Metodosde Laboratorio

ACIDEZ ACTIVA (pH)
1. RESUMEN DEL METODO.
La actividad del ion H+ en el suelo se estima mediante la medición del pH en el sobrenadante de una
suspensión de suelo en agua, en cloruro de calcio 0,01 M o en cloruro de potasio 1 M.
2. MATERIALES.
2.1. Vasos de plástico de 100 ml.

2.2. Varillas de vidrio.
2.3. Piseta.
3. EQUIPOS.
3.1. Potenciómetro (pH metro).

3.2. Balanza.
4. REACTIVOS.
4.1. Cloruro de potasio KCl 1M.

4.2. Cloruro de calcio CaCl2.2H2O 0,02M.
4.3. Soluciones buffer de pH 4; 7 y 10.
5. PREPARACION DE REACTIVOS.
5.1. Cloruro de Potasio (KCl) 1M. 2 Litros.

5.1.1. Pesar 149,12 g de KCl, disolver con agua destilada en un vaso de precipitado y enrasar a 2
litros en un matraz aforado.
5.1.2. Transferir a un recipiente limpio y seco.
5.1.3. Etiquetar (Reactivo, concentración, fecha, nombre del preparador) y guardar.
5.2. Cloruro de calcio CaCl2.2H2O 0,02 M. 2 Litros.
5.2.1. Pesar 5,88 g. de CaCl2.2H2O, disolver con agua destilada y enrasar a 2 litros en un matraz
aforado.
5.2.3. Etiquetar (Reactivo, concentración, fecha, nombre del preparador) y guardar.
6. PROCEDIMIENTO DE ANALISIS.
6.1. Pesar 20 g de TFSA y colocar en vasos de 100 ml (En caso de requerirse también pH en KCl y
CaCl2, pesar dos tandas de cada muestra).
6.2. Agregar a la primera tanda de vasos con la ayuda de un dispensador, 20 ml de agua destilada y dejar
reposar los mismos por una hora, agitando ocasionalmente con una varilla de vidrio (una a dos
veces).
6.3. Si se pesó una segunda tanda, agregar a cada vasito con la ayuda de un dispensador, 20 ml de KCl
1M y dejar reposar el mismo durante 1 hora agitando ocasionalmente con una varilla de vidrio (En
caso de ser solicitado pH en KCl).
6.4. Encender el potenciómetro con una hora de anticipación a las lecturas, posteriormente calibrar el
mismo según normas del equipo utilizado, usando las soluciones buffer de pH 4; 7 y 10.
6.5. Agitar con una varilla de vidrio cada muestra por 30 segundos y después de 1 minuto leer el pH en
agua (1:1) colocando la punta del electrodo justo por encima del sedimento del suelo para mantener
la uniformidad.
6.6. Levantar el electrodo y con la ayuda de una piseta lavar el mismo recogiendo el líquido en un vaso
para el efecto. Dejar la varilla de vidrio dentro del vaso conteniendo la muestra del suelo.
6.7. En las muestras donde fue determinado pH en agua, agregar 20 ml de CaCl 2.2H2O 0,02M y agitar
nuevamente cada uno por 30 segundos con la misma varilla de vidrio.
6.8. Luego de esperar 1 minuto colocar el electrodo del pH metro justo por encima del sedimento del
suelo y leer el pH en CaCl2 0,01M.
6.9. Traer la tanda de muestras para pH en KCL 1M.
6.10. Agitar cada muestra por 30 segundos con una varilla de vidrio.
6.11. Esperar 1 minuto y leer el pH en KCl 1M colocando la punta del electrodo justo por encima del
sedimento.
7. CALCULOS.
7.1. Calcular el delta pH aplicando la siguiente fórmula
Delta pH = pHKCl 1M - pHHOH
8. NOTA.
Es importante seguir las instrucciones del fabricante para un buen mantenimiento del potenciómetro,
especialmente del electrodo. Asimismo, las soluciones buffer deben ser renovadas periódicamente.
9. LITERATURA CONSULTADA.
Soil Survey Staff. (1996). Soil Survey Laboratory Methods Manual. USDA-NRCS. Soil Survey
Investigations Report N° 42. National Soil Survey Center, Lincoln, NE. EUA.
ACIDEZ INTERCAMBIABLE (Al3+ + H+)
Los iones de aluminio e hidrógeno son desplazados de los sitios de intercambio de los coloides del suelo
con una solución de Cloruro de Potasio (KCl) 1 M. La concentración de estos iones es luego
determinada mediante titulación con Hidróxido de Sodio (NaOH) 0,05 M.
4. MATERIALES.
2.1. Tubos para centrífuga de 50 ml.

2.2. Micropipetas de 10 ml.
2.3. Dispensadores.
2.4. Matraz de 2 litros.
2.5. Vasos de precipitado.
2.7. Bureta automática.
2.8. Gotero.
2.9. Frascos erlenmeyer de 125 ml.
5. EQUIPOS.
2.1. Balanzas de precisión de 2 y 4 decimales.

2.2. Agitador.
2.3. Centrífuga
6. REACTIVOS.
2.1. Cloruro de Potasio (KCl).

2.2. Hidróxido de Sodio (NaOH).
2.3. Fluoruro de Sodio (NaF).
2.4. Acido Sulfúrico (H2SO4).
2.5. Fenolftaleína.
2.1. Cloruro de Potasio (KCl) 1M. 2 Litros.

