Aminoácido (ppm)

HPLC U.V.
46,06 46,01
46,06 45,27
45,82 46,21
46,11 46,23
45,75 46,5
46,27 46,03
46,13 45,21
46,34 46,58
46,3 45,53
45,65 46,01

PARA LA MEDICON POR HPLC

1. Para hallar la dispersión para los datos obtenidos por HPLC empleando t-student con
un nivel de confianza del 95%, primero determinamos los grados de libertad (N)
usando

𝑁 = 𝑛 − 1, 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑛 𝑒𝑠 𝑒𝑙 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠

𝑵=𝟗
Con lo que obtenemos un valor para t (95%) = 2.26, proveniente de la tabla de t-student
del nivel de significancia para una prueba t de dos colas.

Y usando la fórmula:

𝐼𝐶 = 𝑥̅ ± 𝑡𝑠/√𝑛

Hallamos el intervalo de confianza que es una medida de la dispersión de los datos,

donde:
∑𝑛𝑖=1 𝑥𝑖
𝑥̅ = = 46.05 𝑝𝑝𝑚 , 𝑒𝑠 𝑙𝑎 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑎
𝑛

∑𝑛 (𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2
𝑠 = √ 𝑖=1 = 0.24 𝑝𝑝𝑚 , 𝑒𝑠 𝑙𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑛−1

Donde el IC queda:
0.24 𝑝𝑝𝑚
𝐼𝐶 = 46.05 𝑝𝑝𝑚 ± 2.26𝑥 = 46.05 ± 0.17 𝑝𝑝𝑚
√10

Por lo que el intervalo de confianza o dispersión de los datos es:

 [45.88 𝑝𝑝𝑚 − 46.22 𝑝𝑝𝑚]

Lo cual significa que es relativamente bajo 0.34 debido a que la desviación estándar no fue
muy grande, lo cual significa que los datos tienen una dispersión no tan alta y el método posee
cierta precisión.

2. La desviación estándar se calculó como;

∑𝑛 (𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2
𝑠 = √ 𝑖=1 = 0.24 𝑝𝑝𝑚
𝑛−1

3. El coeficiente de variación Cv o desviación estándar relativa RDS, se calcula usando

𝑛 2
√∑𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑥̅ ) 𝑠
𝑛−1
𝑅𝑆𝐷 = =
∑𝑛𝑖=1 𝑥𝑖 𝑥̅
𝑛

0.24 𝑝𝑝𝑚
𝑅𝑆𝐷 = = 0.0052
46.05 𝑝𝑝𝑚

Su pequeño valor muestra una homogeneidad relativamente alta.

4. El error relativo (𝜀𝑟 ) y absoluto (𝜀𝑎 ) se obtiene mediante:

∑𝑛𝑖=1|𝑥̅ − 𝑥𝑖 |
𝜀𝑟 = 𝑛
𝑥̅
∑𝑛𝑖=1|𝑥̅ − 𝑥𝑖 |
𝜀𝑎 =
𝑛
De donde obtenemos;

𝜀𝑟 = 0.0040
𝜀𝑎 = 0.19 𝑝𝑝𝑚
El error absoluto se define de la siguiente manera:

𝐸𝑎 = |𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |

Mientras que el error relativo se define como:

|𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |
𝐸𝑎 =
𝑉𝑅
 De donde obtenemos:
𝐸𝑎 = |𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 | = 0.05

|𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |
𝐸𝑎 = = 0.0011
𝑉𝑅

Lo cual nos dice que en la medición podemos estar cometiendo un error de 0.19 ppm
respecto al valor medio, lo que indica una precisión es fiable, pero podría ser mejor en
cuanto a la menor dispersión de los datos.

PARA MEDICION POR U.V.

1. Para hallar la dispersión para los datos obtenidos por HPLC empleando t-student con
un nivel de confianza del 95%, primero determinamos los grados de libertad (N)
usando

𝑁 = 𝑛 − 1, 𝑑𝑜𝑛𝑑𝑒 𝑛 𝑒𝑠 𝑒𝑙 𝑛𝑢𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑐𝑖𝑜𝑛𝑒𝑠

𝑵=𝟗
Con lo que obtenemos un valor para t (95%) = 2.26, proveniente de la tabla de t-student
del nivel de significancia para una prueba t de dos colas.

