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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

FACULTAD DE INGENIERÍA QUIMICA


ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE INGENIERÍA QUÍMICA.

PROYECTO DE TESIS

I. GENERALIDADES
1. TITULO:
Efecto de la temperatura y concentración microbiana de Bacillus sp. en la
degradación de grasas de agua residual de curtiembre.

2. TIPO DE INVESTIGACION
Investigación Básica Desarrollo tecnológico
Investigación aplicada Innovación

3. NOMBRE DEL TESISTA

NOMBRE DE LA TESISTA KAROL AMÉRICA VERGARA POLO


Código 0511601608

Teléfono 044 272294

Email kjenny_20@hotmail.com

Dirección: Jr. Lima # 401 – La Esperanza.


Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
4. NOMBRE DEL ASESOR

APELLIDOS Y NOMBRES Moreno Eustaquio Walter

Categoría y Dedicación Auxiliar TC


Docente

Código 3309

Título Profesional Ingeniería Química

Grado Académico Maestro en Ciencias Económicas


Mención Administración de Negocios.
Departamento Académico Ingeniería Química

Teléfono 969819999

Email Wmoreno@unitru.edu.pe

Dirección Calle Isabel de Bobadilla Mz.C2 lote2


Urbanización Monserrate V Etapa.

5. LUGAR DE EJECUCIÓN DEL PROYECTO.


En la sede de la UNT: laboratorio de Residuos Sólidos y Peligrosos – Pabellón de
Ingeniería Ambiental.

6. PRESUPUESTO: S/. 2728.00

7. DURACIÓN DEL PROYECTO


INICIO: Noviembre 2017
TERMINO: Marzo 2018
8. CRONOGRAMA DE EJECUCIÓN DEL PROYECTO:

ETAPAS INICIO TERMINO Dedicación semanal


(Horas)
a. Recolección de datos. 4/10/2017 4/12/2017 15
b. Experimentación y 5/12/2017 5/02/2018 30
Análisis de resultados.

c. Redacción del informe 6/02/2018 6/04/2018 14


Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
9. RECURSOS DISPONIBLES.
9.1 Personal:
- 01Tesista
- 01Técnico de laboratorio.
9.2 Materiales y Equipos.
9.2.1 Materiales:
- Matraz Erlenmeyer de 250 ml Pirex 6 unidades.
- Caldo Nutritivo
- Aceite de oliva
- Agar yema de huevo
- Agar tween 80
- Asas bacteriológica
- Asa de diglasky
- Alcohol
- Mechero
- Agar nutritivo
- Botellas de vidrio
- Botellas de incubación de 250 a 300 mL
- Detergente
9.2.2 Equipos
- Estufa
- Cámara de bioseguridad
- Incubadora de aire o baño de agua
- Equipo de reflujo, constituido por balones o tubos de digestión de 500 o
250 mL de capacidad con boca 24/40 de vidrio esmerilado y condensador
Liebig, West, Friedrichs, Allihn o equivalente, de 300 mm, con unión 24/40
de vidrio esmerilado, y una plancha de calentamiento con regulador de
temperatura y potencia suficiente para producir al menos 1,4 W/cm2 de
superficie de calentamiento, o su equivalente.
9.2.3 Reactivos.
- Solución tampón de fosfato
- Solución de cloruro de calcio
- Solución de cloruro férrico
- Soluciones ácida y alcalina
- Solución de sulfito de sodio
- Solución de cloruro de amonio
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
- Solución estándar de dicromato de potasio
- Reactivo de ácido sulfúrico
- Sulfato ferroso de amonio (FAS)
- Sulfato mercúrico
- Ácido sulfámico.
9.3 Locales: Laboratorios de Residuos Sólidos y Peligrosos, ubicado en la Escuela de
Ingeniería Ambiental de la UNT.

10. PRESUPUESTO:

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto

Papelería en general, útiles y materiales de oficina

2.3.1 5.1 2 Papel bond A4 80 g 1 paquete 15,00

Papel Kraft 5 pliegues 2,50

Cuaderno de actas 1 unidad 20,00

Plumón indeleble 4 8,00

Bolígrafo 4 8,00

Etiquetas autoadhesivas 3 paquetes 9,00

Tijeras 4 8,00

SUBTOTAL SUBTOTAL 68,00

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto
2.3.2 1.2 1 Pasajes y gastos de
transporte:
…..
- Transporte local 200,00
……
- Transporte interprovincial 500,00
Subtotal 700,00
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto
2.3.1 1.1 Alimentos y bebidas:
- Refrigerio Global 600,00
Subtotal 600,00

