si la zona de reaccin se coloreaba de azul o
violeta azulado el resultado se consideraba positivo.
Prueba de la Catalasa
Se utiliz para determinar la presencia de la enzima catalasa, que se
encuentra en la mayora de las bacterias aerobias y anaerobias que
contienen citocromo.
Para ello, las colonias de los actinomicetos fueron colocadas en una
gota de Perxido de Hidrgeno al 30% (v/v). Si como resultado de la
reaccin se producan pequeas burbujas, esta se consideraba positiva
(Bailn, 2003).
Reduccin de Nitratos
Algunos Actinomicetos tienen la capacidad de reducir nitratos a
nitritos. Esta es una caracterstica utilizada para la identificacin y
diferenciacin de muchas especies (Bailn, 2003). Para poner en
manifiesto esta capacidad, los actinomicetos en evaluacin fueron
inoculados en Caldo Nitrato y se incubaron a 28C durante 7 das.
Transcurrido este tiempo se evalu la capacidad reductora de Nitratos
con la adicin de 3 gotas de -naftilamina y 3 gotas de cido
sulfanlico observando como resultado positivo una coloracin roja a
los 30 segundos (MacFaddin, 2000).
Hidrlisis de Urea
Se realiz para evidenciar la actividad de la enzima ureasa que
poseen ciertos microorganismos, que permite degradar la urea en dos
molculas de amoniaco. Por lo que, las colonias de actinomicetos se
inocularon en Caldo Urea y se incubaron a 28C durante 7 das. Si el
medio se tornaba rosa fucsia, el resultado era considerado positivo
(Bailn, 2003).
Prueba de la Casena
Esta prueba se utiliz para comprobar la actividad proteoltica de los
actinomicetos. Para ello, se sembraron las colonias por puncin en
Agar Casena (Anexo), incubndose a 28C durante 7 das. Al
transcurrir los das de incubacin, la presencia de un halo
transparente alrededor de la colonia fue considerado positivo.
Hidrlisis de Gelatina
La hidrlisis de gelatina determina la capacidad de un organismo de
producir la enzima gelatinasa. El catabolismo de las protenas por las
gelatinasas se da en dos etapas la primera origina polipptido y
posteriormente estos se desdoblan en aminocidos individuales,
(Bailn, 2003). Para evidenciar esta capacidad las colonias fueron
inoculadas por puncin en el Medio Gelatina, incubndose a 28C
durante 10 das. Transcurrido el tiempo, se llevaron los tubos a
refrigeracin durante 15 min, para luego observar la consistencia del
medio, si este se mantiene lquido indica la presencia de enzimas
proteolticas.
Identificacin molecular de los actinomicetos PGPR
La identificacin de la cepa AND 13, con resultados positivos para
todas las pruebas como PGPR, se llev a cabo de acuerdo a la
metodologa propuesta por Cook & Meyer (2003).
12.4.5. RESULTADOS
Aislamiento y purificacin de los actinomicetos.
Se logr aislar un total de 49 cepas de Actinomicetos. El aislamiento se obtuvo
luego de 2 a 3 siembras sucesivas de las colonias en Agar Almidn Casena (AC)
hasta obtener colonias puras, tomndose en cuenta para la caracterizacin
morfolgica la presencia de micelio base y micelio areo corto as como la
pigmentacin de ambos; la textura seca tpica y el olor a tierra hmeda,
caractersticas de estas colonias de actinomicetos.
Todos los actinomicetos aislados presentaron micelio areo con variada
pigmentacin que va desde blanco, crema hasta marrn y morado. Evaluacin in
vitro de las actividades de los actinomicetos relacionadas al PGPR.
Solubilizacin de fosfatos.
De las 49 cepas evaluadas de actinomicetos, el 63,27% present halos de
solubilizacin en el medio Picovskaya cuyos valores se muestran entre 0,02 y
0,06 cm2, siendo la cepa AND 27 la que present mayor rea de solubilizacin
Fijacin de nitrgeno
El 85,72% del total de 49 cepas crecieron satisfactoriamente en este medio, por
lo que se puede presumir que las posibles fuentes de nitrgeno alternativo
utilizados por los actinomicetos en estudio, se obtendran a partir de la captacin
de nitrgeno atmosfrico debido a que poseen actividad nitrogenasica.
Produccin de cido indol actico (AIA)
La produccin de AIA se determin por reacciones colorimtricas utilizando el
reactivo de Salkowsky, el cual es especfico para la deteccin de compuestos
derivados del indol. Esta capacidad fue evaluada primero mediante una prueba
de carcter cualitativo para todas las cepas, para posteriormente cuantificar las
cepas seleccionadas; basndose en una curva de calibracin que se elabor a
partir de patrones de AIA comercial (SIGMA-ALDRICH) diluidos en agua
destilada a diferentes concentraciones.
