DATOS, CÁLCULOS Y RESULTADOS.

Se prepararon 500mL±0,20mL de solución de HCl al 0,1M los cuales se utilizaron

como solvente en todas las soluciones a lo largo de la práctica.
Para realizar los estándares de riboflavina se preparó una solución patrón de la
vitamina al 55,2±0,8 mg/L. para esta solución inicialmente se pesaron
0,0069g±0,0001g de estándar de riboflavina que se llevaron a 50mL±0,05mL, de
esta solución se tomaron 20mL±0,03mL y se diluyeron en otros 50mL±0,05mL.
Todos los volúmenes se completaron con la solución de HCl 0,1M.
6,4𝑚𝑔 20𝑚𝐿 1000𝑚𝐿
× × = 51,2 𝑝𝑝𝑚 𝑑𝑒 𝑟𝑖𝑏𝑜𝑓𝑙𝑎𝑣𝑖𝑛𝑎
50𝑚𝐿 50𝑚𝐿 𝐿

𝑆𝑅 𝑆𝑥 2 𝑆𝑦 2 Sz 2
= √( ) + ( ) + ( ) …
𝑅 x y z
Ec.1. calculo de la incertidumbre

𝑆𝑅 0,0001 2 0,05 2 0,03 2

= √( ) +2×( ) +( ) = 0,01463
51,2 0,0064 50 20

𝑆𝑅 = 0,84
51,20 ± 0,84 ppm

Los estándares se prepararon de la siguiente manera: en matraces ámbar de

50mL±0,05mL se agregaron volúmenes de la solución patrón como se muestra en
la siguiente tabla en la que se incluye el blanco.
Tabla 1. Volúmenes agregados a los estándares y su señal.
Número de estándar Volumen (mL) ppm de riboflavina

Blanco 0 0
1 1±0,007 1,104±0,017
2 1,5 ±0,008 1,536±0,025
3 2±0,01 2,048±0,032
4 3±0,01 3,072±0,047
5 4±0,015 4,096±0,064

El cálculo de los ppm se realizó de la siguiente forma.

𝟏𝒎𝑳 × 51,2𝑚𝑔
= 1,024𝑝𝑝𝑚
1000𝑚𝐿 × 0,05𝐿

𝑆𝑅 0,84 2 0,007 2 0,05 2

= √( ) +( ) +( ) = 0,0171
1,024 51.2 1 50
 𝑆𝑅 = 0,017𝑝𝑝𝑚
1,104± 0,017 ppm

Con los datos anteriores se los volúmenes de agregados para los estándares y
usando el espectrofluorímetro (Jasco FP8500) para determinar las señales de
intensidad de emisión con las que se realizó la siguiente curva

Curva de patrón externo

1000
900
800
Intensidad de emision

700
600
500
400
300
200
100
0
0 1 2 3 4 5 6
Concentración (ppm)

Grafico 1. Curva de calibración por patrón externo.

Tabla 2. Datos de la curva de calibración y señal de la muestra.

ppm de riboflavina Intensidad (señal)

0 0
1,104±0,017 250,732
1,536±0,025
374,679
2,048±0,032 598,031
3,072±0,047
797,941
4,096±0,064 913,930
Muestra Intensidad (señal)
1 624,744
2 629,374
promedio 627,059

Tabla 3. Datos de la regresión correspondiente a la curva de patrón externo grafica 1.

Intercepción (b) 57,5875658

Incertidumbre (b) 80,4644952
Pendiente (m) 223,294127
Incertidumbre (m) 30,8627097
Coeficiente de correlación múltiple 0,972520382
Coeficiente de determinación R^2 0,945795894
R^2 ajustado 0,927727859
Error típico 74,79906586
Observaciones 5

Para preparar la solución que contenía la muestra, se inició tomando 2 mL de la

ampolleta complejo b que se llevó al aforo en un matraz de 50 mL para formar una
solución de 200 ppm (SlnA). De la anterior solución se tomaron 1 mL y se llevaron
a 50 mL formando una solución de 4 ppm (Sln B), y finalmente de esta solución se
tomaron 15 mL y se llevaron a 50 mL (Sln C) a esta última solución se le tomaron
las lecturas con el instrumento.

𝑆𝑅 0,05 2 0,01 2
= √( ) +( ) = 0,0051
200 50 2

5 𝑚𝑔 𝑅𝑖𝑏𝑢𝑓𝑙𝑎𝑣𝑖𝑛𝑎
2,00 ± 0,01 𝑚𝐿 𝑎𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎 ∗
1 𝑚𝐿 𝑎𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎
1 1000 𝑚𝐿
∗ ∗ = 200,00 ± 1.02 𝑝𝑝𝑚
50 ± 0,05𝑚𝐿 1𝐿

𝑆𝑅 1.02 2 0,007 2 0,05 2

= √( ) +( ) +( ) = 0,009
4 200 1 50

200±1,02 𝑚𝑔 𝑅𝑖𝑏𝑢𝑓𝑙𝑎𝑣𝑖𝑛𝑎 1
1,00 ± 0,007 𝑚𝐿 ∗ 1000 𝑚𝐿 𝑎𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎
∗ 50 ±0,05𝑚𝐿

1000 𝑚𝐿
∗ = 4,00 ± 0.04 𝑝𝑝𝑚
1𝐿

𝑆𝑅 0,04 2 0,03 2 0,05 2

= √( ) +( ) +( ) = 0,010
1,2 4 15 50

4±0,04 𝑚𝑔 𝑅𝑖𝑏𝑢𝑓𝑙𝑎𝑣𝑖𝑛𝑎 1
15,00 ± 0,03𝑚𝐿 ∗ ∗
1000 𝑚𝐿 𝑎𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎 50 ±0,05𝑚𝐿

1000 𝑚𝐿
∗ = 1,2 ± 0.012 𝑝𝑝𝑚
1𝐿

-Determinación de la concentración de riboflavina en la muestra.