7.1.1. En un vaso de precipitado de 2000 ml agregar aproximadamente 1500 ml de agua destilada.
7.1.2. Pesar 149,102 g. del KCl y transferir al vaso de precipitado.
7.1.3. Agitar con una varilla de vidrio.
7.1.4. Transferir a un matraz aforado de dos litros y enrasar con agua destilada.
7.1.6. Etiquetar (reactivo, concentración, fecha, nombre del preparador).
2.2. Hidróxido de Sodio (NaOH) 0,05 M. 2 Litros.
7.2.1. En un matraz aforado de 2000 ml agregar aproximadamente 1500 ml de agua destilada
7.2.2. Pesar 4 g. de NaOH y transferir al matraz.
7.2.3. Agitar con movimientos circulares.
7.2.4. Enrasar con agua destilada.
7.2.6. Estandarizar.
2.3. Fenolftaleína al 1%. 100 ml.
7.3.1. En un matraz aforado de 100 ml agregar aproximadamente 50 ml de etanol
7.3.2. Pesar 1 g. de Fenolftaleína y transferir al matraz.
7.3.4. Enrasar con etanol.
2.4. Fluoruro de Sodio (NaF) 1M. 2 Litros.
7.4.2. Pesar 83,98 g. de NaF y transferir al vaso de precipitado.
7.4.3. Agitar con una varilla de vidrio.
2.5. Acido Sulfúrico (H2SO4) 0,05 N. 2 Litros.
7.5.1. En un matraz aforado de 2000 ml agregar aproximadamente 1500 ml de agua destilada.
7.5.2. Agregar 2,776 ml de H2SO4 concentrado (d=1,84; P=96%; M= 18,10), con la ayuda de una
pipeta automática. (Observación: Si el ácido sulfúrico no tuviera las especificaciones citadas,
calcular su concentración inicial para luego determinar la cantidad que se debe agregar. Ver
preparación de reactivos de uso general).
7.5.6. Estandarizar.
2.1. Pesar 5 gramos de TFSA y transferirla a un tubo para centrífuga de 50 ml.

2.2. Preparar también dos blancos que recibirán solamente el reactivo.
2.3. Agregar a cada tubo 50 ml de KCl 1M con ayuda de un dispensador.
2.4. Agitar los tubos que contienen las muestras por 30 minutos.
2.5. Centrifugar los tubos por 2 minutos a 2.000 r.p.m.
2.6. Tomar una alicuota de 20 ml del líquido sobrenadante y colocar en un erlenmeyer y agregar 2 a 3
gotas de fenolftaleina.
2.7. Preparar la bureta automática y titular la solución con NaOH 0,05N estandarizado hasta que la
solución vire a un color rosado que persista por lo menos 30 segundos.
2.8. Si es necesario conocer la concentración de Al+3 por separado, agregar a cada frasco erlenmeyer 10
ml de Fluoruro de Sodio 1M incluyendo los dos blancos.
2.9. Titular la solución con H2SO4 0,05N hasta que el color desaparezca completamente y persista por lo
menos durante 30 segundos.
2.10.Adicionar una gota de indicador, si el color aparece de nuevo adicionar más ácido hasta que el color
rosado desaparezca y no retorne en el lapso de dos minutos.
9. CALCULOS.
2.1. Acidez intercambiable (cmolc/kg) = [(A-B)/C] x M x 100 x (50/20)
Donde:
A = Volumen de NaOH gastado en la muestra (ml)

B = Volumen de NaOH gastado en el blanco (ml)
C = Peso de la muestra (g)
M = Molaridad del NaOH
2.2. Aluminio (cmolc/kg) = [(A-B)/C] x M x 100
Donde:
A = Volumen de H2SO4 gastado en la muestra (ml)

B = Volumen de H2SO4 gastado en el blanco (ml)
C = Peso de la muestra (g)
M = Molaridad del H2SO4
10. NOTA.
En algunos suelos el color rosado conseguido en la titulación se desvanece al quedar la solución en

reposo. Esto se debe a que el precipitado de Al(OH) 3 continúa reaccionando con ácido libre. Por esta
razón, a manera de estandarizar el procedimiento, se anota el punto final cuando el color rosado
permanece durante treinta segundos.
MATERIA ORGANICA
El Carbono Orgánico del suelo es oxidado al hervir con una solución de dicromato de potasio y ácido
sulfúrico. El exceso de dicromato se determina mediante titulación con una solución estándar de sulfato
ferroso y la cantidad de carbono oxidado se calcula de la cantidad de dicromato reducido. La materia
orgánica del suelo se estima posteriormente multiplicando el porcentaje de carbono orgánico por el factor
1,724.
13. MATERIALES.
2.1. Frascos erlenmeyer de 250 ml.

2.2. Micropipeta de 10 ml.
2.3. Dispensador para ácido sulfúrico de 20 ml.
2.4. Dispensador para agua destilada de 100 ml.
2.5. Gotero.
2.7. Vasos de precipitado de 2000 ml y 100 ml.
14. EQUIPOS.
2.1. Campana extractora de gases.

15. REACTIVOS.
2.1. Acido sulfúrico concentrado (H2SO4).

2.2. Dicromato de potasio (K2Cr2O7).
2.3. Sulfato ferroso heptahidratado (FeSO4.7 H2O).
2.4. 1,10-fenantrolina monohidratada.
2.1. Dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1N o 0,1665M. 2 Litros.

16.1.1. Secar 100 gramos de K2Cr2O7 en estufa a 105ºC por el tiempo de dos horas y enfriar en
desecador.
16.1.2. En un vaso de precipitado de 2000 ml agregar aproximadamente 1500 ml de agua destilada
16.1.3. Pesar 98,08 g. del K2Cr2O7 y transferir al vaso de precipitado.
16.1.4. Agitar con una varilla de vidrio hasta completa disolución de la sal.
2.2. Sulfato ferroso (FeSO4) 0,5 N. 2 Litros.

16.2.2. Pesar 280 gramos de sulfato ferroso heptahidratado (FeSO 4.7H2O) y transferir al vaso de
precipitado.
16.2.3. Agitar con varilla de vidrio hasta completa disolución de la sal.
16.2.4. Agregar 30 ml de ácido sulfúrico concentrado y agitar con varilla de vidrio.
16.2.5. Dejar que la solución se enfríe.
16.2.6. Transferir a un matraz aforado de 2000 ml y enrasar con agua destilada.
2.3. Complejo Ortofenantrolina – ferroso 0,025 M. 100 ml.

16.3.2. Pesar 1,485 g. de 1,10-fenantrolina monohidratada y transferir al vaso de precipitado.
16.3.4. Pesar 0,695 g. de FeSO4.7H2O y transferir al vaso de precipitado.
16.3.6. Transferir a un matraz aforado de 100 ml y enrasar con agua destilada.
2.1. Pesar 1 gramo de TFSA y transferir al frasco erlenmeyer.

