1.01350.

0010 Preparación del reactivo

Eosina-azul de metileno en solución según Leishman

1.01350.1000 Para la preparación de aproximadamente 100 ml de solución se añaden y

disuelven:

Eosina-azul de metileno según Leishman 0,12 g

Microscopía Metanol 100 ml
Agitar durante 1 hora a temperatura ambiente
Eosina azul de metileno según Dejar reposar durante 5 días y filtrar
Leishman La solución de colorante recién preparada debe filtrarse antes de su uso.
para microscopía Se trata de una solución de colorante concentrada que ha de ser diluida con una
solución tampón de la manera indicada antes de ser usada (cubeta de tinción y
aparato automático de tinción).

Producto sanitario para diagnóstico in vitro

Solución tampón
Para la preparación de aproximadamente 1000 ml de solución se añaden y
disuelven:
para la tinción de frotis de sangre y de médula ósea y de material citológico
clínico Tableta tampón, art. 111373 (pH 6,4), art. 111374 (pH 1 tableta
6,8) o art. 109468 (pH 7,2) en función del resultado de
El presente colorante “Eosina-azul de metileno según Leishman - para microsco- tinción deseado
pía” es utilizado para el diagnóstico celular en la medicina humana y se empleo
en el examen de muestras de origen humano. Se trata de un colorante seco que Agua destilada 1000 ml
se utiliza para la preparación de una solución de colorante, junto con otros ma-
teriales de diagnóstico in vitro pertenecientes a nuestra cartera, hace evaluables Solución de tinción de Leishman diluida para tinción manual en la cubeta
determinadas para el diagnóstico estructuras de destino (mediante fijación, de tinción
dado el caso inclusión, tinción con la solución eosina-azul de metileno según Para preparar aprox. 200 ml de solución se añaden juntos:
Leishman arriba indicada, contratinción, montaje) en material de examen hema-
tológico y clínico-citológico, como p. ej. frotis de sangre total y de médula ósea. Eosina-azul de metileno en solución según Leishman 30 ml
Solución tampón 20 ml
Principio
La tinción de los núcleos celulares es basa en la interacción molecular entre el Agua destilada 150 ml
colorante Eosina A y un complejo Azur B-ADN. Los dos colorantes forman un mezclar
complejo Eosina A - Azur B-ADN, dependiendo la intensidad de la tinción resul-
tante del contenido de Azur B y de la relación de Azur B respecto a la Eosina A.
El resultado de la tinción puede ser influenciado además por factores como la Solución de tinción de Leishman diluida para tinción en el aparato automáti-
fijación, los tiempos de tinción, el valor ph de las soluciones y las sustancias co de tinción
tampón. Para preparar aprox. 300 ml de solución se añaden juntos lentamente:

Eosina-azul de metileno en solución según Leishman 50 ml

Material de las muestras
Como material de partida se emplean frotis frescos y nativos de sangre total o Solución tampón 30 ml
médula ósea así como material clínico de la citología como sedimento urinario,
Agua destilada 220 ml
esputo, frotis tomados de punciones aspirativas con aguja fina (PAAF/FNAB),
líquidos de lavado, imprints. mezclar y dejar reposar durante 10 minutos

Reactivos
Art. 101350 Técnica
Eosina-azul de metileno según Leishman 10 g, 1 kg Tinción en la cubeta de tinción
para microscopía
Los portaobjetos deberían ser escurridos bien por goteo después de los diferentes
Necesario además: pasos de tinción, de esta manera se podrá evitar el innecesario arrastre de solu-
ciones.
Art. 106009 Metanol para análisis EMSURE® 1 l, 2,5 l, 5 l
ACS, ISO, Reag.Ph Eur Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
indicados.
Art. 109468 Tabletas tampón pH 7,2 100 tabs
para preparación de solución tampón según Portaobjetos con frotis secado al aire
WEISE para tinción de frotis sanguíneos Eosina-azul de metileno en solución según Leishman 3 minutos
o
Art. 111373 Tabletas tampón pH 6,4 100 tabs Solución de tinción de Wright diluida para tinción manual 6 minutos
para preparación de solución tampón según Solución tampón 1 minuto
WEISE para tinción de frotis sanguíneos
o Solución tampón 1 minuto
Art. 111374 Tabletas tampón pH 6,8 100 tabs Secar al aire (p. ej. durante la noche o a 50 °C en el armario de secado)
para preparación de solución tampón según
WEISE para tinción de frotis sanguíneos

