Banco de Sangre PDF

Banco de Sangre Código: CAL-01
Instituto Nacional de Pediatría Nivel de Revisión: 03

Fecha: 16 ENERO de 2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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MANUAL DE PROCEDIMIENTOS
Procedimiento de identificación de los
Procesos necesarios para el sistema de gestión de la calidad
Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:
Nombre: Nombre: Nombre:

Guillermo Escamilla M. Leticia Medina Macias Dinora V. Aguilar
Guerrero Escobar
Firma: Firma: Firma:
Fecha: Fecha: Fecha:

16 enero 2012 16 enero 2012
16 enero 2012
CAL-02-B
Fecha: 26 de Agosto 2003
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Procedimiento de Grupos sanguíneos
y Anticuerpos
CAL-02-B
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y Anticuerpos
CAMBIO REVISIÓN FECHA
Ninguno 0 26/08/03
CAL-02-B
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y Anticuerpos
DESCRIPCION DEL PROCESO
Una vez que al donador se le toma la muestra (Ver procedimiento CAL-43) se

procede a caracterizarlo inmunohematológicamente abarcando los siguientes
estudios:
1. Grupo sanguíneo (Sistema ABO)
2. Subgrupo sanguíneo (Sistema A)
3. Grupo sanguíneo (Sistema Rho)
4. Determinación del Du
5. Fenotipo Rho (EeCc)
6. Rastreo de Anticuerpos irregulares fuera de
Sistema ABO (semipanel o panel completo)
7. Hemolisinas
8. Chequeo de grupo sanguíneo (Sistema ABO &
Rho)
Los métodos para realizar estos ensayos (a excepción de las Hemolisinas)

son:
 Método semiautomático
Tubo
Gel
 Método automático
Gel
Las pruebas de aglutinación establecen:
 HEMOLISIS: Indica una reacción positiva para la

unión Antígeno – anticuerpo.
 AGLUTINACION: la presencia del par Antígeno y/o

Anticuerpo complementarios relevante.
 NO AGLUTINACIÓN la ausencia de cualquiera de
ellos.
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y Anticuerpos
INTERPRETACION Y PONDERACIÓN DE LAS AGLUTINACIONES
DESCRIPCION GRADO PONDERACION

Hemolísis total Ht
Botón completo, sobrenadante claro 4+ 12
Botón grande con algunos agregados, fondo claro 3+ 10
Botón fragmentado en varios grumos grandes, fondo 2+ 8
turbio
Botón fragmentados en numerosos grumos regulares, 1+ 5
fondo turbio
Botón fragmentado múltiples grumos pequeños, fondo +/- 1
muy turbio
Aglutinación no visible negativo 0
1.- DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO
La prueba consiste de dos etapas:

 Prueba directa o celular: eritrocitos estudiados
desafiados contra antisueros comerciales de
especificidad conocida
 Prueba inversa o sérica: suero estudiado desafiado

contra eritrocitos de fenotipo conocidos
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y Anticuerpos
PRUEBA DIRECTA
en tubo
Se realiza la centrifugación del tubo de muestra (etiquetado con el nombre y # del donador) para separar el Paquete
eritrocitario y el plasma o suero. Una vez que se tiene la separación del concentrado eritrocitario y el plasma, este último se
transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador).
Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml aproximadamente de
solución que contiene solución salina y solución de pHix + dos gotas de concentrado eritrocitario del donador
(concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-5%)
Se realiza la prueba directa y la prueba inversa
Para la prueba directa se requiere lo siguiente:
Se identifican 4 tubos
TUBO 1 TUBO 2
TUBO 3 TUBO T
Agregar una gota Agregar una gota de
Agregar una gota de Agregar 2 gotas del
de reactivo Anti-A reactivo Anti-B
reactivo Anti-AB plasma o suero del
(suero de color (suero de color
(suero incoloro) donador
azul) amarillo)
Adicionar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador
Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga a 3500RPM
Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos y se hace la lectura macroscópica para observar si existe o no
aglutinación
Registrar resultados en el formato F-A-14-26
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y Anticuerpos
PRUEBA INVERSA
en tubo
Marcar 4 tubos con las letras A1, A2, B y O

Células de fenotipo conocido preparadas a una concentración del 2-5%
TUBO A1 TUBO A2 TUBO B TUBO O

Agregar una gota de Agregar una gota de Agregar una gota de Agregar una gota de
celulas A1+ 2gotas del celulas A2 + 2gotas del celulas B + 2gotas del celulas O + 2gotas del
plasma del donador plasma del donador plasma del donador plasma del donador
Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.
Se realiza un ligera agitación para desprender el botón de celulas
Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación
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y Anticuerpos
Formato F-A-14-26 que es llenado por el personal de área de donadores:
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y Anticuerpos
Tabla 1
Prueba Directa
ANTIGENOS PRESENTES EN LOS ANTICUERPOS PRESENTES EN

GRUPO SANGUINEO
ERITROCITOS SUERO O PLASMA
A A Anti - B
B B Anti - A
AB AyB -----
O ni A ni B Anti – A & Anti - B
INTERPRETACION
Prueba DIRECTA Prueba INVERSA
GRUPO Tubo con Antisuero Tubo con céluas:
Anti-A Anti-B Anti-AB Testigo A1 A2 B O
A POST NEGT POST NEGT NEGT NEGAT POST NEGAT
B NEGT POST POST NEGT POST POST NEGT NEGT
AB POST POST POST NEGT NEGT NEGT NEGT NEGT
O NEGT NEGT NEGT NEGT POST POST POST NEGT
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y Anticuerpos
De forma Manual:
GRUPO SANGUIENO SABO
EN GEL
transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador). Y se puede introducir al equipo WADiana o realizarlo
de forma manual.
Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 1.0 ml de solución de DianaSol 1
con 25 l de concentrado eritrocitario del donador (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%)
Se realiza la prueba directa y la prueba inversa
Empleo de tira del DianaGel Donors/Donantes

ver imagen
INVERSA
MICROTUBOS
DIRECTA 7y8
MICROTUBOS colocar 50 l de eritrocitos
1, 2, 3, 4, 5, y 6 reactivos (Serigrup Diana A1 y B)
colocar 25 l de solución de con 50 l del suero o plasma del
eritrocitos del donante donador
Centrifugar en DianaFuge
(ver imagen)
Leer
La lectura puede ser visual o en el DianaScanner (equipo WADiana)
(ver imagen)
Interpretación
(Acorde a la imagen presentada)

o mandar impresión
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y Anticuerpos
A1 B
# donador:
Fecha:
Iniciales y clave de quien realizó:
S.ABO S.Rho AT INVERSA
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y Anticuerpos
2. SUBGRUPOS SANGUINEOS (SISTEMA ABO)
Para realizar la prueba de Lectina A1 y H se requiere lo siguiente:
Marcar 1 tubo con la letra A1 (Anti-A1) y otro con la letra H (Anti- H)
TUBO A1 TUBO H
Agregar 1 gota del reactivo Anti-A1 Lectina Agregar 1 gota del reactivo Anti-H
Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador
Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.
Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación y se interpretan los resultados
abla # 2 Subgrupo SABO
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y Anticuerpos
3.- DETERMINACION DEL FACTOR Rh
GRUPO SANGUIENO Rho

en tubo
transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador).
Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml de solución salina con
amortiguador de Phix con dos gotas de concentrado eritrocitario del donador
Marcar un tubo con la letra Rh (anti D) y otro con la letra C (control)
TUBO D TUBO C
agregar una gota del Agregar una gota del reactivo
antisuero comercial Control Rh ó
Anti - D ALB 22%
Agregar una gota de suspensión al 2-5% de eritrocitos del donador

Centrifugar 45 segundos/3500RPM
Leer resuspendiendo con movimiento suave el botón. Interpretación acorde a la aglutinación presente
NO AGLUTINACION AGLUTINACION
Rh neg (D-) Rh post (D+)
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y Anticuerpos
4. Determinación del Du
SI la prueba Anti-D es NEGATIVA
Los tubos marcados con D y C (provenientes de la Prueba RH) se incuban 15-30 minutos a 37 C
Centrifugar e Interpretar
Positiva
Negativa
Se lavan las celulas 3 veces con salina fisiologica.

Se decanta la salina por completo en la última lavada
El resultado
se considera
Rh+ ( D+)
Agregar una gota de suero de Coombs poliespecífico (anti IgG-C3d)

Centrifugar e interpretar El resultado
se considera
Rh- y Du+
( para fines de
Positiva
transfusión se
considera :
Negativa donadores Rh+
receptores Rh-
Rh - (D-)
La determinación del grupo ABO en la tarjeta de Gel conlleva la

determinación del anti D y el Du
Los resultados de Rh negativo en gel se confirman con el Anti D Totem

(anticuerpo policlonal dirigido contra las 6 fracciones del Antígeno D: I – VI)
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y Anticuerpos
5. FENOTIPO Rho (EeCc) :
Marcar la tarjeta con el número del donador que le corresponde
Hacer un suspensión de los eritrocitos 2-3% (1ml de Diana-1 + 25 l de muestra)
Añadir 25 microlitros de la suspensión de eritrocitos 2-3% en los microtubos que indican C, c, E, e

(Ver imagen)
Centrifugar en DianaFuge y leer manual (Tabla 3A, 3B, 3C)
Registrar los resultados en el formato F-A-14-23
Interpretación de fenotipo Rh
Registro del donador Registro del donador

Fecha: Fecha:
Iniciales y clave de quien Iniciales y clave de quien
realizó realizó
Fenotipo: CcE Fenotipo: CEe
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y Anticuerpos
FORMATO F- A – 14 – 23
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y Anticuerpos
Tabla 3B
Fenotipo Rh
REACCION SEROLOGICA ANTI FENOTIPOS

GENOTIPO
D C c E e WIENER FISHER
DCe/dce + + + - + R1r DCcee
DCe/DCe + + - - + R1R1 DCCee
DcE/dce + - + + + R2r DccEe
DcE/DcE + - + + - R2R2 DccEE
DCe/DcE + + + + + R1R2 DCcEe
dce/dce - - + - + rr ddccee
Dce/dce + - + - + R0r Dccee
dCe/dce - + + - + r'r ddccee
dCe/dCe - + - - + r'r' ddccee
dcE/dce - - + + + r" r ddccee
dce/dcE - - + + - r" r " ddccEE
dCe/dcE - ++ + + + r' r" ddCcEe
DCe/DCE + + - + + R1RZ DCCEe
DcE/DCE + + + + - R2RZ DCcEE
DCE/DCE + + - + - RZRZ DCCEE
dCE/dCe - + - + + r y y' ddCCEe
dCE/dcE - + + + - r y r" ddCcEE
dCE/dCE - + - + - ryry ddCCEE
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y Anticuerpos
Tabla 3C
Fenotipo Rh
ANTI- FENOTIPO GENOTIPO PROBABLE

D C E c e WIENER FISHER- RACE WIENER FISHER- RACE
+ + - + + Rh1rh DCe R1r DC/dce
+ + - - + Rh1Rh1 DCe R1R1 DC/dce
- - - + + rhrh ce rr Dce/dce
+ + + + + Rh1Rh2 DCcEe R1R2 DC/DcE
+ - + + + Rh2rh DcEe R2r DcE/dce
+ - + + - Rh2Rh2 DcE R2R2 Dce/DcE
+ - - + + Rh rh Dce Ror Dce/dce
- + - + + rh´rh Cce r´r dC/dce
- - + + + rh´rh cEe r"r dce/dce
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y Anticuerpos
6.- DETERMINACION DE ANTICUERPOS IRREGULARES FUERA DEL

SISTEMA ABO (SEMIPANEL O PANEL COMPLETO)
A todas las mujeres, personas politransfundidas y personas Rh negativos se les

realiza la siguiente prueba:
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y Anticuerpos
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES FUERA DE SISTEMA ABO, EMPLEANDO PANEL TRIO
Se marcan los tubos con # del 1 al 3 con su respectivo duplicado y un tubo más con una T (testigo) y con su duplicado
En cada tubo se coloca:
TUBO T
TUBO 1 TUBO 2 TUBO 3
1 gota De suspensión de
1 gota de Gamma Trio #1 + 2 1 gota de Gamma Trio #2 + 2 1 gota de Gamma Trio #3 + 2
eritrocitos del donador + 2
gotas de suero del donador gota de suero del donador gota de suero del donador
gota de suero del donador
TUBO T’
TUBO 1’ TUBO 2’ TUBO 3’
1 gota De suspensión de
1 gota de Gamma Trio #1 + 2 1 gota de Gamma Trio #2 + 2 1 gota de Gamma Trio #3 + 2
eritrocitos del donador + 2
gotas de suero del donador gota de suero del donador gota de suero del donador
gota de suero del donador
Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos y se introducen en la centrifuga durante 30 segundos.
Las rpm estan establecidas en la centriifuga.
Se realiza la lectura macroscópica en salina rapida y reportar si existe aglutinación (Ver tabla 3A)
Los tubos # 1’, 2’, 3’ y T” se incuban a 37 C durante

Los tubos #1, 2, 3 y T se incuban 22 C durante 60 minutos 30-60 minutos
Se realiza la lectura macroscópica en frio para observar Centrifugar 30 seg. Antes de realizar la lectura macroscópica
aglutinación (Ver tabla 4) y se desechan las muestras para observar aglutinación
NEGATIVO Registrar Registrar resultados como Salina a 37 C

resultados como en el formato F-A-14-23
Salina a 22 C
en el formato
F-A-14-23 Se lava con solución salina con pHix y se centrifuga durante
1minuto se realiza este procedimiento 3 veces (al decantar
tener cuidado con el botón) en el último lavado decantar la
POSITIVO salina por completo
Agregar 1 gota de Anti-IgG-C3d

Se realiza el panel
completo con las Mezcle ligeramente, centrifuge y leer
diluciones de los
eritrocitos del IMSS
Ademas de
del Banco Central
de Sangre del
Centro Medico POSITIVO
Nacional Siglo XXI Registar
resultados como
Salina Coombs y/
o CAGH en el NEGATIVO
formato
F-A-14-23
Se realiza la Prueba confirmatoria o CAGH (adición de células
sensibilizadas con anti D)
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y Anticuerpos
Y la siguiente reacción en tarjeta:
Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta en técnica liss-gel se requiere lo siguiente:
Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 3 y un T( testigo) Las células se preparan empleando 10 l de eritrocitos con 1
ml de solución Diana 2
MICROTUBO 1
MICROTUBO 2 MICROTUBO 3 MICROTUBO T
Anadir 50 l de
Anadir 50 l de Anadir 50 l de Anadir 50 l de
Gamma Trio 1
Gamma Trio 2 Gamma Trio 3 eritrocitos del donador
MICROTUBO 1, 2, 3 y T
Anadir 25 l de plasma del donador
Incubar en Diana incubador durante 15min a 37 C
Centrifugar en Diana fuge y leer (Tabla 4)

Si es positivo se debe realizar el panel completo (10 -11 células del panel siglo XXI o comercial)
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y Anticuerpos
Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta con técnica LISS-gel se requiere lo siguiente:
Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 10 u 11 y un T( autotestigo)
10 l EN CADA UNO DE LOS MICROTUBOS DE CADA UNA DE LAS CELULAS Y DEL TESTIGO
Realizar una suspensión con 10 l de eritrocitos con 1 ml de DIANA 2 y adicionar a todos los microtubos 50microlitros
CEL CEL
CEL 1 CEL 2 CEL 3 CEL 4 CEL 5 CEL 6 CEL 7 CEL 8 CEL 9 AT
10 11
MICROTUBO 1 al AutoTestigo
Anadir 25 l de suero del donador

La interpretación se realiza contra la CARTA PANEL
Tabla 4
Detección de Anticuerpos con reactivo Gamma TRIO 1, 2 y 3
Escanear imagen de carta panel del:

 CARTA PANEL DEL TRIO
 CARTA PANEL DE SIGLO XXI
 CARTA PANEL DE PANEL DIANA
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7. HEMOLISINAS
A las personas con grupo O se les realiza la siguiente prueba:
Para realizar la prueba de Hemolisinas se requieren los tubos con células A1, A2, B y O de la prueba inversa y de el tubo
AutoTestigo de la prueba directa
Todos los tubos se incuban a 37 C/1hora y se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas
en la centriifuga.
Se realiza la lectura macroscópica para observar si existe o no hemolisis
La Prueba es negativa cuando el líquido sobrenadante es de color claro y positiva cuando es de color rojizo
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y Anticuerpos
8.- Chequeo de Grupo sanguíneo (Sistema ABO & Rho)

CONFIRMACION DEL GRUPO
SANGUIENO SABO EN GEL
Se realiza la centrifugación del tubo PILOTO que se toma directamente de la bolsa de concentrado eritrocitario (etiquetado
con el nombre y # del donador) para separar el Paquete eritrocitario y el plasma o suero. Una vez que se tiene la separación
del concentrado eritrocitario y el plasma, este último se transfiere a un tubo previamente etiquetado (nombre y # del donador).
con 25 l de concentrado eritrocitario del donador (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%)
Se realiza una prueba directa
Empleo de tira del DianaGel Confirm

(ver imagen)
DIRECTA MICROTUBOS
MICROTUBTOS Ctrl
A, B, D, Ctrl colocar 50 l
colocar 25 l de solución de con 50 l del suero o plasma del
eritrocitos del donante donador
(ver imagen)
Leer
La lectura puede ser visual
(ver imagen)
Interpretación
Registrar resultados en la libreta de RECHEQUEO DE GRUPOS CAL-25-A

y pegar la impresión
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y Anticuerpos

Fecha: Fecha:
realizó realizó
Libreta RECHEQUEO DE GRUPOS CAL-25-A
FECHA DE GRUPO
# REGISTRO IMAGEN GPO REPORTADO DISCREPANCIAS REPORTA
REALIZACION DETECTADO
A B D Ctrl
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y Anticuerpos
El formato F-A-14-26 se muestra a continuación:
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y Anticuerpos
El formato F-A-14-26 se llena de la siguiente manera:
Anti-A: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique la tabla 3A).
Anti-B: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

Anti-AB: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

Auto (Testigo): Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

GR A1: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

GR A2: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

GR B: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

GR O: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

Lec. A1: Esta prueba se realiza solo en personas de grupo

sanguíneo A. Se anota + si es positivo o – si es negativo y
el número que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique
la tabla 3A).
Ant. H: Esta prueba se realiza solo en personas de grupo

sanguíneo A. Se anota + si es positivo o – si es negativo y
el número que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique
la tabla 3A).
Rh Anti-D: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

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y Anticuerpos
T Auto: Se anota + si es positivo o – si es negativo y el número

que le corresponde del 1 al 4 (Según lo indique la tabla 3A)
Resultados
Grupo: Escribir la letra del grupo donador.
El formato F-A-14-23 muestra a continuación:
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y Anticuerpos
Fecha: Día, mes y año en que se esta realizando el

análisis de la muestra.
Registro: Se escribe el análisis que se esta realizando

en este caso es Anticuerpos irregulares.
# del donador: # que le corresponde al donador según la

bitácora de ingresos y egresos.
22 C: Temperatura a la que se realizo la prueba.
37 C: Temperatura a la que se realizo la prueba.
1: # de microtubo que se esta analizando.

. Se anota + si es positivo o – si es negativo y
el número que le corresponde del 1 al 4
(Según lo indique la tabla 3A)

.
T: Testigo de la prueba.
Se anota + si es positivo o – si es negativo y
Conclusiones: Escribir las observaciones de los

resultados obtenidos.
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y Anticuerpos
Soluciones requeridas
La solución salina y pHix se compone de 1lt de solución salina isotónica y 10 ml

de la solución pHix.
La suspensión de eritrocitos se prepara con 2.5 – 3.0 ml aproximadamente de

solución salina isotónica y pHix más 2 gotas de eritrocitos del donador.
La solución Diana-1 es una solución salina para suspensiones de hematíes para

técnicas en gel, se utiliza para la determinación de grupos sanguíneos, pruebas
cruzadas y autocontrol , se debe conservar a 18-25 C.
La solución Diana-2 Es una solución de baja fuerza iónica para suspensión de

hematíes que facilita la unión de anticuerpo a los hematíes por reducirse la
densidad de la nube de cationes alrededor de los mismos, favoreciendo la
sensibilización , se conserva a 2-8 C.
REGISTROS
El Formato F-A-14-26 se debe almacenar 1año.
El Formato F-A-14-23 se debe almacenar 1año.
LISTA DE DISTRIBUCION
Laboratorista: ____________________________________
Suplente: ____________________________________
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Página 30 de 97
Procedimiento de Técnicas de Serología
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Página 31 de 97
Ninguno 0 26/08/03
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Página 32 de 97
En este procedimiento de Serología se pueden encontrar pruebas de Rutina,

Confirmatorias, seguimiento y para pacientes dentro del protocolo de Transplante de
medula ósea.
Dentro de las pruebas que se realizan de rutina y/o tamizaje en el laboratorio se

encuentran:
PRUEBAS DE TAMIZAJE
ENSAYO PARA DETECCION DE: PRUEBA DE RUTINA
Anticuerpos contra Chagas ELISA
Anticuerpos contra Chagas HAI
Antígeno de Superficie de Hepatitis B ELISA
Anticuerpos contra HCV ELISA
Anticuerpos contra HIV 1+2 ELISA
Anticuerpos contra Sífilis VDRL o RPR
Anticuerpos contra Brucela Antígeno Rosa de bengala
En caso de salir reactivo la prueba de tamizaje, se procede con la realización de

la prueba confirmatoria o suplementaria:
PRUEBAS CONFIRMATORIAS
MARCADOR CONFIRMATORIA
CHAGAS HAI 2 - MERCAPTO ETANOL
HBV NEUTRALIZACIÓN
HCV INMUNOBLOT RIBA HCV
HIV WESTERN BLOT HIV-1
HIV WESTERN BLOT HIV-2
SIFILIS TP-PA ELISA
SIFILIS TP-PA HAI
BRUCELA ANTIGENO BLANCO
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PROPUESTA DE UN ALGORITMO DE
TRABAJO EN BANCO DE SANGRE
DESTINO Reactivo 1er CORRIDA DE MUESTRAS Negativo
LIBERACION
Y
FINAL DEL PARA MARCADORES ASIGNACION
PRODUCTO SEROLOGICOS
2a corrida Negativo REPORTE A

(tubo y piloto) DONADOR
Reactivo
Negativo
PRUEBA
CONFIRMATORIA
NEGATIVO
Reactivo
INDETERMINADO
Solicitar 2a muestra
Se corre ELISA
(1er & 2a MUESTRA)
POSITIVO
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ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS (ELISA)

La enfermedad de Chagas es una infección provocada por un parásito llamado
Tripanosoma cruzi. El diagnostico para esta enfermedad depende de la fase en que se
encuentra la cual puede ir de una fase aguda a una fase crónica. Para el diagnostico de
la fase crónica se utiliza entre otros métodos el de ELISA y para la fase aguda el HAI
que serán los métodos que se explicaran en este procedimiento.
El método de Ensayo inmunoenzimàtico (ELISA) para la determinación de anticuerpos

contra el Tripanosoma cruzi se fundamenta en que la muestra del donador o paciente se
diluye en el soporte en el que se encuentra inmovilizado el antígeno, si contiene
anticuerpos específicos contra Tripanososma cruzi, se formara un complejo que se
mantiene unido al soporte. La fracción que no se une se desecha por medio de lavados.
Se agrega anticuerpos anti inmunoglobulina humana conjugados con peroxidasa, si se
produjo la reacción en la primera etapa del proceso, se unirá el conjugado. Se realiza un
segundo lavado para eliminar en anticuerpo conjugado que no se une. Se agrega el
sustrato. Si existe unión con el conjugado aparece un color celeste y se detendrá la
reacción con ácido sulfúrico, con lo que el color celeste vira al amarillo. La concentración
de anticuerpos específicos es directamente proporcional al color de la reacción.
El reactivo que utilizaremos para realizar la prueba es el CHAGATEST ELISA:
 Incluye una policubeta sensibilizada que contiene tiras

removibles con pocillos que contienen antígenos
citoplasmáticos y de membrana de Tripanosoma cruzi
inmovilizados.
 Diluyente de muestra
 Buffer de lavado de placa
 Controles positivo y negativo
 Anti inmunoglobulina humana conjugado
 Solución de revelado
 Solución de paro
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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La muestra para esta prueba puede ser plasma o suero y de preferencia no se debe de
utilizarse muestras lipemicas, hemolizadas o cualquier otra causa en la que la muestra
se observe turbia.
Cuando el análisis no se realiza el día de la extracción de la muestra se puede conservar

la muestra durante 7 días a 2-10°C o congelada a –20°C, cuando la muestra se requiera
guardar y descongelar de nuevo.
Este procedimiento se lee a una longitud de onda primaria de 450nm (filtro de lectura),
una longitud de onda secundaria de 620-650nm (filtro de referencia).
Una vez que se inicia el análisis no debe de existir interrupciones, es importante que la
muestra y los reactivos al ser colocados en los diferentes pocillos sean colocados en el
seno del pocillo y que al dispensar se enjuague la pipeta para asegurar la
homogenización. Los reactivos utilizados en esta prueba están listos para usar y solo al
Buffer de lavado (5X) se le realiza una dilución 1+ 4 (ejemplo para preparar 1l: 200ml de
buffer de lavado + 800ml de agua destilada). Ver el inserto al final del procedimiento).
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DETECCION DE ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS ELISA
Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s) si se requiere.
Se prende la Incubadora Abbott Commander y se pone a 37 C para cuando se necesite introducir la muestra.
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, bco, controles (los pocillos no se puden
marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis (mapa de muestras).
Se centrifugada la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el
análisis ( la muestra puede ser plasma o suero)
A todos los pocillo previamente identificado en la bitacora CAL- 26-A se les adiciona una alicuota de 200microlitros de diluyente de muestra
incluyendo al blanco
A los pocillos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 10 microlitros del suero o plasma y se homogenizan
con la misma punta con que se esta colocando.
Al pocillo identificado como control internos positivo se le colocan 10 microlitros del tubo marcado como control interno positivo y al pocillo
marcado como control interno negativo se le adicionan 10 microlitros del tubo marcado como control interno negativo.
A los 2 pocillos identificados como control positivo se les colocan 10 microlitros a cada uno del reactivo marcado como control positivo y al los
3 pocillos marcados como control negativo se le adicionan 10 microlitros a cada uno del reactivo marcado como control negativo.
Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta s (para evitar
evaporaciòn).
Se incuba la policubeta a 37 C durante 30 min. en la incubadora Abbott Commander, una vez que suena la alarma se saca la policubeta y se
realiza el lavado en el Equipo Sanofi Diagnostics Pasteur LP 35
Una vez terminado el lavado se decanta el remanente del lavado inviertiendo la policubeta y golpeàndola varias veces sobre papel
absorbente, posteriormente agregar a todos los pocillos 1 gota (60microlitros) de conjugado a todos incluyendo al blanco y mezclar aplicando
con suaves golpes en los laterales de la policubeta.
Se incuba la policubeta a 37 C durante 30 min. en la incubadora Abbott Commander, una vez que suena la alarma se saca la policubeta y se
realiza el lavado en el Equipo Sanofi Diagnostics Pasteur LP 35
Una vez terminado el lavado se decanta el remanente del lavado inviertiendo la policubeta y golpeàndola varias veces sobre papel
absorbente, posteriormente agregar a todos los pocillos 1 gota (50microlitros) de revelador A y una gota de revelador B y mezclar aplicando
con suaves golpes en los laterales de la policubeta durante 10 seg.
La policubeta se deja a Temperatura Ambiente durante 15-20MIN.
Se agrega 1 gota (50 microlitros) de soluciòn Stopper (para detener la reacciòn) a todos incluyendo al blanco mezclar aplicando con suaves
golpes en los laterales de la policubeta durante 10 seg.
Leer a 450nm o bicromàtica a 450/ 620-650nm (el color de la reacciòn es estable durante 30min) o con el programa del equipo LP-400.
Se interpretan los resultados y se guarda el reporte impreso en el Folder de Serologia Chagas y el mes en que se esta realizando el anàlisis y
tambien en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A.
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VALIDACIÓN DE LA CORRIDA
Si la corrida realizada no cumple con una o ambas de las siguientes condiciones se

repite la corrida:
Una lectura de al menos 2 de los 3 controles negativos que corregidas contra el

blanco de reactivos deben ser menores o iguales a 0,150 D.O.
Una lectura media de los controles positivos que corregida debe ser mayor o igual
a 0,600 D.O.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
Con instrumental óptico:

