PRCTICA DE BIOLOGA N 1

EL MICROSCOPIO

1. INTRODUCCIN 5. MARCO TERICO

2. OBJETIVOS 6. OBSERVACIONES EN LA PRCTICA
3. RECURSOS 7. AUTOEVALUACIN
4. PROCEDIMIENTOS

1. INTRODUCCIN
OBSERVANDO LO INVISIBLE. Gracias al Microscopio ptico es posible conocer lo ms pequeo del mundo que
nos rodea.
Desde el descubrimiento del Microscopio por parte de Zacaras Jansen, la ciencia, particularmente la biolgica, ha
venido dcada tras dcada aportando nuevos conocimientos, desde la observacin de la clula y su descubrimiento, el
de las bacterias, hasta la situacin actual con la visualizacin de la ultraestructura celular.
Y nosotros en nuestra formacin como entes promotores y forjadores de salud, es de gran importancia el conocimiento
y desarrollo de destrezas en este instrumento, que en un futuro no muy lejano, ser un medio auxiliar de la carrera.

2. OBJETIVOS
Reconocer al microscopio y sus elementos.
Identificar los diferentes tipos de microscopios.
Aprender la forma de manejo y el cuidado de un microscopio.
Asimilar la tcnica adecuada para el enfoque.

3. RECURSOS
Humanos
Grupo de estudiantes
Ayudante de ctedra
Materiales
Microscopio Simple de Luz
Laminas cubreobjetos y portaobjetos
Objetos para la observacin (Papel cuadriculado, Cabello)

4. PROCEDIMIENTOS
Exposicin terica: brevemente se hablar y abordara temas como los objetivos de la prctica, materiales
necesarios, los procedimientos, definicin del microscopio, historia, estructura, manejo y cuidado,
recomendaciones.
Reconocimiento del Microscopio y sus elementos con la colaboracin del ayudante de ctedra.
Visualizacin de objetos e identificacin de la tcnica correcta para enfocarlos. El papel cuadriculado y el
cabello los colocamos en portaobjetos, cubrimos con el cubreobjetos y observamos con los objetivos de 4x,
10x y 40x.

5. MARCO TERICO

Definicin

Etimolgicamente microscopio viene del griego: "mikro" = pequeo y "scope" = mirar (para mirar cosas pequeas)
En definitiva un microscopio es cualquier instrumento que se utiliza para obtener una imagen aumentada de objetos
minsculos o detalles muy pequeos de los mismos.
En su afn de llegan siempre ms lejos en la investigacin de la naturaleza, de lo que los lmites de sus rganos
sensoriales le imponen, el hombre ha construido mltiples instrumentos que le han permitido acceder all donde los
sentidos no podan penetrar.
As como el telescopio abri a la humanidad las puertas de lo infinitamente grande, el microscopio hizo posible conocer
los mundos de dimensiones nfimas, entre ellos la clula, base de la vida. Se contaban as las bases de las modernas
ciencias biolgicas que hasta bien entrada la edad moderna se haban fundado en las observaciones directas.
El tipo ms comn de microscopio y el primero que se invent es el microscopio ptico. Se trata de un instrumento
ptico que contiene una o varias lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por
refraccin.
La ciencia que investiga los objetos pequeos utilizando este instrumento se llama microscopa.

Historia

La curiosidad innata al hombre ha hecho que este haya intentado saber ms acerca de los objetos ms lejanos, pero
tambin de los ms prximos; desde la antigedad se conoce algunos datos de observaciones hechas por diversas
personas, sobre la propiedad de ciertos materiales (los vidrios) de modificar la imagen de lo que observamos, pero
yndonos a datos precisos, este es un resumen con fechas y nombres de hechos importantes relacionados con el
microscopio:

