Producción de n-butanol a través del metabolismo fermentativo ABE

del Clostridium Acetobutylicum ATCC 824 utilizando como sustrato el

lacto-suero.

Aldair Vergel Rangel*; Anna María Blanco Barrera; Juan David Malagón Villafañe; Katerin Mayorga
Palacio; Mariana Guerrero Becerra; Yurley Dayana Correa Basto.
Escuela de Ingeniería Química, Universidad Industrial de Santander (UIS), Cra 27 Calle 9, Bucaramanga,
Colombia.
Email*: alveran96@gmail.com

Resumen

Este artículo reporta los resultados obtenidos para los parámetros cinéticos de la producción de
Butanol a través del metabolismo fermentativo ABE del C. Acetobutylicum ATCC 824 utilizando
como sustrato el lacto-suero, para lograr este objetivo se recopiló toda la información necesaria
(curvas de crecimiento de biomasa, concentración de sustrato y producto, velocidades de
dilución, tiempos de operación, etc.) y de esta manera se realizó los respectivos balances de
masa, consideraciones y simplificaciones necesarias. Se obtuvo que el rendimiento de producto
a partir de sustrato en el proceso continuo fue de Yps = 5,607E-6, el rendimiento
biomasa/sustrato fue Yxs = 9,38E-3, la velocidad especifica máxima fue de µmáx.= 0,1519 h-1 y
la velocidad de dilución fue de 0,1371 h-1 .Adicionalmente se muestra un análisis económico
para mirar la viabilidad de la producción de n-butanol, este análisis se basó en la producción total
del producto de interés (16,75 BDC) el cual se halló teniendo en cuenta el mejor tipo de proceso
que fue seleccionado con base en datos bibliográficos. Se muestra el mejor lugar geográfico de
Colombia para colocar la planta y por último se realiza una simulación para corroborar los datos
obtenidos.

1. Introducción. alto contenido energético, baja miscibilidad

El ser humano se ha vuelto dependiente de
los combustibles derivados del petróleo a
pesar de contar con diversas fuentes de
energía, sin embargo desde los años 70’s
cuando el petróleo encareció comenzó a
resurgir el interés por la obtención de
productos derivados de fuentes renovables;
de los combustibles con mayor auge se
destacan el biodiesel, bioetanol, bio-butanol
entre otros, este último es de gran
importancia ya que sobresale como un
compuesto químico industrial considerado
como combustible líquido, con capacidad de
reemplazar la gasolina en los motores de
combustión interna [1], presentándose
también como un combustible de mejor
calidad que el etanol debido a que posee un
en el agua y baja volatilidad.
El butanol generalmente es sintetizado a
partir de rutas petroquímicas, pero se han
desarrollado rutas alternativas como la
fermentación ABE (fermentación aceto-
butilica-etilica) la cual fue propuesta por [2],
esta se desarrolla a partir de la degradación
microbiana de diversas fuentes de carbono
con microorganismos, como las bacterias
Butyribacterium methylotrophicum,
Clostridium butyricum o la arquea
Hyperthermus butylicus. Sin embargo, el
género más estudiado es el de Clostridium
ya que estas son capaces de convertir
diversas fuentes de carbono en
combustibles y químicos. Otras especies,
que de manera natural no poseen la
.
capacidad de producir este solvente están purificación y los posibles efectos subletales
siendo modificadas genéticamente para ser de las toxinas en organismos, por su alta
empleadas en la producción de bio-butanol carga orgánica (Guerrero et al., 2012;
que de manera natural no poseen la Kavacik et al., 2010; Carvalho et al.,
capacidad de producir este solvente están 2013).Por ello este trabajo busca evaluar la
siendo modificadas genéticamente para ser viabilidad de construir una planta de
empleadas en la producción de bio-butanol producción de n-butanol a través del
a nivel industrial y comercial, un ejemplo metabolismo fermentativo ABE del C.
claro de estas especies es la E.coli. Acetobutylicum ATCC 824 utilizando como
Como en todos los biocombustibles, la sustrato el lacto-suero, posteriormente se
producción económicamente viable del bio- realiza un análisis económico de toda la
butanol está determinada principalmente por planta
el costo de la materia prima empleada para
su producción (la cual representa alrededor 2. Metodología
de un 60-70% del costo total) y los costos de
recuperación del producto (purificación). 2.1 Selección y Caracterización del
Siguiendo esta línea en la realización de Microorganismo.
este trabajo se seleccionó como sustrato el
lacto-suero (LS) debido a que este es un Microrganismo Ventaja Desventaja
residuo de la industria láctea. Cellobioparum Fermentan Tendencia a
celulosa formar
lactato y
En Colombia se generaron
acetato
aproximadamente 922.000 millones de litros
Hyperthermus Fermentan Ademas de
de LS en el 2006, de los cuales el 35% se butylicus principalme generar
dio en la Costa Norte, leche proveniente de nte productos
un doble propósito (ganado utilizado para la azucares ABE,
generación de carne y leche), donde almidon y producen
predomina una transformación industrial y pectina propinoato y
fijan en N2.
artesanal de queso costeño, en la cual se
Clostridium Obtienen Anaerobios
obtiene suero dulce y quesillo (suero ácido);
energía por Forman
un 20% de esta producción se ubica en los fosforilacion endosporas
valles y la sabana Cundiboyacense, donde de diversas Producen
se obtiene suero ácido, proveniente de la fuentes de sobre todo
elaboración de queso doble crema y sustrato ABE
quesillo; otro 30%, se ubica en la zona de Tabla.1. comparación de microrganismos.
Antioquia y Choco, donde se elaboran
Quesos frescos (Quesito, Cuajada, Queso Se eligió emplear como biomasa las
laurel, Campesino, entre otros), donde el bacterias Clostridium ya que son capaces de
subproducto obtenido es suero dulce, el convertir diversas fuentes de carbono, como
resto de la producción, se encuentra en la la glucosa, galactosa, celobiosa, manosa,
zona Sur y los llanos, donde predomina la xilosa y arabinosa, en combustibles y
elaboración de queso fresco, en la cual se químicos como el butanol, acetona y etanol.
obtiene un suero dulce. (Fedegan, 2013), Con base a los resultados obtenidos por
por lo tanto es necesario buscar alternativas distintas fuentes bibliográficas se evidencia
para la estabilización de este residuo, debido que la cepa de Clostridium acetobutylicum
a que la continua descarga de LS en los ATCC 824 tiene un mejor desempeño para
suelos puede dañar su estructura física y los objetivos antes mencionados porque
química, reducir la producción de cultivos e presenta mayor producción de los solventes
incluso puede provocar serios problemas de ABE debido a las rutas metabólicas que
contaminación en aguas subterráneas presenta. Otros microorganismos como por
superficiales, aumentando los costos de ejemplo el Clostridium acetobutylicum
CDBB-B-797 que tiene la habilidad de
aprovechar los azucares presentes en el
lacto-suero para generar biomasa y producir
ácidos, pero no es capaz de hacer la
fermentación ABE para la producción de
butanol.
A continuación en la tabla 2, se mencionan
las propiedades más influyentes que se
deben tener en cuenta para poder tratar con
la C. Acetobutylicum.

