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Director Externo:
Olga Lucia Ospina Ramírez, Ph.D.
Director Interno:
José Manuel Flórez Pérez, Ph.D.
I. Introducción ...................................................................................................................... 1
Perspectivas................................................................................................................................... 41
Anexos .................................................................................................................................... 42
I. Introducción
Para llevar a cabo este estudio biofísico de las películas interfaciales de surfactante
pulmonar, se realizaron isotermas de compresión de origen porcino, a partir de lavados
broncoalveolares; teniendo señalada la cantidad de fosfolípidos que contiene el material (Bligh,
1959) se evalúan las isotermas, mediante la medición de la presión superficial en función del área
de la interfase aire-líquido, a dos temperaturas de referencia 25°C y 37°C. En estas mediciones
se tiene en cuenta la variación de factores como: la masa del surfactante (10μg, 25μg y 50μg)
que se aplica en la interfase, y la velocidad de compresión de la película (37mm/min,
70mm/min y 100mm/min), utilizando una balanza de tensión superficial o balanza de superficie
KSV Nima, que consta básicamente de un recipiente de teflón en el que se dispone una
subfase acuosa de buffer monocapas, sobre la cual se deposita el material surfactante que forma
la película interfacial a analizar.
Introducción
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I.1.1. Historia.
Introducción
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I.1.2. Composición.
Introducción
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Figura 2: Fosfolípidos y lípidos neutros representados por medio de un esquema, en dónde se puede
observar la estructura química e identificar las regiones hidrofílicas e hidrofóbicas de cada uno.
Esquema tomado de (Ospina, 2011)
Las proteínas son moléculas formadas por aminoácidos y cumplen con diversas
funciones en el organismo. En el SP existen cuatro proteínas: SP-A, SP-B, SP-
C y SP-D (Figura 3), que en parejas cumplen con unas funciones específicas; la
SP-A y la SP-D son glicoproteínas hidrofílicas encargadas principalmente de
Introducción
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Figura 3: Representación gráfica de las cuatro proteínas (SP-A, SP-B, SP-C y SP-D) existentes en el
surfactante pulmonar ubicado en la hipofase acuosa del alveolo. (Pérez-Gil, 2008)
Introducción
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y la segunda se forma entre la capa de agua que rodea al alveolo, con la sangre que
circula por los capilares de las paredes alveolares.
Introducción
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En los líquidos se pueden observar fuerzas internas provocadas por la atracción entre
las moléculas, a esta atracción se le conoce normalmente como cohesión y a las
fuerzas internas que se producen entre las moléculas que interactúan, se les conoce
como fuerzas de Van der Waals. Estas fuerzas que disminuyen al aumentar la
distancia entre las moléculas, ayudan a que exista entre ellas una mayor estabilidad
que, aunque son fuerzas débiles en comparación con las fuerzas internas de las
moléculas, se dan en grandes cantidades, generando importantes contribuciones a las
propiedades físicas de los líquidos (Castellan, 1987).
En una interfase aire-líquido, las fuerzas de Van der Waals difieren de acuerdo a las
fases en las que se encuentran las sustancias que están en contacto, y como la
separación entre las moléculas es mucho mayor en una fase gaseosa que en una fase
condensada, entonces las fuerzas de Van der Waals son menores en los gases que en
los líquidos. Si se analiza el líquido en la interfase, se puede observar que las
interacciones de las moléculas de la superficie, no se encuentran en equilibrio debido
a que no hay fuerzas lo suficientemente intensas que actúen hacia arriba para que la
fuerza neta sobre ellas sea cero; este desequilibrio en la interfase hace que las
moléculas experimenten fuerzas hacia el centro del líquido, provocadas por las que
están justo debajo de las que se encuentran en la superficie, causando así que el
líquido tienda a minimizar su superficie resistiéndose a fuerzas de expansión (Wilson
& Buffa, 2003).
Cuando la interfase aire-líquido se encuentra en equilibrio hidrostático y se somete a
un proceso reversible e isotérmico de expansión, el trabajo mecánico realizado en el
sistema se describe por medio de dos situaciones: la primera situación, define el
trabajo que realiza la presión para incrementar el volumen del sistema de la siguiente
manera , pdV; y la segunda situación, especifica que, el trabajo que incrementa el
área de la interfase lo realiza la tensión superficial γ, en donde el signo negativo
indica que γ se opone a dicho proceso de expansión, –γdA (Ono & Kondo, 1960).
