“AÑO DEL DIALOGO Y LA RECONCIALIACION NACIONAL”

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRÁCTICA N°3

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

CURSO BIOQUIMICA Y NUTRICION

DOCENTE HERNANDEZ PACHECO MIRTHA ELIZABETH
ALUMNO SIGUAS ESPINO GUSTAVO ADOLFO
“AÑO DEL DIALOGO Y LA RECONCIALIACION NACIONAL”

UNIVERSIDAD PRIVADA SAN JUAN BAUTISTA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA HUMANA

PRÁCTICA N°3

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMATICA

CURSO BIOQUIMICA Y NUTRICION

DOCENTE HERNANDEZ PACHECO MIRTHA ELIZABETH
ALUMNO SIGUAS ESPINO GUSTAVO ADOLFO
I. OBJETIVOS

 Establecer los factores que modifican la actividad enzimática

 Estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimática,
como la temperatura, el pH, la concentración del sustrato y la
enzima y la presencia de inhibidores.
 Confrontar los conocimientos teóricos adquiridos en las clases
con las actividades experimentales en el laboratorio.

II. MARCO TEORICO

Los enzimas son biomoléculas especializadas en la catálisis de las

reacciones químicas que tienen lugar en la célula. Son muy eficaces
como catalizadores ya que pueden aumentar la velocidad de las
reacciones mucho más que nada artificial, y además son altamente
específicos ya que cada uno de ellos induce la transformación de un
solo tipo de sustancia y no de otras que se puede encontrar en el
medio de reacción.

FACTORES QUE AFECTAN A LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

Diferentes factores ambientales pueden afectar a la actividad
enzimática. Destacaremos dos: el pH y la temperatura.

EFECTO DEL pH:

El pH es otro factor que influye en la actividad enzimática, debido a
que el pH influye en la ionización de los grupos funcionales de los
aminoácidos que forman la proteína enzimática. Cada enzima realiza
su acción dentro de un determinado intervalo de pH, dentro de este
rango habrá un pH óptimo donde la actividad enzimática será
máxima. Por debajo del pH mínimo o por encima del pH máximo, la
enzima se inactiva y se queda desnaturalizada. En la mayoría de las
enzimas, el pH óptimo está próximo a la neutralidad, aunque hay
excepciones. La mayoría de las enzimas presentan un pH óptimo
para el cual su actividad es máxima; por encima o por debajo de ese
pH la actividad disminuye bruscamente. Este efecto se debe a que, al
ser las enzimas de la naturaleza proteica, al igual que otras
proteínas, se desnaturalizan y pierden su actividad si el pH varía más
allá de los límites estrechos. De ahí la cuenta de la importancia
biológica de los sistemas tampón.

En la mayor parte de los casos, el pH óptimo está próximo a la

neutralidad, en consonancia con el pH intracelular, pero existen
enzimas con pH óptimo muy diverso según el nivel del pH del medio
en el que actúan (las enzimas proteolíticas del jugo gástrico tienen
pHs óptimos próximos a 2 ya que este es el pH del dicho jugo). Por
último, existen algunas enzimas a los que el pH no afecta en
absoluto.

EFECTO DE LA TEMPERATURA:

Alabama igual What ocurre estafa la mayoría Delaware las

reacciones químicas, la velocidad de las reacciones catalizadas por
enzimas se incrementan con la temperatura. La variación de la
actividad enzimática con la temperatura es diferente de unos
enzimas a otros en función de la barrera de energía de activación de
la reacción catalizada. Sin embargo, una diferencia de lo que ocurre
en otras reacciones químicas, en las reacciones catalizadas por
enzimas se produce cuando se alcanza una temperatura crítica. Este
efecto no es más que un reflejo de la desnaturalización térmica de la
enzima cuando se alcanza dicha temperatura. La Temperatura
influye en la actividad enzimática. En general por cada 10ºC que
aumente la temperatura la velocidad de la reacción aumenta de 2 a 4
veces. Esta regla se cumplió y hasta que la temperatura alcanza un
valor máximo (T ° óptima) donde la actividad es máxima. Esto se
debe a que al aumentar la T ° aumenta el movimiento de las
moléculas y, por tanto, aumenta la probabilidad de encontrarse entre
el S y el E. Si la T ° aumenta por encima de la T ° óptima, disminuye
e incluso cesa la actividad enzimática debido a que la enzima se
desnaturaliza. Cada enzima posee una temperatura óptima, en las
enzimas humanas suele estar alrededor de 37ºC. Los animales
pueden ser utilizados para regular la Tª corporal, se ven obligados a
hibernar en la estación fría porque la actividad de sus enzimas es
baja en las temperaturas.

