15.
REACCIÓN DE CENTRO GERMINAL - LA TÍA CRISTINA
La reacción del centro germinal ocurre a expensas de los linfocitos B2-Foliculares . El objetivo de
esta clase es aprender cómo se activan los linfocitos, qué eventos ocurren en el centro germinal, y
larecirculación de LT y LB . Un LB se activa cuando reconoce un epítope de antígeno directamente
con su BCR , él hace la respuesta, en esa señalización se activan y proliferan los LB, se convierten
en células efectoras , que son células plasmáticas de corta vida que secretan principalmente IgM ,
entonces en una infección aguda se tendrán altos títulos de IgM ; una vez esto ocurre la mayoría
de las células se diferencian a plasmáticas de vida corta , pero hay algunas poquitas que se
devuelven al folículo a realizar la reacción del centro germinal , donde ocurren los 4 procesos que
vimos la clase pasada: madurar afinidad, mejorar la afinidad por el epítopo, cambiar el isotipo
tratando de especializar la respuesta , y una vez ocurran esos procesos esos linfocitos toman dos
caminos, unos se convierten en células de memoria y otros en células plasmáticas de vida larga .
Las células plasmáticas de vida larga se ubican en médula ósea y secretan discretas cantidades
de anticuerpos por toda la vida , mientras que las células de memoria , que están siendo estudiadas,
algunos plantean que se quedan en los órganos linfoides secundarios y que otras van a los tejidos
, hablando de una memoria central y una periférica , periférica porque unos linfocitos se quedan en
el sitio donde reconocen el antígeno y otras se quedan en los órganos linfoides , repito estas son
solo teorías porque sobre células de memoria aún hay mucho por estudiar.
¿Qué se sabe exactamente sobre células de memoria?, que ellas son las que se van a activar ante
un reto subsiguiente . Cuando entra nuevamente el mismo antígeno ya no van a reaccionar las
células vírgenes sino los Linfocitos de memoria y esta respuesta es más grande mejor, más
adecuada, más efectiva y más corta en el tiempo . Entonces estas células de memoria ya no van a
ser células plasmáticas de corta vida sino células plasmáticas que van a secretar el isotipo
apropiado para esa respuesta, especializandola , y por consiguiente la respuesta va a ser mucho
más efectiva, grande y temprana y nuevamente se guardan células de memoria para un nuevo
encuentro con ese mismo epítopo de ese antígeno.
*1*
Esa es la cinética de la respuesta inmune, primaria y secundaria . Vamos a ver que una secundaria
es mucho mejor que la primaria . La primaria es pequeña al compararse con la secundaria que es
mucho mayor, usualmente la Ig que se produce en mayor cantidad es IgM (en la primaria) aunque
se puede hacer un pequeño cambio de isotipo y encontrar un poco de IgG . La respuesta secundaria
es mayor y el isotipo ya depende de a cuál isotipo se cambió , entonces ya no se produce IgM , se
va a producir IgE si es respuesta a helmintos o IgA si es una respuesta en mucosas ó IgG si es otro
tipo de respuesta (virus u otros microorganismos).
La afinidad del anticuerpo por el antígeno es menor en la respuesta primaria , si se mejora la afinidad
( en la RI secundaria ) se mejora la unión de ese anticuerpo con ese antígeno ó BCR con ese
antígeno y la respuesta va a ser mejor y mucho más rápida . En la respuesta primaria la producción
de IgM puede ser por cualquier naturaleza química , porque vimos que los Linfocitos B1, Los LB-
B2 foliculares y los LB de la zona marginal del bazo pueden producir IgM y no necesariamente
necesitan la cooperación de LT . Para que haya cambio de isotipo se necesita que haya una
interacción con el LT entonces en esta respuesta primaria todos los inmunógenos pueden inducir
respuesta , ¿pero que se produce? IgM , mientras que para poder que haya cambio de isotipo se
necesita la participación de antígenos T-dependientes .
Los antígenos T-dependientes siempre van a tener un contacto con el LT porque son proteicos y
al tener esa naturaleza son susceptibles de ser procesados y presentados por el LB y al hacer esto
se lo van a presentar a los LT Helper , que le va a secretar citoquinas (al LB) y expresa CD40L .
CD40L es muy importante para la reacción del centro germina l, si se muta CD40L no hay cambio
de isotipo ni maduración de afinidad, ni células de memoria ni hay células plasmáticas de vida larga.
*2*
Abbas muestra en su última ed esta gráfica. Cuando el BCR reconoce este antigeno lo endocita,
procesa y presenta a un LT-Helper y al hacer esa interacción (que ya vimos que no es solamente
esa interacción , porque por sí sola no es suficiente para hacer el cambio de isotipo, ni maduración
de la afinidad ) vamos a lograr que esa célula haga la reacción del centro germinal, maduración de
la afinidad, cambio de isotipo, se generen células de memoria y plasmáticas de larga vida;
solamente cuando se da esa cooperación B-T puede ocurrir la reacción del centro germinal . (la
coherencia o cohesión de este párrafo no es muy buena, lo siento, esa señora habló como se le dió
la gana pero creo que logré que se entendiera el concepto)
¿Qué ocurre con los antígenos T-independientes? , dijimos que generalmente eran moléculas
repetitivas como carbohidratos , entonces la activación de LT por un antígeno T independiente es
muy fuerte porque los epítopes van a estar haciendo reacciones cruzadas , o sea la señalización
es más fuerte . Un antígeno T-independiente siempre necesita unas ayudas para activar el LT,
como los TLR (a manera de correceptores), CR2 (CD21) pueden mejorar la activación.
Entonces *Los LB no solamente con la unión antígeno-anticuerpo o antígeno-BCR se van a activar.
*Son mejores activadores los antígenos T-independientes por las uniones cruzadas que generan
muy buena señalización pero a pesar de eso estos LB, que son los de la zona marginal del bazo, y
los LB-B1 se ayudan en su activación con TLR y CR2 .
Pero el caso del LB-B2 Folicular , esa unión solita no es suficiente para activarse y necesita todo
esto que se llama una cooperación B-T . Para que se diferencie una célula plasmática se ha hecho
todo este proceso.
3**
Quiero hablarles de 2 citoquinas BAFF y APRIL muy importantes en el proceso de desarrollo de un
linfocito B , y tienen sus respectivos receptores TACI, BCMA y el receptor de BAFF (BAFF-R) , 3
receptores que pueden unir esas citoquinas. En el estado transicional del LB, esas citoquinas, BAFF
por ejemplo, participa en ese estado transicional e induce diferenciación (En LB de zona marginal
del bazo o LB-B2 Folicular). En el proceso de maduración ambas citoquinas participan en los LB de
memoria para sobrevivencia , las dos citoquinas participan, tenganlo presente: BAFF y APRIL
actúan en el proceso de maduración y sostenimiento de los
LB de memoria, además ayudan en la inducción de la secreción de anticuerpos por las células
plasmáticas ; si ustedes analizan son citoquinas propias de los LB para sus procesos de activación
y maduración.
4***
En esta gráfica nos muestran lo que hace cada una de las citoquinas. Nos dicen que BAFF puede
ser unida por BAFF-R, BCMA y TACI, los 3 receptores, ¿para que? , para promover sobrevivencia,
diferenciación, coestimulación, proceso de maduración y diferenciación a células plasmáticas .
Repito, quiero que tengan presente y claro que estas citoquinas actúan en el proceso de
maduración, supervivencia y proliferación de los LB , se las menciono porque son muy importantes
y las vamos a encontrar en los diferentes estadios de maduración de los LB.
