Académique Documents
Professionnel Documents
Culture Documents
1. Biorremediación
La biorremediación puede ser definida como el uso de organismos vivos, componentes
celulares y enzimas libres, con el fin de realizar una mineralización (compuesto blanco
Þ CO2 + H2O), una transformación parcial, la humificación de los residuos o de agentes
contaminantes y una alteración del estado redox de metales.
Históricamente el compostaje fue una primitiva forma de biorremediación en donde los
residuos por ej. derivados de la recolección domiciliaria (restos orgánicos, inorgánicos,
residuos industriales, etc.) son incluidos en containers permitiendo que puedan ser
biodegradados por microorganismos (Senior and Balba, 1990).
Los factores que gobiernan la biorremediación son complejos y pueden variar
enormemente dependiendo de la aplicación. En muchos casos puede llegar a ser
difícil distinguir entre los factores bióticos y abióticos que contribuyen con la
biorremediación.
La biorremediación es un fenómeno común en la naturaleza cuando en un ambiente o
ecosistema se produce una alteración del equilibrio como es el caso de una gran tala
de árboles, esto origina un aumento considerable de materia orgánica en el suelo.
En este caso los factores físicos y bióticos tratan de reponer el daño, se produce
entonces un aumento de organismos saprófitos los cuales ocasionan una gran
mineralización de la materia caída, además el resto de esa materia puede ser
reciclada o humificada
Cabe remarcar que cuanto más diversidad biológica exista en un ecosistema con
mayor eficiencia podrá autodepurarse.
Las técnicas de biorremediación pueden ser clasificadas según el tratamiento y a la
fase usada.
Se denomina biorremediación in situ cuando el suelo contaminado se trata en el lugar,
el sitio permanece prácticamente inalterado durante el tratamiento y la biorremediación
ex situ el suelo es retirado y trasladado hasta una unidad de tratamiento.
El tratamiento es efectuado en fase sólida si el suelo es tratado sobre un lecho
especialmente preparado y no hay líquido libre. Por el contrario se denomina fase
barro cuando se lleva en un reactor y se forma barro entre el suelo y agua (Ferrari,
1996).
En general existen dos estrategias para ayudar a un ecosistema a remediarse:
La primera es agregar nutrientes de forma de estimular las poblaciones naturales y así
aumentando su actividad y la segunda es introduciendo microorganismos exógenos
dentro del ecosistema como forma de remediación.
En este último caso con las nuevas técnicas de la ingeniería genética se pueden
emplear microorganismos genéticamente modificados haciéndolos más eficientes en
la biorremediación.
2. Biorremediación de hidrocarburos
La descomposición microbiana de hidrocarburos es de considerable importancia
económica y ambiental por los perjuicios que ocasiona.
Una de las principales causas de contaminación del ambiente son los derrames de
petróleo, tal como ocurrió en marzo de 1989 cuando el superpetrolero Exxon Valdez
chocó con varios icebergs en el estrecho del Príncipe Guillermo en Alaska,
derramando 11 millones de galones de petróleo en el agua ocasionando un impacto
ecológico inimaginable cuyo gasto de limpieza se estimó en (U$ 1500 millones).
Los hidrocarburos varían en su habilidad de ser degradados, los derrames de estos en
el agua tienden a formar laminas en la superficie en donde el viento y el oleaje crean
microscópicas emulsiones. Esto permite que los microorganismos predominantemente
bacterias (pseudomonas, corinebacterias y micobacterias), algunas levaduras y hasta
algas verdes tengan una mayor superficie de contacto con la partícula, facilitando el
acceso a la misma y permitiendo su degradación.
Pero la biorremediación en el agua se ve afectada por la disponibilidad de nutrientes
debido a que estos generalmente se encuentran en bajas concentraciones, por lo que
generalmente tras un derrame se adiciona fósforo y nitrógeno como forma de estimular
el crecimiento de los microorganismos que potencialmente degradarán el hidrocarburo.