Introducción
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Teniendo en cuenta estas dos situaciones, el trabajo total que se ejerce sobre la
superficie cuando hay cambios en su área y volumen es:
𝛿𝑊 = 𝑝𝑑𝑉 − 𝛾𝑑𝐴. (1)
Debido al proceso que se está ejerciendo sobre el sistema, a medida que cambia el
área de la interfase, la energía interna U del sistema también cambia y por
consiguiente se genera un incremento en la cantidad de calor. Esto se describe por
medio de la primera ley de la termodinámica como:
𝛿𝑄 = 𝑑𝑈 + 𝛿𝑊, (2)
Y teniendo en cuenta la relación de la ecuación (1) con la primera ley, tenemos:
Introducción
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Introducción
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Figura 4: a) presiones ejercidas tanto en el interior como en el exterior de una membrana elástica. b)
Fuerzas generadas por las diferencias de presiones y la tensión superficial de la superficie de la
membrana, y a la derecha se observa una proyección de la superficie de la semiesfera sobre un plano
imaginario. Esquema modificado de (Kane & Sternheim, 2007)
Introducción
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Figura 5: Ley de Laplace representada por dos alveolos de diferentes tamaños que se encuentran
interconectados. Esquema modificado de (Ospina, 2011)
Introducción
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I.2.4. Adsorción
Cuando el interior del alveolo está recubierto por una fina capa de agua,
instantáneamente se genera fuerzas intermoleculares que hacen que el alveolo tienda
a minimizar su superficie y por consiguiente tienda al colapso; está tensión en la
superficie del líquido, se puede contrarrestar fácilmente con una sustancia que sea
capaz de acumularse en la superficie (Figura 6) y disminuya la energía total
interfacial del sistema (Villar, López, & Cussó, 2013), y como ya se ha mencionado
anteriormente, esta sustancia la secreta las células neumocitos tipo II y se le conoce
como surfactante pulmonar.
Introducción
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Figura 6: Adsorción de una película de surfactante pulmonar que se ubica en la interfase aire-líquido
Si se deposita una sustancia con propiedades anfipáticas en una superficie acuosa y se deja
reposar por un tiempo determinado, esta se adsorbe en la interfase, formando una
monocapa a la que se le conoce como película de Langmuir, que produce cambios en las
propiedades físicas del sistema; para poder observar algunos de los cambios físicos que se
dan en la interfase, se realizan isotermas de presión superficial utilizando instrumentos que
permiten medir las fuerzas intermoleculares, producidas en la superficie de un líquido en
particular. En el caso del surfactante pulmonar, al cual se le realiza un análisis de los
efectos que produce en la tensión superficial de sustancias acuosas, uno de los
instrumentos que se utiliza es la balanza Langmuir KSV Nima.
Figura 7: Balanza de Langmuir de tensión superficial en donde se puede observar algunas de las partes que la
componen: (sensor de presión superficial, cubeta de teflón, barrera de compresión y canales de termalización).
Introducción
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Esta balanza (Figura 7) contiene una cubeta hecha de teflón, controlada térmicamente por
medio de unos canales por los cuales circula agua a la temperatura que lo requiera el
experimento a realizar; esta cubeta tiene la propiedad de ser resistente ante la adhesión de
sustancias como el agua o algunos disolventes orgánicos, y tiene una cinta de material
hidrofóbico (Ribbon Barrier) que evita que la película de surfactante se salga del área de
trabajo, funcionando así, como una barrera que ayuda a tener un mayor control sobre el
material. Con esta balanza se pueden realizar diferentes observaciones de la tensión
superficial a través de un software que controla un sensor de presión superficial y las
barreras que varían la superficie de trabajo, ya sea disminuyendo o aumentando el área a
una velocidad constante (Biolin Scientific, 2016).