**5*
Cuando un Linfocito virgen B2 ... recuerden que el BCR de los B2 está conformado por IgM y
recordemos que IgM de membrana e un monómero , que cuando es secretada se convierte en
pentámero . Entonces IgM + IgD forman el complejo BCR del linfocito B2 , ese tipo de linfocito
siempre necesita la cooperación de los LT y otros estímulos , pero vimos que en esa cooperación
BT se necesitan citoquinas y CD40L ; una vez esto ocurre, cuando el LB-B2 se une con su antígeno
necesita la cooperación del LT y otras moléculas, ¿el LT que le secreta? citoquinas y le expresa
CD40L para que pueda ser una activación efectiva , y una vez que esto sucede ese LB prolifera
(expansión clonal) y se diferencia, la mayoría de veces, en células plasmáticas de vida corta , que
van a secretar IgM en la RI humoral primaria . Unos poquitos de esta clona hacen otro proceso que
se llama la reacción del centro germinal , donde estas células van a cambiar el isotipo, ya no van a
producir IgM sino IgG por ejemplo, o también hacen maduración de la afinidad , que ya vimos que
eso permitía que la reacción secundaria o terciaria ante ese antígeno, epitope o ese anticuerpo por
ese BCR sea muy rápida muy efectiva; y a partir de que se han hecho estos dos procesos se
generan células de memoria y células plasmáticas de vida larga (falta en la gráfica de arriba) . Estoy
repitiendo lo mismo pero lo vamos complementando y ampliando.
Antes de entrar a la reacción del centro germinal quiero que vean cómo se activa un LB
6**
Observemos, dijimos que el LB-B2 folicular necesita lógicamente la unión del epítopo con su BCR,
recordemos que el BCR también tiene unas moléculas señalizadoras que son Igα e Igβ que tienen
motivos ITAM , una vez se une el ligando al receptor, yo en una oportunidad les dije, una cosa es
que el receptor esté sobre la membrana y otra cuando se une a su epítopo porque sufre un cambio
conformacional que es sensado por las Tirosin kinasas . Se ha visto que el dominio constante
expresado Cμ4 cambia su estructura , y esto hace que las balsas lipídicas comiencen a acercarse
y vayan atrayendo a la otra inmunoglobulina, IgD que está expresada en membrana del LB (IgD e
IgM están separadas); cuando una de ellas recepciona al epitope, hace una activación para que las
balsas lipídicas atraigan a la otra Ig y se pueda hacer una unión cruzada que es indispensable, para
tener el complejo BCR completo.
7**
Ya tenemos el complejo BCR completo, alli nos muestra como las balsas lipídicas van a acercar a
IgM e IgD y van a hacer esta unión cruzada con el epítopo . Entonces miren que el Lyn (kinasa) va
a fosforilar los motivos ITAM y atrae a Syk y la fosforila , y Syk va a atraer el BLNK
Pregunta de Valentina ¿Profe la unión cruzada sólo puede ser entre IgM e IgD o puede ser entre
IgM e IgG.
R//: Generalmente es entre IgM e IgD pero podría ocurrir.
**8**
Aquí nos muestran lo que acabo de decir pero tiene un plus. Aquí no está lastimosamente la otra
Ig. esta gráfica me gusta porque muestra que el BCR está conformado por dos moléculas de Ig
entonces lo que nos dice es que una vez se activa el BCR, los motivos ITAM de Igα e Igβ son
fosforilados por Lyn , se atrae a Syk hacia Igα e Igβ, se fosforila (Syk) y este a su vez fosforila a
ésta molécula ( BLNK supongo , según la imagen). Vimos que Lyn también fosforila al Btk (proteína
de la kinasa de Bruton), esta molécula activa la PLCy para que convierta el PIP2 en DAG e IP3 ,
que como ustedes saben, estas moléculas (DAG e IP3) activan a segundos mensajeros para que
se activen los factores nucleares necesarios para que la célula se active .
¿Qué nos muestra además la gráfica? que este es el momento de activación y que con estas
moléculas se pueden activar estas moléculas (CD21 o CR2) que reconocen microorganismos.
¿Qué es el CD21?, El CR2 (receptor del complemento ), cuando el microorganismo está unido al
C3d del complemento de manera covalente, CD21 hace reconocimiento de ese Microorganismo ,
y CD19 es la que tiene los motivos ITAM para activar una kinasa que se llama Pi3K y ésta a su vez
induce la activación reforzando la acción y activación que inducen de las Btk para ampliar la
activación .
¿Si no hay opsonización del Microorganismo con c3d no va a haber activación?, si la habrá , en el
caso de los LB-B2 con la cooperación de los LT , ¿pero si es antígeno T-independiente y no tenemos
un LB-B2 folicular sino uno de zona marginal del bazo que son los que más expresan CR2 ? SÍ, se
puede activar pero en ellos es muy importante que sea reforzada esa activación por el CR2 (CD21).
El linfocito B2 folicular siempre para su activación necesita para su activación cooperación de
LT , el LB de la zona marginal del bazo que solo tiene IgM y mucho CR2 en su superficie ,
generalmente va a recepcionar Microorganismos de la sangre que llegan al bazo y muchos de ellos
llegan unidos a c3d , Entonces un LB de este tipo se va a activar muy fácilmente y muy bien
cuando se une el antígeno a su BCR + el c3d del Microorganismo a su CR2 .
¿Cómo hacen los LB-B1? ¿que tienen en su superficie como BCR? estos se activan por TLR , todos
ellos tienen moléculas acompañantes en su proceso de activación . ( Los LB-B2 foliculares expresan
CR2 , pero los que más lo expresan son los LB de zona marginal del bazo , lo que lleva a pensar
que ellos son los que más necesitan de la cooperación de esta molécula para que se activen). En
los LB-B1 últimamente se ha evidenciado que una segunda señal es importante desde los TLR,
mientras que los LB-B2 foliculares necesitan cooperación de LT.
En la imagen del libro de Pavón nos muestran que como en todo sistema, la activación de los LB
necesitan un grupo de moléculas que la inhiban , estas dos moléculas ( SHIP†y†SHIP1†supongo†)
que vamos a ver al final... yo les hablé este receptor cuando les mostré la superfamilia de las
Inmunoglobulinas y los receptores de la IgG, el FcyRIIb que tiene motivos ITIM, o sea que es un
receptor inhibidor, y esta molécula CD22, también tiene motivos ITIM , estos receptores son los que
ayudan en la homeostasis, en caso que se necesite que el LB no se active más.
9**
Abbas nos muestra esta gráfica y nos dice que cuando se une el epitope al BCR (que vuelve y
juega deberían de ser dos moléculas de inmunoglobulina) se activa esta familia de kinasas (Fyn,
Lyn y Blk) y fosforila a Ig-alfa y a Ig-beta quienes atraen a Syk y lo fosforilan. Este a su vez (Syk)
va a fosforilar a otras proteínas adaptadoras como la tirosin kinasa de bruton y la fosfolipasa C
gamma 1 (PLCG1) para que se produzcan diacylglycerol (DAG) e inositol trifosfato (IP3). Entonces
qué va a activar el aumento de Calcio intracelular? proteínas y enzimas que son dependientes de
calcio, calcineurina y calreticulina y estas enzimas a su vez van a activar unos factores nucleares.
Por otro lado DAG va a activar la proteinkinasa C (PKC) que va a participar en la activación de otros
factores nucleares. La vía de las Ras-MAP kinasas van a activar a las JNK y a las ERK que van a
formar este factor nuclear AP-1.