La presencia o ausencia de Ac. Anti-T. cruzi se determina relacionando la absorbancia
de la muestra respecto al valor Cut-off
Cut-off = CN + 0,200 D.O.
Donde CN: promedio de las lecturas del control negativo
Zona de indeterminación: Cut-off +- 10%
Muestras no reactivas: se consideran aquellas con absorbancia menores que el

límite inferior de la zona de indeterminación.
Muestra reactiva: se consideran aquellas con absorbancia mayores que el límite

superior de la zona de indeterminación.
Muestras indeterminadas: se consideran aquellas con absorbancia que caen

dentro de la zona de indeterminación. Estas muestras deben ser ensayadas
nuevamente.
Interpretación visual: Si se opta por esta interpretación debe considerarse:

No reactiva: muestra que no presenta una coloración mayor que los controles
negativos.
Reactiva: muestra que presenta una coloración netamente amarilla.
Cuando se presentan colores tenues mayores que el control negativo se requiere de

interpretación instrumental.
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ANTICUERPOS CONTRA CHAGAS (HAI)
La hemaglutinación indirecta (HAI), también llamada hemaglutinación reversa pasiva, se

basa en la propiedad que tienen los anticuerpos del Tripanosoma cruzi de producir
aglutinación específica en presencia de glóbulos rojos sensibilizados con los
correspondientes antígenos.
En el suero existen anticuerpos inespecíficos (heterófilos) que son capaces de aglutinar

glóbulos rojos de distintas especies. Su presencia se investiga enfrentando el suero con
los GR no sensibilizados. Los anticuerpos interferentes se eliminan mediante
tratamientos con 2-mercaptoetanol que se utiliza en la Prueba confirmatoria.
Para la realización de esta prueba solo se puede utilizar solo suero y se requiere que las
muestras no se encuentren de preferencia lipemicas o hemolizadas. Si la muestra se
resguardara antes de su análisis se conservara a 2-10 C durante no más de 72 Hrs.
contadas a partir de la extracción o a –20 C para periodos mas largos de conservación.
Los reactivos a utilizar en esta prueba no todos están listos para usar y es muy
importante que sean preparados con las cantidades que indica el inserto CHAGATEST
HAI y el tiempo que se considera son estables. (Ver el inserto al final del
procedimiento).
Cuando se presenten resultados en todas las diluciones reactivas o todas con ausencia
de reactividad, puede ser indicio de autoaglutinación por la presencia de Anticuerpos
heterofilos del antígeno HAI o deterioro de los reactivos.
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Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s).
Se marca la placa con dividiones de 4 pocillos
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos que requiera la
bitacora para la correcta identificación del análisis.
Se marca la placa con el numero de toma de muestra que le corresponde
análisis ( la muestra solo puede ser suero). A todos los pocillo se les adiciona una alicuota de 25microlitros de diluyente de suero (Buffer)
El diluyente del suero se prepara: 200 microlitros de solución proteica por cada 10 ml del buffer
A los pocillos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 25microlitros del suero y se homogenizan con la
misma punta con que se esta colocando.
Se realizaran diluciones seriadas a partir del primer pocillo (½, ¼, 1/8, ….. etc).
Se toma una alicuota de 25microlitros del primer pocillo del paciente y se pasa al segundo pocillo, se homogeniza y se toma una alicuota del
segundo pocillo de 25 microlitros y se pasa al tercer pocillo y lo mismo para el cuarto pocillo (en el cuarto pocillo se toma la alicuota de
25microlitros y se tira para que contenga el mismo volumen que los demas pocillos. Las diluciones seran de ½ para el primer pocillo, ¼ para el
segundo pocillo y asi sucesivamente.
Al pocillo identificado como control positivo y control negativo se les realiza el mismo proceso de dilucion.
Una vez reconstituido y agitado el reactivo que contiene los GR no sensibilizados (control de heterofilia) se le adiciona 25microlitros a los
pocillo que contienen la dilucion ½ y ¼ de todas las muestras y controles
Y a los pocillo que contienen las diluciones 1/8 y 1/16 muestras y controles se les adiciona 25microlitros de Antigeno HAI o GR sensibilizados
Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta
(para evitar evaporaciòn).
Se deja en reposo durante 90min (en un lugar donde no exista vibracion)
Leer a partir de los 90min. Se puede aumentar la nitidez de lectura haciendolo sobre un espejo, ilumunando la placa desde arriba e
interponiendo un papel blanco y traslùcido entre la policubeta y la fuente de luz.
Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A.
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No reactivo: presencia de un sedimento en forma de un botón o pequeño anillo de

bordes regulares.
Reactivo: formación de una película o manto que cubre el 50% o más del fondo de los
pocillos. Si no se usan microdilutores la imagen del manto puede ser más pequeña.
Cuando se observan resultados positivos y además se presenta manto en los pocillos

de control de heterofilia (diluciones ½ y ¼), debe realizarse otra titulación con los sueros
correspondientes pero previamente tratados con 2-ME o adsorbidos con GR no
sensibilizados (el tratamiento elimina la reacción inespecífica).
ANTIGENO DE SUPERFICIE DE HEPATITIS B (ELISA)
Ensayo inmunoabsorbente enzimático para la detección del antígeno de superficie de la

hepatitis B en suero o plasma humano.
La prueba de anticuerpos frente al HBs Ag ELISA es un ensayo inmunoabsorbente

enzimático de tercera generación para la detección del antígeno de superficie de la
hepatitis B (HBs Ag). Es una prueba de preselección de muestras y herramienta
diagnóstica ante una posible infección por hepatitis B.
Se utilizan pocillos recubiertos con anticuerpos frente al HBs Ag como fase sólida. El
técnica ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se fijan a la fase sólida
pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo complementario marcado con una
enzima capaz de actuar como substrato cromegénico. Al aplicar el substrato, la
presencia de un antígeno o anticuerpo puede detectarse por el desarrollo de un producto
final coloreado, el ELISA es utilizado para enfermedades infecciosas.
El procedimiento se divide en dos etapas y se lleva a cabo en un micropocillo recubierto

con anticuerpos frente al HBs Ag. El control de omisión de muestra (COM) es una
característica de la prueba basada en la medición del cambio de densidad óptica ( DO) a
405nm que se produce en los pocillos al añadir la muestra. Cambio que se observa
también visualmente, cuando el diluyente de conjugado pasa de color azul a verde
azulado al añadir la muestra.
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Etapas de la prueba:
En la primera
Se añade al pocillo de ensayo el conjugado de trabajo, constituido por anticuerpos
conjugados con HPR y diluidos en diluyente de conjugado de color azul. La microplaca
se incuba y si la muestra contiene HBs Ag, éste se fija al pocillo recubierto de
anticuerpos, y simultáneamente al conjugado para formar complejos inmovilizados,
constituidos por anticuerpos- HBs Ag-conjugado. Las proteínas séricas o plasmáticas se
eliminan en el siguiente paso de lavado.
En la segunda etapa
Se añade al pocillo un sistema de detección de enzimas compuesto por OPD y peróxido

de hidrógeno. Si el conjugado se ha fijado a la muestra, el OPD se oxida bivalentemente
la peroxidasa para formar un compuesto intermedio que, a su vez, se reduce, donante
de iones hidrógeno. La forma oxidada de OPD resultante es de color naranja. Por último
se añade ácido sulfúrico para detener la reacción. La intensidad de color depende de la
cantidad de conjugado fijado que haya en el pocillo. La intensidad de color ésta en
función de la concentración de HBs Ag que contenga la muestra, se mide con un lector
de microplaca a 490 0 492nm.
 Precauciones
Los reactivos se puede almacenar entre 2-8° C.

No mezclar reactivos de lotes diferentes.
Dejar reactivos a temperatura ambiente 30 min. antes de su empleo.
Utilizar guantes y lavarse las manos al terminar.
La preparación de los reactivos se observa en el inserto de la prueba anexada al final del

procedimiento.
Es importante que si utiliza plasma este recolectado con anticoagulante adecuado

(heparina no) y que contenga la cantidad que se requiere para la muestra. Se puede
utilizar suero. El suero o plasma se puede almacenar a 2 y 8 C durante un máximo de 7
días, en congelación a –18 C o menos y no descongelar y congelar consecutivamente.
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CRITERIOS DE ACEPTACION DEL SUBSTRATO EN BLANCO
Se considera que una placa es válida con respecto al substrato en blanco si el valor de
la absorbancia del pocillo correspondiente al substrato en blanco (pocillo 1A) es igual o
mayor que –0,001 e igual o menor que 0,050.
CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CALIBRADOR NEGATIVO
Se considera que una placa es válida si al menos dos de los tres calibradores negativos
cumplen con los siguientes criterios.
 Si uno de los tres valores control está fuera de estos límites, deberá
volver a calcularse la media de los controles negativos (NCalx) en base
a los dos valores de absorbancia aceptables de los calibradores.
 Los valores que estén entre –0,006 y 0,012, ambos incluidos, son
válidas y deben redondearse a 0,000 para efectuar el cálculo.
 Determine la media de los valores de absorbancia del calibrador

negativo (NCalx).
 La placa no será válida y deberá repetirse la prueba si dos o más de los

tres valores control está fuera de los límites.
CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CONTROL POSITIVO
Los controles positivos son utilizados para verificar que los componentes del kit de la
prueba tienen capacidad para detectar una muestra reactiva, siempre que el
procedimiento de la prueba se haya seguido estrictamente.
Se considera que una placa es válida únicamente cuando los valores de absorbancia
respectivos a 490nm ó 492nm son iguales o mayores que el valor de corte, y cumple
además los siguientes criterios:
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El valor de absorbancia del control positivo es igual o mayor que 0,225 e igual o
menor de 2,500.
El valor de absorbancia del control positivo no difieren entre sí más de 0,230.
Si uno cualquiera de estos valores controles está fuera de estos límites, el ensayo
no se considera válido y deberá repetirse.
CRITERIOS DE ACEPTACION DEL CONTROL NEGATIVO
El calibrador negativo y el control positivo deben cumplir los criterios de aceptación de

control de calidad para que la microplaca se pueda considerar válida.
CALCULO DE LOS VALORES DE CORTE (cut-off)
Valor de corte = NCalx + 0,030
Ejemplo:
Control negativo Absorbancia
1 0,001
2 0,000
3 0,002
Absorbancia total= 0,003
NCalx = Absorbancia total/ 3 = 0,001
Valor de corte= 0,001 + 0,030 = 0,031
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Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la muestra(s) que se van a
utilizar para esta prueba.
Se enciende la incubadora Abbott Commander a 37 C
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan el blanco, muestras y controles (los circulos no se
pueden marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis.
análisis ( la muestra que se utiliza puede ser suero o plasma )
La forma de colocarlos es asi:
Colocar 3 pocillos Colocar 2 pocillos

Colocar las Colocar el Control Colocar el Control
Blanco con Controles con controles
muestras interno negativo interno positivo
negativos positivos
Adicionar 50microlitros de Conjugado de Hepatitis B a todos los pocillos menos al blanco (7ml de diluyente de conjugado + 20microlitros de
concentrado de conjugado)
Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia y homogenizar con la punta que se adiciona.
Colocar 150microlitros de
cada muestra
Colocar 150microlitros en el
pocillo del Control interno
negativo
positivo
Colocar en los 3 pocillos de

Controles negativos
150microlitros del control
Colocar en 2 pocillos de
Controles positivos
Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 90min.
Realizar los respectivos lavados (solución de lavado con 950ml de agua destilada+ 50ml de solución de lavado 20X) con el LP 35 SANOFI
Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 6 ciclos) La forma de operar del equipo se describe al final del procedimiento. Quitar exceso de lavado
con golpes sobre un papel. Se prepara la Solución Buffer-sustrato-OPD
(1 pastilla de OPD + 6ml de Buffer)
Adicionar 200microlitros deSolución Buffer-sustrato-OPD a todos los pocillos (incluyendo al blanco). Tapar la placa con una cubierta de metal
si se tiene o en oscuridad e incubar a temperatura ambiente durante 30min. Al termino de la incubación se adicionan a todos 50microlitros de
acido sulfurico 4N (para parar la reacciòn)
Se realiza la lectura y se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A. y se guarda el registro impreso
en el folder del mes y con el nombre de la prueba.
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Las muestras con valores de absorbancia menores que –0,014 deben volver a
ensayar una vez. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición se
obtenga el mismo valor.
Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte e igual o
mayor de –0,014 deberán considerarse no reactivas. No es necesario repetir la prueba.
Las muestras cuyo valor de absorbancia sea igual o mayor que el valor de corte
se consideran inicialmente reactivas y deben volver a ensayarse por duplicado antes de
proceder a su interpretación definitiva.
Al volver a ensayar una muestra inicialmente reactiva, ésta se considera

repetidamente reactiva al HBs Ag si una cualquiera de las determinaciones por
duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el valor de corte.
Después de volver a ensayar una muestra inicialmente reactiva, ésta se considera

reactiva y el resultado es confirmado por neutralización con anti- HBs Humano, se
considera la muestra como positiva al HBs Ag.

no reactiva al HBs Ag si ambas determinaciones duplicadas son no reactivas y menor
que el valor de corte e igual o mayor de –0,014.
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ANTICUERPOS CONTRA HCV (ELISA)
Este es un Inmunoensayo enzimático cualitativo para la detección de Anticuerpos frente

al Virus de la Hepatitis C (anti- HCV) en suero o plasma humanos.
En el Inmunoensayo enzimático (ELISA) se utiliza como fase sólida pocillos con un

revestimiento de una combinación de antígenos recombinantes configurados del virus de
la hepatitis C. El principio de la ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se
fijan a la fase sólida pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo
complementario marcado con una enzima capaz de actuar como substrato cromogénico.
Al aplicar el substrato enzimático, la presencia sobre el antígeno o anticuerpo puede
detectarse por el desarrollo de u producto final coloreado. El ELISA es utilizado para
enfermedades infecciosas.
El virus de la Hepatitis C es el agente causal de la mayoría si no es de todas, las
hepatitis transmitidas por sangre y que no son del tipo A ni del tipo B.
En la primera
Se incuba una muestra diluida en el pocillo de pruebas durante un periodo determinado
de tiempo. Si en la muestra existe anticuerpo reactivo frente a cualquiera de los tres
antígenos, se formarán complejos de antígeno-anticuerpo en la superficie del
micropocillo. Si no existe anti-HCV, no formarán dichos complejos. La etapa de lavado
elimina las proteínas del suero o plasma que no se hayan unido.
En la segunda etapa
Se añade al micropocillo un anticuerpo monoclonal de rata conjugado con peroxidasa de

rábano. El conjugado se une específicamente a la porción de la IgG humana de los
complejos antígeno-anticuerpo. Si estos complejos antígeno-anticuerpo no se hallan
presentes, el conjugado que no se ha unido se eliminará en la fase de lavado que ha de
realizarse a continuación.
En la tercera etapa
Se añade al pocillo un sistema de detección de enzima compuesto de o-fenilendiamina

(cromogénico) y peróxido de hidrógeno (sustrato). Si existe conjugado unido, el OPD se
oxidará y dará lugar a un producto final coloreado. En esta reacción, la peroxidasa se
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oxida de forma divalente mediante el peróxido de hidrógeno y forma un compuesto

intermedio que, a su vez, se reduce a su estado inicial mediante interacción subsiguiente
con el OPD donador de ión hidrógeno. Entonces, se añade ácido sulfúrico para paralizar
la reacción.
La intensidad de color depende de la cantidad de conjugado unido, está en función de la

concentración de anti-HCV presente en la muestra. La intensidad de color se mide con
un lector de micropocillos diseñado para cuantificar la absorbancia de la luz en un
micropocillo.
La preparación de los reactivos para este procedimiento se encuentra en el inserto al

final del procedimiento.
Se puede utilizar suero o plasma para realizar la prueba, se puede utilizar suero, incluido
el recogido en tubos separadores de suero, o plasma recogido en EDTA, ACD, CPDA,
CP2D, CPD y citrato de sodio al 4% y heparina.
La muestra se puede almacenar entre 2-8 C hasta 7 días y si se requiere un

almacenamiento prolongado, la muestra se congela a menos 18 C. Los pocillo que no se
van a utilizar se almacenan entre 2-8 C en la bolsa de aluminio que se suministra, con
desecante, sellada firmemente y se debe utilizar dentro de los 42 días siguientes a la
apertura de la bolsa de aluminio.
Los valores individuales de control negativo deben ser iguales o menores que
0,0120 y mayores o iguales que –0,005. Si uno de los tres valores control se encuentra
fuera de alguno de estos límites, recalcule el valor medio del control negativo en base a
los dos valores controles aceptables. La placa no será válida y deberá repetirse la
prueba si dos o más de los tres valores control están fuera de los límites.
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Determinar la media de los valores control negativo.
Ejemplo:

1 0,005
2 0,015
3 0,010
NCx = Absorbancia total/ 3 = 0,010
Se considera que una placa es válida, si ambos controles positivos, si el valor de
ambos controles positivos es mayor o igual al valor de corte “cutoff” dentro de la lectura
del lector de placas
Nota: los valores por encima del límite superior del rango soportado del lector de
microplacas puede aparecer como “ OVER” o “ *** “ .
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Adicionar 20 microlitros de Soluciòn buf er- sustrato-OPD (1 pastil a de OPD en 6ml de Buf er sustrato) a todos los pocil os (incluyendo al
blanco). Tapar la placa con una cubierta de metal o /y oscuridad se incuba a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a todos
50microlitros de acido sulfurico 4N (para parar la reac iòn)
Se realiza la lectura, se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A y a guarda el registro dentro del
folder del mes y prueba cor espondiente
Valor de corte = NCx + 0,330

Ejemplo:
1 0,005
2 0,015
3 0,010
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Valor de la línea de corte = 0,010 + 0,330 = 0,340
ensayar en un pocillo único. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición
se obtenga el mismo valor o inferior a –0,025.
Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte se

consideran no reactivas. No es necesario repetir la prueba.
proceder a su interpretación definitiva.

repetidamente reactiva para anticuerpos a HCV si una cualquiera de las determinaciones
por duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el valor de corte.

no reactiva para anticuerpos HCV, si ambas determinaciones por duplicado son no
reactivos, es decir menores que el valor de corte.
ANTICUERPOS CONTRA HIV 1 + 2 (ELISA)
Este es un Inmunoensayo enzimático cualitativo para la detección de Anticuerpos frente

al Virus de Inmunodeficiencia humana de Tipos 1 y/o 2 (HIV-1 y HIV-2) en suero o
plasma humanos.
En el Inmunoensayo enzimático (ELISA) se utiliza como fase sólida pocillos con un

revestimiento de una combinación de antígenos recombinantes HIV-1 y HIV-2. El
principio de la ELISA es de que los antígenos o anticuerpos que se fijan a la fase sólida
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pueden detectarse mediante un antígeno o anticuerpo complementario marcado con una

enzima capaz de actuar como substrato cromogénico. Al aplicar el substrato
enzimático, la presencia de un antígeno o anticuerpo puede detectarse por el desarrollo
de un producto final coloreado. El ELISA es utilizado para enfermedades infecciosas.
El síndrome de Inmunodeficiencia adquirida (SIDA) como el complejo relacionado con el

(CRS) están causados por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 y tipo 2.
HIV-1 y HIV-2 son similares pero distintos.
Morfología y linfotropismo similar

Modos de transmisión parecen ser idénticos.
Los genomas de los virus exhiben aproximadamente un 60% de homología en
genes conservados tales como gag y pol y un 30-40% de homología en genes menos
conservados.
Este método puede ser utilizado tanto para el estudio de donadores de sangre como
para fines de diagnóstico. El ensayo utiliza una combinación de dos proteínas de
envoltura recombinantes de HIV-1 y una proteína core recombinante de HIV-2.
En la primera Etapa del procedimiento se diluye en diluyente de la muestra (color

verde). La dispersión de la muestra o el control provoca un cambio de color evidente que
puede monitorearse visualmente o mediante lecturas fotométricas a 610nm. A
continuación la muestra o control diluidos se incuban en el pocillo del equipo durante un
periodo de tiempo establecido. Si la muestra contiene un anticuerpo reactivo a alguno de
los 4 antígenos, se formaran complejos antígeno-anticuerpo en la superficie del pocillo.
Si no hay anti HIV-1 y/o anti-HIV-2, nose formarán los complejos. Las proteínas séricas o
plasmáticas no fijadas se eliminarán en la siguiente fase de lavado.
En la segunda etapa se añade al pocillo una mezcla de los 4 antígenos HIV-1 y

HIV-2 recombinantes conjugados a peroxidasa de rábano. El conjugado se fija
específicamente la porción inmunoglobulina anti-HIV-1 y/o anti-HIV-2 (IgG e IgM) de los
complejos antígeno-anticuerpo. Si no existen complejos antígeno-anticuerpo, el
conjugado no fijado se eliminará en el siguiente lavado.
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En la tercera etapa, se añade un sistema de detección de enzimas consistente en

o-fenilenediamina y peroxido de hidrógeno. Si hay conjugado fijado, el OPD se oxidará
produciendo una reacción de color anaranjado. Entonces se añade ácido sulfúrico para
detener la reacción.
La intencidada del color resultante depende de la cantidad de conjugado fjado y

es, por lo tanto, una función de la concentración de anti- HIV-1 y/o anti-HIV-2 presente
en la muestra. La intensidad del color se mide con un lector de microplacas diseñado
para medir la absorbancia de luz de un pocillo.
La preparación de los reactivos para este procedimiento se encuentra en el inserto al

final del procedimiento.
Se puede utilizar suero o plasma para realizar la prueba, se puede utilizar suero, incluido
el recogido en tubos separadores de suero, o plasma recogido en EDTA, ACD, CPDA,
CP2D, CPD y citrato de sódio al 4% y heparina.
La muestra se puede almacenar entre 2-8 C hasta 7 días y si se requiere un

almacenamiento prolongado, la muestra se congela a menos 18 C.
Los pocillos que no se utilizan se deben de cerrar bien y darles 60 días de caducidad a
2-8 C con desecante.
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Antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la muestra(s) que se van a
utilizar para esta prueba. Los reactivos se agitan sin formar burbujas.
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan el blanco, muestras y controles (los circulos no se
pueden marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis.
La forma de colocarlos en la placa es asi:
Colocar 1 pocillos
Colocar 3 pocillos
con controles Colocar las Colocar el Control Colocar el Control
Blanco con Controles
positivos HIV1 y muestras interno negativo interno positivo
negativos
otro + HIV2
Adicionar 50microlitros de diluyente de muestra a todos los pocillos menos al blanco
Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia y homogenizar con la punta que se adiciona.
cada muestra

