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Cuantificación de la Vitamina C (ácido L-ascórbico)

presente en una bebida de la marca Tampico®


Nicolás Muriel, Josué Calderón

RESUMEN nocivas que atacan las


Los antioxidantes son fundamentales para el óptimo células saludables en un organismo, causando que
mantenimiento celular, la salud sistémica y el pierdan su estructura y su función, esto puede
bienestar celular. Controlan los radicales libres, ocasionar enfermedades degenerativas como el
previniendo enfermedades degenerativas como el cáncer, enfermedades cardiovasculares, cataratas,
cáncer, enfermedades cardiovasculares, cataratas, daños en el sistema inmune y disfunción cerebral
daños en el sistema inmune y disfunción cerebral (Eskin y Przybylski, 2000). Los antioxidantes son
(Eskin y Przybylski, 2000). Los antioxidantes fundamentales para el mantenimiento celular, la
pueden ser derivados de nutrientes, como lo es la salud sistémica y el bienestar celular. Entre los
vitamina C (Percival M. 1998). Se realizó la antioxidantes se pueden encontrar antioxidantes
cuantificación de vitamina C presente en una bebida derivados de nutrientes: vitamina C, vitamina E,
comercial de naranja y mandarina mediante carotenoides, y otros compuestos de bajo peso
espectrofotometría por medio de una curva de molecular (glutatión y ácido lipoico); enzimas
calibración. Se obtuvieron concentraciones de 0,262 antioxidantes: superoxido dismutasa, glutatión
mg ácido ascorbico/mL jugo y aproximadamente peroxidada, glutatión reductasa; proteinas de unión a
62,95mg de Vitamina C en un envase de 240mL, lo metales: ferritina, lactoferrina, albúmina y
cual coincidió con los 60mg especificados en las ceruplasmina que secuestran iones cobre y hierro
tablas nutricionales del producto (Alimentos del libres que son capaces de catalizar reacciones
Valle S.A., 2016) oxidativas, entre otros (Percival M. 1998).

