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PROTOCOLO DE
HEMATOLOGIA
VERSION 1.0
PROTOCOLO DE HEMATOLOGIA
PASTO SALUD E. S. E.
Elaborado por:
2014
PROTOCOLO DE HEMATOLOGIA
FORMULACION CODIGO VERSION PAG
Subgerencia de Salud e Investigación PR-HEM 1.0 3
CONTENIDO
PAG
CONTROL DE CAMBIOS
INTRODUCCIÓN
Las instituciones de salud, que prestan servicios de baja y mediana complejidad, tienen
entre sus servicios de salud el apoyo diagnostico, siendo de gran ayuda para el personal
médico en la determinación de una patología, para lo cual es necesario que se
implementen y ejecuten procedimientos que lleven a la optimización de procesos para
garantizar y brindar un servicio seguro.
1. OBJETIVOS
Facilitar al personal que labora en los distintos laboratorios clínicos de la E.S.E. Pasto
Salud una guía que les permita realizar los exámenes del área de hematología de una
forma práctica, correcta y acertada que les ayude a correlacionar los resultados con la
patología del paciente.
2. ALCANCE
Para todo el personal nuevo y para todos aquellos profesionales que sea necesario una re
inducción en el montaje de los exámenes del área de Hematología
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3. PROTOCOLOS DE HEMATOLOGIA
Las personas Du positivas deben considerarse Rh (D) positivas a todos los efectos.
Todas las sangres que den resultado negativo en la determinación del antígeno D por
cualquier técnica directa (placa o tubo) deben ser confirmadas mediante una prueba de
antiglobulina indirecta (investigación del Du).
- MATERIAL NECESARIO
Anti-D, con igual consideración que para la determinación Rh (D). Los reactivos deben
contener anticuerpos humanos IgG, que reaccionen en la fase de antiglobulina.
SEROFUGA
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
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- CONTROL DE CALIDAD
- REGISTROS GENERADOS
La prueba de Coombs directa se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la
superficie de los glóbulos rojos. Muchas enfermedades y fármacos (quinidina, metildopa y
procainamida) pueden llevar a la producción de estos anticuerpos. Estos anticuerpos
algunas veces destruyen los glóbulos rojos y causan anemia. Esta prueba algunas veces
se lleva a cabo para diagnosticar la causa de anemia o ictericia.
- MATERIAL NECESARIO
Solución salina
Suero de coombs
Serofuga
No aplica
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
Monoespecíficos.
Un resultado positivo en la prueba de antiglobulina directa suele indicar que los eritrocitos
están recubiertos in vivo por inmunoglobulinas, complemento o ambos.
Pacientes con Anemia Hemolítica Autoinmune (AHAI), Enfermedad Hemolítica del Recién
nacido se relacionan con IgG acompañado de fracciones del complemento C3 en un 24%
de los casos.
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
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- CONTROL DE CALIDAD
- REGISTROS GENERADOS
- FUNDAMENTO
La prueba sirve para la comprobación del anticuerpo IgG libre en suero del paciente. El
suero es incubado con una mezcla de eritrocitos grupo sanguíneo O POSITIVO que
tienen la mayoría de los antígenos eritrocitarios conocidos.
Si el suero del paciente contiene antiuerpos libres que pueden fijarse al eritrocito estos se
aglutinan.
Además la prueba:
Positivo en:
- MATERIAL NECESARIO
Solución salina
Suero de coombs
Albúmina bovina
Serofuga
Baño Maria
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Marcar tres tubos 1 con control, el otro con células I y el otro con células II.
Tubo1: agregar dos gotas de suero del paciente y dos gotas de glóbulos rojos o
positivos lavados del paciente.
Tubo 2: agregar dos gotas de suero del paciente y se agrega dos gotas de células I
comerciales
Tubo 3: agregar dos gotas de suero del paciente y se agrega dos gotas de células II
comerciales.
Se agrega a los tubos 1, 2 y 3 albumina bovina o liss.
Se centrifugan tubo 1, 2 Y 3 ( 1 min a 3500 rpm ), Resuspender el botón celular
suavemente observando la presencia de aglutinación , Incubar a 37º c por 20
minutos, centrifugar 1 minuto y leer por aglutinación.
Lavar tres veces con solución salina. Agregar 2 gotas de suero de coombs al control y
a las muestras.
Centrifugar 1 minuto y leer por aglutinación.
Si el resultado es positivo hacer dilución en cascada del suero del paciente y repetir el
procedimiento
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
- REGISTROS GENERADOS
amarilla. El resultado de tinción puede ser influido por diferentes factores como el valor del
pH de la solución y de la solución tampón, las substancias tampón (amortiguadores, el
tiempo de tinción y la fijación.
- MATERIAL NECESARIO
Laminas
Cubre objetos
Lancetas
Algodón
Alcohol
Reactivos para coloración de FIELD
Aceite de inmersión
Cronómetro
- MUESTRA
Sangre capilar
- ACTIVIDADES
Se rechazan muestras que no cumplan con las normas en la coloración del extendido.