1.1. Bienes de Inversión

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto
2.3.1 11.14 Láminas porta objeto 1 caja 6,00
1
Agar nutritivo 1 frasco 500

Laminillas porta objeto 1 caja 4,00

Algodón 1 Libra 17,00

Bolsas de polietileno con


1 paquete 20,00
cierre hermético

Encendedor 4 unidades 8,00

Cocina Eléctrica 1 unidad 30,00

Frasco hermético de boca 40


160,00
ancha unidades

Gotero de plástico 5 unidades 5,00

SUBTOTAL 750.00

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto
2.3.2 2.2 3 Servicio de internet:
- Internet 8 meses 480,00
Subtotal 480,00
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
1.2. Servicios

Naturaleza
Clasificador Cantidad Costo S/.
del gasto
2.3.2 2.4 4 Servicio de impresión,
encuadernación y
empastado:
- Empastados y ……… 100,00
encuadernados
- Fotocopias 300 copias 30,00
Subtotal 130,00

RESUMEN DEL PRESUPUESTO

Naturaleza
Clasificador Total S/.
del gasto
Papelería en general, útiles y materiales
2.3.1 5.1 2 68,00
de oficina
2.3.1 11.14
Repuestos y accesorios 700,00
1
Servicio de impresión, encuadernación y
2.3.2 2.4 4 600,00
empastado

2.3.2 1.2 1 Pasajes y gastos de transporte 750,00

2.3.1 1.1 Alimentos y bebidas 480,00


2.3.2 2.2 3 Servicio de internet 130,00
TOTAL 2728.00

FINANCIAMIENTO.
De S/. autofinanciado por la tesista.
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
II. PLAN DE INVESTIGACIÓN.

1. ANTECEDENTES Y FUNDAMENTACIÓN CIENTÍFICA, TÉCNICA O


HUMANÍSTICA.

A nivel mundial, ha surgido preocupación por el deterioro ambiental y de salud que


originan los residuos industriales, entre ellos los efluentes grasos. Al no existir una
estructura para la disposición final de estos residuos, las empresas adoptan
conductas de manejo, con sistemas de disposición final temporal o definitiva no
acordes a la normativa. El propósito de este trabajo estuvo dirigido a dos aspectos:
I- aislar cepas bacterianas lipolíticas endógenas de un residuo graso industrial (RGI)
y II-tratar biológicamente dicho residuo con un consorcio bacteriano preparado con
las cepas aisladas del mismo. A tales efectos, el RGI fue adicionado a un medio
mínimo mineral e incubado bajo condiciones de laboratorio, obteniéndose colonias
bacterianas, las cinco preponderantes, se asignaron a los géneros Pseudomonas
(cepas 1 y 2), Bacillus (cepas 3 y 4) y Enterobacter (cepa 5).
El consorcio bacteriano, una mezcla de las cepas aisladas, en 21 días y a
temperatura ambiente, degradó 341,5 mg de grasa (91,4 % de degradación); la carga
bacteriana superó 1010 UFC/mL, la DBO5,20º y DQO disminuyeron en un 33,6 % y
59,8 %, respectivamente, durante el mismo lapso de tiempo.
La actividad lipasa de las cepas, evaluadas a las 24 y 48 horas de tratamiento, se
detectó por titulación potenciométrica de los ácidos grasos liberados, usando aceite
de oliva como sustrato.
La actividad enzimática específica de las cepas, con un promedio de 0,500 mmoles
x min-1 x μg-1, osciló entre 0,141 y 0,158 mmoles x min-1 x μg-1 y las tasas de
actividad entre 8,8-12,2 mmol x min-1.
El consorcio bacteriano fue efectivo en eliminar el 90 % del volumen de residuos
grasos y olores desagradables de trampas de grasa de empresas procesadoras de
cerdos y aves, representando una herramienta útil para el tratamiento de estos
residuos. (Gonzalez D., Amaíz L., Medina L., Vargas R., Izzeddin N. y Valbuena O.,
2012, p. 105)

En este caso la temperatura ambiente es la temperatura de experimentación pero no


es una variable. La carga bacteriana si es variable independiente, llegando a más de
1010 UFC/mL. El consorcio bacteriano degrado grasa mediante la actividad lipolítica
de las cepas en un 90 % lo que indica que el género Bacillus si se puede aplicar en
los tratamientos de residuos grasos.

