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 Contrôle de Microbiologie générale
Téléphone portable interdit

Répondre aux questions suivantes :

Une bactérie esl jsolée à pa(ir d'un prélèvement sur une eau industrjelle à Ia demande du responsable qualité de cele entreprise. Le laboratoire
d'analyse et d'identificatron a pour rÔle d'identifier cette souche bactérienne qui contamine l'eau jndustrielle.

Le laboratoire réalise un étalement sur gélose normale avec incubation à 30oC penclant 48 H. Il y a développement en grande quantité
d,un type de
colonie (colonie type A) et de quelques autres colonies (Vpe B)

Identification des colonies de type A

Le lechnicien du laboratoire réalise un test KOH qui se révèle négatif et une coloration de Gram (voir annexe 1). Il effectue une recherche
de
l'enzyme respiratoire. Il ensemence un tube Vf, une gélose drigalski, une gélose BCp et une gélose chapman.

i. Conclure sur le tyçre de Gram de la souche (Grarn + ou Gram -) I Lpt

R : KOH - donc Gram +

2. Conclure sur la morphologie et le mode de groupement de la bactérie / 1 pt

R : coques rondes en amas

3. Quelle est l'enzyme respiratoire recherchée ? | L pt

R : Catalase

Après incubation, on réalise une lecture des miljeux de culture

Tube Vf : culture sur toute la hauteur du tube mais avec autant de culture en haut du tube qu'en bas du tube
Gélose drigalski : pas de présence de colonies
Gélose BCP : développement de colonies violeltes
Gélose chapman : développement de colonies roses

4. Donner le type respiratojre de la bactérie / 1 pt

R : anaérobie aérotolérante

5. Réaliser une interprétation des résultats de la gélose drlgalski (composition en annexe 2)

| 2pts
R : Si pas de présence de colonies, donc la bactérie est de type Gram + car la gélose drigalski est sélective des bactéries Gram
Attention : si la bactérie ne se développe pas sur cette gélose, on ne sait pas si elle est iac -
- ou Lac +.
6. Réaliser une inlerprétation des résultats de la gélose BCP (composition en annexe 3)
/ 1pt
R : Les bactéries sont lactose -

7. Réaliser une tnterprétation des résultats de la gélose chapman (composition en annexe 4) | 2 pts
R: développement = suspicion de staphylocoques
Colonies roses = manitol -

B. Comment qualifier ces bactéries par rapport aux conditjons de pH ? / 1pt

R : neutrophile

On réalise une culture en milieu liquide de cette bactérie et on suit l'évolution de I'absorbance en fonction du temps.

9' Sur un graphique (assez grand), tracer l'évolution de cette absorbance en faisant apparaître les djfférentes phases
de la croissance
/
(graphique annoté) 3 pts

Courbe de croissance

a : latence
b : accélération
c : exponentielle de croissance
d : ralentissement
e r stationnaire
f : déclin, mortalité cellulaire,
décroissance, lyse cellulaire
 Contrôle de Microbiologie générale

X
g .L-t)
Evolution de la vitesse spécifique de
croissance

La vrtesse spécifique de croissance varie

selon les phases de la courbe de
croissance. Cette viiesse spécifique de
croissance est nulle lors de la phase de
latence et de la phase stationnaire. Elle
augmente durant la phase d'accélération
et elle est maximale et constante durant
la phase exponentielle oe crorssance

10. Expliquer ce qu'est la vrtesse spécifique de croissance / 1/5 pts

La vitesse spécifique de croissance : px. , p s'exprime en temps-l . (Par exemple en h-l ou en min-l.), Plus il est grand et plus la
vitesse de croissance du microorganisme est grande. Ce facteur évolue en fonction des phases de la croissance. Il est maximum
durant la phase exponentielle de croissance et prends le nom de px. EXPO. Ce paramètre sert de référence pour caractériser une
cultu re,

11. Tracer sur le graphique l'évolution de cette vitesse spécifique de croissance | 2 pts
12. Comment calcule-t-on la vitesse spécifique de croissance ? pt |I

Ln (N) Détermination graphique de la durée de la phase

Détermination graphique et mathématique de p et Ln (N)
de latence
G

Ln(Nr)
LnNz - LnNr
ll=
F
Ln(N, )
T2-T1

Ln2
v
p

Ln(Nn)
Ln(Nn)

T1 T2
Temps (min
Temps (min
ou H) Temps de ou H)
lalence

13. Expliquer ce qu'est le temps de génération ? / 1,5 pts

C'est le temps de doublement de la population. Ce temps est calculé à partir de la vitesse spécifique de croissance.
Temps que met une cellule à se diviser et la population dont elle provient à doubler.

14. Comment calcule-t-on le temps de génération ? |I pt

Ln2
o=-
-p