Alternativamente: Tinción en el banco de tinción

Art. 105387 Eosina-azul de metileno en solución según 500 ml Para conseguir un óptimo resultado de tinción, deberían respetarse los períodos
Leishman modificada indicados.
para microscopía
Portaobjetos con frotis secado al aire
Preparación de las muestras Eosina-azul de metileno en 1 ml cubrir completamente 1 minuto
La toma de muestra debe ser realizada por personal especializado. solución según Leishman
Todas las muestras deben tratarse de acuerdo con el estado de la tecnología. Solución tampón 2 ml mezclar 5 minutos
Todas las muestras deben estar rotuladas inequívocamente.
Deben usarse instrumentos adecuados para la toma de muestras y en la prepa- Solución tampón enjuagar 1 minuto
ración, y deben seguirse las instrucciones del fabricante para la aplicación / el Solución tampón enjuagar 1 minuto
empleo.
Secar al aire (p. ej. durante la noche o a 50 °C en el armario de secado)
Tinción en el aparato automático de tinción Protección contra infecciones
Debe observarse a toda costa una protección eficaz contra infecciones de acuer-
Tiempo Estación Dip do con las directivas de laboratorio.
Portaobjetos con frotis secado al aire
Eosina-azul de metileno en solución según Indicaciones para la eliminación de residuos
3 minutos 2 on El envase debe ser eliminado de acuerdo con las directivas válidas de elimina-
Wright
ción de residuos.
Solución de tinción de Wright diluida para Las soluciones usadas y las soluciones caducadas deben eliminarse como
6 minutos 3 on
tinción en el aparato automático de tinción desecho peligroso, debiéndose cumplir las directivas locales de eliminación de
Solución tampón 1 minuto 4 on residuos. Podrá pedirse información sobre los procedimientos de eliminación
bajo el Quick Link “Hints for Disposal of Microscopy Products” en
Agua corriente del grifo 2 minutos 5 on www.microscopy-products.com. Dentro de la UE tiene validez el REGLAMENTO
(CE) Nº 1272/2008 sobre la clasificación, el etiquetado y el envasado de sustan-
Secar 3 minutos 6 - cias y mezclas, por el que se modifican y derogan las Directivas 67/548/CEE y
1999/45/CE y se modifica el Reglamento (CE) Nº 1907/2006.

Para el almacenamiento de preparados hematológicos durante varios meses se Reactivos auxiliares