12.4.6. DISCUSION
En los ltimos aos, el estudio de la interaccin de los actinomicetos a nivel
rizosfrico ha generado gran inters en los investigadores, para caracterizarlos
como PGPR (El Tarabily & Sivasithamparam, 2006). Los actinomicetos tienen
la capacidad de sobrevivir a ambientes extremos, hecho que no es comn para la
mayora de las bacterias. Adems, muchos microorganismos utilizados como
biofertilizantes presentan una inestabilidad en cuanto a viabilidad e
infectabilidad generados por el estrs medioambiental, mientras que los
actinomicetos se propagan mejor bajo condiciones de estrs.
Los metabolitos microbianos son fundamentales en las relaciones ecolgicas
entre microorganismos, siendo muy importante en el caso de los actinomicetos
segn Lehr et al. (2008), es por ello que se realiz la evaluacin de la capacidad
promotora del crecimiento vegetal (PGPR) a travs de diversas pruebas
fundamentales para determinar actinomicetos rizosfricos que posean estas
caractersticas tal y como lo realizan Husen (2003) y Joseph et al. (2007) en sus
investigaciones.
La capacidad que poseen algunas rizobacterias para solubilizar fosfatos, les
permite ser consideradas como bacterias promotoras de crecimiento vegetal,
especialmente aquellas que encontramos en suelos con grandes cantidades de
fosfato precipitado. Los mecanismos que utilizan estos microorganismos para la
solubilizacin de fosfatos son la produccin de cidos orgnicos y de fosfatasas,
sin embargo, esto depender de la naturaleza del fsforo en el suelo de acuerdo
con Whitelaw (2000), Gyaneshwar et al. (2002) y Tiesen (2008).
Al evaluar esta caracterstica, se obtuvo que ms del 60% de las cepas en estudio
presentaron halos de solubilizacin, sin embargo, estos eran muy pequeos en
comparacin con los de la cepa patrn, Azotobacter sp. Franco (2008) obtuvo
resultados similares, teniendo una gran cantidad de actinomicetos
solubilizadores de fosfatos con un rendimiento por debajo que el de las bacterias
del gnero Azotobacter.
Los actinomicetos AND 13 y AND 16 presentaron un mayor rendimiento en las
caractersticas analizadas, siendo los resultados de la cepa AND 13 los ms
alentadores. Pudindose emplear estas cepas, a futuro, en el campo como una
solucin alterna ante el uso excesivo de productos qumicos.
Existen tres factores que influyen en la distribucin y en la actividad de muchos
actinomicetos en el suelo: el pH, la temperatura y el tipo de suelo. Es por eso
que en este estudio se evalu tambin la capacidad de crecimiento de las cepas
AND 13 y AND 16 (cepas seleccionadas como PGPR) a diferentes temperaturas
y pH. Los resultados obtenidos coinciden con Stanley (1994), que indica que los
actinomicetos no pueden crecer a pH por debajo de 5,0, teniendo en cuenta que
el gnero Streptomyces no puede crecer a pH menor a 5,9. Siendo su rango de
pH ptimo entre 6,8 - 8,0.
Los actinomicetos al ser mesfilos, crecen mejor a temperaturas entre 25 a 30C,
pero a temperaturas inferiores a 5C su crecimiento es nulo segn Stanley
(1994), coincidiendo con los resultados de la evaluacin de crecimiento a
diferentes temperaturas. Sin embargo, a pesar de las condiciones de crecimiento
establecidas, los actinomicetos son microorganismos que se adaptan a otro tipo
de condiciones. Segn estudios se afirma que estos microorganismos han sido
aislados de diferentes ambientes como praderas, arenas de la playa, cuevas
subterrneas, arrozales y subhielo glacial de la Antrtida, adems Ibrahim et al.
(2006), Terkina et al. (2006) y Jayasinghe & Parkinson (2008) reportaron el
crecimiento de dichos microorganismos a temperaturas entre 10,2C y 2,5C.
Con la caracterizacin bioqumica se pudo concluir que la cepa AND13
pertenece al gnero Streptomyces, considerando que ste es uno de los ms
reconocidos del orden Actinomycetales debido a su amplia distribucin en la
naturaleza, especialmente en el suelo y porque alberga a un gran nmero de los
productores ms importantes de antibiticos y otros metabolitos secundarios
segn Ramrez et al. (2008). Para confirmar los resultados de esta
caracterizacin, se realiz la identificacin molecular de la cepa, a travs del
secuenciamiento de los fragmentos amplificados del gen RNAr 16S ,
comparndola con las secuencias depositadas en el GenBank a travs del
programa Clustal 2.1, obtenindose porcentajes de similitud mayores a 99% con
la especie Streptomyces samposii.
12.5.1. RESUMEN
12.5.2. ANTECEDENTES
Gneros con esporangios diversos, los fragmentos de hifas se dividen para dar
estructuras redondas, mviles, el tpico es Geodermatophilus. Mientras Frankia
es un simbiote que fija nitrgeno molecular en rboles no leguminosas del
gnero Alnus, cuando forma ndulos en sus races por ello se fabrican
inoculantes con base en ese gnero que se cultiva en el laboratorio.
12.5.4. CONCLUSIN