ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DEL LITORAL

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA VIDA

FICHA DE LA PRÁCTICA PARA LABORATORIO BIOG1001

(Nombre del laboratorio donde se realiza la práctica)

LABORATORIO:

PRÁCTICA Nº 5 FECHA

NOMBRES COMPLETOS:
PARALELO:

TEMA DE LA PRÁCTICA: EXTRACCIÓN DE ADN

VALOR DE LA PRÁCTICA: CALIFICACIÓN

1.1 INTRODUCCIÓN:

Todo organismo vivo está formado por la ampliamente estudiada y conocida molécula de ADN. Sabemos
que los organismos vivos provienen de una única célula ancestral llamada LUCA. Este hecho nos indica que
entre organismos vivos compartimos mucho más de lo que nos podríamos llegar a imaginar. Por ejemplo,
los humanos compartimos el 50% de ADN con el plátano. Sin embargo, el porcentaje del ADN que
compartimos depende de cómo se mida. Si medimos secuencias idénticas de pares de bases, entonces es
bastante bajo, pero si nos fijamos en los genes con funciones idénticas o similares entonces es de hecho el
50%. Algunas de las cosas para las que estos genes codifican son de bioquímica básica: la replicación del
ADN, la transcripción, la traducción, el metabolismo de ADN (recombinación, reparación), el metabolismo
de la célula (catabolismo y anabolismo) y la regulación del ciclo celular (mitosis). Este tipo de genes son
nombrados por los biólogos como “secuencias conservadas”.

Para poder estudiar esta molécula con detalle se precisa su aislamiento de la célula, y para ello es necesario
un conjunto de materiales e instrumentos de laboratorio complejos. Lo que este experimento pretende es
un acercamiento simple y sencillo a la técnica de extracción de ADN que se puede realizar de manera sencilla
con materiales de la vida cotidiana.

1.2 EXPLICACIÓN CIENTÍFICA DEL PROCEDIMIENTO:

El ADN se encuentra en el interior del núcleo de las células eucariotas rodeado de proteínas (histonas) que
lo mantienen unido y compactado. Por ello, para poder aislarlo y observarlo se deben deshacer la
membrana plasmática y la envoltura nuclear y también se precisa la desnaturalización de las proteínas. A
continuación se explicará detalladamente la función de cada procedimiento y reactivo usado en la práctica:

Trituración de la frutilla: Incrementa el área superficial de la frutilla, permitiendo destruir más fácilmente la
membrana de sus células, permitiendo una absorción más efectiva del calor y de las soluciones que se
añadirán.

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Detergente: tiene como función destruir las membranas celulares del tejido vivo que estamos usando. El
detergente disuelve grasas, que es el componente principal de la membrana plasmática y nuclear de las
células. Al romperse las membranas celulares se permite la salida del ADN al exterior. La licuadora también
ayuda en la rotura mecánica de estas células.

Filtración: este paso permite separar los restos de los tejidos de la frutilla y de las células que hemos roto
en los pasos anteriores. Ese material no nos interesa y quedará retenido en el papel filtro o colador. El
líquido filtrado es el que contiene el ADN libre de membrana nuclear.

Alcohol congelado: el ADN es una molécula polar, pero la reacción con el etanol a muy baja temperatura
hace que se vuelva apolar e insoluble en el etanol. Esto se hace visible porque las diferentes cadenas se van
aglutinando entre sí al precipitarse debido a la acción de las fuerzas físicas. El alcohol al ser menos denso
que el agua del extracto, flota sobre esta.

Sal: la molécula de ADN es soluble en agua y por tanto invisible, pero si se pone une ADN en un medio
salado, junto a alcohol frío, esta molécula se vuelve insoluble y precipita. Por lo tanto, el agua salada ayuda
a la precipitación en el alcohol. La sal también ayuda a separar el ADN de las histonas.

1.3 OBJETIVO GENERAL:

Extraer ADN de la frutilla mediante un procedimiento sencillo con reactivos caseros.

1.4 EQUIPOS Y MATERIALES:

- 4 frutillas maduras
- Cuchillo y tabla
- Fundas plásticas
- 1 vaso de precipitación
- Detergente común diluido (añadir 10ml de detergente en 90 ml de agua potable)
- 1 colador o papel toalla
- Sal
- Tubos de ensayo
- Etanol al 95% frío
- Varilla de madera

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1.5 PROCEDIMIENTO:

1. Cortar la frutilla en trozos pequeños.

2. Colocar los trozos de la frutilla en una bolsa de plástico y amasar bien. Si la frutilla no estuviera
suficientemente madura o sacara poco jugo, agregar hasta un volumen equivalente de agua.
3. Agregar la sal gruesa y el detergente diluido a la masa de la frutilla. Mezclar bien.
4. Luego de 5 a 10 minutos, filtrar la masa de la frutilla con un colador de tela o papel absorbente.
5. Distribuir 10 ml del líquido filtrado en cada uno de los tubos de ensayo.
6. Inclinar levemente el primer tubo y muy despacio dejar escurrir 10 ml de etanol 95% sobre el líquido. El
etanol formará una segunda capa por encima de la solución.
7. Esperar 10 minutos tratando de mezclar las capas y observar cómo el ADN precipita en la interfase de las
dos capas y llega hasta la superficie.
8. Retirar el ADN con una varilla de madera o con una aguja de crochet.
ADN en la
interfase
de las dos capas

Figura 1. ADN
precipitándose.

1.6 OBSERVACIONES

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1.7 CUESTIONARIO

a. El ADN de una célula se encuentra enrollado a proteínas (histonas) formando la cromatina. ¿En qué
etapa del experimento separas el ADN de las proteínas?

b. El ADN obtenido no se encuentra puro, ¿qué otras sustancias podrían haberse extraído mezcladas con
el ácido desoxirribonucleico?

c. ¿Cómo se relaciona el proyecto Genoma Humano con el experimento realizado? ¿Por qué es tan
importante?

d. Puedes dar ejemplos de algunos tipos de genes humanos que pudieran alterarse artificialmente, ¿crees
que los científicos deberían proseguir con este tipo de investigaciones? Si o no, y por qué.

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1.8 CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES

1.9 REFERENCIAS DE LA GUÍA:

- Martínez, Laura 2015. Extracción de ADN. Experimentos con reactivos de la vida cotidiana. UAB.
- Malajovich, Maria. Guías de actividades, Biotecnología: enseñanza y divulgación.
http://www.bteduc.bio.br

1.10 REFERENCIAS DEL ESTUDIANTE:

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