Controles negativos
Colocar en 1 de los pocillos

de Controles positivos
+HIV1 y en otro +HIV2
negativo
positivo
Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 30min.
Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 5 ciclos) La forma de operar del equipo se
describe al final del procedimiento. Quitar exceso del lavado con golpes sobre un papel.
Adicionar 200microlitros de Conjugado a todos los pocillos (excepto al blanco). Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C
durante 30min. Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur
Adicionar 200microlitros de Soluciòn buffer- sustrato-OPD (1 pastilla de OPD en 6ml de Buffer sustrato) a todos los pocillos (incluyendo al
blanco). Tapar la placa con una cubierta metalica o poner a oscuridad e incubar a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a
todos 50microlitros de acido sulfurico 4N (para parar la reacciòn) incluyendo al blanco.
Se realiza la lectura, se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A y se guarda el registro en el
folder del mes y la Prueba correspondiente.
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Los valores individuales de control negativo deben ser iguales o menores que
0,070 e iguales que –0,010. Las cifras entre 0,000 y –0,010, ambas inclusive, son
válidas y deben redondearse a 0,000. Si uno de los tres valores control está fuera de
estos límites, deberá volver a calcularse la media de los controles negativos (NCx) en
base a los dos valores aceptables. La placa no será válida y deberá repetirse la prueba
si dos o más de los tres valores control están fuera de los límites.
Determinar la media de los valores control negativo (NCx).
Ejemplo:

0,005
0,010
0,015
Se considera que una placa es válida, si ambos controles positivos (HIV-1 y HIV-2)
satisfacen los siguientes criterios:
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El valor de absorbancia del control positivo HIV-1 es igual o mayor que 0,200 y
está dentro del rango soportado por el lector de microplacas.
El valor de absorbancia del control positivo HIV-2 es igual o mayor el corte del
ensayo y está dentro del rango soportado por el lector de microplacas.
Si uno cualquiera de estos valores controles está fuera de estos límites, el ensayo
no se considera válido y deberá repetirse.
Nota: los valores por encima del límite superior del rango soportado del lector de
microplacas puede aparecer como “ MAS DE” o “ *** “ .
Valor de corte = NCx + 0,125
Ejemplo:
1 0,005
2 0,010
3 0,015
Valor de corte= 0,010 + 0,125 = 0,135
ensayar en un pocillo único. Se considera que son no reactivas, aunque en la repetición
se obtenga el mismo valor.
Las muestras con valores de absorbancia menor que el valor de corte e igual o
mayor de –0,025 deberán considerarse no reactivas. No es necesario repetir la prueba.
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proceder a su interpretación definitiva para posteriormente realizar la Prueba
confirmatoria para definir si es positiva, indeterminada o negativa.

repetidamente reactiva para anticuerpos a HIV-1 y/o HIV-2 si una cualquiera de las
determinaciones por duplicado, o ambas, son reactivas, es decir, igual o mayor que el
valor de corte.

no reactiva para anticuerpos a HIV-1 y/o HIV-2, si ambas determinaciones por duplicado
son negativas, es decir menores que el valor de corte.
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ANTICUERPOS CONTRA SIFILIS (VDRL o RPR)
Esta prueba es utilizada para detectar sífilis a través de una técnica aglutinación cuando
existe presencia de Treponema pallidum, por medio de una reacción inmunológica color
azul.
El reactivo SYPAL-CB es una suspensión coloidal de cardilipina, colesterol y lecitina. La

cardiolipina es extraída del corazón de la res y la lecitina del pollo. Para su conservación
el almacenaje se realiza a una temperatura de 2 - 8 C y cuidando que el recipiente se
encuentre bien cerrados y alejados de luz.
Las tarjetas que contiene el kit no se introduce al refrigerador para evitar que se
humedezcan. Se requiere atemperar los reactivos antes de utilizarlos (15-30°C)
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El Técnico de Serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C el SYPAL-CB, los controles y la muestra(s).
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos que requiera la
bitacora para la correcta identificación del análisis (si se considera necesario) si no se pueden marcar a un lado de la placa con el # de toma
de muestra.
Se centrifuga la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el análisis (
la muestra puede ser suero o plasma)
En esta prueba se utiliza una placa de prueba SYPAL-CB a todos los circulos se les adiciona una alicuota de 50microlitros o 1 gota con
pipeta desecha del suero del paciente, donador, etc.y se extiende con la misma pipeta desechable o punta.
De igual forma se aplican los controles positivo y negativo
A todos los circulos se les adiciona 1 gota de SYPAL-CB

(con la punta especial que incluye el kit para la aplicacion de este reactivo) y se agita la placa en el agitador BAXTER ROTATOR V durante
6 min. Leer a partir de los 6min. /100 RPM
Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-26-B
Cuando el Resultado es Negativo se reporta como Negativo,

cuando el Resultado es Positivo se realizan diluciones seriadas para determinar el titulo y se realiza la confirmatoria
Para realizar la lectura de la placa se agita manualmente por unos segundos (lo que
aumenta el tamaño de los aglutinados) y se observa con luz fuerte y se continua
agitando suavemente durante la lectura para distinguir cualquier microaglutinado.
Una prueba se considera positivas si se obtiene grandes aglutinados (lo que

depende de la cantidad presente de anticuerpos en el suero).
Una prueba se considera negativa cuando la mezcla permanece homogénea.
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ANTICUERPOS CONTRA BRUCELA (ANTIGENO ROSA DE BENGALA)
Para determinar la presencia de anticuerpos en el diagnostico de la Brucela de forma

rutinaria en el laboratorio se realiza la siguiente prueba:
Esta prueba es utilizada para el diagnostico de Brucelosis es de aglutinación rápida en

placa es empleada para la detección temprana de aglutininas especificas de Brucilla
( B. melitensis, B. abortus y suis).
Para la realización de esta prueba solo se puede utilizar solo suero y se requiere que las
muestras no se encuentren lipemicas o bemolizadas. Si la muestra se resguardara
antes de su análisis se conservara a 2-8 C.
El Técnico de Serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s).
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles (los circulos no se puden
marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis.
Se centrifuga la muestra si es que no se encuentra previamente centrifugada para tenerla lista para el momento en que la requiere el análisis (
la muestra solo puede ser suero)
En esta prueba se utiliza una placa de prueba, la cual debe ser identificada, en donde a todos los circulos se les adiciona una alicuota de 30-
40microlitros o una gota con pipeta desecha del suero del paciente, donador, etc. y a los controles positivo y negativo de reactivos internos.
Se homogenizan dentro del circulo con la parte plana de la pipeta desechable una vez que se colocan.
Se les adiciona a todos (incluyendo controles) 30microlitros o 1 gota del Antigeno Rosa de Bengala previamente homogenizado.
Agitar la placa en el agitador BAXTER ROTATOR V durante 4 min.
Leer a partir de los 4min.
Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-26-B.
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RESULTADOS
La lectura debe llevarse a cabo exactamente a los 4 minutos tomados a partir de que se
comenzó a mezclar.
No aglutinación: cuando se presenta un suero negativo.

Cualquier cantidad de aglutinación: presencia de anticuerpos específicos. Cuando se
presenta un suero positivo.
Como esta prueba es cualitativa cuando se tiene un resultado positivo debe ser confirma
mediante una prueba cuantitativa para brucelosis como: aglutinación lenta estándar o
aglutinación lenta en presencia de 2-mercaptoetanol.
CONFIRMATORIA y/o SUPLEMENTARIAS

CHAGAS ( HAI 2- BETA MERCAPTO ETANOL)
La hemaglutinación indirecta (HAI), también llamada hemaglutinación reversa pasiva, se

basa en la propiedad que tienen los anticuerpos del Tripanosoma cruzi de producir
aglutinación especifica en presencia de glóbulos rojos sensibilizados con los
correspondientes antígenos.
Y de esta manera eliminar los anticuerpos inespecíficos (heterófilos) que son capaces de
aglutinar glóbulos rojos de distintas especies (y dar falsos positivos). Su presencia se
investiga enfrentando el suero con los Glóbulos Rojos no sensibilizados. Esta prueba se
realiza para eliminar los anticuerpos heterófilos de las muestras con el tratamientos con
2-mercaptoetanol.
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El Técnico de Serlogia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C los reactivos, controles y la muestra(s).
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras y controles, los datos se pueden anotar en
la placa o en la bitacora para la correcta identificación del análisis. Se realiza por duplicado en la misma placa.
análisis ( la muestra solo puede ser suero)
Se realiza una dilución 1:100 con 25ml de solución fisiologica + 25microlitros de 2- mercaptoetanol
Se toma una alicuota de 25 microlitros de la muestra del donador, paciente, etc y de los respectivos controles + 25 microlitros de la dilución
anterior, se homogenizan con la misma punta con que se esta colocando y se tapa con la cubierta adhesiva.
Se incuba a 37 C durante 1 hr.
Se les adiciona una alicuota de 25microlitros de diluyente de suero (Buffer)
Se realizaran diluciones seriadas a partir del primer pocillo.

Se toma una alicuota de 25microlitros del primer pocillo del paciente y se pasa al segundo pocillo, se homogeniza y se toma una alicuota del
segundo pocillo de 25 microlitros y se pasa al tercer pocillo y lo mismo para el cuarto pocillo (en el cuarto pocillo se toma la alicuota de
25microlitros y se tira para que contenga la misma cantidad que los demas pocillos. Las diluciones seran de ½ para el primer pocillo, ¼ para el
segundo pocillo y asi sucesivamente.
Al pocillo identificado como control positivo y control negativo se les realiza el mismo proceso de dilucion.
Una vez reconstituido y agitado el reactivo que contiene los GR no sensibilizados (control de heterofilia) se le adiciona 25microlitros a los
pocillo que contienen la dilucion ½ y ¼ de todas las muestras y controles
Y a los pocillo que contienen las diluciones 1/8 y 1/16 muestras y controles se les adiciona 25microlitros de Antigeno HAI
Se mezclan aplicando suaves golpes en los laterales de la policubeta y se tapa con una cubierta adhesiva toda la policubeta s (para evitar
evaporaciòn).
Se incuba durante 60min en ABBOTT COMMANDER/ Se deja en reposo durante 90min (en un lugar donde no exista vibracion)
Leer a partir de los 90min. Se interpretan los resultados y anota el resultado en la Bitàcora de Serologia CAL-13-A.
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HbsAg ELISA (NEUTRALIZACION)
Es una Prueba confirmatoria que detecta anticuerpos para la Hepatitis B en muestras

reactivas en la ELISA para Antigenos de Hepatitis B.
Es una técnica de neutralización en conjunto con métodos estándares en ELISA

ORTHO-ANTICUERPOS.
El Técnico del área de serologia enciende la incubadora ABBOTT COMMANDER para tenerla a la temperatura que se requiere al introducir las placas.
Se divide la placa en dos partes que contienen cada una lo siguiente:
TIRA CONTROL
TIRA PRUEBA
BLANCO
3 CONTROLES NEGATIVOS 2 CONTROLES POSITIVOS
2 CONTROLES POSITIVOS MUESTRAS POR DUPLICADO
LA MUESTRA POR DUPLICADO
Una vez que se tienen vien identificados el contenido de cada pocillo se adiciona 50 microlitros de conjugado (conjugate diluent y antibody to hep. B
sudpase antigen) EXCEPTO AL BLANCO
TIRA CONTROL TIRA PRUEBA

Se le adiciona 20 microlitros de Confirmatory control Se le adiciona 20 microlitros de Antibody hep. B surface antigen
TIRA CONTROL
TIRA PRUEBA
A los 3 pocillos marcados para CONTROL NEGATIVO se le adiciona
200microlitros de calibardor negativo a cada uno.
A los 2 pocillos marcados para CONTROL POSITIVO se le adiciona
200microlitros de calibardor positivo a cada uno.
A los 2 pocillos marcados para CONTROL POSITIVO se le adiciona
200microlitros de calibardor positivo a cada uno.
A los 2 pocillos marcados para MUESTRA Y MUESTRA DUPLICADO
se le adiciona 200microlitros de la muestra.
A los 2 pocillos marcados para MUESTRA Y MUESTRA DUPLICADO
se le adiciona 200microlitros de la muestra.
Se tapa la placa con el papel adherible y se incuba a 37 C durante 180 min.
Se lava 6 veces con solución lavado en el SANOFI DIAGNOSTIC PASTEUR LP35.
Se adiciona 200microlitros del sustrato OPD (12ml de Buffer con 1 pastilla de OPD) a todos los pocillos y se incuba a temperatura ambiente en oscuridad
durante 30 min.
Se adiciona 50 microlitros de H2SO4 4N a todos los pocillos
Leer a 492 con referencia de 620 en el equipo SANOFI DIAGNOSTIC PASTEUR LP 400
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La absorbancia promedio de la muestra diluida o sin diluir es mayor o igual al valor

Cutoff y la adición de anticuerpos al antígeno de Hepatitis B reduce la reactividad de la
muestra en un 50% o más la Prueba se considera positiva.
Cuando la absorbancia promedio de la muestra diluida o sin diluir es mayor o igual al

valor Cutoff y la adición de anticuerpos al antígeno de Hepatitis B no reduce la
reactividad de la muestra al menos un 50% la muestra es no neutralizable y se debe
diluir al menos 1 a 10 y reinspeccionarse.
Si la absorbancia de la muestra duplicada es menor al Cutoff de la muestra diluida y sin

diluir se considera NO NEUTRALIZABLE.
Para calcular el Cutoff se requiere sumar los valores resultantes de absorbancia de los
3 controles negativos y dividirlos entre 3. Una vez que se tiene el valor promedio de los
controles negativos se suma a un valor 0.050 y se obtiene el Cutoff.
HCV (INMUNOBLOT RIBA HCV)
La prueba CHIRON* RIBA* HCV 3.0 SIA es un inmunoensayo cualitativo in vitro para la
detección de anticuerpos frente a proteínas individuales codificadas por el virus de la
hepatitis C (anti- HCV) en suero o plasma humano donado por la transfusión o
manufactura posterior. Los antígenos recombinantes utilizados son c33c y NS5 y dos de
los péptidos sintéticos son c100p y 5-1-1p que proceden de regiones putativas de la
nucleocápside viral.
Esta prueba tiene 3 etapas:
Primera etapa
La muestra o el control del ensayo se diluye e incuba con la tira. Si muestra contiene
anticuerpos específicos frente a HCV, éstos se fijarán a las correspondientes bandas de
antígeno recombinante y/o péptido sintético de la tira. Los componentes séricos o
plasmáticos no fijados se eliminarán por aspiración y lavado.
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Segunda etapa
La tira se incuba en presencia de un conjugado de anti- IgG humana de cabra, marcada

con peroxidasa. El conjugado se fija a la porción de anti- IgG humana del complejo
antígeno-anticuerpo. El componentes no fijados se eliminarán por decantación y
posteriores pasos de lavado.
Tercera etapa
Se añade un sistema colorimétrico de detección enzimática compuesto por agua

oxigenada y 4-cloro-1-naftol. Si el conjugado se fijo a la muestra, la reacción enzimática
origina un producto de reacción de color azul-negro insoluble en cada banda específica
de antígeno, péptido o control HCV. La reactividad de la muestra ante cada banda de
antígeno se determina comparando visualmente la intensidad de la banda antigénica
individual con la de las bandas de control interno de IgG humano alta y baja absorbidas
en cada tira.
Los reactivos se debe almacenar a 2 y 8 C.

Leer en el inserto de la prueba anexado al final del procedimiento para conocer sobre las
precauciones que se debe tener con los reactivos que incluye la prueba al igual que la
preparación de los reactivos y soluciones
CONTROL DE CALIDAD
Los controles positivo y negativo se deben incluir en cada serie , independientemente el

número de muestras o número de tiras utilizadas.
Como controles internos en cada tira se incluyen dos niveles de IgG humana (nivel I,
control bajo y nivel II, control alto). La reactividad de las bandas individuales de HCV se
determina comparando la intensidad de cada banda con los controles internos de la tira
IgG humana de nivel I y nivel II.
Los resultados previstos de los controles positivo y negativo que incluye la prueba son:
Las bandas del control interno IgG de nivel I y nivel II deben ser claramente
distinguibles a simple vista en las tiras de control positivo y negativo, y el control
IgG de nivel I debe ser evidentemente más claro que el control IgG de nivel II.
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La tira de control positivo debe mostrar una respuesta de 2+ o mayor para todas
las bandas de antígeno y péptido del HCV. La respuesta en la banda SODh debe
ser visible inferior al control IgG humano de nivel I.
La tira de control negativo debe mostrar una respuesta a cada una de las bandas
de antígeno del HCV y SODh que sea visiblemente inferior al control IgG humano
de nivel I.
Si los controles de la prueba incluidos no cumplen los criterios anteriores, la serie queda
invalidada y debe repetirse.
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El Técnico de Serologia escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, bco, controles (los
tubos no se puden marcar y contienen una tira dentro de ellos que contiene un número) y los datos que requiera la bitacora para la correcta
identificación del análisis.
análisis ( la muestra puede ser plasma o suero)
A todos los tubos previamente identificado en la bitacora CAL- 26-A se les adiciona una alicuota de 1ml de diluyente ( specimen diluent)
A los tubos que son de los pacientes, donador o repetición de análisis se les adiciona 20 microlitros del suero o plasma y se homogenizan con
la misma punta con que se esta colocando.
Al tubo identificado como control negativo se le colocan 20 microlitros y al tubo marcado como control positivo se le adicionan 20 microlitros y
se homogenizan con la misma punta con que se esta colocando.
Se tapan y se colocan en agitación vertical a temperatura ambiente durante 4 horas.
Se tira el liquido excedente teniendo cuidado con la tira que contiene y se adiciona 1ml del diluyente y se pone en agitación vertical durante
30min a temperatura ambiente
Preparo una solución de lavado WASH BUFFER CONCENTRATE (50X) con 450ml de agua destilada + 25ml de WASH BUFFER
CONCENTRATE
Decanto y pongo las tiras en la bandeja de reacción con 30ml aproximadamente de la solución de lavado que prepare en el paso anterior,
este proceso de decantación y lavado lo realizo 3 veces
Observo en el incerto cuanto conjugado debo agregar con respecto al número de tiras que tengo.
El incerto indica por ejemplo que para una tira requiero 1ml de conjugado pero
que cuando son menos de 10 tiras debo tomar a un así 10ml de conjugado
Una vez adicionado en la bandeja de reacción el conjugado pongo en agitación durante 10- 12 min. y realizo lavados y decantaciones 3 veces
como en lo hice anteriormente.
Preparo una solución substrato de trabajo en la que depende el número de tiras que tengo. Ejemplo: cuando tengo de 3-10 tiras preparo 1.7ml
de volumen de solución substrato con 8.5ml solución buffer del subtrato
Es muy importante que no sepeguen las tiras.
Agitar de 15 a 20 min a temperatura ambiente y decantar.
Lavar con 60ml de agua destilada dos veces.
Con pinzas colocar las tiras en un papel absorbente y retiro el exceso de agua.
Dejar secar las tiras durante 30min en la oscuridad y a temperatura ambiente
Leer resultdos antes de 3 hrs.
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La reactividad anti-HCV en una muestra se determina comparando la intensidad de cada

banda de HCV con la intensidad de las bandas del control interno de IgG humana (nivel I
y nivel II) de cada tira. La identidad de los anticuerpos se define por la ubicación
especificada de la banda de HCV.
La intensidad de las bandas de HCV se clasifica en función en función de la intensidad

de los controles de IgG internos de la siguiente forma:
Intensidad de la banda Puntuación
Ausente NEGATIVO
Menor que la intensidad de la banda control IgG de nivel I POSITIVO / NEGATIVO
Igual a la intensidad de la banda control IgG de nivel I 1+
Mayor que la intensidad de la banda control IgG de nivel I y 2+
menor que la intensidad de la banda control IgG de nivel II
Igual a la intensidad de la banda control IgG de nivel II 3+
Mayor que la intensidad de la banda control IgG de nivel II 4+
La interpretación NEGATIVA, INDETERMINADA o POSITIVA se basa en el patrón de

reacción presente en la tira. Para interpretar las series como válidas deben utilizarse los
siguientes criterios:
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Patrón de la banda de antígeno Interpretación

Ninguna banda de HCV presenta
reactividad 1+ o mayor.
O NEGATIVO
Sólo la banda de SODh presenta
Una única banda de HCV presenta
O
La banda de SODh presenta reactividad INDETERMINADO
1+ o mayor conjugadamente con una o
más banda de HCV presenta reactividad
1+ o mayor.
Al menos dos banda de HCV presenta
POSITIVO
Una intensidad de banda menor que el control IgG nivel I (es decir +/-) está por
debajo del valor límite parta la reactividad en el ensayo.
Solamente se puede hacer una interpretación POSITIVA de la tira en ausencia

de reactividad de la banda de SODh (es decir +/-).
Un resultado de la prueba POSITIVO indica la presencia de anti-HCV e infección

previa o actual con HCV. Un resultado de la prueba INDETERMINADO indica que
el anti-HCV puede no estar presente y que no se puede llegar a una conclusión
sobre si existe infección por HCV. Dado que una reactividad de +1 o mayor con
cualquiera de los antígenos codificados del virus HCV de la tira es una posible
evidencia de infección previa o actual con HCV, todos los individuos clasificados
INDETERMINADOS deben volver a someterse a la prueba durante un período de
6 a 12 meses para verificar si se ha producido un aumento de la reactividad. Se
recomienda que los INDETERMINADOS se vuelvan a someter a una prueba al
cabo de 6 meses, usando una muestra obtenida en ese momento.
Un resultado NEGATIVO que es REACTIVO por un procedimiento aprobado de

escrutinio de anti-HCV, no excluye la posibilidad de infección con HCV. Las
concentraciones de anti-HCV pueden no ser detectables en la infección inicial.
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HIV (WESTERN BLOT HIV 1 + HIV 2
Es una detección por electroinmunotransferencia de los anticuerpos anti-HIV 1 en suero

o plasma humano para la confirmación de una respuesta anti-HIV 1y anti-HIV 2 positiva
y para precisar la especificidad antigénica en el cuadro diagnóstico del SIDA.
La calidad de los antígemos utilizados en estos test no permite eliminar absolutamente

determinadas respuestas inespecíficas.
En el cuadro diagnóstico del SIDA, es necesario para la caracterización de la infección

por los virus HIV-1 ó HIV-2.
Este test se basa en el principio del ELISA indirecto sobre una tira de nitrocelulosa que
contiene todas las proteínas constituyentes del virus HIV-1, HIV 2 y un control interno
anti-IgG. La banda del control interno se halla situada junto al extremo no numerado de
la tira antes de la reacción p18 o p16 y permite validar la adición de la muestra y de los
reactivos así como el buen desarrollo del método.
El procedimiento de ensayo comprende las siguientes etapas:
Rehidratación de las tiras de nitrocelulosa

Incubación de las muestras a confirmar y sueros de control.
Si están presentes los anticuerpos anti-HIV 1 o HIV 2 se unirán a las proteínas virales
presentes sobre la tira de nitrocelulosa.
Después del lavado, se incuban las tiras con anticuerpos anti IgG humanos
marcados con fosfatasa alcalina. El conjugado se une a los anticuerpos anti-HIV 1 o
HIV 2 fijados al soporte sólido.
Después del lavado y eliminación del conjugado en exceso, la adición de solución de
revelado permite evidenciar la actividad enzimática de los complejos ligados a la
nitrocelulosa.
La aparición de bandas coloreadas específicas permite reconocer la presencia de
anticuerpos anti-HIV 1 o HIV 2 en el suero.
IMPORTANTE
No mezclar en un mismo ensayo diferentes lotes.

Reactivos no caducos.
Reactivos a temperatura ambiente antes de ser utilizados.
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No tocar las tiras con las manos, utilizar pinzas.

Utilizar los sueros de control en cada ensayo
REACTIVO PARA RECONSTITUIR
R2 Solución de lavado / diluyente

Homogenizar la solución, diluir (1/5) en agua destilada (ejemplo: 30ml de solución de
lavado + 120ml de agua destilada). Homogenizar cuidadosamente.
Una vez reconstituido permanece estable durante un mes a +2 - 8 C.
El equipo contiene 3 botes :
Desechos con tapón rojo

H20 destilada con tapón azul
Solución de lavado (1/5) con tapón amarillo.
VALIDACIÓN DE LOS RESULTADOS
La banda del control interno anti-IgG debe ser de coloración fuerte. Permite validar la
adición de la muestra y de los reactivos así como el buen desarrollo del método. La
ausencia o la escasa intensidad de coloración de la banda del control interno anti-IgG
indica ya sea la ausencia de depósito de la muestra o de los reactivos, o ya sea un
incumplimiento del método.
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El Químico del área de serologia enciende el equipo SANOFI DIAGNISTIC PASTEUR LS 12 con el interruptor que se encuentra en la parte de atras del
lado derecho.
En la pantalla se observa lo siguiente:
L-S.12 - Version 6.07.2y-

Selection Mode RUN = START
EDIT=1 CONFIG=2 SERV=3
Presionar START
RUN: Select. Test: New LAV BLOT

=1 =2 Valid= START Return= STOP
Presionar START
Run= Check botte contents-Rack on 1

Prime=3 Valid= START Return= STOP
Verificar que la linea amarilla este endentro del bote del

agua
Presionar el # 3
Una vez que termina se cambia la linea amarilla a el bote

de solución de lavado
Presionar el # 3 , apretar 3 veces el 3 para realizar 3

lavados)
Como los virus de HIV son similares son tratados igual
Se acomodan las tiras en cada unos de los Rack de la

siguiente forma:
RACK 1 HIV 2 Control negativo

RACK 2 HIV 2 Control positivo
RACK 3 Muestra
RACK 4 HIV 1 Control negativo

RACK 5 HIV 1 Control positivo
RACK 6 Muestra
Presionar START
RUN: Number of strips 1st Rack:5

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Presionar el # 2
Cambiar a 1 st Rack= 6
Presionar el # 2
RUN: Number of strips 2nd Rack:6

Presionar el # 1 hasta llegar al 0 para que quede

2nd Rack=0
Presionar START
RUN: Put the rack (s) on the tray

Valid= START Return= STOP
Presionar START
RUN: New Lav Blot / Pha: 1:

Presionar START
RUN: New Lav Blot

Phase 1: Soaking strip
Se agitan durante 5 min.
RUN: New Lav Blot Valid= START

Phase 2: Dispense 20microlitros of sample
Abrir la tapa del equipo
Adicionar 20 microlitros del control negativo WB1y 2

y 20 microlitros del control positivo WB1 y 2.
Adicionar 20 microlitros de la muestra
Homogenizar con la punta de la pipeta cada una despues
de adicionar
RUN: New Lav Blot R3

Negative Control serum
Positive Control serum R4
Presionar START
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RUN: New Lav Blot R3

Negative Control serum
Positive Control serum R4
Presionar START
RUN: New Lav Blot 2Hrs.