 Se calculó la concentración de riboflavina en la muestra, a partir de la
aproximación:

I= KC
Ec.2

Donde I es la intensidad que será debidamente proporcional a la concentración del

analito por una constante. Por ello a partir de la curva de calibración y por la ley de
beer se puede interpolar la concentración de la muestra obteniéndose como
resultado

Y = m(x) + b
Ec.3
Dónde:
Y = Valor de intensidad de la muestra
m= La pendiente
X= concentración de muestra
b = punto de corte con el eje (intercepto)

Despejando:
y−b
x=
m

𝑆𝑅 1 1 𝑦̅ − 𝑦̅ 2 1
𝑆𝑥𝑜 = √ + +( 𝑜 ) ∗ = 0,281
𝑏 𝑀 𝑛 𝑚 𝑆𝑥𝑥

624,444 − 57,587
x1 = = 𝟐, 𝟓𝟒𝟎 ± 𝟎, 𝟐𝟖𝟏𝒑𝒑𝒎 𝒓𝒊𝒃𝒐𝒇𝒍𝒂𝒗𝒊𝒏𝒂
223,294

𝑆𝑅 0,281 2 0,05 2 0,007 2 0,03 2 0,01 2

= √( ) +3×( ) +( ) +( ) +( ) = 0,107
10,583 2,540 50 1 15 2

2,722𝑚𝑔 0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐶 0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐵

× ×
𝐿 𝑠𝑙𝑛 𝐶 0,015𝐿𝑆𝑙𝑛 𝐵 0,001𝐿𝑆𝑙𝑛𝐴
0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐴 𝟏𝟎, 𝟓𝟖𝟑
× = ± 𝟏, 𝟏𝟕𝟒 𝒅𝒆 𝑽. 𝑩𝟐 𝒆𝒏 𝒍𝒂 𝒂𝒎𝒑𝒐𝒍𝒍𝒆𝒕𝒂
2 𝑚𝐿 𝐴𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎 𝒎𝑳

𝑆𝑅 1 1 𝑦̅ − 𝑦̅ 2 1
𝑆𝑥𝑜 = √ + +( 𝑜 ) ∗ = 0,282
𝑏 𝑀 𝑛 𝑚 𝑆𝑥𝑥
 629,734 − 57,587
x1 = = 𝟐, 𝟓𝟔𝟐 ± 𝟎, 𝟐𝟖𝟐𝒑𝒑𝒎 𝒓𝒊𝒃𝒐𝒇𝒍𝒂𝒗𝒊𝒏𝒂
223,294

𝑆𝑅 0,282 2 0,05 2 0,007 2 0,03 2 0,01 2

= √( ) +3×( ) +( ) +( ) +( ) = 0,107
10,675 2,562 50 1 15 2

2,748𝑚𝑔 0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐶 0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐵

× ×
𝐿 0,015𝐿𝑆𝑙𝑛 𝐵 0,001𝐿𝑆𝑙𝑛𝐴
0,05𝐿 𝑆𝑙𝑛 𝐴 𝟏𝟎, 𝟔𝟕𝟓𝒎𝒈
× = ± 𝟏, 𝟏𝟖𝟒 𝒅𝒆 𝑽. 𝑩𝟐 𝒆𝒏 𝒍𝒂 𝒂𝒎𝒑𝒐𝒍𝒍𝒆𝒕𝒂
2 𝑚𝐿 𝐴𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎 𝒎𝑳
𝑥̅ = 2.735 𝑝𝑝𝑚
10,629 𝑚𝑔
𝑥̅ = 𝑉. 𝐵2 𝑎𝑚𝑝𝑜𝑙𝑙𝑒𝑡𝑎
𝑚𝐿
Se promediaron lo valores obtenido de las concentraciones y se procedió a
calcular el porcentaje de error respecto al valor teórico de la etiqueta del complejo
B (5 mg/ mL).

% 𝐸𝑟𝑟𝑜𝑟 =
|𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜 − 𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑒𝑥𝑝𝑒𝑟𝑖𝑚𝑒𝑛𝑡𝑎𝑙|
𝑥100
𝑉𝑎𝑙𝑜𝑟 𝑡𝑒𝑜𝑟𝑖𝑐𝑜
Ec.4

|5 − 10,593|
𝑥100 = 111,86 %
5
|5 − 10,675|
𝑥100 = 113,5%
5

Promedio=112,68%

Se procedió a calcular el límite de detección y de cuantificación teniendo en cuenta

que la desviación obtenida fue de aproximadamente 0,328 y que b es la pendiente.

Límite de detección

𝑆𝑅 74,799
3𝑥 = 3𝑥 = 1.005
𝑏 223,294

Límite de cuantificación
 𝑆𝑅 74,799
10 𝑥 = 10 𝑥 = 3.350
𝑏 223,294