1608 Zacaras Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.

1608 Zacaras Jansen construye un microscopio con dos lentes convergentes.
1665 Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeos poros
1665 Hooke utiliza un microscopio compuesto para estudiar cortes de corcho y describe los pequeos poros
en forma de caja a los que l llam "clulas". Publica su libro Micrographia
en forma de caja a los que l llam "clulas". Publica su libro Micrographia
1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9 aos
1674 Leeuwenhoek informa su descubrimiento de protozoarios. Observar bacterias por primera vez 9 aos
despus.
despus.
1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad
1838 Schleiden y Schwann proponen la teora de la clula y declaran que la clula nucleada es la unidad
estructural y funcional en plantas y animales.
estructural y funcional en plantas y animales.
1876 Abb analiza los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el microscopio y muestra
1876 Abb analiza los efectos de la difraccin en la formacin de la imagen en el microscopio y muestra
cmo perfeccionar el diseo del microscopio.
cmo perfeccionar el diseo del microscopio.
1881 Retzius describe gran nmero de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por ningn
1881 Retzius describe gran nmero de tejidos animales con un detalle que no ha sido superado por ningn
otro microscopista de luz. En las siguientes dos dcadas l, Cajal y otros histlogos desarrollan nuevos
otro microscopista de luz. En las siguientes dos dcadas l, Cajal y otros histlogos desarrollan nuevos
mtodos de tincin y ponen los fundamentos de la anatoma microscpica.
mtodos de tincin y ponen los fundamentos de la anatoma microscpica.
1882 Koch usa tinte de anilina para teir microorganismos e identifica las bacterias que causan la
1882 Koch usa tinte de anilina para teir microorganismos e identifica las bacterias que causan la
tuberculosis y el clera. En las siguientes dos dcadas, otros bacterilogos, como Klebs y Pasteur
tuberculosis y el clera. En las siguientes dos dcadas, otros bacterilogos, como Klebs y Pasteur
identificarn a los agentes causativos de muchas otras enfermedades examinando preparaciones teidas bajo
identificarn a los agentes causativos de muchas otras enfermedades examinando preparaciones teidas bajo
el microscopio.
el microscopio.
1937 Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes, construyen el primer microscopio electrnico.
1937 Ernst Ruska y Max Knoll, fsicos alemanes, construyen el primer microscopio electrnico.

Estructura

El microscopio ptico comn est conformado por dos sistemas:

El sistema mecnico est constituido por una serie de piezas en las que van instaladas las lentes que permiten
el movimiento para el enfoque.
El sistema ptico comprende un conjunto de lentes dispuestas de tal manera que produce el aumento de las
imgenes que se observan a travs de ellas.
La parte mecnica del Microscopio
La parte mecnica del microscopio comprende: el pie, el cabezal, el revlver, la platina, el tornillo micromtrico y el
tornillo micromtrico. Estos elementos sostienen la parte ptica y de iluminacin, adems permite los desplazamientos
necesarios para el enfoque del objeto.
El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio y tiene por lo general forma de Y o bien es
rectangular
 El cabezal o tubo ptico. Tiene forma cilndrica y est ennegrecido internamente para evitar las molestias que
ocasionan los reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los oculares.
El revlver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se enroscan los objetivos. Al girar el
revlver, los objetivos pasan por el eje del tubo y se colocan en posicin de trabajo, la cual se nota por el ruido
de un pin que lo fija.
La columna, llamada tambin asa o brazo, es una pieza colocada en la parte posterior del aparato. Sostiene el
tubo en su porcin superior y por el extremo inferior se adapta al pie.
La platina. Es una pieza metlica plana en la que se coloca la preparacin u objeto que se va a observar.
Presenta un orificio en el eje ptico del tubo que permite el paso de los rayos luminosos a la preparacin. La
platina puede ser fija, en cuyo caso permanece inmvil; en otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante
tornillos laterales puede centrarse o producir movimientos circulares.
El tornillo macromtrico. Girando este tornillo, asciende o desciende el tubo ptico o la platina del
microscopio, deslizndose en sentido vertical gracias a una cremallera. Estos movimientos largos permiten el
enfoque rpido de la preparacin.
El tornillo micromtrico. Mediante el movimiento casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la
platina, se logra el enfoque exacto y ntido de la preparacin. Lleva acoplado un tambor graduado en divisiones
de 0,001 mm que se utiliza para precisar sus movimientos y puede medir el espesor de los objetos.