Figura 8: La placa de Wilhelmy es un método con el cual se puede medir la fuerza que ejerce la tensión superficial de la
película adsorbida, sobre la placa sumergida en el líquido. Esquema modificado de (Salager & Anton, 2005) & (Biolin
Scientific, 2016).
Introducción
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Figura 9: Isoterma de compresión de una película de surfactante adsorbida en una interfase: Presión superficial en
función del área con indicación de las fases asociadas a la concentración según el área en la compresión. Esquema
modificado de (Ospina, 2011) & (Biolin Scientific, 2016)
Introducción
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Durante la espiración, el aire sale de los espacios alveolares continuamente sin embargo no
todos los alveolos precisamente están en un estado de máxima compresión, en el mismo
instante otros alveolos pueden estar finalizando la expulsión de aire. Se presume que el
surfactante debe tener una estabilidad para mantener estados de máxima compresión,
durante periodos medianamente largos de tiempo. (Ospina, 2011)
Introducción
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Introducción
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II. Objetivos
II.1. General
compresión.
II.2. Específicos
II.2.1. Describir los cambios en la presión superficial del surfactante pulmonar por medio
de isotermas de compresión.
superficial.
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III. Justificación
debido al déficit de secreción del mismo en los pulmones de los bebés prematuros, se ve la
los bebés que nacen con enfermedades respiratorias y así evitar la mortalidad de los mismo.
Debido a que esta problemática es muy común en el mundo, se decidió desarrollar esta práctica
con el fin de aportar a la caracterización del surfactante pulmonar con la ayuda de la Pontificia
surfactante pulmonar obtenido en Colombia; este trabajo se desarrolló en los laboratorios del
Para obtener el surfactante de los pulmones de cerdo y poder hacer uso de éste en la
físicas con el fin de analizar qué tan eficiente y productiva puede llegar a ser su fabricación.
superficial de esta sustancia y cómo varia a los cambios de temperatura, concentración y área
del área, a través de la compresión de películas interfaciales con el fin de comparar la información
A cada par de pulmones se le añade por la tráquea 2,5L de una solución salina
compuesta de Tris 5mM pH 7,0 conteniendo 150mM de NaCl. Cuando los
pulmones están aproximadamente llenos, esta solución sigue por las vías aéreas
respiratorias y se procede a masajearlos suavemente para estimular la secreción
de surfactante pulmonar en los alveolos. Posteriormente en una probeta con un
filtro de gasa doble, se introduce el lavado que es extraído directamente de los
pulmones, luego este lavado se vuelve a filtrar con gasas en vasos precipitados con
el fin de excluir tejidos de gran tamaño que no son necesarios, y por último este
líquido es vertido en tubos para iniciar con los procesos de aislamiento y
obtención del SP.
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Figura 11: Centrifugación del LBA: a) Tubos con LBA pesados equitativamente dos a dos. b)
Equipo en el cual se realizó el primer proceso de centrifugación. c) 2L de sobrenadante fueron
obtenidos en la centrifugación del LBA de 8 pulmones de cerdo.
Después del aislamiento del surfactante a partir del LBA con la ultracentrífuga, es
necesario realizar un gradiente de densidad. Para este proceso fue necesario
recolectar todos los sedimentos con mucha precaución para evitar la menor pérdida
posible; después se trasladó el material a un tubo Potter-Elvehjem, y sobre una
cubeta de hielo se procedió a homogenizar los sedimentos, macerando con una
solución de NaBr al 16% y del cual se obtuvo aproximadamente 17,5mL de la
disolución; después esta disolución debía estar distribuida uniformemente en 4
tubos que además debían contener encima una capa de 5,5mL de NaBr al 13% y
otra capa de 2mL de NaCl al 1%.
Figura 12: Gradiente de densidad: a) Recolección de los sedimentos que quedan después de realizar el
primer proceso de ultracentrífuga. b) Homogenización de los sedimentos con NaBr al 16%. c)
Distribución de la disolución con NaBr al 13% y NaCl al 1% para proceder a realizar el gradiente de
densidad por medio de una última ultracentrifugación.
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Los tubos se colocaron en una ultracentrífuga con el rotor SW41 a 27000 rpm
(100000 gravedades) durante 1 hora con freno y con esto el tiempo de espera para
sacar las muestras de la centrifuga en su totalidad era de 2 horas.
