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Acta Veterinaria Brasilica, v.6, n.2, p.

68-79, 2012

LESES DE ARMAZENAMENTO DURANTE A CONSERVAO DE


SANGUE NAS DIFERENTES ESPCIES: UMA REVISO

[Storage lesions caused during blood conservation in the different species: Review]

Rejane dos Santos Sousa1, Isabella de Oliveira Barros1, Marcondes Dias Tavares1, Isadora Karolina
Freitas de Sousa2, Gleidson Benevides de Oliveira1, Antonio Humberto Hamad Minervino3, Raimundo
Alves Barrto Jnior1*
1
Universidade Federal Rural do Semi-rido, Departamento de Cincia Animal.
2
Faculdade de Medicina Veterinria e Zootecnia, Departamento de Clnica (FMVZ- USP)
3
Universidade Federal do Oeste do Par, Instituto de Biodiversidade e Florestas - (IBEF-UFOPA)

RESUMO - O sangue armazenado em bolsas plsticas sofre alteraes graduais ao longo do perodo de
conservao, sendo essas leses conhecidas em conjunto como leses de armazenamento. Tais alteraes podem
inviabilizar a utilizao do sangue ou diminuir sua eficcia ps-transfuso. Dessa forma, a presente reviso tem
por objetivos relatar as principais alteraes hematolgicas, morfolgicas, hemogasomtricas e bioqumicas
ocorridas durante o armazenamento de sangue total em bolsas plsticas refrigeradas em temperaturas de 1 a 6 C,
em diferentes espcies animais.

Palavras-Chave: bolsas de sangue; citrato; transfuso.

ABSTRACT - Blood stored in plastic bags undergoes gradual changes throughout the conservation period; these
lesions are known collectively as the storage lesion. Such changes may prevent the use of blood or decrease their
efficacy after transfusion. Thus, this review aims to report the main hematological, morphological, blood gas and
biochemical alterations that occur during storage of whole blood in plastic bags, refrigerated at 1-6 C in
different animal species.
Keywords: blood bags; citrate; transfusion.

INTRODUO solues que ajudam a conservar o sangue durante o


perodo de armazenamento, o fluido ainda sofre
A medicina transfusional veterinria tem evoludo vrias alteraes que em conjunto so conhecidas
muito nos ltimos tempos, acompanhando os como leses de armazenamento.
avanos vivenciados pela medicina humana, atravs
da adaptao de diversas tecnologias para pacientes As leses de armazenamento vo desde
veterinrios, sendo importante para essa evoluo o modificaes microscpicas das clulas vermelhas
desenvolvimento das bolsas plsticas e substncias que podem resultar em danos irreversveis e reduo
preservativas que possibilitaram maior vida til dos da sobrevivncia ps-transfusional, at o acmulo de
componentes sanguneos (Lacerda, 2005; Costa substncias biorreativas que podem influenciar a
Junior et al,, 2008). Embora se conheam as tcnicas qualidade do sangue transfundido e contribuir para
de fracionamento do sangue para obteno de seus reaes ps-transfusionais (Chin-Yee et al., 1997).
componentes, a conservao e utilizao de sangue Portanto de extrema importncia que o sangue
total ainda a forma mais difundida e utilizada nos armazenado passe por um controle de qualidade para
centros veterinrios (Lucas et al., 2004; Costa avaliao de sua viabilidade.
Jnior, 2006; Sousa et al. 2012a).
Na medicina humana, os parmetros de qualidade
No mercado, existem diversas bolsas plsticas com esto bem estabelecidos e so rigorosamente
diferentes solues preservativas, as quais so seguidos enquanto na medicina veterinria, apesar de
utilizadas para o armazenamento do sangue total ou se conhecerem as alteraes ocorridas durante o
de hemocomponentes. Apesar da presena destas

*
Autor para correspondncia: barreto@ufersa.edu.br

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armazenamento nas diferentes espcies, os mesmos adenina (CPDA-1) (Gibson et al., 1957; Nako et al.,
no esto bem institudos. 1960).

Dessa forma, a presente reviso tem por objetivos Na medicina veterinria, as primeiras bolsas
relatar as principais alteraes hematolgicas, utilizadas para se armazenar o sangue coletado
morfolgicas, hemogasomtricas e bioqumicas foram as contendo citrato cido e dextrose (ACD).
ocorridas durante o armazenamento de sangue total Entretanto, a preservao do sangue conservado
em bolsas plsticas refrigeradas de 1 a 6 C, em nesta soluo era, no mximo, trs semanas
diferentes espcies animais. (Eisenbrand & Smith, 1973).