Tabla 3 Caracterización del lactosuero

En la tabla 3, se evidencian las propiedades

Tabla.2. Caracterización del Microorganismo (C.
Acetobutylicum ATCC 824.
más relevantes que posee el sustrato
elegido en este caso el lactosuero, como lo
son el porcentaje de humedad, el pH, entre
otros además se añaden la composición
fisicoquímica.

2.2 Selección y Caracterización del 2.3 Diagrama del proceso

Sustrato.
El proceso de obtención de Butanol a partir
A partir de la comparación de los sustratos de lactosuero, utilizando para la etapa
propuestos en la tabla 3, se decide elegir el fermentativa el microorganismo C.
lacto suero ya que este posee todos los Acetobutylicum, de manera general se divide
macro y micronutrientes y elementos traza en cuatro etapas: selección de la materia
que los microorganismos necesitan para prima, pretratamiento de la materia prima y
realizar el proceso fermentativo, también, procesamiento de los azucares y un
Considerándolos componentes del suero posterior tratamiento referente a la
por su valor tecnológico, nutricional, recuperación y purificación del butanol.
farmacológico, fisiológico, etc., esta “materia
prima” adquiere potencial riqueza para la
industria ya que es un desecho industrial. Se
pueden utilizar como fuente de carbono y
energía para producir biomasa. Así mismo,
el uso de microorganismos específicos
correctamente suplementados permite
Fig.1 Diagrama general del proceso de obtención de
incrementar el rendimiento de la producción
butanol a partir de lactosuero.
de productos de fermentación.
Fuente de carbono Ventajas Desventajas
Pretratamienro simple para la Los cultivos pueden competir
obtencion de azucares potencialmente con el suministro de
fermentables de la biomasa. alimentos.
Sucrosa y almidón Producción de butanol con alta
productividad (mejor que
empleando otros sustratos)

Biomasa más abundante no Dificultad para obtener azúcares

competitiva con el suministro de fermentables a partir de esta biomasa.
alimentos. Los Clostridium Producción de componentes
productores de butanol utilizan en inhibitorios de la fermentación durante
Biomasa lignocelulósica
su mayoría azúcares procedentes el pretratamiento del material.
de biomasa celulósica Baja productividad de butanol.

Alto rendimiento de producción de Limitación en el número de cepas de

butanol. Incremento en la Clostridium capaces de producir
producción de butanol con menor butanol a partir del glicerol.
formación de subproductos.
Bajo costo de la biomasa,
Glicerol
suministrada por la industria del
biodiesel.

No compite con los suministros de La producción de butanol a partir de

alimentos. No se biomasa de algas no se ha
requieren tierras para cultivo. demostrado convincentemente.
Mayor rendimiento por área de Baja productividad de butanol.
Biomasa de algas cultivo cuando se comparan con
plantas.

La fracción de biomasa Baja transferencia de masa de gas a

recalcitrante puede ser empleada líquido. Baja productividad de
sin necesidad de pretratamientos butanol. Limitación
Syngas complejos. Algunos en el número de cepas de Clostridium
clostridios pueden producir butanol capaces de producir butanol
a partir del Syngas. directamente a partir de syngas

Amplia disponibilidad. De Requiere pretratamiento para

naturaleza barata. Este acondicionar pH. Necesita
coproducto contiene alrededor del ser suplementado con nutrientes como
50 por ciento de los nutrientes de la el hierro para comparar su efecto
Lactosuero leche (proteínas solubles, lactosa, sobre el metabolismo fermentativo de
vitaminas y sales minerales) la cepa clostridium.
constituyéndose una reserva
alimentaria de alto valor nutricional.

Tabla.4. Comparación entre los diferentes tipos de sustratos considerados

2.3.1 Pre- Tratamiento del Lactosuero

El proceso de pre-tratamiento que se le
realiza al suero se basa de tres etapas
primordiales que son la filtración, ajuste del
Fig 2. Diagrama del pretratamiento del sustrato
pH y adición de hierro con el fin de obtener
el sustrato en las condiciones adecuadas A continuación se describe en que consiste
para su posterior aprovechamiento, según cada una de las etapas mostradas en la
los requerimientos de la fermentación. figura 2.
Filtración
Una vez esterilizado el suero se filtró para
eliminar las proteínas precipitadas, la
filtración se efectuó en primera estancia en
manta de cielo para retener las partículas de
mayor tamaño y posteriormente empleando
papel filtro cuantitativo (Ahistrom, grado 54)
para el resto. Todo el proceso de filtración se
realizó empleando material estéril y en
condiciones asépticas.
Ajuste del pH
El ajuste del pH es esencial sobre todo en la
parte de mantenimiento de las células ya
que estas son muy susceptibles a esta
variable operacional. El pH se ajustó a 7.0,
empleando para ello, NaOH 1 M estéril. El
suero con pH ajustado fue almacenado en
refrigeración a 4 °c, hasta ser empleados
para la fermentación.
Adición de Hierro
Cabe resaltar que el hierro es un importante
componente en la dieta Clostridium, en un
ambiente de crecimiento deficiente de hierro
no tiene lugar la formación de hidrogeno, la
ausencia del hidrogeno cambian las rutas
metabólicas, y se suministra hierro para
permitir que C. acetobutylicum produzca la
ferredoxina requerida para dirigir su
metabolismo hacia la ruta solventogénica y
no hacia la producción de lactato.
El suero previamente desproteinizado y
ajustado el pH fue adicionado con
FeSO47H2O, en cantidades necesarias para
alcanzar una concentración final de 20 mg
fe/l de suero, según los requerimientos de la
fermentación.
2.3.2 Post-Tratamiento del
producto
Debido a que en la obtención del butanol se
genera paralelamente acetona y etanol se
debe considerar el montaje de un proceso
fermentativo acoplado al proceso de
recuperación o purificación del producto de
interés, butanol. El acoplar los procesos
ayudará a incrementar la pureza de producto
y eso trae aumento en la calidad y valor de
este, debido a esto se han desarrollado una
gran variedad de técnicas de recuperación
de butanol que permitan reducir el costo de
su bioproducción, la selección del método
óptimo para la recuperación del producto
debe balancear variables como la eficiencia,
requerimientos energéticos, costos, y la
simplicidad del proceso, en la tabla 6 se
caracteriza de manera general en la fase en
la que se obtendría el butanol, las ventajas y
desventajas que presenta y la selectividad
hacia el butanol.
De la tabla 6 se concluye que la opción más
óptima para la destilación del butanol, ya que
esta se caracteriza por ser un proceso físico
que aprovecha la diferencia en las
temperaturas de ebullición entre los
componentes de la mezcla en ente caso
tenemos los que se muestran en la tabla XX
donde se observa que el butanol es el
menos volátil, lo cual facilita la separación
por este método, obteniéndose a la salida
del separador una corriente purificada de
butanol y una corriente residual de gases
compuesta de agua, acetona y etanol.
Compuesto Punto de ebullición
Butanol 117.7
Acetona 56
Etanol 78.37
Agua 98-100
Tabla. 5. Puntos de Ebullición del efluente del
fermentador
2.4 Interacción de la ruta metabólica
seguida por el C. Acetobutylicum y el
sustrato utilizado (Lacto-suero).
Se definió que el butanol se va a producir
mediante procesos biológicos empleando el
microorganismo clostridium Acetobutylicum,
y lacto-suero como fuente de carbono.
 Fase de obtención Selectividad
Operación ventaja Desventaja
de butanol estimada