En el caso de que el derrame sea en el suelo el proceso es diferente, la oxidación es
llevada a cabo por hongos y bacterias y el movimiento del hidrocarburo es más
vertical, además el proceso de humificación tiende a atrapar el residuo haciéndolo más
persistente. En este caso el factor limitante no está en la disponibilidad de nutrientes
sino que la disponibilidad de oxigeno es baja, por lo que se debe aerear el suelo o
agregar peróxido de hidrogeno (H2O2) para mejora el proceso.
En los derrames, la fracción de hidrocarburo más volátil es evaporada con facilidad
dejando a los componentes alifáticos y aromáticos para ser oxidado por diversos
grupos de microorganismos.
En experimentos llevados a cabo tras los derrames de petróleo se demuestra que el
número de bacterias oxidantes aumenta de 103 a 106 veces poco después del mismo y
en condiciones favorables más del 80 % de los componentes no volátiles son oxidados
entre 6 meses y un año del derrame.
Algunas fracciones, como los hidrocarburos de cadena ramificada y los policíclicos,
permanecen mucho más tiempo en el ambiente principalmente si llegan a zonas
anaerobias ocasionando perjuicios a largo plazo.
3. Biorremediación de Hidrocarburos Aromáticos Polinucleares
Los hidrocarburos aromáticos polinucleares (HAPs) constituyen un grupo de
contaminantes considerado de estudio prioritario debido a sus propiedades
mutagénicas, tóxicas y cancerígenas. En los últimos años la acumulación de estos a
ido aumentado (Menzie et al., 1992).
Una gran variedad de estos compuestos orgánicos no volátiles pueden ser
encontrados en el petróleo contaminante de suelo en donde los niveles de estos
varían, pero generalmente altas concentraciones pueden ser encontradas en los
derrames de hidrocarburos.
El suelo tiene la capacidad de absorber estos compuestos y muchos son volatilizados
en la atmósfera, pero son los microorganismos los principales degradadores de estos
compuestos (Crawford et al., 1993).
Los HAPs consisten en 2 o más anillos benzénicos ya sea en forma simple o múltiple
formando cadenas o racimos y cuanto más anillos tenga el compuesto más resistente
será a la actividad enzimática, (ver tabla 1. donde se describen las características
físicas de los HAPs). Lee and Ryan (Atlas, 1981) notó que la biodegradación del
naphtaleno (2 anillos) era más de 1000 veces superior que la del benzopireno (5
anillos), en general estructuras conteniendo 4 o más anillos son difíciles de degradar.
Los estudios de degradación de los HAPs comenzaron hace más de 80 años cuando
Sohgen and Stormer aislaron bacterias capaces de degradar compuestos aromáticos
usándolos como fuente de carbono (Atlas, 1981).
En ambientes acuáticos los principales géneros de bacterias y hongos hallados son los
siguientes, Pseudomonas, Achromobacter, Arthrobacter, Micrococcus, Nocardia,
Vibrio, Acinetobacter, Brevibacterium, Corynebacterium, Flabobacterium, Candida,
Rhodotorula y Sporobolomyces.
En investigaciones realizadas en el suelo mostraron que 11 géneros de hongos entre
los que se destaca Phanerochaetes chrysosporium que es considerado un
microorganismo prometedor debido a la producción de lignasa con alto potencial de
degradar compuestos insolubles de alto peso molecular y 6 de bacterias fueron los
grupos dominantes en la degradación de HAPs.
La degradación bacteriana de estos compuestos normalmente envuelve la formación
cis,dihydrodiol observado por la formación de un diácido como el ácido cis,cis-
mucónico mientras que en eucariotas como los hongos la oxidación da la formación de
trans,dihydrodiol, en ambos casos un diol es un intermediario indispensable
(Alexander, 1977).