Phase 3: Incubation of samples
Se incuba 2 hrs con agitación.
RUN: New Lav Blot

Phase 5:2nd wash of sample
(3 veces)
RUN: New Lav Blot Valid=START

Phase 6: Dsipense 2.0ml de Conjugate RS
2.0ml de conjugate
Presionar START
RUN: New Lav Blot 60min.

Phase 7: Incubation Conjugate R5
RUN: New Lav Blot

Phase 8: 1st wash conjugate R5
RUN: New Lav Blot

Phase 9: 2nd wash conjugate R5
RUN: New Lav Blot Valid:START

Phase 10: Dispense 2.0ml Substrate R6
2ml de Colour developent solution R6
Presionar START
RUN: New Lav Blot Reaction stop STOP

Phase 11: Incubation substrate R6 Oh. Mn. S
5min. Aprox.
Presionar STOP
RUN: New Lav Blot

Phase 12: 1st. Rinse Subtrate R6
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RUN: New Lav Blot

RUN: New Lav Blot

RUN: New Lav Blot Valid:START

Phase 13: End of test
Presionar START
RUN: Begin a new test

YES= START NO=STOP
Presionar STOP
RUN: Instrument cleaning.Put a Rack

(1st pos.) Valid=START
Return= STOP
Presionar START
RUN: Conect R2 and H20

Tubing to the H2O bottle
Valid=START Return= STOP
Presionar START
RUN: Instrument cleaning.
0H mn-s
RUN: Disconnect the R2

and H2O tubing
Presionar START
RUN: Dring instrument
0H mn-s
RUN: Descontamination
Presionar START
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Colocar en un vaso de precipitado una solución de etanol

al 30% e introducir al vaso las lineas amarilla y azul
RUN: Inmerse both tube ends in 30% ethanol
Presionar START
RUN: Descontaminating tubing
-mn-s
RUN: 30% ethanol contact
OH--mn--s
RUN: Connect R2 and H2O tubing to

the H2O bottle
Presionar START
RUN: Cleaning instrument
3mn
RUN: Disconnect the R2 and H2O

tubing
Presionar START
RUN: Drying instrument

3mn
RUN: End of decontamination

Turn off the instrument
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La presencia de anticuerpos anti-proteínas constitutivas del virus HIV 1 y HIV 2 en las

muestras, se traduce por la aparición de bandas específicas coloreadas (azul-violeta).
Su posición corresponde a las masas molares de las proteínas virales representadas en
la tabla siguiente:
HIV 1
DETERMINA GEN NATURALEZA ASPECTO EN WESTERN

CIÓN BLOT
GP 160 ENV Glicoproteína precursora de Banda nítida
la GP 110/120 y de la GP 41
GP 110/ 120 ENV Glicoproteína de la envoltura Banda de bordes difusos
P 68 POL Transcriptasa inversa Banda nítida
P 55 GAG Precursora de proteínas Banda doble
internas
GP 41 ENV Glicoproteína Banda difusa
transmembranal
P 40 GAG Precursora de proteínas Banda nítida
internas
P 34 POL Endonucleasa Banda nítida
P 24/ 25 GAG Proteína interna Banda nítida
P 18 GAG Proteína interna A veces banda doble
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INTERPRETACIÓN NEW LAV BLOT 1
Utilizar el control positivo para identificar los anticuerpos revelados y verificar la

presencia de la banda del control interno en cada tira.
INTERPRETACIÓN PERFIL
Positivo 2ENV +/- GAG +/- POL
1ENV GAG POL
Indeterminado GAG + POL
GAG
POL
Negativo Ninguna banda Bandas no
significativas
La calificación de indeterminado puede ser por alguna de las alternativas siguientes:
Seroconversión
HIV-2
Reacción cruzada con otros retrovirus.
HIV 2
DETERMINACIÓN GEN NATURALEZA ASPECTO EN

WESTERN BLOT
GP 140 ENV Precursor de GP 105 y GP 36 Banda + -difusa
GP 105 ENV Glicoproteína de la envoltura Banda difusa
P 56 GAG Precursora de proteínas Banda nítida
internas
GP 36 ENV Glicoproteína Banda difusa
transmembranal
P34 POL Endonucleasa Banda nítida
P 26 GAG Proteína interna Banda nítida
P 16 GAG Proteína interna Banda nítida
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INTERPRETACIÓN NEW LAV BLOT II
Utilizar el control positivo para identificar los anticuerpos revelados y verificar la

presencia de la banda del control interno en cada tira.
INTERPRETACIÓN PERFIL
Positivo ENV + GAG + POL
ENV + GAG
ENV + POL
Indeterminado GAG + POL
GAG
POL
ENV
Negativo Ninguna banda Bandas no significativas
HIV (Ag P24 ELISA)
VIRONOSTIKA HIV-I ANTIGEN
El sistema microelisa VIRONOSTIKA HIV-I ANTIGEN es un enzimoinmunoensayo para

detección cualitativa y cuantitativa del antígeno de la nucleocápside p24 del virus de la
inmunodeficiencia humana del tipo 1 en suero, plasma o sobrenadante de cultivo celular
humano.
Es un inmunoensayo que se basa en el principio del sándwich. El anti-HIV-1 (humano)

acoplado a la peroxidasa de rábano (HRP) sirve como conjugado, usando como sustrato
a la tetrametilbencidina (TMB). Al concluir la prueba, el desarrollo de color sugiere la
presencia del antígeno del HIV-1.
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TAMPON FOSFATO DILUIDO
Verificar la ausencia de cristales de sales en el tampón fosfato concentrado. Si se han

formado cristales en la solución, volver a solubilizarlos calentando a 37 C hasta la
disolución de los mismos.
Diluir el tampón fosfato concentrado 1:25 con agua destilada o desionizada. Preparar
50ml de tampón fosfato diluido, como mínimo, para cada tira microelisa empleada.
El tampón fosfato diluido es estable durante dos semanas si se almacena a 2–8 C.
SUSTRATO TMB
Preparación del substrato TMB
Número de pocillos Solución TMB Solución de peróxido de urea

1-16 1ml 1ml
17-32 2ml 2ml
33-48 3ml 3ml
49-64 4ml 4ml
65-80 5ml 5ml
81-96 6ml 6ml
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El Químico de serologia antes de iniciar la prueba se llevan a temperatura de entre 15-30 C aproximadamente los reactivos, los controles y la
muestra(s) que se van a utilizar para esta prueba. Los reactivos se agitan sin formar burbujas.
Se escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se colocan las muestras y controles (los circulos no se pueden
marcar) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis.
La forma de colocarlos en la placa es asi:
Colocar 3 pocillos con Controles Colocar 1 pocillos con controles

Colocar las muestras
negativos positivos
Adicionar 25microlitros de disruptor a todos los pocillos
Adicionar a los pocillos con la siguiente secuencia:
cada muestra

Controles negativos
Colocar en 1 de los pocillos

de Controles positivos
Agitar ligeramente la placa y taparla con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 60min.
Realizar los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 4 ciclos) La forma de operar del equipo se
describe al final del procedimiento. Lavar con tampón fosfato diluido. Quitar exceso del lavado con golpes sobre un papel.
Adicionar 100microlitros de Conjugado a todos los pocillos. Tapar la placa con una cubierta adhesiva e incubar a 37C durante 60min. Realizar
los respectivos lavados con el LP 35 SANOFI Diagnostico Pasteur (Programa 1 con 4 ciclos, lavar con tampón fosfato diluido)
Adicionar 100microlitros de sustrato-TMB preparado a todos los pocillos. Incubar a temperatura ambiente durante 30min. Y se adicionan a
todos 100microlitros de ácido sulfúrico 1mol/l (para parar la reacciòn)
Se realiza la lectura a 450nm con referencia de 620nm, se interpretan los resultados y guarda el registro en el folder del mes de la Prueba
correspondiente.
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RESULTADOS
Calificación de los valores de control negativo (CN)

La absorbancia de cada pocillo de CN debe ser menor que o igual a 0,090 (longitud de
onda doble) o 0,130 (longitud de onda única) y mayor que o igual a 0,000 (longitud de
onda doble) o 0,040 (longitud de onda única).
Eliminar los valores fuera de rango y determinar el valor de control negativo medio
(CNx). Eliminar todo CN que no satisfaga los criterios siguientes, y volver a calcular el
valor medio:
Longitud de onda doble
CN mayo o igual a 0,5x (CNx)

CN menor o igual a 1,5x (CNx)
Longitud de onda única
CN mayo o igual a 0,8x (CNx)

CN menor o igual a 1,2x (CNx)
Si dos o más valores están fuera del intervalo, el ensayo no es válido y debe repetirse.
Calificación de los valores de control positivo (CP)

La absorbancia de cada pocillo de CP debe ser mayor que o igual a 0,960 (longitud de
onda doble) o 1,000 (longitud de onda única).
Valor cutoff
Si el ensayo de prueba es válido, calcular el valor cutoff como sigue:
Cutoff para suero y plasma = CNx + 0,070
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VIDAS HIV DUO (HIV4)
Es una prueba de screening para la infección por HIV automatizado en el sistema

VIDAS, basado en la detección combinada del antígeno p24 de VIH-1 y las
inmunoglobulinas G anti-VIH1 y anti-VIH2 en suero o plasma humano por una técnica
ELFA.
Los virus de inmunodeficiencia humana (VIH) son retrovirus ARN transmitidos

principalmente por vías sexual, parenteral, perinatal y transplacentaria. Desde el
aislamiento del VIH 1 en 1993 Y del VIH 2 en 1995, han sido caracterizadas numerosas
variantes genéticas.
El diagnóstico de una infección por VIH, se basa en la práctica normal en la

detección de anticuerpos séricos anti-VIH por una técnica ELISA.
Existe un periodo de 3 semanas y media entre la contaminación y la aparición de

los primeros anticuerpos.
Durante este periodo, el antígeno p24 esta presente en la mayoría de los

pacientes infectados por VIH-1, sea cual sea su origen.
La detección simultánea de la antigenémia p24 y de los anticuerpos anti-VIH-1 y

anti-VIH-2 permite reducir el retraso existente entre la contaminación y el diagnóstico de
la infección. Objetivo de VIDAS HIV DUO.
Todas las etapas de la reacción están controladas por el sistema. El cono de uso único,
sirve a la vez de fase sólida y de sistema de pipeteo El resto de los reactivos están
listos para su uso y distribución en el cartucho.
Primera reacción
La detección de inmunoglobulinas G anti-VIH1 (también las del subtipo (grupo) O) y anti-

VIH2, se realiza en la parte baja del cono, donde después de la etapa de dilución, la
muestra es aspirada y expulsada varias veces de la parte inferior del cono. Esta
operación permite a las IgG anti-VIH de la muestra unirse a los péptidos de síntesis gp
41y/o subtipo (grupo) O y/o gp 36 fijados en el cono. Los componentes no ligados se
eliminan en los lavados.
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El conjugado anti-IgG humana marcado con fosfatasa alcalina se incuba ahora en el

cono, en el cual se fija a las IgG anti-VIH. Los componentes no ligados se eliminan en
los lavados.
Segunda reacción
Es la detección del antígeno p24 y se realiza en la parte alta. La muestra previamente

diluida y los anticuerpos de conejo anti-p24 biotinilados son aspirados y expelidos en el
cono. Durante la incubación del virus es lisado y los antígenos p24 liberados se unen
por un lado los anticuerpos anti-p24 monoclonales de ratón fijados en la parte superior
del cono, u por otro lado a los anticuerpos anti-p24 biotinilados. Los componentes no
fijados son eliminados mediante estreptavidina conjugada con fosfatasa alcalina, cuyo
exceso se elimina mediante lavados.
Etapa final
La etapa final de revelado se realiza simultáneamente en las dos partes y el substrato

(4-metil-umbeliferil fosfato) se aspira y expele en el cono. La enzima presente en el
conjugado cataliza la reacción de este substrato en un producto (4-metil umbeliferota)
midiendo la fluorescencia emitida a 450nm. Esta es proporcional a la presencia de IgG
anti-VIH y/o antígeno p24 presentes en la muestra.
Al final de la prueba, los resultados son calculados automáticamente por el VIDAS en

relación a un estándar, y posteriormente impresos.
El cono es sensibilizado en el momento de la fabricación con 3 péptidos sintéticos

( 1péptido env VIH-1, gp 41 + 1péptido env VIH-2, gp 36 + 1péptido específico VIH-1
grupo O) y 3 anticuerpos monoclonales anti-p24. Los péptidos permiten la captura de
las IgG anti-VIH 1 o anti-VIH 2 y los anticuerpos monoclonales el antígeno p24.
La identificación de la prueba, el número de lote y la fecha de caducidad están indicadas

sobre el cartucho en un código de barras y está compuesto de 10 pocillos. El primer
pocillo tiene una parte precortada para facilitar la introducción de la muestra. El último
pocillo es una cubeta que permite la lectura por fluorimetría. Los 8 pocillos intermedios
contienen los diferentes reactivos necesarios para el análisis.
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Precauciones:
No utilizar reactivos después de la fecha de caducidad.

No mezclar reactivos o consumibles de equipos diferentes.
Utilizar guantes de látex de uso único sin talco (puede provocar falsos).
Los reactivos y productos de se recomienda manipular con precaución.
Los reactivos se conservan a 2-8 C.
MUESTRA:
Suero o plasma (EDTA, citrato, trombina, heparina de litio, gel de heparina de litio,
oxalato)
Las muestras que contienen partículas deberán centrifugarse.
Se conservan a 2-8 C, 48 horas como máximo, sino congelar a –25 C. No congelar y

descongelar. No descomplementar las muestras.
CALIBRACION
Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo, se efectúa a la llegada de cada

nuevo lote, después de introducir las especificaciones del lote y se realiza cada 14 días.
El estándar identificado como S1, será analizado dos veces y el valor debe encontrarse
entre los límites de RFV fijados. Si no la media no será memorizada y se tendrá que
repetir la calibración.
CONTROL DE CALIDAD
Se incluye un control positivo y un control negativo en cada equipo, estos controles se

debe utilizar cada vez que se utiliza un nuevo equipo con el fin de verificar la ausencia
de alteraciones de los reactivos. Cada recalibración debe ser verificada con la ayuda de
estos controles.
Para que el aparato pueda verificar el valor de los controles, es necesario identificarlos
mediante C1 y C2.
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Si los valores obtenidos del control positivo se desvían del intervalo de confianza
indicado en la etiqueta del frasco. Si el valor se desvía de los valores esperados, los
resultados no pueden validarse.
La técnica se observa al final del procedimiento.
RESULTADOS
Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente.

El equipo efectúa dos medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada
prueba:
La primera tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta substrato antes
de ponerse en contacto el substrato con el cono.
La segunda se efectúa después de la incubación del substrato con la enzima
presente en el cono.
El cálculo del RFV es el resultado de la diferencia de las dos lecturas, apareciendo en la

hoja de resultados.
El RFV se interpreta por el sistema VIDAS de la siguiente forma:
Valor del test = RFV paciente/ RFV calibrador
El valor de la prueba y la interpretación se imprimen en la hoja de resultados.
La interpretación en función del valor de la prueba es la siguiente:
Valor del test Resultados

Cuando el valor es menor a 0,25 Negativo
Cuando el valor es menor o igual a 0,25 pero menor a 0,35 Positivo límite
Cuando el valor es mayor o igual a 0,35 Positivo
INTERPRETACION
Las muestras cuyo valor sea inferior a 0,25 se consideran negativas dentro de los
límites de las características del reactivo. En caso de sospecha de una primo-infección,
los valores próximos a 0,25 deberán ser interpretados con prudencia.
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Las muestras con valor superior o igual a 0,25 debe repetirse.

Deben ser analizadas con una prueba ELISA en donde se detecta el Ag P24.
Si resulta positivo se realiza una ELISA donde solo se detecta Ag P24.
BRUCELA (ANTIGENO BLANCO)
PRUEBA DE AGLUTINACIÒN LENTA EN PRESENCIA DE 2-MERCATOETANOL
Esta es una técnica cuantitativa para la determinación de anticuerpos anti-Brucella de la

clase IgG e IgA (Marcadores de infección activa).
El antigeno que se utiliza es la cepa de B. Abortus. Al ponerse en contacto con los

anticuerpos, estos van uniéndose entre si a las bacterias suspendidas desarrollando la
reacción de aglutinación, de esta manera se van depositando en el fondo formando una
malla visible.
La molécula de 2-mercaptoetanol actúa sobre la cadena J de la molécula de IgM

liberando las subunidades, mismas que pierden la capacidad de aglutinar, por lo que la
reacción visible se debe fundamentalmente a la presencia de IgG e IgA.
Para observar mejor la reacción se realiza la lectura frente a una fuente de luz. El titulo
de cada muestra se determina tomando en cuenta la dilución más alta en donde se
observa una reacción positiva.
Reacción positiva: Formación de una malla de aglutinación en el fondo del pozo con
clarificación del medio.
Reacción negativa: Permanece la turbidez del medio y el fondo se aprecia un acumulo

de células sedimentadas en forma de botón.
INTERPRETACION
Los resultados en esta prueba se consideran significativos desde títulos de 1/20,

reflejando así una etapa activa de la infección.
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El Químico de serologiamarca la placa a utilizar con los # del 1 al 12 y en el otro extremo con las
letras A a la H.
Diluir el diluyente para suero (2-Me) con SSI ( dilución 1:10)

-Adicionar 180microlitros de esta solución en los pozos marcados como H
-Adicionar 100microlitros en el resto de los pozos
Adicionar 20microlitros de cada muestra de la siguiente manera:
En los pozos 1H al 10H colocar la muestra problema

En el pozo 11 H El Control positivo
En el pozo 12 H Control negativo
Para realizar las diluiciones se requiere:

-Subir y bajar 3 veces con la pipeta para mezclar el suero
-Tomar 100microlitros del pozo H y pasarlos al pozo G
-Mezclar y pasar 100microlitros al pozo F se continua de la misma forma hasta llegar al pozo A.
Después de mezclar se descartan 100microlitros de este último para igualar el volumen.
PUNTA DIFERENTE PARA CADA MUESTRA
Agitar el antígeno y diluir con SSI (diluir 1:10)

Mezclar y colocar 100microlitros de esta suspensión a todos los pozos
Cubrir la placa para evitar desecación e incubar a 37 C de 20-24 hrs.
Leer la placa y anotar el resultado en la Bitácora de serologia CAL-13-A
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TRANSPLANTE DE MEDULA OSEA

CITOMEGALOVIRUS
VIDAS CMV IgG (CMVG)
Diagnostico in vitro
Determinación inmunoenzimàtica de IgG anticitomegalovirus (CMVG) en suero humano
por tècnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación)
El citomegalovirus forma parte de la familia de los herpes virus.

Causa patologías graves tanto en niños como en adultos.
Puede persistir durante años en la persona infectada
Es causante de infecciones recurrentes
Se puede transmitir a otros individuos.
Existen casos de entre un 60 – 85% de la población infectada, la mayoría se tratan de

casos asintomáticos.
Entre el 1 -3% de los casos se da en mujeres embarazadas y en 1 caso de cada 2 la

infecciòn se transmite al feto, siendo una infección asintomático.
En 5% de los casos puede tener consecuencias graves como:
Hepato especnomegália
Hidrocefalia
Micromegalia
Partos prematuros.
La muerte del feto es frecuente.
En infecciones asintomáticas el 10% de los niños presentan secuelas neurosensoriales

tales como:
Sordera
Ceguera parcial o total.
Pude causar infecciones severas en personas inmunodeprimidas (infectadas por VIH o

transplantados).
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VIDAS CMV IgG es una tecnica automatizada que permite medir cuantitativamente las
IgG anti CMV en suero humano. El principio de determinación asocia el método
inmunoenzimático a una lectura final en fluorescencia (ELFA).
La identificación del la prueba, el número de lote y la fecha de caducidad están indicadas

sobre el cartucho en un código de barras.
La identificación de la prueba, el número de lote, los parámetros de calibración y el título

del calibrador, están indicados claramente y contenidos en un código de barras de la
ficha de especificaciones adjuntas al equipo.
Precauciones:

Dejar reactivos a temperatura ambiente 30 min. antes de su empleo.
Comprobar que el deshidratante contenido en la bolsa de los conos no cambia de color
(pasa de azul al rosa).
Homogenizar el cartucho con los calibradores, controles y muestras para una mejor
reproducibilidad de los resultados.
Utilizar guantes de látex de uso único sin talco.
MUESTRA:
Suero:
No descomplementados
No hemolizados
No contaminados
Se conservan 5 días a 2-8C, congelar a -20C. No congelar y descongelar

sucesivamente.
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CALIBRACION
Se efectua mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada

CONTROL DE CALIDAD

estos controles. Si los valores obtenidos de los controles se desvían de los valores
esperados, los resultados no pueden validarse.
La técnica se puede observar al final del procedimiento.
RESULTADOS
Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente y las

concentraciones en IgG anti CMV del suero o controles son calculados por el equipo.
Los resultados son expresados en Ua/ml respecto a una curva de calibración
memorizada en el equipo.
Umbral e interpretación de los resultados
Valor (Ua/ml) Interpretación

Menor a 4 Negativo
Mayor o igual a 4 pero menor a
6 Dudoso
Mayor o igual a 6 Positivo
Para valores entre 4 y 6, repetir la prueba.
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RESULTADOS FUERA DE LA CURVA
Las muestras con resultado mayor de 400 Ua/ml pueden ser diluidas al ¼ en suero
fisiológico. Multiplicar el resultado por el factor de dilución para obtener el título de la
muestra. Solo diluir las muestras cuyo título puro sea mayor a 400 Ua/ml.
VALOR CRITICO
Determina un aumento significativo del nivel de anticuerpos, equivalente a un aumento

de 4 veces el título de anticuerpos. Este aumento indica que existe una infección activa,
y se calcula como sigue:
Valor crítico: Muestra convaleciente Ua/ml / muestra aguda Ua/ml
Valor Crítico Interpertación

Sin cambio significativo del nivel de
Menor a 2
anticuerpos.
Valor crítico evocador de un aumento de
anticuerpos. Una muestra suplementaria
De 2 a 4 deberá ser extraída y analizada entre 7 y 14
días, y reestudiado con la primera para
recalcular el valor crítico.
Aumento del nivel de anticuerpos muy
Mayor a 4
significativo.
Se recomienda repetir las muestras agudas y convalecientes en la misma lista de trabajo

del VIDAS.
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VIDAS CMV IgM (CMVM)
Pra esta prueba no es recomendable utilizar plasma.
Determinación cualitativa inmunoenzimática de IgM anti-citomegalovirus (CMVM) en
suero humano por técnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación)
El citomegalovirus forma parte de la familia de los herpes virus.

Causa patologías graves tanto en niños como en adultos.
Puede persistir durante años en la persona infectada
Es causante de infecciones recurrentes
Se puede transmitir a otros individuos.
Existen casos de entre un 60 – 85% de la población infectada, la mayoría se tratan de

casos asintomáticos.
Entre el 1 -3% de los casos se da en mujeres embarazadas y en 1 caso de cada 2 la

infecciòn se transmite al feto, siendo una infección asintomático.
En 5% de los casos puede tener consecuencias graves como:
Hepato-esplenomegalia
Hidrocefalia
Micromegalia
Partos prematuros.
La muerte del feto es frecuente.
En infecciones asintomáticas el 10% de los niños presentan secuelas neurosensoriales

tales como:
Sordera o ceguera parcial o total.
Pude causar infecciones severas en personas inmunodeprimidas ( infectados por VIH o

transplantados).
La detección de las I g M anti- CMV puede ser útil en el diagnóstico de las infecciones
primarias recientes, particularmente en mujeres embarazadas.
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La detección de las IgM puede presentar resultados falsamente positivos debido al factor
reumatoide, y resultados falsamente negativos debido a la presencia de IgG. Problemas
que se evitan con la adsorción.
El principio de determinación asocia el método inmunoenzimático a una lectura final en

fluorescencia (ELFA).
Una vez adsorbidas las IgG y el factor reumatoide, la muestra es aspirada y expulsada
del interior del cono durante un tiempo determinado. Los anticuerpos IgM anti- CMV
presentes en la muestra van a fijarse en el antígeno CMV fijado en la pared interne del
cono. Las etapas de lavado eliminan los componentes no fijados.
Un anticuerpo monoclonal anti-IgM humano marcado con fosfatasa alcalina es aspirado

y expulsado dentro del cono y se va a fijar en las IgM anti- CMV humanas fijados en la
pared del cono. La etapa de lasvado elimina los componentes no fijados.
La etapa final de revelado, el substrato (4-metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y

después expulsado en el cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis
de este substrato en un producto (4-metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida es
medida a 450nm.

sobre el cartucho en un código de barras, el primer pocillo tiene una parte precortada
para facilitar la introducción de la muestra.
Precauciones:
No utilizar reactivos después de la fecha de caducidad.