2.2. Preparar también dos frascos erlenmeyer para utilizar como “blanco”.
2.3. Colocar los frascos erlenmeyer sobre una superficie que resiste al calor.
2.4. Con una micropipeta, agregar 10 ml de K2Cr2O7 1N.
2.5. Con un dispensador, agregar rápidamente 20 ml de ácido sulfúrico concentrado.
2.6. Agitar las muestras con movimiento circular.
2.7. Dejar enfriar durante 30 minutos.
2.8. Agregar 100 ml de agua destilada con un dispensador.
2.9. Agregar 3 o 4 gotas de ortofenantrolina.
2.10.Titular la suspensión del suelo y de los blancos con FeSO 4 0,5 N. Cuando el punto final se está
acercando la solución toma una coloración verdosa y luego cambia a verde oscuro. En este momento
el sulfato ferroso se debe agregar gota a gota hasta que cambie bruscamente de azul a rojo (o
marrón rojizo).
18. CALCULOS.
2.1. % Carbono Orgánico = ((A-B)/C) x N x (0,30 / 0,77)
Donde:
A = Volumen de FeSO4 gastado en el blanco

B = Volumen de FeSO4 gastado en la muestra
C = Peso de la muestra
N = Normalidad del FeSO4
0,77 = Factor de recuperación propuesto por Walkley (1935)
7.2. % Materia Orgánica = % Carbono Orgánico x 1,724
19. NOTAS.
2.1. Si la mezcla dicromato–ácido se torna de color azul verdozo, es señal de que todo el dicromato se
redujo. En este caso se debe agregar mas dicromato y ácido para mantener el volumen en la
proporción 1:2, o disminuir el tamaño de la muestra y repetir el análisis. La siguiente tabla ilustra la
relación que debe ser tenida en cuenta entre el contenido de carbono, el peso de la muestra y las
cantidades de dicromato y ácido a ser agregadas.
C.O. Peso Muestra K2Cr2O7 1N H2SO4

% g. ml ml
0 –3 1 10 20
3–6 0,5 10 20
6 – 12 0,5 20 40
12 – 24 0,25 20 40
24 – 50 0,1 30 60
2.2. La solución de Sulfato Ferroso debe ser conservada en recipiente oscuro y estandarizada diariamente
tilulándola contra 10 ml de Dicromato de Potasio 1 N.
2.3. Se debe tomar especial cuidado en la manipulación del ácido sulfúrico. Utilizar gafas y guantes.
20. LITERATURA CONSULTADA
Allison, L.E. (1965). Organic Carbon. In Methods of soil analysis. Monog. 9. V.2, pp. 1367-1378.
Amer. Soc. Agron., Madison, Wis. EUA.
BASES INTERCAMBIABLES
RESUMEN DEL METODO.
Los cationes de calcio, magnesio, potasio y sodio son desplazados de los sitios de intercambio de los
coloides del suelo con una solución de Acetato de Amonio (C2H7NO2) 1 M. La concentración de estos
iones es luego determinada mediante lectura en el Espectrofotómetro de Absorción Atómica.
MATERIALES.
2.1. Tubos para centrífuga de 50 ml.

2.2. Micropipetas de 1 ml.
2.3. Dispensadores.
2.7. Tubos de ensayo de 20 ml.
3. EQUIPOS.

3.2. Agitador.
3.3. Centrífuga.
3.4. Espectrofotómetro de Absorción Atómica (EAA).
4. REACTIVOS.
4.1. Acetato de Amonio (C2H7NO2) 1M pH 7.

4.2. Cloruro de estroncio hexahidratado (SrCl2.6H2O) 1,5%.
4.3. Estándar de 1000 mg L-1 de calcio, magnesio, potasio y sodio.
5. PREPARACIÓN DE REACTIVOS.
5.1. Acetato de Amonio (C2H7NO2) 1M pH 7. 8 Litros.