Y usando la fórmula:

𝐼𝐶 = 𝑥̅ ± 𝑡𝑠/√𝑛

Hallamos el intervalo de confianza que es una medida de la dispersión de los datos,

donde:
∑𝑛𝑖=1 𝑥𝑖
𝑥̅ = = 45.96 𝑝𝑝𝑚, 𝑒𝑠 𝑙𝑎 𝑚𝑒𝑑𝑖𝑎
𝑛

∑𝑛𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2
𝑠= √ = 0.47 𝑝𝑝𝑚 , 𝑒𝑠 𝑙𝑎 𝑑𝑒𝑠𝑣𝑖𝑎𝑐𝑖𝑜𝑛 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
𝑛−1

Donde el IC queda:
0.47 𝑝𝑝𝑚
𝐼𝐶 = 46.05 𝑝𝑝𝑚 ± 2.26𝑥 = 45.96 ± 0.33 𝑝𝑝𝑚
√10
Por lo que el intervalo de confianza o dispersión de los datos es:
[45.63 𝑝𝑝𝑚 − 46.29 𝑝𝑝𝑚]

Lo cual significa que es bastante alto 0.66 ppm debido a que la desviación estándar fue muy
grande, lo cual significa que los datos tienen una alta dispersión y el método puede carecer de
precisión.

2. La desviación estándar se calculó como;

∑𝑛 (𝑥𝑖 − 𝑥̅ )2
𝑠 = √ 𝑖=1 = 0.47 𝑝𝑝𝑚
𝑛−1

3. El coeficiente de variación Cv o desviación estándar relativa RDS, se calcula usando

𝑛 2
√∑𝑖=1(𝑥𝑖 − 𝑥̅ ) 𝑠
𝑛−1
𝑅𝑆𝐷 = 𝑛 =
∑𝑖=1 𝑥𝑖 𝑥̅
𝑛

0.47 𝑝𝑝𝑚
𝑅𝑆𝐷 = = 0.010
45.96 𝑝𝑝𝑚

Su valor relativamente alto muestra una falta de homogeneidad alta de los datos
obtenidos.

4. El error relativo (𝜀𝑟 ) y absoluto (𝜀𝑎 ) se obtiene mediante:

∑𝑛𝑖=1|𝑥̅ − 𝑥𝑖 |
𝜀𝑟 = 𝑛
𝑥̅
∑𝑛𝑖=1|𝑥̅ − 𝑥𝑖 |
𝜀𝑎 =
𝑛
De donde obtenemos;

𝜀𝑟 = 0.0091
𝜀𝑎 = 0.42 𝑝𝑝𝑚

El error absoluto se define de la siguiente manera:

𝐸𝑎 = |𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |
Mientras que el error relativo se define como:

|𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |
𝐸𝑎 =
𝑉𝑅

De donde obtenemos:
𝐸𝑎 = |𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 | = 0.04

|𝑉𝑅 − 𝑉𝑜 |
𝐸𝑎 = = 0.00087
𝑉𝑅

Lo cual nos dice que en la medición podemos estar cometiendo un error de 0.42 ppm
respecto al valor medio, lo que indica una precisión no tan fiable como el método de
HPLC.

ANALISIS

Según los resultados podemos decir que el método de HPLC resulta ser mas preciso
debido a que presento valores menos dispersos, como lo evidencio su desviación
estándar, error absoluto y relativo respecto al método espectroscópico de UV, así como
también su rango en el caso del método cromatográfico 0.34 ppm contra 0.66 ppm de
los datos recogidos por el equipo de UV, sin embargo para efectos prácticos ambas
técnicas pueden proporcionar mediciones confiables siempre que el equipo este
correctamente calibrado. Problemas de dispersión se pueden solucionar si se toma una
población mas grande de datos, esto es si se hacen mas mediciones (mayor a 20) en
donde se pueda tener con mayor certeza la concentración del aminoácido.