No mezclar reactivos o consumibles de equipos diferentes.
Utilizar guantes de látex de uso único sin talco (puede provocar falsos).
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MUESTRA:
Suero:
No descomplementados
No hemolizados
No contaminados

sucesivamente.
No sueros lipémicos, bemolizados o contaminados.
CALIBRACION
Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada

CONTROL DE CALIDAD

estos controles.
Para que el aparato pueda verificar el valor de los controles, es necesario identificarlos
mediante C1 y C2.
Si los valores obtenidos del control positivo se desvían del intervalo de confianza
indicado en la etiqueta del frasco. Si el valor se desvía de los valores esperados, los
resultados no pueden validarse.
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RESULTADOS
Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente.

El equipo efectúa dos medidas de fluorescencia en la cubeta de lectura para cada
prueba:
La primera tiene en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta substrato antes
de ponerse en contacto el substrato con el cono.
La segunda se efectúa después de la incubación del substrato con la enzima
presente en el cono.
El cálculo del RFV es el resultado de la diferencia de las dos medidas. Aparece en la

hoja de resultados.
El índice i de la prueba es calculado por el instrumento (es la relación entre la señal

fluorescente encontrada para el suero a analizar con respecto a la señal memorizada del
estándar).
Indice Interpretación
Una i menor a 0,70 Negativo
Cuando i es menor o igual a 0,70 y pero menor a 0,90 Dudoso
Cuando i es mayor o igual a 0,90 Positivo
Para índices entre 0,70 y 0,90, repetir la prueba.

Si la verificación vuelve a dar dudosa, se repite el análisis sobre un nuevo suero tomado
entre 10 y 15 días más tarde.
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TOXOPLASMA
VIDAS TOXO IgG II (TXG)
Determinación cuantitativa inmunoenzimática de las IgG anti-toxoplásmaticas en suero
o plasma humano (anticoagulante permitido EDTA, heparina) por técnica ELFA (enzima
LINKED flourecente validación)
Ayuda a conocer el estado inmunitario.
El Toxoplasma gondii, es un protozoario, parásito intracelular obligatorio, es un patógeno

muy extendido en el hombre. Parásito cuyo huésped definitivo es el gato, se disemina en
la naturaleza e infecta a numerosos mamíferos.
Las afecciones en personas inmunocompetentes es discreto, pero las afecciones fetales

así como en inmunocomprometidos puede ser muy severa.
Mujeres O positivo antes de quedar embarazada, no transmiten el paràsito usualmente

el parásito a su hijo.
Mujeres O negativo, son susceptibles de ser infectadas en el curso del embarazo.
La transmisión al feto ocurre durante la fase aguda de la enfermedad.
La gravedad y frecuencia de la afectación fetal depende de:
Fecha de la infección materna
Virulencia de la cepa infectante
Importancia del inóculo
Calidad de la respuesta inmune de la madre.
El diagnóstico de la infección se basa en la exploración biológica: búsqueda de

inmunoglobulinas específicas (IgM e IgG).
El diagnóstico de una infección aguda adquirida durante el embarazo se realiza

poniendo de manifiesto una seroconversión, o por un aumento significativo del título de
anticuerpos detectados en dos muestras secuénciales testadas en paralelo.
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El principio de determinación asocia el método inmunoenzimático sándwich en dos

etapas con una lectura final en fluorescencia (ELFA).
Todas las etapas de la reacción están controladas y son realizadas por el sistema.
En a primera etapa la muestra se diluye, se aspira y expulsa del interior del cono
durante un tiempo determinado. Los anticuerpos anti-T. gondii IgG presentes en la
muestra van a fijarse en los antígenos de T. gondii fijado en el interior del cono. Las
etapas de lavado eliminan los componentes no fijados.
Las IgG de ratón monoclonales anti-IgG humanas conjugadas con fosfatasa alcalina son
expulsadas y aspiradoas del interior del cono y se van a fijar en las IgG humanas fijados
en la pared interna del cono.
La etapa final de revelado, el substrato (4-metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y

después expulsado en el cono; la enzima del conjugado cataliza la reacción de hidrólisis
de este substrato en un producto (4-metil-umbeliferona) cuya fluorescencia emitida es
medida a 450nm. Proporcional a la concentración de anticuerpos presentes en la
muestra.
El cono esta sensibilizado con antìgeno toxoplásmatico de membrana y citoplásmico,

cada cono está identificado por el código TXG. Se utilizan solo los conos necesarios y
se deje el resto en la bolsa.

sobre el cartucho en un código de barras, el primer pocillo tiene una parte precortada
para facilitar la introducción de la muestra. El último pocillo es una cubeta que permite la
lectura por fluorimetría. Los pocillos intermedios contienen los diferentes reactivos
necesarios para el análisis.
Precauciones:
No usar reactivos después de la fecha de caducidad.

No mezclar reactivos o consumibles de lotes diferentes.
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Manejar cada reactivo con sumo cuidado.
Homogenizar el cartucho con los calibradores, controles y muestras para una mejor
reproducibilidad de los resultados.
MUESTRA:
Suero o plasma (EDTA, heparina)

No hemolizados
No contaminados

sucesivamente.
CALIBRACION
Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo, se efectúa a la llegada de cada

CONTROL DE CALIDAD

RESULTADOS
Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente. El equipo

realiza dos lecturas de fluorescencia en la cubeta óptica para cada prueba. La primera
toma en cuenta el ruido de fondo debido a la cubeta y al substrato. La segunda lectura
se realiza después de la incubación del substrato en el cono. El cálculo de RFV es el
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resultado de la diferencia entre ambas lecturas y aparece en la hoja de resultados, se

interpretan en Ul / ml.
Título (Ul/ml) Interpretación

Menor a 4 Negativo
Mayor o igual a 4 pero menor a 8 Dudoso
Mayor o igual a 8 Positivo
RESULTADOS FUERA DE LA CURVA
Las muestras con resultado mayor de 300 Ul/ml pueden ser diluidas al ¼ en el control
negativo.
Si el factor de dilución no se ha indicado en la lista de trabajo, multiplicar el resultado por
el factor de dilución para obtener la concentración de la muestra.
VIDAS TOXO IgM (TXM)
Determinación inmunoenzimática de las IgM anti-toxoplásmaticas en suero humano por

técnica ELFA (enzima LINKED flourecente validación). Tras la inmunocaptura de las
IgM del suero, las IgM antitoxoplásmaticas se detectan específicamente gracias a un
inmunocomplejo marcado con fosfatasa alcalina.
Ayuda a conocer el estado inmunitario.
Los reactivos se conservan a 2-8 C y su fecha de caducidad esta indicada en el envase.
Precauciones:
No usar reactivos después de la fecha de caducidad.

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Los reactivos después de ser utilizados deben ser correctamente eliminados.
Manejar cada reactivo con sumo cuidado y desecharlos adecuadamente.
MUESTRA:
Suero
No hemolizados
No contaminados
sucesivamente.
CALIBRACION
Se efectúa mediante el estándar incluido en el equipo , se efectúa a la llegada de cada

CONTROL DE CALIDAD

RESULTADOS
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Los resultados de la prueba los analiza el mismo equipo automáticamente y el l índice i

de la prueba es calculado por el instrumento (es la relación entre la señal fluorescente
encontrada para el suero a analizar con respecto a la señal memorizada del estándar).
Indice Interpretación
Una i menor a 0,55 Negativo
Cuando i es menor o igual a 0,55 pero menor a 0,65 Dudoso
Cuando i es mayor o igual a 0,65 Positivo
Para índices entre 0,55 y 0,65, repetir la prueba.

Si la verificación vuelve a dar dudosa, se repite el análisis sobre un nuevo suero tomado.
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El equipo Mini VIDAS se enciende con el interruptor que se encuentra en la parte de abajo en la zona de en medio a un lado del cable de
conexión
Mini VIDAS BOOT R1.13

MES DIA AÑO HORA: MINUTOS: SEG
1992 bioMerieox Vitek, Inc.
All Rights Reserved
Booting …………..
Initializing
Please wait ……..
Se puede introducir el cartucho en cualquiera

de los RAP de muestra A y B
Se introduce el cartucho para que la zona con

el punto verde se siga viendo.
Inicializar sección ………………….

Pantalla de estado …………………
Menú de calibración ………………..
Menú de resultados ………………..
Menú de utilidades …………………
Error codigo de barras: #

Hora: día/mes/año
Atención: Estandar de Prueba
# caducidad
Reporta cada estandar caducado

Cuando se introduce un kit nuevo en la

charola
Dar click en Menú de calibración……...
Lectura del lote ………………….

Introd. Manual del lote patrón …
Introd. Hoja manual TOS …..…..
Lista de standares memorizado.
Lista de lote patrón …………,…
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Seleccionar
Lista de standards memorizados……..
Se observa en la pantalla la prueba a realizar
TXG…………
TXM ………..
HIV4 ……….
Buscando estandares
Nombre de la Prueba
Lote: #
HR.: MIN.: SEG DIA/MES/AÑO
Caducidad : HR:MIN:SEG DIA/MES/AÑO
# : #
BORRAR……...
Como es un Kit nuevo se introduce la

información

Seleccionar Lectura del lote ……………...
Sección A …………..
Sección B …….…….
Se pone la tarjeta de codigo de barras en la

charola y se introduce en A o en B
Por favor, espere ……….
Si algun codigo de barras esta dañado manda

el siguiente mensaje
Error codigo de barras: #

Hora: HR: MIN: SEG DIA/MES/AÑO
Datos tarjeta MLE
incorrectos
Seleccionar
Introd. Manual del lote patrón……...
Lectura automática
1/16| BORRAR……….
DEFECTUOSO O # DE CODIGO DE
BARRAS
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A B C …………..Z +
Se debe verificar todos para ver cual es que

esta mal
Cuando llego al 16 / 16 se da un regreso de

pantalla
Datos de lote incorrectos

¿ Editar de nuevo?
SI ……….
NO ……….
Seleccionar SI ……….
Se observa la siguiente pantalla

Dar un regreso de pantalla a la principal

Seleccionar Pantalla de estado ………..
A Disponible …………………..
B Disponible …………………..
Visualizar temp………….
Seleccionar
Temperatura
Bandeja Conos
A: # #
B: # #
Imprimir …………….
A Disponible …………………..
B Disponible …………………..
A o B en la charola que se desea trabajar
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Sección A
1
2
3
# de cartuchos que puedes utilizar
COMENZANDO ………….
Selecciono el # 1
Posición A1
S ……….……
C……….…….
Test ……….…
Dilución …..…
ID Muestra ....
Se S ………… Se tienen 2 standares
Introducir el número de estándar (1-4)
Seleccionar el # 1
Posición A1
S1 S ……….……
C……….…….
Test ……….…
Dilución …..…
ID Muestra ....
Seleccionar Test …………...
Programas a utilizar
CH2
CHB
CDA2
CDB
Para seleccionarla moverte con las fechas
Seleccionar el que se va a utilizar
Por favor, esperar
Posición A1
S1 Programa utilizado S……...……...

C……….…….
Test ……….…
Dilución …..…
ID Muestra ....
Paso a la siguiente posición
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Seleccionar C ……..
e introducir # controles
Selecciono ID Muestra ……………….
Posición # ID
Nombre completo Borrar ….……

…….…….
A Z M1 ……….…
M2…...…….
Moverse con las flechas

No da espacios
Cuando ya no se desea colocar otra muestra

se busca el simbolo de pantalla siguiente
Por favor, esperar
Seleccionar Test …………...
Seleccionar Borrar …………...
Borar configuración de la posición………

Borar configuración de la sección……...
Seleccionar
Borar configuración de la posición……...
Posición A #
S1 Programa utilizado S……...……...

C……….…….
Test ……….…
Dilución …..…
ID Muestra ....
Se observa lo que se programo:
Sección A
1 Nombre de la Prueba S1
2 Nombre de la Prueba S2
3 Control C1
4 Control C2
Nombre completo del donador o paciente
COMENZANDO …………...
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Los frascos de los reactivos
VIDAS HIV DUO

C1 Control +
VIDAS HIV DUO

C2 Control -
VIDAS HIV DUO

S1 Estandar
Agitar en el vortex
Adicionar 100microlitros del reactivo

correspondiente y colocar el cartucho en el
orificio que tiene suero o plasma, cerrar la
puerta A o B. Presionar
COMENZANDO…………….
Aparece en la pantalla lo siguiente:
ID Técnico
1:
2:
3:
Seleccionar el # corresspondiente al nombre

del Químico que esta realizando la prueba
Código de barras…………
Disponible ………………..
Visualizar temperatura …...
Comenzando …………
RUN …………
INICIAR EL PROCESO
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VIRUS DE EPSTEIN BAAR
VIRONOSTIKA EBV VCA IgM e IgG
Es un enzimoinmunoensayo ELISA para la determinación cualitativa y semicuantitativa

de anticuerpos IgM o IgG frente al Antígeno de la Cápside del Virus Epstein Barr en
suero o plasma humano. Esta indicado como ayuda en el diagnóstico de infección por
EBV primaria o reactivada.
El virus Epstein Barr es el agente etiológico de la mononucleosis infecciosa (MI) e

interviene en el linfoma de Burkitt y en el carcinoma nasofaríngeo.
El péptido p18 VCA, una proteína marcadora específica del VCA recién definida única
del EBV, se utiliza en el Vironostika EBV VCA IgM junto con un anticuerpo monoclonal
específico de p18 VCA como conjugado. Péptido formado po 56 aminoácidos
codificados por la secuencia de inicio de lectura BRRF3. Para IgG se utiliza anti-IgG
humana de cabra como conjugado. Péptido, bien caracterizado, está formado por 56
amonoácidos codificados por la secuencia de inicio de lectura BRRF3.
En IgM la técnica se fundamenta en el principio de captura de anticuerpos, los pocillos

se hallan recubiertos de anticuerpo monoclonal contra IgM humano que constituye la
fase sólida. En IgG la técnica se fundamenta en el principio de sándwich, los pocillos se
hallan recubiertos con péptidos sintéticos p18 EBV VCA que constituye la fase sólida.
RESULTADOS CUALITATIVOS
IgM
Los cálculos deben efectuarse por separado para cada soporte de tiras.
Validez de la prueba
Abreviaturas:
Cal I: Absorbancia del calibrador I
Cal II: Absorbancia del calibrador II
Cal IV: Absorbancia del calibrador IV
1. Cal I debe ser menor a 0,300

2. Determinar el valor medio de Cal II (Cal IIx)
Cal II debe ser mayor o igual a 0,75 Cal IIx menor o igual y 1,25 Cal IIx
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Si un (máximo de un ) replicado de Cal II no cumple esta condición, eliminar el

más externo, y volver a calcular Cal IIx para la calificación de los replicados Cal II
restantes.
3. Cal IV - Cal IIx debe ser mayor a 0,600.
Un ensayo es válido si se cumplen los criterio indicados anteriormente.
Valor cutoff
Si el ensayo es válido, el valor del cuoff= Cal IIx.
RESULTADOS
Una muestra es reactiva para anticuerpos IgM contra EBV VCA si la absorbancia de
la muestra es mayor o igual del valor del cutoff.
Una muestra es no reactiva para anticuerpos IgM contra EBV VCA si la absorbancia
es menor del valor del cutoff.
IgG
Los cálculos deben efectuarse por separado para cada soporte de tiras.
Validez de la prueba
Abreviaturas:
Cal I: Absorbancia del calibrador I
Cal II: Absorbancia del calibrador II
Cal IV: Absorbancia del calibrador IV
1. Cal II debe ser menor a 0,250

2. Determinar el valor medio de Cal II (Cal IIx)
Cal II debe ser mayor o igual a 0,75 Cal IIx menor o igual y 1,25 Cal IIx
Si un (máximo de un ) replicado de Cal II no cumple esta condición, eliminar el
más externo, y volver a calcular Cal IIx para la calificación de los replicados Cal II
restantes.
3. Cal IV - Cal IIx debe ser mayor a 0,750.
Un ensayo es válido si se cumplen los criterio indicados anteriormente.
Valor cutoff
Si el ensayo es válido, el valor del cuoff= Cal IIx.
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RESULTADOS
Una muestra es reactiva para anticuerpos IgG contra EBV VCA si la absorbancia de
la muestra es mayor o igual del valor del cutoff.
Una muestra es no reactiva para anticuerpos IgG contra EBV VCA si la absorbancia
es menor del valor del cutoff.
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El Técnico de Serologia escribe en la bitácora para análisis manual CAL-26-A el orden en que se pondran las muestras, calibradores (los
pocillos no se pueden marcar ) y los datos que requiera la bitacora para la correcta identificación del análisis.
análisis ( la muestra puede ser plasma o suero). Se realiza una dilución 1:101 en un tubo previamente marcado (1ml del diluyente de
muestras +10microlitros de la muestra) se homogeniza con la misma punta y la deja la punta dentro del tubo
De la placa e deja la primera tira para puros controles y empezando con la segunda tira se coloca 100microlitros simultaneamente en la placa
para IgM y en la de IgG de la dilución de la muestra.
Se corrobora que los reactivos para las IgG e IgM estan bien identificados y se procede a colocarlos en los respectivos pocillos
Coloco en los pocillo 100microlitros de cada CALIBRADOR Coloco en los pocillo 100microlitros de cada CALIBRADOR
para IgM que contienen: para IgG que contienen:
CALIBRADOR 1: 5 U CALIBRADOR 1: 10 U
CALIBRADOR 2: 20 U CALIBRADOR 2: 20 U
CALIBRADOR 3: 80U CALIBRADOR 3: 110U
CALIBRADOR 4: 140U CALIBRADOR 4: 170U
POR DUPLICADO CADA CALIBRADOR POR DUPLICADO CADA CALIBRADOR
EJEMPLO:
POCILLO 1 y 2 CALIBRADOR 1
(por eso se deja una linea para calibradores)
Tapo las placas con cinta ahesiva y se pone a incubar durante 1 hr. a 37 C
Prepara una solución Buffer de fostatos 1:25 (480ml de agua destilada + 20ml de Buffer de fostatos) y con ella realizo el lavado.
Lavo con el LP 35 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR (Programa 5 con 4 cliclos)
CONJUGADO PARA IgM

El conjugado que se va aprepar a continuación requiere como minimo
CONJUGADO PARA IgG
10 min para su preparación por lo que se debe ´prepara con
anterioridad para que se encusntre homogenizado a la hora de
PREPARACION DEL CONJUGADO:
colocar en los pocillos.
Para dos tiras aproximadamente
PREPARACION DEL CONJUGADO:
Se toman 2.5ml de diluyente de conjugado y se mezcla con
En el frasco que contiene la solución de reconstituyente de conjugado
50microlitros de conjugado, y se homegeniza y se agregan
adiciono 5ml de la solución reconstituyente de conjugado y pongo a
100microlitros de conjugado
agitar hasta que se encuentra homogeo. Cuando se encuentra
totalmente resuspendido se agregan 100microlitros de conjugado.
Tapo las placas con cinta ahesiva y se pone a incubar durante 1 hr. a 37 C
Lavo con el LP 35 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR (Programa 5 con 4 cliclos)
Se adicionan 100microlitros de TMB y se deja a temperatura de entre 18-.22 C durante 30 min. y se para la reacción con 200microlitros de
solución de acido sulfurico 1N
Una hora despues se realiza la lectura aen el LP 400 SANOFI DIAGNOSTICS PASTEUR a 450nm
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EQUIPO MINI VIDAS
Se utiliza para realizar las siguientes pruebas:
Elisa de 4ta Generación, detecta Ag p24 y Ac HIV-1/2

En paciente con T.M.O. para Citomegalovirus y Toxoplasmosis.
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SANOFI DIAGNOSTICS PATEUR LP 35
El equipo SANOFI DIAGNOSTICS PATEUR LP 35 se enciende con el interruptor que se encuentra en la
El equipo tiene 3 botes: 1. Solución de lavado, 2. Agua destilada y 3. Desechos
Primero se realiza el mantenimiento:
En la pantalla se observa los siguiente:
WASH? N/
WASH PARM?
RIUSE? Y/
WASH?
W/TEST NUM:01?
Y/
WASH?
W/CYCLES NUM: 04?
Y/
WASH?
W/STRIPS NUM:04?
Y/
WO1/ CYC:4/ST:04?
Y/
Se cambian las mangueras a la solución de lavado
Lavado de la muestra
WASH?
W/TEST NUM:01?
Y/
WASH?
W/CYCLES NUM: 05?
Y/
WASH?
W/STRIPS NUM:04?
Y/
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ESPECTROFOTOMETRO SANOFI PASTEUR LP 400

El Equipo SANOFI PASTEUR LP 400 se enciende con el interruptor que se encuentra en la parte del frente del
equipo e inmediatamente checa los filtros.
En la pantalla se observa los siguiente:
SELF TEST REPORT

ENTER
LP 400
(FAST) (START) (DATA) (ASSAY) (SETUP)
Colocar la placa y presionar (DATA)
DATA: SELECT DATA MANIP. FUNTION

(IDENT) (LIST) (RECALC) ( DIR) (CLEAR)
Presinar (IDENT)
DATA/IDENT: ENTER ID KEYS/BARCODE

PLATE ID:
Se escribe la fecha como identificación y se presiona

(ENTER)
DATA/IDENT: SELECT ASSAY (NUM/CURSOS)

ASSAY NR:
Presionar el # asignado a la prueba que desea realizar

que va del 1 al 7
Se observa en la pantalla # - Prueba seleccionada

presionar (ENTER)
DATA/IDENT: ENTER ID KEYS/BARCODE

FIRST SAMPLE ID:
Seleccionar el # 1 y presionar (ENTER)
DATA/IDENT: TOTAL NUMBER OF SAMPLES

n:
Seleccionar el # de pocillos que desea que se lean

(sin contar blanco, controles internos y externos),
Teclear el # y dar un (ENTER)
DATA/IDENT: INCREMENT FOR SAMPLE ID

I=
# DE
Seleccionar el # 1 y presionar (ENTER)
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IDENTIFICACION
# SAMPLES PUT ON 1 PLATE (S)
Presionar (ENTER)
LP 400
(FAST) (START) (DATA) (ASSAY) (SETUP)
Presionar (START)
START: SELECT PLATE W/ CURSOR

Nr. 1-ID: Fecha que puse como identificación -
identified
Presionar (ENTER)
START: PRINTOUT INMEDIATELY?

(YES) (NO)
Presionar (YES)
MEASURING
450 620
PRINTING
ASSAY # (# de prueba)
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Incubadora ABBOTT COMMANDER
La incubadora ABBOTT COMMANDER se enciende con el interruptor que se encuentra en la

parte de atras del equipo
Se presiona el botón que indica la temperatura que se desea y se observa que aparece en la pantalla
Se indica en cual carril se pondra el soporte que contiene la prueba y se presiona el #
La pantalla se pone en ceros para que se especifique el tiempo a los que desea suene la alarma
Una vez que se introduce la prueba se presiona el # de carril donde se metio y empieza a correr el tiempo
Una vez que pasa el tiempo especificado suena la alarma y se puede sacar la placa introducida
La bitácora de Resultados de Serologia CAL-13-A debido a su tamaño no se muestra

dentro de este procedimiento.
La bitácora de Resultados de Serologia CAL-13-A se llena de la siguiente manera:
Fecha: Día, mes y año en que se realizó la toma de

muestra.
No.: Número asignado en toma de muestra.
Disponente: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s) del

donador.
Para la valoración de los siguientes datos se toma en cuenta las especificaciones

que se encuentran en la NOM-003-SSA2-1993.
Hematología
Hto: Hematocrito el valor es obtenido del equipo Sysmex.
Hb: Hemoglobina el valor es obtenido del equipo
Sysmex.
Leu: Leucocitos el valor es obtenido del equipo Sysmex.
Plq: Plaquetas el valor es obtenido del equipo Sysmex.
Prot: Se deja el espacio vació.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Sistema ABO
Se especifica en el recuadro correspondiente la letra(s) del grupo sanguíneo o se

palomea.
A, B, AB, O: Tipos de Grupo sanguíneo del Sistema A,B,O del

donador .
A1, H: Subgrupos sanguíneos de A cuando el donador
es del grupo sanguíneo A.
(Ver procedimiento CAL- 25)
Se especifica en el recuadro correspondiente la palabra del factor sanguíneo o se

palomea.
Pos. Factor sanguíneo positivo.

Neg. Factor sanguíneo negativo. Cuando el Rh es negativo
se realiza la confirmación en el sistema DianaGel anti-
D (Ver procedimiento CAL- 25)
D Se especifica si es negativo (-) o positivo (+) .
Los siguientes datos se toman del formato F-A-14-23:
D, C, E, e, c: Se realizan por medio del sistema DianaGel anti-D

(Ver procedimiento CAL-25), los resultados de la
lectura del fenotipo se reportan como positivo(+) o
negativo (-) en el cuadro correspondiente.
SRr La resultados de la lectura del fenotipo se lee en
CAL-13-B.
RASTREO DE Abi FSABO
Este análisis se realiza a:

Todas las mujeres donadoras.
Personas politransfundidas.
Como rutina el análisis se realiza con el REAGENT RED BLOOD CELLS FOR
ANTIBODY DETECTION
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Post. Cuando el análisis de rutina es positivo se debe de

realizar una prueba más especifica con los reactivos
que son surtidos por el Banco de Sangre del Instituto
Mexicano del Seguro Social (presenta fecha de
caducidad). Para resultados positivos se palomea el
cuadro o se escribe la palabra positivo y se
establece la especie del mismo
(Ver procedimiento CAL- 25)
Negt. Cuando el análisis de rutina es negativo se palomea
el cuadro o se escribe la palabra negativo
(Ver procedimiento CAL- 25).
Ab Se deja el espacio vació.
HEMOLISINAS
Este análisis se realiza solo a Personas con grupo sanguíneo O (Ver Procedimiento
CAL- 25)
Negt. Se palomea el cuadro cuando es negativo.