5.1.1. Colocar el contenido de un envase de acetato de amonio p.a. de 500 g en un vaso de
precipitado de 2000 ml y disolver con agua destilada.
5.1.2. Enrasar la solución a 2 litros en un matraz y transferirla a un recipiente de 10 litros.
5.1.3. Pesar 116,64 g de acetato de amonio p.a. y disolver con agua destilada en vaso de
precipitado.
5.1.4. Enrasar la solución a 2 litros en un matraz y verterla en el recipiente de 10 litros.
5.1.5. Agregar otros 4 litros de agua destilada en el recipiente.
5.1.6. Ajustar la solución a pH 7. Sí el pH es menor a 7, agregar gotas de amoniaco. Si el pH es
mayor a 7 agregar gotas de ácido acético glacial.
5.1.7. Etiquetar (reactivo, concentración, fecha, nombre del preparador) y guardar.
5.2. Cloruro de estroncio (SrCl2 6H2O) 1,5%. 2 litros.
5.2.1. Pesar 30,43 g de SrCl2.6H2O.
5.2.2. Disolver con agua destilada en un vaso de precipitado.
5.2.3. Enrasar a 2 litros en un matraz aforado.
5.3. Solución de calcio, magnesio, potasio y sodio de 50 mg L-1 a partir de 1000 mg L-1.
5.3.1. Retirar 2,5 ml de solución de 1000 mg L-1 con ayuda de una micropipeta.
5.3.2. Colocar en un matraz de 50 ml.
5.4. Estándar de calcio 0; 0,5; 1,0; 2,5; 5,0 y 7,5 mg L -1.
5.4.1. Retirar respectivamente 0; 0,5; 1,0; 2,5; 5,0 y 7,5 ml de la solución de calcio de 50 mg L -1.
5.4.2. Colocar por separado en matraces de 50 ml y enrasar con cloruro de estroncio al 1,5%.
5.4.3. Trasferir a envases de plástico, rotulados y guardar en heladera.
5.5. Estándar de magnesio 0; 0,2; 0,4; 0,8; 1,2 y 1,6 mg L -1.
5.5.1. Retirar respectivamente 0; 0,2; 0,4; 0,8; 1,2 y 1,6 ml de la solución de magnesio de 50 mg L -1
5.5.2. Colocar por separado en matraces de 50 ml y enrasar con cloruro de estroncio al 1,5%.
5.5.3. Transferir a envases de plástico rotulados y guardar en heladera.
5.6. Estándar de potasio 0; 0,25; 0,50; 1,0; 1,5 y 2,0 mg L -1.
5.6.1. Retirar respectivamente 0; 0,25; 0,50; 1,0; 1,5 y 2,0 ml de la solución de potasio de 50 mg L-1
5.6.2. Colocar por separado en matraces de 50 ml y enrasar con agua destilada.
5.7. Estándar de sodio 0; 0,25; 0,50; 1,0; 1,5 y 2,0 mg L -1.
5.7.1. Retirar respectivamente 0; 0,25; 0,50; 1,0; 1,5 y 2,0 ml de la solución de sodio de 50 mg L -1,
5.7.2. Colocar por separado en matraces de 50 ml y enrasar con agua destilada.
6.1. Extracción.
6.1.1. Pesar 5 g de TFSA para muestras de la Región Oriental y 2,5 g para muestras de la Región
Occidental y colocar en tubos de centrífuga de 50 ml.
6.1.2. Agregar 50 ml de acetato de amonio, tapar y agitar por 45 minutos.
6.1.3. Centrifugar a 2000 r.p.m. durante 2 minutos.
6.2. Determinación de Calcio y Magnesio.
6.2.1. Retirar 0,5 ml de los tubos de centrífuga con la ayuda de una micropipeta y colocar en
tubos de ensayo de 20 ml.
6.2.2. Agregar 9,5 ml de solución de Cloruro de estroncio al 1,5%.
6.2.3. Para la determinación de calcio, calibrar el EAA siguiendo los diferentes pasos enumerados
en el manual de operación del mismo, utilizando una longitud de onda de 422,7 nm.
6.2.4. Proceder a la lectura de los estándares de calcio y posteriormente las soluciones problemas.
6.2.5. Para la determinación de magnesio, calibrar el EAA con una longitud de onda de 285,2 nm.
6.2.6. Proceder a la lectura de los estándares de magnesio y posteriormente las soluciones
problemas.
6.2.7. En caso de que alguna muestra exceda el valor de luz absorbida por el estándar con mayor
concentración de calcio o magnesio, rediluir 1 ml de la solución del tubo de ensayo y
agregarle nuevamente 4 ml de SrCl2 .6 H2O al 1,5%.
6.2.8. Realizar los cálculos de la concentración de Calcio y Magnesio en mg/kg (ppm) y en
cmolc/kg.
6.3. Determinación de potasio y sodio.
6.3.1. Retirar 0,5 ml de los tubos de centrífuga con la ayuda de una pipeta automática y colocar
en tubos de ensayo de 20 ml.
6.3.2. Agregar 9,5 ml de agua destilada.
6.3.3. Para la determinación de potasio, calibrar el EAA siguiendo los diferentes pasos
enumerados en el manual de operación del mismo utilizando una longitud de onda de 766,5
nm.
6.3.4. Proceder a la lectura de los estándares de potasio y posteriormente las soluciones
problemas.
6.3.5. Para la determinación de sodio, calibrar el EAA utilizando una longitud de onda de 582
nm.
6.3.6. Proceder a la lectura de los estándares de sodio y posteriormente las soluciones problemas.
6.3.7. En caso de que alguna muestra exceda el valor de luz absorbida por el estándar con mayor
concentración de potasio o sodio, rediluir 1 ml de la solución del tubo de ensayo y
agregarle nuevamente 9 ml de agua destilada.
6.3.8. Realizar los cálculos de la concentración de potasio y sodio en mg/kg (ppm) y en cmol c/kg.
7. CALCULOS.
7.1. Factor de dilución.
7.1.1. Para Región Oriental.

50 10
FD    200 (hasta 1500 mg L-1 de Ca++ , 320 mg L-1 de Mg++, 400 mg L-1 de
5 0,5
K+ y Na+)
Si existiere redilución:
50 10 5
FD     1000 (hasta 7500 mg L-1 de Ca++ , 1600 mg L-1 de Mg++, 2000 mg L-1
5 0,5 1
de K+ y Na+)
7.1.2. Para la Región Occidental
50 10
FD    400 (hasta 3000 mg L-1 de Ca++ , 640 mg L-1 de Mg++, 800 mg L-1
2,5 0,5
de K+ y Na+)
Si existiere redilución
50 10 5
FD     2000 (hasta 15000 mg L-1 de Ca++ , 3200 mg L-1 de Mg++, 4000 mg L-1
2,5 0,5 1
de K+ y Na+)
7.2. Línea de calibración y análisis de regresión.
La lectura de los diferentes estándares se utiliza para realizar un análisis de regresión lineal
simple, donde los valores de “y” corresponden a la concentración de los estándares en ppm y los valores
de “x” a la lectura del EAA. De esta forma se obtiene una ecuación del tipo y = a + b x. Posteriormente
se leen las soluciones problemas y utilizando la ecuación de calibración se determinan las
correspondientes concentraciones de Ca, Mg, K y Na intercambiables en ppm. Se debe tener en cuenta la
dilución inicial o eventuales rediluciones.
Si no es posible realizar el análisis de regresión, se puede construir una línea de calibración sobre papel
milimetrado.
8. NOTAS
8.1. Es conveniente nebulizar las soluciones diluidas en el día de su preparación.

8.2. Se debe tomar precauciones para evitar contaminación, especialmente del sodio, a través de agua
corriente y el sudor.
CAPACIDAD DE INTERCAMBIO CATIÓNICO (CIC)
RESUMEN DEL METODO.
Se trata de medir la cantidad total de cargas negativas por unidad de peso del suelo. En primer lugar se
saturan los sitios de intercambio con una solución de acetato de amonio (procedimiento para extracción
de bases intercambiables). Posteriormente se lava el exceso de amonio con alcohol y se desplaza al
amonio (catión de referencia) con una solución de cloruro de sodio. Por último, se determina la cantidad
de amonio desplazado del suelo.
MATERIALES.
2.1. Pisetas para alcohol y agua destilada.

2.2. Embudo de vástago largo.
2.3. Papel de filtro cuantitativo (Whatman No 42 o N°5).
2.4. Matraz de 50 ml.
2.5. Pipeta de 3 y 20 ml.
2.6. Erlenmeyer de 125 ml.
EQUIPOS.
3.1. Destilador a vapor semi-micro-Kjeldahl.

3.2. Calentador.
REACTIVOS.
4.1. Alcohol rectificado.

4.2. Cloruro de sodio (NaCl) al 10%, acidificado
4.3. Acido clorhídrico (HCl) 2 N.
4.4. Hidróxido de sodio (NaOH) 1 N.
4.5. Rojo de metilo.
4.6. Verde de bromocresol.
4.7. Acido Bórico (H3BO3) al 4%.
4.8. Acido sulfúrico (H2SO4) 0,05 N.
PREPARACION DE REACTIVOS.
5.1. Hidróxido de sodio (NaOH) 1 N. 1 Litro.