ABSTRACT Antioxidantes
Los radicales libres son moléculas que perdieron un
Antioxidants are essential for optimal cell electrón y remueven el electrón que les hace falta,
maintenance, cell systemic health and welfare. They de las moléculas que están a su alrededor para
control free radicals, preventing degenerative obtener su estabilidad. Los Antioxidantes son
diseases such as cancer, cardiovascular disease, molécula capaces de retardar o prevenir la oxidación
cataracts, damages to the immune system and brain de un sustrato oxidable, actuando como donador de
dysfunction (Eskin and Przybylski, 2000). electrones (agente reductor); contrarrestar el efecto
Antioxidants can be derived from nutrients, as it is negativo de los radicales libres. Los antioxidantes
vitamin C (Percival M. 1998). It was made the son considerados aditivos y están regulados bajo el
quantification of present vitamin C in a commercial Acta Federal de Drogas, Alimentos y Cosméticos.
orange drink through spectrophotometry using a Este código los define como sustancias para
calibration curve. Concentrations obtained were of preservar el alimento del deterioro, rancidez o
0.262 mg of ascorbic acid / mL of juice, thus, in a decoloración debido a la oxidación (21 CFR 170.3).
240mL juice bottle there are 62,95mg of vitamin C, No deben exceder el 0.2% por peso basado en el
which coincided with the 60mg specified in contenido de grasa del alimento (Eskin y Przybylski,
nutritional tables of the product (Valley Foods S.A., 2000).
2016)
Vitamina C
Palabras clave: Antioxidantes, radicales libres,
aditivo, producto funcional, Vitamina C. La vitamina C, conocida como ácido ascórbico, es un
nutriente hidrosoluble que se encuentra en ciertos
INTRODUCCIÓN alimentos. En el cuerpo, actúa como antioxidante, al
ayudar a proteger las células contra los daños
Los antioxidantes inhiben la acción de los radicales causados por los radicales libres. Además, el cuerpo
libres, los cuales son moléculas potencialmente necesita vitamina C para producir colágeno, una
proteína necesaria para la cicatrización de las de los productos funcionales, de la Universidad de la
heridas. La vitamina C también mejora la absorción Sabana, revisada y corregida por Diana Ximena
del hierro presente en los alimentos de origen vegetal Hurtado Varela.
y contribuye al buen funcionamiento del sistema
inmunitario para proteger al cuerpo contra las  Solución 2-nitroanilina
enfermedades (National Institues of Health, 2016).  Solución nitrito de sodio
 Patrón de vitamina C
La cantidad de vitamina C que necesita por día  Etanol Absoluto
depende de la edad. Las cantidades promedio diarias  Ácido oxálico
de vitamina C, expresadas en miligramos (mg), que  Agua destilada
se recomiendan para las personas de diferentes
 Material vegetal
edades son las siguientes:
 2 Micropipetas
Etapa de la vida Cantidad  Vortex
recomendada  13 tubos de ensayo
Bebés hasta los 6 meses de edad 40 mg  Mortero
Bebés de 7 a 12 meses de edad 50 mg  Matraz
Niños de 1 a 3 años de edad 15 mg  Espectrofotómetro
Niños de 4 a 8 años de edad 25 mg  Bebida Tampico® de 240mL
Niños de 9 a 13 años de edad 45 mg
75 mg Preparación de la solución patrón
Adolescentes (varones) de 14 a 18 años de
edad
65 mg
Se prepararon dos soluciones, una concentrada y otra
Adolescentes (niñas) de 14 a 18 años de
diluida, para la primera se midió 1mL del jugo y se
edad llevó hasta 10mL con ácido oxálico. Para la solución
Adultos (hombres) 90 mg
diluida se tomaron 100 µL de la solución
Adultos (mujeres) 75 mg anteriormente preparada y se agregaron 9,9mL de
Adolescentes embarazadas 80 mg ácido oxálico.
Mujeres embarazadas 85 mg
Adolescentes en período de lactancia 115 mg Preparación de la curva de calibración
Mujeres en período de lactancia 120 mg La concentración del ácido ascórbico presente en el
Cantidad de Vitamina C recomendada de acuerdo a diferentes jugo se determinó espectrofotométricamente, dando
etapas de la vida. Tomado de: National Institutes of Health, Office el siguiente tratamiento a cada tubo de ensayo (todos
of dietary supplements (National Institues of Health, 2016)
previamente recubiertos con aluminio).
La deficiencia de vitamina C (menos de 10 mg por
Tabla 1: Volúmenes de reactivos (2-nitroanilina y nitrito de sodio)
día) durante varias semanas puede contraer para preparar curva de calibración
escorbuto. El escorbuto causa cansancio, P
Reactivo

inflamación de las encías, pequeñas manchas en la B 1 2 3 4 5 6


piel de color rojo o violeta, dolor en las 1 2 3 4 5 6

articulaciones, mala cicatrización de las heridas, y


nitroanilina

vello ensortijado o en forma de "sacacorchos". Otros


(ml)
2-

0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1 0,1
síntomas de esta enfermedad incluyen depresión,
inflamación y sangrado de las encías y aflojamiento
o pérdida de dientes. Las personas que padecen
sodio (ml)
Nitrito de

escorbuto también pueden sufrir anemia. Sin


0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2 0,2
tratamiento, el escorbuto es mortal (National
Institues of Health, 2016).

MATERIALES Y MÉTODO Después de agregar los reactivos de la tabla 1 se


mezcló bien y se verifico el pH, el cual fue ácido. Se
Los materiales y el método desarrollados fueron en
base a la guía Antioxidantes como parte fundamental
dejó en reposo por diez minutos y se prosiguió con Tabla 4. Concentración y absorbancia para la realización de la
curva de calibración de Vitamina C.
los reactivos de la tabla 2.
Concentración Absorbancia
Tabla 2: Volúmenes de reactivos (etanol absoluto, patrón ácido
ascórbico y ácido oxálico) para preparar curva de calibración 0,005 0,184
P
0,01 0,365
Reactivo

B 1 2 3 4 5 6 0,02 0,695
1 2 3 4 5 6
0,03 0,858
0,04 0,873
absoluto
Etanol

0,05 0,894
(ml)

3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8 3,8

Gráfica 1. Curva de calibración para la Vitamina C con base en


ascórbico (ml)

los datos de la tabla 4.