Esta tecnología permite

Requiere de una gran
separar compuestos
cantidad de
sensibles a la
Destilación gas energíadebido al calor 72
temperatura,
requerido por el
aprobechando diferencia
proceso.
de punto de ebullcion.

Instalaciones más Formación de

sencillas.
Hay la posibilidad de
Extracción
Liquido separar componentes
L-L
sensibles al calor sin
necesidad de realizar una
destilación al vacío.
emulsión. Costo del
extractaste.
Tóxico para el cultivo. 310-750
Recuperación y
pérdida del extractaste.

Puede incrementar
Requiere gran cantidad
significativamente la
Remoción de volumen del
productividad del sistema
del Liquido fermentador o -----------------
permite mitigar la
producto concentración de
toxicidad del butanol hacia
biomasa.
las células
Requiere implementar
permite separar sin
per- sistemas de
Gas necesidad de calentar la 2-209
vaporacion membranas
mezcla liquida
Ensucia el proceso
Realiza una separación
Osmosis Requiere de fase
Liquido detallada de pocas 1.02-3
inversa externa
cantidades de materiales
Requiere de fase
Arrastre No ensucia. No daña el externa. Baja
Gas abr-22
con Gas cultivo. Fácil de operar selectividad. Baja
eficiencia.
Requiere de fase
Fácil de operar. Bajo
externa.
requerimiento.
Alto costo de material.
Adsorción solido Energético. 130-630
Baja Selectividad.
Regeneración del
absorbente