HISTRICO A partir de 1980 foram criadas as solues aditivas


que vieram para aumentar o tempo de prateleira das
No sculo XX, a medicina transfusional vivenciou hemcias. Na dcada de 90, novos conhecimentos
grandes avanos com a descoberta dos diferentes contriburam para melhoria da qualidade das clulas
tipos sanguneos, com a utilizao dos armazenadas, como a leucorreduo (Hess, 2006).
anticoagulantes durante a coleta, o conhecimento das Cada vez mais, o empenho dos pesquisadores tem
tcnicas de esterilizao, o fracionamento do sangue sido o aprimoramento de solues preservativas, no
e identificao das doenas transmissveis (Lacerda, intuito de se reduzir as leses de armazenamento e
2005). Essas descobertas permitiram a difuso da promover maior tempo de conservao (Hess, 2006).
transfuso na medicina humana e serviram como
base para a medicina veterinria. BOLSAS DE SANGUE E REFRIGERAO

O desenvolvimento de meios e solues Inicialmente, a coleta e armazenamento de sangue


preservativas possibilitou o armazenamento dos para transfuso eram realizados mediante utilizao
eritrcitos, prolongando sua vida til. No sculo XX, de frascos de vidro a vcuo contendo anticoagulante.
Rous e Turner verificaram que uma soluo com Tais recipientes so menos adequados por
citrato de sdio poderia ser utilizada como provocarem hemlise, agregao plaquetria e
preservativo do sangue e que a lise in vitro era inativao dos fatores de coagulao VIII e XIII
retardada por adio de acares, tal constatao (Hunt & Moore, 1990).
permitiu a conservao do sangue em citrato e
glicose, por at 26 dias (Mollison et al., 1997; A partir da Segunda Guerra Mundial, bolsas de
Hashimoto, 1997). A adio de cido ctrico policloreto de vinila (PVC) so utilizadas para o
mistura de glicose e citrato possibilitou o armazenamento, em substituio aos frascos de
desenvolvimento de uma soluo com melhor vidro, que so impermeveis troca de gases.
capacidade de preservao, mantendo a viabilidade (Genetet & Mannoni, 1980). A introduo do PVC
de 70% dos eritrcitos (Massouredis, 1983). na confeco de bolsas de sangue veio minimizar a
adeso celular, a formao de cogulos e a hemlise
A introduo do citrato como anticoagulante durante a estocagem. Isto facilitou o transporte e
permitiu que o doador e o receptor fossem separados centrifugao do sangue, bem como possibilitou a
no espao, j que o sangue poderia ser transportado sobrevida de vrios componentes sanguneos ps-
de um local para outro sem coagular, enquanto a transfuso (Pierre, 1981).
adio de glicose possibilitou a nutrio das
hemcias por maior perodo de tempo (Mollison, As bolsas possuem tambm propriedades especiais
2000). Isso tornou possvel a coleta de sangue de de permeabilidade ao CO2, pois durante a estocagem
vrios indivduos e armazenamento por um tempo do sangue, a glicose consumida para produzir ATP
razovel, at encontrar um receptor, estabelecendo a gera uma srie de metablitos, dentre eles o lactato e
possibilidade da criao dos bancos de sangue (Hess, prtons que, na presena da anidrase carbnica, so
2006). convertidos em gua e CO2. Por sua vez, o dixido
de carbono resultante dessa reao difunde-se para o
Outras descobertas foram importantes para melhor meio externo devido permeabilidade da bolsa a
conservao das hemcias, como a adio de fosfato esse gs, evitando a reverso da reao (Hess &
na dcada de 50, que aumentou a viabilidade de 80% Greenwalt, 2002).
das clulas, e incorporao de adenina soluo de
citrato/dextrose na dcada de 70, que permitiu o As bolsas para conservao de sangue total
aumento dos nveis de adenosina-5-trifosfato (ATP). utilizadas na medicina veterinria so as mesmas
Desde ento, o conservante mais utilizado vem utilizadas na medicina humana, as quais possuem
sendo a soluo contendo citrato, fosfato, dextrose e soluo conservadora na proporo de 63 mL para

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450 mL ou 70 mL para 500 mL de sangue total,


enquanto as bolsas com solues aditivas possuem Originalmente, as solues aditivas so adicionadas
ainda soluo de 100 mL a serem adicionados aps a ao concentrado de hemcias, aps a centrifugao do
coleta (Feldam & Sink, 2007). sangue total e separao do plasma. Pesquisas no
campo da medicina veterinria tem utilizado essas
Os sistemas para coleta de sangue podem ser usados solues na conservao de sangue total (Costa
para humanos, caninos e animais de grande porte. Jnior et al., 2008; Bertoletti, 2011; Barros, 2011).
No entanto, no so apropriados para coleta de Cada constituinte da soluo preservativa possui
sangue felino, j que o volume de anticoagulante funes especficas que ajudam a manter a
utilizado na bolsa planejado para 450 mL de viabilidade do sangue por mais tempo. O citrato
sangue e uma tpica doao felina de um anticoagulante que age quelando o clcio e
aproximadamente 50 mL. Nesses casos so impedindo a coagulao sangunea, bem como
realizadas adaptaes com uso de seringa de 60 mL promove a estabilizao da membrana eritrocitria
acopladas a bolsas, sendo a quantidade de auxiliando na manuteno do pH intracelular
anticoagulante reduzida (Bertoletti, 2011). Em (Authement et al., 1986; Hgman et al., 2002).
outros pases existem sistemas fechados de coleta de
sangue especfico para felinos (Feldam & Sink, J a dextrose adicionada soluo como fonte de
2007). energia, sendo este carboidrato consumido
lentamente pela clula quando as mesmas so
As bolsas para coleta de sangue podem ser submetidas a condies de baixas temperaturas (1 a
encontradas na forma de bolsa nica, ou acopladas 6C) contribuindo, inclusive, com a manuteno de
formando sistemas duplo (bolsa primria e outra nveis adequados de ATP. A adenina promove um
satlite), triplo (bolsa primria, mais duas satlites) aumento do adenilato, que importante para a
ou qudruplo (uma primria e trs satlites). As sntese de ATP, aumentando as reservas desses
bolsas satlites so utilizadas para armazenar os nucleotdeos no interior das clulas estocadas,
componentes sanguneos aps a centrifugao do reduzindo a fragilidade osmtica e garantindo maior
sangue total, como concentrado de hemcias, plasma sobrevida das hemcias (Authement et al., 1986).
e plaquetas (Feldam & Sink, 2007).
O fosfato substrato para a produo do 2,3
So utilizadas para coleta e armazenamento de difosfoglicerato (DPG) no interior das hemcias, que
sangue trs principais tipos de solues um componente orgnico responsvel pela captura
preservativas: ACD (Citrato Dextrose), CPD (Citrato e liberao de O2 pela hemoglobina aos tecidos
Fosfato Dextrose) e CPDA-1 (Citrato Fosfato (Eisenbrandt & Smith, 1973; Wardrop et al., 1994a).
Dextrose e Adenina). Ainda, existem as bolsas que O quadro 1 apresenta a concentrao das principais
contm solues aditivas as quais possuem na bolsa substncias utilizadas nas solues preservativas de
primria CPD ou CPD2 e na bolsa satlite SAG-M, uso em medicina veterinria, enquanto que o quadro
ADSOL (AS-1), NUTRICEL (AS-3) ou OPTISOL 2 apresenta a composio das diferentes solues
(AS-5) (Holme, 2005). aditivas.