Debido a que en los procesos de centrifugación las sustancias se ubican según su
densidad, al sacar los tubos se pudo observar que había cuatro capas de distintas
sustancias, en la cual el SP quedó suspendido en la tercera capa de abajo hacia
arriba entre el NaBr al 13% y el NaCl. Después de tener prácticamente aislado el
surfactante, se retiró cuidadosamente de los tubos para evitar que se mezclara con
las capas en las que se encontraba en medio y fue trasladado de nuevo al Potter-
Elvehjem para homogenizarlo con un poco de buffer monocapas al 1x. Para
finalizar se vertió el surfactante nativo (SN) obtenido, en un eppendorf con
muestras de 20L y 50L y llevado a una temperatura de -80ºC. A partir de 2L de
lavado broncoalveolar, se obtuvieron 3mL de SP a una concentración de
49,7mg/mL.
Figura 13: Ultracentrifugación del LBA: a) Capas formadas por las diferentes densidades de las
disoluciones, en donde el surfactante pulmonar se encuentra aislado y ubicado entre el NaCl y el NaBr al
13%. b) Se procede a retirarlo para ser homogenizado. c) se deposita en eppendorf y es guardado a una
temperatura de -80ºC.
μL KH2PO4 a μmoles de
Tubo
0,05mg/mL fosfato
Blanco 0 0
2 10 0,0037
3 40 0,0147
4 100 0,0367
5 250 0,0918
6 400 0,1469
Tabla 2:
Valores de absorción de fosforo. Resultados del espectrofotómetro
Tabla 3:
Valores de absorbancia de fosfato y concentración para las muestras de surfactante
Muestra C XC Total C
Ab Cf
SP (mg/mL) (mg/mL) (mg/mL)
SP1.1 0,3641 0,0693 50,88
SP1.2 0,3744 0,0712 52,27 51,3
SP1.3 0,3631 0,0691 50,75
49,7
SP2.1 0,1648 0,0327 47,98
SP2.2 0,1652 0,0328 48,09 48,1
SP2.3 0,1658 0,0329 48,25
De las muestras de SP se extrae un volumen de 10µl para la muestra SP1 que se encontraba a
1/10 y 1/20 la muestra SP2 para la valoración de fosfolípidos, Ab es medida por el
espectrofotómetro, Cf es calculada de la relación lineal de absorbancia y concentración. De la
tabla se concluye que la concentración del surfactante pulmonar es de 49,7mg/mL.
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V. Análisis y Resultados
La balanza de tipo Langmuir esta formada por una cubeta termostatizada, con una
capacidad de aproximadamente 500mL, por ello posee un sistema que se conecta a un baño para
controlar la temperatura durante el experimento; las balanzas de superficie son altamente
sensibles a la presencia de compuestos tensioactivos, por lo que en todos los experimentos de
este tipo, la cubeta se llena con una disolución de buffer o tampón monocapas. Por otro lado, el
estudio de presión superficial en función del área se obtiene a través de un software, el cual
transduce los datos análogos del sensor de fuerza que se encuentra conectado a la bandera de
papel de filtro (placa de Wilhelmy) y los envía al software (KSV Nima), ya prediseñado para la
balanza de tensión superficial. Esto permite detectar los cambios inducidos por la compresión en
la organización molecular de la monocapa, correspondientes a una organización del material en
la interfase.
Las isotermas son obtenidas a temperaturas de 25°C y 37°C; siendo la primera la más
estudiada en la caracterización de surfactante pulmonar y la segunda la temperatura fisiológica
(Blanco, 2012). La compresión del material se realiza sobre una superficie que varía desde un
área máxima de 158cm2 hasta un área mínima de 16cm2, la cual está confinada por la cinta de la
balanza. Para realizar dicha compresión se tienen en cuenta dos variables: la primera es la
cantidad de material y la segunda es la razón de cambio del área por minuto, la cual se menciona
como velocidad de compresión de la barrera.
retira el material de la interfase, hasta registrar de nuevo valores cercanos a cero en el sensor de
presión superficial; luego se limpia con agua bidestilada la placa de Wilhelmy y la micro-jeringa,
todo esto con el fin de reducir el margen de error en las siguientes mediciones. Se realizan
aproximadamente diez experimentos por cada variación de masa, velocidad de compresión y
temperatura; pretendiendo con esto observar una tendencia en el comportamiento de las películas
interfaciales de surfactante pulmonar nativo de origen porcino colombiano, no obstante, solo tres
de ellas fueron elegidas para la descripción de este trabajo.