Tabla 6. Operaciones unitarias consideradas para la purificación del producto

La fermentación bacteriana es el bioproceso

seleccionado ya que este se encarga de
transformar este tipo de residuos en
productos con valor agregado como lo es el
Butanol; Aunque puntualmente se trata de
fermentación ABE (Fermentación aceto-
butilica-etilica), pues esta se caracteriza por
producir solventes en una proporción de 3
partes de acetona, 6 de butanol por 1 parte
de etanol, lo cual es muy conveniente para
el propósito de la ejecución del proyecto.
Este tipo de fermentación sigue la ruta
metabólica mostrada en la figura 3 y esta se
compone de dos fases llamadas
Acidogénica y Solventogénica. Figura 3. Ruta metabólica del C. Acetobutylicum para la
producción de Butanol mediante la fermentación ABE.
La primera fase comprende el crecimiento
exponencial de las bacterias y productos
asociados al crecimiento como el ácido
Acético y Butírico, a este le sigue una fase
estacionaria donde no se presenta cambio
en la concentración de biomasa y la
Solventogénesis toma lugar, los ácidos son
re-asimilados, y la acetona, butanol y etanol
aparecen como metabolitos secundarios.
Hay que tener en cuenta factores que afecte
significativamente la producción del solvente
por el bioproceso efectuado, dado lo
delicadeza de la fermentación además estos
parámetros son lo que dan el soporte para
definir varias etapas del proceso como se
tendrá en cuenta en el diseño de la planta.
• Muchas de las enzimas involucradas en el
metabolismo fermentativo de C.
Acetobutylicum son inactivadas en la
presencia de oxígeno impidiendo tanto la
generación de energía como la producción
de solventes de interés, es por lo que el
proceso se da en condiciones anaeróbicas y
aunque el lacto-suero contiene 2.5 g/l de
oxigeno es una cantidad despreciable para
la cantidad de materia (fuente de Carbono) a
tratar.
• La C. Acetobutylicum es una bacteria
mesofílica con temperatura óptima de
crecimiento de 37°C, lo cual implica un
control especial de temperatura sobre todo
en la fase de Acidogénica.
•El pH óptimo de crecimiento de la C.
Acetobutylicum es 6.5, mientras que la
producción de solventes es favorecida en la
región más acida con pH cercano a 4.5,
• La presencia de butanol, acetona y
etanol resulta ser tóxica para C.
acetobutylicum, ya que provoca la activación
de cuerpos de resistencia, lo anterior implica
la limitación en la concentración de
solventes en el medio de cultivo, por esto se
requiere una operación continua que
gradualmente valla removiendo los
productos y alimentando sustrato fresco.
• El hierro es un importante
componente en la dieta del C.
Acetobutylicum, en un ambiente de
crecimiento deficiente de hierro no tiene
lugar la formación de Hidrógeno, la ausencia
de este cambia las rutas metabólicas
Seguidas por el C. Acetobutylicum para la
obtención de bio-butanol, por lo anterior es
necesario adicionar en los pretratamientos
hierro; según anteriores estudios (Durán,
2015) el hierro debe adicionarse en forma de
FeSO4 7H2O
• El pH óptimo de crecimiento de la C.
Acetobutylicum es 6.5, mientras que la
producción de solventes es favorecida en la
región más acida con pH cercano a 4.5,
debido a esto se opta por operar de manera
separada cada etapa de la fermentación
ABE, como solución alternativa se podría
incrementar el crecimiento aumentando la
capacidad amortiguante del medio.
Algunos organismos productores de acetona
y butanol requieren biotina y ácido p-amino
benzoico para su crecimiento, estos
requerimientos pueden satisfacerse
adicionando extracto de levadura a los
medios de cultivo.
Los genes involucrados en la
solventogénesis han sido identificados,
secuenciados y descritos dentro del mega
plásmido pSOL1; algunos genes
probablemente involucrados en la ruta de
alcohologénesis se han encontrado también
dentro del plásmido, entre ellos destacan los
genes CAP0035 que codifica para síntesis
de un segundo aldehído deshidrogenasa,
CAP0025 que lleva la información de
piruvato descarboxilasa y CAP0059
codificante para la etanol deshidrogenasa,
todas estas enzimas indispensables para la
formación de los productos alcohólicos
deseados: butanol y etanol [4].
3.1 Ecuación pseudoquimica del proceso
𝑪𝟏𝟑,𝟏 𝑯𝟐𝟏,𝟏 𝑶𝟗,𝟓𝟐 𝑵 + 𝟏. 𝟓𝟕𝟑𝑵𝑯𝟑 →
𝟏𝟐, 𝟖𝟔𝟒𝑪𝑯𝟏,𝟒 𝑶𝟎,𝟒 𝑵𝟎,𝟐 + 𝟎. 𝟐𝟑𝟓𝑪𝑶𝟐 +
𝟑. 𝟗𝟎𝟑𝑯𝟐 𝑶 + 𝟏, 𝟎𝟑 ∗ 𝟏𝟎−𝟒 𝑪𝟐 𝑯𝟔 𝑶 + 𝟗, 𝟐 ∗
𝟏𝟎−𝟓 𝑪𝟒 𝑯𝟏𝟎 𝑶
La caracterización elemental del
microorganismo fue proporcionada por [14].
Y la del lacto-suero por [7]; A partir de
balances elementales y rendimientos
teóricos de los productos (ABE) con
respecto al sustrato obtenidos de se
pudieron obtener los coeficientes
estequiométricos).
3.2 selección del tipo de proceso y
reactor
Con base en la productividad de butanol
obtenido de las diferentes referencias
bibliográficas mostradas en la tabla 7 se
concluye que el mejor proceso para la
implementación de la planta de síntesis de
este compuesto, es empleando múltiples
reactores en continuo, esto es debido a que
la fermentación ABE se constituye de dos
etapas, una Acidogénica y otra
Solventogénica, por lo que es necesario
utilizar más de dos reactores para su puesta
en marcha, con lo cual se garantiza
condiciones especiales de pH y temperatura
para cada reactor y una continua extracción
de compuestos inhibitorios para el proceso
(sustrato, solventes, ácidos volátiles, etc.).,
en la figura 4 se esquematiza el diagrama
general del proceso incluyendo los dos
reactores ( fermentadores), y la parte de pre
y post- tratamientos.
Figura 4. Diagrama general del proceso.
4. Descripción del Proceso
La obtención del butanol atraves del proceso
fermentativo del lactosuero empleando la C.
Acetobutylicum, se realizó de manera
continua a través de un sistema de
acondicionamiento de las materias primas,
para luego pasar por los dos fermentadores.
En el primer fermentador, el tiempo de
operación dura aproximadamente 48 horas,
y es donde se da el consumo de lactosa,
crecimiento exponencial del microorganismo
y se produjeron los ácidos acético y butírico,
lo que causa la reducción del valor de pH
hasta que fue sustancialmente constante
alrededor de un valor de 5.5. Entre 48 y 60
horas de fermentación comenzó la segunda
etapa, caracterizada por la disminución del
consumo de la lactosa, la re-asimilación de
ácidos y la producción de los solventes
deseados: acetona, butanol y etanol,
alcanzando una concentración máxima de
solventes después de 168 horas de
fermentación.
Es por esto que se opta por el acoplamiento
de un sistema de purificación
específicamente una torre de destilación del
cual el efluente liquido es el butanol.
 SUSTRATO (Fuente PRODUCTOS Y OBSERVACIONES DEL PROCESO
MICROORGANISMO REFERENCIA
de carbono ) RENDIMIENTOS FERMENTATIVO

Suero de leche ácido

ATCC 824 Fermentación en lote con duración
con pH ajustado a
(microorganismo ABE (9.2 g/L) Ennis (1987) de 120 horas. La proporción de
6.0 empleando
Weizman) solventes A:B:E fue de 1:13:4.4
NaOH

Fermentación por lote con duración

Suero de leche Acetona 0.00 ±0.00 g/L de 168 horas. Rendimiento de 0.44
ATCC 824
desproteinizado Etanol 5.11 ± 1.65 g/L Durán-Padilla, et al. g de butanol por gramo de lactosa
(microorganismo
adicionado con Butanol 7.13 ± 1.53 g/L (2014) consumida. La proporción de
Weizman)
FeSO4 solventes A:B:E fue de
0.0:5.87:4.13.

Fermentación por lote con 96 horas

de duración. Realizada a 30°C, pH
Butanol (3.2 g/L)
inicial de 5.30 y final de 4.45. El
ATCC 824 Suero de leche Acetona (0.65 g/L)
porcentaje de utilización de
(microorganismo hidrolizado y Etanol (no detectado) Ennis (1987)
azúcares fue de 54.8%. La
Weizman) permeado Acetato (2.30 g/L)
proporción de formación de
Butirato (3.20 g/L)
solventes A:B:E registrada fue de
1.7:8.3:0.0

Fermentación por lote con 52 horas

Butanol (3.4 g/L)
de duración. Realizada a 37°C, pH
Acetona (0.85 g/L)
ATCC 824 Suero de leche inicial de 5.30 y final de 4.50. El
Etanol (0.15 g/L)
(microorganismo hidrolizado y Ennis (1987) porcentaje de utilización de azúcares
Acetato (2.20 g/L)
Weizman) permeado fue de 57.5%. La proporción de
Butirato (1.95 g/L) formación de solventes A:B:E
registrada fue de 1.9:7.7:0.4.

Butanol (0.90 g/L)

Acetona (no Fermentación por lote con 78 horas
Suero de leche
ATCC 824 detectado) de duración. Realizada a 30°C, pH
permeado
(microorganismo Etanol (no detectado) Ennis (1987) inicial de 5.55 y final de 4.05. El
hidrolizado con ácido
Weizman) Acetato (2.50 g/L) porcentaje de utilización de
sulfúrico
Butirato (3.10 g/L) azúcares fue de 24.1%.