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Cumplir esquema de tres gotas gruesas en pacientes con resultados negativos, que sean
procedentes de zonas endémicas. Una vez realizadas y reportadas las tres gotas
gruesas ya se descarta que sea un caso de Malaria.
En pacientes con resultados de gota gruesa inicial positivo, repetirla después de dos días
para descartar un caso de malaria mixta
- INFORME DE RESULTADOS
P. Falciparum se debe informar aparte las formas sexuadas de las asexuadas. Observar
mínimo 200 campos
Cálculo:
- VALORES DE REFERENCIA
NEGATIVO
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
evidenciar la calidad y la precisión con la que estamos haciendo los reportes y así tomar
las acciones correctivas del caso.
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Mezclar las muestras suavemente, con una rotación continua más o menos 30
veces
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Microcitosis:
Ruido eléctrico:
Transfusiones recientes:
Plaquetas gigantes:
RBC x 3 = HGB
RBC x 9 = HCT
HGB x 3 = HCT
Busque las señales de los glóbulos rojos y anormalidades en la parte derecha del
histograma.
Observe la elevación de los parámetros MCV, MCHC y RDW.
Revise el frotis y busque células rojas aglutinadas.
Busque en el historial médico la presencia de aglutininas frías o calientes y las
transfusiones recientes.
Presencia de Fibrina:
En caso de Malaria:
Los parásitos pueden estar presentes en la curva de los linfocitos. Busque en el frotis
su presencia.
Observe el histograma.
Busque en el frotis glóbulos blancos inmaduros.
Verifique el historial médico del paciente
Linfocitos atípicos:
Ausencia de neutrófilos:
Satelitismo de plaquetas:
Neutrófilos hipersegmentados
Ruido eléctrico:
Plaquetas pequeñas:
Hiperglicemia:
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
Polimorfonucleares Neutrofilos
En el momento de nacer: 60 - 75
1 semana a 6 años: 19 - 63
6 a 16 años 32 - 54
16 a 18 años 34 - 64
Mayor de 18 años 50 - 62
Linfocitos:
En el momento de nacer: 25 - 40
1 semana a 6 años: 40 - 70
6 a 16 años 50 - 70
16 a 18 años 40 - 55
Mayor de 18 años 40 - 50
Monocitos : 3–8%
Eosinófilos: 3–6%
Basófilos: 0–1%
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
Enviar informe de inmediato al médico tratante ante datos muy elevados de glóbulos
blancos, valores muy altos y bajos de hematocrito – hemoglobina.
- CONTROL DE CALIDAD
además envía junto con el paquete seis diapositivas para hacer el reporte de todas las
células que se encuentren presentes.
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
Antisueros A, B
SEROFUGA
SOLUCION SALINA
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Colocar en el tubo marcado A, dos gotas de suero anti -A; en el tubo marcado B dos
gotas de suero anti -B,
Agregar a cada tubo dos gotas de la suspensión de hematíes.
Mezclar suavemente y centrifugar a 3500 r.p.m por 1 minuto.
Desprender el botón de células del fondo del tubo agitándolo suavemente.
Observar la aglutinación y cuantificarla en cruces.
- INFORME DE RESULTADOS
Hematíes en o + B
estudio + + AB
o o O
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Realizar frotis de cada fosa por aparte, Dejar secar Colorear con Wright
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
Eosinofilos: O - 5 %
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- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
N/A
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Coloración de Wright:
Cubrir el portaobjetos por completo con el colorante después de dos minutos agregar
una cantidad igual de buffer soplar con suavidad para lograr una mezcla uniforme.
Aparecerá un resplandor verde metálico.
Después de cinco minutos enjuagar bien con agua potable
Limpiar la parte posterior del portaobjetos para eliminar los residuos del tinte
Secar a temperatura ambiente colocando el portaobjetos en posición vertical en una
rejilla para portaobjetos
Hacer lectura con objetivo de 100 en la zona ideal del extendido
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
Morfología globular normal: sin alteraciones morfológicas evidentes en todas las líneas
celulares: Ligera, moderada, marcada hipocromía, poliromatofilia, poiquilocitosis o
anisocitosis.
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
El Instituto Nacional de Salud envía seis diapositivas anuales, las cuales son analizadas
mediante un visor o proyector.
- REGISTROS GENERADOS
3.9 HEMATOCRITO
Esta prueba determina la masa eritrocitaria. Los resultados se expresan como porcentaje
de eritrocitos en un volumen de sangre. Constituye una medida muy importante de la
anemia o policitemia.
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- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
Ante valores muy bajos o altos de hematocrito reportar urgentemente.
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- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
ADULTOS %
MUJERES 36 - 48
VARONES 42 - 52
NIÑOS %
0 - 2 Semanas 44 – 64
2 - 8 Semanas 39 - 59
2 - 6 meses 35 - 46
6 meses -1 año 30 - 43
1 - 6 años 30 - 40
6 - 16 años 32 - 42
16 - 18 años 34 - 44
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Ninguna institución certificada conocida, ofrece el control de calidad para esta prueba.
Pero el disponer de un control externo para la hemoglobina, indirectamente permite tener
un valor de referencia para el hematocrito.
