UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

Laboratorio de Nutrición Mineral de Informe de la practica No. 6

Plantas y Fertilidad de Suelos
ALUMNO CURSO GRUPO FECHA FACULTAD
JIMA NARVÁEZ JOSÉ 5 “A” 2015 01 16 CIENCIAS
GABRIEL AGRÍCOLAS

1. Tema: Determinación del contenido de nitrógeno en el suelo

2. Introducción

El nitrógeno es uno de los elementos principales para la vida. Aunque el nitrógeno

molecular (N2) compone el 78% de la atmósfera, esta forma de nitrógeno no puede usarse
por los animales ni por la mayoría de las plantas en la fabricación de aminoácidos y
proteínas esenciales. Este nitrógeno molecular, primero, ha de "fijarse" (combinado con
oxígeno o hidrógeno) para formar compuestos tales como amoniaco (NH3) o nitrato (NO3-),
o alguna otra forma orgánica de nitrógeno. Alguna fijación del nitrógeno ocurre por los
efectos de los rayos, y alguna, por las algas verde-azules, sin embargo, la mayor parte de
la fijación del nitrógeno se lleva a cabo por bacterias que viven en el suelo. La tasa de
crecimiento de las plantas, generalmente, es proporcional a la tasa a la cual se provee el
nitrógeno. Si el suelo tiene deficiencia de nitrógeno, las plantas se vuelven altas y débiles,
raquíticas y pálidas, limita la productividad. El ión de amonio puede atarse a las partículas
de arcilla para permanecer en el suelo, sin embargo, el ión de nitrato, con frecuencia, el
agua lo lava o "lixivia" del suelo. La mayor parte del nitrógeno en el suelo se ha de hallar
en los horizontes superiores de los suelos, y, como consecuencia, el nitrógeno puede
drenarse fácilmente de los suelos cuando ocurre alguna perturbación (Ecoplexity, 2010).
En el método de Kjeldahl se cuantifican las formas orgánica y amónica, y con ciertas
modificaciones se pueden incluir los nitratos. Éstos deberían incluirse cuando se los
encuentra en cantidades apreciables, dado que una concentración en el suelo de 500 ppm
de nitratos sólo representa un 0.01% del N total.
Etapa I: Digestión de la muestra
Temperatura de digestión
Varios estudios demostraron que la temperatura de digestión es el factor que más incide
en la determinación del N por el método Kjeldahl, dado que si ésta es demasiado baja,
inferior a 360 ºC, la digestión es lenta o incompleta y sies superior a 410 ºC, pueden
producirse pérdidas de amonio.
El control de la temperatura se realiza con un bloque calefactor y mediante el agregado de
sulfato de sodio o de potasio, que permite aumentar el punto de ebullición del sulfúrico.
Generalmente se prefiere la sal de potasio a la de sodio, ya que esta última incrementa las
proyecciones del digesto sobre las paredes del tubo o balón, donde la temperatura es
sustancialmente más elevada.
Catalizadores
Los de mayor eficiencia son aquellos que contienen selenio o mercurio, siguiendo los
compuestos de titanio y cobre, pero dado que en el mismo orden decrece su toxicidad se
recomiendan estos últimos.
Etapa II: Destilación y Titulación
El amonio que se desprende al alcalinizar el medio se recoge sobre una solución de ácido
bórico, cuyo volumen o concentración no es necesario conocer con exactitud, ya que el
borato de amonio que se forma se vuelve a transformar en ácido en el transcurso de la
valoración con solución de sulfúrico. Sin embargo, es imprescindible ajustar el pH de la
solución de ácido bórico a valores de 4.5-5.0.
Finalmente, como en cualquier titulación, debe prestarse especial atención al título de la
solución de ácido sulfúrico utilizada para valorar el amonio proveniente de la destilación.
3. Objetivos

a. General: Determinar el contenido de nitrógeno en diferentes muestras de

suelo mediante el método Kjeldahl

b. Específicos

i. Conocer y aplicar correctamente el método Kjeldahl y su procedimiento en las

muestras suelo en el laboratorio

ii. Analizar los resultados del análisis del contenido de nitrógeno de las muestras
de la práctica mediante el método Kjeldahl, e interpretar el nivel del contenido
de nitrógeno de cada una de las muestras de suelo

