El día 8 de noviembre apoyamos en diversas actividades en el stand de CAMBIO (acomodo de

productos, dosificación de los mismos, etc.). Posteriormente por la tarde dimos un recorrido por las
instalaciones de CUNorte para conocer el estado de las áreas verdes del plantel y recabar información
que nos permitiera realizar una caracterización y con base en esta poder sugerir algunas
recomendaciones para mejorar esta situación.

Preparación de sustratos e inoculación

El día 9 de noviembre nos dedicamos a tareas del laboratorio comenzando por la preparación de
sustratos para la inoculación de microorganismos de acuerdo con la información brindada los
sustratos deben tener las siguientes características:

• Tamaño de partícula ideal para el sustrato de soporte malla 40, actividad acuosa 0.2 - 0.9
• En arroz la humedad ideal es de 55% para inocular, es decir para preparar 1kg de inoculo al
55% se necesitan 550 g de agua+ inoculo y 450g de arroz. Se mete al autoclave (se cuece
adentro)
• 3107 es la cantidad óptima de esporas por gr de materia seca es la cantidad óptima para
inocular.

A continuación se describe el procedimiento para realizar la inoculación:

1. Se hace el conteo de esporas y se hace la corrección para saber cuál es la cantidad de ml de

inoculo que se necesita para llegar a 3107.
2. Se agregan 10ml de solución fisiológica .15M O 10ml de tween al 0.1%
3. Una vez hecho el conteo en la cámara de Neubauer se realiza la estimación de inoculo.

Ejemplo.- 766 esporas * 10000= 7660000/4 cuadros= 1915000*100(Factor de dilución)

=1.915108

Se necesitan 450g de sustrato entonces:

450gr arroz * 3107 esporas (concentración óptima)/gr arroz * ml/1.915108 esporas= 70.49ml (volumen
de inoculo necesario para alcanzar la concentración óptima)

4. El soporte (arroz) va a estar a 55% de humedad entonces el volumen de líquido necesario

es 550ml, a esta cantidad se le debe restar la cantidad del inoculo:

550ml-70.49ml= 479.51ml.

De reactivos se necesitan 1gr/l de urea, 5gr/l de sacarosa.

∴1gr/l urea /0.55 l urea= 0.55gr urea

∴5gr/l sacarosa /.55 l= .11gr sacarosa

Imagen 1.- Crecimiento de Beauveria en sustrato sólido

de arroz.
Cultivo de microorganismos
Se realizaron cultivos de microorganismos de tres fuentes: Composta, sustrato e inoculo comercial.
Para ello se hizo una dilución seriada de cada fuente. Se utilizaron des medios de cultivo el PDA y
LGI.

Una vez concluida la dilución seriada se procedió a transferir los inóculos a las cajas con el medio
nutririvo. En total se realizaron 18 inoculaciones:

• 3 de composta, 3 de sustrato y 3 inoculo comercial; utilizando las diluciones 10-5, 10-6 y 10.7,
en medio PDA.
• 3 de composta, 3 de sustrato y 3 inoculo comercial; utilizando las diluciones 10 -5, 10-6 y 10.7,
en medio LGI (medio selectivo carente de nitrógeno, utilizado para identificar
microorganismos diazótrofos, potencialmente fijadores de nitrógeno atmosférico).

Imagen 3.- Microorganismos desarrollándose en Imagen 2.- Microorganismos desarrollándose en

medio LGI, la cantidad de viales es baja en medio PDA, se observa el crecimiento de diversos
comparación de los presentes en medio PDA. tipos tanto de bacterias como de hongos
filamentosos.

Elaboración de cromatografías de suelo

Como parte de la caracterización realizada en CUNorte se realizaron cromatografía con la finalidad
de conocer el estado del suelo, durante el recorrido se realizó un muestreo y se identificaron algunas
de las características observadas a simple vista como lo son el color, la textura y profundidad del
mismo, ya en el laboratorio y mediante una guía rápida de análisis se determinó la clase textural a la
pertenece cada muestra de suelo.

Las cromatografías fueron realizadas utilizando la metodología descrita por Pfeiffer, en total se
elaboraron 15 de las cuales 13 provienen de las muestras de suelo, 1 de una composta y 1 de un
sustrato, provenientes ambos de Abonat en Tala.
 Imagen 4.- cromatografías obtenidas a partir de la muestras de suelo.

¿Qué sigue?
A partir de lo observado y aprendido durante la realización de diversas actividades dentro de la
empresa aunado a los aportes realizados por la Dra. Marta durante esta visita a CUNorte el siguiente
paso es adaptar la metodología aprendida a las condiciones de Abonat, conjuntando los datos de los
materiales para la elaboración de sustratos y los datos de crecimiento y desarrollo de microrganismos.
Para esto se van a preparar diversos sustratos utilizando materiales como bagazo de caña y agave,
arroz, y maíz en distintas proporciones para evaluar cuál sustrato presenta las mejores características:
tiempo de crecimiento de la cepa, facilidad de preparación, disponibilidad a lo largo del año.