5.1.1. Pesar 40 g de NaOH, disolver con agua destilada en un vaso de precipitado y enrasar a 1 litro
con agua destilada en un matraz.
5.2. Cloruro de sodio (NaCl) 10% acidificado. 6 Litros.
5.2.1. Pesar 200 g de NaCl., disolver con agua destilada ligeramente tibia y 50 ml de H 2SO4 2M,
enrasar la solución a 2 litros con agua destilada en un matraz aforado y verterla en un
recipiente de 6 litros. (Realizar este mismo procedimiento tres veces).
5.3. Acido clorhídrico (HCl) 2N. 1 Litro.
5.3.1. Agregar a un matraz de 1 L aproximadamente 600 ml de agua destilada.
5.3.2. Adicionar cuidadosamente 165,62 ml de HCl concentrado (d=1,19; P=37%; 12,076 M).
5.3.3. Dejar enfriar y completar el volumen a un litro con agua destilada.
5.3.4. Transferir a un recipiente limpio y seco
Observación: si el ácido clorhídrico no tuviera las especificaciones citadas calcular la
molaridad según la siguiente fórmula:
densidad  % pureza  10
Molaridad 
pesomolecular
... y la cantidad a utilizar según la siguiente fórmula:
(C1) x (V1) = (C2) x (V2)
Dónde: C1, es molaridad del ácido que se desea preparar;

V1, es volumen del ácido que se desea preparar;
C2, es molaridad del ácido concentrado a utilizar en la preparación;
V2, es volumen del ácido concentrado a utilizar en la preparación.
5.4. Indicador mixto rojo de metilo - verde de bromocresol. 100 ml.

5.4.1. Pesar 0,2 g de rojo de metilo y 0,1 g de verde de bromocresol, disolver con etanol 95%,
enrasar con el mismo utilizando un matraz aforado.
5.5. Acido Bórico (H3BO3) 4%. 2 Litros.
5.4.1. Pesar 80 g de H3BO3, disolver con agua destilada en un vaso de precipitado y enrasar a 2 L
con agua destilada en un matraz aforado.
5.6. Acido sulfúrico (H2SO4 ) 0,05 N. 2 Litros.
5.6.1. Adicionar aproximadamente 1 L de agua destilada en un matraz de 2 L.
5.6.2. Adicionar 2,776ml de H2SO4 concentrado (d=1,84; P=96%; M=18,10), con ayuda de una
pipeta automática. (Observación: si el ácido sulfúrico no tuviera las especificaciones citadas,
calcular según fórmulas citadas para preparación de HCl , punto 5.3.5)
5.6.3. Completar el volumen a 2 L con agua destilada.
5.6.4. Estandarizar el H2SO4 0,05N con NaOH 0,05N estandarizado.
PROCEDIMIENTO DE ANALISIS.
6.1. Extracción de bases.

6.1.1. Pesar 5 g de tierra fina seca al aire (TFSA) para muestras de la región oriental y 2,5 g para
muestras de la región occidental y colocar en tubos de centrífuga de 50 ml.
6.1.2. Adicionar 50 ml de acetato de amonio, tapar y agitar durante 45 minutos.
6.1.3. Centrifugar a 2000 rpm durante 2 minutos y utilizar el sobrenadante para determinar calcio,
magnesio, potasio y sodio (ver metodología para determinación de bases del suelo).
6.2. Lavado.
6.2.1. Eliminar el sobrenadante (utilizado para determinación de bases del suelo), teniendo
cuidado de no perder suelo.
6.2.2. Preparar embudos de vástago largo con papel de filtro cuantitativo (Whatman N o42 o N°5)
y colocar un vaso de precipitado de 150 ml debajo del vástago, para recibir el liquido
drenado.
6.2.3. Pasar el suelo del tubo de centrifuga al embudo preparado, utilizando piseta con alcohol.
Cuidar que no se pierda suelo en esta operación.
6.2.4. Lavar el suelo remanente sobre el papel de filtro con aproximadamente 10 ml de alcohol en
cuatro ocasiones, utilizando piseta. Dejar que el alcohol drene completamente a través del suelo antes de
agregar el siguiente incremento. (El líquido drenado, que lleva el exceso de amonio se desecha).
6.3. Extracción de amonio
6.3.1. Una vez que se elimine todo el alcohol y el papel de filtro se encuentre seco, colocar debajo
del vástago del embudo matraces de 50 ml para recibir el filtrado.
Agregar al suelo remanente sobre el papel de filtro aproximadamente 10 ml de NaCl 10% en cinco
ocasiones, utilizando piseta. Dejar que el NaCl drene completamente a través del suelo antes
de agregar el siguiente incremento.
Enrasar a 50 ml con NaCl 10% y tapar.
Destilación.
Agregar al destilador semi-micro-Kjeldahl 20 ml del filtrado obtenido con el NaCl 10%, utilizando
una pipeta volumétrica.
Agregar 1 ml de NaOH 1N y lavar las paredes con agua destilada para arrastrar todo el filtrado y el
hidróxido de sodio.
Destilar aproximadamente 65 ml sobre 10 ml de ácido bórico al 4% y 5 a 6 gotas de indicador mixto
rojo de metilo - verde de bromocresol, colocados en frascos erlenmeyer.
Titulación.
Titular el producto de la destilación con H2SO4 0,05N (cambio de color verde a rojo).
CÁLCULOS.
7.1. CIC (cmolc/kg) = (A/B) x N x (C/D) x 100.
A = Volumen de H2SO4 0,05N gastado (ml).