En conclusión tenemos que una vez que se active (este microorganismo debería de ser más grande
y tener el epítopo aquí para que haga una unión cruzada), mediante fosforilaciones consecutivas
da la activación de unos segundos mensajeros y estos hacen que se produzcan unos factores
nucleares. Si ustedes observan en casi todas las células los factores nucleares son los mismo, no
se dice que en el macrofagos hay uno diferenete a tal. Los factores nucleares son los mismos, y
son moléculas que pueden ir al ADN y ubicarse en promotores de genes donde está la información
de lo que la célula necesita producir como respuesta a su activación. Entonces en el caso de LB lo
que se necesita que se produzca son anticuerpos y en el de LTCD4 son citoquinas.
No se esucha la pregunta… y ella responde: Mira cómo se ubican en la imagen, todo esto pasa en
cada una de las moléculas.
10**
Aquí está lo que les acabo de decir; El CR2 puede participar en la activación del LB. Dijimos que el
CR2 estaba expresado en mayor cantidad en la subpoblación de la zona marginal del bazo (podría
estar en todas, pero se tiene en cuenta la cantidad) y esto quiere decir que esta molécula es
importante haciendo el papel de correceptor que ayuda en la activación de ese tipo de linfocito. Por
otro lado en los LB1 veíamos que el TLR también participa en el proceso de activación con el BCR.
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Aquí nos está mostrando esta gráfica que a veces el C3d, que es unido por el CR2, va a estar unido
a un microorganismo o tambien podria estar en antígeno soluble unido al C3d e igual puede ser
reconocido por el CR2 y por el BCR. Es decir que el reconocimiento puede suceder en un MO
completo (se llama antígeno particulado cuando está sobre la membrana) o en un antígeno soluble
y finalmente se da la activación.
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Entonces tenemos un LB que con su región variable a unido epítopes de un MO. Como es una APC
una de las señalización le permite hacer endocitosis. Como es un LB está se da mediada por
clatrinas (Es la diferencia entre endocitosis y fagocitosis. en la fagocitosis no hay participación de
clatrinas) Se forma una vesícula, el endosoma, y esa vesícula a su vez (fagosoma o endosoma
temprano) se acidifica por medio de una ATPasa, entonces mientras se empieza a acidificar se
separa ese anticuerpo (BCR) del antígeno y se devuelve el BCR la superficie del LB, al igual que
con la IgG, que tenía un receptor RN que separaba el anticuerpo del resto de moléculas haciendo
una vesícula reciclable y otra conteniendo el MO que es el fagosoma que sigue el proceso de unión
al lisosoma y ya ustedes saben esa parte de procesamiento y presentación. Esto sucede en
cualquier APC, la diferencia es el proceso de endocitosis o fagocitosis.

Ya con esto claro entramos a hablar de la Reacción del centro germinal Hemos visto que existen 3
tipos de antígenos que puedes activar diferentes subpoblaciones de LB.
Aquellos que son diferentes de la naturaleza proteica van a activar a los LB1 y a los de la zona
marginal del bazo, los de naturaleza proteica activan LB2 foliculares. Todos ellos pueden endocitar,
procesar y presentar, pero los LB2 son los que siempre endocitan, procesan y presentan, los otros
sólo endocitan, por ejemplo si es un antígeno carbohidrato o uno lipídico no lo presentan, o lo
presentan en moléculas CD1 y el macrofago no es el que sea más abundante en CD1 (Es la célula
dendrítica).
Entonces repito: los LB2 foliculares son los que reconocen antígenos proteicos los endocitan, los
procesan y los presentan. Los otros dos reconocen las demás naturalezas de antígenos (Incluyendo
proteicas) pero normalmente sólo se activan para producir IgM, no van a hacer cooperación con LT
ni van a hacer reacción de centro germinal.
Kevs pregunta: Hay algún microorganismo que no exprese como … (No se escucha) Respuesta:
NO, siempre se van a producir IgMs y un poquito de IgG sin maduración de la afinidad.
13**
Ahora entramos a ver muy bien esa respuesta de antígeno-anticuerpo timo dependiente, ya
aprendimos a ver como se activa un LB y el profe santiago les explico como se activan los LT. Una
vez activados hay una cooperación o interacción del LB con LT, esto se hace para que el LB se
prolifere y se diferencie en una célula plasmática capaz de producir anticuerpos.
Entonces nos ubicamos en que tanto LB como el LT maduraron, en médula ósea y en timo
respectivamente. Una vez que maduraron y se hizo la selección positiva en el caso de los LT y la
selección negativa en el asunto de eliminar los autorreactivos, los que pasan este proceso salen
del timo y se ubican en los órganos linfoides secundarios y los LB que están en médula ósea salen
en estadio transicional (que acaban de hacer selección positiva) y así llegan al bazo y ahí deciden
diferenciarse en LB2 folicular o de la zona marginal del bazo.
14**
Los LB2 de la zona marginal se quedan en pulpa roja y los foliculares van a ir a ubicarse en los
folículos linfoides de los ganglios, esto se da gracias a la expresión de las quimoquinas CXCR5.
Una vez que llegan al ganglio y tienen expresado el CXCR5 se encuentran dentro del folículo con
las células dendríticas foliculares (no son APC, son unas células que acumulan antígenos y
complejos inmunes para mostrarlos constantemente). Las células dendríticas foliculares secretan
grandes cantidades de quimioquina CXCL13 que es la que atrae al LB al folículo y que se ubique
en la corteza del ganglio linfático. (Desde la médula ósea hay moléculas como las integrinas y las
selectinas participando en el movimiento, cuando llegan al ganglio el linfocito ya tiene expresado el
CXCR5 y la CXCL13 lo ubica en la estructura)
Los Linfocitos (tanto los LB como los LT) llegan por las vénulas endoteliales altas. Los LT se ubican
en la paracorteza debido a la expresión de CCR7 que es atraído por las quimioquinas CCL19 y
CCL21. Ya ubicamos anatómicamente el ganglio.
Pregunta que no se escucha … respuesta:los linfocitos vírgenes están más hacia la parte externa
del folículo porque necesitan activarse, la ubicación más exacta se hace con los … y ... blastos que
lo vamos a ver ahorita cuando se hace la reacción del centro germinal, porque se hace más evidente
con la zona oscura y con la zona clara donde está cada uno. los linfos vírgenes aunque son
bastantes, están rotando, casi a diario pasan por un ganglio, circulan constantemente, en cuestión
de horitas recirculan, por esto no se ve una gran cantidad ahí esperando.
15**
Tenemos que entran por las vénulas endoteliales altas y se ubican cada uno en su sitio (paracorteza
o folículo linfoide). Cuando hay una infección una célula dendrítica captura el antígeno, lo procesa
y lo llega presentando al órgano linfoide, entra por los vasos linfáticos aferentes y por allí mismo
vienen también antígenos. Entonces la célula dendrítica va a venir a ubicarse (también guiada por
quimioquinas y receptores) a la zona de la paracorteza para ubicar al LT virgen que es específico
para el epítopo que ella está presentando, por su parte el antígeno se ubica en el folículo para tratar
de encontrar el BCR específico. [REPETICIÓN: por los linfáticos aferentes llegan las células
dendríticas que ya han endocitado o fagocitado, procesado y están presentando el epítopo del MO
de donde hay lesión y se ubica en la paracorteza para buscar el LT virgen que tiene TCR específico
para el epítopo que el presenta. Aparte tambien se transportan antígenos (algunos son pequeños,
otros son complejos inmunes, algunos están unidos al complemento,etc.) que entran por lo linfáticos
aferentes al ganglio y se quedan en los folículos esperando a que un LB específico para ese
antígeno lo reconozca ]
16**
Cuando los antígenos son pequeños van a entrar directamente por los ductos que llegan al folículo,
pero los grandes son transportados por los macrofagos del seno subcapular , una subpoblacion
especial de macrofagos que no fagocita, procesa y presenta si no que captan por medio de sus
receptores complejos inmune o antígenos y los entrega en el folículo al LB específico (la entrega
se da por que el LB virgen tiene mayor afinidad que el macrofago por ese antígeno que se está
trasnportando). Cuando el LB lo toma con el BCR, se da una endocitosis, un procesamiento y una
presentación.