Quadro 1- Composio de diferentes solues conservadoras utilizadas no armazenamento de sangue total ou


hemocomponentes.
Anticoagulante ACD1 CPD2 CPDA-13
Citrato de sdio (g) 1,48 1,66 1,66
cido ctrico (mg) 493 188 188
Fosfato de sdio (mg) - 140 140
Dextrose (g) 1,65 1,61 2,00
Adenina (mg) - - 17,3
Fonte: Mudge et al., 2004.
1
Citrato dextrose; 2Citrato fosfato dextrose; 3Citrato fosfato dextrose e adenina.

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A primeira soluo aditiva desenvolvida foi a SAG- anticoagulante (CP2D) e na soluo aditiva (fosfato
M, sendo as solues aditivas subsequentes de sdio monobsico) (Hess, 2006).
variaes da mesma, como AS-1, AS-3 e AS-5
(Hess, 2006). A soluo AS-3 no possui manitol na As bolsas contendo CPDA-1 so as mais utilizadas
sua composio, entretanto tem citrato, que substitui na medicina veterinria (Lanevschi & Wardrop,
a ao estabilizadora de membrana do manitol e 2001), sendo que a CPD/SAG-M aos poucos vem
tambm enriquecida de fosfato na soluo ganhando espao.

Quadro 2- Composio de diferentes solues aditivas utilizadas no armazenamento de sangue total ou


hemocomponentes.
Componentes SAG-M ADSOL NUTRICEL OPTISOL
(AS-1) (AS-3) (AS-5)
Cloreto de sdio (mg) 877 900 410 877
Manitol (mg) 525 750 - 525
Adenina (mg) 17 27 30 30
Dextrose (g) - 2,2 1,1 900
cido Ctrico (mg) - - 42 -
Citrato de sdio (mg) - - 588 -
Fosfato de sdio monobsico (mg) - - 276 -
Tipo de anticoagulante na bolsa CPD1 CPD CPD2 CPD
primria
Fonte: Holme (2005).
1
Citrato, fosfato e dextrose; 2Citrato, fosfato de sdio monobsico e dextrose.

Novas solues aditivas vm sendo desenvolvidas na soluo aditiva, que abranda a queda do pH e,
medicina humana, no intuito de diminuir as leses de consequentemente, conserva o ATP e DPG.
armazenamento e aumentar o tempo de conservao.
A produo de ATP para manuteno do Independente do tipo de soluo utilizada para
metabolismo energtico dos eritrcitos tem sido um conservao do sangue, aps a coleta as bolsas
grande desafio para a medicina transfusional, mas devem ser armazenadas em geladeiras com
recentemente foi criada uma nova soluo aditiva, a temperatura de 1 a 6C, pois as reaes bioqumicas
PAGGS-M, que possui em sua composio cloreto e moleculares das hemcias so retardadas pela
de sdio, fosfato, glicose, adenina, manitol e reduo da temperatura (Scott et al., 2005). As
guanosina (Walker et al., 1990; Hess, 2006). A hemcias humanas mantidas sob refrigerao entre 2
guanosina foi adicionada como fonte de ribose, com a 8C diminuem em at 40% o metabolismo,
objetivo de conduzir a via EmbdenMeyerhof da retardando o processo de envelhecimento normal
gliclise e aumentar o aporte de ATP, sendo que (Hgman, 1998).
essa soluo proporcionou aumento do perodo de
armazenamento que antes era de 42, para 49 dias CONSERVAO DE SANGUE TOTAL NAS
(Walker et al., 1990). Outra soluo desenvolvida foi DIFERENTES ESPCIES
a CPD ErythroSol ( CPD/RAS2), onde tentou-se
aumentar o pH da soluo conservadora atravs da A separao dos hemocomponentes sanguneos no
reduo do anticoagulante CPD, e usando soluo uma prtica rotineira na medicina veterinria,
aditiva neutra com glicose autoclavada em uma bolsa como ocorre na medicina humana (Lacerda, 2005).
separada (Hogman et al., 1997), a qual conserva os No entanto, o fracionamento do sangue permite que
eritrcitos humanos por at sete semanas. mais de um paciente possa se beneficiar de apenas
um doador, pois muitas vezes o paciente que requer
Hess et al. (2003) criaram uma soluo preservativa uma transfuso, precisa de apenas um componente
(CPD/EAS-81) capaz de armazenar as hemcias por sanguneo especifico.
oito semanas, na qual promoveram a alcalinizao da

