FACTORES AMBIENTALES Y NUTRICIONALES QUE INCIDEN EN

EL CRECIMIENTO DE LA LEVADURA SACCHAROMYSSES

CEREVISIAE

Sarah Monsalve, David Felipe López, Javier Ramírez

*Universidad de Antioquia, Ingeniería Sanitaria, Microbiología

Sanitaria.

Resumen:
Con el objeto de analizar la incidencia de diferentes factores (ambientales y
nutricionales) en el crecimiento de la levadura Saccharomysses cerevisiae, se partió
de un cultivo puro de S.cerevisiae, dicho cultivo fue sembrado en tres Erlenmeyer
cada uno de ellos con diferentes valores de concentración de glucosa (1%, 5%, 10%).
De cada muestra de cultivo se agregó 3 ml a un tubo de ensayo, uno para cada
muestra, teniendo las debidas precauciones para el manejo de cultivos. La primera
muestra fue tomada en el tiempo cero y mediante el uso del espectrofotómetro y a
una longitud de onda de 450 nm se determinó la masa microbiana (previamente se
había calibrado el equipo con el cero). El proceso fue repetido a diferentes intervalos
de tiempo de cada hora, dichas mediciones se realizaron en aproximadamente 7
horas. Los resultados obtenidos a partir del procedimiento experimental, indican que
s. cerevisiae es un hongo unicelular que tiene su mejor factor nutricional, para este
caso, es la glucosa en concentración del 5%, pues al ser sometida a dichas
condiciones presentó un crecimiento grande y continuo en el tiempo.