Entonces aquí me decían que sí eran muy parecidas a las células dendríticas foliculares, y la
respuesta es que si, son dos subpoblaciones diferentes. Todavía no se sabe muy bien la forma de
funcionar pero sii que lo que hacen es transportar estos antígenos grandes o con complejos
inmunes (acomplejados con complejos inmunes o con moléculas del complemento) hasta el
folículo. Otras células que pueden participar son las células dendríticas de la médula, que pueden
captar antígenos en médula y transportarlos al folículo y hacer lo mismo, entregarlos al BCR
específico. Les repito, los mecanismos todavía no están tan claros.
17**
Una vez que el LB es activado entonces suceden eventos que le permiten continuar con el proceso
de activación. El primero es que el LB que ha sido activado con este antígeno va a empezar a
expresar proteínas de supervivencia , o sea induce expresión de proteínas anti-apoptoticas y se
implementa el proceso de proliferación . Además se induce la expresión de moléculas
coestimuladoras como B7-1 y B7-2, porque acordémonos que la interacción necesita más que MHC
+ péptido con BCR, como CD40 y DC40 ligando,etc. entonces no son sólo estas dos, son varias.
También se empieza a expresan receptores para citoquinas porque ya sabemos de la interacción
B-T en que el LT le va a secretar citoquinas al LB, además el LB empieza a expresar el CCR7 para
que CCL19 Y CCL21 (que están en paracorteza) lo lleven por gradiente químico a que salga del
folículo hacia la paracorteza y vaya a la zona de los LT. Está activacion da la generacion de células
plasmáticas de vida corta que van a producir anticuerpos principalmente IgM. Esto es lo que sucede
cuando se activa el LB.
18**
Abbas nos muestra que la célula dendrítica viene procesa y presenta al LT virgen, con ayuda de
moléculas coestimuladoras como B7-1 y B7-2, CD80/CD86 con CD28 (que sin ellas no se da
activación). Entonces se activó el LT con un epitope proteico y aparte el LB se activó con epítopo
que puede ser proteico o no (El antígeno debe tener proteínas pero no necesariamente el BCR lo
reconoce por está proteína), lo procesa y presenta y este LB empieza a expresar CCR7 y esto lo
saca del folículo. Ell LT cuando la célula dendrítica le presenta el antígeno se activa, prolifera se
diferencia en una subpoblación (Th1 - Th2 - Th17) pero hay unas pocas que no se diferencian en
esas subpoblaciones si no que van a quedar como LT foliculares . Lo que los diferencia es que el
linfocito T va a expresar un factor nuclear que se llama BCL6, que lo va a direcciona hacia LT
folicular.
En conclusión: un LT se activa y se da una proliferación por IL-2 de forma autocrina, algunos de
estos van a diferenciarse en Th1 - Th2 o Th17 pero aquí en la reacción del centro germinal hay una
subpoblación que se llaman loS LT foliculares que no van al sitio de infección si No que se quedan
haciendo reaccion de centro germinal. Los que se quedan es por la expresión de factor nuclear
BCL6.
Los que expresan el El BCL6 son los que se van a diferenciar en LT foliculares. entonces ya
tenemos aquí el LT folicular y el LB folicular, lo que sucedió es el cambio de expresión de receptores.
Mientras tanto, en esta activación, el LT folicular va también a cambiar su receptor de quimocinas
por el CXCR5, es decir, se cruzan. Al expresar el CXCR5 el LT va a ser atraido hacia el folículo por
la CXCL13. En ese “salir y entrar”, justo afuera del folículo, se van a encontrar algunos LT y algunos
LB que van a tener ese contacto que se llama la primera cooperación BT o la primera interacción
BT . ¿Qué es eso? Que el LB, que tiene un epítope que puede ser reconocido por el TCR del LT,
se une a él actuando como APC y así el LT expresa el CD40L (ligando) y le secreta citoquinas (al
LB).
19**
Aquí en la primera interacción BT, los LB reciben una estimulación del linfocito T helper ya que este
le secreta unas citoquinas y expresa el CD40L.
Pregunta: Si estamos en el folículo terminal, se supone que el LB tiene una sola especificidad,
entonces ¿Cómo pasa a la zona T y reconoce un antígeno…?
No, no está reconociendo. El hizo su proceso de endocitosis, procesamiento y presentación dentro
del folículo, cambio el receptor de quimocinas y salió. Al salir no viene una sola célula T folicular,
vienen varias células; y de ahí también están saliendo varios LB mostrando epítopes diferentes. No
todos los LT no todos los LB que salen y entran se encuentran, porque puede ser que no estén
mostrando el antígeno o el epítopo por el cual es específico el TCR.
Este LT va a reconocer el mismo epítopo que le presentó la célula dendrítica, y el LB va a tener
especificidad no por ese epítopo;porque el LB con su BCR puede reconocer ya sea un lípido, o un
carbohidrato, etc; y cuando procesa ese antígenos va a mostrar un péptido. Un microorganismo
tiene lípidos, carbohidratos y proteínas, el LB va a tomar péptidos para ser procesados y
presentados por una molécula del MHC clase II.
Solamente va a ser reconocido por un LT que sea específico para ese péptido. Lo que quiero decir
es que no cambian las especificidades.
Pregunta de patico: Según lo que entendí algunos LT migran hacia el folículo, entonces ahí pueden
encontrar linfocitos B…
Imaginémolo como esto, los unos van saliendo (LB) y los otros van entrando (LT) y se van
encontrando, ¿y el encuentro en qué consiste? En que si hay un TCR que es afín al epítope que el
LB está mostrando, entonces va a ser atraído por él y va a llegar ahí; si no, pasa derecho hasta el
folículo, y seguramente no va a tener una función específica, lo más seguro es que muera por
apoptosis. Pero el que viene y se une es el que va a cooperar con el LB para que él se diferencia
en una célula plasmática de vida corta (lo que hacen la mayoría) y esa célula plasmática es la que
va a secretar anticuerpos en los primeros días y generalmente van a secretar IgM en la parte aguda
de la infección.
Unos pocos de estos LB se devuelven, vuelven a cambiar sus receptores de quimocinas, y se
devuelven al folículo, ¿con quiénes? Con los linfocitos T foliculares. En ese caso los LB entran al
folículo a realizar la reacción del centro germinal.
Entonces, la mayoría de los linfocitos se van a defendernos, van a secretar citoquinas al sitio donde
está ocurriendo la infección; los LB van a secretar anticuerpos IgM que van a ir al sitio de la infección
a cumplir acciones como activar la vía clásica del complemento o la neutralización
Pregunta: Ese linfocito TCD4 que está interactuando con esa célula dendrítica (en la parte de arriba
dela izquierda) ¿Entonces, ahí si se produce presentación?
La primera presentación a un linfocito T virgen.
¿Entonces para que haya interacción con ese LB necesitan coincidir en la especificidad de ese
antígeno?
Eso es lo que te he estado diciendo todo el tiempo
¿Y la probabilidad no sería muy poca? Es poca, pero como no está sucediendo sólo con un linfocito,
acuerdate que el antígeno tiene varios epítopes y son varios LT los que se pueden activar, como
también son varios LB, de esos algunos van a coincidir.