4. Materiales y reactivos

Materiales Reactivos
 Lámina de papel higiénico  Ácido salicílico en ácido sulfúrico concentrado
 Muestra de suelo seca, molida y  Solución de ácido bórico con indicador al 2%
tamizada  Indicador mixto: mezcla de verde de bromocresol
 Tubo de digestión Kjeldhal y rojo de metilo.
 Unidad digestora Kjeldhal  Catalizador Kjeldhal: CuSO4, 6.25 % Cu
 Probetas  Hidróxido de sodio 10 N
 Pipeta  Ácido clorhídrico 0.1 N
 Agua destilada

5. Método o procedimiento

Digestión
- Pesar en papel higiénico 1 g de suelo seco, molido y tamizado (suelos con hasta 2% de
materia orgánica) y colocarlo dentro del tubo Kjeldahl. Pesar 0.5 g si el suelo tiene 4 % de
materia orgánica y 0.25 g si el suelo tiene 8 %.
- Adicionar 1.5 g del catalizador y 5 ml de la mezcla ácido salicílico-ácido sulfúrico
concentrado.
- Colocar los tubos Kjeldahl en el bloque digestor a las siguientes temperaturas y tiempos:
Temperatura (°C) Tiempo (minutos)
180 5
300 5
400 5
450 30

- Durante el periodo de tiempo en el que las muestras son sometidas gradualmente a altas
temperaturas se eliminan los vapores de ácido sulfúrico, por esta razón, el bloque digestor
debe ubicarse dentro de la cámara extractora de gases. Al final de la digestión las
muestras toman una apariencia lechosa y el material mineral se deposita en la base del
tubo.
- Una vez completada esta etapa, sacar el tubo del bloque y dejarlo enfriar.
- Agregar 15 ml de agua destilada para colocar el producto de la digestión en suspensión.
- Agitar para evitar la precipitación de cristales de sulfato de amonio.
Destilación y Titulación
- Abrir la puerta de seguridad de la unidad de destilación seleccionada.
- Asegurarse de que en el colector no queden restos de la muestra anterior. Si se observan
restos, vaciarlos del colector.
- Colocar el tubo Kjeldahl con el líquido digerido en la cámara de la unidad de destilación
Kjeldahl.
- Seleccionar “OPERATION”. Si es necesario seleccionar el volumen de NaOH y la
normalidad del HCl.
- Seleccionar “START” o inicio.
- El equipo Kjeldahl PRO-NITRO “A” realiza los siguientes pasos de manera automática:
> Dosifica la solución fijadora en el colector.
> Inicia la destilación de la muestra.
> Adiciona NaOH a la muestra.
> Transcurridos unos 1.5 minutos inicia la valoración automática.
> El dosificador digital va añadiendo HCl en el colector hasta que el color cambia de verde
a rojo. El contenido de N detectado aparece en el display.
> Cuando el color rojo es permanente el equipo detiene automáticamente la destilación.
> Vacía el colector.
> Vacía parte del tubo muestra.
> Indica en la pantalla la cantidad HCl consumido (ml) y el porcentaje de N total.
- Abrir la puerta de seguridad.
- Extraer el tubo muestra.
- Comprobar que el colector quede completamente vacío después del análisis, si quedan
restos, proceder a vaciarlo. Si es necesario se debe aumentar el tiempo de vaciado.
- El equipo queda listo para analizar la siguiente muestra. Si no se ha producido ninguna
anomalía, no es necesaria ninguna operación de limpieza.

6. Cálculos

1ra Forma
𝑉𝑥𝑁(𝑎𝑐)𝑥𝑃𝑎(N)
%N =
𝑃𝑥10
Donde:
V= Volumen HCl gastado en la titulación
N (ac) = Normalidad exacta del Acido Clorhídrico
Pa = Peso atómico del nitrógeno
P = Peso de la muestra en mg
Muestra 523

1,37𝑥0,096𝑥14
%N =
1,0023𝑥10
Datos:
V= 1,37
N (ac) = 0,096 %N = 0,1837 = 0,18 %
Pa = 14
P = 1,0023

2da Forma
N
%N = 𝑥100
𝑃
Donde:
N = lectura del N en mg
P = Peso de la muestra en mg

Muestra 523
1,84216
%N = 𝑥100
1,0023
Datos:
N = lectura del N en mg %N = 0,1837 = 0,18 %
P = Peso de la muestra en mg
7. Resultados

Presentar los resultados del análisis en el Cuadro 1 utilizando los datos de interpretación
presentados en el Cuadro 2.