Patrón ácido

- 0,1 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 - - - - - -


Curva de calibración Vitamina C
1
Filtrado (ml)

0,8

Absorbancia
- - - - - - - 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0 1,0
0,6
0,4
0,2
oxálico
Ácido

(ml)

1,0 0,9 0,8 0,6 0,4 0,2 - - - - - - -


0
0 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06
Concentración (mg/mL)
Posteriormente se mezcló bien cada tubo de ensayo
y se dejaron en reposo por veinte minutos. Luego de Los datos de la tabla 4 se realizaron de la forma a
esto se procedió a añadir los reactivos de la tabla 3. continuación expuesta, se tomó el volumen 0,2 mL
del patrón ácido ascórbico de la tabla 2 para la
Tabla 3: Volúmenes de reactivos (NaOH y Agua destilada) para prueba de cálculo así:
preparar curva de calibración
P
Reactivo

500𝑚𝑔 1
B 1 2 3 4 5 6
1 2 3 4 5 6 0,2𝑚𝐿 ∙ ∙ = 0,01 𝑚𝑔/𝑚𝐿
1000𝑚𝐿 10𝑚𝐿
NaOH

El resultado es 0,01 mg/mL y corresponde a una


10%
(ml)

1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2 1,2
absorbancia de 0,365 de acuerdo a la tabla 4
da (ml)
destila
Agua

3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 3,7 Como se puede observar en la gráfica 1 no se obtuvo
una recta como la que se esperaba al ser una curva de
calibración, se puede destacar que los dos últimos
Se mezcló bien cada tubo y se midió la absorbancia datos (no permiten una linealidad considerable en la
en el espectrofotómetro a 540nm, teniendo en cuenta gráfica realizada y por lo tanto se procedió al rechazo
que los tubos B corresponden a los utilizados para la de datos. De acuerdo a esta corrección se obtuvo la
curva de calibración, mientras los tres primeros de P gráfica 2 presentada a continuación.
contienen la solución concentrada y los 4, 5 y 6
contienen la solución diluida.

RESULTADOS

Los resultados obtenidos para la curva de calibración


de la Vitamina C se tabularon en la tabla 4,
adicionalmente se presenta la gráfica 1 a
continuación, con base en los anteriores.
Gráfica 2. Curva de Calibración de la vitamina C con el rechazo De esta forma se calcularon las concentraciones para
de datos realizado.
el jugo de naranja y mandarina analizado y se
tabularon en la siguiente tabla

Tabla 6. Concentraciones calculadas en mg/mL de Vitamina C en


el jugo de naranja y mandarina analizado.

Muestra Concentración (mg/mL)


1 0,28062067
2 0,22192876
3 0,23660174
4 0,28062067
5 0,27695242
6 0,27695242
De la gráfica 2 Se obtuvo la ecuación de la linea de
tendencia de la curva de calibración 𝒚 = De acuerdo a la tabla 6 el promedio de
𝟐𝟕, 𝟐𝟔𝟏𝒙 + 𝟎, 𝟎𝟖𝟐𝟔, con esta se procedio a concentraciones de vitamina C en el jugo analizado
determinar la concentración de vitamina C presente ̅𝒄𝒐𝒏𝒄 = 𝟎, 𝟐𝟔𝟐𝟐𝟕𝟗 𝒎𝒈/𝒎𝑳 , y por lo tanto en
es de 𝒙
de acuerdo a la absorbancia medida de los tubos de un envase de 240 mL del jugo analizado hay
ensayo, de acuerdo a la tabla 5. presentes 62,95 mg de Vitamina C.
Tabla 5. Concentraciones obtenidas de acuerdo a la absorbancia
medida y a la curva de calibración DISCUSIÓN DE RESULTADOS