Se hizo esa primera cooperación BT, que no es solamente esto, hay otras moléculas involucradas,
por ejemplo CD40 y CD40L; y se induce en esta interacción a que suceda esto, a que esta célula
se diferencie en plasmocito productor de anticuerpos.
Pregunta: ¿El LT folicular se convierte en folicular cuando expresa el BCL6 o cuando interactúa con
el LB?
No, el ya es folicular. Todos los linfocito que expresen BCL6 van a ser LT foliculares.
Pregunta de Ángel Correa: En la clase con el viejo Zea, yo había entendido que en los folículos
secundarios se veía como el cambio de color porque todo el proceso se daba como yéndose hacia
el centro
Todavía no he llegado al folículo secundario, seguimos en el folículo primario.
Ah bueno, ¿entonces, en el orden es como: linfocito B se va hacia la paracorteza y después se
devuelve a la zona folicular?
Si, y es ahí donde se forma el folículo secundario, cuando se devuelve. Todavía no tengo folículo
secundario ni reacción del centro germinal,
Una vez que esto sucede, y les digo yo, hay uno LT foliculares que entran al folículo y unos LB
(poquitos) que se devuelven al folículo, ahora si van a hacer la reacción del centro germinal y ese
folículo ya no va a ser un folículo primario, sino, un folículo secundario.
19**
Aquí vemos nuevamente (Ni puta idea en cuál diapositiva ya que tiene 3 con la misma puta
presentación para explicar la misma mierda que lleva diciendo hace 3 clases. Creo que es esta) la
presentación a un linfocito T; recuerden, que se necesitan como mínimo las dos moléculas
coestimuladoras. Vemos como el LT cambió su receptor de quimocinas y el LB cambió su receptor
de quimocinas y por ese cambio pudieron hacer su interacción (Y en ese dibujo también faltan
moléculas).
Entonces, para que ese LB se active necesita unir a su BCR el epítope, fagocitarlo o endocitarlo,
procesarlo y presnetarlo al LT.
Ahora sí aquí tenemos las moléculas
20**
Al LB que le está presentando el epítope al LT en la zona extrafolicular le expresa, este LT, el
CD40L y le secreta citoquinas, ¿para qué? Para que el LB se diferencie, unas en plasmocitos
productoras de anticuerpos y otras que sean linfocitos que se van a devolver al folículo a hacer la
reacción del centro germinal.
21***
Y lo que les decía era esto, cuando hay una interacción entre las dos células, no es que están en
3ra dimensión los receptores y los ligandos, es más bien como un cierre ligando-receptor,
ligando-receptor, etc. hasta que quedan juntas haciendo una sinapsis inmunológica. Esto es una
presentación de un LB a un LT de verdad pa Dios, así se ve.
Ahora vamos a empezar (Por fin) la reacción del centro germinal. ¿Qué ocurre ahí en la reacción
del centro germinal?
- Maduración de la afinidad (Hipermutación)
- Cambio de isotipo
- Diferenciación en células plasmáticas de vida larga
- Generación de células de memoria
22**
Está gráfica es como un paso a paso (pero no sabían que los LT se llamaban foliculares, ahora se
sabe que hay unos LT que se llaman foliculares, que expresan un factor nuclear [BCL&] y que
entran al folículo a hacer la reacción del centro germinal).
Estos linfocitos (B) van a hacer una especie de concurso, van a modificar un poco su región variable
para ver si logran ser más afines al epítope; ya que van a hacer una prube dura, estos se multiplican
para que de esa clona por lo menos se salven algunos, entonces ellos hacen una gran multiplicación
y endocitan su BCR. Al endocitar su BCR cambian el nombre a centroblastos , y lo que se ve al
microscopio es una zona muy oscura, pero eso sólo se debe a que han proliferado muchísimo esos
LB que entraron a la zona marginal.
Estos centroblastos que ya se han multiplicado van a hacer unas hipermutaciones (mutaciones muy
rápidas) y las pueden hacer varias veces. Esas hipermutaciones se van a hacer en la región
variable, entonces si se cambia un nucleótido por otro ustedes saben que el marco de lectura va a
cambiar, entonces se van a producir uno o dos aminoácidos diferentes, lo que cambia la región
variable, por ejemplo, antes cargada positivamente y cambia por unos aminoácidos neutros o por
unos cargados negativamente; y eso va a cambiar la especificidad.
Cuando ya ellos vuelven a expresar su BCR ya lo hacen con esas hipermutaciones y ya han hecho
esos cambios. Ahora, ¿quién va a ser el juez de esos cambios? ¿quién va a decir “Si, mejoró o no
mejoró la afinidad”? La célula dendrítica que viene mostrando todos los antígenos o complejos
inmunes allí.
Entonces, aquellos linfocitos que ya expresaron su BCR y que cambian el nombre por centrocitos
van a empezar a unirse a los antígenos o complejos inmunes que las célula dendrítica les está
mostrando, y sólo se van unir con mucha rapidéz y con mucha fuerza aquellos que mejoraron la
afinidad. ¿Qué sucede? Este LB viene y le quita el antígeno, ¿se acuerdan de el ejemplo que les
hice con el macrófago? Les dije, ellos estás sosteniendo allí el antígeno, pero si viene un BCR con
mucha más especificidad, se lo roba, se lo atrae. ¿Y qué sucede? Que entonces se hace una
señalización de sobrevida, se producen proteínas antiapoptóticas y este LB va a volver a endocitar,
procesar y presentar el antígeno.
Como la mayoría de ellos hacen rearreglos y mutaciones equivocadas, van a morir; y al morir
muchos de ellos los macrófagos que se encuentran en el folículo, los van a fagocitar y van a limpiar
ese espacio, si usted lo mira al microscopio lo va a ver más claro, por eso se llama zona clara o
zona de luz. Aquí ya estamos hablando de un folículo secundario y de una reacción del centro
germinal.
Vamos a encontrar una zona oscura, una zona clara y una vez que se selecciona, esta selección
no es positiva o negativa en sentido de si es autorreactivo, sino que se va a seleccionar al LB que
es muy afín a su antígeno, ¿cómo se selecciona? Él capta el antígeno, lo endocita, lo procesa y lo
presenta al LT folicular, y este linfocito T tiene unas características particulares porque secreta IL-
21 (al igual que los linfocitos Th17), secreta IL-4 (como el linfocito Th2) y secreta IFN - γ (que las
secretan los linfocitos Th1), por eso es un perfil diferente, casi que compendia los otros.
Entonces este LT folicular le secreta citoquinas, le expresa el CD40L y así se hace el cambio de
isotipo. Es importante resaltar que se necesitó CD40L acá (en la primera interacción BT para
diferenciarlos en plasmocitos o en LB que irían a hacer la reacción del centro germinal) y CD40L
acá (en la selección de los linfocitos B después de la maduración de la afinidad). Así vemos el por
qué les pregunté ayer que qué pasaba si un paciente tenía mutado o el CD40 o el CD40L, ¿qué les
dije que pasaba? No habría reacción del centro germinal, por lo que no pasarían esos 4 procesos
de los que estamos hablando: no habría cambio de isotipo, no habría maduración de la afinidad ni
formación de linfocitos de memoria y plasmocitos de vida larga. La persona sufre de un síndrome
de hiperIgM, siempre va a producir las IgM que se producen extrafolicularmente.
Una vez que ha pasado la maduración de la afinidad y el cambio de isotipo aún no se sabe cuál es
la señal que hace que unos se diferencien en plasmablastos y los otros en linfocitos B de memoria.
Los plasmablastos salen a la circulación y, gracias a unas moléculas como quimocinas y receptores
de quimocinas, llegan a la médula ósea; en la médula ósea comienzan a producir moderadas
cantidades de anticuerpos casi de por vida. Mientras que las células de memoria se ubican en los
órganos linfoides secundarios y en los sitios de entrada de la infección, algunos autores lo definen
como memoria central y memoria periférica, respectivamente.