Cerniglia y Heitkamp (1989) han sugerido los siguientes principios aplicados a la
degradación de los HAPs.
1) Una gran variedad de bacterias, hongos y algas tienen la habilidad de degradarlos.
2) La hidroxylación de los HAPs envuelve la incorporación de oxigeno molecular.
3) Los microorganismos procariotas metabolizan los HAPs con un ataque inicial de
una dioxigenasa para dar cis,dihydrodiol que además es oxidado para formar
dihydroxidos.
4) HAPs con más de 3 anillos de benzeno no sirven como sustrato para el crecimiento
bacteriano lo que hace que deba estar sujeto a una transformación co-metabólica.
5) Muchos de los genes son codificados por plásmidos.
6) HAPs de bajos pesos moleculares como el naphtaleno son degradados
rápidamente mientras que aquellos de alto peso como el anthraceno o el benzopyreno
son más resistentes.
7) La biodegradación ocurre con mayor eficiencia en la interface sedimento/agua.
8) La adaptación microbiana puede ocurrir por continuas exposiciones a los HAPs.
Ultimamente se han desarrollado técnicas de compostaje como forma de
biorremediación.
Dado que si los microorganismos son capaces de degradar compuestos tóxicos en la
naturaleza es de esperar que estos hagan lo mismo en un laboratorio bajo condiciones
optimas. Este tratamiento consiste en la formación de un barro con el material
contaminado y agua.
Tabla 1) Parámetros físicos de los 16 HAPs de mayor prioridad según USEPA.
(PM=peso molecular, PF=punto fusión (ºC), PE=punto ebullición (ºC), S=solubilidad en
agua a 25 ºC)
Fluoranteno Benzo(jk)fluoreno
Benzo(b)
Benceno(e)
3,4-Benzopireno
Dibenzo(ah)
Indeno(1,2,3-
cd)
Insecticidas clorados
DDT 4 años
Aldrín 3 años
Clordano 5 años
Heptacloro 2 años
Lindano 3 años
Insecticidas organofosforados
Diazinón 12 semanas
Malatión 1 semana
Paratión 1 semana
Herbicidas
2,4,5T(ácido2,4,5,triclorofenoxiacético) 20 semanas
Dalapín 8 semanas
Atrazina 40 semanas
Simazina 48 semanas
Degradación microbiana
Durante muchos años se creía que los mecanismos de degradación de los plaguicidas
eran similares en animales y en microorganismos. Pero con el avance de las
investigaciones se apreciaron las diferencias, en animales se da una conversión de
éstos compuestos de forma que puedan ser excretables, éste proceso se da
principalmente en el higado. En microorganismos su utilización es por el contrario una
forma de obtención de energía o fuente de carbono.
Las vías metabólicas son muy variadas, fermentaciones, respiraciones anaeróbicas,
acción de exoenzimas y procesos quimiolitótrofos pueden ser encontrados
(Matsumura, 1982).
Existen dos formas por la que la cual la microflora puede degradar el plaguicida.
I) La sustancia favorece el crecimiento microbiano y es empleada como fuente de
carbono, energía y raras veces como fuente de nitrógeno, azufre, etc..
El número de microorganismos aumenta y el aislamiento se realiza utilizando el
plaguicida como única fuente de nutrientes. Luego de que el compuesto fue degradado
las poblaciones decrecen.
II) Por cometabolismo, el compuesto no actúa directamente como fuente de nutrientes
sino que se debe emplear otras como la glucosa, que al disminuir en el medio inducen
las enzimas necesarias para la degradación del plaguicida.
Las reacciones catabólicas ocurren principalmente cuando las dosis de pesticidas son
altas y la estructura química permite su degradación.
(Alexander, 1977) indica una serie de reacciones que pueden ser realizadas por
microorganismos heterótrofos sobre los plaguicidas:
Detoxificación- Conversión de una molécula tóxica en otra no tóxica (Arthrobacter
spp).