B = Peso de muestra (g).
N = Normalidad del H2SO4 estandarizado.
C = Volumen del lixiviado con NaCl 10% (ml).
D = Volumen destilado (ml).
Ejemplo: CIC (Cmolc/Kg) = (A/5) x N x (50/20) x 100 (Región Oriental)

CIC (Cmolc/Kg) = (A/2,5) x N x (50/20) x 100 (Región Occidental)
8. NOTAS
Se debe prestar especial cuidado durante el lavado del suelo con alcohol (pasos 6.2.3. y 6.2.4.) porque
esto permite eliminar el exceso de NH4+5
FOSFORO EXTRACTABLE
El fósforo es extraído del suelo con una solución que contiene ácido sulfúrico y ácido clorhídrico
(Mehlich-1). La concentración del complejo azul producido por la reducción, con ácido ascórbico, del
fosfomolibdato formado cuando el molibdato de amonio reacciona con fosfato se mide en el
Espectrofotómetro colorimétrico a 740 nm.
26. MATERIALES.
2.1. Frascos de plástico de 50 ml.

2.2. Micropipetas de 2 y 10 ml.
2.3. Dispensadores.
2.7. Tubos de ensayo de 20 ml.
27. EQUIPOS.

2.2. Espectrofotómetro colorimétrico.
2.3. Agitador.
28. REACTIVOS.
2.1. Acido sulfúrico concentrado (H2SO4).

2.2. Acido clorhídrico concentrado (HCl).
2.3. Molibdato de Amonio [(NH4)6Mo7O24.H2O].
2.4. Tartrato antimoniato de potasio [K(SbO)C4H4O6.1/2 H2O].
2.5. Acido Ascórbico.
2.6. Fosfato biácido de potasio (KH2PO4).
2.1. Reactivo “A”. 200 ml.

29.1.1. Pesar en la balanza de precisión 10 gramos de Molibdato de Amonio [(NH 4)6Mo7O24.H2O] y
transferir a un vaso de precipitados de 200 ml.
29.1.2. Pesar en balanza de precisión 0,2425 gramos de Tartrato antimoniato de potasio
[K(SbO)C4H4O6.1/2 H2O] y transferir al mismo vaso de precipitados.
29.1.3. Agregar 40 ml de agua destilada y agitar con varilla de vidrio.
29.1.4. Con mucho cuidado y en incrementos pequeños, agregar 140 ml de H 2SO4, agitar con varilla
de vidrio hasta que las sales se disuelvan y dejarlo enfriar.
29.1.5. Transferir el contenido del vaso de precipitados a un matraz aforado de 200 ml y enrasar con
agua destilada.
29.1.8. Guardar en la heladera.
2.2. Reactivo “B”. 100 ml.

29.2.1. Pesar en la balanza de precisión 8,8 gramos de Acido Ascórbico y transferir a un matraz
aforado de 100 ml.
29.2.2. Agregar 50 ml de agua destilada y agitar con movimientos circulares hasta disolver
completamente el reactivo.
29.2.6. Guardar en la heladera.
2.3. Reactivo “C”. 500 ml.
29.3.1. Pipetear 10 ml del Reactivo “A” y llevarlo a un matraz aforado de 500 ml.
29.3.2. Pipetear 5 ml del Reactivo “B” y llevarlo al mismo matraz aforado de 500 ml.
Observación: Este reactivo se debe preparar una hora antes de su uso y una vez preparado solo es útil
por 48 horas.
2.4. Solución Mehlich-1. 1 Litro.

29.4.1. Preparación de una solución de HCl 1N.
29.4.1.1. Transferir 88,32 ml de HCl concentrado (35%) a un matraz aforado de 1000 ml y enrasar
con agua destilada.
29.4.1.2. Estandarizar.
29.4.2. Preparación de una solución de H2SO4 1N.
29.4.2.1. Transferir 27,7 ml de H2SO4 concentrado (96%) a un matraz aforado de 1000 ml y
enrasar con agua destilada.
29.4.2.2. Estandarizar.
29.4.3. Transferir 25 ml de la solución de H2SO4 1N y 50 ml de la solución HCl 1 N a un matraz
aforado de 1000 ml y enrasar con agua destilada.
2.5. Soluciones estándar.

29.5.1. Solución estándar de 100 ppm.
29.5.1.1. Pesar en la balanza de precisión 0,4390 gramos de KH 2PO4 y llevarlo a un matraz aforado
de 1000 ml.
29.5.1.2. Agregar aproximadamente 500 ml de agua destilada.
29.5.1.3. Agregar 3 ml de H2SO4 concentrado y agitar con movimientos circulares.
29.5.1.4. Enrasar el matraz con agua.
29.5.1.5. Transferir a un recipiente limpio y seco.
29.5.1.6. Etiquetar (reactivo, concentración, fecha, nombre del preparador).
29.5.1.7. Guardar en la heladera.
29.5.2.1. Corresponde a la solución Mehlich-1.
29.5.3. Solución estándar de 0,125 ppm.
29.5.3.1. Pipetear 0,125 ml de solución estándar de 100 ppm y colocarla en un matraz aforado de
100 ml.
29.5.3.2. Enrasar el matraz con solución Mehlich-1.
29.5.4. Solución estándar de 0,5 ppm.
29.5.4.1. Pipetear 0,5 ml de solución estándar de 100 ppm y colocarla en un matraz aforado de 100
ml.
29.5.5.1. Pipetear 1 ml de solución estándar de 100 ppm y colocarla en un matraz aforado de 100
ml.
ml.
ml.
2.1. Preparar el reactivo “C” conforme se indica en la Sección 5.