En las gráficas de la primera columna para una masa de 10μg, se observa que es
necesario comprimir el material aproximadamente un 30-35% del área dentro de la barrera, para
que se evidencie un cambio en la presión superficial con relación a las tres velocidades
mencionadas anteriormente, estas gráficas llegan a tener valores de presión superficial de
50mN/m o en términos de tensión superficial, llegan a valores cercanos a los 25mN/m, valor
correspondiente a la presión de equilibrio; de esto se puede especular que la cantidad de material
no es suficiente y/o es necesario una mayor compresión, para que a estas condiciones sea
evidente un aumento en la presión superficial.
En las gráficas de la segunda columna para una masa de 25μg, se observaron cambios
inmediatos al inicio de la compresión, en donde la presión superficial de las isotermas a
37mm/min y 70mm/min, alcanzó valores cercanos a 70mN/m, sin embargo, para la velocidad de
100mm/min, la presión máxima fue de 62mN/m.
En términos generales, las isotermas de compresión a 25°C, muestran cada uno de los
estados en los que se puede organizar la película interfacial durante la compresión y las zonas del
periodo de fase correspondientes a cada una de las transiciones. El factor común del surfactante
nativo analizado a esta temperatura, es que llega a la meseta de transición de la fase líquido-
expandida y fase líquido-condensada, en valores próximos a 45mN/m de presión superficial,
adicionalmente, se puede observar que las isotermas llegan a valores máximos de presión ideal.
Tabla 4:
Gráficas de isotermas a una temperatura de 25ºC
En la Tabla 5, en la primera columna se puede observar que para una masa de 10μg, es
necesario que se comprima el área aproximadamente un 25-30% para que haya un cambio en la
fase gaseosa (G), para después permanecer la mayor parte de la compresión en la fase líquido-
expandida (LE); las isotermas solo llegan a tener valores máximos de presión superficial de
50mN/m. Con esto podemos concluir que la variación en la temperatura no evidenció un
aumento en la presión superficial y que al igual que en las isotermas a 25°C la cantidad de
material suministrado no fue suficiente.
En la segunda columna se puede observar, para una masa de 25μg, que la presión
superficial de las isotermas alcanzó valores entre 6mN/m y 12mN/m en un estado de no
compresión; con base en esto podemos asumir, que el material se encuentra en la fase líquido-
expandida (LE) justo antes de comprimir. Al final de la compresión se evidencian pequeños
aumentos en la presión superficial para una velocidad de compresión de 70mm/min por encima
de los 50mN/m, sin embargo, no llega a fases de mayor empaquetamiento.
Tabla 5:
Gráficas de isotermas de compresión a una temperatura de 37ºC
Los resultados obtenidos para el cálculo de trabajo realizado en las isotermas mostradas
anteriormente, en las matrices que aparecen en la Tabla 4 y Tabla 5, donde se varían la
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Tabla 6:
El trabajo calculado para las isotermas a 25°C
En la Tabla 6 se encuentran los valores calculados del trabajo realizado por cada isoterma
ubicada en la matriz de 25°C. Los resultados obtenidos se encuentran en el rango de
208,37x10⁻⁶J hasta 499,61x10⁻⁶J, donde los valores de máximo y mínimo trabajo se
encuentran a una velocidad de compresión de 37mm/min, la velocidad más pequeña
suministrada para las muestras de surfactante pulmonar nativo.
Basándose en los resultados de trabajo calculado y para observar de una forma distinta los
trabajos obtenidos, se calcula el promedio de trabajo asociado a la cantidad de material
suministrado y velocidad de compresión.
Tabla 7:
Promedio del trabajo para las isotermas de 25°C.