Palabras Claves: Hongo, levadura, Crecimiento, Nutrientes, Glucosa, Temperatura,

Saccharomysses cerevisiae (S.cerevisiae).
Introducción: A nivel ambiental y sanitario
Los microorganismos están S.cerevisiae, se puede emplear como
distribuidos en la naturaleza, haciendo descomponedor de materia orgánica
parte de diferentes ecosistemas, todos en procesos biológicos de tratamientos
ellos como seres vivos, requieren, para de aguas industriales y domésticas;
su óptimo desarrollo, de factores degradan proteínas complejas y
ambientales apropiados y condiciones carbohidratos. Son termotolerantes y
nutricionales ideales tales como productores de alcohol.
glucosa, fosfatos, nitratos, agua, entre Como aplicación de este
otros. Una amplia variedad de especies microorganismo descomponedor
de levaduras poseen diferentes tenemos la elaboración de abonos
habilidades en cuanto a metabolismo orgánicos, aplicación directa sobre
se refiere, cada especie como tal tiene residuos de cosecha, tratamientos de
la habilidad de realizar actividad malos olores, tratamiento de aguas
metabólica acorde a los diferentes residuales.
parámetros ambientales y nutricionales El método de espectrofotometría es de
a los que se encuentren expuestos gran utilidad para determinar la
como en este caso, la glucosa. cantidad de masa microbiana, se basa
fundamentalmente en el uso de un
Saccharomysses cerevisiae, también espectrofotómetro, este mide la
es conocida como S. cerevisiae, es un cantidad de luz que transmite una
hongo unicelular, esta levadura es de solución o en este caso un cultivo
gran importancia en la industria para la liquido de células microbianas. La
fabricación de productos como pan, turbidez es proporcional a la masa de
cerveza y vino, hace parte de la familia las células en suspensión y su medida
Saccharomycetaceae, su reproducción nos permite conocer como varia el
es asexual, por gemación, y en su ciclo crecimiento de los microorganismos
de vida alternan entre la forma haploide presentes en un cultivo con el pasar del
y su forma diploide, En algunos casos tiempo, pues en la medida en que se
en condiciones muy determinadas, la incrementa la masa microbiana, menos
forma diploide puede reproducirse de será la cantidad de luz que se
forma sexual, se produce la meiosis. transmite, lo que implica una mayor
absorbancia.
Un factor nutricional que afecta el en este experimento son (1%, 5%,
crecimiento de la levadura S. 10%).
cerevisiae es la concentración de
glucosa a la que está sometido el Método experimental:
hongo, la molécula de glucosa Para conocer los diferentes efectos
representa la principal fuente de causados por la variable nutricional
carbono y energía para la mayoría de glucosa, sobre la levadura
las células. El ingreso del azúcar a la S.cerevisiae, inicialmente se tomó un
célula, que marca el inicio del medio de cultivo puro de dicho hongo y
catabolismo, es un proceso altamente tres Erlenmeyer los cuales contenían
regulado que varía de una célula a otra caldo nutritivo y condiciones
dependiendo de sus funciones. La S. ambientales y nutricionales
cerevisiae requiere aporte constante de controladas, como la temperatura a la
glucosa para procesarla por la vía que estaban inoculadas de 35°C y las
aerobia y anaerobia, la captación de diferentes concentraciones de glucosa
azucares es un proceso complejo en el del medio, luego fueron inoculados con
que participan numerosos una pipeta con 3 ml de cultivo puro de
transportadores pertenecientes a una la levadura.
familia multigénica, compuesta por al Los Erlenmeyer se distribuyen de la
menos 20 genes diferentes (Bisson y siguiente manera:
Coons, 1993; Conde et al., 2010). El - Glucosa 1%
objetivo de esta práctica es mirar la - Glucosa 5%
incidencia de este factor nutricional en - Glucosa 10%
el crecimiento de la levadura S. Es esencial que el lugar de trabajo esté
cerevisiae. Al exponer la levadura a en condiciones estériles antes de llevar
diferentes estímulos nutricionales muy a cabo cualquier análisis
diferentes a los convencionales o microbiológico, para esto se utilizó
habituales se quiere mirar el alcohol y un mechero para evitar la
comportamiento del microorganismo contaminación del mismo.
en cuanto a supervivencia y hasta A continuación, se procedió a tomar
donde puede mantenerse en el tiempo 3ml de muestra con su respectiva
sin la variación del factor. Las pipeta contenida en cada uno de los
concentraciones de glucosa utilizadas tres Erlenmeyer previamente marcados
con cinta de enmascarar, y
depositarlos en tres tubos de ensayo para el tiempo estipulado se obtuvieron
anteriormente rotulados con los valores 7 mediciones para cada medio.
de concentración de la glucosa, es Tabla 1. Densidades ópticas para
fundamental aclarar que antes de diferentes concentraciones de glucosa
realizar este procedimiento se debió para la levadura S.cerevisiae.
agitar bien la muestra. DENSIDAD OPTICA EN EL TIEMPO EN MEDIOS DE
CULTIVO CON DIFERENTES CONCENTRACIONES DE
Los 3 ml contenidos en los tres tubos GLUCOSA
de ensayo se agregaron a una celda HORA GLUCOSA 1 % GLUCOSA 5 % GLUCOSA 10 %
correspondiente para medir en el 8:50 0,105 0,229 1,132
espectrofotómetro; con esta prueba se 9:50 0,08 0,272 1,138
obtuvo la absorbancia para cada una 10:30 0,256 0,345 1,278

de las muestras. Para llevar a cabo 11:50 0,417 0,456 1,386

12:30 0,712 0,684 1,706
este procedimiento es necesario con
13:30 0,892 0,911 2,146
antelación realizar la calibración del
14:30 1,274 1,344 2,994
equipo.
Inmediatamente después se realizó la
En el medio con concentración de
medición por espectrofotometría con
glucosa del 1% se puede decir que las
una longitud de onda de 450 nm. El
dos primeras mediciones de la DO
procedimiento se repitió para todos los
corresponden a la fase de latencia
intervalos de tiempo establecidos.
donde no se nota un aumento
Para el desarrollo de la práctica se
importante en el valor de la DO, en la
eligió un tiempo de 6 horas, durante las
segunda medida se obtiene un valor de
cuales se tomó medición cada hora
0,08 y a partir de esta medida se
RESULTADOS Y DISCUSION:
observa un crecimiento de la que se
Nuestro trabajo constituye un
puede decir que corresponde a la fase
experimento multifactorial, lo cual hace
exponencial de la cinética del hongo.
difícil discernir de manera precisa la
Todo lo anterior se puede deducir de la
respuesta del microorganismo al factor
gráfica 1.
nutricional glucosa. En la tabla 1, se
La tendencia de los valores de DO no
presentan los resultados del cambio de
es muy lineal y de las 3 graficas
la densidad óptica (DO) a través del
obtenidas es la que tiene un patrón
tiempo, en las diferentes
menos normal, las variaciones son más
combinaciones de concentración de
drásticas, aunque tiende, al igual que
glucosa (1%, 5%, 10%). Finalmente
 en las otras dos concentraciones de
GLUCOSA 5%
glucosa, a aumentar severamente en la
1,6 1,344
última medida. 1,4
1,2
0,911
1
GLUCOSA 1 % 0,684