23**
Aquí se ve la primera cooperación BT , luego la expansión clonal (zona oscura), pero no nos
muestra que se ha endocitado el BCR; no muestra que la célula dendrítica folicular lo selecciona
por la afinidad por el antígeno, el LB lo endocita, procesa y presenta a un LT folicular y, una vez ha
pasado todo esto, se diferencia en plasmocitos de vida larga y células de memoria.
24**
¿Qué más se sabe de la interacción BT? El LT folicular, cuando tiene contacto con el LB, expresa
el receptor ICOS , mientras que el LB expresa el ICOS-L . A esta interacción de ICOS con el ligando
induce un aumento de expresión del factor de transcripción BCL6 que hace que el LT vaya a hacer
la reacción del centro germinal.
25**
Con esta imagen lo que les quiero mostrar es que la célula dendrítica tiene varios receptores del
complemento, aquí nos muestran sólo CR2, pero también puede tener CR1 o CR3; también tiene
receptores de IgG para los complejos inmunes. Entonces desde los complejos inmunes o desde las
moléculas que están unidas al CR2 se le puede pasar o transferir el antígeno al BCR para que se
active y cumpla con lo que acabamos de decir (endocitar, procesar y presentar).
Por lo tanto, ¿cuántas cooperaciones BT hemos visto? Una extrafolicular y la otra intrafolicular
Extrafolicular: Ocurre para que se formen plasmocitos de vida corta y que algunos se devuelvan a
hacer la reacción del centro germinal.
Los LB pueden hacer, en la zona oscura, varios ciclos de hipermutación hasta que ya decide
expresarsu BCR, donde posteriormente hay una selección por afinidad, que consiste en que el BCR
le quita el antígeno a la célula dendrítica y lo endocita, lo procesa y lo presenta al LT folicular que
le ayuda a hacer el cambio de isotipo y la generación de células plasmáticas de vida larga y células
de memoria.
26**
¿En qué consiste la maduración de la afinidad? Inicialmente el BCR tiene una afinidad por un
epítope, y con esas hipermutaciones en la región variable ea afinidad tiene que mejorar, si no
mejora, el LB se muere por apoptosis; esto ocurre de 6 a 10 días después del contacto con el
antígeno, o sea, no es inmediato.
27**
¿Cómo ocurre el cambio de isotipo? Este ocurre cuando el LT folicular tiene contacto con un LB
folicular, y ahí se están expresando el CD40 y el CD40L al igual que el LT le está secretando
citoquinas. ¿Qué sucede? Cuando no hay esa cooperación BT o cuando hay esa cooperación BT
pero… entonces lo primero que se produce es la IgM que ya sabemos que es la mejor activadora
de la vía clásica del complemento. Y esto es lo que se produce en las células plasmáticas de vía
corta.
Las células plasmáticas de vida larga van a hacer cambio de isotipo. Aún no se sabe cuáles son
las citoquinas que inducen las subclases de IgG, algunos autores dicen que es el IFN - γ .
La IL-4 induce a que se haga el cambio de isotipo a IgE y a IgG4 .
El TGF - β y otras citoquinas pueden inducir a que el LB haga cambio de isotipo a IgA.
28**
¿Cómo se hace el cambio de isotipo? El cambio de isotipo ya se hace en el ADN, recuerden que
hasta ahora yo les decía que lo único que se conserva intacto es que ya el VDJ se unió y ya en el
transcrito primario es que se diferenciaban y se podía producir IgM para la superficie e IgD para
formar el BCR, pero el resto quedaba intacto. Esto porque cuando ya se va a hacer el cambio de
isotipo viene un proceso parecido a la unión VDJ; hay unos sitios de switch ( Sμ, Sγ y†Sε ) los
cuales van a ser reconocidos por las AID.
Se unen aquí, se corta el DNA y se juntan la región constante con la región variable. Así como se
juntó el VDJ a μ , el VDJ a δ ; aquí desde el DNA ya se hace nuevamente un bucle y se acerca la
región constante del isotipo de la inmunoglobulina que se necesita. En este caso se trata de la IgE.
29**
Este proceso se hace así: Justo en las regiones S (switch) se separa la doble hebra de DNA y se
hace un transcrito de RNA para sostener la hebra que queda suelta; a la hebra que quedó sola, AID
(Deaminasa Inducida por Activación), toma las citocinas y las convierte en uracilos; en los sitios S
hay separaciones y las citocinas son convertidas en uracilos. Eso es un error en el DNA, ya que
este no puede tener uracilos, es un error grande, posteriormente la n-uracil-glicosilasa quita esos
uracilos porque eso es un error en el DNA, y deja sitios abásicos (sin ninguna base nitrogenada).
Como son tantos los sitios abásicos, es decir, como quedó tan roto el DNA la decisión es que AP-
1 y toda la maquinaria de reparación del DNA ve que eso no es reparable y deciden cortar ese
espacio, tanto de la hebra que estaba arriba como de la hebra que estaba abajo, y de esa forma se
hace el bucle. Repito, en los sitios de switch cuando hay una señalización de las citoquinas
secretadas por el LT folicular, la heterocromatina se descondensa y expone esos sitios S para que
se separen las hebras y se construya ese RNA. Esa hebra separada es tomada por AID, AID se
expresa si hay CD40 y CD40L y este participa tanto en la maduración de la afinidad como en el
cambio de isotipo.
Ahí toma las citocinas y las convierte en uracilos, las desamina, desamina las citocinas y resulta
que como esto es un error en el ADN, entonces llega esta enzima, la n-uracil-glicosilasa, quita estos
uracilos, como este sector del DNA ya está dañado, entonces AP-1 corta estos sitios abásicos,
queda muy dañado este ADN y entonces finalmente este ADN es colocado en un bucle que va a
ser degradado, para que se hace esto? Para acercar la región constante a que se acercará a VDJ.
Estoy cambiando la afinidad de este anticuerpo? si o no?... No, es la afinidad la que estoy
cambiando, sigue siendo la misma, es la región constante y que sucede cuando cambio la región
constante? ... cambia la función efectora . ¿Cambia la especificidad?... No. ¿Entonces por qué se
produjo un IgE?, porque seguramente la respuesta es a un Helminto y necesitamos IgE.
Entonces, los linfocitos B vírgenes se activan ante la presencia de un antígeno, el linfocito B virgen
es quien procesa y presenta ese antígeno a un linfocito T folicular. Este linfocito T folicular va a
secretarle unas citoquinas para que el haga la expresión de AID , entonces el linfocito T va a
secretar citoquinas y va a expresar CD40L . Quién induce la expresión de AID?...CD40, que hacen
las citoquinas? … inducir los procesos para el cambio de isotipo. ¿Qué sucede entonces?... que los
linfocitos B hacen esas hipermutaciones en sus BCR y solamente aquel linfocito B que puede quitar
con mucha afinidad el antígeno a la célula dendrítica folicular, lo endocita, procesa y presenta a los
LT foliculares es seleccionado por su alta afinidad y va entonces con la cooperación de este LT a
hacer el cambio de isotipo. Al hacer el cambio de isotipo ya completo la maduración de la afinidad,
el cambio de isotipo y está interacción que aún no se sabe por qué, algunas se diferenciarán en
células de memoria y células plasmáticas de vida media larga e irán a la médula ósea.
Entonces aquí es una tablita donde ustedes pueden repasar estos conceptos que les acabo de
mencionar, esto es un repaso, usted puede repasar sobre esta tablita.