2.2. Pesar 5 gramos de TFSA y transferir a un frasco de plástico de 50 ml.
2.3. Preparar también dos frascos de plásticos para utilizar como “blanco”.
2.4. Agregar con dispensador 50 ml de la solución Meilich-1.
2.5. Agitar los frascos durante 15 minutos a 100 oscilaciones por minuto.
2.6. Dejar reposar la suspensión por espacio de una noche.
2.7. Usar pipeta automática y transferir 2 ml del sobrenadante y de los 5 estándares a un tubo de ensayo
de 20 ml y agregarle 8 ml del reactivo C. Agitar la mezcla con un vortex y esperar por lo menos 20
minutos para el desarrollo del color.
2.8. Colocar la longitud de onda del Espectrofotómetro colorimétrico a 740 nm.
2.9. Ajustar la transmitancia a 100% utilizando el blanco que contiene 2 ml de solución Meilich-1 y 8 ml
del reactivo C.
2.10.Leer la transmitancia de los otros cuatro estándares y de las soluciones de suelo.
2.11.Si en algunos casos el valor de transmitancia es mayor al valor de la transmitancia generada por el
estándar más concentrado (5 ppm), rediluir la solución cargando en otro tubo de ensayo 2 ml de la
solución de suelo y 8 ml de agua destilada (dilución 10x por 5 = 50 x).
31. CALCULOS.
La lectura de los diferentes estándares se utiliza para realizar un análisis de regresión lineal simple, donde
los valores de “y” corresponden a la concentración de los estándares en ppm y los valores de “x” a la
lectura del espectrofotómetro. De esta forma se obtiene una ecuación del tipo y = a + b x.
Posteriormente se leen las soluciones problemas y utilizando la ecuación de calibración se determinan las
correspondientes concentraciones de P extraíble en ppm. Se debe tener en cuenta la dilución inicial 1:50 o
eventuales rediluciones.
Si no es posible realizar el análisis de regresión, se puede construir una línea de calibración sobre papel
milimetrado.
32. NOTAS.
2.1. La formación del complejo fosfato y molibdato es influenciada por la concentración de ácido del
medio. Cuando la concentración del ácido es mayor que la adecuada, ocurre la formación de una
coloración amarillenta, y por otro lado cuando la concentración es menor, se forma una coloración
azul, aun en la ausencia de fósforo.
2.2. El Extractor Mehlich-1 es recomendado para suelos ácidos y neutros.

2.3. El lavado de los vidrios utilizados debe ser cuidadoso ya que resto de jabón, detergente o polvo
contienen fosfatos y son contaminantes frecuentes.
EMBRAPA. (1997). Manual de métodos de análisis de suelo / Centro Nacional de Pesquisa de Solos.
2da. Ed. Río de Janeiro. 212 p. Ilust. (EMBRAPA-CNPS. Documentos; 1)
Pavan, M.A. et al (1992). Manual de análise química do solo e controle de qualidade. Londrina, IAPAR
(Circular N° 76). 40 p. Ilust.
DISTRIBUCION DEL TAMAÑO DE LAS PARTICULAS
(METODO DE LA PIPETA)
1. RESUMEN DEL METODO
La materia orgánica del suelo es destruida por oxidación con peróxido de hidrógeno. La fracción arena
se remueve de la suspensión mediante tamizado en húmedo y luego es fraccionada mediante tamizado en
seco. La fracción de arcilla se determinan en la suspensión que permanece luego del tamizado en
húmedo, mediante la extracción de una aliquota de 10 ml durante el proceso de sedimentación
(aplicación de la ley de Stoke) en cilindros volumétricos de 500 ml. La fracción limo se determina por
diferencia entre 100% menos el porcentaje de arena más arcilla.
2. MATERIALES
2.1. Fleakers de 300 ml con tapa de goma

2.2. Dispensadores de 10 y 50 ml
2.3. Vaso de precipitado de 1000 ml
2.4. Embudo
2.5. Cápsula de porcelana de 100 ml
2.6. Probeta de 500 ml
2.7. Pipeta
2.8. Juego de tamices de 1; 0,5; 0,25; 0,1 y 0,047 mm
3. EQUIPOS
3.1. Balanzas electrónicas de 2 y 4 decimales

3.2. Plancha caliente (hot plate)
3.3. Estufa
3.4. Agitador horizontal
3.5. Tamizador mecánico
3.6. Desecador
4. REACTIVOS
4.1. Peróxido de hidrógeno (agua oxigenada) de 30 volúmenes

4.2. Hexametafosfato de sodio 0,067 M
4.3. Etanol
5. PREPARACION DE REACTIVOS
5.1. Hexametafosfato de sodio 0,067 M
5.1.1. Pesar 40,8 g de Hexametafosfato de sodio – (NaPO3)6 – y diluir en 1 litro de agua.
6. PROCEDIMIENTO
6.1. Pesar 10 gramos de TFSA y transferir a un fleaker de 300 ml.

6.2. Agregar 40 ml de agua destilada y 5 ml de agua oxigenada a la muestra.
6.3. Cubrir el fleaker con su tapón de goma y permitir la oxidación inicial de la materia orgánica.
6.4. Llevar el fleaker a una plancha caliente y calentar a 90 °C.
6.5. Agregar incrementos de 5 ml de agua oxigenada a intervalos de 30 minutos hasta que la oxidación se
haya completado o hasta el agregado de 30 ml de agua oxigenada. La oxidación termina cuando la
muestra deja de burbujear.
6.6. Calentar la muestra por un tiempo adicional de 45 minutos para descomponer el exceso de agua
oxigenada. Si la reacción es violenta, agregar pequeños incrementos de etanol o agitar manualmente
- en forma circular - la muestra para disminuir la velocidad de la reacción. Anotar cualquier
característica inusual.
6.7. Agregar 25 ml de Hexametafosfato de sodio 0,067 M a cada muestra.
6.8. Colocar la muestra en un agitador horizontal y agitar a 120 oscilaciones por minuto durante 16 horas.
6.9. Retirar la muestra del agitador y pasar por un tamiz de 0,047 mm (300 mesch). El filtrado (que
contiene limo + arcilla) debe pasar a través de un embudo y ser recibido en un cilindro volumétrico
de 500 ml. Lavar y deslizar las partículas contenidas en el fleaker sobre el tamíz, evitando usar
chorros muy fuertes. Continuar lavando hasta que el volumen de la suspensión en el cilindro sea de
300 a 400 ml., con esto se consigue que todas las partículas menores a 0,02 mm pasen a la probeta.
6.10. Llevar el volumen a 500 ml y tapar.
6.11. Preparar un blanco (agua destilada + dispersante) para medir las fluctuaciones de temperatura (T 1 y
T2) y para descontar el peso del dispersante.
6.12. Dejar reposar el cilindro toda la noche para equilibrar la suspensión
6.13. Lavar la arena que quedó sobre el tamiz de 0,047 ml y devolverla al fleaker para secarla a 105 °C
sobre la plancha caliente.
6.14. Transferir la arena secada en la plancha sobre un juego de tamices arreglados en orden decreciente
de 1; 0,5; 0,25; 0,1 mm y un colector. Agitar la arena durante un minuto en un agitador con
movimiento lateral y vertical para separar las diferentes fracciones.
6.15. Pesar y anotar por separado el peso de cada fracción de arena.
6.16. Determinar gravimétricamente el porcentaje de arcilla, removiendo una alicuota de 10 ml de la
suspensión del cilindro volumétrico con ayuda de una pipeta.
6.17. Poner el cilindro sobre una mesa fija (sin vibración) y agitar en forma manual con movimientos de
arriba abajo durante 1 minuto. Esta operación también debe realizarse con el blanco.
6.18. Registrar el tiempo cuando termina la agitación. Para fracciones menores a 0,002 mm, bajar
lentamente la pipeta cerrada a 5 cm de profundidad en la suspensión, y retirar una aliquota en el
tiempo calculado de acuerdo a T 3 (Tabla 1).
6.19. Colocar la aliquota en una cápsula etiquetada y tarada.
6.20. Enjuagar la pipeta 2 veces con agua destilada, vertiendo el líquido en la cápsula.
6.21. Anotar la temperatura del blanco cuando termina la agitación (T 1) y luego de transcurrir dos horas
(T2).
6.22. Hallar el promedio de T1 y T2 y registrar este valor como T 3. La temperatura T3 se utiliza para
ajustar el tiempo en el que se debe retirar la aliquota de la suspensión a la profundidad indicada en la
Tabla 2.
6.23. El mismo procedimiento de 6.22. se debe seguir para retirar la aliquota del blanco.
6.24. Secar la aplicuota a 105 °C toda la noche y enfriar en un desecador que contenga P 2O5 o un
desecante equivalente. Anotar el peso del residuo (Rw) con precisión de 0,1 mg
7. CALCULOS ¿?????REVISAR???????
7.1. % Arcilla = 100 x (Rw2 – Dw) x (CF/Tw)
donde: Rw2 = peso de residuo (g) de fracción menor a 2 um.