Se determinó cuál es el efecto del inóculo de un consorcio microbiano nativo en la


degradación de materia orgánica de las aguas residuales colectadas del canal de
regadío “Santa Rosa”- Distrito Santa Rosa, Provincia de Chepén 2015. Para llevar a
cabo el procesamiento de las muestras de agua residual, se utilizaron cuatro
biorreactores tipo Airlift de aireación interna, cada uno de los cuales contenía agua
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
a tratar, además se le agregó una concentración específica de consorcio microbiano
nativo (5%, 10%, 15%), proveniente del sedimento de estas mismas aguas y
constituidos por 5 diferentes cultivos bacterianos, y un testigo solo con agua residual.
El proceso fue monitoreado cada 48 horas durante 12 días; a una temperatura de 30
°C y un pH de 7 se evaluaron parámetros tales como Demanda Bioquímica de
Oxígeno, Recuento de Bacterias Aerobias Mesófilas Viables y Coliformes Totales.
Al realizar el análisis estadístico se llegó a la conclusión que una mayor
concentración de inóculo del consorcio microbiano nativo aislado (15%), se obtiene
una mayor degradación de la materia orgánica contenida en las aguas residuales del
canal de regadía “Santa Rosa” – Distrito Santa rosa, Provincia de Chepén. La
biorremediación para la eliminación de desechos grasos es una nueva vía alternativa
en biotecnología de lipasas (Mendoza Medina L. H., Ramírez Lecca J. L., 2016, p.
xvii).

El consorcio microbiano de aguas residuales nativo ha sido trabajado a diferentes


concentraciones, este caso en porcentajes, lo que significa una forma de trabajo
experimental con respecto a la muestra. La temperatura de trabajo sugerida es la
Temperatura de 30 ºC. lo que indica que las bacterias degradan mayor cantidad de
grasa sin disminuir su concentración y su posible aplicación.

Las lipasas bacterianas actualmente poseen diferentes aplicaciones como


resultados de la biodegradación los residuos grasos. Se ha producido biogás 0,6 L/g
de DQO a partir de la digestión anaeróbica por lipasas producidas por
Staphylococcus xylosus a partir de 25 % de grasa hidrolizada (Affes y col., 2017).

NZila (2017), encontró un consorcio bacteriano aislado de aguas residuales, capaz


de reducir el 80% de la demanda química de oxigeno (10 550 +/-2 828 mg /L), 80%
de nitrógeno y 57% de fósforo de las aguas residuales de grasa. Por otro lado, Cai
(2016), aisló a partir de un campo petrolífero, una Pseudomonas synxantha capaz
de reducir un 93% de los residuos grasos a ácidos grasos después de 12 horas a 30
ºC, constituyendo un valor potencial en la biodegradación de grasas en la industria.

El desarrollo de la biotecnología ha permitido contar con una variada gama de


productos compuestos constituidos fundamentalmente por enzimas y/o
microorganismos que garantizan el saneamiento del suelo y el agua en diversos
sectores.
Por otra parte, durante los últimos años se han desarrollado múltiples investigaciones
relacionadas con la metodología de administración de biomasa para el tratamiento y
sus posibilidades de acción. La aplicación de esta novedosa tecnología in situ
favorece la recuperación del equilibrio ecológico, al mantener la máxima de NO
CONTAMINAR, eliminando los olores desagradables, la no acumulación de residuos
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
orgánicos, la incorporación de microorganismos patógenos y homogenización de las
aguas servidas, entre otros.
En el presente trabajo se utilizaron productos biológicos de la Línea Kodesol de la
firma Española CODEMA para la degradación de la materia orgánica presente en
los residuales líquidos de las instalaciones turísticas seleccionadas para el estudio,
los mismos para su aplicación se desglosaron en tres etapas: choque, asentamiento
y optimización.
El tipo de producto y las concentraciones utilizadas obedecieron a las condiciones
de los residuales en cada caso. Como resultado, los parámetros analizados (DBO5,
DQO, Grasas y Aceites) disminuyeron en más de 50 % en un periodo de 6 meses,
demostrando la efectividad del tratamiento de la depuración microbiana de los
residuales. (Hernández Herrera O. C., Salas Trujillo R.A., p. 1)

La degradación de materia orgánica mediante bacterias comerciales constituye una


alternativa de tratamiento de residuos grasos y aceites logrando, en este caso, una
remoción del 50 %. Pudiendo utilizarse para comparar la eficiencia de bacterias
comerciales con otras endógenas.