30**
-Pregunta ininteligible
Hay dos presentaciones y las dos mediadas por LT foliculares, yo les dije el LT que se diferencia a
célula efectora sale al sitio de la infección y queda un linfocito T que se llama folicular porque
expresa el Bcl-6, es el que va a unirse extrafolicularmente por primera vez al LB y va a inducir la
producción de células plasmáticas de corta vida, algunos LT foliculares, entran al folículo y hacen
una segunda interacción B-T para inducir el cambio de isotipo, Si usted ve las dos cooperaciones
B-T tienen las mismas moléculas y de las más importantes para el LB es el CD40 y su unión con el
ligando , para el LT el ICOS con ICOSL porque va a inducir el aumento de Bcl-6, para que el LT
entre al folículo y haga la reacción del centro germinal.
-¿Profe, todas las clonas del linfocito B que pueden reconocer un antígeno soluble y ser activado?
No, algunos seguramente no, es tan al azar ese proceso, se ha visto que algunas clonas lo pueden
hacer, no todas las clonas lo pueden hacer, no todos los LT pueden hacer reacción de centro
germinal, pero sabemos que un MO tiene tantos epítopes que algunos lt y lb que son específicos a
este organismo pueden hacer la reacción germinal y generar células de memoria y células
plasmáticas de vida media larga.
¿Se acuerdan de este cuadrito que les mostré ayer?...
31**
ahora tiene un poco más de sentido, porque entonces yo les digo, mire que este BCR hizo
maduración de la afinidad, ¿cambio la función efectora?...No, cambio el reconocimiento del
antígeno. Es que él dejó de ser BCR y ahora se diferencia o se secreta, ¿qué cambió? no se cambió
la unión con el antígeno, se cambió la función efectora, antes era un receptor, ahora es un
anticuerpo que va a cumplir su función efectora de acuerdo al isotipo que tenga. Ah que ahora es
un isotipo distinto, ¿que cambio? No cambio la unión con el antígeno, sino la función efectora, pasó
de ser una IgM a una IgA. Ayer lo miramos, cual es la función efectora de la IgM y cual es la función
efectora de la IgG, son muy diferentes, lo único que coinciden es en la activación de la vía del
complemento pero mejor lo hace la M, pero la otra es opsonina, hace ADCC, neutraliza, activa
mastocitos, entonces mejora la respuesta, entonces con esta tablita usted me dice que entendió el
concepto de cambio de afinidad, cambio de isotipo y la relación de tener un BCR y tener anticuerpos
secretados.
32**
Qué sucede entonces con las células plasmáticas, ya les explique que las células de memoria eran
muy poquitos los estudios que hay. El plasmablasto sale del folículo y se ubica en la médula ósea,
gracias a que expresa el CXCR4 y es atraído por el CXCL12 que es una quimioquina que hay en
la médula ósea, aquí los eosinófilos le secreta IL-6 y APRIL y estas dos citoquinas van a hacer que
este linfocito esté activado permanentemente sin necesidad de que tenga que estar unido a un
antígeno para estar secretando anticuerpos. Entonces esta célula se sabe que no necesita la
presencia del antígeno para estar secretando pequeñas cantidades de anticuerpos y la explicación
es que estas dos citoquinas unidas a su receptor en esta célula van a inducir que ella esté secretand
o pequeñas cantidades de estos anticuerpo. Ya cuando llegan a Médula ósea se llaman cella
plasmáticas de larga vida, mientras recorre de órgano linfoide secundario a médula ósea se llama
plasmablasto.
Yo les mostré una gráfica en donde les decía que así como el BCR activaba a través de
fosforilaciones, la activación de la célula , había un momento que debía haber una inhibición de
esta activación y esta inhibición la hace este receptor que lo mencionamos hace un rato, este se
llama el Fc γ RIIb(CD32) y el CD22 , resulta que ellos tienen unos motivos que al ser fosforilados
activan a las fosfatas y al activar a las fosfatasas las fosfatasas empiezan a desfosforilar el BCR (
quitar fosfatos a Ig α e Igβ ) y finalmente se inactiva el linfocito B, así es que se inactiva el linfocito
B.
33**
Terminamos entonces hablando de recirculación tanto de LT como de LB. Este pedacito es corto.
Hemos estado hablando que los linfocitos salen de la Médula Ósea entran a órgano linfoide
secundario que luego salen de ahí por sangre y por linfa. Entonces cuando los LT y LB salen de
sus órganos linfoides ya maduros, viajan vía sanguínea y entran a través de las vénulas endoteliales
altas (HEV) , los linfocitos B se ubican en los folículos y los linfocitos T, se ubican en la paracorteza
, esto en parte se debe a que hay unos receptores de quemoquinas y unas quemoquinas.
Entonces más o menos 25x10^9 linfocitos están aquí recirculando, entre los órganos linfoides
secundarios, una vez que se activan los linfocitos, entonces, estos linfocitos, los LT, van a salir a
través de las arterias y van a llegar a los sitios de la infección para cooperar, en el caso de los LT
CD4 con las células que allí se encuentran y poder eliminar la infección.
34*
Los linfocitos salen por el ducto torácico y por los vasos sanguíneos, ahorita me decían que si sólo
con las quimioquinas era suficiente para que los linfocitos migren… no, se necesitan de más
moléculas: se necesitan las selectinas, integrinas y quemoquinas :
Las selectinas, que se llaman P - selectinas y E-selectina , aquellas que están en el endotelio
activado. y L-selectina , aquella que está en el linfocito, siempre se van a unir a un carbohidrato en
una glicoproteína y la van a tener, en este caso, células como los monocitos, los neutrófilos y los
linfocitos y el el caso de la selectina-L el ligando lo va a tener en el endotelio, especialmente en las
vénulas endoteliales altas (HEV) , estas selectinas hacen una unión que no es muy fuerte, una
unión leve que permite lo que se llama el rodamiento de los linfocitos . Las integrinas son las que
van a hacer esa unión fuerte, que va a permitir la pavimentación de las células, que se van a pegar
fuertemente al endotelio vascular y puedan hacer una extravasación desde el vaso sanguíneo hasta
el tejido, dentro de las integrinas tenemos el LFA-1 (CD11a, CD18) que lo tienen neutrófilos,
macrófagos, linfocitos B y linfocitos T , su ligando se llama el ICAM-1 y el ICAM-2 , que están en el
endotelio activado , el Mac-1 se encuentra también en células fagocíticas y su ligando ICAM-1,
ICAM-2, en el endotelio activado en este paso constitutivo. El VLA-4, lo tienen también monocito,
células T y su contraparte lo tienen también el VCAM-1. La integrina A4B7 la tienen monocitos,
células T del intestino y su contraparte, su ligando es el VCAM, aquí cuando les mande la
diapositiva, van a tener todos esos datos.
35**
Cuando hay una activación del endotelio vascular, ya sea por citoquinas o por moléculas como
lipopolisacáridos de los microorganismos gram-negativas, este endotelio va a expresar, receptores
de quimioquinas y va a expresar selectinas e integrinas, pero una vez que la quimioquina se une a
su receptor, va a inducir que la integrina que tenía una conformación de baja afinidad, se transforme
en una conformación de alta afinidad. Las selectinas se unen muy levemente para hacer el
rodamiento.
Una vez que la quimioquina se une al receptor, vamos a tener una unión fuerte y en este caso el
linfocito va a hacer un proceso de diapédesis o de traspaso a través del endotelio activado.
