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Normas De seguridad.
Finalidad: Es obligatorio que todas las personas que participan en el laboratorio de bacteriología conozcan y cumplan
con las normas de seguridad establecidas, para que el trabajo se realice con un riesgo mínimo, y haya nula
probabilidad de contaminar el medio ambiente.
Las medidas de control establecidas están diseñadas para proteger a las personas y al ambiente de la posible
exposición a microorganismos potencialmente patógenos que se manejan en la secuencia del trabajo técnico y la
disposición adecuada de los desechos biológico infecciosos.
ES necesario:
Tener conocimiento básico de la patogenicidad de las bacterias y el método de transmisión de las mismas para
desarrollar métodos preventivos que minimicen los riesgos.
Riesgos bacteriológicos: toma de muestra, transporte, proceso (mayor probabilidad), almacenaje y desecho
Rutas por las que puede ingresar un MOO después de una exposición:
Clasificaciòn:
V. MICROSCOPIA
a) M. campo claro: preparaciones en fresco, y muestras teñidas con colorantes.
b) M. campo oscuro: la luz incide en ángulo oblicuo, se observa sólo la luz que incide en los objetos, el
fondo queda oscuro. Se utiliza para observar preparaciones en fresco para búsqueda de espiroquetas.
c) M. de contraste de fases: El índice de refracción de la muestra provee un contraste, contiene anillos de
difracción en el condensador y objetivo, se observan diferentes grosores. El contraste permite observar
organelos en eucariotas, preparaciones en fresco.
d) M. fluorescencia: preparaciones fijas; microorganismos en muestras de tejidos. Requiere colorantes
fluorocromos (fluorescentes porque la luz primero se absorbe y cuando regresa a su nivel de energía
emite luz visible) generalmente utiliza luz UV, requiere cuidados al ojo (filtros al ocular).
e) M. electrónico: emisor fotónico emite electrones que inciden sobre la muestra que posteriormente
enfocan en campos electromagnéticos. Forman imagen en pantalla. Preparaciones teñidas con metales
pesados. Es el mic. con máxima resolución,. De Transmisión: a través. De Barrido: escanea (vista
tridimensional.
VI. RESPUESTA INMUNE
Se clasifica en Innata y Adaptativa.
Innata: no es específica, no tiene memoria, misma respuesta a lo largo de la vida.
Piel: Barrera mecánica
Lágrimas y saliva: lisozimas
Estómago: acidez
Fagocitos.
Tracto respiratorio: células ciliadas
Nariz: pelos
Inflamación
Adaptativa: Específica, tiene memoria, evoluciona en el transcurso de la vida.
Humoral: Anticuerpos
Celular: Linfocitos T
Antígeno: Moléculas que el organismo reconoce como extrañas, las cuales son capaces de estimular el
sistema inmune para producir anticuerpos.
Anticuerpo: Molécula producida como respuesta a un antígeno, que tiene la propiedad de combinarse
específicamente con el antígeno que indujo su producción.
Llamados inmunoglobulinas, son glucoproteínas en forma de Y: tienen una región variable Fab (las 2 puntas)
que es donde se une al antígeno (que lo originó), una región constante Fc ( cola de la Y) que son las zonas de
unión para el complemento y receptores de superficie celular.
La molécula de inmunoglobulina es simétrica: consta de 2 cadenas pesadas H (heavy) y 2 ligeras L (light).
Los isotipos de las inmunoglobulinas son: IgG, IgM, IgA, IgE e IgD, y están determinados por el tipo de cadena
H pesada.
La IgM es pentamérica y tiene 10 sitios de unión al antígeno. La IgG tiene 2 sitios de unión al antígeno.
La IgG puede atravesar la barrera placentaria (es la única) proporcionando inmunidad al recién nacido, y
utiliza su fracción Fc para activar complemento.
La IgA provee inmunidad en las mucosas (leche, saliva, secreciones)
La IgE nos defiende contra parásitos y también promueve las alergias.
La IgM activa el complemento y es muy aglutinante (10 sitios de unión)
La IgD: Es como precursora de las otras y se encuentra en los linfocitos B
Un epítope o determinante antigénico: es una porción del antígeno con capacidad de desencadenar la
respuesta inmune.
RESPUESTA INMUNE ADAPTATIVA: Fases
A) Los macrófagos fagocitan la bacteria por endocitosis (fagosoma), luego al fagosoma incorporan lisozimas
para digerirla (fagolisosoma)
B) Los macrófagos presentan el antígeno: utilizan el complejo mayor de histocompatibilidad (MHC) y lo
colocan en la superficie de su membrana. Por esto se llaman células presentadoras de antígeno.
C) Esta célula presentadora de antígeno se une a un linfocito Th (helper) que tiene a su vez un receptor. Y
se activa
D) El linfocito Th activado libera interleucinas (también llamadas linfocinas, o citoquinas) las cuales
provocan expansión clonal (forman más linfocitos T) y también estimulan a otros macrófagos.
E) Los linfocitos nuevos formados pueden DIFERENCIARSE EN Th1 para activar inmunidad celular*, y Th2
para activar inmunidad humoral **(o sea para activar a linfocitos B) otros se diferencian en Tc
***(citotóxicos), y otros serán células de memoria.
F) * los Th1 liberan interleucinas que activan a los macrófagos para que dirijan al sitio de la infección y van
“programados” a fagocitar las células infectadas.
G) ** Los Th2 se especializan en ponerse en contacto con linfocitos B para que se activen****
H) Un linfocito B se puede activar por 2 mecanismos: por ** un Th2 (que se pone en contacto con él tienen
un receptor) ó por contacto directo con el antígeno .
I) **** el linfocito B activado sufre expansión clonal, algunos se diferencian a células plasmáticas para
producir anticuerpos, otros serán células de memoria.
J) ***Los linfocitos citotóxicos Tc se especializan en reconocer y MATAR células infectadas, también
algunos quedan como memoria.
Célula plasmática: es un linfocito B que cambió para producir anticuerpos. Están en los tejidos.
Linfocitos Th también conocidos como CD4
Linfocitos Tc también conocidos como CD8
Fase aguda: el paciente tiene síntomas se descubre o sospecha la enfermedad. Usualmente primer semana a 10 días
Fase convalesciente: El paciente ya resolvió la infección (con sus defensas) 2 semanas después de la fase aguda.
En fase aguda: primero se eleva IgM. Una IgM detectada en el laboratorio dá un diagnóstico específico positivo de
infección.
La IgG aumenta después y un aumento en sus títulos de 4 veces (cuadruplicado) con una diferencia de 2 semanas
entre una determinación y otra confirma el diagnóstico. Si bajan después de la determinación confirma diagnóstico e
indican que entró en convalescencia.
Cuando los anticuerpos IgG comienzan a bajar, el paciente entró en convalescencia.
Si se efectúa una sola determinación también sirve para valorar el estatus inmune del paciente. (si está vacunado)
También debe tomarse en cuenta que hay pacientes inmunosuprimidos que no tendrán la respuesta inmune
esperada y los métodos serológicos pueden no ser representativos.
RESPUESTA SECUNDARIA: REINFECCIÓN (Segunda vez de encuentro con el Ag)
Los anticuerpos IgM son muy bajos, los IgG son los más representativos.
La respuesta es más rápida en el día 5 ya se puede medir. Y la IgG aumenta más que en la respuesta primaria.
También en la convalescencia bajan.