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O tempo de armazenamento do sangue na espcie tempo de armazenamento diferente entre as


humana depende da soluo utilizada na bolsa de espcies, no sendo indicado usar como referncia o
coleta: ACD e CPD so de 21 dias, CPDA-1 de 35 tempo de conservao do sangue humano (Bertoletti,
dias e bolsas contendo soluo aditiva varia de 42 a 2011; Durham, 1996). O quadro 3 apresenta o tempo
49 dias (Razouk & Reich 2004). Na medicina de conservao dos hemocomponentes em diferentes
veterinria, pesquisas tem mostrado que utilizando solues conservadoras e diferentes espcies.
as mesmas solues para a conservao do sangue, o

Quadro 3 - Tempo de conservao dos hemocomponentes em diferentes solues conservadoras de acordo com a
espcie animal.
Espcie Soluo Conservadora Componente Tempo de Preservao Autor

Canino CPDA-1 Sangue total 35 dias Authement, 1986

Canino CPDA-1 Sangue total 41 dias Costa Jnior et al. 2008


CPD/SAGM Sangue total 41 dias

Canino CPDA-1 Concentrado de 20 dias Wardrop et al. 1994b


CPD/Adsol hemcias 37 dias
Concentrado de
hemcias

Canino CPD/Nutricel Concentrado de 35 dias Wardrop et al. 1997


hemcias
Felino CPAD-1 Sangue total 28 dias Bertoletti, 2011
CPD/SAGM Sangue total 28 dias

Equino CPDA-1 Sangue total 21 a 28 dias Durham, 1996


Equino CPD/SAGM Concentrado de 35 dias Niinist et al. 2008
hemcias
Bovino CPDA-1 Sangue total 35 dias Ribeiro Filho et al.1994
Ovino CPDA-1 Sangue total 35 dias Sousa et al. 2012b
Asinino CPDA-1 Sangue total 42 dias Barros, 2011
CPD/SAGM Sangue total 42 dias

LESES DE ARMAZENAMENTO E observado em alguns estudos a utilizao de


CONTROLE DE QUALIDADE DO SANGUE parmetros humanos para avaliar a qualidade do
ARMAZENADO sangue animal armazenado (Mudge et al., 2004;
Niinisto et al., 2008; Barros, 2011).
A retirada do sangue da circulao para conservao
in vitro, transfere os eritrcitos para um ambiente A utilizao dos hemocomponentes uma realidade
diferente do encontrado no organismo vivo, o que na clnica de pequenos animais, em especial na
promove uma srie de alteraes hematolgicas, canina, sendo conhecidas as formas de
morfolgicas, hemogasomtricas e bioqumicas, que fracionamento, tempo de conservao dos
em conjunto so conhecidas como leses de hemocomponentes e sobrevivncia ps-transfusional
armazenamento (Chin-Yee et al., 1997; Bertoletti, das hemcias transfundidas, enquanto na clnica de
2011). grandes animais o sangue total ainda a forma mais
utilizada, embora alguns estudos em equinos tm
Na medicina humana, existem parmetros sido conduzidos, no intuito de possibilitar a
hematolgicos e bioqumicos de referncia que utilizao dos hemocomponentes. Posteriormente
precisam ser seguidos para que o sangue e seus so descritas as principais alteraes hematolgicas,
componentes sejam considerados de boa qualidade morfolgicas, bioqumica e hemogasomtricas
para a realizao da transfuso. Na medicina ocorridas no armazenamento de sangue total nas
veterinria, os parmetros de qualidade no esto diferentes espcies animais.
bem estabelecidos para cada espcie animal, sendo

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Alteraes Hematolgicas e Morfolgicas ou no concentrado de hemcias, para as diferentes