Post. Se palomea el cuadro cuando es positivo.
SEROLOGIA BASICA
Las Pruebas serólogicas siguientes son realizadas a todas las muestras de los
donadores y son reportan como:
Reactiva Se sella con esta leyenda cuando se considera que el análisis de la

muestra presenta una probable infección. Se realiza la Prueba confirmatoria con
la 1era muestra y una ELISA con la segunda muestra
Negativo Se sella con esta leyenda cuando no presenta la enfermedad (Ver
procedimiento CAL- 26).
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Serologia básica:
VIH Detecta la presencia de anticuerpos contra el virus de Síndrome de

Inmunodeficiencia Adquirida.
AgsHB Detecta la presencia del Antígeno de superficie de la
Hepatitis B.
HCV Detecta el anticuerpo para la Hepatitis C.
BRUCELLA Detecta el anticuerpo para la Brucella.
V.D.R.L. Detecta el anticuerpo contra el Treponema pallidum.
CHAGAS Detecta el anticuerpo contra el Tripanosoma cruzi.
Diferentes técnicas para realizar la detección:
HAI
ELISA
Los siguientes análisis se realizan en los siguientes casos:
Pacientes en tratamiento de medula ósea.

Pacientes o donadores con solicitud de Médica.
CMV Citomegalovirus
IgM Inmunoglobulina M
IgG Inmunoglobulina G
TOXO Toxoplasma
EVB Virus Eimtein Barr

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Pruebas confirmatorias:
WB I Para detectar anticuerpos para H.I.V.1

WB II Para detectar anticuerpos para H.I.V.2
RIB Para detectar anticuerpos para H.C.V.
CONFIRMATORIAS
NEUTRALIZACIÓN Prueba confirmatoria para Hepatitis B.

Ag BLANCO Prueba confirmatoria para Brucella
MERCAP Prueba confirmatoria para Chagas
TP/PA Prueba confirmatoria para Sifilis
PBS. ESPECIALES
Citometría Pruebas especificas de Control de calidad.
CD34 Pruebas especificas de Control de calidad
Carga viral Pruebas especificas de Control de calidad.
OBSERVACIONES: Para escribir más información sobre el análisis de la muestra.

REALIZO: Escribir la rubrica o poner el sello de las personas que llena la bitácora.
Al finalizar el llenado de la bitácora el personal de Serología debe incluir el siguiente

sello con la información que se le solicita para cada Enfermedad que fue analizada.
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REGISTROS
La Bitácora de resultados de Serologia CAL-13-A se guarda durante 1 año en

archivo activo y 1 año en archivo muerto.
Laboratorista: ____________________________________
Laboratorista: ____________________________________
Laboratorista: ____________________________________
Suplentes: ____________________________________
Suplentes: ____________________________________
Suplentes: ____________________________________
CAL-02-B
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Procedimiento de almacenamiento de los
productos obtenidos de la Sangre Total
CAL-02-B
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Ninguno 0 15/08/03
CAL-02-B
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Una vez que se ha llevado a cabo el fraccionamiento de la muestra (Ver

procedimiento CAL-21) y etiquetado se requiere guardar cada uno de los
productos de la siguiente manera para su adecuada conservación:
TEMPERATURA
PRODUCTO DE
CONSERVACION
Concentrado de Eritrocitos +1 a +6 C
Concentrado de Eritrocitos leucorreducido prealmacenamiento +1 a +6 C
Concentrado de Eritrocitos lavados (con solución salina al 0.9%) +1 a +6 C
Concentrado de Plaquetas +20 a +24 C*
Plasma fresco -18 C o menor **
Plasma envejecido -18 C o menor **
Crioprecipitado -18 C o menor **
Es recomendable irradiar las unidades de sangre y componentes sanguíneos

celulares, con una dosis mínima de 1,500 cGy (1,500 rads) para reducir el riesgo
de enfermedades injerto contra huésped, en los receptores que se encuentren en
los casos siguientes:
a) Fetos receptores de transfusiones intrauterinas;

b) Exsanguineotransfusión en prematuros y en recién nacidos de peso
corporal inferior a 1,000g;
c) Pacientes seleccionados inmunocomprometidos;
d) Receptores que han sido sometidos a trasplante de médula ósea;
e) Receptores de unidades provenientes de familiares consanguíneos de
primer grado.
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La sangre o componentes celulares irradiados puede ser aplicados a receptores

inmunológicamente normales. Los CE irradiados después de 5 días se deben de
lavar.
La temperatura de los refrigeradores, congeladores e incubadoras que almacenan

sangre, componentes sanguíneos, muestras o reactivos, se deberán registrar
cuando menos cada ocho horas, aunque tengan graficador automático y un
sistema de alarma audible. Los equipos sin indicador de temperatura, deberán
tener en su interior un termómetro, en caso de refrigeradores y de utilizarse
termómetros de laboratorio, el bulbo de éste deberá estar sumergido en glicerina
al 10% y, tratándose de congeladores, en glicerina al 50%.
La vigencia máxima del Concentrado de Eritrocitos y Concentrado de Eritrocitos

pobre en leucocitos a partir de la recolección depende del sistema y del
anticoagulante:
Para sistemas cerrados son:
ANTICOAGULANTE VIGENCIA MAXIMA

Heparina 2 días
ACD 21 días
CPD 21 días
CPDA-1 35 días
ACD-SAGMANITOL 42 días
CPDA-MANITOL 45 días
Para sistemas abiertos, bajo condiciones de esterilidad (dentro de la campana

de flujo laminar), la vigencia máxima será de 24 hrs conservándose entre +1 y
+6 C y de 4hrs. si se conserva entre +20 y +24 C (Las unidades que se
conservan en congelación mantienen el periodo de vigencia según el
producto):
La vigencia máxima del Concentrado de Eritrocitos lavados a partir de la

recolección es de 4 hrs, a partir de su preparación.
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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Las plaquetas por fraccionamiento y por Aféresis podrán conservarse durante 5

días a +20 y +24 C y agitación constante.
El Plasma Fresco Congelado, el Plasma sin Factor tiene una duración de 1 año
a –35° C
El Plasma envejecido tiene una duración de 1 años a –18 C y entre +1 y +6 C

de 26 días (con ACD o con CPD); 40 días (con CPDA ) 12 meses.
El Plasma fresco tiene una duración de 12 hrs, una vez descongelado.
El Crioprecipitado a –18 C o menor tiene una duración de 1 año y de 6 hrs,

una vez descongelado.
**El factor VIII de la coagulación que contiene el crioprecipitado se preserva

mejor cuando el plasma fresco y crioprecipitado se conservan a temperatura de
–30 C o menores.
Los productos se acomodan por grupo, y orden numérico, del menor al mayor, de
derecha a izquierda y del frente hacia atrás
REGISTROS
Los Registro de temperaturas se guardan durante 5 años en archivo activo y 5

años en archivo muerto.
Químico: __________________________
Químico: __________________________
Químico: __________________________
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Técnico laboratorista: __________________________
Auxiliar laboratorista: __________________________
Auxiliar laboratorista: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
CAL-02-B
CAL-02-B
Fecha: 26 JULIO 2006
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Procedimiento de recepción y entrega
de los productos en el laboratorio
1. Se modifica titulo del 0 15/08/03

procedimiento.
2.
CAL-02-B
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La solicitud y la entrega de los diferentes productos se realiza de la siguiente

manera:
El formato A-13-14-07 es llenado por el Médico tratante que solicita el producto y

se muestra a continuación:
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El formato A-13-14-07 es llenado por el Químico, Laboratorista, Técnico del

Laboratorio, (ocasionalmente el Médico) del Banco de Sangre que recibe, procesa
y asigna el producto solicitado:
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El formato M-3-0-21 es llenado por el Médico tratante que solicita el producto y se

muestra a continuación:
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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La bitácora CAL-28-A es llenada por el Médico tratante, enfermera, solicitante o

mensajero que pide el producto, por su tamaño no se muestra.
La bitácora CAL-28-B se llena de la siguiente manera:
Día, mes y año en que se realiza lo solicitado

Fecha:
# que se indica como Unidad en el paquete o # de
Registro de la unidad: frascos que se entregan.
Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del

Nombre del donador: donador.
Tipo de producto que se solicito (CP, CE, PFC,

Producto: Albúmina, Factor VIII y IX.
Tipo de sangre del donador (A, B, AB u O) y

Grupo sanguíneo: Factor Rh.
Cantidad en unidades o mililitros que contiene

Volumen que contiene
la bolsa
la bolsa del producto:
Personal del área de Inmunohematologia que
Quien realiza el estudio: realiza el estudio o la separación del producto, etc.
El resultado que dio la prueba de compatibilidad

Compatibilidad:
# consecutivo solicitud el producto.
# de entrada:
# que fue designado por la institución en su
Registro del paciente: credencial de afiliado.
Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del

Nombre del paciente: paciente
Tipo de sangre del donador (A, B, AB u O) y Factor

Rh.
Grupo sanguíneo:
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Área o servicio que solicito el producto.

Servicio al que pertenece:
# de cama donde se encuentra el paciente.
Cama:
Día, mes y año en que se egresa el producto.

Fecha:
Hora de egreso del producto.
Hora:
Cantidad que se le entrega de producto.
Volumen:
Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s),
clave o sello personal de la enfermera o mensajero
Nombre:
que recibe el producto.
Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s),

clave o sello personal del Laboratorista, Químico,
Nombre:
Técnico que entrega el producto.
# consecutivo de entrega el producto (con la letra

# de egreso: asignada según el turno).
REGISTROS
La bitácora CAL-28-A se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el

archivo muerto.
La bitácora CAL-28-B se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el

archivo muerto.
El formato A-13-14-07 se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el

archivo muerto.
El formato M-3-0-21 se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en el

archivo muerto.
CAL-02-B
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Químico: __________________________
Químico: __________________________
Químico: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Laboratorista: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
Suplentes: __________________________
CAL-02-B
Fecha: 10 junio 2011
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Procedimiento para valoración de venas y somatometría
Nombre: IRMA GUTIERREZ Nombre: DRA. MARGARITA Nombre: DRA. DINORA

LETICIA MEDINA MACIAS AGUILAR ESCOBAR
Fecha: 27 JUNIO 2011 Fecha: 27 JUNIO 2011 Fecha: 10 JUNIO 2011
CAL-02-B
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Se agrega el sistema informático de 1 10/06/2011

banco de sangre y el sistema Kanban
CAL-02-B
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Una vez que el donador ha sido registrado (Ver procedimiento CAL-20) se procede
de la siguiente manera
La Enfermera toma del Kanban ubicado en el área de recepción la
ficha de identificación del donador M-3-0-23 ó M-3-0-10-a (Historia
clínica en proceso manual) con número de control interno de
ingreso a recepción
De la ficha de identificación del donador M-3-0-23 observa el

nombre completo del candidato a donador, lo llama y le indica que
pase a la sala donde se le realizará la valoración de sus venas y
somatrometría
La enfermera solicita al candidato a donador se suba a la báscula

para tener su peso, pregunta su estatura o lo mide y los registra en
la parte inferior del formato M-3-0-23 ó M-3-0-10-a si es manual
Pide descubra y extienda ambos brazos para valorar sus venas e

indicar con una M el sitio de toma de muestra
si
¿El donador tiene mala
calidad de venas?
no
Pregunta y revisa si tiene algún dibujo, herida o tatuaje (menos de 1 año de

realizado) NOM 003-SSA2-1993
si
El donador presenta alguna
herida o tatuaje
no
Se toma temperatura tensión Arterial (TA), Frecuencia Respiratoria

(FR), Frecuencia Cardiaca (FC)
Se registran los resultados en la parte inferior de el formato M-3-0-10-a ó en la

Historia clínica M-3-0-10-b inciso L, cuando es proceso manual y firma de
responsable.
Observa si los valores se encuentran dentro de los límites establecidos

por la especificaciones indicada en la norma NOM-003-SSA2-1993,
ingresa estos datos al sistema informático de banco de sangre Se descarta al
candidato como
donador
no y se avisa a Trabajo
social y al Médico
Valores OK? para que le indique
la causa del
rechazo, el médico
la anota en ficha de
Identificación con
si formato M-3-0-23.
Deja en el Kanban del área de toma de muestras la ficha de

identificación con formato M-3-0-23, y la historia Clínica con
formato M-3-0-10 sólo en proceso manual, para continuar con la Médico pasa a
Valoración médica (Ver Procedimiento CAL-40) Trabajo social la
ficha de
Identificación con
formato M-3-0-23.
para que haga
evaluación social y/
o reprogramación
de cita
CAL-02-B
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La Ficha de Identificación del donante (M-0-3-0-23) en donde se registran los

datos de enfermería se encuentra en la parte inferior en donde dice uso exclusivo
de enfermería y se muestra a continuación:
CAL-02-B
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La ficha de identificación del donador (M-3-0-23) cuando el sistema es manual se

CAL-02-B
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Cuando el procedimiento es manual se registra en La Historia clínica de

candidatos a donación M-3-0-10-b inciso L) EXPLORACION FISICA y se muestra
a continuación.
CAL-02-B
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En el formato electrónico de historia clínica, se registran los datos de

somatometría por el personal de enfermería y se muestra a continuación:
El formato M-3-0-10-b se inciso L) EXPLORACION FISICA y el formato M-3-0-23

se llenan de la siguiente manera:
Peso: Cantidad en Kg que pesa el candidato a donar.

Talla: La estatura que indica el candidato.
FC: Frecuencia Cardiaca (Latidos por minuto) que presenta el
candidato.
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FR: Frecuencia Respiratoria (Respiraciones por minuto) que

presenta el candidato (puede tomar la mitad del tiempo y
calcularlo).
T/A: Tensión Arterial que presenta el candidato.
Temperatura: Temperatura que indica el termómetro colocado debajo del
brazo izquierdo del candidato
Nota: El formato M-3-0-23 debe estar lleno previamente por la recepcionista con
los datos generales y el consentimiento informado firmado por el donador
(Ver procedimiento CAL-20). En caso manual los candidatos a donar
llenarán la ficha de identificación y la recepcionista revisará que los datos
estén completos.
REGISTROS
M-3-0-23 Ficha de identificación del donante apto se debe almacenar en el archivo

activo durante 5 años y en el archivo muerto 5 años. (NOM-003-SSA2-1993).
Cuando es rechazado se almacena su registro por 3 meses (NOM-003-SSA2-
1993).
Sistema informático de banco de sangre.
CAL-02-B
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Se modifica el flujo grama del proceso 03 16 ENERO 2012

que se lleva a cabo en el Banco de
Sangre
CAL-02-B
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El Banco de sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo, la selección

de los candidatos a donación, y posteriormente el procesamiento de la sangre bajo los
estándares de calidad aplicables.
El flujo grama de la operación que se lleva a cabo es el siguiente:
CAL-02-B
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CITA PARA DONACIÓN (CAL-11)
REGISTRO de los donadores (CAL-

20)
VALORACIÓN DE VENAS Y
SOMATOMETRÍA ( CAL-30)
TOMA MUESTRA ( CAL-43)
VALORACIÓN MÉDICA (CAL-40)
EXTRACCIÓN DE EXTRACCIÓN DE EXTRACCIÓN DE

SANGRE, SANGRE, SANGRE,
(Flebotomía CAL-46) (Aféresis CAL-50) (RCSP CAL-52)
ENTREGA DE
COMPROBA
NTE
(CAL-31)
FRACCIONAMIENTO
(CAL-21)
LIBERACION: LIBERACION:
DETERMINACION DE DETERMINACION DE LIBERACION:
GRUPO SANGUINEO Y GRUPO SANGUINEO Y DETERMINACION DE GRUPO
ANTICUERPOS (CAL-25) ANTICUERPOS (CAL-25) SANGUINEO Y ANTICUERPOS
SEROLOGIA (CAL-26) SEROLOGIA (CAL-26) (CAL-25)
NAT (CAL-71) NAT (CAL-71) SEROLOGIA (CAL-26)
ALMACENAMIENTO ALMACENAMIENTO CUANTIFICACION Y

(CAL-27) (CAL-27) VIABILIDAD CELULAR
(CAL-66)
PRUEBAS DE CRIOPRESERVACION
COMPATIBILIDAD (CAL-31) (CAL-77)
ENTREGA DE PRODUCTOS
(CAL-28 )
CAL-02-B
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Para cada proceso del diagrama anterior, existen procedimientos documentados que
describen la forma de llevarlos a cabo (Ver lista maestra de documentos CAL-02-A)
REGISTROS
No existen registros asociados a este procedimiento
CAL-02-B
Fecha: 3 de Nov de 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de control de sangre recibida
de otros hospitales
CAL-02-B
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de otros hospitales
ninguno 03/11/03
00
CAL-02-B
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de otros hospitales
La trabajadora social ó el personal del laboratorio del Banco de Sangre del INP,
solicita vía telefónica a otro banco de sangre los hemocomponentes que se
necesiten de acuerdo a la valoración por el médico adscrito o el jefe del servicio.
Una vez que se consigue el apoyo de alguna institución, se elabora el formato

F-A-14-29 (original y 2 copias), y se solicita al Servicio de Ambulancias que traiga
los hemocomponentes.
El personal del Banco del INP (Inmunohematología) entrega un recipiente

adecuado para traslado de los hemocomponentes, así como el formato F-A-14-29
al personal de ambulancias.
El personal de ambulancias recoge los hemocomponentes en el banco de sangre

de la institución otorgante, entregando el original y copia del formato F-A-14-29,
el banco de sangre externo sella el acuse y entrega relación del producto o
productos solicitados con el certificado de serología negativa.
El personal del Banco de Sangre del INP recibe los hemocomponentes junto con
una copia del formato F-A-14-29 revisa que los hemocomponentes traigan todos
los datos requeridos como son:
 Nombre del donador

 Registro
 Grupo Rh
 Fecha de extracción
 Fecha de caducidad
 Volumen
 Evidencia de serología negativa
El personal del laboratorio verifica el estado físico del producto recibido para
determinar si éste se acepta o no (rechazando productos que no estén con una
temperatura adecuada de transportación, hemolizados, lipémicos, el volumen
debe corresponder al indicado en la etiqueta de la bolsa y debe traer una muestra
piloto para realizar las pruebas serológicas aplicables).
Si el producto cumple con los requisitos, se acepta, en caso contrario se regresa.

CAL-02-B
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de otros hospitales
En caso de aceptación se da ingreso en la Libreta de Ingresos y Egresos del

Banco de Sangre del INP registrando la serologia y se toma la muestra piloto para
realizar pruebas serológicas.
El formato F-A-14-29 se muestra a continuación, (La copia se entrega al personal
administrativo para que lo archive).
Instituto Nacional de Pediatría
Insurgentes Sur 3700-C
BANCO DE SANGRE
Solicitud de: PRODUCTOS SANGUINEOS
México, D.F., a ____de ______________ de ______.

Folio:____________
C. Dr. (a) __________________________.
Director o Jefe del Banco de Sangre Del
__________________________________
P R E S E N T E ,
Por este medio me permito solicitar a ustedes los siguientes productos:
O A B AB
POSITIVO
SANGRE TOTAL
NEGATIVO
POSITIVO
PAQUETE GLOBULAR
NEGATIVO
POSITIVO
PLASMA FRESCO CONGELADO
NEGATIVO
POSITIVO
PLASMA RICO EN PLAQUETAS
NEGATIVO
POSITIVO
CONCENTRADOS PLAQUETARIOS
NEGATIVO
POSITIVO
GLOBULINA ANTIHEMOFÍLICA
NEGATIVO
OTRAS SOLICITUDES:
Agradeciendo de antemano su atención, aprovecho este para enviarle un cordial

saludo.
A T E N T A M E N T E
JEFE DEL BANCO DE SANGRE
c.c.p. Banco de Sangre
F-A-14-29
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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de otros hospitales
REGISTROS
El formato F-A-14-29 se almacena por cinco años pasados los cuales se puede
desechar.
CAL-02-B
Fecha: 12 enero 2012
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Procedimiento de citas para donación
Nombre: LIC. TS ANA Nombre: DRA. MARGARITA Dra. DINORA AGUILAR

MARÍA DORANTES CEH LETICIA MEDINA MACÍAS ESCOBAR
Fecha: 12 Enero 2012 Fecha: 12 Enero 2012 Fecha: 12 Enero 2012
CAL-02-B
Página 12 de 10
1.- Se puntualizan los 3 tipos de cita. 05 12 Enero 2012
2.- Se modifica el tiempo de tolerancia

en las citas para donar sangre en
concordancia con el folleto.
3.- Se puntualizan algunas

excepciones de las personas que no
pueden donar que no incluye el folleto
CAL-02-B
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El Personal de Trabajo Social del Banco de sangre del Instituto Nacional de

Pediatría lleva a cabo el siguiente proceso para proporcionar una cita para
DONACION a las personas que lo soliciten en base a los siguientes lineamientos:
1.- Horarios para programación de cita para donación: Se programaran las citas a
los familiares de los pacientes que acuden al Banco de Sangre en los siguientes
horarios: 11:30 am y 12:30 pm.
2.- Se otorgaran 200 minutos de tolerancia para recibir familiares de pacientes a

programación de citas.
3.- A su ingreso al Banco de Sangre el vigilante otorgará una ficha numerada para
establecer el orden de ingreso.
4.- La trabajadora social asignada al área de selección de disponentes atenderá a

los familiares por grupos según el horario de ingreso al Banco de Sangre y les
impartirá una plática de orientación y sensibilización para la donación de sangre.
5.- El contenido de la plática impartida por la trabajadora social es el siguiente:
5.1 Presentación
5.2 Documentos necesarios para solicitar cita.
5.3 Importancia de la donación de sangre segura.
5.4 Promoción de la donación altruista
5.5 Documentos que necesita tener el donador el día de su cita.
5.6 Características físicas y de salud que debe reunir el candidato a donador.
Se exceptúan a las personas sordomudas o que hablen un dialecto ya que implica
dificultad para la comunicación con el personal que presta la atención y esto afecta
la confiabilidad de los resultados.
CAL-02-B
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5.7 Beneficios de donar sangre (estudios de laboratorio como grupo sanguíneo y

serología, un examen médico).
5.8 Donación de sangre y/o aféresis
5.9 Programación de citas
La Trabajadora social solicita la Hoja de Hospitalización u orden de

cirugía (Ver tabla A )
Llena el folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre ? Con los
datos de la solicitud de donación
y anota en la bitácora de citas CAL-11-A los datos solicitados
ocupando el # de espacios de citas de donadores que les corresponda
cubrir.
En base a la situación social del paciente asigna el día de la cita ,

considerando diagnóstico y servicio donde se atiende al paciente . En
el Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría se manejan
tres tipos de citas: CITA ABIERTA, CITA PROGRAMADA y CITA
PROGRAMADA DE URGENCIA (Ver abajo descripción de cada tipo
de cita.
Verifica con el solicitante los datos del paciente registrados en el

folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre ? , confirma la cita
para la donación y le indica leer el folleto Información importante para
la donación sanguínea (Ver procedimiento
CAL-20) para conocer los requisitos para ser donador .
Le recuerda que debe traer los folletos el día de la donación , además

de su identificación personal con fotografía y vigente .
FIN
CAL-02-B
Página 15 de 10
TIPOS DE CITAS
En el Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría se manejan tres

tipos de citas:
 CITA ABIERTA. Trabajo Social asigna a familiares de pacientes con base en
los siguientes criterios:
a. Pacientes foráneos
b. Diferimiento o rechazo en más de una ocasión de donadores
c. Sin redes de apoyo
El plazo para traer a sus donadores no será mayor a dos semanas.
 CITA PROGRAMADA (Cita que Trabajo Social asigna con una fecha y hora
determinada).
 CITA PROGRAMADA URGENTE. Se solicitan más donaciones de acuerdo a

los requerimientos del paciente, a pesar de haber cumplido con las dos
donaciones. Deberán acudir a la brevedad posible (plazo no mayor a una
semana) ya que se requieren de forma inmediata para cubrir las necesidades
transfusionales del paciente.
MANEJO DE PRÓRROGAS
Trabajo Social del Departamento de Banco de Sangre proporciona prórrogas a los

familiares de los pacientes cuando:
1. Se adelanta fecha de cirugía.
2. Se da a los familiares fecha inmediata para la cirugía del paciente (en las
siguientes 24 hrs.)
MANEJO DE CONDONACIONES
Ver procedimiento CAL-63 para manejo de condonaciones por el Banco de

Sangre
CAL-02-B
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IMÁGENES DE FORMATOS RELACIONADOS CON ESTE PROCEDIMIENTO
El Folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre?
CAL-02-B
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Información importante para la donación sanguínea” También es entregada al

donador, y se muestra a continuación:
CAL-02-B
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CAL-02-B
Página 19 de 10
Tabla A. Donadores solicitados.
SERVICIO EN QUE SE ATIENDE NO DE DONADORES

AL PACIENTE SOLICITADOS
Cirugía ambulatoria 1
Cateterismo cardiaco 1
Cirugía cardiovascular 4 ó más
Estancia en áreas críticas 2 ó más
Cirugía programada 2
Hospitalización 2
Transplante de Células 10 ó más
Progenitoras Hematopoyéticas
Cirugía ambulatoria y cateterismo cardiaco: Se solicita una donación de

sangre, esta se debe de realizar antes de la cirugía o el mismo día dependiendo
el caso. SOLO EN ESTE CASO TRABAJO SOCIAL DEL BANCO DE SANGRE
DA PRORROGAS PARA QUE SE CUBRA POSTERIORMENTE LA DONACIÓN,
en caso de que la cirugía o cateterismo se haya realizado de manera urgente y se
solicita realizar la donación un tiempo no mayor a una semana.
Cirugía cardiovascular: Cirugía cardiovascular requiere 3 donadores de sangre 1

de plaquetas el día de la cirugía, en caso necesario se solicita un mayor número
de donadores según los requerimientos del paciente.
Estancia en áreas críticas (Urgencias, Terapia Intensiva), Cirugía

programada, Hospitalización: Se solicitan dos donaciones de sangre, con
variaciones de acuerdo a los requerimientos del paciente.
Trasplante de células progenitoras hematopoyéticas: Se solicitan 10

donadores de plaquetas aptos quienes iniciarán el proceso de donación antes del
trasplante y se programan de acuerdo a las necesidades del paciente y puede
haber modificaciones de acuerdo a los requerimientos transfusionales del
paciente.
CAL-02-B
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El folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? se debe llenar de la
siguiente manera:
DATOS DEL PACIENTE PROPORCIONADOS POR EL

DONADOR:
Nombre del paciente: Nombre completo del paciente para el que va a

realizar la donación
Número de expediente: Número de Expediente asignado por el INP
(equivale al # de registro).
Servicio: Especialidad en la que se esta tratando el

paciente.
Cama: # de cama en que se encuentra el paciente
hospitalizado para quien se solicita la donación
PARA USO EXCLUSIVO DEL BANCO DE SANGRE:
Número de donadores: Número de donadores que se solicitan según sea

el caso (Ver tabla A)
Fecha de la donación: Fecha de la cita para asistir a la donación
Hora de la cita: Hora de la cita para la donación
La Bitácora de citas CAL-11-A contiene lo siguiente:
CAL-02-B
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BITÁCORA DE CITAS
CAL-11-A
Fecha:
#de
No./Hora Nombre Registro Servicio Fecha Observaciones
donadores
La Bitácora de citas CAL-11-A se llena de la siguiente manera:
Fecha: Día, mes y año en que está citado el candidato a donador.