Los microorganismos eficaces (EM®) han sido reportados como una alternativa
frente al problema ambiental de la contaminación hídrica, puesto que este consorcio
puede utilizar los compuestos contaminantes presentes en el agua residual
doméstica (ARD) como fuente de carbono y energía para su metabolismo y
crecimiento reduciendo así sus concentraciones en el agua.
El presente trabajo tuvo como objetivo monitorear algunos de los cambios
fisicoquímicos y microbiológicos que se presentaron en un ARD tras aplicar 3
diferentes concentraciones de EM®; evaluando su efecto, la relación entre
parámetros y de éstos con la calidad del agua, así como el efecto de la profundidad
en la acción de EM®. Adicionalmente, se busca una aproximación al funcionamiento
de EM® en este tipo de sistemas de tratamiento.
Para este fin se evaluaron tres dosis de EM® (1/10000, 1/5000 y 1/3000 v/v),
empleando tanques de 1.10 x 0.56 7 mm de espesor que contenían 110 L de ARD
cada uno (n=3). Se tomaron muestras del ARD en dos alturas (20 y 40 cm) a los 0,
10, 30 y 45 días analizando parámetros fisicoquímicos (OD, pH, T, DQO, DBO, ST,
NO3-, NO2-, NH4+, PO4, SO4 y S2-) y microbiológicos (coliformes totales y fecales,
heterótrofos totales, levaduras, lactobacilos y bacterias fototróficas).
Bajo las condiciones de estudio, los resultados no mostraron diferencias
significativas entre las profundidades evaluadas, de igual forma no se observaron
diferencias significativas entre el control y los tratamientos para la mayoría de los
parámetros, a excepción de la disminución significativa de S2- (30 y 45 d) y coliformes
fecales (10 d), así como recuentos significativamente mayores en levaduras y mayor
DBO5 (30 y 45 d) en los tratamientos. (Cardona Gómez J., García Galindo L. A.,
2008, p. vi)
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
Según Cardona y García (2008) EM® en el tratamiento de aguas residuales tiene
como variable independiente a la concentración bacteriana, indicando que se puede
dosificar experimentalmente en v/v y a la altura del recipiente como variable de
estudio donde se comprueba que no influye en el tratamiento de agua residual
doméstica. Estas bacterias permiten hacer comparaciones de resultados en el
trabajo de reducción de DBO5 y DQO principalmente.

El presente trabajo investigó la adición de un inóculo de Pseudomonas aeruginosa


en ciertos efluentes grasos recolectados de locales de expendio de comida rápida.
Se consideró evaluar el comportamiento del inóculo en un medio apropiado que
estimule o facilite la biodegradación de lípidos como parte de un futuro proceso de
tratamiento de desechos. Para esto se utilizó el método de titulación con NaOH 0.05
N mediante el cual se cuantificó la cantidad de ácidos grasos liberados debido a la
actividad de las lipasas de Pseudomonas. Los parámetros a evaluar fueron:
temperatura, tiempo de incubación, pH inicial, concentración de sales y cantidad de
inóculo (% V/V). Se comprobó que los mejores resultados (0,823, 0,747 y 0,781 U)
se dieron con una temperatura de 37 ºC, un tiempo de 24 h y un pH inicial de 7.
Los resultados mostraron que con tiempos mayores a 24 h (48 y 72 h) la actividad
de enzima decrece y esto puede ser debido a la acción de otras enzimas por medio
de los cuales Pseudomonas consume también los ácidos grasos liberados y por
consiguiente se reduce la cantidad de NaOH usada para el punto final. (Huané
Jamanca L., Rivera Reyes R., 2014, p.1)

Las Bacterias del género Pseudomonas aeruginosa es característica de efluentes


grasos. En este caso la Variable independiente: concentración microbiana, se
expresa en % v/v. la Temperatura optima es de 37ºC y el pH indicado es 7. Propone
el Método de Titulación de Ácidos grasos para determinar la actividad enzimática y
su respectiva degradación de grasa.