espcies. No entanto alguns trabalhos levam em
Os eritrcitos dos mamferos so clulas anucleadas considerao os parmetros humanos (Niinisto et al.,
que no possuem mitocndrias, o que diminui a 2008; Mudge, 2004; Barros, 2011).
capacidade sinttica e impede realizao do ciclo de
Krebs e a fosforilao oxidativa, sendo necessrio Em algumas espcies, o armazenamento tem
que as solues conservadoras forneam nutrientes promovido variaes no volume corpuscular mdio
para a manuteno do metabolismo energtico das hemcias (VCM), sendo observado que
atravs da gliclise. Nesse contexto, a concentrao hemcias de ovinos e humanos aumentam esse ndice
de adenosina trifosfato (ATP) durante o hematimtrico (Sousa et al., 2012b; Wolfe, 1985),
armazenamento desempenha papel fundamental, entretanto na espcie equina tal alterao no foi
principalmente por estar envolvida em funes observada (Mudge et al., 2004; Lopes et al., 1994).
importantes como o controle da bomba de sdio e A variao no VCM est relacionada falncia da
potssio e na manuteno da forma dos eritrcitos bomba de sdio e potssio, que afetada pela
(Korte & Verhoeven, 2004). diminuio dos nveis de ATP, levando ao acmulo
de substncias osmticas e perda progressiva da
Apesar das solues conservadoras possurem fontes rea de superfcie das hemcias (Valeri, 1994).
de energia para a manuteno do metabolismo
eritrocitrio, a sobrevivncia dos eritrcitos A conservao de sangue total em bolsas CPDA-1
limitada tanto pela reduo da fonte energtica ao em ovinos (Sousa et al., 2012b) e ACD em equinos
longo do armazenamento como pelo envelhecimento (Lopes et al., 1994; Barthel, 1999) mostrou reduo
natural das hemcias. O perodo de armazenamento na leucometria global. Salib e Dawson (1985)
promove uma srie de alteraes na membrana sugeriram que a diminuio dos leuccitos ao longo
plasmtica dos eritrcitos como reduo do tamanho do armazenamento ocorre devido rpida
e esferocitose progressiva, surgimento de degenerao dos neutrfilos, quando comparada aos
microvesculas e aumento gradual da fragilidade linfcitos.
osmtica, sendo que algumas sofrem lise, levando
diminuio no nmero de hemcias, diminuio do Ao longo dos anos, estudos tem mostrado que os
volume globular e aumento da hemoglobina leuccitos podem exercer efeitos deletrios indiretos
plasmtica (Wardrop et al., 1994a). sobre as hemcias armazenadas por consumir a
glicose da soluo conservadora e por liberar
O aumento da hemoglobina plasmtica substncias biorreativas. Durante o armazenamento
(hemoglobina livre) resultante da ruptura das ocorre ruptura dos leuccitos, promovendo liberao
hemcias ou liberao da hemoglobina presente em de imunomoduladores inflamatrios como histamina,
microvesculas presente na membrana, o que pode mieloperoxidase e protena eosinoflica catinica
ocasionar danos funo renal e ao sistema de (Hgman, 1998).
coagulao quando o sangue transfundido (Hess e
Greenwalt, 2002; Korte e Verhoeven, 2004). Nos A presena de leuccitos em produtos sanguneos
bancos de sangue humanos, a percentagem de armazenados tem sido causa de reaes febris
hemlise durante o armazenamento no deve ser decorrente da liberao de citocinas,
superior a 1%. Nos pases da Unio Europia e no imunossupresso pela diminuio da atividade das
Brasil esse parmetro mais rgido, no podendo clulas Natural Killer e da fagocitose e leses
ultrapassar 0,8% (Korte e Verhoeven, 2004; RDC, pulmonares devido presena de agregado
2004). O clculo da porcentagem de hemlise segue leucocitrio, na circulao pulmonar (Eder e
a frmula de Wardrop et al. (1997): Chambers, 2007; Sheppard et al., 2007). Dessa
forma, a transfuso de sangue armazenado sem
% Hemlise = (100 VG*) x hemoglobina leucorreduo (reduo mediante filtrao) pode
plasmtica (g/dL)/Hemoglobina total (g/dL) desencadear reao inflamatria no receptor e assim
* Volume Globular potencializar ou ser mascarada, por doena primria
que o receptor pode ter (McMichael et al., 2010).
Pelas normas brasileiras o nvel de hemoglobina
plasmtica do concentrado de hemcias humano no A contaminao de hemcias por leuccitos acelera
deve ser superior a 0,8 g/dL ao final do tempo de a hemlise e aumenta o potssio extracelular,
armazenamento (RDC, 2004). Na medicina portanto a conservao melhor quando se elimina a
veterinria no existem parmetros estabelecidos camada leucoplaquetria (Hogman et al., 2002).
quanto ao grau de hemlise e o nvel de Portanto, a reduo de 80 a 90% dos leuccitos tem
hemoglobina plasmtica admissvel no sangue total demonstrado reduo dos riscos de reao ps-

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transfusional (Hgman, 1998). Existem no mercado (aproximadamente 7,4). Em condies fisiolgicas,