Oculares Tubo ptico

Brazo
Revolver
Platina
Objetivos
Tornillo
Micromtrico
Diafragma
Condensador
Tornillo
Micromtrico
Fuente de Luz
Pie

Interruptor

Sistema ptico
El sistema ptico es el encargado de reproducir y aumentar las imgenes mediante el conjunto de lentes que lo
componen. Est formado por los lentes oculares, los objetivos, la fuente de luz, el condensador y el diafragma.
Los oculares. Los oculares estn constituidos generalmente por dos lentes, dispuestas sobre un tubo corto. Los
oculares generalmente ms utilizados son los de: 8X, 1OX, 12.5X, 15X. La X se utiliza para expresar en forma
abreviada los aumentos.
Los objetivos. Los objetivos producen aumento de las imgenes de los objetos y organismos y, por tanto, se
hallan cerca de la preparacin que se examina. Los objetivos utilizados corrientemente son de dos tipos:
objetivos secos y objetivos de inmersin. Se disponen en una pieza giratoria denominada revlver.
Los objetivos secos se utilizan sin necesidad de colocar sustancia alguna entre ellos y la preparacin. En la cara
externa llevan una serie de ndices que indican el aumento que producen, la abertura numrica y otros datos.
El nmero de objetivos vara con el tipo de microscopio y el uso a que se destina. Los aumentos de los
objetivos secos ms frecuentemente utilizados son: 6X, 1OX, 20X, 45X y 60X.
El objetivo de inmersin est compuesto por un complicado sistema de lentes. Para observar a travs de este
objetivo es necesario colocar una gota de aceite de cedro entre el objetivo y la preparacin, de manera que la
lente frontal entre en contacto con el aceite de cedro. Generalmente, estos objetivos son de 100X y se distingue
por uno o dos crculos o anillos de color negro que rodea su extremo inferior.
 La Fuente de Luz: Que puede ser natural (a travs de un espejo) o artificial (una lmpara conectado a una
fuente de energa elctrica).
Condensador. El condensador est formado por un sistema de lentes, cuya finalidad es concentrar los rayos
luminosos sobre el plano de la preparacin. El condensador se halla debajo de la platina. El condensador puede
deslizarse sobre un sistema de cremallera mediante un tornillo que determina su movimiento ascendente o
descendente.
Diafragma. Generalmente, el condensador est provisto de un diafragma o iris, que regula su abertura y
controla la calidad de luz que debe pasar a travs del condensador.

Tipos de Microscopios

La bsqueda de imgenes de mejor calidad y contraste, ha llevado al descubrimiento de nuevas y mejoradas clases de
microscopios. Las principales clases de microscopios se resumen en el siguiente cuadro:

Microscopios pticos
Microscopios pticos
microscopio simple
microscopio simple
microscopio compuesto
microscopio compuesto
Microscopios pticos especiales
Microscopios pticos especiales
microscopio de luz ultravioleta
microscopio de luz ultravioleta
microscopio en campo oscuro
microscopio en campo oscuro
microscopio de fase
microscopio de fase
Microscopios electrnicos
Microscopios electrnicos
microscopio electrnico de transmisin
microscopio electrnico de transmisin
microscopio electrnico de barrido
microscopio electrnico de barrido

Los microscopios pticos utilizan la propiedad de los lentes de aumentar la imagen de los objetos y de esa manera
visualizarlos con el uso de la luz visible (espectro de luz).
Los microscopios pticos especiales en cambio utilizan otros tipos de luz o modificaciones a la luz visible para obtener
imgenes que de otra manera no se pueden visualizar.
El microscopio electrnico dej a un lado la utilizacin de fotones (partculas que componen la luz) y de los lentes, y
pas al uso de electrones para la visualizacin y campos magnticos que hacen las veces de lentes obtenindose as
imgenes de mejor calidad y de un mayor aumento.

