Laboratorio de Microbiología Aplicada

Informe de Laboratorio #1

Cornelio Williams, Daniela Sinchiguano, Xavier Chavarría Bayot

Grupo #1
Paralelo: Miércoles 11-14

TEMA: Introducción al Laboratorio de Microbiología, Medios de Cultivo y

Manipulación de Bacterias.

INTRODUCCIÓN
La investigación de microorganismos es importante clínicamente,
industrialmente y en un sinnúmero de otras áreas. Para poder estudiar estos seres es
conveniente aislar colonias en ambientes controlados. Un medio de cultivo es una
solución de nutrientes necesarios para el crecimientos de diversos microorganismos.
Se pueden dividir en medios definidos e indefinidos de acuerdo a si su composición
molecular exacta es conocida o no. Los definidos usualmente se forman al añadir una
cantidad determinada de un compuesto orgánico a agua destilada. La cantidad o la
fuente de carbono del medio depende del microorganismo a cultivar. Los medios
indefinidos o complejos se crean a base de sustancias orgánicas tales como sangre o
caseína (Madigan et al., 2015).
Estos medios se pueden clasificar por su composición. El medio nutritivo es
un medio complejo al que se le añaden sustancias hondamente nutritivas con el
objetivo de que en él crezcan microorganismos que son nutricionalmente
demandantes como ciertos patógenos (Madigan et al., 2015). Existen medios para
diferentes objetivos. Un medio selectivo suprime el crecimiento de microorganismo
no deseados y permite el de aquellos deseados. El medio diferencial permite distinguir
entre diferentes tipos de colonias (Tortora et al., 2016).
Los medios líquidos son aquellos que no contienen agar y los sólidos aquellos
que contienen hasta 2% de agar. Los medios sólidos permiten inmovilizar las células
y formar colonias aisladas (Madigan et al., 2015). Para lograr esto se necesitan aplicar
ciertas técnicas. Entre estas están la aséptica y la de estriado. La aséptica es un
conjunto de pasos que permiten realizar subcultivos de manera estéril. La de estriado
permite obtener colonias aisladas a partir de un único inóculo primario que es estriado
sobre un medio sólido (Tortora et al., 2016).

RESULTADOS
Tabla 1. Cultivos bacterianos obtenidos en diferentes medios
MEDIO DE TIPO DE MEDIO TÉCNICA DE RESULTADOS
CULTIVO SIEMBRA
UTILIZADA
Agar nutritivo pico Basal Aséptico Crecimiento
de flauta (AG) positivo (+)
Agar nutritivo Basal Estriado Crecimiento
(AG) positivo (+)
Agar MacConkey Selectivo Estriado Selectivo: (Gram -)
lactosa (MKL) diferencial Diferencial:
Lactosanegativa
(Lac -)
Caldo nutritivo Basal Aséptico Crecimiento
(CN) positivo (+)
Agar Chromocult Selectivo Estriado Selectivo: (Gram -)
(CC) diferencial Diferencial:
Coliformes

DISCUSIÓN
Se utilizaron dos técnicas diferentes en la práctica. La primera técnica, la técnica
aséptica, se utilizó para realizar subcultivos con el objetivo de obtener más bacterias a
partir de un cultivo anterior. La técnica del estriado se usó para poder aislar colonias
de bacterias. En el cultivo realizado en los tubos de ensayo con caldo nutritivo (medio
basal) se observo un crecimiento positivo de bacterias. Se determino esto debido al
aumento en la turbiedad del caldo. En el cultivo realizado en el Agar nutritivo pico de
flauta (medio basal) se encontró un crecimiento bacteriano positivo. Se determino
esto debido a que se encontró un rastro de bacterias sobre el inóculo. Se sembró agua
de laguna en tres medios diferentes (agar nutritivo, MacConkey lactosa y
Chromocult). En el caso de la caja Petri con el cultivo en Agar Nutritivo (medio
basal) se encontró un crecimiento bacteriano positivo, principalmente en el inoculo
primario. Esto probablemente se debe a que en el inoculo primario existía una mayor
concentración de bacterias (Madigan et al., 2015).. Las bacterias que proliferaron
fueron bacterias aeróbicas y mesófilas debido a que el cultivo se incubó a temperatura
corporal y en presencia de oxígeno. En el caso del Agar MacConkey lactosa se obtuvo
un crecimiento positivo de bacterias gramnegativas y a juzgar por la coloración
amarilla se puede concluir que las bacterias encontradas en el cultivo eran
lactosanegativas (que fermentan peptona en lugar de lactosa). Se sabe esto gracias a
que el cultivo es selectivo e inhibe el crecimiento de las bacterias Grampositivas y
también diferencial que nos permite observar que las bacterias son lactosanegativas
cuando la colonia presenta un color amarillo y lactosapositivas cuando son rojas
(MacConkey, 1905). En el caso del Agar Chromocult se observó que se produjo un
crecimiento positivo de bacterias Gram negativas coliformes de coloración rosada en
la muestra, mas no se encontraron de E. coli. Se concluye esto debido a que el cultivo
Chormocult es selectivo para bacterias Gram negativas y en él los coliformes se tiñen
de color rosado y el E. Coli de morado. La ausencia de E. Coli en la muestra de agua
de laguna indica que no existe contaminación fecal (Wachsman y Vullo, 2006).

Bibliografía

MacConkey, A. 1905. Lactose-Fermenting Bacteria in Faeces. The Journal of

Hygiene, 5 (3): 333–79

Madigan, T., Martinko, J., Bender, K., Buckley, D. & Stahl, D. 2015. Brock Biology
of Microbiology. 14ava ed. Pearson Education. Estados Unidos

Tortora, G., Funke, B. & Case., C. 2016. Microbiology: An Introduction.12ava ed.

Pearson Education. Estados Unidos

Wachsman, M. & Vullo, D. 2006. Aplicación de Diferentes Técnicas de Recuento

para Bacterias de Importancia Sanitaria en Aguas. Actas de las VII Jornadas de
Enseñanza Universitaria de la Química. 125-132