En la Tabla 7 se observa una variación del trabajo con relación a la cantidad de material
suministrado en cada experimento, es directamente proporcional a la masa suministrada. Se
ratificar que el trabajo mecánico realizado por los músculos que intervienen en el proceso
de espiración, hace un gasto energético con relación a la cantidad de material que se
encuentra en la interface alveolar para la absorción y organización molecular. En este caso,
el análogo con el trabajo realizado, es generado por la cinta sobre la película interfacial en
la balanza, para alcanzar presiones superficiales altas a medida que se realiza la
compresión.
El trabajo realizado por las isotermas de 25°C que alcanzan presiones superficiales
máximas, se encuentra en el rango de 431.0X10⁻⁶J hasta 463,2X10⁻⁶J
Tabla 8:
El trabajo realizado para las isotermas a 37°C
En la Tabla 8 se encuentran los valores calculados para el trabajo realizado por cada
isoterma ubicada en la matriz de 37°C; en la tabla se observan valores de trabajo mecánico
en el rango de 232,41x10⁻⁶J con una velocidad de 37mm/min y una masa 10μg, hasta
468,16x10⁻⁶J con una velocidad de 100mm/min y una masa de 50μg, es preciso resaltar
34
Tabla 9:
Trabajo promedio calculado para las isotermas de 37°C con relación a la cantidad de material suministrad.
Del mismo modo que para las isotermas de 25°C, en la Tabla 9 se calculó el promedio del
trabajo para las tres isotermas con las mismas condiciones. El menor promedio de trabajo
calculado se presenta para las isotermas que se comprimen a una velocidad de 37mm/min
con una masa de 10μg.
Como se observó en las gráficas a 37°C ninguna de las isotermas llego a valores máximos
de tensión superficial, el rango de trabajo realizado es menor en estas gráficas, pero
cercano a los valores obtenidos a las isotermas de 25°C. El trabajo calculado para las
isotermas de 37°C a una velocidad de 70mm/min y una masa de 10μg mostro valores
inferiores de trabajo mecánico a diferencia de los resultados obtenidos a 25°C.
Si analizamos las gráficas y los cálculos de trabajo, para las isotermas de 25°C y 37°C
sometidas a una velocidad de 70mm/min, se evidencia que es necesario un mayor gasto
energético para que el complejo tensioactivo logre llegar a tensiones superficiales mínimas,
o lo que es igual, presiones superficiales máximas; ya que se observa que las isotermas a
25°C, registran valores máximos de presión superficial y valores de trabajo semejantes a
los de 37°C, con relación a las masas de 25μg y 50μg;.
35
Tabla 10:
Gráficas de presión superficial en función del tiempo a una temperatura de 25ºC
En términos generales en la Tabla 10, se observa que a medida que se tiene más material
de surfactante en la interfase y se comprime a mayor velocidad, el tiempo necesario para
alcanzar máximas presiones superficiales, correspondientes a mínimas tensiones superficiales, va
disminuyendo notablemente. En 60 segundos se alcanzan valores de 70mN/m para 50μg con una
36
Tabla 11:
Gráficas de presión superficial en función del tiempo a una temperatura de 37ºC
VI. Discusión
Es importante tener presente que el análisis que se describe en este trabajo, se le realizó a
procesos de compresión in vitro, que ocurren en condiciones fuera del equilibrio. Se evaluó la
capacidad de las películas interfaciales para alcanzar valores máximos de presión superficial al
ser comprimidas, donde los comportamientos de las películas de surfactante pulmonar se
obtuvieron a partir del análisis de isotermas de compresión y se consideraron los cambios en
función de la cantidad de material y de la velocidad de compresión de las películas.
En el caso de las gráficas observadas anteriormente a 25°C y 37°C, se observa que las
isotermas llegan a la meseta de transición de la fase líquido-expandida y fase líquido-
condensada en valores próximos 45mN/m de presión superficial. En las isotermas de
25°C a 25μg y 50μg se observa claramente, un surfactante pulmonar óptimo en la
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VII. Conclusiones
A 25°C las isotermas de compresión muestran los posibles estados en los que se puede
organizar la película interfacial durante la compresión y las zonas correspondientes a
cada una de las transiciones de fase.
