Vous êtes sur la page 1sur 5

UNIVERSIDAD NACIONAL

AUTÓNOMA DE MÉXICO
FES ZARAGOZA

QUÍMICA FARMACÉUTICA BIOLÓGICA


CUARTO SEMESTRE
BIOQUÍMICA CELULAR Y DE LOS TEJIDOS I. LAB.
PRACTICA No. 8 y 9
 Extracción y análisis de lípidos de la yema
de huevo.c
 Análisis e identificación de lípidos de la
yema de huevo por cromatografía en capa
fina.
Equipo No. 8
Integrantes.
Domínguez López Karla Irene.
López Arrieta Meryt Karina.
Ramírez Sebastián Eva Natalia.
Macías Teniente Pamela.
Objetivos.
 Analizar las propiedades de los lípidos.
 Extraer los lípidos de la yema de huevo.
 Cuantificar fosfatos de lípidos fosforilados y no fosforilados.
 Analizar la importancia biológica de los lípidos presentes en la y la de huevo.

 Identificar los lípidos de la yema de huevo por medio de la técnica de


cromatografía en capa fina.
 Estudiar los fundamentos de la cromatografía en capa fina.

Resultados.

Bla Muestra de la yema de Solución patrón de fosfatos.


nco huevo.
.
No Fosforilados. Fosforila
dos.
Tubos - 1 2 3 4 5 6 7
Volumen de - 1.0 1.0 0.2 0.6 1.0 2.0 3.0
solución
problema/patró
n (ml)
𝐻2 𝑂 Agua 10. 9.0 9.0 9.8 9.4 9.0 8.0 7.0
destilada. 0
Reactivo 3 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4
Reactivo 4 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2
Absorbancia. 0 0.104 0.044 0.018 0.052 0.084 0.171 0.2
56
Concentración - - - 0.008 0.02 0.043 0.0878 0.1
de solución 7 318
patrón de
fosfato. (mg de
fosfato
monopotasico)
Picogramos de 2 6 10 20 30
fosfato.
Imagen 1. Cromatoplacas equipos 6, 8, 9, 10: reveladas con Ninhidrina, Molibdato, Yodo y Bismuto (de
izquierda a derecha).

Imagen 2.Cromatoplacas equipos 1, 2, 3, 4: reveladas con Molibdato, Yodo,Bismuto y Ninhidrina (de izquierda
a derecha).
Análisis de resultados.

Para los resultados de la cromatografía, se puede observar en las imágenes 1 y 2,


las placas con Ninhidrina nos muestran los lípidos que contienen grupos animo
primario y secundario, por lo tanto es evidente la presencia
de fostatidiletanolamina, esfingomielina y de lípidos totales. En las placas reveladas
con Molibdato se logran apreciar la presencia de fosfolípidos en general, por lo tanto
los lugares donde no se logra visualizar una mancha corresponde a los lípidos
no fosforilados (colesterol).
En las placas con Yodo, se logran apreciar las insaturaciones de los lípidos, es
decir, se logran ver las manchas de los lípidos con dobles enlaces, por lo tanto
se deberían apreciar 5 manchas, sin embargo solo se aprecian 2 por cada
aplicación y en algunos 3 manchas que corresponden a la fosfatidilcolina (mancha
superior), fosfatidiletanolamina (segunda mancha) y la esfingomielina (mancha
inferior), sin embargo por la apariencia de las manchas, podríamos pensar que la
segunda mancha puede ser que contenga también fosfatidilinositol debido a las
concentraciones teóricas de estos fosfolípidos en la yema de huevo.
En las placas reveladas con bismuto se pueden apreciar los fosfolípidos de colina,
por lo tanto se deberían de distinguir 2 manchas en ambas placas (fosfatidilcolinaen
la parte superior y esfingomielina en la parte inferior), sin embargo en la placa de la
Imagen 1 solo se aprecia una, esto puede ser debido a la concentración de estos
fosfolípidos.

Con respecto a la curva estándar podemos observar que el porcentaje de fósforo


es mayor en los no fosforilados, ya que fue de 5.32% contra 1.4% de fosforilados.
Esto podría deberse a una mala ejecución de la técnica, ya que las muestras
podrían estar contaminadas, o incluso pudo haber una confusión de las muestras
fosforilados y no fosforilados cuando se llevó a cabo la digestión, y la determinación
de fósforo. Sin embargo estos proc ntajes son cercanos a los reportados en la
literatura, de 3%.

Conclusión.

Se logró una identificación parcial de los fosfolípidos de la yema de huevo por medio
de la cromatografía en capa fina, ya que las placas cromatográficas nos muestran
algunos resultados, los cuales no son del todo confiables, puesto que muestran
algunas variaciones a las que se debieron obtener. También influyen factores como
la cantidad de muestra colocada en el punto de aplicación, asícomo el hecho de que
no fue la misma solución de yema de huevo de donde se sacaron todas las
muestras para la cromatografía de lípidos.
Mediante la cuantificación de fósforo contenido en los lípidos de la muestra, por el
método de Fiske-Subbarow, y el método de Kjeldahl, se determinó el porcentaje de
lípidos en la yema de huevo. Los resultando fueron 5.32% para no fosforilados y
1.4% para fosforilados, se concluye que los datos no son confiables ya qué hay
mayor porcentaje de fósforo en los que deberían ser no fosforilados por lo tanto se
llevó a cabo mal la técnica o hubo una confusión al llevar a cabo los métodos.

Bibliografía:
*Olsen, E. Métodos ópticos de análisis. Barelona; México: Reverte, 1986.
*Ayres G. Análisis químico cuantitativo. México: Oxford University Press, 2001.
Bibliografía:
*Blanco D, Garrido A, Teijón J, et al. Fundamentos de bioquímica estructural.
México: Alfaomega; 2005.
*Murray RK, Granner DK, Mayes PA, Rodwell VW. Harper: Bioquímica ilustrada.
28ª ed. México DF: McGraw-Hill Interamericana; 2010.