Fermentación por lote con 46 horas

Butanol (2.72 g/L) de duración. Realizada a 34°C, pH
Suero de leche Acetona (0.74 g/L) inicial de 6.15 y final de 4.50 (sin
ATCC 824
permeado Etanol (0.40 g/L) control de pH). El porcentaje de
(microorganismo Ennis (1987)
hidrolizado con ácido Acetato (1.90 g/L) utilización de azúcares fue de
Weizman)
sulfúrico Butirato (2.94 g/L) 29.8%. La proporción de formación
de solventes A:B:E registrada fue
de 1.9:7.1: 1.0.

Fermentacion en continuo.Las
pruebas se llevaron a cabo a 37 °
C. El proceso de puesta en marcha
se llevó a cabo empleando el
medio sintético con 23 g / L de
solución de suero de
Clostridium lactosa.la velocidad de dilusion
queso Butanol 2.66 g / L
acetobutylicum DSM estaba en D = 0.54 h-1,con un pH
desproteinizado en ABE 3.24 g/L
792 de 4.7.las condiciones del
polvo.
funcionamiento del bioreactor fse
llevo acabo en un tiempo de 21.7
dias

Tabla 7. Recopilación bibliográfica de los procesos más representativos de la síntesis de n-Butanol por rutas de los bioprocesos
 4.1 Concentración de metabolito
Biomasa (ácidos y disolventes)
La concentración de metabolito (ácidos y
disolventes) se midió por medio
de cromatografía de gases aparato (GC)
(Agilent 7890A) equipado con un FID, y
equipado con un capilar columna Pora .
(DO600) usando un espectrofotómetro
Sustrato Butanol
(Cary - 50 Varian). La concentración de
especies solubles se midió en la fase
líquida después de la centrifugación
(10.000 rpm, 10 min).
Figura 5. Diagrama del proceso con corrientes y
operaciones.

Las pruebas se llevaron a cabo a 37 ° 4.2 Métodos analíticos

C. El nitrógeno se burbujeó en la parte
inferior del reactor. La concentración de 4.2.1 Concentración de azúcar.
lactosa alimentada al reactor se La concentración de azúcar se midió por
estableció en 50 g L -1. D (caudal medio de una cromatografía líquida de
volumétrico/volumen de reacción) y R alta resolución (HPLC) (sistema Agilent
(relación entre el caudal volumétrico 1100). Se utilizó agua des ionizada
permeado a través de la unidad de como fase móvil a un caudal
microfiltración y el caudal de de 0,6 ml min -1. Los azúcares se
alimentación) se cambiaron entre 0.02 y separaron en un Hi-Plex H de 8μm,
0.15 h -1 y 14% y 95%, 30cmx7,7 mm a temperatura ambiente y
respectivamente. En particular, se llevó a se detectaron con un detector de índice
cabo un conjunto de corridas de refracción (RI)
estableciendo R en 88% y
-1
cambiando D entre 0.02 y 0.15 h , se 4.2.2 pH
llevó a cabo una campaña de prueba El pH se midió fuera de línea
estableciendo D a un valor prefijado (0.07 en muestras de 1,5 ml mediante un pH-
y 0.1) y cambiando R entre 14 % y 95%. metro (Hanna Instruments). La densidad
celular se midió como absorbancia óptica
El cultivo se muestreó periódicamente a 600 n
para medir las concentraciones de
4.2.3 Balance de masa
biomasa y metabolito hasta que se
alcanzaron las condiciones de equilibrio. Suponiendo que la densidad de las
Los datos medidos en condiciones de corrientes de líquido fuera constante, el
estado estacionario se promediaron en un balance de masa total y el balance de
intervalo de tiempo de aproximadamente masa para las células fueron:
4-5 veces el espacio-tiempo del líquido (D
-1).

Las rutas de transformación de la

población microbiana bajo condiciones de
Solventogénesis, se pueden modelas
mediante el siguiente conjunto de
reacciones.
determinar la productividad máxima de
butanol en el reactor continuo, respecto a
la tasa de dilución (D) y la relación entre
el caudal permeado y el caudal de
alimentación (R).

5. RESULTADOS

Los resultados se dividen de manera

general en dos partes los primeros
resultados referentes a los cálculos
Donde La suposición principal de este cinéticos donde se obtiene la constante
modelo es que, bajo las condiciones de de velocidad de reacción, el coeficiente de
operación utilizadas, la tasa específica de velocidad de dilución los respectivos
la formación de esporas y lisis de células rendimientos; la segunda parte de
es menor que el μS. En particular, el resultados se obtienen de los balances de
modelo fue desarrollado de acuerdo con
biomasa, sustrato en el sistema
las siguientes suposiciones:
producción de Butanol seleccionado.
1) la tasa específica de lisis celular es
insignificante
2) [16] informan que la muerte celular en
un amplio intervalo de condiciones
ambientales adversas se caracteriza por
una tasa de mortalidad específica que
varía entre 0.0015 y 0.009 h -1. Como
primer intento, el modelo se desarrolló
estableciendo μD = 0.0045 h -1
La tasa de crecimiento específico fue
estimada por medio de la relación
propuesta por [17]:
Figura 6. Fermentación por lote de suero de
quesería empleando ATCC 824. Grafico ph,
concentración de azucares, concentración
celular y concentración de productos de
fermentación vs tiempo de fermentación.

Los calculos completos para el proceso

fermentativo compuesto de los dos
reactores se muestran en el anexo 1.
Donde se obtienen 2157.4 kg de Butanol
apartir de 5000 kg de sustrato consumido.