bolsas que reduzem a camada leucoplaquetria as reaes metablicas tendem a desviar
(buffy coat) do sangue total, denominadas bolsas continuamente este pH para cido ou bsico
Top Bottom, que possuem filtros especiais que (Almosny, 2003). Quando o sangue coletado
separam as hemcias e o plasma, dos leuccitos e armazenado em solues conservadoras, uma das
das plaquetas. A leucorreduo realizada por essas principais alteraes que ocorre a reduo do pH,
bolsas no completa, sendo recomendado que os visto que as clulas continuam seu metabolismo.
produtos das clulas vermelhas no tenham mais que
1,2x109 leuccitos/unidade (Hogman et al., 1978). Nas diferentes espcies observa-se a reduo do pH
logo no primeiro dia de armazenamento, decorrente
Durante o armazenamento, as hemcias tambm da presena de cido ctrico na soluo
sofrem uma sequncia previsvel de alteraes na conservadora, sendo que este pH tende a decrescer
forma. Inicialmente tais clulas apresentam forma ainda mais ao longo do tempo, devido ao
normal de disco bicncavo (disccitos), sofrem metabolismo anaerbico das hemcias em que a
crenao formando equincitos e posteriormente glicose metabolizada a lactato, levando ao acmulo
ficam ingurgitadas formando uma esfera crenada de ons H+ (Authement et al., 1986; Ribeiro Filho et
com mltiplas espculas (esferoquincitos), as quais al., 1993).
so eventualmente perdidas por meio de vesculas
lipdicas, produzindo esfercitos (Greenwalt et al., O poder tampo do plasma tambm produz efeitos
1990). na conservao. Em concentrados de hemcias, a
diminuio do pH mais rpida do que no sangue
A formao dos equincitos ocorre quando h total. A retirada de plasma elimina parte da soluo
diminuio na concentrao de ATP, excesso de de conservao utilizada e, sobretudo, os substratos,
Ca2+, presena de agentes qumicos, expanso da como glicose e fosfatos (Genetet & Mannoni, 1980).
poro externa ou interna da bicamada lipdica dos Entretanto, a relao soluo de conservao/volume
eritrcitos, sendo que equincitos so reversveis e de sangue deve ser respeitada, pois, se o volume de
interconvertveis forma de disccito (Chailley et sangue coletado for pequeno em relao ao
al., 1973). Entretanto, se houver perda de fragmentos anticoagulante, a diminuio do pH ser mais
da membrana pela continuidade da leso, com acentuada, devido acidez da soluo (Ribeiro Filho
aumento da viscosidade e rigidez do eritrcito, et al., 1994).
forma-se o esfercito, irreversvel e altamente
suscetvel hemlise (Chabanel et al., 1987). A captao e liberao de oxignio pela
hemoglobina so mediadas pelo 2,3 DPG, sendo que
No entanto, Hess et al. (2000) mostraram que existe as concentraes desse elemento esto relacionados
uma correlao entre a morfologia e a concentrao a variaes do pH, que quando menor que 7,0 h
de ATP e a sobrevivncia das hemcias ps- degenerao do DPG aumentando a afinidade da
transfusional, mas no existe correlao entre a hemoglobina pelo O2, enquanto pH acima de 7,0
morfologia e o grau de hemlise, sugerindo que a promove regenerao do DPG e menor afinidade da
manuteno da forma das hemcias uma hemoglobina pelo O2 (Kurup et al., 2003).
caracterstica desejvel, porm no necessria para
manuteno da qualidade das hemcias. A reduo na afinidade da hemoglobina pelo
Experimentos in vitro mostraram que as hemcias oxignio conhecida como efeito Bohr, ou desvio
retornam a sua forma normal aps serem Bohr. O aumento na pCO2 outro fator que tambm
ressuspendidas, desde que estas no estejam no causa reduo na afinidade da hemoglobina atravs
estgio de esfercito (Hess et al., 2000). de dois mecanismos: por diminuio do pH
sanguneo e por promover combinao direta do CO2
Para Scott et al. (2005) as alteraes morfolgicas com a hemoglobina formando compostos
podem influenciar o transporte dos eritrcitos pelos carbaminos (Randall et al., 2008).
minsculos capilares sanguneos e reduzir a
sobrevivncia ps-transfusional, j que as clulas No bem conhecido o pH onde as clulas
com alteraes morfolgicas so eliminadas mais sanguneas podem ser submetidas e continuam a
rapidamente pelo sistema fagoctico macrocitrio. metabolizar, mas Hess e Greenwalt (2002) em
trabalho com sangue humano sugeriram que o pH de
Alteraes Hemogasomtricas 6,2 seja o mximo.

O pH sanguneo dos animais est prximo da A presso de CO2 uma varivel hemogasomtrica
neutralidade com leve tendncia alcalinidade que tende a aumentar no interior das bolsas de

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sangue ao longo do perodo de armazenamento, Altos valores de potssio no sangue armazenado


devido principalmente neutralizao do cido esto na dependncia da hemlise, e das
lctico produzido pelo metabolismo celular, concentraes de potssio intra-eritrocitrios entre as
resultando na produo de CO2. A pO2 tambm espcies, sendo encontradas altas concentraes nas
tende a aumentar no interior das bolsas, sendo hemcias de humanos (1023,9mmol/L), equinos
observado aumento dessas variveis no (1201,1mmol/L), sunos (105,912,7), caprinos
armazenamento de sangue canino, bovino, ovino e (76,1mmol/L) e bovinos (222,5mmol/L) e baixos
asinino (Costa Junior et al., 2008; Ribeiro Filho et valores para ces (5,71mmol/L) e gatos
al., 1994; Sousa et al., 2012b; Barros, 2011). (5,91,9mmol/L), de acordo com Harvey (2010).
Comprovando que as bolsas plsticas utilizadas para
o armazenamento do sangue so permeveis ao CO2 Com relao aos ovinos e asininos tem-se observado
e ao O2 (Ribeiro Filho et al., 1994). Altos nveis da variaes intraespcies, existindo animais com
pCO2 tambm promovem maior degradao do 2,3 hemcias possuindo altos valores de potssio (HK+ -
DPG (Hgman et al., 2002). ovinos 98,7mmol/L, asininos 114mmol/L) e com
baixos valores deste on (LK+ - ovinos 39,4mmol/L,
O metabolismo anaerbico das hemcias produz asininos 100mmol/L), conforme citado na literatura
cidos, entre eles o cido lctico, que neutralizado (Turcker e Ellory, 1971; Miseta et al., 1993).
pela ao do HCO3- plasmtico, que tem papel
tamponante no meio extracelular (Randall et al., Portanto, as concentraes de potssio do sangue
2008). Ribeiro Filho et al. (1994) mencionam canino armazenado, no podem ser comparadas com
aumento nos nveis de lactato ao longo do perodo as concentraes do sangue equino, por exemplo,
de armazenamento, enquanto ocorre reduo gradual mesmo levando em considerao o mesmo tempo de
nos nveis de bicarbonato plasmtico, de modo a armazenamento e o grau de hemlise, j que as
neutralizar esses cidos (Ribeiro Filho et al., 1994). concentraes de potssio sero diferentes devido
diferena individual na concentrao
Alteraes Bioqumicas intraeritrocitria desse eletrlito.