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- REGISTROS GENERADOS
3.10 LEISHMANIA
La Leishmaniasis es una zoonosis que afecta la piel, mucosa y vísceras resultantes del
parasitismo de los macrófagas por un protozoario flagelado del genero de Leishmania,
introducido al organismo por la picadura de un insecto Flebotomínio, que en el nuevo
continente pertenece a genero Lutzomyia.
- MATERIAL NECESARIO
Guantes
Alcohol
Solución salina
Jabón quirúrgico
Gasa estéril
Algodón
Laminas portaobjetos
Lancetas
Hojas de bisturí
Colorante de Wright o Field
Microscopio
Aceite de inmersión
Lápiz vidriograf
Cronómetro
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Realice limpieza del sitio de la lesión utilizando gasa impregnada de solución salina
En caso de haber costra remuévala cuidadosamente.
Sobre la cara interna del borde de la úlcera realice un raspado con el borde romo de
una hoja de bisturí. Hágalo de manera tal que no sangre mucho, presionando el sitio
de la lesión hasta hacer isquemia.
El material así obtenido se extiende en forma suave sobre una lámina portaobjetos
nueva, previamente limpiada, desengrasada y debidamente rotulada.
Tome otras tres muestras de la misma manera colocando dos muestras por lámina
portaobjetos.
Cuando la lesión es abierta el frotis directo se realiza a partir de linfa obtenida por
raspado del borde interno de la lesión, sin necesidad de hacer otra incisión. Si la
lesión es cerrada como pápula o nódulo se realiza una pequeña incisión con cuchilla
de bisturí o un aspirado de la lesión.
Deje secar las muestras a temperatura ambiente ,Filtrar previamente los colorantes
Realice la coloración de Wright o Field durante el tiempo estipulado por el laboratorio.
Observe al microscopio de luz con un aumento de 100 X todo el frotis para buscar los
amastigotes que pueden encontrarse intra o extracelulares.
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
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- CONTROL DE CALIDAD
Se hace periódicamente.
Estandarización de los tiempos de coloración de Wright.
Filtración periódica de los colorantes.
- REGISTROS GENERADOS
3.11 Rh (D)
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Determinación en placa
Determinación en tubo
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
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- CONTROL DE CALIDAD
- REGISTROS GENERADOS
El ácido acético al 2% lisa los glóbulos rojos pero no los leucocitos ni los eritrocitos
nucleados. El líquido de Turk también contiene azul de metileno que tiñe los núcleos. Es
necesario corregir el recuento de leucocitos, si el frotis de sangre presenta eritrocitos
nucleados.
- MATERIAL NECESARIO
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
Contar el número de células en los cuatro cuadrantes de los extremos y multiplicar por 50
- VALORES DE REFERENCIA
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Ninguna institución conocida certificada ofrece el control de calidad para esta prueba.
- REGISTROS GENERADOS
3. 13 RECUENTO DE NORMOBLATOS
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
N/A
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Ninguna institución conocida certificada ofrece el control de calidad para esta prueba
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
El Instituto nacional de salud envía un CD para el reporte de un ESP cada dos meses,
donde incluye las plaquetas.
- REGISTROS GENERADOS
Los reticulocitos son glóbulos rojos juveniles sin núcleo, que contienen residuos de RNA
y quizá de ribosomas en el citoplasma. Cuando los reticulocitos se incuban con los
colorantes supravitales como el azul de Cresil brillante, el RNA residual se agrega al
retículo y se precipita, formando un complejo ribonúcleo-proteína evidenciando los
gránulos de color oscuro o red de reticulina, de allí su aspecto reticulado (filamentos
azules)
- MATERIAL NECESARIO
Tubos de ensayo
Portaobjetos
Laminilla
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- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Probar cada nuevo lote de colorante examinando una muestra de sangre que se sabe
es normal. Si se dispone de una muestra anormal conocida debe utilizarse como
testigo.
Hacer doble montaje de una muestra con el fin de hacer control de reproductibilidad
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
Un tubo estéril de 9 x 120 mm con una solución de citrato, el volumen del tubo es 1.6 mL.
Una gradilla especial con escala para los tubos de 1.6 mL, para realizar lecturas en 30
minutos.
N/A
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
Coloque la Gradilla VACUETTE para VSG de 1.6 ml en una mesa donde no vaya a ser
movida o manipulada durante la prueba. La temperatura del lugar de trabajo debe estar
entre +18 °C y +25 °C.
Cuando el cronómetro indique la finalización del tiempo, note el nivel del menisco formado
entre los eritrocitos sedimentados y el plasma sobrenadante en la escala de la gradilla
VACUETTE para VSG de 1,6 ml.
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Control de reproducibilidad
- REGISTROS GENERADOS
- MATERIAL NECESARIO
N/A
- MUESTRA
- ACTIVIDADES
- INFORME DE RESULTADOS
- VALORES DE REFERENCIA
- NOTIFICACIÓN ESPECIAL
N/A
- METODOS ALTERNOS
N/A
- CONTROL DE CALIDAD
Control de reproducibilidad
- REGISTROS GENERADOS