P absorbancia x (concentración) mg/mL De acuerdo con las tablas nutricionales del jugo
1 0,006 0,000280621 Tampico® (ver anéxos) este contiene el 100% del
2 0,022 0,000221929 valor diario de Vitamina C basado en una dieta de
3 0,018 0,000236602 2000 calorias (Alimentos del Valle S.A., 2016). Este
4 0,006 0,000280621 pocentaje de valor diario corresponde a 60mg de
Vitamina C (Ministerio de la protección social,
5 0,007 0,000276952
2010). De acuerdo con los resultados obtenidos
6 0,007 0,000276952
experimentalmente el jugo contiene 62,95mg de
Vitamina C en un envase de 240 mL, información
De acuerdo con las absorbancias de la tabla 5 se que concuerda con la presentada en las tablas de
calcularon las concentraciones de los tubos P de nutrición, obteniendo un error porcentual del 4,92%
acuerdo a la siguiente prueba de cálculo: con base en los 60mg presentados anteriormente. Se
y = absorbancias de la tabla 5, se tomó la absorbancia puede inferir que el error presentado se puede derivar
0,007. de mediciones erróneas en el procedimiento para
realizar la curva de calibración, esto, debido a que el
𝑦 − 𝑏 0,0825 − 0,007 coeficiente de linealidad (0,9729) no es tan cercano
𝑥 = 𝑐𝑜𝑛𝑐𝑒𝑛𝑡𝑟𝑎𝑐𝑖ó𝑛 = =
𝑚 27,261 a 1 como para una minimización del error.
= 0,000276952 𝑚𝑔/𝑚𝐿
La ración diaria recomendada (RDR) de vitamina C
Esta concentración corresponde a la concentración depende tanto del sexo como de la edad y de etapas
de la solución diluída del jugo, por lo tanto se específicas en la vida, así, un niño necesita entre los
realizan las operaciónes para determinar la 3 y 9 años 35 a 55 mg/día, una mujer en embarazo
concentración de Vitamina C en el jugo analizado, necesita 85mg/día, una mujer lactante de 120mg/día,
esto, mediante el siguiente procedimiento: y para las mujeres y hombres de 19 años o más, el
Se toma la concentración de la prueba de cálculo mínimo consiste entre 75 y 90mg diarios
anterior 0,000276952 mg/mL respectivamente (Emily Wax RD, 2015). Por lo tanto
10𝑚𝐿 ∙ 0,000276952𝑚𝑔/𝑚𝐿
se puede ver que la información nutricional de 60mg
10𝑚𝐿( )
𝐶𝐽𝑢𝑔𝑜 = 0,1𝑚𝐿
= 0,276952 𝑚𝑔/𝑚𝐿 de Tampico® presentada anteriormente es suficiente
1𝑚𝐿
para los niños, pero para los adultos no, por lo tanto
es necesario consumir otra fuente significativa de La densidad medida del jugo es de 0,9656 g/mL
vitamina C en la dieta. 26,228 𝑚𝑔 á𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑎𝑠𝑐𝑜𝑟𝑏𝑖𝑐𝑜 1𝑚𝐿
∗ = 0,2761 ∗ 100𝑔
100 𝑚𝐿 𝑑𝑒 𝑍𝑢𝑚𝑜 0,9656 𝑔
Los resultados obtenidos pueden expresarse también 𝟐𝟕, 𝟏𝟔𝟐 𝒎𝒈 á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝒂𝒔𝒄𝒐𝒓𝒃𝒊𝒄𝒐
como 27,16 mg de Vitamina C por cada 100g de =
𝟏𝟎𝟎 𝒈 𝒅𝒆 𝒁𝒖𝒎𝒐
Jugo, esto permite hacer la comparación con estudios
2. Comparar los datos obtenidos con los de las
realizados por la Universidad de Murcia en España,
tablas de nutrición.
para jugos de zumo de naranja y mandarina, las
marcas utilizadas fueron Alvalle, Don Simón, Hero,
De acuerdo con la tabla de nutrición para el jugo
Juver, Kas, Minute Maid y Zumosol, en donde los
trabajado de la marca Tampico®, este contiene
resultados obtenidos oscilan entre 30,1 y 48,1 mg de
en un envase de 240 mL el 100% de Vitamina C
Vitamina C por 100mg de zumo (Cano & Arnao,
diaria recomendada basada en una dieta de 2000
2004). Así los resultados obtenidos para el
calorias, es decir aproximadamente 60mg de
Tampico®, 27,16mg/100g Jugo, son notablemente
acuerdo con la guía para el consumidor sobre
inferiores a los presentados anteriormente, esto
alimentos de rotulado nutricional (Ministerio de
principalmente porque el Tampico® no es un zumo
la protección social, 2010)
de naranja y/o mandarina, por lo tanto la Vitamina C
contenida es adicionada a forma de aditivo funcional,
Teniendo esto en cuenta la medida realizada para
en cambio las bebidas analizadas por el estudio de la
el jugo estuvo bastante cerca de la presentada en
Universidad de Murcia si son zumos de naranja y/o
las tablas de nutrición (60mg), pues fue de
mandarina, y adicionalmente poseen los aditivos
62,95mg.
funcionales de ácido ascórbico, por lo tanto la
Vitamina C presente de estos será mayor que la de
3. Expresar los resultados en unidades
una bebida sin zumo natural de fruta, como lo es el
internacionales de vitamina C.
Tampico®.
1 UI = 0,05mg
CONCLUSIONES
62,95mg*(1UI/0,05mg)=1259UI
- La bebida saborizada Tampico® es una fuente
ANEXOS
significativa de vitamina C, ya que contiene el
aporte suficiente para el valor diario de vitamina - Tabla nutricional del jugo analizado de la marca
C de los niños y un aporte significativo en la dieta Tampico® citrus punch.
de los adultos.
- Los antioxidantes cumplen un importante papel
en la salud humana y son fundamentales en los
productos comerciales de hoy en día.