4.2.4 Análisis estadístico

Se realizó un análisis de sensibilidad de
los parámetros del modelo sobre la tasa
específica de formación de esporas para
 De los datos registrados se tomaron los
tres primeros puntos, debido a que, en
este rango se evidencia el crecimiento
exponencial del microorganismo; con los
datos obtenidos se calculó la velocidad
especifica máxima de crecimiento y los él
rendimientos de butanol y etanol respecto
al lacto-suero.
En la literatura se encontró que la relación
de la cantidad de butanol, etanol y
acetona en la solución es de 58,7%,
Figura 7. Fermentación por lote en suero de 41,3% y 0,0% respectivamente para este
quesería suplementado con extracto de levadura,
sustrato y microorganismo [6] además, se
carbonato de calcio y FeSO4 empleando ATCC
824.Grafico ph concentración de azucares y consideró que en un litro de lacto-suero
concentración de productos de fermentación vs hay 0,046 gramos de lactosa según la
tiempo de fermentación.
composición del sustrato reportado por
[7].
5.1 Determinación de los parámetros
cinéticos
5.2 Velocidad especifica máxima de
t (h) X(g/L) s(g/L) ln(x) dx/dt µ
0 0,5 55 -0,69314718 0,125 0,25
crecimiento (µmáx.)
12 1,6 52 0,47000363 0,0583 0,03643
24 1,9 48 0,64185389 0,028 0,01095
36 2,1 45 0,74193734 Basados en la ecuación de balance de
48 2,13 42 0,75612198 masa de un reactor Batch:
60 1,92 36 0,65232519
𝐿𝑛(𝑋) = 𝐿𝑛(𝑋𝑜) + µ𝑡 (9)
72 1,56 34 0,44468582
84 1,3 31 0,26236426 Regresión lineal.
96 1,2 30 0,18232156
108 1 29 0 𝐿𝑛(𝑋) = 0,055𝑡 − 0,525 (10)
120 0,92 27,5 -0,08338161 m = µmáx. = 0,055 h − 1
132 0,9 27 -0,10536052
144 0,86 26,5 -0,15082289
156 0,85 26,4 -0,16251893 5.3 Rendimientos de butanol y etanol
168 0,84 26 -0,17435339
respecto al lacto-suero:
Tabla 8. Tabla de datos para calcular los
rendimientos en operación Batch.
g de producto generado
YP/S = g de sustrato consumido (11)
g de Butanol
Y′PB/S = 1,0847 x10 − 6 g de lactosero
g de Etanol
Y′PE/S = 7,632x10 − 6
g de lactosero

5.4 Rendimiento de Biomasa respecto

al Lacto-Suero

g de Biomasa
Y′X/S = 0,8436 g de lactosero
Figura 8. Curva de crecimiento
5.5 Tiempo de duplicación
𝐿𝑛(2)
tb= µ
=12,602 h
5.6 Velocidad de muerte

y = -0,0074x + 0,9331
µg=0,0074

5.7 Resultados del proceso Tabla 9. Grado de conversión

fermentativo.
Las figuras 9. (A, B y C) y la tabla 9,
fueron extraídas de los resultados
obtenidos por [18]. De las figuras 9. (A y
B) se deriva la tabla 9.
Figura 9. Los datos se refieren a estados
estacionarios de pruebas de fermentación
continua en función de la tasa de
dilución. R = 88%. (A) Concentración de
metabolitos. (B)Concentración
de lactosa y biomasa. (C) Productividad
solvente.
de lactosa ( ξ L ), rendimiento de butanol ( Y B / L ) y
selectividad ( Y B / L / Y Sol / L ) de la fermentación
continua en la planta de reactor-MF: efectos
de D a R 88%. Concentración de lactosa en la
alimentación 50 g/ L.
La Fig. 9 (A, B) y la Tabla 9 informan los
datos medidos durante los estados
estacionarios de la fermentación que se
llevó a cabo en la alimentación del reactor
con el flujo de lactosa de 50 g /L. La
concentración de lactosa (C L), células
(X TOT) y metabolitos (ácidos y solventes)
se informan en la figura 9 A y B como una
función de la tasa de dilución
a R establecida al 88%. El pH fue 4.7 en
todas las condiciones de
operación. Como se esperaba, la
conversión de lactosa y la concentración
de productos (células y metabolitos)
disminuyeron con la tasa de dilución
(disminución de tiempo-espacio). En
particular, la concentración de butanol
disminuyó notablemente con D. La
selectividad de butanol, informada en
la Tabla 2, aumentó con D y se aproximó
a un valor constante de aproximadamente
0,90 g /g. Fig 9 C informa de la
productividad específica de butanol y
disolventes evaluado para los ensayos
informados en Fig. 9 A y B. Ambas
productividades aumentaron con D. Se
puede observar una doble pendiente en
los datos de productividad vs. D con una
discontinuidad en D ≈ 0.1 h -1: la
pendiente en la D más baja es más alta
que en la D más alta.
 5.8 Determinacion de los parametros 5.10 Rendimiento de Butanol respecto
cineticos al sustrato

P Vs S
0.6
0.5 y = 0.1213x - 1.9134
0.4 R² = 0.9635
0.3
0.2
Tabla 10. Datos de concentración de Biomasa (X), 0.1
Lactosa ( C) y Butanol (P) a diferentes velocidades 0
de dilución (D) las cuales fueron extraídos de las 15 17 19 21
gráficas 9 (A y B).
Figura 11. Concentración de producto respecto a
la lactosa
En la literatura se encontró que la relación
de la cantidad de butanol y etanol en la 𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑢𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
solución es de 58,7% y 41,3% Y’P/S =5,607x10-6 𝑔 𝑑𝑒 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑒𝑟𝑜
respectivamente, además, se consideró
que en un litro de lacto-suero hay 0,046 5.11 Rendimiento de Butanol respecto
gramos de lactosa; considerando lo a la biomasa
anterior los siguientes rendimientos
fueron escalados al sustrato (Lacto-suero)
debido a que el procedimiento P Vs X
experimental se realizó con la fuente de
0.6
carbono (Lactosa).
0.4
5.9 Rendimiento de biomasa respecto
al sustrato 0.2 y = -0,4992x + 1,9956
R² = 0,9431
0
3 3.2 3.4 3.6 3.8
X vs C
Figura 12. Concentración de producto respecto a
4
la biomasa
3.5
3
𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑢𝑡𝑎𝑛𝑜𝑙
2.5 Y’P/X =0,023 𝑔 𝑑𝑒 𝐵𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎
2 y = -0.2162x + 7.3397
1.5 R² = 0.9053
1 Para los datos anteriores se consideró
0.5 que la constante de mantenimiento es
0 muy pequeña, por lo tanto, es
16 17 18 19 20 21 aproximadamente cero, el proceso fue
realizado en ausencia de metabolismo
Figura 10. Concentración de biomasa respecto a la
lactosa
endógeno y de productos extracelulares
considerándose un estado estable, por lo
𝑔 𝑑𝑒 𝑏𝑖𝑜𝑚𝑎𝑠𝑎 que se consideró que los rendimientos
Y’X/S =9,382x10-3 𝑔 𝑑𝑒 𝑙𝑎𝑐𝑡𝑜𝑠𝑒𝑟𝑜 observados son iguales a los
rendimientos teóricos en el reactor
continuo.