A 25°C, las isotermas llegan a la meseta de transición de la fase líquido-expandida y fase
líquido condensada en valores próximos 45mN/m de presión superficial, donde sin
embargo no todas las isotermas llegan a valores máximos de presión.
A 37°C, los mayores valores alcanzados de presión superficial están en el orden de
±50mN/m. Por el contrario, a 25°C si se alcanzan valores máximos 70mN/m de presión
superficial y con mayor promedio de valores calculados de trabajo, para las tres
cantidades de masa suministradas.
A 37°C, se observaron valores de trabajo mecánico en el rango de 232,41x10-6J con una
velocidad de 37mm/min y una masa 10μg, hasta 468,16x10-6J con una velocidad de
100mm/min y una masa de 50μg,
Ninguna de las isotermas a temperatura fisiológica (37°C) presenta presiones
superficiales máximas, ni arriba de 52mN/m, el factor común del surfactante nativo a
37°C, es llegar a valores máximos en torno a la meseta de transición de fase líquido-
expandida y fase líquido-condensada.
A 25°C, el menor tiempo invertido en alcanzar presiones cercanas 70mN/m, fue de 60
segundos para la masa de 50μg y velocidades de compresión de 100mm/min.
El mayor trabajo calculado fue de 499,61x10-6 J para una isoterma con 50μg, a una
velocidad de compresión de 37mm/min y con una temperatura de 25°C.
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Perspectivas
El desarrollo de estudios adicionales con las velocidades y masas a las cuales se sometió
la película tensoactiva en este estudio, permitiría una visión más profunda sobre el
comportamiento tensioactivo. Creemos que estudios reológicos, expondrían claramente el
comportamiento elásticos y viscosos en la monocapa y la energía requerida para la
reorganización del surfactante pulmonar. También estudios de cualificación de lípidos saturados,
caracterización de extracto orgánico de origen porcino y análisis comparativo de Corusorf,
permitirían seguramente una representación más completa de SP para posibles preparaciones de
surfactantes nativos y/o mixtos de origen colombiano.
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Anexos
A.1. Programación en el análisis de datos de las
isotermas
#include <iostream>
#include <stdlib.h>
#include <stdio.h>
#include <math.h>
#include <fstream>
#include "TMath.h"
void kk2_fit() {
inFileCom1.open("25c37v10mg1.dat");
inFileCom2.open("25c37v10mg2.dat");
inFileCom3.open("25c37v10mg3.dat");
int n = 0;
while(!inFileCom1.eof()){
n++;
cout << "n: " << n << endl;
int nn = 0;
while(!inFileCom2.eof()){
nn++;
cout << "nn: " << nn << endl;
inFileCom2.close();
int nnn = 0;
while(!inFileCom3.eof()){
nnn++;
cout << "nnn: " << nnn << endl;
fCom1->SetLineColor(3);
fCom2->SetLineColor(4);
fCom3->SetLineColor(6);
gCom1->Fit("fCom1","R+");
gCom2->Fit("fCom2","Rx+");
gCom3->Fit("fCom3","Rx+");
gCom1->Draw("A*");
gCom2->DrawClone("p*");
gCom3->DrawClone("p*");
//fCom1->DrawClone();
//fCom2->DrawClone();
//fCom3->DrawClone();
cout << "integral from fit com1: " << fCom1->Integral(5,150) << endl;
cout << "integral from fit com2: " << fCom2->Integral(5,150) << endl;
cout << "integral from fit com3: " << fCom3->Integral(5,150) << endl;
cout << "integral from graph Com1: " << gCom1->Integral() <<endl;
cout << "integral from graph Com2: " << gCom2->Integral() <<endl;
cout << "integral from graph Com3: " << gCom3->Integral() <<endl;
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VIII. Referencias
Blanco, O., Cruz, A., Ospina, O.L., López-Rodriguez, E., Vázquez, L. y Pérez-Gil, J. (2012).
“Interfacial behavior and structural properties of a clinical lung surfactant from porcine
Bligh, E. G. y Dyer, W. J. (1959). “A rapid method of total lipid extraction and purification.”
5(16):10-17.
Chu, J., Clements, J. A., Cotton, E. K., Klaus, M. H., Sweet, A. Y., Tooley, W. H., Bradley, B.
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