DO
0,8
1,4 0,6 0,456
1,274 0,345
1,2 0,4 0,229 0,272
0,2
1 0,892
0
0,8 0,712 8:50 9:50 10:30 11:50 12:30 13:30 14:30
DO

0,6 TIEMPO (HORAS)

0,417
0,4 0,256
0,2 0,105 0,08 Grafica 2. Resultados del crecimiento de
0 S.cerevisiae, a una concentración de glucosa
8:50 9:50 10:30 11:50 12:30 13:30 14:30
TIEMPO (HORAS) del 5% durante un tiempo de 6 horas.

Grafica 1. Resultados del crecimiento de

En la gráfica 2, se observa que la
S.cerevisiae a una concentración de glucosa
población de la levadura siempre está
del 1% durante un tiempo de 6 horas.
en crecimiento, y se podría decir que
los 3 primeros tiempos corresponden a
En la gráfica 1, se puede evidenciar
la fase de latencia, esto último no se
que la medición de la DO de las 12:50
puede afirmar debido a que las
tuvo un crecimiento de población muy
variaciones no son muy drásticas.
elevado, en la última medición que
corresponde a las 14:50 se observa el
valor máximo en la DO de 1,274, esta GLUCOSA 10%
3,5 2,994
medida es la más pequeña,
3
comparándola con los otro dos datos 2,5 2,146
2 1,718
máximos obtenidos de los Erlenmeyer 1,278 1,386
DO

1,5 1,132 1,138

con diferentes concentraciones de 1
glucosa. 0,5
0
8:50 9:50 10:30 11:50 12:30 13:30 14:30
TIEMPO (HORAS)

Grafica 3. Resultados del crecimiento de

S.cerevisiae, a una concentración de glucosa
del 10% durante un tiempo de 6 horas.

La mejor condición que ha favorecido
en crecimiento de la S.cerevisiae
corresponde a la concentración de
glucosa al 10% como se muestra en la
gráfica 3, la cual ha permitido la
velocidad de crecimiento más elevada,
aunque el tiempo de latencia fue más
largo, tardo las 4 primeras horas, y el
de crecimiento se presentó de forma
suave desde la medición número 5, el
dato obtenido en esta medición
corresponde a 1,718, el dato obtenido
en la última medición es
aproximadamente 3 veces más grande
que el obtenido en la primera medición.
Es importante aclarar que a esta
concentración fue necesario hacer
dilución desde la primera medida,
porque el valor de la absorbancia
excedía la unidad.
CONCLUSIONES
La levadura S.cerecisiae
metaboliza eficientemente la
glucosa esto se ve evidenciado
en el crecimiento grande y
continuo en los diferentes
medios a los que fue expuesta,
en unas se presenta de manera
más rápida y con mayor número
de organismos.
Se deduce que el crecimiento
de la S.cerevisiae es
directamente proporcional a la
concentración de glucosa del
medio al que está expuesta la
levadura, esto solo se puede
afirmar para las 3 variaciones
de concentraciones de glucosa
utilizadas en el laboratorio,
también se observa que la
levadura S.cerevisiae tuvo un
mayor crecimiento en el medio
de cultivo con una
concentración de glucosa del
10% donde se evidencio un
crecimiento mayor, alcanzando
una densidad óptica de 2,994
por el contrario la menor
densidad óptica se obtuvo en el
medio de cultivo con
concentración de glucosa del
1%, con una medición de 0,08.
Se puede decir que la fase de
latencia del hongo estudiado
también es directamente
proporcional a la concentración
de glucosa, en la concentración
más baja se demoró 2 horas, en
el siguiente, 3 horas, y en la
concentración de glucosa más
elevada tardó 4 horas, sin
embargo Muchos de los datos
obtenidos se pudieron ver
afectados por el método
utilizado, ya que al agitar la
muestra quedan las partículas
suspendidas y el Cambridge: Cambridge
espectrofotómetro no diferencia University Press. 1990, 950p.
los microorganismos muertos
de los que se adaptaron al
medio. El no agitar bien puede
producir algunas variaciones de
los datos.
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