Informe de práctica de
Laboratorio 2
BIOLOGIA CELULAR Y
MOLECULAR II
Facultad de Odontología
BACTERIAS Y COLORACION DE GRAM
RAFAEL EDUARDO GÓMEZ CASTAÑO
 RESUMEN
Los agentes exógenos causantes de
enfermedades en lo seres humanos
corresponde a 5 grupos: bacterias, virus,
hongos, protozoos, helmintos. Las bacterias
pertenecen al reino procariota, estas se
pueden clasificar según su morfología y
tamaño en tres grandes grupos: Cocos (tienen
forma esféricas) , bacilos ( forma de batones)
y las espiroquetas (forma espiral). Su
membrana es rígida y esta le permite
agruparse , por ejemplo, algunos cocos forma
parejas (diplococos), también pueden formar
cadenas (estreptococos), en la siguiente
imagen se puede apreciar con mejor claridad
sus agrupaciones:
A diferencia de las células, las bacterias
carecen de pared celular, estas poseen una
membrana. Según su tipo de membrana se
pueden clasificar en grampositvas y
gramnegativos.
PALABRAS CLAVE: Bacterias, membrana,
coloración, microorganismo.
 INTRODUCCION
La clasificación de las bacterias según su
membrana facilita la identificación de su
estructura y mecanismos de acción ya
que cada una posee unas características
propias.
Las bacterias grampositivas se
denominan de esta manera debido a su
resultado positivo a la prueba de la
coloración de Gram. Estas bacterias
poseen una capa lipídicas similar a las de
las células humanas en adición a esto,
estas bacterias poseen una gran capa de
péptido glicanos (alrededor de 40), este
tipo de bacterias sobreviven es ambientes
secos.
El otro tipo de bacteria son las
grannegativas, se denominan así al no
retener la coloración de Gram, por lo tanto
su resultado es negativo. Este tipo de
bacterias cuentan con dos capas lipídicas
dobles mas una membrana.
Estructura de la membrana y capas lipídicas de
las bacterias Grampositivas y negativas.
En este laboratorio se buscaba clasificar e
identificar el tipo de bacterias presentes
en la placa bucal interproximal o
cervicular. Esta placa es un biofilm
generado a partir de residuos de alientos,
proteínas y bacterias tanto aerobias como
anaerobias.
 MATERIALES Y METODOS.
A continuación se exponen cada uno de
los materiales y los procedimientos que
se realizaron en el laboratorio.
Microscopio

Portaobjetos

Coloración de Gram

Palillos estériles

Mechero

Coloración Gram ( cristal violeta,

lugol, alcohol acetona, safranina)
 Agua.
 Objetos de bioseguridad como
guantes, delantal anti-fluidos, gorro
quirúrgico y tapabocas.
Inicialmente se prepararon y posicionaron
los materiales necesario para la recolección
de la muestra de placa dental, estos fueron:
los palillos estériles, el portaobjetos el
mechero para generar un campo estéril.
Seguido a esto se preparo la persona que nos
promovería la placa, se le extrajo
delicadamente y se realizo un frotis en el
portaobjetos que ya estaba previamente
marcado con la identificación del donador de
la placa. Después de realizar el frotis, se fijo
la muestra a el portaobjetos por medio del
calor emitido del mechero.
El paso previo a la identificación de la placa
es la tinción de la placa bacteriana por medio
de la Tinción de Gram. Esta permite identificar
la morfología y agrupación de las bacterias y
principalmente las características
estructurales de su pared, entre los dos
grandes grupos de bacterias, grampositivas y
gramnegativas. Consta de varios pasos:
 Se añade un colorante, (cristal violeta)
que de deja en contacto con la
muestra y se juaga al minuto, este tiñe
todas las bacterias del medio.
 Tras ello se fijan la coloración con el
lugol por un minuto y después se
juaga con agua.
 A continuación, se usa un decolorante
por 30 segundos, alcohol acetona, que
hará perder el cristal violeta a las
gramnegativas. En ese instante, las
grampositivas siguen de color violeta,
pero las gramne- gativas no se ven al
no estar coloreadas.
 Para visualizar éstas se usa el
colorante de contraste, generalmente
safranina o fucsina por 20 segundos,
que las tiñe de rojo. De esta forma,
finalmente, las bacterias
grampositivas quedarán teñidas de
violeta/azul y las gramnegativas de
 rojo. Sin duda es la tinción más
utilizada en microbiología, y, en
muchos casos, se usa como el primer
paso del diagnóstico directo. Cabe
destacar que esta método mantiene la
estructura original del la bacteria
intacta pero la mata.
Finalmente se dejó la muestra en reposo por
7 días. Antes de realizar la evaluación y
análisis microscópico se agregó una gota de
aceite (imasion) el cual aclara y devuelve la
forma original de las bacterias para así poder
realizar una evaluación mas acertada.
En la muestra tomada se encontró gran
cantidad de bacilos (Lactobacilus casei: Es
acidófilo, continua las caries ya formadas, con
proteolíticos: desnaturalizan las proteínas de
la dentina.) y menor grados cocos
(Estreptococos: mutans, sobrinus, sanguis,
salivalis. Son los que inician las caries.)
Bacterias encontradas en mayor grado de la muestra
tomada ( bacilos)
 CONCLUSIONES
La observación de las bacterias con el
microscopio se realiza en fresco o recurriendo
al empleo de tinciones que facilitan su
visualización y la de sus estructuras y
permiten distinguir entre los distintos tipos
bacterianos. Todo esto gracias a el
microscopio, un buen y correcto uso de este
permite identificar las bacterias y así
seleccionar los medicamentos o antibióticos
que sean necesarios para tratarlas.
 BIBLIOGRAFIA
 Micribiologia Oral, J. Liebana Ureña;
paginas 40-47
 Histologia, Ross, Kaye y Pawlina;
paginas 10-18
 Tortora, GJ; Funke, BR; Case, CL.
Introducción a la microbiología.
Zaragoza: Acribia, 1993: 55- 72.
 http://biologiamedica.blogspot.com.co
/2010/09/bacterias-gram-positivas-y-
gram.html
 https://curiosoando.com/que-es-una-
bacteria-gram-negativa