CUESTIONARIO

1. Hacer la curva y calcular la concentración de la


muestra problema expresándola:

De acuerdo a los resultados obtenidos se obtuvo una


concentración promedio del jugo analizado de
0,262279 mg/mL
Tabla nutricional de la bebida Tampico® analizada. Imagen tomada de
a. mg de ácido ascórbico/100 ml de zumo. Alimentos del Valle Colombia, de www.alvival.com.co el 30 de agosto de
2016.
𝟐𝟔,𝟐𝟐𝟖 𝒎𝒈 á𝒄𝒊𝒅𝒐 𝒂𝒔𝒄ó𝒓𝒃𝒊𝒄𝒐
0,262279*100 = 𝟏𝟎𝟎𝒎𝑳 𝒅𝒆 𝒁𝒖𝒎𝒐
BIBLIOGRAFÍA
b. mg de ácido ascórbico/100 g de zumo.
Alimentos del Valle S.A. (30 de Agosto de 2016).
Alival.com.co. Obtenido de
http://www.alival.com.co/es/site/presentations/id
_products/23/idioma/es.html
Cano, A., & Arnao, M. B. (2004). ACTIVIDAD
ANTIOXIDANTE HIDROFÍLICA Y
LIPOFÍLICA YCONTENIDO EN VITAMINA
C DE ZUMOS DE NARANJA
COMERCIALES:RELACIÓN CON SUS
CARACTERÍSTICAS ORGANOLÉPTICAS.
Ciencia y Tecnologia Alimentaria Journal of
Food, 4(3), 185-189.
Emily Wax RD, D. Z. (2015). The Brooklyn Hospital
Center. Brooklyn NY: A.D.A.M.
Hurtado. (2016). Antioxidantes como parte fundamental
de los productos funcionales. Chia, Colombia:
Universidad de la Sabana.
Ministerio de la protección social. (2010). guia para los
consumidores sobre alimentos de rotulado
nutricional. PMA. Programa Mundial de
Alimentos.
National Institues of Health. (30 de Agosto de 2016).
Office of dietary supplements. Obtenido de
www.ods.od.nih.gov:
https://ods.od.nih.gov/factsheets/VitaminC-
DatosEnEspanol/
Eskin, N.A.M. y R. Przybylski. 2000. Antioxidants and
Shelf Life of Foods. En: N. A. M. Eskin y D. S. Robinson
(eds.). Food Shelf Life Stability: Chemical, Biochemical
and Microbiological Changes. CRC Press, Boca Ratón,
Florida

Percival M. 1998. Antioxidants. Clinical Nutrition


Insights. Nut031 1/96 Rev. 10/98.

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