El objetivo del presente trabajo fue evaluar el efecto de las temperaturas de 20, 30 y
40°C en combinación con los pH 6 y 7 por un cultivo de Pseudomonas sp. capaz de
degradar el petróleo diesel 2, al 8%; aislado de lodos activos de la Planta de
Tratamiento de aguas Covicorti-Trujillo; tomándose un muestreo por conveniencia;
sometiéndose a un enriquecimiento en caldo mínimo con petróleo diesel 2 al 8%.
Luego de 5 días de incubación se aisló e identificó el cultivo de Pseudomonas sp.
sometiéndose a diferentes tratamientos. Para ello se construyó 6 biorreactores de
tanque aireado y agitado en los cuales se colocó 356 ml de caldo mínimo de sales,
32 ml petróleo diesel 2, al 8%; como fuente de carbono; finalmente a cada biorreactor
se le adicionó 12 ml de inóculo de Pseudomonas sp.(9 x 108 cél/ml), se incubó a las
temperaturas de 20, 30 y 40°C en combinación con los pH 6 y 7 durante 28 días.
Cada experimento se realizó por triplicado.
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
La degradación se monitoreó al inicio y al final del proceso, empleando el método de
Babcok (% de grasas totales). Al tiempo cero y cada 7 días se retiraron alícuotas de
0.5 ml de cada biorreactor para el crecimiento de Pseudomonas sp. Mediante la
prueba de ANAVA, se demostró que a 40°C y pH 7 se obtuvo 3.8 % de grasas totales.
Se obtuvieron diferencias significativas en los tratamientos de 40°C pH 7 con 20°C
pH 6 y 20°C pH 7 respectivamente. Se concluye que 40°C pH 7 afecta
favorablemente la eficiencia de la degradación del petróleo diesel 2 por
Pseudomonas sp. (Salinas Mariños, Esther, 2014)

Influencia de la Temperatura en la concentración microbiana, siendo la temperatura


de 40 °C la temperatura optima. Influencia del pH siendo el 7 el valor del pH óptimo.
Se propone el método Babcok para cuantificar el porcentaje de grasas totales en la
degradación de petróleo diesel 2 por Pseudomonas sp.

Por ello, en el presente trabajo tiene como objetivo aislar Bacillus sp para la
biodegradación de grasa residual. La literatura informa que varias especies de
Bacillus aisladas de diversos entornos producen la enzima lipasa. Ghanem (2000)
informó el aislamiento de Bacillus alcalophilus como un productor de lipasa
termoestable alcalófila e investigó las influencias de pH y la temperatura sobre la
actividad de la enzima. Así como Sevgi (2007), aisló una especie Bacillus a partir
aguas residuales contaminadas con aceite comercial demostrando una mayor
actividad de lipasa entre las 17 cepas cultivadas en medio de agar con tributirina,
mostrando en pH 6 y a 30 ºC una concentración de actividad de lipasa extracelular e
intracelular de 15 a 168 U/ml respectivamente.

Por lo tanto el propósito de la investigación es someter a diferentes temperaturas y


concentración en la biodegradación de residuos grasos de una cepa bacteriana de
Bacillus sp.

2. JUSTIFICACIÓN

Dado los problemas de contaminación de las aguas residuales de nuestra comunidad,


principalmente en el desecho de residuos de grasas se tiene como objetivo en esta
investigación plantear un método de biodegradación más sostenible de dichas fuentes
de contaminación, en el empleo de Bacillus sp para disminuir la carga lipidica,
empleando en diferentes condiciones de temperatura y concentración microbiana.

3. PROBLEMA.
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
¿Cuál es el efecto de la temperatura a 25 ºC, 30ª y 35 ºC en la degradación de grasas
de agua residual de curtiembre por Bacillus sp a concentración microbiana de 1,5 x 108,
3x108 y 6x108 UFC/ml.

4. HIPÓTESIS

La temperatura y concentración microbiana tienen un efecto directo en la


biodegradación de grasas del agua residual de curtiembre.

5. OBJETIVOS

OBJETIVO GENERAL

- Estudiar el efecto de la temperatura y concentración microbiana del Bacillus sp.


sobre la biodegradación de grasas del agua residual.

OBJETIVOS ESPECÍFICOS

- Identificar y aislar una cepa bacteriana de género Bacillus sp


- Dosificar el tiempo de incubación de las bacterias.
- Determinar el porcentaje de degradación de grasa de la muestra de agua residual
de curtiembre.

