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Resumen. Abstract
Materiales y métodos.
Se le adicionó 6 ml de agua destilada dejando
Para el desarrollo de esta práctica fue a reposar por 3 minutos para la separación de
necesario conseguir las materias primas fases.
(betabel, jitomate y el colorante), de igual
forma se emplearon equipos especiales para Con la ayuda de una pipeta Pasteur se
este experimento. La práctica consta de 3 recolecto la capa superior del hexano que
partes: contiene los compuestos liposolubles de color
anaranjado y fueron depositados en unos
Extracción y cuantificación tubos de vidrio previamente recubiertos con
espectrofotométrica de betalaínas. papel aluminio. Para el estudio
espectrofotométrico se prepararon 3 muestras
Primero se picó finamente al betabel con un de 5 ml, como muestra blanco se empleó el
cuchillo, se pesó 5 gramos seguido de una
hexano.
adición de 40 ml de metanol al 80% (v/v).
Para determinar el contenido de licopeno se
Después se filtró con una gasa colectando el empleó la absorbancia a 503 nm. Para obtener
filtrado en un matraz aforado de 50 ml y se absorbancias inferiores a 0.6 se hicieron
llevó al aforo con metanol al 80%. diluciones de 100:1.
Posteriormente, se tomó 10 ml de la muestra
y se centrifugó a 3000 rpm/ 10 min. Determinación de Ácido carmínico.
𝑚𝑔 𝐴 ∗ 𝐹𝑑 ∗ 𝑃𝑀 ∗ 𝑉
𝐵( )=
𝑔 𝑒∗𝑃∗𝐿
𝐵(𝑏𝑒𝑡𝑎𝑐𝑖𝑎𝑛𝑖𝑛𝑎𝑠)
Figura 1. Preparación de las muestras de
550𝑔
Betalainas para la cuantificación. (0.220)(10) ( ) (0.001 𝐿)
𝑚𝑜𝑙
=
𝐿
(60000 )(1 𝑔)(1𝑐𝑚)
𝑚𝑜𝑙𝑐𝑚
Extracción y cuantificación 𝑚𝑔
espectrofotométrica de betalainas. = 0.000020166
𝑔
En la tabla 1 se muestran los espectros de
absorción de las Betacianinas para determinar 𝐵(𝐵𝑒𝑡𝑎𝑥𝑎𝑛𝑡𝑖𝑛𝑎𝑠)
cuantitativamente las concentraciones 308𝑔
obtenidas, se empleó la absorbancia a 538 (0.265)(10) ( ) (0.001 𝐿)
= 𝑚𝑜𝑙
nm. 𝐿
(40800 ) (1 𝑔)(1𝑐𝑚)
𝑚𝑜𝑙𝑐𝑚
Tabla 1. Cuantificación de betacianinas 𝑚𝑔
= 0.000020004
Muestras Diluidas (100:1) 𝑔
1 0.200 Abs
2 0.210 Abs
3 0.250 Abs
Promedio 0.220 Abs
𝑚𝑔
Extracción y cuantificación de: 0.000020166 o bien 2x10-05 y la
𝑔
espectrofotométrica de licopeno.
concentración de betaxantinas fue de 0.265 de
absorbancia con unidades equivalentes de
𝑚𝑔
Tabla 2. Cuantificación de licopeno en la concentración: = 0.000020004 𝑔 o bien,
muestra de tomate fresca 2x10-05
De acuerdo a los datos obtenidos por los
Muestras Diluidas (100:1) investigadores Castellanos y Yahia (2008) en
la cuantificación de betalainas en un
1 0.202 Abs espectrofotómetro UV/Vis, las lecturas a 540
2 0.212 Abs nm de betacianinas se obtuvo 0.312 de
3 0.200 Abs absorbancia; las betaxianinas con la lectura
Promedio 0.204 Abs de 438 nm, se obtuvo 0.420 de absorbancia.
La cual, en comparación con los datos
𝑚𝑔 𝐴 ∗ 𝑃𝑚 ∗ 𝑉 ∗ 100 obtenidos en esta práctica (ver tabla 1), nos
( )= indica que los resultados están dentro de los
100𝑔 𝑒∗𝑃∗𝐿
(𝐿𝑖𝑐𝑜𝑝𝑒𝑛𝑜) parámetros indicados, las pequeñas
536.9𝑔 diferencias obtenidas significa que otros
(0.204) ( ) (15 𝑚𝑙) ∗ 100 factores pueden afectar la concentración del
𝑚𝑜𝑙
= pigmento, ya sea por la manipulación de la
172000𝑀
( 𝑐𝑚 ) (15 𝑔𝑟)(1𝑐𝑚) muestra, el grado de madurez del fruto, el
𝑚𝑔 clima, etc.
