TALLER 1: LABORATORIO MICROBIOLOGIA

1. E.M.B Agar
 Este medio (también denominado E.A.M.) es utilizado para el aislamiento selectivo de
bacilos Gram negativos de rápido desarrollo y escasas exigencias nutricionales. Permite el
desarrollo de todas las especies de la familia Enterobacteriaceae
FORMULA (gramos/ litro)
Peptona 10.0
Lactosa 5.0
Sacarosa 5.0
Fosfato dipotásico 2.0
Agar 13.5
Eosina 0.4
Azul de metileno 0.065
PH final: 7.2 ±0.2
Fuente: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/embagar.htm
 Este cultivo pertenece a un medio de consistencia sólida, composición compleja y de
utilización diferencial y selectivo. Los colorantes de anilina (eosina y azul de metileno)
inhiben el desarrollo de bacterias Gram positivas y a las Gram negativas exigentes. También
se combinan precipitando a pH ácido, actuando como indicadores de producción de ácidos.
Su consistencia es sólida ya que poseen un agente solidificante (agar) en altas
concentraciones(1.35g/mL); es complejo ya que en su composición contiene peptona.
 No es un medio de sustrato definido, porque no contienen sustancias cromogénicas o
fluorogénicas además de ser un medio selectivo y como ya se sabe los medios de sustrato
definido no son selectivos.
 Es un medio de cultico para bacterias, especialmente enterobacterias; los hongos no Son
viables en medios de pH neutros, ellos son más afines a pH acido. Las bacterias gran
positivas y las gram negativa exigente son inhibidas por la eosina y el azul de metileno.

E.M.B Agar
Fuente de carbohidrato SI Lactosa (0.5%) y Sacarosa (0.5%)
Fuente de nitrógeno Si Peptona (1.0%)
Agente inhibidor Si Eosina (0.04%) y Azul de metileno (0.0065%)
Agente solidificante Si Agar (1.35%)
Indicador de pH Si Eosina (0.04%) y Azul de metileno (0.0065%)

2. Agar TCBS (tiosulfato, citrato, sales biliares)

 Medio selectivo para el aislamiento y cultivo de Vibrio cholerae, Vibrio parahemolyticus y
otras especies de Vibrio a partir de heces, agua y alimentos contaminados. También es
conocido como Agar Tiosulfato Citrato Bilis Sacarosa, o como Agar Selectivo para Vibrios.
FORMULA (gramos/ litro)
Extracto de levadura 5.0
Peptona de carne 5.0
Tripteina 5.0
Citrato de sodio 10.0
Tiosulfato de sodio 10.0
Bilis de buey 8.0
Sacarosa 20.0
Cloruro de sodio 10.0
Citrato Férrico 1.0
 Azul de bromotimol 0.04
Azul de timol 0.04
Agar 15.0
PH final: 8.6 ±0.2
Fuente: http://www.britanialab.com.ar/esp/productos/b02/tcbsmedio.htm
 Este medio según su consistencia es Sólido, ya que posee una concentración de agente
solidificante (agar)
Relativamente alta (1.5%), es un medio de composición compleja ya que posee peptona
de carne y extracto de levadura y es de utilización selectiva gracias a las concentraciones
de tiosulfato y citrato que inhibe la mayoría de enterobacterias.
 No es un medio de sustrato definido, porque no contienen sustancias cromogénicas o
fluorogénicas además de ser un medio selectivo y como ya se sabe los medios de sustrato
definido no son selectivos.
 Es un medio de cultivo para bacterias, selectivo para Vibrios, gracias a las concentraciones
de tiosulfato y citrato que inhibe la mayoría de entero bacterias y a su pH alcalino que no
hace Viable a los Hongos.
Agar TCBS (tiosulfato, citrato, sales biliares)
Fuente de carbohidrato SI Sacarosa (2.0%)
Fuente de nitrógeno Si Peptona de carne (0.5%) y extracto de levadura
(0.5%)
Agente inhibidor Si Citrato férrico (0.1%), Tiosulfato de Sodio (1.0%) y
sales biliares (0.8%)
Agente solidificante Si Agar (1.5%)
Indicador de pH Si Azul de bromotimol (0.004%) y Azul de timol
(0.004%)

3. Agar XLD (xilosa, lisina, desoxicolato)

 Medio selectivo diferencial, utilizado para el aislamiento y diferenciación de patógenos
entéricos Gram negativos, especialmente del género Shigella.
FORMULA ( GRAMOS / LITROS )
Xilosa 3.75 g
Lisina 5.0 g
Lactosa 7.5 g
Sacarosa 7.5 g
Cloruro De Sodio 5.0 g
Extracto De Levadura 3.0 g
Rojo Fenol 0.08 g
Desoxicolato de Sodio 2.5 g
Tiosulfato de Sodio 6.8 g
Citrato Férrico de Amonio 0.8 g
Agar 15.0 g
Agua destilada c.s.p. 1000 mL
pH final 7,4 ± 0,2

Fuente:
http://www.ucv.ve/fileadmin/user_upload/facultad_farmacia/catedraMicro/10_Agar_XLD.pdf
 El medio agar Xld es un cultivo solido debido a la presencia de agente solidificante (agar),
además es de composición compleja por la presencia de extracto de levadura, es de
diferenciación y selectividad gracias a las sales y colorantes rojo de fenol, citrato férrico de
Amonio y tiosulfato de sodio
 El XLD Agar fue desarrollado por Taylor para conseguir mejores aislamientos e
identificaciones de patógenos entéricos, especialmente Shigella. Los patógenos se
diferencian no solamente de los fermentadores no patógenos de Lactosa, sino además de
muchos no patógenos que no fermentan la lactosa o la sacarosa. Este medio está
formulado para favorecer el crecimiento de Shigella spp.
Agar XLD (xilosa, lisina, desoxicolato)
Fuente de carbohidrato SI Sacarosa y lactosa
Fuente de nitrógeno Si extracto de levadura
Agente inhibidor Si Citrato férrico de Amonio Tiosulfato de Sodio
Agente solidificante Si Agar (1.5%)
Indicador de pH Si Rojo de fenol
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