No. / Hora: # consecutivo del día y hora de su cita.
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del paciente.
Registro: # de registro del paciente asignado por el INP.
Servicio: Especialidad donde se encuentra el paciente.
# De donadores: # de donadores solicitados.
Fecha: Día y mes en que se da la cita.
Observaciones: Cualquier observación que se considere relevante.
CAL-02-B
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REGISTROS
Bitácora CAL-11-A (Libreta programación de citas) se almacena en el archivo del

área de recepción durante 1 año.
Bitácora CAL-20-A (Registro de donadores) se almacena 3 meses después de que

completa el llenado de todas sus hojas.
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de Entrega de resultados

Dr. Ismael Hernández Dra. Margarita Leticia Dra. Dinora V. Aguilar
Montiel Medina Macías Escobar
T.S. Ana María Dorantes
Ceh
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se establece el mismo tiempo de

entrega de resultados después de la
3 10/01/2012
donación de sangre y de aféresis
Se actualiza el formato electrónico de

entrega de resultados 3 10/01/2012
Se cambia plazo de almacenamiento

en archivo activo y muerto de la
3 10/01/2012
Bitácora CAL-13-A
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Una vez que al donador se le ha realizado el Sangrado o el Procedimiento de

Aféresis (Ver Procedimiento CAL-46 o CAL-50) se le informa que podrá recoger
los resultados del análisis de la muestra personalmente a los 8 días posteriores a
la donación. El día de entrega de resultados se procede de la siguiente manera:
La recepcionisa solicita identificación y fecha en que realizó donación de sangre (verifica que
coincida la fotografía de la identificación , con la persona presente) y le pide que se registre en
la bitacora de entrega de resultados CAL -13-A
En el sistema de cómputo, la recepcionista ingresa apellidos para localizar Resultados de

Serología (siempre que sean negativos), imprime los resultados, y sube con el químico para
que los avale con su firma.
De manera manual, La recepcionista, sube al laboratorio para copiar los datos de la libreta de
Serología (siempre que sean negativos) al formato F-A-14-07; Procede a transcribirlos a
máquina para que el químico los avale con su firma .
La serología es NO La recepcionista entrega resultados por escrito al donador .

SI positiva?
La recepcionista detecta serología positiva en El donador firma de recibido en la bitacora de resultados

el sistema de cómputo o en la libreta de CAL-13-A
Serología, e informa al médico responsible y
al químico de laboratorio
FIN
Químico informa al médico

responsible de Sero-
Positivos
Médico le solicita a Trabajo Social que localice al donador
Trabajo social trata de localizar vía telefónica al donador para

informarle la necesidad de una 2da. muestra para completar
estudios (se realizan 3 llamadas en un lapso de 1 mes para
tratar de localizar al donador en caso de no ser posible se
canaliza el caso al Servicio de Epidemiología )
Cuando el donador acude a 2da. Muestra por haber

obtenido un resultado REACTIVO de su muestra
El médico habla con el donador para comentar que se requiere

otra muestra de su sangre para completar estudios , se toma
2da, muestra y se da “Cita en una semana para entregar
Resultados”
En laboratorio se realiza la prueba de ELISA
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El resultado
REACTIVO NEGATIVO
puede ser
Se realiza prueba confirmatoria

de la cual podemos obtener los
siguientes resultados
Resultado Resultado Resultado

INDETERMINADO POSITIVO NEGATIVO
Médico reporta como Médico notifica y explica

Brucella, chagas, VIH
indeterminado, da cita en posibles causas
VHC, VDRL, VHB
tres meses para otra
muestra, se da seguimiento
durante un año
Médico entrega resultados y Médico refiere al donador a FIN

refiere al donador a psicología para que sea
Epidemiología para que lo sensibilizado, y el psicológo
canalice a donde reciba informa al médico cuando
atención. considera que el donador
puede recibir la noticia.
FIN El médico en
compañía del
psicologo notifica el
diagnóstico
Positivo:
Cuando el análisis de la Prueba de rutina o tamizaje realizada a la 2da muestra
es REACTIVA y la Prueba confirmatoria se encuentra dentro de los rangos
considerados como POSITIVO, la muestra se determina como POSITIVA.
Negativa:
Cuando el análisis de la Prueba de rutina o tamizaje realizada a la 1era muestra
es NEGATIVA dentro de los rangos considerados, la muestra se determina como
NEGATIVA.
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Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Indeterminada:
Es cuando el resultado de la prueba No cumple con el 100% los criterios de
interpretación.
Opciones:
RESULTADO DE LA
PRIMERA MUESTRA SEGUNDA MUESTRA CONFIRMATORIA
PRUEBA
1era. Corrida: reactivo Positiva
Positiva
2da Corrida: reactivo Negativo
Negativa
(se corre tubo Reactiva Indeterminado (seguimiento
Indeterminada
primario y tubo piloto) del donador)
1era. Corrida: reactivo
2da Corrida: negativo Negativa
1era. Corrida:
negativo
Negativa
El formato de Entrega de Resultados F-A-14-07 se llena en la maquina de

escribir de la siguiente manera:
INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRÍA

BANCO DE SANGRE
Resultado de los exámenes practicados al DONADOR:
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s)
Número de Registro: Número de la bitácora de egresos e ingresos.
Grupo (ABO): Resultados obtenidos por medio del análisis de la

muestra
FACTOR RH (D): Resultados obtenidos por medio del análisis de la
muestra
V.D.R.L., Resultados obtenidos en serología.
HUDDLESSON,
ANTIGENO
AUSTRALIA,
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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HEMOGLOBINA g.% Resultados obtenidos del equipo automatizado de

y HEMATOCRITO: biometría hemática.
OTROS: Resultados de H.I.V.,CHAGAS y HEPATITIS C

obtenidos en serología
México, D,F., a: Fecha en que se solicita el comprobante de donación.
Clave, Nombre y Del Jefe del Laboratorio o del químico responsable

Firma:
La Hoja de entrega de resultados F-A-14-07 que se obtiene del sistema

informático de Banco de Sangre contiene lo siguiente:

BANCO DE SANGRE
Donante: Nombre del donador

Donación: No. De Unidad, Fecha
Fenotipos: Resultado obtenidos por medio de análisis de la muestra
Anticuerpos: Resultado obtenidos por medio de análisis de la muestra
RESULTADOS ANALÍTICOS
Hemoglobina Resultados obtenidos en el equipo automatizado de
biometría hemática
Hematocrito Resultados obtenidos en el equipo automatizado de
biometría hemática
Grupo Resultados obtenido por medio del análisis de la
muestra del donador
Rh Resultados obtenido por medio del análisis de la
muestra del donador
Hepatitis B Resultados obtenidos en serología
Hepatitis C Resultados obtenidos en serología
HIV 1-2 Resultados obtenidos en serología
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Sífilis Resultados obtenidos en serología

Chagas Resultados obtenidos en serología
Brucella Resultados obtenidos en serología
NAT Hepatitis B Resultados obtenidos en Biología Molecular
NAT Hepatitis C Resultados obtenidos en Biología Molecular
NAT HIV Resultados obtenidos en Biología Molecular
Proteínas Totales Resultados obtenido por medio del análisis de la
muestra del donador
Nombre y firma del Nombre y firma del Jefe del Laboratorio o del químico
personal de laboratorio responsable
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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BITÁCORA DE ENTREGA DE RESULTADOS CAL-13-A
Fecha de
Nombre del Fecha de NÚMERO Tipo de Se entregaron Firma de Persona que
solicitud de OBSERVACIONES
Donador Donación UNIDAD Resultados Resultados Recibido entrega
Resultados
Si:_____ No:____
Escritos Causa: _________
Si:____ No:____
Verbales Causa:_________
___
FORMA DE LLENAR LA BITÁCORA CAL-13-A:
Fecha de solicitud Se anota la fecha en que acude el donador a

de Resultados
solicitar resultados
Nombre del
Donador Nombre del donador
Fecha de
Donación Fecha en que se realizó la donación
NÚMERO UNIDAD Se anota el número de unidad que se le asignó
Si:____ No:___
Escritos
Causa _______
Se tacha el lugar que indique el tipo de resultados
Se entregaron Tipo de
Resultados resultados entregados y la causa de este tipo de entrega de
Verbales
Si __ No: ____ resultados
Causa:____
Firma de Recibido Firma del donador de que recibió resultados

Persona que
entrega Nombre de quien integra resultados
Cualquier comentario acerca de si es reactivo,
OBSERVACIONES acude a segunda muestra, o dato importante del
donador
Nota: La Recepcionista entrega los resultados al donador en caso de que todas

las pruebas serológicas sean negativas, de lo contrario el médico proporciona la
información y plan a seguir al donador.
CAL-02-B
Fecha: 10-01-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
La Bitácora de Resultados CAL-13-A se guarda durante 1 año en archivo activo y

5 años en archivo muerto.
CAL-02-B
Fecha: 7 Octubre 2009
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de Calibración del CELLDYN RUBY
Nombre: Q.F.B. MARÍA Nombre: M en C GUILLERMO Nombre: Dra. DINORA

TERESA FLORES ESCAMILLA GUERRERO V. AGUILAR ESCOBAR
CAMACHO
Fecha:07 Octubre 2009 Fecha:14 Octubre 2009 Fecha:

14 Octubre 2009
CAL-02-B
anco de Sangre Código: CAL-14
Fecha: 7 Octubre de 2009
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se actualiza procedimiento porque se 2 7 Octubre de 2009

cambió el equipo automatizado de
Biometría Hemática
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Para poder realizar los análisis de la toma de muestra (Ver Procedimiento CAL-
16) se requiere haber realizado una calibración previa del equipo CELLDYN
RUBY para la que se procede de la siguiente manera:
CAL-02-B
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FLUJOGRAMA PARA PROCESO DE CONTROLES
CHECAR PONER LOS ROTAR LOS INVERTIR

NUMERO DE TUBOS 15 CONTROLE EL
LOTE Y MIN A S CON LA CONTROL
FECHA DE TEMPERATU MANO POR Y ROTAR
CADUSIDAD RA 20 POR 20
AMBIENBTE SEGUNDOS SEGUNDOS
INVERTIR
PONER LOS
CONTROLES EN CONTROL
VERIFICAR INICIAR ES A LA
EQUIPO EN
VALORES Y ASPIRA SISTEMA DERECHA
CURVA DE L- ABIERTO Y A LA
J DO IZQUIERD
SELECSIONAN
E CON LA
DO EL NIVEL
MABNO
DE CONTROL
POR 10
SEG
SI
CHECAR
NO CONTROLES Y
REACTIVOS
PROC
ESAR
MUES
TRA
S
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Las hojas de los resultados de la calibración se guardan en la carpeta CAL-14-A
La carpeta CAL-14-A se llena de la siguiente forma:
Fecha de calibración: Día, mes y año en que se realizo la

calibración. (Impresa en la hoja de
resultados.
Control patrón de calibración usado: Indicar el lote y fecha de caducidad del

control patrón de calibración.
Persona que realiza la calibración: Nombre completo o sello de la persona

que realiza la calibración.
Nota 1: La Calibración se debe realizar todos los días antes de analizar las
muestras.
Nota 2: La bitácora se debe encontrar en el área de toma de muestra para su

llenado.
Nota 3: El control patrón de calibración tiene una fecha de caducidad pasada la

cual se desecha y se cambia de control.
REGISTROS
La carpeta CAL-14-A se debe guardar durante al menos 1 año.
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Fecha: 24 sep 2003
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Procedimiento de identificación de muestras
CAL-02-B
Fecha: 7 de Octubre 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de Pruebas Inmunohematicas
CAL-02-B
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Se asigna el número de bitácoras de 1 7 de octubre 2003

registro
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El Banco de sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo los siguientes
procesos para proveer de sangre segura a los pacientes que la requieran:
 RECEPCION DE MUESTRAS
 GRUPO SANGUINEO (Sistema ABO & Rh)
 LECTINAS
 FENOTIPO (Rh & FSABO)
 COOMBS DIRECTO
 RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES
(COOMBS INDIRECTO)
 PRUEBA CRUZADA
o OPCIONES DE TRANSFUSION
 RN
 TABLA DE NOM
 ALTGORITMOS:
o PRUEBA CRUZADA INCOMPATIBLE
o PRUEBA CRUZADA INCOMPLETA
o REACCION TRANSFUSIONAL
 RPR / VDRL
 DESPLASMATIZAR PLAQUETAS
 LAVADO DE PAQUETES GLOBULARES
 SANGRE RECONSTITUIDA
 FILTRACION
 CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Y
CELULAS
 ELUSION
o ELU KIT
o EGA KIT
 ADSORCION
 AGLUTININAS ANTI A & ANTI B
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Los métodos para realizar ensayos de aglutinación son:

 Método semiautomático
Tubo
Gel
 Método automático
Gel
Las pruebas de aglutinación establecen:
 HEMOLISIS: Indica una reacción positiva para la

unión Antígeno – anticuerpo.
 AGLUTINACION: la presencia del par Antígeno y/o

Anticuerpo complementarios relevante.
 NO AGLUTINACIÓN la ausencia de cualquiera de

ellos.
INTERPRETACION Y PUNTUACION DE LAS AGLUTINACIONES

DESCRIPCION GRADO PUNTUACION
Hemolísis total Ht
Botón completo, sobrenadante claro 4+ 12
Botón grande con algunos agregados, fondo claro 3+ 10
Botón fragmentado en varios grumos grandes, fondo turbio 2+ 8
Botón fragmentados en numerosos grumos regulares, fondo turbio 1+ 5
Botón fragmentado múltiples grumos pequeños, fondo muy turbio +/- 1
Aglutinación no visible negativo 0
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INTERPRETACION Y PONDERACIÓN DE LAS AGLUTINACIONES EN GEL
NEGATIVO
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RECEPCION DE MUESTRAS
Una vez que el Médico, enfermera o mensajero lleva la muestra a la ventanilla del laboratorio, el PERSONAL DE BANCO DE SANGRE, revisa que las
muestras esten bien identificadas con el Nombre completo del paciente, registro, fecha y hora de toma de la misma; que la muestra sea la indicada
para el analisis solicitado y que la solicitud tenga todos los datos requeridos.
Se retiene la muestra
Discrepancia entre
y la solicitud se rotula Se solicita nueva
NO membrete de tubo
“MUESTRA MAL muestra
con requisición
ETIQUETADA”
SI
Menor cantidad de
NO
la indicada
El PERSONAL DE BANCO DE
SANGRE procede a centrifugar la
Se le indica al Médico, enfermera o mensajero que lleva la
muestra para trasvasar en tubos
muestra anote en la Bitácora de Registro CAL-031-A los datos
membretados con los datos del
solicitados en el número consecutivo correspondiente. El
paciente, fecha y número de
PERSONAL DE BANCO DE SANGRE, asigna el número
requisición, el plasma o suero y el
correspondiente a la entrada tomado de la Bitácora CAL-031-A
paquete eritrocitario, para su
en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original y copia)
distribución, almacenamiento o
trabajo.
1.- DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO
La prueba consiste de dos etapas:

 Prueba directa o celular: eritrocitos problema
desafiados contra antisueros comerciales de
especificidad conocida
 Prueba inversa o sérica: suero problema desafiado

contra eritrocitos de fenotipo conocidos
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PRUEBA DIRECTA
en tubo
Se realiza la centrifugación del tubo de muestra para separar el Paquete eritrocitario y el plasma o suero.
Se rotula 2 tubos para la transferencia de suero y suspensión de eritrocitos (2-5%) con solucion salina amortiguada
Se realiza una prueba directa y una prueba complementaria llamada inversa
Para la prueba directa se requiere lo siguiente:
Marcar 4 tubos con los # del 1 al 3 y el cuarto con una T (testigo)
TUBO 1 TUBO 3
TUBO 2 TUBO T
Agregar una gota Agregar una gota de
Agregar una gota de Agregar 2 gotas del
de reactivo Anti-A reactivo Anti-B
reactivo Anti-AB plasma o suero del
(suero de color (suero de color
(suero incoloro) paciente
azul) amarillo)
Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos del paciente a los cuatro tubos
Se introducen en la centrifuga durante 15 a 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga. Esta prueba se realiza
a temperatura ambiente
Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos y se hace la lectura macroscópica para aglutinación (Ver tabla 1)
Registrar resultados en el / los formato A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27
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PRUEBA INVERSA en tubo
Marcar 4 tubos con las letras A1, A2, B y O

Células de fenotipo conocido preparadas a una concentración del 2-5%
TUBO A1 TUBO A2 TUBO B TUBO O

Agregar una gota de Agregar una gota de Agregar una gota de Agregar una gota de
celulas A1+ 2gotas del celulas A2 + 2gotas del celulas B + 2gotas del celulas O + 2gotas del
plasma del paciente plasma del paciente plasma del paciente plasma del paciente
Se introducen en la centrifuga durante 15-30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.
Se realiza una ligera agitación para resuspender las celulas
Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación (ver tabla 1)
Registrar resultados en los formatos A-13-14-07; FA-14-23; F-A-14-27
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Tabla 1
Prueba Directa
ANTIGENOS PRESENTES EN LOS ANTICUERPOS PRESENTES EN

GRUPO SANGUINEO
ERITROCITOS SUERO O PLASMA
A A Anti - B
B B Anti - A
AB AyB -----
O ni A ni B Anti – A & Anti - B
INTERPRETACION
Prueba INVERSA
Prueba DIRECTA
GRUPO Tubo con céluas:
Tubo con Antisuero
Anti-A Anti-B Anti-AB A1 A2 B O
Testigo
A POST NEGT POST NEGT NEGT NEGAT POST NEGAT
B NEGT POST POST NEGT POST POST NEGT NEGT
AB POST POST POST NEGT NEGT NEGT NEGT NEGT
O NEGT NEGT NEGT NEGT POST POST POST NEGT
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GRUPO SANGUINEO Sitema ABO/Rh EN GEL
con 25 l de concentrado eritrocitario del paciente (concentración de eritrocitos aproximada: entre el 2-3%)
Se realiza una prueba directa y una prueba complementaria llamada inversa
Empleo de tira del DianaGel Donors/Donantes

ver imagen
INVERSA
AUTOTESTIGO MICROTUBOS
DIRECTA TUBO Ctrl A1; B
MICROTUBOS colocar 25 l de eritrocitos del colocar 50 l de eritrocitos
A, B, AB, D,D` donador y 50 l del suero o reactivos (Serigrup Diana A1 y B)
colocar 25 l de solución de plasma del PACIENTE con 50 l del suero o plasma del
eritrocitos del PACIENTE PACIENTE
(ver imagen)
Leer
La lectura puede ser visual o en el DianaScanner
(ver imagen)
Interpretación
Registrar resultados en el formato F-A-14-26; F-A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-114-27

o mandar impresión
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A1 B
REGISTRO:
# REQUISICION:
Fecha:
Clave de quien realizó:
S.ABO S.Rho AT INVERSA
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SUBGRUPOS DE “A”
Marcar 1 tubo con la letra A1 (Anti-A1) y otro con la letra H (Anti- H)
TUBO A1 TUBO H
Agregar 1 o 2 gotas del reactivo Anti-A1 Lectina Agregar 2 gotas del reactivo Anti-H
Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos (2-5%) del PACIENTE A CADA TUBO
Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos

Se realiza una ligera agitación a cada uno de los tubos y se incuban durante 5 minutos aproximadamente a
temperatura ambiente.
Se introducen en la centrifuga durante 15-30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.
Se realiza un ligera agitación para resuspender los eritrocitos.
Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación
Registrar resultados en los formatos FA13-14-07; FA-14-23; F-A-14-27
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Tabla # 2 Subgrupo “A”
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GRUPO SANGUIENO Rho en tubo
Se identifica otro tubo y se prepara en él la suspensión de eritrocitos del donador tomando 2.5 a 3.0 ml de solución salina con
amortiguador con dos gotas de concentrado eritrocitario del PACIENTE
Marcar un tubo con la letra Rh (anti D) y otro con la letra C (control)
TUBO D TUBO C
agregar una gota del Agregar una gota del reactivo
antisuero comercial Control Rh ó
Anti - D ALB 22%
Agregar una gota de suspensión al 2-5% de eritrocitos del donador

Centrifugar 15-30 segundos, la revolución esta predeterminada
Leer resuspendiendo con movimiento suave el botón. Interpretación acorde a la aglutinación presente
NO AGLUTINACION AGLUTINACION NO
Rh neg (D-) Rh post (D+) AGLUTINACION
Registrar resultados en los formatos F-A-14-26; F-Q-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27

o mandar impresión
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SI la prueba Anti-D es NEGATIVA
Los tubos marcados con D y C (provenientes de la Prueba RH) se incuban 15-30 minutos a 37 C
Centrifugar e Interpretar
Positiva
Negativa
Se lavan las celulas 3 veces con salina fisiologica, teniendo cuidado para resuspender las celulas por completo
Se decanta la salina por completo en la última lavada
El resultado
se considera
Rh+ ( D+)
Agregar una gota de suero de Coombs poliespecífico (anti IgG-C3d)

Centrifugar e interpretar El resultado
se considera
Rh- y Du+
( para fines de
Positiva
transfusión se
considera :
Negativa donadores Rh+
VALIDAR TECNICA CON CELULAS
SENSIBILIZADAS receptores Rh-
Rh - (D-)
Registrar resultados en los formatos: F-A-13-14-07; F-A-

14-23; F-A-14-27
La determinación del grupo ABO en la

tarjeta de Gel conlleva la determinación del anti D y su especie el Du
Los resultados de Rh negativo en gel se confirman al desafiarlos con el Anti

D Totem (anticuerpo policlonal dirigido contra las 6 fracciones del Antígeno
D: I – VI)
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FENOTIPOS Rh
Hacer un suspensión de los eritrocitos 2-3% (1ml de Diana-1 + 25 l de muestra)
Añadir 25 microlitros de la suspensión de eritrocitos 2-3% en los microtubos que indican C, c, E, e

(Ver imagen)
Centrifugar en DianaFuge y leer manual o en el Diana scanner (Tabla 3A, 3B, 3C)
Registrar los resultados en los formatos F-A-13-14-07; F-A-14-23; F-A-14-27
Interpretación de fenotipo Rh

Fecha: Fecha:
realizó realizó
Fenotipo: CcE Fenotipo: CEe
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FORMATO F- A – 14 – 23
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Tabla 2
Fenotipo Rh
REACCION SEROLOGICA ANTI FENOTIPOS

GENOTIPO
D C c E e WIENER FISHER
DCe/dce + + + - + R1r DCcee
DCe/DCe + + - - + R1R1 DCCee
DcE/dce + - + + + R2r DccEe
DcE/DcE + - + + - R2R2 DccEE
DCe/DcE + + + + + R1R2 DCcEe
dce/dce - - + - + rr ddccee
Dce/dce + - + - + R0r Dccee
dCe/dce - + + - + r'r ddccee
dCe/dCe - + - - + r'r' ddccee
dcE/dce - - + + + r" r ddccee
dce/dcE - - + + - r" r " ddccEE
dCe/dcE - ++ + + + r' r" ddCcEe
DCe/DCE + + - + + R1RZ DCCEe
DcE/DCE + + + + - R2RZ DCcEE
DCE/DCE + + - + - RZRZ DCCEE
dCE/dCe - + - + + r y y' ddCCEe
dCE/dcE - + + + - r y r" ddCcEE
dCE/dCE - + - + - ryry ddCCEE
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COOMBS INDIRECTO O RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES
PANEL CASERO se les adiciona 5 microlitros de las células panel + 500 microlitros de la solución Diana sol 2
(suspensión al 1%) y se homogenizan. EL PANEL COMERCIAL SE ADICIONA DIRECTAMENTE
Se le realizan de 3 a 5 lavados al tubo que contiene los eritrocitos de la muestra problema.
Se identifica la tarjeta de Diana Gel Coombs con los # del 1 al 10 y el AT (testigo) y se toma una alicuota de 50
microlitros de cada tubo y se depositan en su respectivo microtubo + 25 microlitros del suero de la muestra problema
Al microtubo marcado con la letra AT se le adiciona 50microlitros de la suspensión de eritrocitos problema

previamente lavadas + 25 microlitros del suero problema.
Se incuba en el equipo Diana Incubador a 37°C / 15min., transcurrido el tiempo se centrifuga en Diana Fuge y se
interpretan los resultados con la CARTA PANEL CORRESPONDIENTE.
RESULTADO es NEGATIVO: Se indica al reportar que los Anticuerpos irregulares FSABO.