36**
Entonces sabemos que gracias a las arterias y a través de las vénulas endoteliales altas, va a entrar
el linfocito T, este linfocito T, va a presentarle el antígeno a una célula dendrítica por primera vez y
una vez que se activa este linfocito B virgen, debería mostrar moléculas coestimuladoras, va a salir
del órgano linfoide secundario y va a ir al sitio donde ocurre la infección. Las HEV van a ser ricas
en quemoquinas, la CCL19 y la CCL21 que van a hacer que este linfocito con su receptor llegue
allí.
Las HEV son células grandes, inducidas a producirse por la linfotoxina, y una vez esto sucede, la
L-selectina, se une a está adresina y la célula podrá llegar y pasar a este lugar que es la
paracorteza.
37**
Cómo recirculan entonces los linfocitos vírgenes. Los linfocitos vírgenes expresan la L-selectina se
une a CD34 y a ICAM-1, en las HEV. Expresan también la integrina LFA-1 y VLA-4, que se unen a
ICAM-1 y VCAM-1 que están en las células endoteliales altas y expresan CCR7 que se une a
CCL19 y CCL21, que son producidas por HEV y fibroblastos del aparato reticular. Entonces dijimos,
se necesita una selectina para hacer primero una unión suave, se necesita luego un receptor de
quimioquina y unas quemoquinas que inducen que la integrina exprese mayor afinidad por el
ligando y haga una unión fuerte, entonces estas son las moléculas que participan en esta
recirculación del linfocito, y esto es para que pueda pasar de las HEV hacia el órgano linfoide
secundario, en este caso un ganglio linfático. También se necesita de otra molécula, el S1P
(esfingosina-1-fosfato) está molécula se encuentra en grandes cantidades en la sangre y en la linfa
y los linfocitos vírgenes, expresan el S1PR1 que es el receptor para está esfingosina, que sucede.
S1P como está en grandes concentraciones en la linfa y en la sangre, atrae a los linfocitos, para
que salgan de los órganos hacia la sangre y puedan ser transportados de un órgano a otro,
entonces, lo que sucede es que cuando va a salir el linfocito, expresa el receptor, y el linfocito
cuando sale a la sangre al captar esas grandes cantidades de S1P, entonces el receptor se
endocita, una vez que se une al ligando, el receptor se endocita. Entonces eso permite que se
pueda seguir recirculando, que salga de la linfa y llegue a un órgano linfoide secundario. En el
órgano linfoide secundario, entonces, las integrinas, las selectinas, las quemoquinas y los ligandos
de quemoquinas, van a hacer que se peguen a las HEV y que vuelva y una vez que entra, se
exprese nuevamente el receptor. Cuando hay mucha esfingosina el receptor se endocita, cuando
hay poca esfingosina el receptor se expresa. Entonces en los órganos linfoides secundarios, el
receptor va a estar expresado y en la linfa el receptor se endocita para poder permitir el traspaso.
38**
Mirémoslo acá, vemos como los linfocitos entran por las HEV y salen por los vasos eferentes a otro
órgano linfoide secundario, si no se a encontrado con el antígeno, no se ha activado, entonces hace
esa recirculación. Cuando ese linfocito ,entonces, reconoce el antígeno, porque la célula dendrítica
que estaba en el sitio de la infección, vino se lo presentó y lo activo, saale este linfocito activado
por los vasos linfáticos eferentes va a entonces a terminar al ducto torácico y del ducto torácico a
la vena cava y se reparte entonces a través de la sangre al tejido donde está ocurriendo la infección.
Cómo participa entonces esta molécula en la recirculación?... Entonces mire, sabemos que cuando
entran los linfocitos desde las HEV, han endocitado este receptor porque les dije que había gran
cantidad en la sangre y en la linfa, entonces aquí lo tienen endocitado, estos aquí se van a quedar
un tiempo. Cuando ya han reconocido el antígeno, en cuestión de minutos a horas, hace que
entonces el receptor salga, esto hace que el linfocito salga del órgano linfoide hacia la linfa donde
reconoce el S1P, cuando reconoce al antígeno se demora en reexpresarse, o sea, mientras se
activa la célula con el antígeno, se demora horas a días esa reexpresión de ese receptor, porque
se necesita esperar que ese linfocito en el órgano linfoide secundario, haga su proceso de
activación y ya salga de ahí como una célula activada.
39*
Está gráfica es un resumen de esto que les estoy diciendo, entonces en las HEV vemos que en los
nódulos linfáticos salen al ducto torácico, del ducto torácico al corazón y de ahí vuelve a los nódulos
linfáticos, digamos que ese es el proceso de recirculación. Tenemos entonces que en las HEV,
vamos a tener los ligandos para la selectina-L, vamos a tener las quimioquinas CCL21 y CCL19,
para que se unan al CCR7 y que una vez que se unan a este receptor esta integrina se vuelva más
afín a su ligando. Entonces tenemos en todo esto el rodamiento, la activación y finalmente la unión
al endotelio para que puedan pasar, en este caso los linfocitos T del HEV a la paracorteza,
dependiendo de la expresión del receptor de S1P, va a estar o va a salir en la sangre este linfocito,
ya sea activado o no, les mencionaba que cuando se activaba en presencia de antígeno, entonces
se va a quedar muchas horas, incluso días en el proceso de activación. Si no encuentra el antígeno,
en cuestión de minutos, vuelve y expresa el receptor y entonces vuelve y empieza el proceso de
recirculación.
40**
Cuando se aumenta la cantidad del receptor entonces se baja la sensibilidad a las quemoquinas,
porque entonces se quedaría allí y cuando se expresa el CCR7, aumenta la sensibilidad a
quimioquinas, pero se disminuye la sensibilidad a S1P.
Cómo migran entonces los linfocitos efectores, porque estos eran los linfocitos vírgen. Los linfocitos
efectores por las mismas moléculas S1PR1, CCR7, selectina-L (que también reduce la expresión
para que pueda salir). Todo lo que hace que permanezca en el órgano linfoide secundario
disminuye, CCR7 y selectina-L, para que pueda salir a los tejidos y expresar S1PR1 y ligandos de
selectina P y E, que están en el endotelio activado.

41**
Hay unas quemoquinas que están en el sitio de la infección, que van a ayudar a traer a esos LT
activados CXCR3, CXCL10, son la quemoquina y el receptor, que van a permitir que se unan a este
endotelio activado en el lugar de la infección. CD69 es una molécula que se expresa en los linfocitos
activados, y se expresa para que el receptor S1P no se exprese , que se endocita por días, mientras
se acaba el proceso de activación de ese LT y luego se vuelve a expresar, se baja la producción
de CD69 cuando se necesita que salga activado y vuelve a expresarse S1PR1. Eso es un juego de
moléculas.

42*
Resumiendo, para que sean atraídos al foco inflamatorio, se necesitan las quimioquinas, para
rodamiento se necesitan las selectinas, para adhesión firme se necesitan las integrinas, y para
diapédesis se necesitan moléculas como CD31 y el complejo B…(no se entiende)... eso lo van a
ver en inflamación.

43**
La recirculación del LB es muy parecida, se manejan las mismas moléculas, quemoquinas, el
manejo del receptor S1P y la llegada tiene que ver con quimioquinas y sus receptores. También
sabemos que, se necesita de CXCR4 y CXCL12 para que el plasmoblasto pueda llegar a la médula
ósea y en el caso de las células plasmáticas de larga vida que producen la IgA ellas migran a la
mucosa y a través de CCR9 y CCL25 , ellas van a estar ahí ubicadas secretando IgA que es lo que
se necesita. Nos vemos en el examen, estamos abiertos a tutorías.

44**

TAREA
1. ¿Qué función cumpe el medicamento Fingolimod en la esclerosis múltiple?
2. ¿Qué otras consecuencias a nivel inmunológico tiene este medicamento?