Entre os padres bioqumicos utilizados para avaliar O sangue armazenado e hemolisado de animais que
a conservao de sangue total esto s concentraes possuem altos valores de potssio intraeritrocitrio
de ATP, 2,3 DPG, sdio, potssio e glicose, quando transfundido possui maiores chances de
entretanto, a determinao desses dois ltimos provocar hipercalemia, enquanto sangue armazenado
parmetros so prticos e normalmente utilizados na de animais que possuem pouco potssio intracelular
rotina dos bancos de sangue para avaliar a qualidade tem menores chances de provocar hipercalemia, mas
do sangue armazenado (Tomczak, 2008). podem agravar quadros de pacientes com problemas
renais ou pacientes que recebam grandes volumes
O potssio um on predominante intracelular, transfusionais (Hohenhaus, 2007). O quadro 4
sendo encontrado apenas cerca de 2% no meio apresenta a concentrao de potssio em estudos
extracelular, enquanto o sdio um on extracelular. realizados em diferentes espcies animais.
A manuteno do equilbrio desse gradiente de
concentrao nas hemcias realizada pela bomba Assim como a hemoglobina, o aumento da
de sdio e potssio encontrada na membrana concentrao de potssio extracelular indica um dos
plasmtica. A atividade da bomba Na/K primeiros eventos que se relacionam com a reduo
dependente dos nveis de ATP, sendo tambm da qualidade das clulas vermelhas (Korte &
influenciada pela diminuio do pH e da temperatura Verhoeven, 2004). Para a espcie humana so
(Meyer et al., 1995; Hgman et al., 1997; Hgman, aceitveis nveis menores que 100mmol/L
1998). (Tomczak, 2008) de potssio ao final do perodo de
armazenamento de concentrado de hemcias. Porm,
Ao longo do perodo de armazenamento ocorre esse valor no pode ser estendido a todas as
diminuio das concentraes de ATP, queda do pH espcies, necessitando ainda de estudos que
e diminuio da atividade da bomba de Na+/ K+, determinem os valores para cada espcie.
ocorrendo aumento do potssio extracelular e
diminuio do sdio extracelular (Meyer et al., Determinaes dos valores de ATP e 2,3 DPG, que
1995). A inverso do gradiente de concentrao tendem a diminuir no decorrer do perodo de
promove aumento de solues osmticas e armazenamento, vm sendo includas nas pesquisas
consequentemente aumento da hipertonicidade do para se avaliar a qualidade do sangue armazenado,
meio intracelular (Hashimoto, 1997; Valeri, 1994). porm na prtica esses parmetros no so utilizados
rotineiramente nos bancos de sangue, devido

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onerosidade (Niinisto et al., 2008; Mudge et al., transfuso para que ele se normalize. Contudo, este
2004; Costa Jnior et al.; 2008; Hgman, 1998). um fator limitante para a utilizao de sangue
armazenado por longo perodo em pacientes crticos
A reduo da concentrao de ATP durante o que necessitam de entrega rpida de O2, e agravado
armazenamento responsvel principalmente pelas ainda mais, pois os pacientes crticos necessitam de
leses de armazenamento ligadas a membrana tempo superior a 24 e 48 horas ps-transfuso para
celular dos eritrcitos, como esferocitose recuperarem os nveis de 2,3 DPG (Scott et al., 2005;
progressiva, endocitoses anormais, aumento da Kristensen & Feldam, 1997).
fragilidade, reduo do tamanho e surgimento de
microvesculas, alm de interferir no bom As concentraes de 2,3 DPG assim como as de
funcionamento da bomba de sdio e potssio potssio so variveis entre as espcies. Ruminantes
(Eisenbrant & Smith, 1973; Hgman et al., 2002). e felinos diferentemente das outras espcies animais,
inclusive o homem apresentam quantidades menores
O 2,3 DPG como j mencionado anteriormente de 2,3-DPG, sendo este mediador menos importante
importante na liberao do oxignio ligado para essas espcies devido a mecanismos adaptativos
hemoglobina, para os tecidos. Apesar de o que permitem a esses animais terem liberao rpida
armazenamento promover depleo dos nveis de 2,3 de oxignio aos tecidos (Bunn & Forget, 1986).
DPG, os eritrcitos retornam a sntese normal de 2,3
DPG, sendo necessrias 24 a 48 horas aps a

Quadro 4 - Concentrao de potssio plasmtico (mmol/L) em componentes sanguneos armazenados em


diferentes solues conservadoras.
Espcie Componente Tempo de Tipo de bolsa Potssio Autor
Armazenamento (mmol/L)

