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UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE CIENCIAS QUMICAS

CARRERA DE BIOQUMICA CLNICA

INMUNOLOGA II

ANTICUERPOS ANTI - ssDNA

SANTIAGO LPEZ
DEFINICION
Tambin conocido como: ANTI DNA
desnaturalizado, ANTI DNA hlice simple,
ANTI DNA monocatenario.

Son inespecficos, se detectan en LES y en


cualquier proceso inflamatorio por lo que
carece de utilidad clnica.

Las pruebas ELISA han demostrado una


mayor sensibilidad que las pruebas
estndar de IFI y RIA que permiten una
mejor deteccin de anticuerpos de bajo
ttulo.

VN: <20 U/ml


UTILIDAD CLINICA

Esclerosis sistmica, Clase IgG son los


Existe correlacin
La deteccin esclerodermia ms
Aparecen en clnica entre
precisa de localizada y en patognicos, lo
un 30-90% de anticuerpos
Anti-ssDNA varias de clase IgM no
circulantes ssDNA
los pacientes enfermedades del
puede ser y compromiso de tanto, los de
con LES tejido conectivo,
piel,
importante en enfermedades clase IgA
dependiendo articulaciones y
el manejo de hepticas, as como aparecen en la
de la actividad clulas
SLE en algunas glomerulonefriti
sanguneas s lpica
personas normales.
PRUEBAS

Inmunoflorescencia Indirecta (IFI): Sirve para el


monitoreo de la terapia y el seguimiento del paciente.

Enzimoinmunoensayo (ELISA): Sirve para l diagnstico


pero no para el monitoreo de la terapia. Mayor
sensibilidad que las pruebas estndar de IFI y RIA

Radioinmunoensayo (RIA): Tcnica de referencia, porque


detecta slo los anticuerpos que producen la patologa.
EQUIPOS
HELIOS Automated IFA
System
AESKU.GROUP
El procesador HELIOS
es capaz de realizar
todo el procesamiento
IFA y la lectura de
forma automtica.
El equipo puede procesar hasta 30 pruebas iguales o distintas por
cada 90 minutos, pudiendo ser desde 1 hasta 30 pacientes.

Cada cartucho incluye un control de calidad de la prueba, por lo


cual se convierte en el primer equipo en el mundo que procesa un
test de verificacin o control de calidad por cada prueba procesada
COMO TRABAJA ALEGRIA
1 2: Vaco y sin recubrimiento (pocillo
para la dilucin de la muestra)
3 4: Recubierto con antgeno (pocillos
de reaccin)
5: Control; amarillo; que contiene
anticuerpos especficos de prueba,
buffer, detergente, conservante: azida
sdica 0.09% y ProClin 300 0.05%.
6: Conjugado enzimtico; rojizo; que
contiene anticuerpos IgG antihumano,
HRP etiquetado; PBS, BSA, detergente,
conservante ProClin 300 0.05%.
7: Bfer para muestra: amarillo; que
contiene buffer, detergente,
conservante: azida sdica al 0.09% y
ProClin 300 al 0.05%.8: Sustrato de
TMB: transparente; que contiene 3,3 ',
5,5'-Tetrametilbenzidina.
1.- Dilucin de la muestra

2.- Se pipetea muestra


diluida y control en cada
pocillo recubierto
3.- Se incuba y aplica
lavado x 2

4.- Se pipetea
conjugado enzimtico
en pocillo de muestra
y control
5.- Se incuba y aplica lavado x 2

6.- Se pipetea sustrato en


pocillo de muestra y control

7-. Unidad ptica del equipo lee


densidad ptica
CASO CLINICO
ANTECEDENTES

Mujer de 46 aos

Infeccin pasada por el virus de la hepatitis B


(VHB)
Dislipemia y trastornos menstruales
Consult por una erupcin
discretamente pruriginosa
de 2 semanas de evolucin
que se inici en el cuello y
en la parte alta de la
espalda, para extenderse
con posterioridad al escote
y a la cara.

Se trataba de lesiones con


morfologa redondeada, de
tamaos variables,
eritematoedematosas, con
tendencia a confluir
formando placas.
No afectacin de extremidades
inferiores ni de la porcin distal de las
superiores.

No fiebre ni sntomas sistmicos


asociados y la exploracin por
aparatos no mostr hallazgos
significativos.

Refera tratamiento con un


anticonceptivo (estradiol-norgestrel)
por 1 ao, que le haban administrado
para regular sus ciclos menstruales

Tetrazepam, coincidiendo con el inicio


de la erupcin, que le fue
administrado por una contractura
cervical.
Se tom una biopsia cutnea
Se solicit una analtica general con estudio de
autoinmunidad
HEMOGRAMA
Leucocitos 4.000/ul
linfocitos 1.400/ul
Plaquetas 139.000/ul
BIOQUMICA SANGUNEA
TGO 81 mU/ml
TGP 55 mU/ml
GGT 695 mU/ml

Respecto al estudio de autoinmunidad


ANA: positivos a ttulos bajos (15 U)
Anticuerpos anti-Ro
Antihistonas: positivos.
Anti-ADN-ss: positivos a ttulos bajos (25 U)
Anti-ADN-ds, anti-Sm y anti-La: negativos.
Sospecha Lupus eritematoso inducido por frmacos

Se retir toda la medicacin y se instaur tratamiento con 30


mg/da de prednisona, con mejora progresiva.

Al cabo de un mes, la erupcin se encontraba en fase de resolucin,


aprecindose tan slo una fina descamacin superficial.

Tras mes y medio, parmetros de laboratorio normalizados,


incluidas las transaminasas, sin que se determinara ninguna
hepatopata que justificara el aumento previo de stas.

La nueva determinacin de marcadores de autoinmunidad mostr


unos ANA an elevados a ttulos de 12 U, al igual que los anti-Ro,
mientras que los antihistona y anti-ADN-ss haban negativizado.

El resto de autoanticuerpos no se modificaron en relacin al control


previo.
Diagnstico de LECS inducido por frmacos:
Desarrollo de una erupcin cutnea clnica e
histolgicamente indicativa de un lupus
eritematoso cutneo subagudo
Paciente sin antecedente de conectivopata
Exposicin previa a medicamentos
Elevacin de ANA, antihistona, anti-ADN-ss y
anti-Ro
Rpida mejora clnica tras la supresin de los
frmacos, permitieron el
REFERENCIAS
Martn, j. (2004) Lupus eritematoso cutneo
subagudo inducido por frmacos. Hospital Clnico
Universitario de Valencia. Espaa.
ALPOC Diagnostics(2017) Anti-ss-DNA Screen
(IgA, IgG, IgM) ELISA. USA.
ORGENTEC (2017) Alegria for Automated
Laboratory Diagnostics. Alemania.
Rodrguez, M. (2006) Anticuerpos anti DNA y
dirigidos contra protenas asociadas al DNA.
Revista espaola reumatologa. Madrid, Espaa.

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