Degradación- Transformación de una sustancia compleja en productos más simples ej.
la mineralización que da como
resultado la aparición de CO2, H2O, NH3, etc. (Pseudomonas spp)
Conjugación- Formación de compuestos por reacciones de adición, en donde el
microorganismo combina el plaguicida con metabolitos celulares (adición de
aminoácidos, ácidos orgánicos, etc.).
El estudio de la biodegradación de los plaguicidas no es sencillo en el suelo, ya que
las concentraciones son muy bajas. Se deben emplear cromatografias de fase
gaseosa o líquida, espectrofotometría ultravioleta, para poder detectar trazas de
pesticidas o sus intermediarios de la degradación.
5. Biorremediación de metales pesados
Otra importante área de contaminación es la que originan los metales pesados, en
este caso el mecanismo bioquímico microbiano no es la degradación del átomo
contaminante, sino que se produce un cambio en el estado de oxidación del metal
para su detoxificación.
Este cambio en el estado de oxidación permite seguir varias estrategias de
biorremediación:
a) El metal se vuelve menos soluble y precipita lo que hace que sea menos utilizado
por los organismos del ambiente.
b) Hace que se vuelva por el contrario más soluble por lo que puede ser removido por
permeabilidad.
c) Permite que pueda haber una volatilización del átomo.
d) Hacerlo en si menos tóxico para los organismos del medio.
Ciclo biogeoquímico del Mercurio
Aunque el mercurio es un elemento poco abundante en el ambiente natural, es un
producto industrial de amplia utilización y es uno de los componentes activos de los
plaguicidas introducidos en el agro y por ende en el medio ambiente.
La minería de las minas de mercurio y la combustión de combustibles fósiles libera
aprox. 40000 toneladas de mercurio al año.
El mercurio está presente en tres estados de oxidación Hg0, Hg+ y Hg2+.
El principal mineral de mercurio es el sulfato HgS, llamado cinabrio. La solubilidad de
este es demasiada baja por lo que en ambientes anaerobios el mercurio esta en esta
forma; pero debido a la aereación sufre una oxidación gracias a los tiobacilos, dando el
ion mercurio, Hg2+.
Este Hg2+ es muy tóxico pero los microorganismos convierten el Hg 2+ en mercurio
elemental Hg0 detoxificandolo. Una reductasa NADP (codificada por plásmidos)
asociada al Hg2+ cataliza la siguiente reacción.
2+ + 0 + +
Hg + NADP + H Þ Hg + 2H + NADP
Se ha identificado una proteína periplásmica en Pseudomonas spp que atrapa el Hg 2+.
Ese ion es atrapado en una región de la proteína formada por dos residuos de cisteína
formando R-S-Hg-S-R, posteriormente es transportado a través de la membrana
plasmática donde es reducido a Hg0.
2+
Esto evita que el Hg se incorpore a otros residuos de cisteina de otras proteínas lo
que podría desnaturalizarlas provocando la muerte del microorganismo, razón por la
cual se usa el mercurio de como antiséptico y desinfectante de heridas.
Otras bacterias convierten el Hg2+ en metilmercurio y dimetilmercurio de alta tóxicidad,
en esta metilación interviene la vitamina B12 como coenzima de la siguiente forma.
Hg0 +CH3-B12 Þ CH3-Hg0
metilmercurio
CH3-Hg+ +CH3 Þ CH3-Hg-CH3
dimetilmercurio
El metilmercurio y dimetilmercurio son lipofílicos y se acumulan en los lípidos
celulares.
6. Tratamiento De Efluentes
Las aguas residuales son materiales derivados de la actividad industrial y de los
residuos domésticos, los cuales por razones de salud pública no pueden ser vertidas a
los cursos de aguas corrientes o lagos.
A pesar de las recomendaciones y ordenanzas en los últimos años los ambientes
naturales han recibido un creciente aporte de efluentes industriales y domésticos que
han llevado al deterioro de muchos cursos de agua haciéndolos incompatibles con la
vida.