recomienda el montaje con un medio de montaje (p. ej. Neo-Mount®, DPX nuevo,
Entellan® Nuevo) y un cubreobjetos. Sin montaje, la tinción tendrá una estabili-
dad de unos 3 días; si se cubre con aceite de inmersión, la estabilidad será de
sólo unas horas.
Para el análisis de preparados teñidos con un aumento microscópico >40x se
recomienda el uso de aceite de inmersión.
Resultado
Solución tampón Solución tampón Solución tampón
pH 6,4 pH 6,8 pH 7,2
Núcleos celulares violeta rojizo violeta rojizo violeta rojizo
Linfocitos plasma azul plasma azul plasma azul
Monocitos plasma azul plasma azul plasma azul Leishman modificada
grisáceo girsáceo grisáceo
Granulositos gránulos violeta gránulos violeta gránulos violeta
neutrófilos claro claro claro
Granulositos gránulos rojo gránulos rojo gránulos rojo Art. 107961 Entellan® Nuevo 100 ml, 500 ml,
eosinófilos ladrillo ladrillo ladrillo
Granulositos gránulos violeta gránulos violeta gránulos violeta
basófilos oscuro oscuro oscuro
Trombocitos violeta violeta violeta
Eritrocitos rojizo rojizo rojizo
Notas técnicas
El microscopio usado debería corresponder a los requisitos de un laboratorio de
diagnóstico médico.
Si se utilizan procesadores de histología y aparatos automáticos de tinción,
deberán tenerse en cuenta las instrucciones de operación del fabricante, tanto
del aparato como del software.
La solución de colorante recién preparada debe filtrarse antes de su uso.
Eliminar el aceite de inmersión en exceso antes de archivar.
Diagnóstico
Los diagnósticos deberán ser establecidos solamente por personas autorizadas
y cualificadas.
Deberán emplearse terminologías vigentes.
Deberán elegirse y realizarse ensayos ulteriores según métodos reconocidos.
Cada aplicación debería implicar controles adecuados para descartar resultados
erróneos.
Almacenamiento
Guardar Eosina-azul de metileno según Leishman - para microscopía de +5 °C
a +30 °C.
Estabilidad
Eosina-azul de metileno según Leishman - para microscopía se puede utilizar
hasta la fecha de caducidad indicada.
Después de abrir el frasco por primera vez, el contenido almacenado entre +5 °C y
+30 °C es utilizable hasta la fecha de caducidad indicada.
Los frascos deben mantenerse siempre bien cerrados.
Notas sobre el empleo
Solamente para uso profesional.
Para evitar errores, la aplicación debería ser realizada por personal especializado.
Deben cumplirse las directivas nacionales sobre seguridad en el trabajo y ase-
guramiento de la calidad.
Deben emplearse microscopios equipados de acuerdo con el estándar.
Si es necesario, deberá utilizarse una centrifugadora que corresponda al están-
dar de laboratorios y a las exigencias.
Art. 100579 DPX nuevo 500 ml
medio de montaje anhidro para microscopía
Art. 100869 Entellan® nuevo para montadores de 500 ml
cubreobjetos
para microscopía
Art. 100974 Etanol desnaturalizado con aprox. 1 % 1 l, 2,5 l
de metiletilcetona para análisis EMSURE®
Art. 103699 Aceite de inmersión según ISO 8036 frasco gotero de
para microscopía 100 ml
Art. 104699 Aceite de inmersión frasco gotero de
para microscopía 100 ml, 100 ml,
500 ml
Art. 105387 Eosina-azul de metileno en solución según 500 ml
para microscopía
Art. 106009 Metanol para análisis EMSURE® 1 l, 2,5 l, 5 l
ACS, ISO, Reag.Ph Eur
medio de montaje rápido 1l
para microscopía
Art. 108298 Xileno (mezcla de isómeros) 4l
para histología
Art. 109016 Neo-Mount® frasco gotero de
agent de montage anhydre 100 ml, 500 ml
pour la microscopie
Art. 109468 Hemacolor® Tabletas tampón pH 7,2 100 tabs
para preparción de solución tampón
según WEISE
para tinción de frotis sanguíneos
Art. 109843 Neo-Clear® (sustituto de xileno) 5l
para microscopía
Art. 111373 Tabletas tampón pH 6,4 100 tabs
para preparación de solución tampón
según WEISE para tinción de frotis sanguíneos
Art. 111374 Tabletas tampón pH 6,8 100 tabs
para preparación de solución tampón
según WEISE para tinción de frotis sanguíneos
Clasificación de substancias peligrosas
Art. 101350
Tener en cuenta la clasificación de substancias peligrosas en la etiqueta y las
indicaciones en la ficha de datos de seguridad.
La ficha de seguridad está disponible en el sitio web y a solicitud.
Componentes principales del producto
Art. 101530
C.I. 52015 + azur 52 %
C.I. 45380 48 %
Otros productos de IVD
Art. 101383 Eosina-azul de metileno en solución 100 ml, 500 ml,
según Wright 2,5 l
para microscopía
Art. 101424 Eosina-azul de metileno en solución según 100 ml, 500 ml,
May-Grünwald modificada 1 l, 2,5 l
para microscopía
Art. 109204 Azur-eosina-azul de metileno según Giemsa 100 ml, 500 ml,
en solución 1 l, 2,5 l
para microscopía
Art. 111674 Hemacolor® Tinción rápida de frotis 1 set
sanguíneos
kit de tinción para microscopía
Literatura
1. Löffler, H., Rastetter, J., Haferlach, T, Atlas der klinischen Hämatologie, 2004,
Springer-Verlag Berlin Heidelberg
2. Routine Cytological Staining Techniques: Theoretical Background and Practice,
Mathilde E. Boon, Johanna S. Drijver, 1986, Elsevier Science Publishing
Company
3. Conn’s Biological Stains: A Handbook of Dyes, Stains and Fluorochromes for
Use in Biology and Medicine, 10th Edition, (ed. Horobin, R.W. and Kiernan,
J.A). Bios, 2002

Consult instructions Manufacturer Catalog number Batch code

for use

Caution, consult Use by Temperature

accompanying documents YYYY-MM-DD limitation

Status: 2018-03-02

Merck KGaA, 64271 Darmstadt, Germany

Tel. +49(0)6151 72-2440
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MA 01821, USA, Tel. +1-978-715-4321