GUIA PARA LA REALIZACION DE UNA TECNICA

LAVADO Y SUSPENSION DE HEMATIES.

OBJETIVOS:

 Lavar hematíes para evitar enmascarar anticuerpos débiles.

 Desarrollar destrezas en la decantación manual para evitar pérdidas de
hematíes.
 Aplicar cálculos matemáticos en la preparación de suspensiones a volúmenes y
concentraciones distintas.

ALCANCE:

La preparación de hematíes suspendidos en solución salina, es utilizado para las pruebas

inmunohematologicas que evaluaran la presencia o ausencia de antígenos, sean estos
pertenecientes a sistemas de grupos sanguíneos o a la evaluación en definitiva de un
antígeno causante de una reacción hemolítica o prevención de la misma.

REFERENCIAS:

Todd-sanford .D, El laboratorio en el diagnóstico clínico, Madrid España, volumen uno,

sección IV, Quinta edición
ROITT .I. Inmunología, fundamentos, Novena edición, medica panamericana, 1998

DEFINICIONES:

Solución salina: Es utiliza en general como un medio de suspensión de hematíes. Su

preparación es fácil en el laboratorio. Se disuelve 8.5 gramos de cloruro de sodio en un
litro de agua recién destilada o desionizada, se puede o no aplicar alguna solución
amortiguadora, para la obtención de mejores resultados se recomienda utilizar la
solución salina tamponada.

MATERIALES Y EQUIPOS:

 Tubos de ensayo
 Muestra de sangre
 Solución salina
 Centrifuga (es recomendado la serofuge)
 Demográfico
 Pipetas desechables, automáticas (DE PREFERENCIA LAS DE VOLUMEN FIJO)
 Puntas azules y amarillas.

MUESTRA:

 Sangre Total o concentrado de hematíes (de preferencia con anticoagulante)

  La muestra puede ser tomada directamente del paciente, o de la bolsa de
recolección.

PROCEDIMIENTO:

 Centrifugar la muestra (si es sangre total) para separar el suero o plasma de los
glóbulos rojos, pasar el suero o plasma a otro tubo limpio y rotulado.
 Con una pipeta de Pasteur o automática, colocar 0,5 ml de glóbulos rojos en un
tubo previamente identificado o rotulado.
 Complementar con solución salina, no llenar en su totalidad dejar un espacio
aproximadamente 1 cm antes de llegar al borde superior del tubo de ensayo
 Centrifugar por 2 minuto a 3500 rpm.
 Decantar la solución salina sobrenadante de forma manual
 Agitar los tubos para resuspender los glóbulos rojos.
 Repetir el procedimiento del llenado con solución salina, el total de lavados serán
de 3 (tres)
 En el último lavado la solución salina debe ser clara sin signo de hemólisis.
 Preparar una suspensión 1:20 (una parte de los hematíes lavados con 19 partes
de solución salina al 0.9%), ósea al 5%
 Realizar también suspensiones de hematíes al 40% y 1%.

LIMITACIONES:

 No utilizar muestras hemolizadas.

 Evitar tiempos prolongados en los lavados.
 No utilizar solución salina contaminada, o la que no tenga una concentración del
0.9%.

SOLUCION DE ERRORES TECNICOS:

 Ajustar velocidades y tiempo de centrifugación de acurdo al tipo de centrifuga

utilizada en el laboratorio, recuerde que las centrifugas tienen códigos.
 Utilizar material limpio
 La decantación adecuada, evita la perdida excesiva de muestra.
 La codificación adecuada de los tubos evita confusión