Aquellos materiales tóxicos o indeseables deben ser tratados para hacerlos inocuos,
los materiales inorgánicos como sedimentos u otros residuos pueden ser tratados por
procesos fisico-químicos, pero los residuos con una carga orgánica importante deben
sufrir un tratamiento microbiológico para su oxidación.
El tratamiento de desechos generalmente involucra etapas múltiples de tratamiento
físico y biológico.
Tratamiento primario: Consiste en separaciones físicas, en la que el agua se hace
pasar por una serie de mayas para eliminar residuos mayores y luego el efluente se
deja asentar para permitir que los sólidos suspendidos sedimenten.
Tratamiento secundario: Estos son procesos que reducen la demanda bioquímica de
oxigeno (DBO) de los desechos originales antes de verterlos a los cursos de aguas,
consta de los siguientes procesos.
Proceso anaeróbico: Este proceso comprende procesos de digestión y fermentación
básicamente realizada por bacterias.
El resultado final es la producción de CO2 y CH4 con lo que se logra una disminución
del contenido de sustancia orgánica.
La descomposición anaeróbica se suele usar para el tratamiento de materiales con
mucha sustancia orgánica insoluble como celulosa, fibra, etc.
El proceso puede ser resumido de la siguiente forma, (ver figura 1).
1) Digestión inicial de las macromoléculas por proteasas, polisacaridasas y lipasas
extracelulares hasta sustancias solubles.
2) Fermentación de los materiales solubles hasta ácidos grasos.
3) Fermentación de los mismos a acetato, CO 2 y H2.
4) Formación de CH4 a partir de H2, CO2 y acetato.
La formación de metano es llevada a cabo un grupo de microorganismos anaeróbicos
obligados muy especializados, las bacterias metanogénicas, (en la tabla 3, se
muestran los distintos grupos que pueden ser encontradas).
Los procesos de descomposición operan en forma semicontinua en tanques cerrados
llamados digestores de lodo, dentro de los cuales se introduce el material no tratado y
del cual se retira el material ya tratado a intervalos.
El tiempo de retención en el tanque puede ser de 2 semanas a un mes.
Posteriormente el residuo sólido el cual está formado por material indigerible y masa
bacteriana, se elimina periodicamente, se seca y luego se quema o se entierra.
Proceso aeróbico: El sistema aeróbico de tratamiento más común es el llamado de
lodos activados. Aquí, las aguas de
desecho se mezclan y aerean en un gran tanque con el fin de acelerar el proceso de
degradación.
En estos ambientes se desarrollan hongos, bacterias formadoras de limo
principalmente Zoogloea ramigera típica de este proceso y bacterias filamentosas.
El tiempo de permanencia del residuo en los tanques de lodos activados es de 5 a 10
horas el cual es demasiado corto para la oxidación total del mismo.
El proceso principal es la adsorción de los materiales solubles al material celular
microbiano.
Esto permite una reducción de la DBO del líquido (de 75 a 90%), pero la DBO general
(líquido + sólido) se reduce muy poco.
La gran reducción de la DBO se produce en el digestor anaeróbico, al cual se
transfiere el agregado.
Tratamiento terciario: Es un proceso de elevado costo económico que involucra un
tratamiento fisico-químico que incluye filtración, precipitación y cloración lo que permite
reducir los niveles de fosfatos y nitratos del efluente final.
La calidad final de las aguas residuales es tal que no llega a sostener un desarrollo
microbiano extensivo y en muchos casos se llega a bombear al suministro de agua
algunas ciudades.
Tabla 3) Característica de las bacterias metanogénicas
Methanobrevibacter Cocobacilo
Methanosphaera Coco
Methanospirillum Espirilo
Methanocorpusculaceae Methanocorpusculum -
Methanosaeta Bastón
Methanothrix Bastón