Humano Concentrado 42 dias CPD-SAM 60 Tomczak, 2008


Canino Sangue total 41 dias CPDA-1 5,1 Costa Jnior, 2006
CPD-SAGM 3,8
Felino Sangue total 28 dias CPDA-1 4,8 Bertoletti, 2011
CPD-SAGM 2,76
Equino Sangue total 32 dias CPDA-1 17,3 Mudge et al. 2004
Equino Concentrado 35 dias CPD-SAGM 28,5 Niinisto et al. 2008
Asinino Sangue total 42 dias CPDA-1 6,73 Barros, 2011
CPD-SAGM 5,78
Bovino Sangue total 35 dias CPDA-1 9,96 Ribeiro Filho et al.
1993
Ovino Sangue total 35 dias CPDA-1 22,85 Sousa et al. 2012b

Kay (1977) atribui essa adaptao, ao fato de que no inicio do perodo de conservao observam-
ruminantes e felinos serem animais que requerem se elevados valores decorrentes da presena de
liberao rpida de energia, na execuo de saltos e glicose na soluo preservativa. Entretanto, os nveis
corridas repentinas. Nos momentos de exigncias deste carboidrato tendem a diminuir durante o
fsicas os animais, apresentam aumento da armazenamento, devido sua utilizao como fonte
temperatura corprea, o pH sanguneo diminui, e a energtica para produo de ATP (Ribeiro Filho et
demanda de O2 aumenta. Nessa situao a afinidade al., 1994).
diminuda pelo oxignio pode facilitar a sua
liberao para os tecidos (Bunn & Forget, 1986). O consumo de glicose pelos eritrcitos varia de
acordo com as diferentes espcies animais, sendo
A glicose tem sido utilizada como um marcador da que os eritrcitos humanos apresentam maior taxa de
qualidade do sangue humano armazenado, onde ao consumo deste carboidrato (1,48 1,1mmol/h/mL)
final do perodo de conservao os nveis desse quando comparado com outros mamferos. Como as
carboidrato devem ser superiores a 50mg/dL bolsas de conservao de sangue foram projetadas
(Tomczak, 2008). A glicose o substrato utilizado para essa espcie, a quantidade de glicose no um
para produo de energia atravs da gliclise, sendo

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empecilho para a conservao de sangue em outras


espcies (Harvey, 2010). Os padres de controle de qualidade do sangue
armazenado nos bancos de sangue humano esto
Ao final de 32 dias de conservao de sangue total bem estabelecidos, existindo leis nacionais que
equino em diferentes solues, observaram-se normatizam esse processo no intuito de detectar
valores de glicose acima de 300mg/dL (Mudge et al., erros ao acaso ou erros sistemticos. No entanto, na
2004). No sangue canino e felino, valores acima de medicina veterinria os parmetros de qualidade no
500mg/dL durante 42 dias e 28 dias de conservao esto bem estabelecidos para as diferentes espcies,
respectivamente, em bolsas CPD/SAGM (Costa sendo importante o desenvolvimento de estudos que
Jnior et al., 2008; Bertoletti, 2011). As bolsas tipo possam determinar os padres de qualidade para as
CPD/SAG possuem na soluo preservativa maior diferentes espcies, assim como avaliar os efeitos e
quantidade de glicose quando comparada s bolsas respostas do receptor ao recebimento do sangue
tipo CPDA-1. armazenado e a capacidade das hemcias de
funcionar ps-transfuso.
A atividade da enzima lactato desidrogenase (LDH)
tambm tem sido utilizada em estudos com sangue REFERNCIAS
equino armazenado, para auxiliar na avaliao de Almosny, N. Equilibrio cido-bsico em Medicina Veterinria.
hemlise, j que essa enzima est presente em In: Anais do I Simpsio de Patologia Clnica Veterinria da
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armazenadas evitar a proliferao bacteriana jumentos (equus asinus) acondicionado em bolsas de sangue do
(Hgman et al., 2002; Smith et al.,1978), em virtude tipo CPDA-1 e CPD/SAG-M. 2011. Dissertao (Mestrado em
dos eritrcitos armazenados servirem como meio de Medicina Veterinria). Universidade Federal Rural do Semi-
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ressaltar que apesar das bolsas para a coleta e Barthel, B. Functionell changes in red blood cells during storage
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animais ou ainda durante o armazenamento se as Bertoletti, B. Peroxidao lipdica e parmetros bioqumicos do
bolsas no forem seladas corretamente. Segundo sangue total felino armazenado em bolsas plsticas contendo
Hess (2010) a maioria das bactrias no sobrevive s CPDA-1 e CPD/SAG-M. 2011. Dissertao (Mestrado em
baixas temperaturas de armazenamento (1 a 6C), no Medicina Veterinria). Universidade Federal de Santa Maria.
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entanto existem algumas tolerantes, como
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lento, cerca de uma diviso por dia, levando pelo hemoterpicos, incluindo a coleta, o processamento, a testagem,
o armazenamento, o transporte, o controle de qualidade e o uso
menos 19 dias para uma bactria multiplicar-se cerca humano de sangue, e seus componentes, obtidos do sangue
de 108, podendo provocar sepse (Wagner, 2004). venoso, do cordo umbilical, da placenta e da medula ssea.
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