Extracción de proteínas

Resumen: Se calentó 50 ml de agua con leche de soja Ades, para su posterior precipitación con hidróxido de
Sodio, para separar el precipitado se procedió a filtrar, se preparó así mismo albúmina para realizar la curva
patrón, añadiendo reactivo de biuret, y así cuantificar en el espectrofotómetro a 545 nm.

Palabras clave: Punto isoeléctrico, soja, biuret

Introducción: la carga total de la molécula proteica,
depende del pH de la solución y del número relativo
de cada aminoácido en la molécula. Por tanto cuando
el número total de cargas negativas iguala al número
total de cargas positivas en la molécula se le llama
punto isoeléctrico o pH isoeléctrico de la proteína.
De los datos obtenidos en absorbancia, se realizó un
curva patrón como se muestra en la figura 1.
Figura 1: Curva patrón de proteínas.
0.3
0.25

Absorbancia
(1) 0.2 y = 0.0351x - 0.0305
En la soja hay un buen balance de aminoácidos R² = 0.4005
0.15
esenciales, de las cuales se pueden extraer las
0.1
proteínas y realizar concentrados proteicos. (2)
La presencia de un enlace peptídico se puede poner 0.05
de manifiesto mediante la reacción del biuret, que es 0
un compuesto simple que contiene un enlace 0 2 4 6 8
peptídico, cuando se trata el biuret con CuSO4 en Concentración
medio alcalino se genera un coloración púrpura. A
este proceso se le denomina reacción del biuret por
lo cual las proteínas reaccionan intensamente. (3).
De la curva patrón se obtiene la siguiente ecuación
Objetivo: Extraer Proteína a partir de la leche de y=mX+b, y=0.0198X+0.0119. Despejando a X nos
soja. quedó de la siguiente manera, X= y-0.0119/0.0198.
De los 0.5 gramos de proteína extraída de la leche de
Resultados y discusión: soja se obtuvo una absorbancia de 0.071 y que al
De las lecturas realizadas en el espectrofometro a 545 introducir este dato en la ecuación anterior, nos
nm. Con respecto a albúmina y biuret, se obtuvieron queda de la siguiente manera: X=0.071-
los resultados en la tabla 2. 0.0119/0.0198. Obteniendo así un resultado de
2.9848 mg/ml de muestra.
Tabla 2: Absorbancias obtenidas en diferentes
concentraciones.
Blanco en Albúmina Biuret en Absorbancia
mg/ml en ml. ml.
0 0 3 0
1 1 2 0.0165
2 1 2 0.055
3 1 2 0.128
5 1 2 0.283
Muestra 1 1 2 0.080
Muestra 2 1 2 0.062
Figura 2: Adición del NaOH a la leche de soja. Figura 4: filtrado del precipitado, sobre papel filtro.

Figura 3: Formación del precipitado

 2.- Rodríguez, V. (2008). Bases de la Alimentación Humana.
España: Netbiblo.
Bibliografía:
3.- (Campbell, P., Smith, A., Peters, T.). (2006). Bioquímica
1.- (Peña, A., Arroyo, A., Gómez, A., Tapia, R.). (2004).
ilustrada. España: Masson.
Bioquímica. México: Limusa.