INHIBICIÓN

ENZIMÁTICA
 Inhibición reversible: competitiva,
acompetitiva y mixta
•  Un  inhibidor  (I)  es  un  compuesto  que  se  liga  a  la  enzima  e  interfiere  con  su  
ac:vidad.  

•  Inhibidor  (I)  evita  la  formación  (ES)  o  bloquea  la  reacción  química  

•  Con  mucha  importancia  a  nivel  farmacológico,  industria  alimen:cia  y  

agrícola.  

•  Células  con  muchos  inhibidores  enzimá:cos  

•  No  forma  un  enlace  covalente  

Inhibición competitiva
•  Más  frecuentes  
•  I  se  une  a  moléculas  de  E  libres  (sin  
unión  al  sustrato)  
•  Solo  ES  lleva  a  cabo  la  formación  de  
producto  

•  Inhibición  compe--va  clásica  

•  Cuando  EI  se  forma  una  molécula  de  S  
no  se  une  a  la  enzima  y  visceversa  
(excluyente).  
•  S  e  I  se  unen  al  mismo  si:o  ac:vo  
•  Muchos  de  estos  I  son  análogos  al  
sustrato  (benzamidina-­‐tripsina)  
•  Inhibición  compe--va  no  clásica  
•  El  I  se  une  a  un  sito  diferente  alterando  el  si:o  de  unión  del  sustrato  (Ej.  
Enzimas  alostéricas)  
•  La  unión  de  S  con  el  si:o  ac:vo  evita  la  unión  de  I  a  un  si:o  separado  y  
visceversa.  

•  La  can:dad  EI  se  reduce  aumentando  [S].  Entonces,  mientras  más  I  esté  
presente  se  necesitará  más  S  para  alcanzar  la  Km.  
Inhibición acompetitiva
•  Se  unen  al  ES  y  no  a  la  E  libre  
•  Disminuye  Vmax  por  formación  ESI  
•  No  se  revierte  con  adición  de  S.  
•  Desciende  la  Km  
•  Este  :po  de  inhibición  ocurre  en  reacciones  mul:sustrato.  
•  Inhibición  no  compe--va  o  mixta  
•  Se  unen  a  la  E  o  al  ES  y  forman  complejos  inac:vos  EI  y  ESI  
•  No  son  análogos  del  sustrato  ni  se  ligan  al  mismo  si:o  del  S  
•  Disminuye  Vmax  
•  Se  man:ene  Km  (muy  raro)  
•  No  se  compensa  agregando  S.  Sin  embargo  es  una  forma  reversible  de  
inhibición    
 Efectos de inhibidores reversibles sobre
constantes cinética

I.  Compe--va   I.  Acompe--va   I.  No  compe--vo  

Aumenta  Km   Desciende  Km   Km  se  man:ene  

Vmax  no  cambia   Desciende  Vmax   Desciende  Vmax  
 Inhibición irreversible
•  Reacción  química  I  –E,  se  alteran  grupos  funcionales  de  E  
•  Forma  un  enlace  covalente  I  –  E  =  eliminación  de  moléculas  del  si:o  
ac:vo  
•  Con  el  paso  del  :empo  se  va  haciendo  más  fuerte  hasta  llegar  a  una  
pérdida  total  de  ac:vidad.  
•  Sinté:cos  y  naturales  
•  Usados  en  la  iden:ficación  de  residuos  de  aminoácidos  en  el  si:o  
ac:vo  o  sus:tución  de  sus  cadenas  laterales  reac:vas  
 •  La  eficiencia  del  inhibidor  se  mide  por  una  constante  de  velocidad  Ki  

•  Estudios  ciné:cos  en  :empos  muy  cortos  con  patrón  similar  al  de  una  
inhibición  no  compe::va.  Una  inhibición  no  compe::va  desaparece  
con  diálisis.  
•  Son  sustancias  muy  tóxicas  para  el  organismo  
•  Su  acción  ocurre  con  muchas  enzimas  a  la  vez  
•  Se  unen  covalentemente  con  grupos  cercanos  al  centro  ac:vo:  
reac:vos  específicos  del  grupo  (SH  cisteína  y  OH  serina)  y  marcadores  
de  afinidad  (derivados  de  clorome:lcetona)  
Clasificación de inhibidores irreversibles
•  Reac-vos  de  grupo  SH.-­‐  Alquilación  de  grupos  SH  y  reacción  con  
dobles  enlaces(formación  de  :oleter  estable  a  hidrólisis  dependientes  
de  pH).  Agentes  formadores  de  mercáp:dos  y  agentes  oxidantes  
•  Agentes  formadores  de  mercáp:dos  y  agentes  oxidante  (formación  
de  di  sulfuros  S-­‐S)  

•  Metales  pesados  .-­‐  Ag,  Pb,  Tl,  Hg,  Cd  reaccionan  con  COOH  de  
aspartato  y  glutamato,  imidazol,  serina,  fenol,  etc.  
•  Inhibidores  que  combinan  con  ca-ones  esenciales  .-­‐  iones  cianuro,  
sulfuro  y  EDTA.  

•  Reac-vos  específico  de  grupo  y  marcadores  de  afinidad.-­‐  Reaccionan  

con  un  grupo  específico  en  el  centro  ac:vo  y  sus  proximidades  sin  
reaccionar  con  otros  aa  iguales  presentes  en  la  misma  proteína.  (Ej.  
Organofosforados)  
Aplicaciones del estudio de la inhibición
enzimática
•  Determinación  de  la  ac:vidad  enzimá:ca  
•  Tratar  enfermedades  alterando  la  ac:vidad  enzimá:ca  

•  Organifosforados  
•  En  agricultura  se  usan  inhibidores  organofosforados  como  
insec:cidas.    
•  DFP  para  inves:gar  las  enzimas  
•  Gases  venenosos  (uso  militar)  
•  Modo  de  acción:  inhibición  irreversible  de  ace:lcolinesterasa  
(promueve  hidrólisis  de  ace:lcolina)  =  parálisis  
Uso de inhibidores en biomedicina e
industria alimenticia
•  Usados  para  inves:gar  rutas  metabólicas  

•  Medicinas  (diseñar  medicamentos  de  uso  clínico  – diseño  racional  de  un  
fármaco)  y  venenos  

•  Ejemplo  de  diseño  racional:  inhibidores  de  la  enzima  nucleósido  fosforilasa  
(diseño  a  computadora  -­‐inhibidores  potenciales  al  si:o  ac:vo  – eficiencia  
100  veces  mayor)  

•  Los  inhibidores  son  tan  específicos  para  un  :po  de  enzima  como  lo  es  el  
sustrato  
•  Insec:cidas,  herbicidas,  defoliantes,  fitosanitarios.  
•  Muchos  adi:vos  en  la  industria  alimen:cia  (contra  hongos,  mohos)