6. DISEÑO EXPERIMENTAL.

6.1. Aislamiento de Bacillus sp productoras de lipasas.

Se preparará 100 ml de caldo nutritivo, compuesto de peptona al 5 g/l, extracto de


carne 3 g/l y 0,5 g/l de NaCl; y 100 ml de solución de minerales mínima, compuesto
por FeSO4 0,01 g/l, NaCl al 0,5 g/l, KH2PO4 al 0,5 g/l, MgCl2 0,014 g/l, CaCl2 al
0,0058 g/l y ZnCl2 0,0013 g/l. Se esterilizará ambos medios a la autoclave a 121 ºC
por 15 min. Luego de enfriarse se inoculará 10 g de la muestra de residuos grasos
a cada matraz. Se añadirá de manera estéril 10 % de aceite de oliva a cada uno de
los matraces. Se incubará a 30 ºC por 48 horas. Luego de la incubación se toma
100 ul de cada matraz y se hace a la centésima dilución y se siembra por
superficie en una placa petri con agar yema de huevo y en otra con agar tween 80
(compuesto de agar nutritivo mas CaCl2.H2O 0,01%. Luego de auto clavarse se
añadirá 1 % del tween 80); se hace por duplicación. Se incubará a 30 ºC por 5 días
(Ertu˘grul y col, 2007)
Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
Para la purificación de las colonias productoras de lipasas, se tomará aquellas que
formaran un halo alrededor de aquellas y se sembrará en frascos de penicilina con
agar nutritivo. Se conservarán a 5ªC hasta su uso posterior.

6.2. Identificación bioquímica de Bacillus sp

La identificación bioquímica de Bacillus sp se realizará por tinción de gram, posición


de la espora, oxidasa, catalasa, fermentación de la glucosa, L-arabionosa, D-xilosa
y D-manitol, hidrólisis de almidon, hidrólisis de la urea, fermentación del citrato,
reducción de nitratos, hidrólisis de gelatina y Voges Proskauer. (Ramani y col, 2010;
Cuervo, 2010)

6.3. Preparación del inóculo

De los cultivos puros se tomará con la asa bacteriológica y se resuspenderá en 25


ml del caldo RCBN hasta llegar a los tubos del Nº1, Nº3 y Nº5 del nefelómetro de
Mac Farland, los cuales son 1,5 x 108, 3x108 y 6x108 UFC/ml respectivamente.

6.4. Ensayo de Biodegradación de grasa de agua residual.


En primer lugar se medirán el pH, la demanda bioquímica de oxigeno y demanda
química de oxígeno inicial de la muestra de agua residual. Se utilizará 225 ml de
agua residual en un matraz de 500 ml más 25 ml del inóculo bacteriano.
Para la prueba de temperatura se realizará a los valores de 25 ºC, 30ºC y 35ºC de la
muestra de agua residual, manteniendo a una velocidad de 150 rpm y retirándose
alícuotas de 20-50 mL a las 0, 24, 48 y 72 h de incubación para la determinación de
grasas del agua residual.

6.5. Determinación de grasa de agua residual por el método de Soxhlet.

Una cantidad previamente homogeneizada y seca, medida o pesada de la muestra


se somete a una extracción con éter de petróleo o éter etílico, libre de peróxidos o
mezcla de ambos. Posteriormente, se realiza la extracción total de la materia grasa
libre por soxhlet.

7.- Análisis estadístico.


Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
Los datos obtenidos en este trabajo de investigación se analizarán por parámetros
según descriptiva, promedio y desviación Estándar. Se utilizará el software SPSS v.22-
64 bits (Priyadi y col. ,2005).

8. Posible contribución e impacto.


De los resultados del presente proyecto, se determinaron la concentración
microbiana de Bacillus sp. y temperatura más apropiadas para disminuir la carga
lipídica del efluente de una curtiembre, contribuyendo a un tratamiento alternativo en
este tipo de efluentes para la disminución de su contenido de grasa.

9.- REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS.


Gonzalez D., Amaíz L., Medina L., Vargas R., Izzedin N. y Valbuena O. 2012.
Biodegradación de residuo graso industria empleando bacterias endógenas.

Pedroza-Padilla C.J., Romero-Tabarez M., Orduz S., 2017, Actividad lipolítica de


microorganismos aislados de aguas residuales contaminadas con grasas.

Alcarraz Curi Mario., 2014, Evaluación de la actividad proteolítica y lipolítica de cepas para
el tratamiento de efluentes de curtiembre

Pazmiño Flores C. Y., 2016, Evaluación de la eficiencia de las bacterias lipolíticas de rumen
de vaca para la degradación de aguas residuales con grasas y aceites.

Cardona Gómez J., García Galindo L. A., 2008, Evaluación del Efecto de los
Microorganismos Eficaces (EM®) sobre la calidad de un agua residual doméstica. Bogotá.

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Escuela Académica Profesional de Ingeniería Química.
‘Mendoza Medina L. H., Ramírez Lecca J. L., 2016, Efecto de la concentración de un
consorcio microbiano nativo en la degradación de materia orgánica de las aguas residuales
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