Figura 13. Gráficas y Ecuaciónes de A) Concentración de
producto (P) en función de la velocidad de dilución. B)
Concentración de biomasa en función de la velocidad de
dilución.
Tomando las ecuciones mostradas en la
figura 13 y considerando que el proceso
se realiza en estado estable, sin
metabolismo endógeno, y además la
constante de mantenimiento (ms) es muy
pequeña por lo que, es aproximadamente
igual a cero podemos determinar la
velocidad específica de crecimiento
(µmáx), la velocidad de dilución de
operación (Dope), la velocidad de
operación crítica (Dcriítica) y el caudal
máximo (Fmáx); cuyos valores se
encuentran tabulados en la tabla 10. Es
necesario aclarar que como el proceso no
se ajustó a la ecuación de Monod; fue
necesario tomar de la literaura [18] los
valores de KS=0,48 g/L y S0=5000 g/L. El
calculo detallado de estos parámetros
cinéticos se encuentran explicitos en el
anexo 1.
6. Inhibidores
El desempeño del proceso fermentativo
ABE está seriamente limitado por: altos
costos de sustrato, inhibición por sustrato,
y baja tolerancia a solventes (máximo
20g/L), crecimiento lento y baja densidad
celular viable durante la fase
solventogénica; estas limitaciones
resultan en baja concentración de
productos, baja productividad, bajo
rendimiento, alto costo de recuperación y
dificultad en el control del metabolismo del
cultivo.
6.1 Inhibición por sustrato: En el caso
específico de Clostridium Acetobutylicum
silvestre su metabolismo se detiene
cuando la presencia de solventes alcanza
una concentración de 20 g/L, lo cual limita
la concentración de fuentes de carbono
que pueden ser utilizados en la
fermentación, ocasionando una baja
productividad y baja concentración de
productos. Cuando la concentración
inicial de sustrato excede los 80g/L, la
producción de solventes supera los 20g/L,
lo cual es causante de inhibición por
producto.
6.2 Inhibición por productos.
La presencia de butanol, acetona y etanol
resulta ser toxica para C. Acetobutylicum,
ya que provoca la activación de la
formación de cuerpos de resistencia, es
decir, a concentraciones bajas de
solventes C. Acetobutylicum comienza a
esporular. Lo anterior limita la
concentración de solventes en el medio
de cultivo, originando bajos rendimientos
y un alto costo durante su recuperación en
las soluciones diluidas [19].
Tanto los ácidos como los solventes
causan inhibición en los microorganismos
del género Clostridium, aunque sus sitios
de inhibición son diferentes. A ciertas
concentraciones de ácidos y solventes el
crecimiento celular se detiene, aunque el
consumo de azucares puede continuar, a
concentraciones más elevadas de estos
productos la actividad microbiana termina.
La inhibición del crecimiento celular está
dada porque al entrar en contacto con
alcoholes y formas neutras de ácidos
orgánicos la bicapa lipídica de la
membrana celular comienza a ser
alterada, se presentan alteraciones en
diversas estructuras celulares, en
actividades de complejos enzimáticos
unidos a membrana, en la conformación
estética de “sistemas funcionales claves”
o interfieren con los procesos regulatorios
microbianos. En el caso de la
fermentación ABE se ha observado que la
presencia de acetona, etanol, acetato y
butirato, por si solos, no contribuyen
significativamente a la inhibición del
crecimiento. El butanol solo o en conjunto
con el butirato si presentan efectos
importantes sobre el crecimiento
microbiano: una concentración de 13 g/l
de butanol o de 15 g/l de butirato y butanol
causan el 50% de inhibición del
crecimiento celular y el consumo de
glucosa, lo que afecta negativamente la
actividad de la enzima ATPasa,
encargada de mantener constante el
gradiente de pH interno y externo de la
célula, el cual es esencial para que se dé
el crecimiento celular [9]. Se ha
encontrado también que la toxicidad del
butanol afecta el crecimiento celular, el
transporte de nutrientes y el consumo de
azucares [20].
[20] y [21] determinaron que el estrés al
que es sometida la bacteria por la
acumulación de los productos de
fermentación generó perturbaciones en el
balance redox lo que provoca represiones
de genes que codifican para los sistemas
de fosfotransferasas, motilidad celular y
proteínas flagelares lo que desemboca en
la detención prematura del crecimiento
celular
7. Análisis de oferta y demanda
Ante la disminución de la oferta mundial y
el aumento de los precios de los
combustibles fósiles existe una tendencia
creciente por generar alternativas
energéticas. La producción de materias
primas para generar biocombustibles
compite con la producción de alimentos,
madera y fibras. La demanda de
biocombustibles se está incrementando
debido a la necesidad cada vez mayor de
energéticos, el alza en el costo del
petróleo, la búsqueda de fuentes de
energía renovables y no contaminantes y
el deseo de aumentar los ingresos
agrícolas en los países en desarrollo.
Asimismo, ha aumentado en forma
drástica la necesidad de contar con
fuentes de carbono, como el suero de
leche o lacto suero, que pueden utilizarse
como materia prima para producir
biocombustibles.
7.1 Mercado del n-butanol
El más grande mercado del n-butanol son
pinturas, abrigos y algunos usos menos
extensivos como adhesivos, sellantes,
tintas, textiles y plásticos. Igualmente es
usado como solventes en las
formulaciones para polímeros e inclusive
otros solventes. La demanda mundial del
n-butanol se centra en:
La demanda global y en los mercados
químicos de n-butanol es cercana a los
tres millones de toneladas, equivalentes a
novecientos ochenta y nueve millones de
galones en el 2007, avaluado esto en
aproximadamente seis mil millones de
dólares. Dicha demanda está en
crecimiento a un promedio de dos punto
siete por ciento anualmente y debido al
camino hacia la industrialización Asia ha
llegado a ser el consumidor más grande;
las cantidades en cuanto a las
proyecciones pasarían de 898 millones de
galones en el 2007 a aproximadamente
1,288 millones de galones para el año
2015.
7.2 Comparación económica de la
producción del biobutanol
A continuación, vemos la comparación en
costos de seis casos de producción de
biobutanol; en los primeros cuatro la base
de las mismas es a fermentación:
1. Fermentación con Clostridium
acetobutylicum ABE, este análisis es a
partir de astillas de madera.
2. Fermentación avanzada con
Clostridium beijerinckii BA101
desarrollado por Hans Blaschek de la
Universidad. de Illinois en Urbana-
Champaign y con licencia para Tetravitae