Cuadro 1. Resultados e interpretación del análisis del contenido de materia orgánica de

diferentes suelos de Ecuador.
N° de Peso de la HCl consumido mL Nitrógeno Interpretación
muestra muestra mg
(mg) %
523 1,0023 1,37 1,84216 0,18 Bajos

Cuadro 2. Nivel de materia orgánica en suelos de Ecuador

Nivel Contenido de N (%)
Muy bajo < a 0,10
Bajo 0,11 a 0,24
Medio 0,25 a 0,50
Alto > 0,50

8. Conclusiones

El contenido de nitrógeno es fundamental en cuanto al contenido de nutrientes del suelo

este es uno de los principales nutrientes que limita la producción y desarrollo de los
cultivos debido a que las plantas toman este nutriente en grandes cantidades.
El nitrógeno es tomado por las plantas en dos formas como nitrito y amonio principalmente
como nitrito que está en gran mayoría en el suelo esto se debe a la descomposición de la
materia orgánica y fertilizantes que en la solución del suelo se descomponen al ion amonio
y las bacterias del suelo por el proceso de nitrificación transforman a nitrato.
El nitrógeno que el proceso de Kjeldahl y el equipo de titulación lee en las muestras es el
amonio que es contenido en la solución del suelo, el nitrógeno es un nutriente muy móvil
en el suelo razón por la cual un análisis del suelo sirve como una base para hacer
recomendaciones en cuanto al contenido de este elemento en los suelos.
Es muy importante saber también cual es el extraente del nitrógeno al momento de hacer
el análisis del suelo, debido a que existe más de un procedimiento para medir el contenido
de nitrógeno y los resultados varían entre estos procesos.
Para hacer recomendaciones es muy importante conocer el estado del cultivo si lo hay o el
fin que tiene nuestro suelo, cada cultivo tiene sus propias necesidades de este nutriente,
además que la fertilización con nitrógeno debe ser manejada responsablemente para
evitar daños ambientales, pérdidas por volatilización y acidificar los suelos
Tomar muestras adecuadas para el análisis del laboratorio, de esto depende el análisis del
contenido de nitrógeno en nuestros suelos de no ser así el análisis no tiene valides ni
utilidad.
9. Cuestionario

¿En qué consiste la fijación de N?

La fijación biológica del nitrógeno atmosférico, consistente en la reducción de N2 a NH4+

por la enzima nitrogenasa, es, después de la fotosíntesis, la ruta metabólica más
importante para el mantenimiento de la vida en la Biosfera.
Los microorganismos fijadores de nitrógeno son bacterias comprenden organismos
fototrofos, como bacterias pertenecientes a la familia Rhodospirillaceae, Clorobiaceae y
Cianobacteriae; organismos quimioautotrofos, como bacterias de los géneros Thiobacillus,
Xanthobacter y Desulfovibrio y organismos heterotrofos como las bacterias petenecientes a
la familia Frankiaceae, al grupo Rhizobiaceae y a los géneros Azotobacter

¿Cuáles es la forma de N absorbida en mayor cantidad por las plantas?

Las formas iónicas que una raíz puede absorber el nitrógeno son el nitrato (NO3–) y el
amonio (NH4+). Como la mayor parte del nitrógeno del suelo está en forma orgánica, es
necesaria una actividad microbiológica que lo convierta en amonio o nitrato mayormente
por la nitrificación la planta dispone de nitrato que es la forma que en mayor cantidad
absorbe la planta por sus raíces.

¿Explique de dónde proviene el N utilizado por las plantas y a qué procesos se

somete?
El nitrógeno proviene de fuentes orgánicas como los residuos y material orgánico en
descomposición o por el uso de fertilizantes como la urea, una vez en el suelo las formas
orgánicas no disponibles para la planta se mineralizan y junto a los fertilizantes se someten
en el suelo a la nitrificación, es el proceso a través del cual las bacterias nitrificantes
transforman el amonio en nitrato. Se necesitan dos pasos distintos para que esto suceda.
1. Las Nitrosomonas sp. oxidan el amonio en un producto intermedio, el nitrito.
2. Las Nitrobacter sp. transforman el nitrito en nitrato.
Las bacterias nitrificantes se consideran bacterias autótrofas, o bacterias que utilizan el
CO2 como fuente de carbono para su crecimiento.

10. Bibliografía consultada

Fijación biológica del nitrógeno. Disponible en:

https://www.uam.es/personal_pdi/ciencias/bolarios/Investigacion/fijacionN.htm. Consulta
del 01 de febrero de 2015
Nitrificación. Disponible en:
http://www.selba.org/EspTaster/Ecologica/Agua/Nitrificacion.html
Nitrogeno total. Disponible en :
http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1405-31952011000600001

11. Firma