INHIBIDORES:

Son compuestos químicos que se unen en la enzima, en distintos

puntos del mismo y disminuyen o incluso impiden su actividad. Estos
compuestos pueden ser de varios tipos: iones, moléculas orgánicas
ya veces el producto final de la reacción. A la acción que realiza la
inhibición de la denominación. La inhibición puede ser:

· Inhibición irreversible: cuando el inhibidor impide permanentemente

la actividad enzimática, bien porque se convierte en una forma
permanente con grupos funcionales importantes del centro o bien
porque altera su estructura. A estos inhibidores se les denomina
venenos ya la inhibición que realiza la llamada envenenamiento de la
enzima. Ej. La penicilina que inhibe las enzimas que sintetizanla
pared bacteriana. El ion cianuro actúa sobre el citocromo oxidasa
(enzima respiratoria).

· Inhibición reversible: El inhibidor se une a la enzima de forma

temporal a través de los enlaces móviles e impide el normal
funcionamiento del error, pero no la inutiliza permanentemente.

Puede ser de dos tipos:

Competitiva: El inhibidor es similar al sustrato y se puede unir al
centro activo de la enzima que impidiendo que haga el sustrato. Es
decir, ambos, inhibidor y sustrato compiten por unirse al centro activo
de la enzima. La acción suele anularse en la concentración del
sustrato

No competitiva: El inhibidor no compite con el sustrato, puede actuar

de 2 formas:

-Sobre el enzima, uniéndose a el lugar diferente al centro activo y

modificando su estructura lo que dificulta que el enzima se pueda
unir con el sustrato.
-Sobre el complejo ES uniéndose a él y dificultando su
desintegración y por lo tanto la formación de los productos.
III. DESARROLLO EXPERIMENTAL

EXPERIMENTO A
EFECTO DE LA CONCENTRACIÓN DE LA ENZIMA, DE LA
TEMPERATURA Y DEL ION CLORO SOBRE LA ACTIVIDAD DE
LA AMILASA SALIVAL

1) Preparar los siguientes tubos:

2) Colocar los tubos I al V en un baño de agua a 37°C, durante 5

minutos. El tubo VI servirá de comparación para ver el efecto de
la temperatura sobre la acción enzimática por lo que se deja a
temperatura ambiente.
3) Agregar la solución de Ácido clorhídrico, 0.5 ml en cada uno de
los 6 tubos.

4) De los tubos que estuvieron en reacción de baño maría, agregar

0.5 ml a agregar a cada uno de los tubos pequeños.

5) Agregar la solución yodada, 0.5 ml

Solucion
Yodada
6) Mezclar y dejar en reposo por 10 min.
7) Leer las absorbancias al espectrofotómetro a 650 nm.

8) La diferencia de las absorbancias entre los tubos nos indicará la

actividad enzimática para cada tubo.
9) Graficar en papel milimetrado: Actividad enzimática en el eje Y vs
concentración de la enzima [E] en el eje X.
IV. CUESTIONARIO

1.- CUÁL ES LA IMPORTANCIA DEL KM.

La Km nos da una idea la afinidad que tiene el enzima por su sustrato, cuanto
mayor es Km menor es la afinidad (predominan las formas E y S libres), cuanto
menor es Km mayor es la afinidad (predomina la forma ES).

2.- QUÉ EFECTOS PRODUCE LAS ALTAS TEMPERATURAS SOBRE

LAS ENZIMAS.

Una de las razones la temperatura del cuerpo está tan cuidadosamente

controlada para permanecer en un rango estrecho es que afecta a cómo las
diferentes funcionan las reacciones químicas. Los cambios de temperatura
pueden afectar a la actividad de las proteínas especiales conocidas como
enzimas, que son necesarias para muchos de los procesos esenciales para
la vida.

Mecanismo enzimático

Las enzimas son proteínas que todos los organismos utilizan para provocar
cambios químicos, MedlinePlus, explica. Una de las cosas interesantes
acerca de enzimas es que a pesar de que pueden provocar un cambio
permanente en la estructura química de una sustancia, las enzimas sí
mismos no cambian, lo que significa que una molécula de enzima puede ser
utilizado en varias ocasiones. Las enzimas pueden ser utilizados para hacer
nuevas estructuras y descomponer compuestos, y se pueden encontrar en
virtualmente cada célula viva porque la función de la enzima es esencial
para la vida.