Bioscience(www.advancedbiofuelsinc.co
m). Este proceso consiste en la
fermentación continua de maíz sin
eliminación continua de los disolventes.
Podría ser fácilmente adaptado para
convertir las fábricas de etanol de maíz
para la producción de butanol.
3. Dos reactores de doble paso
inmovilizado con una recuperación
continua (DIRCR) proceso patentado por
David Ramey de la Environmental
Energy, Inc. (www.butanol.com). El uso
de maíz como materia prima, este primer
proceso convierte los azúcares en ácido
butírico, ácido butírico a continuación,
butanol. En base a demandas de los
desarrolladores, esta vía parece ser mejor
que el caso 2.
4. Condensación de bioetanol de
biobutanol.
5. Ruta termoquímica, es decir, la
gasificación de biomasa seguida de la
catálisis del gas de síntesis.
6. La síntesis oxo ruta petroquímica
Fig 14. Costo de producción del Butanol
usando diferentes tecnologías USD $ por
galón.
Así pues, el Precio estimado en Colombia
del n-Butanol es de 80000 COP /
Kilogramos, además el mercado mundial
anual para el n-butanol empleado como
un químico es de 2.8 a 3 millones de
toneladas, con una tasa de crecimiento
estimada del 3.2% por año, por lo menos
hasta el año 2025. El mercado del
butanol está valuado en 4.2 billones de
dólares por año, para el isobutanol se
calcula un valor de mercado de 560
millones de dólares por año (Wadrop,
2010).
El lactosuero, conocido también como
suero de quesería, es el líquido
resultante de la coagulación de la leche
durante la elaboración del queso. Es una
excelente fuente de nutrientes, como a
su vez un producto fuertemente
contaminante del medio ambiente, con
una DQO (demanda química de
oxígeno) de 70.000 ppm
aproximadamente, por lo que un litro de
lacto suero equivale a 0,6 personas
equivalente en la carga orgánica por día
generada. Una quesería que genere
15.000 litros de suero por día y que se
dispongan a cursos de agua (directa o
indirectamente) contamina en forma
similar a una población de 9.000
habitantes, además de la cantidad de
ácido láctico presente en él, altera
significativamente los procesos
biológicos que se llevan a cabo en las
plantas de tratamiento a donde podría
llegar el vertido (Valencia-Denicia y
Ramírez-Castillo, 2009.
La producción anual de suero lácteo es
de aproximadamente 2033 millones de
litros, de las cuales 6 millones son de
lactosa; el precio estimado de Suero de
leche es de 2300 COP / Kilogramo. Solo
el 18.9% de la industria realiza un
tratamiento adecuado de los residuos
líquidos, el 21.8% realiza un proceso no
adecuado y la mayoría con un 59.4% no
realiza ningún tipo de manejo y va
directamente al alcantarillado en el mejor
de los casos
Con el empleo del lactosuero como
fuente de lactosa para la producción de
biobutanol se busca disminuir el vertido
de éste desecho en el drenaje de la
ciudad, el cual finalmente desemboca en
ríos y arroyos, contaminando el
ecosistema acuático dañando flora y
fauna especialmente por los incrementos
que representa en la demanda de
oxígeno del cuerpo de agua.
8.Lazo de control
Para tener un mejor rendimiento en el
proceso se decide colocar lazos de
control de temperatura y pH por razones
ya mencionadas anteriormente.
9. Análisis económico
Basados en la demanda nacional de
gasolina según la Unidad de Planeación
Minero Energético (UPME) para el 2017
que fue de 95.300 BDC, se va a suplir el
0.018% de la demanda con esta planta. El
precio del butanol 80.000 COP/Kg en el
2017 por lo tanto la ganancia bruta por la
venta de butanol es de 172’592.000 pesos
colombianos. Como el lactosuero es un
residuo de la industria láctea y además
causa daños medioambientales si no se
desechan correctamente, el manejo de
estos residuos es tedioso y costoso, por
tal motivo estas compañías pagan 5
COP/L de lactosuero por deshacerse de
este componente. Los ingresos que se
obtienen por darle un manejo adecuado al
lactosuero son de 50 millones de pesos,
dando una ganancia bruta del proceso de
222’592.000 pesos.(ver anexo 2)
10.Ubicacion geográfica de la planta
En Colombia se generaron
aproximadamente 922.000 millones de
litros de LS en el 2006, de los cuales el
35% se dio en la Costa Norte, leche
proveniente de un doble propósito
(ganado utilizado para la generación de
carne y leche), donde predomina una
transformación industrial y artesanal de
queso costeño, en la cual se obtiene
suero dulce y quesillo (suero ácido); un
20% de esta producción se ubica en los
valles y la sabana Cundiboyacense,
donde se obtiene suero ácido,
proveniente de la elaboración de queso
doble crema y quesillo; otro 30%, se ubica
en la zona de Antioquia y Choco, donde
se elaboran Quesos frescos (Quesito,
Cuajada, Queso laurel, Campesino, entre
otros), donde el subproducto obtenido es
suero dulce, el resto de la producción, se
encuentra en la zona Sur y los llanos,
donde predomina la elaboración de queso especificaciones para cada una de las
fresco, en la cual se obtiene un suero etapas.
dulce; con base en los datos reportados
anteriormente la mejor alternativa para
ubicar la planta en Colombia es en la
costa Norte debido a que genera la mayor
cantidad de desechos producto de la
existencia de macro y micro empresas
productoras de queso y sus derivados,
adicionalmente la topografía de esta zona
es mayormente plana facilitando el
acceso, lo cual acarrea una disminución
en los costos
11. Conclusiones
Según los requerimientos de la ruta
metabólica seguida por el Clostridium
Acetobutylicum ATCC 824 se logró
adaptar el sustrato a las condiciones
óptimas mencionadas. Para lograr lo
anterior fue necesario realizar un control
de pH Y temperatura de los dos
fermentadores utilizados para realizar el
proceso de acidogénesis y
solventogénesis respectivamente.

Se logro establecer las bases teóricas,

económicas y geoespaciales para la
adecuación, implementación y
rentabilidad para la construcción de una
planta de n-butanol atraves de la
fermentación ABE utilizando Clostridium
Acetobutylicum ATCC 824, esto se hizo
teniendo en cuenta la disponibilidad de
sustrato, el control de las variables de
proceso y las mejores condiciones para el
microorganismo.

Debido a una investigación exhaustiva

documentada por bibliografía se pudo
establecer que la mejor alternativa para la
producción de n-butanol es el proceso
multietapas debido a que las condiciones
de la fermentación ABE requieren de
Anexos
Anexo 1
Anexo 2
Anexo 3
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