Propiedades del Microscopio

Poder separador. Tambin llamado a veces poder de resolucin, es una cualidad del microscopio, y se define como la
distancia mnima entre dos puntos prximos que pueden verse separados. El ojo normal no puede ver separados dos
puntos cuando su distancia es menor a una dcima de milmetro.
En el microscopio ptico, el poder separador mximo conseguido es de 0,2 dcimas de micra, y en el microscopio
electrnico, el poder separador llega hasta 10 ngstrom.
Poder de definicin. Se refiere a la nitidez de las imgenes obtenidas, sobre todo respecto a sus contornos. Esta
propiedad depende de la calidad y de la correccin de las aberraciones de las lentes utilizadas.
Poder de aumento. En trminos generales se define como la relacin entre el dimetro aparente de la imagen y el
dimetro o longitud del objeto.

Manejo y Enfoque

En forma sistemtica se debe seguir el siguiente modelo para un adecuado manejo y la tcnica del enfoque:
Encender la fuente de luz o colocarlo en un lugar iluminado en el caso de microscopio con fuente natural.
 Colocar el objetivo de menor aumento en posicin de empleo y bajar la platina completamente. Si el
microscopio se recogi correctamente en el uso anterior, ya debera estar en esas condiciones.
Colocar la preparacin sobre la platina sujetndola con las pinzas metlicas.
Comenzar la observacin con el objetivo de 4x (ya est en posicin) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la
preparacin es de bacterias.
Para realizar el enfoque:

Acercar al mximo la lente del objetivo a la preparacin, empleando el tornillo macromtrico. Esto
debe hacerse mirando directamente y no a travs del ocular.
Mirando, ahora s, a travs de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparacin con
el macromtrico y, cuando se observe algo ntida la muestra, girar el micromtrico hasta obtener un
enfoque fino.

Al pasar al siguiente objetivo la imagen debera estar ya casi enfocada y suele ser suficiente con mover un
poco el micromtrico para lograr el enfoque fino.

Empleo del objetivo de inmersin:

Bajar totalmente la platina.

Subir totalmente el condensador para ver claramente el crculo de luz que nos indica la zona que se va
a visualizar y donde habr que echar el aceite.
Girar el revlver hacia el objetivo de inmersin dejndolo a medio camino entre ste y el de 40X.
Colocar una gota mnima de aceite de inmersin sobre el crculo de luz.
Terminar de girar suavemente el revlver hasta la posicin del objetivo de inmersin.
Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite.
Enfocar cuidadosamente con el micromtrico.

Recomendaciones

Levantar y transportar el microscopio por el brazo.

Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesin prctica.
Cuando no se est utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se
ensucien y daen las lentes.
Nunca hay que tocar las lentes con las manos.
No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio.
Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posicin de observacin.
La cantidad de luz que ingresa por el condensador va ha depender del objetivo que estemos utilizando, a mayor
aumento mayor cantidad de luz.
Despus de utilizar el objetivo de inmersin, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pauelos
especiales para ptica o con papel de filtro (menos recomendable). En nuestro caso podemos hacer uso de
pauelos que no dejen pelusa.
No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio.
El cambio de objetivo se hace girando el revlver y dirigiendo siempre la mirada a la preparacin para prevenir
el roce de la lente con la muestra.
Mantener seca y limpia la platina del microscopio.
6. OBSERVACIONES DE LA PRCTICA

1. Ponga el nombre de cada una de las partes del Microscopio ptico Compuesto:

2. Grafique lo observado en el microscopio:

Objeto: _____________________ Objeto: _____________________

4x 4x

10x 10x

40x 40x

7. AUTOEVALUACIN
1. Son componentes del sistema mecnico del microscopio. Excepto:
a) El tubo ptico.
b) El brazo.
c) La platina.
d) El diafragma.
e) Los tornillos macro y micromtrico.
f) Todos.
g) Ninguno.

2. Sobre el manejo y cuidado del microscopio. Seale lo correcto:

a) Se debe levantar y transportar el microscopio por el brazo.
b) Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al inicio y final de la sesin prctica.
c) Nunca hay que tocar las lentes con las manos.
d) No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se est utilizando el microscopio.
e) Todos.
f) Ninguno.

3. Seale 2 diferencias entre el microscopio ptico y el microscopio electrnico:

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4. Qu entiende por poder de definicin del microscopio?

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5. Cmo explica usted observar la imagen impresa en el papel milimetrado ( < ) de modo inverso en el microscopio?
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