La temperatura y la energía cinética

En cierta medida, el aumento de temperaturas acelera la velocidad a la que

las enzimas trabajo, Worthington Biochemical Corporation explica. Cuando
se incrementa la temperatura, las moléculas se unen con más frecuencia y
con mayor energía. Debido a las reacciones químicas necesitan una cierta
cantidad de energía que se produzca, el aumento de la energía de las
moléculas que participan en la reacción se puede acelerar la velocidad a la
que se produce la reacción. En consecuencia, las enzimas son capaces de
trabajar más rápidamente en temperaturas más altas, pero sólo hasta cierto
punto.
 La temperatura y la desnaturalización

Aunque el aumento de las temperaturas puede hacer que las enzimas

funcionan más rápidamente, si la temperatura sube demasiado la enzima
deja de funcionar. Las enzimas se basan en que tiene una estructura
tridimensional muy específico para trabajar derecha. Si la temperatura
alrededor de una enzima se pone demasiado alta, la enzima pierde su
forma, que se conoce como la desnaturalización, y deja de trabajo. La
mayoría de las enzimas se convertirán desnaturalizado a temperaturas muy
altas.

Los termófilos

Una de las excepciones a la regla general de que muy altas temperaturas

causan la desnaturalización de la enzima ocurre con termófilos. Los
termófilos, de acuerdo con la Universidad de Colorado, son organismos que
viven a temperaturas muy altas, como en fuentes geotérmicas y de metro,
donde la temperatura puede ser más caliente. Estos organismos tienen
enzimas que están diseñados para funcionar de manera óptima a
temperaturas muy altas para permitir que los organismos a vivir.

3.- COMO SE CLASIFICAN LAS ENZIMAS?

En función de su acción catalítica específica, las enzimas se clasifican en 6

grandes grupos o clases:

Clase 1: OXIDORREDUCTASAS

Clase 2: TRANSFERASAS

Clase 3: HIDROLASAS

Clase 4: LIASAS

Clase 5: ISOMERASAS

Clase 6: LIGASAS

4.- A QUE SE LLAMAN ZIMÓGENOS E ISOENZIMAS.

Zimógeno. - son precursores inactivos de las enzimas. Observe que este

concepto es diferente a decir que son “enzimas inactivas”. Una enzima
inactiva es una enzima que ha perdido su actividad debido a diferentes
factores, como factores físicos, químicos o aun metabólicos.
Un zimógeno es una molécula que necesita ser activada para convertirse en
una enzima activa, por lo que es más exacto decir que los zimógenos son
precursores de enzimas, que decir que son enzimas inactivas. Las enzimas
digestivas, algunos factores de la coagulación y otras proteínas son
sintetizadas como zimógenos.

Isoenzimas. - son proteínas con diferente estructura pero que catalizan la

misma reacción. Con frecuencia, las isoenzimas son oligómeros de
diferentes cadenas peptídicas, y usualmente difieren en los mecanismos de
regulación y en las características cinéticas.

Desde el punto de vista fisiológico, la existencia de isoenzimas permite que

haya enzimas similares con diferentes características, “personalizadas” de
acuerdo a los requerimientos específicos del tejido o a determinadas
condiciones metabólicas.

5.- QUE SON COFACTORES Y MENCIONE EJEMPLOS.

Los cofactores enzimáticos son sustancias de diferente naturaleza química,

que participan en las reacciones enzimáticas debido a que las enzimas no
poseen en su estructura todos los grupos funcionales necesarios para llevar
a cabo la catálisis de todas las reacciones metabólicas; los cofactores no
son componentes obligados de todas las reacciones.

Los cofactores pueden ser iones inorgánicos que facilitan la unión enzima-
sustrato o estabilizan la estructura tridimensional de la enzima, o
constituyen por sí los centros catalíticos que ganan eficiencia y
especificidad al unirse a las proteínas.

V. CONCLUSIONES

Como producto del análisis de los resultados del análisis realizado en

el laboratorio, se pueden extraer las siguientes conclusiones:

 La temperatura es un factor determinante en las reacciones

enzimáticas porque acelera o retarda la acción de las enzimas, lo
que se evidencia con la producción de burbujas.
 Para que la catalasa funcione correctamente debe tener un nivel
de neutro y temperatura ambiente