Dw = peso del agente dispersante (g) = 0,4408 / CF
CF = 1000 ml / Dv
Dv = volumen pipeteado
Tw = peso total (g) de la muestra tratada con agua oxigenada y secada en estufa
7.2. % Limo fino = 100 x (Rw20 – Dw) x CF/Tw) - % Arcilla
donde: Rw20 = peso de residuo (g) de fracción menor a 20 um.
7.3. % Arena = (Swi / Tw) x 100
donde: i = fracciones de arena retenidas en los tamices de 1; 0,5; 0,25; 0,1 y 0,047 mm.
7.4. % Limo grueso = 100 – (%Arcilla + % Limo Fino + % Arena)
8. NOTAS

Metodosde Laboratorio

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ACIDEZ ACTIVA (pH)

1. RESUMEN DEL METODO.

2.1. Vasos de plástico de 100 ml.

3.1. Potenciómetro (pH metro).

4.1. Cloruro de potasio KCl 1M.

5.1. Cloruro de Potasio (KCl) 1M. 2 Litros.

7.1. Calcular el delta pH aplicando la siguiente fórmula

Delta pH = pHKCl 1M - pHHOH

3. RESUMEN DEL METODO.

2.1. Tubos para centrífuga de 50 ml.

2.1. Balanzas de precisión de 2 y 4 decimales.

2.1. Cloruro de Potasio (KCl).

2.1. Cloruro de Potasio (KCl) 1M. 2 Litros.

2.1. Pesar 5 gramos de TFSA y transferirla a un tubo para centrífuga de 50 ml.

2.1. Acidez intercambiable (cmolc/kg) = [(A-B)/C] x M x 100 x (50/20)

A = Volumen de NaOH gastado en la muestra (ml)

2.2. Aluminio (cmolc/kg) = [(A-B)/C] x M x 100

A = Volumen de H2SO4 gastado en la muestra (ml)

En algunos suelos el color rosado conseguido en la titulación se desvanece al quedar la solución en

11. LITERATURA CONSULTADA.

12. RESUMEN DEL METODO.

2.1. Frascos erlenmeyer de 250 ml.

2.1. Campana extractora de gases.

2.1. Acido sulfúrico concentrado (H2SO4).

16. PREPARACION DE REACTIVOS.

2.1. Dicromato de potasio (K2Cr2O7) 1N o 0,1665M. 2 Litros.

2.2. Sulfato ferroso (FeSO4) 0,5 N. 2 Litros.

2.3. Complejo Ortofenantrolina – ferroso 0,025 M. 100 ml.

17. PROCEDIMIENTO DE ANALISIS.

2.1. Pesar 1 gramo de TFSA y transferir al frasco erlenmeyer.

2.1. % Carbono Orgánico = ((A-B)/C) x N x (0,30 / 0,77)

A = Volumen de FeSO4 gastado en el blanco

7.2. % Materia Orgánica = % Carbono Orgánico x 1,724

C.O. Peso Muestra K2Cr2O7 1N H2SO4

RESUMEN DEL METODO.

2.1. Tubos para centrífuga de 50 ml.

3.1. Balanzas de precisión de 2 y 4 decimales.

4.1. Acetato de Amonio (C2H7NO2) 1M pH 7.

5.1. Acetato de Amonio (C2H7NO2) 1M pH 7. 8 Litros.

7.1. Factor de dilución.

7.1.1. Para Región Oriental.

7.1.2. Para la Región Occidental

7.2. Línea de calibración y análisis de regresión.

8.1. Es conveniente nebulizar las soluciones diluidas en el día de su preparación.

RESUMEN DEL METODO.

2.1. Pisetas para alcohol y agua destilada.

3.1. Destilador a vapor semi-micro-Kjeldahl.

4.1. Alcohol rectificado.

5.1. Hidróxido de sodio (NaOH) 1 N. 1 Litro.

(C1) x (V1) = (C2) x (V2)

Dónde: C1, es molaridad del ácido que se desea preparar;

5.4. Indicador mixto rojo de metilo - verde de bromocresol. 100 ml.

6.1. Extracción de bases.

7.1. CIC (cmolc/kg) = (A/B) x N x (C/D) x 100.

A = Volumen de H2SO4 0,05N gastado (ml).

Ejemplo: CIC (Cmolc/Kg) = (A/5) x N x (50/20) x 100 (Región Oriental)

25. RESUMEN DEL METODO.

2.1. Frascos de plástico de 50 ml.

2.1. Balanzas de precisión de 2 y 4 decimales.

2.1. Acido sulfúrico concentrado (H2SO4).

29. PREPARACION DE REACTIVOS.

2.1. Reactivo “A”. 200 ml.

2.2. Reactivo “B”. 100 ml.