= 0.063678837
100𝑔
-02 𝑚𝑔 La cuantificación del licopeno con la lectura
= 6.4x10 100𝑔
de 503 nm se obtuvo un promedio de 0.204
Abs, en comparación con los reportes de
Determinación del Ácido carmínico.
investigadores, nos indica que el resultado
está dentro de los parámetros actualmente
Tabla 3. Determinación del Ácido
empleados para la evaluación de
carminico.
concentración de pigmentos.
Muestras Diluidas (50:10)
Según Arias y col (2002), mencionaron que
1 0.620 Abs el contenido de licopeno de los tomates puede
2 0.613 Abs variar significativamente con la maduración y
3 0.610 Abs en las diferentes variedades de tomate.
Promedio 0.614 Abs
Según el investigadores Valverde (2009)
(% 𝑑𝑒 𝐴𝑐𝑖𝑑𝑜 𝑐𝑎𝑟𝑚í𝑛𝑖𝑐𝑜) presentó los resultados de su experimento en
(100)(0.614) variedades comunes de tomate, la
= concentración de licopeno fue de 0.122 de
(13.9)(1 𝑔𝑟)(1𝑐𝑚)
Absorbancia de 1 a 12.2 mg/100 g de fruta
= 4.4 % maduro. Analizó el contenido de licopeno en
tomates provenientes de cultivos
Mediante el equipo de espectrofotómetro hidropónicos en
UV/Vis se determinó la concentración de Diferentes etapas de maduración y demostró
betacianinas a 0.220 de Absorbancia, la cual que para la etapa verde el promedio de
al aplicar la ecuación para determinar las unidades equivalentes es de 0.116 mg/100g.
unidades equivalente de concentración fue En efecto, se observa que de acuerdo con las
referencias presentadas hubo una gran [3]Yeung D. (2001). Lycopene: The facts.
variación en las unidades equivalentes, ya que www.lycopene.org
la equivalencia en esta práctica fue de:
𝑚𝑔
6.4x10-02 100𝑔 esto es debido a que el tomate [4]Briseño, G. A., Celina Llanderal, (2008).
Contenido de Ácido Carmínico en Hembras
estaba semi maduro y también la dilución fue de Grana Cochinilla de diferentes edades. En:
muy elevado: de (100 ml de agua: 1 ml de Llanderal, C.D.H. Zetina A. L. Vigueras y L.
muestra). También implica mucho la región Portillo (Eds) 2008. Grana Cochinilla y
donde se cosechó el tomate, clima, Colorantes Naturales. Colegio de
temperatura, estado de madurez, Posgraduados. México.16-20.
manipulación, etc.
[5]Tovar, A., Pando-Moreno, M. & C. Garza.
La determinación cuantitativa del Ácido (2005). Evaluation of three varieties of
carmínico, se obtuvo una absorbancia de Opuntia ficus-indica (L.) Miller as hosts of
0.612. Con un 4.4 % de Acido carmínico, the cochineal insect (Dactylopius coccus
según los cálculos. Costa (Homoptera: Dactylopiidae) in a
NOM-119-ssa1-1994, bienes y servicios. semiarid area of northeastern Mexico.
Materias primas para alimentos, productos de Economic Botany, 59: 3-7.
perfumería y belleza. Colorantes orgánicos
naturales. Especificaciones sanitarias. [6]Castellanos y Yahia (2008) cuantificación
Menciona que el contenido de ácido de betalainas. Unam, México
carmínico deberá estar dentro de 1.8 a 20 %,
lo cual le da una buena clasificación y en el [7]Arias R., Lee T. Ch., Logendra L., Janes
caso de comercializarse, puede competir con H. (2009). Correlation of lycopene measured
grana producida en otros países, según los by HPLC with the L, a, b color reading of a
criterios internacionales. Cabe mencionar que hidroponic tomato and the relationship of
el ácido carmínico es una sustancia química maturity with color and lycopene content. J.
compleja utilizada como colorante rojo Agric. Food Chem. 48:1697 . 1702.
extraído de la cochinilla y empleados como
colorantes en cosméticos. [8]Martínez-Valverde I., Periago M. J.,
Provan G. y Chesson A. (2009). Phenolic
Conclusión. compounds, lycopene and antioxidant
activity in comercial varieties of tomato
Bibliografía. (Lycopersicum esculentum). Journal of the
Science of Food Agriculture 82 (3):323 . 330.
[1]Stintzing, F. C. and R. Carle. (2004).
Functional properties of anthocyanins and [9]https://www.ecolex.org/.../nom-119-ssa1-
betalains in plants, food, and in human 1994-especificaciones-sanitarias-de-
nutrition. Trends in Food Science & materias..
Technology 15, 19-38.