RESULTADO es POSITIVO: Se reporta como POSITIVO & ANTICUERPO DETECTADO CON PROBABLE
ESPECIFICIDAD:…..
Se anotan los datos y resultados de la prueba en la Bitácota de Estudios especiales CAL-31-B y se conserva el
formato F-A-14-23 junto con el original del formato A-13-14-07. La copia del formato A-13-14-07 se le entrega al
Médico residente o a la enfermera que lo solicite y se le pide que ponga los datos que se le solicitan y firme de
recibido en la Bitácora de Entrega de resultados de estudios especiales CAL-31-C.
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Y la siguiente reacción en tarjeta con el PANEL TRIO:
Para el rastreo de Anticuerpos en tarjeta en técnica liss-gel se requiere lo siguiente:
Marcar la tarjeta DianaGel Coombs del # 1 al 3 y un T( testigo) Las células se preparan empleando 5 l de eritrocitos con 0.5 ml de solución Diana 2
MICROTUBO 1 MICROTUBO T
MICROTUBO 2 MICROTUBO 3
Anadir 50 l de Anadir 50 l de
Anadir 50 l de Anadir 50 l de
Gamma Trio 1 eritrocitos del
Gamma Trio 2 Gamma Trio 3
PACIENTE
MICROTUBO 1
Anadir 25 l de plasma del PACIENTE

Si es positivo se debe realizar el panel completo
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Tabla 3
CARTA PANEL TRIO
Escanear imagen de carta panel del:

TABLA 4
CARTA PANEL DIANA
 CARTA PANEL DE SIGLO XXI
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COOMBS DIRECTO EN TUBO
El concentrado eritrocitario se toma una alicuota y se realiza una suspensión al 2-5%, a la cual se le realizan 3
lavados minimo con solución de cloruro de sodio al 0.9% (SSI), en cada lavado se centrifuga. se decanta y se repite el
proceso de lavado.
Una vez que se realizarón los lavados se decanta el exceso de solución y se adiciona SSI para obtener una solución
al 5%.
AGREGAR 1 GOTA DE LA DILUCION DE ERITROCITOS DEL PACIENTE Y 2 GOTAS DE SUERO DE COOMBS
Se centrifugan los tubos y se leen anotando el resultado en el formato F-A-14-27 donde indica 22 °C en su respectiva
dilución,
Si el RESULTADO es POSITIVO se titula (diluyendo el suero de Coombs en forma doble seriada,)se reporta en los
formatos A-13-14-07 y F-A-14-27 POSITIVO y la dilución
Si el RESULTADO es NEGATIVO si la técnica fue realizada en tubo se continua con el llamado CAGHs (consumo de
antiglobulina humana) es la prueba que se realiza para corroborar que se haya realizado bien la técnica anterior.
Para realizar el CAGHs se adiciona una gota de células sensibilizadas a todos los tubos, se mezclan y centrifugan a
SI ES POSITIVO SE VALIDA EL ENSAYO, SI ES NEGATIVO SE REPITE DESDE SU INICIO
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RPR o VDRL
El Químico de Inmunohematologia antes de iniciar la prueba lleva a temperatura de entre 15-30 C el REACTIVO Y
SUS CONTROLES
Procede a centrifugar la muestra para continuar con la separación del plasma y el concentrado eritrocitario.
Se realiza la identificación de la placa: controles y muestra
A los circulos que se van a ocupar se les adiciona una alicuota 1 A 2 gota del suero del paciente.y se extiende con la
misma pipeta desechable o punta.
De igual forma se aplica en los circulos correspondientes los controles positivo y negativo
A todos los circulos se les adiciona 1 gota del REACTIVO

Se homogeniza y se lleva a agitar la placa en el equipo BAXTER ROTATOR V durante 6 - 8 min. A 100 rpm.
Realizar lectura macroscopica e interpretar, ausencia de aglutinación resultado negativo, presencia de aglutinación
resultado positivo
Se anota el resultado en la Bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia

CAL-31-B y en el formato de solicitud A-13-14-07 original y copia, se entrega al personal que venga por los resultados
la copia de la forma A-13-14-07 y se le pide que ponga los datos que se le solicitan y firme de recibido en la Bitácora
de Entrega de resultados de estudios especiales CAL-31-C.
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COOMBS DIRECTO EN GEL
El concentrado eritrocitario se toma una alicuota y se realiza una suspensión al 2-5%, a la cual se le realizan 3
lavados minimo con solución de cloruro de sodio al 0.9% (SSI), en cada lavado se centrifuga. se decanta y se repite el
proceso de lavado.
Una vez que se realizarón los lavados se decanta el exceso de solución y se adiciona SSI para obtener una solución
al 5%.
AGREGAR 1 GOTA DE LA DILUCION DE ERITROCITOS DEL PACIENTE Y 2 GOTAS DE SUERO DE COOMBS
Se centrifugan los tubos y se leen anotando el resultado en el formato F-A-14-27 donde indica 22 °C en su respectiva
dilución,
Si el RESULTADO es POSITIVO se titula (diluyendo el suero de Coombs en forma doble seriada,)se reporta en los
formatos A-13-14-07 y F-A-14-27 POSITIVO y la dilución
Si el RESULTADO es NEGATIVO si la técnica fue realizada en tubo se continua con el llamado CAGHs (consumo de
antiglobulina humana) es la prueba que se realiza para corroborar que se haya realizado bien la técnica anterior.
Para realizar el CAGHs se adiciona una gota de células sensibilizadas a todos los tubos, se mezclan y centrifugan a
SI ES POSITIVO SE VALIDA EL ENSAYO, SI ES NEGATIVO SE REPITE DESDE SU INICIO
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ANTIGENOS ERITROCITARIOS
Se rotulan 2 tubos con los datos del paciente, una vez que la muestra se centrifuga y se separa el suero o plasma del
tubo y en el otro se realiza una suspensión al 2-5% de globulos rojos.
Se identifican 20 tubos con la sigla de cada uno de los antigenos a determinar
Se coloca en cada tubo una gota de la suspensión de eritrocitos al 2-5% de la muestra problema + 1 gota del
antisuero correspondiente (VER TABLA ANEXA 5)
Se incuban de 15-20 min
Cuando obtengo en Salina rápida un negativo se continua con una incubación de 15-30min. en la temperatura a la
cual reacciona optimamente con su respectivo anticuerpo (MNSU 22 C, el resto a 37 C) al termino de la incubación se
sacan los tubos se centrifugan a 3500RPM / 20-30 segundos y se toma tubo por tubo observando algun tipo de
aglutinación. Se reporta todos los resultados obtenidos en el formato F-A-14-23.
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TABLA 5: ANTIGENOS ERITROCITARIOS
M N S s P Fya Fyb K k Jka Jkb Lea Leb Dia TIEMPO DE

INCUBACION
S/4°C
S/22°C
S/37°C
S/SC
CAGH
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Una vez que el Médico residente o la enfermera lleva la muestra a la ventanilla del laboratirio el Químico revisa que la
muestra este bien identificada (Nombre completo del paciente o familiar, hr. de toma de muestra y fecha de la toma,
que la muestra sea la adecuada para el analisis que solicita y que la solicitud tenga todos los datos que se requieren.
Una vez que el Químico verifica lo anterior le pide al Médico residente se anote en la Bitácora de Registro CAL-31-A y
el Químico anota el # consecutivo en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original) y M-3-0-21 (original y
copia) y el turno que le corresponde. Este procedimiento se realiza si el Médico del Banco de sangre lo considera
adecuado por el diagnostico del paciente o por que no se tengan en existencia concetrados plaquetarios del grupo
sanguineo del paciente.
El procedimiento se realiza de igual manera para Pool de plaquetas, Feresis o Concentrado plaquetario
La centrifuga se pone a temperatura de 22 a 24 C
El producto a desplasmatizar se centrifuga a 1400rpm/10min a una temperatura de entre 22-24 C, una vez que
concluye la centrifugación por medio del Conector esteril o puncionanado la bolsa con la espiga de la bolsa transfer,
sosteniendo en la palma de la mano la bolsa que contiene el plasma y las plaquetas, se trasvaza el plasma en su
totalidad a la nueva bolsa.
A la bolsa que contienen las plaquetas se le deja una linea de aprox. 15 cm sellandola y desechando la bolsa que
contiene el plasma
A la bolsa que contiene las plaquetas por medio del conector esteril se le conecta un equipo de venoclicis para que
por medio de el puncione una bolsa o frasco de solución salina fisiologica y se trasvasa la cantidad de solución
adecuada o solicitada.
Se sella la bolsa para separa la solución salina, se resuspenden las plaquetas y se coloca en agitación durante
30min./100RPM/T.A. Con el formato M-3-0-21 copia y en la etiqueta indica que el producto fue desplamatizado.
Se anotan los datos del donador y paciente en la Bitácota de Control de asignación de sangre CAL-31-D y se
conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21. La copia del formato M-3-0-21 se le entrega
al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el producto. Una vez que el Químico completa
los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido en la Bitácora CAL-31-D y en el original del
formato M-3-0-21.
Una que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la fecha
y hora en que se entrego el producto.
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DESPLAZMATIZACIÓN
copia) y el turno que le corresponde.Este procedimeinto se realiza cuando el Médico solicita por medio del formato A-
13-14-07 un paquete eritrocitario lavado o que el paquete a transfundir haya sido radiado 5 días antes o por que la
patologia del paciente asi lo requiera. (Verificar si el paquete fue filtrado cuando fue fraccionado)
Al Concentrado eritrocitariose le conecta por medio del Conector esteril la parte contraria a la espiga del equipo de
venoclisis y la parte sobrante se desecha. La parte que queda libre que es donde se encuentra la espiga se une a la
bolsa o frasco de solución salina y se deja de 100 a 150ml.
Se sella la bolsa dejando aprox. de 5-10cm de linea en la bolsa del concentrado eritrocitario, homogeniza por medio
de inversión.
Se centrifuga colocando el paquete con los puertos de entrada hacia abajo a 3500RPM durante 10min.
Una vez que finaliza la centrifugación se retira con sumo cuidado los vasos de la centrifuga y posteriormente el
Concentrado eritrocitario lavado el que se cuelga en un tripie.
Se identifica la bolsa transfer con los datos de la bolsa que contiene el CE a lavar y se prepara con 50-100ml de SSI la
cual se une a CE lavado y se deja pasar el CE LAVADO a la bolsa transfer deteniendo la transferencia de CE antes
de que la linea que divide el CE y el sobrenadante quede antes de 3cm de la base de los puertos.
Una vez que se detiene la transferencia se sella la linea y se separa la bolsa que contiene el sobrenadante para
desecharla
Se homogeniza el CE y se refrigera hasta su solicitud
conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21. La copia del formato M-3-0-21 se le entrega
al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el producto. Una vez que el Químico completa
los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido en la Bitácora CAL-31-D y en el original del
formato M-3-0-21.
Una que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la fecha
y hora en que se entrego el producto.
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LAVADO DE PAQUETES
ELUSION
FILTRACION
el Químico anota el # consecutivo en el formato de solicitud del análisis A-13-14-07 (original y copia) y el turno que le
corresponde. Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita o cuando el Médico del Banco de sangre lo
considera necesario se realiza para pacientes que se cree tiene aloanticuerpo o autoanticuerpo.
Se rotulan 2 tubos con los datos del paciente, una vez que la muestra se centrifuga a 3500RPM/8min. Se separa el
plasma y se toma aprox. 1ml (varia según la cantidad de muestra extraída) del paquete de celulas
LAVADO CON SSI

Al tubo que contiene el paquete de celulas se le adiciona ¾ partes de SSI del tubo
Centrifugar a 3500rpm/2min, decantar (3 lavados minimo).
LAVADO CON SOLUCION DE LAVADO

Solución de lavado dilución 1/10 (1ml de solución de lavado concentrado + 9ml de solución salina fisiologica)
Al tubo que contiene el paquete de celulas lavadas con SSI se le adiciona ¾ partes de Sol. de lavado del tubo
Centrifugar a 3500rpm/2min, decantar (4 lavados minimo).
Después del último lavado se decanta totalmente la solución de lavado.
Del paquete previamente lavado se toma una alicuota y se coloca en un tubo identificado y se adiciona la misma
cantidad de sol. de elución
Se realizan dos movimientos de inversión al tubo y se introduce a la centrifuga a 3500rpm/1min. se decantar

(3 lavados minimo).
Después del último lavado se decanta totalmente la solución de lavado y se adicionan 20 gotas de amortiguador
(color azul) pH 7
ELUIDO
TARJETA TUBO
Realizar una solución al 1% del panel de células del Identificar 10 tubos

del SIGLO XXI
Adicionar 1 gota de células panel del SIGLO XXI
+
Tomar una alicuota de 50microlitros de las solución 2 gotas del ELUIDO
anterior + 50 microlitros del ELUIDO
Incubar durante 15min.

Incubar durante 15min. en Diana Incubador
Lavadar con solución de lavado 1 vez
Interpretar los resultados con la carta del panel
Agregar 2 gotas de suero de Coombs a cada tubo
Mezclar y centrifugar a 3500rpm/15-30seg
Interpretar los resultados con la carta del panel
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copia) y el turno que le corresponde. Este procedimiento se realiza si el Médico en la solicitud indica que se le realice
filtración al producto solicitado
Una vez que se le realizarón las pruebas de compatibilidad al producto y esta listo para ser filtrado
Se selecciona el filtro por su capacidad y producto a filtrar y se identifica la etiqueta que trae la bolsa del equipo para
filtrar con el nombre del donador, tipo de sangre, # de registro, volumen, fecha de extracción, fecha de caducidad y
fecha en que se esta realizando la filtración.
Se realiza la unión de la bolsa y el equipo de filtración con el TSCD SC-201A
Se corta la parte sobrante y se abre la parte de la linea que se sello para dejar pasar el producto y el piloto de la bolsa.
Se cuelga la bolsa en un tripie y se espera a que termine de pasar todo el producto
Si no se va a requerir el total de la bolsa, se coloca la bolsa ( a donde se encuntra el producto filtrado) en la balanza y
tomo solo la cantidad que requiero, procedo a sacar el aire de la bolsa y sello. Si se requiere todo el producto se
espera a que se filtre todo, se saca el aire, se sella y se pesa para conocer el peso final.
conserva el formato A-13-14-07 junto con el original del formato M-3-0-21(se especifica la cantidad que entrega). La
copia del formato M-3-0-21 se le entrega al Médico residente o a la enfermera que solicite el producto junto con el
producto. Una vez que el Químico completa los datos de la bitácora CAL-31-D se le solicita que la firme de recibido
en la Bitácora CAL-31-D y en el original del formato M-3-0-21.
Una vez que el Químico entrega el producto sella en la parte del formato M-3-0-21 de ENTREGADO, incluyendo la
fecha y hora en que se entrego el producto.
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CONTROL DE CALIDAD DE REACTIVOS Y CELULAS

El Químico del área de grupos realiza el Control de calidad de los hemoclasificadores y células reactivo que son las siguientes:
Los hemoreactivos a utilizar son: Las Células que se van a ocupar:

-Anti-A -Globulos rojos A1
-Anti-B -Globulos rojos A2
-Anti-AB -Globulos rojos B
-Anti-A1 -Globulos rojos O
-Anti-H -Eritrocitos sensibilizados
-Anti-D -Eritrocitos no sensibilizados
-Albumina 22% o Control de Rh -Globulos rojos de fenotipo conocido
(panel1-10)
El Control de calidad se realiza con las células del C.M. Siglo XXI a las que se les realizan tres lavados previos a su uso con SSI (1 L. de
solución CS + 10ml pHix) hasta ¾ partes del tubo, centrifugar a 3500/ 2min, decantar, agitar para resuspender las células En el último lavado
decantar sin resuspender. De cada una de las células realizar una suspensión al 5%. Durante los lavados determinar la existencia de
hemolisis y turbidez.
Identificar 4 tubos con los # del 1 al 4 y con la letra A,

4 tubos con la letra AB, 4 tubos con la letra B, 2 tubos con la letra A1 y 2 tubos con la letra H
Adicionar 2 gotas de su respectivo reactivo a los 4 o 2 tubos
Una vez que se adicionarón los reactivos se realiza lo siguiente:
A los TUBOS 1
Adicionar 1 gota de globulos
rojos A1(lavados)
A los TUBOS 2
rojos A2(lavados)
A los TUBOS 3
rojos B(lavados)
A los TUBOS 4
rojos O (lavados)
Centrifugar 3500rpm / 15-30seg. Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad
Identificar 2 tubos como D Rh+ y D Rh- :
A los 2 tubos adicionarle 2 gotas de Hemoclasificador D y al #1 adicionar 1 gota de globulos rojos R1r (células del panel C.M. Siglo XXI Rh
positivas) y al # 2 adicionar 1 gota de globulos rojos rr (células del panel C.M. Siglo XXI Rh negativas)
Identificar 2 tubos como albumina o control Rh:
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A los 2 tubos adicionarle 2 gotas de reactivo ALBUMINA o el Control Rh y al #1 adicionar 1 gota de globulos rojos R1r (células del panel C.M.
Siglo XXI Rh positivas) y al # 2 adicionar 1 gota de globulos rojos rr (células del panel C.M. Siglo XXI Rh negativas)
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Centrifugar 3500rpm / 15-30 seg. Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad
Obsevar las especificaciones en la NOM- 017-SSA1-1993
Observar Avidez en placa de as células del C.M. Siglo XXI A1, A2, B, de la siguiente manera:
Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-A

+
1gota de células A1
Mezclar con un aplicador de madera y tomar el tiempo en que aglutina con un cronometro y registrarlo en la Bitácora
Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-A

+
Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-B

+
1gota de células B
Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-AB

+

+

+
1gota de células B
Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-D

+
1gota de células con fenotipo R1r
Obsevar las especificaciones de Avidez de la NOM- 017-SSA1-1993
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Adicionar 1 gota de hemoclasificador Anti-C3d-IgG

+
1gota de células sensibilizadas
Obsevar las especificaciones de Avidez de la NOM- 017-SSA1-1993
Para realizar el Control de calidad del suero de Coombs se identifican 1 serie de 8 tubos cada una con las siguientes diluciones: 1/1 o sin diluir
, ½, ¼, 1/8, 1/16, 1/32, 1/64 y 1/ 128
Adicionar al tubo # 1
1 ml de Anti-IgG,-C3d
Adicionar al tubo #2 1ml de de Anti-IgG,-C3d + 1ml de SSI

Homogenizar
Al tubo #3 se le adiciona una alicuota de 1ml del tubo #2 y se homogeniza ,

Al tubo #4 se le adiciona una alicuota de 1ml del tubo #3 y se homogeniza
Asi se continua hasta la dilución 1/128
en la última dilución se desecha 1ml para que todos los tubos tengan la misma cantidad.
Montar 2 SERIES de 8 tubos identificada con cada una de las diluciones. Se toma una alicuota de 0.1ml de la última dilución y se coloca en el
últimos tubos de la SERIE I y IIy asi en todas las diluciones.
A las SERIE I y II adicionarles lo siguiente:
SERIE I SERIE II
Adicionar 1 gota de eritrocitos sensibilizados lavados Adicionar 1 gota de eritrocitos NO sensibilizados lavados
Se centrifugan 30seg / 3500rpm .

Leer Aglutinación y anotar en la bitácora de Control de Calidad
En caso de obtener resultados negativos en cualquiera de las 2 series realizar consumo de antiglobulina humana para control de la técnica y
reportar en la bitácora.
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ACTIVIDADES DE RUTINA
Anotar la temperatura de los refrigeradores

Ordenar refrigeradores
Sacar la lista de CE existente por # de registro, Fecha de caducidad y grupo.
Sacar la lista para Centro Nacional
Acomodar las plaquetas según lo siguiente:
radiadas, cruzadas, próximas a caducar, disponibles.
Sacar la lista de plaquetas cruzadas
Tener el producto solicitado para cirugías e indicar la fecha en que se requiere
Se ordenan las requisiciones A-13-14-07 por # y turno
Se anota en egresos M-3-0-21
Cotejar en entrega de guardia
Lista de egresos y cancelados
Verificar que el producto solicitado a las 24 hrs se encuentra todavía se

reincorpora al stock
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CAL-31- A BITACORA DE ESTUDIOS ESPECIALES DE

INMUNOHEMATOLOGIA
Fecha: Día, mes y año en que se esta realizando el estudio.

Registro: #de registro del paciente.
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del paciente.
Edad: Años que tiene en ese momento el paciente (opcional)
Sexo: M (hombre) y F (mujer).
Depto. y/o Servicio: Servicio de donde se solicita el estudio.
Cama: # de cama donde se encuentra el paciente.
Diagnostico: Diagnostico que da el medico.
G: Gesta
P: Partos
A: Abortos
Rhogam: Vacuna de Rh
Transfusión: Si ha sido transfundido si o no
Fecha: Fecha en fue transfundido
EST. LAB.
Bilis: Bilirrubinas
HTO: Hematocrito
HB: Hemoglobina
RETIS: Reticulositos
TP: Tiempo de protombina
P/G: Peso (g)
SABO
Grupo: Grupo Sanguíneo del paciente.
Subgrupo: Cuando el paciente es del grupo A se determina su subgrupo A1 o A2
SRh
D, DU, Rh Salino, C, c, E, e: Determinación de fenotipo de Rh
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COOMBS
IgG-C3d, IgG, C3, IgM, Titulo, Potencia: Determinación con el reactivo de
Coombs Positivo o Negativo, su titulo y potencia.
RASTREO DE ANTICUERPOS IRREGULARES FSABO

Suero: Tipo de muestra utilizada (suero)
Eluido Adsorción: Tipo de muestra utilizada (eritrocitos)
Positivo: Cuando se encuentra positivo

Negativo: Cuando se encuentra negativo
Especificidad: Probable Anticuerpo
Titulo: Respuesta (en cruces)
Potencia: Potencia encontrada.
FENOTIPO
P, M, N, S, s, Fya, Fyb, Jka, Jkb, Lea, Leb, K, k: Antígenos eritrocitarios con
anticuerpos específicos.
Día: Día en se realiza el estudio.
RPR
Positivo: Se marca con una X si es positivo
Negativo: Se marca con una X si es negativo
Titulo: Titulo encontrado en la prueba.
Ab INMUNES
Anti-A, Anti-B: Prueba de aglutininas o Sello, firma, rubrica del Químico que
realizo el estudio.
CAL- 31-E CONTROL DE CALIDAD
Fecha: Día, mes y ano en que se realiza el control de calidad.

Turno: Turno que esta realizando el control de calidad (M matutino, V vespertino,
N nocturno, E especial)
Reactivo: Hemoclasificado al que se le va a realizar el control de calidad..
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Lote: de lote del hemoclasificado.

Caducidad: Fecha en que caduca el hemnoclasificado.
Marca: Nombre comercial que tiene el hemoclasificado
Registro: # que tiene como registro el hemoclasificado.
Color: Color que presenta el hemoclasificado.
Aspecto: Aspecto transparente o turbio del hemoclasificado.
A1, A2, B, O, R1r, rr, A1, A2, B, Rr: Resultados al realizar el control de calidad.
Hemolisis: Negativa o positiva.

Turbidez: Negativa o positiva
Cel. Sensib.: Con dilucioneas del 1/1 al 1/128 y células sensibilizadas.

Cel. no sensib: Con dilucioneas del 1/1 al 1/128 y células no sensibilizadas.
CAGH: Consumo de antiglobulina humana.
31-F ENTREGA DE GUARDIA
Fecha: Día, mes y ano de entrega de turno.

Req. Inicial: # de requisición inicial
Req. Final: # de requisición final
Turno: Turno que esta realizando el control de calidad (M matutino, V vespertino,
N nocturno, E especial)
Egreso: Numero de egreso inicial con que se recibe el turno.
Ingreso: Numero de egreso final con que se recibe el turno.
Cirugía con células: Nombre completo del paciente y registro.

Productos liberados: Numero, tipo de producto y estado en que se encuentra
(pendiente, liberados)
Pacientes: Nombre del paciente y registro
Refrigeradores: Si están en orden o no.
Entrega: Firma o/y sello, rubrica del Químico(a) que entrega el turno.
Recibe: Firma o/y sello, rubrica del Químico(a) que recibe el turno.
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CAL-31-D CONTROL DE ASIGNACION DE SANGRE
Fecha: Día, mes y ano en que asigna la sangre

Registro: Numero de registro del donador (paquete).
Nombre del donador: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del
donador.
Producto: Tipo de producto solicitado (CE, CP, etc )
GPR. Y Rh: Grupo sanguíneo y Rh del donador.
Volumen: Volumen que contiene el paquete.
Realizo Prueba: Químico que realiza la asignación del producto.

Resultados: Compatible o no compatible.
No. Solic.: Numero y turno de la solicitud.
Proced.: -------------------
Observaciones: Cuando existe alguna especificación.
Registro: Numero de registro del paciente.
Nombre del receptor: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del

paciente.
GPO Y Rh: Grupo sanguíneo y Rh del paciente.
Departamento y/o Servicio: Servicio que solicita el producto.
Cama: Numero de cama en que se encuentra el paciente.
Fecha ent.: Día, mes y ano en que se entrega el producto solicitados
Hora entr.: Hora en que se entrega el producto solicitado.
Volumen: Volumen real que se entrega.
Recibió: Personal que recibe el producto.
Entrego: Químico que entrega el producto.
No. Salida: Numero que se le asigna de salida y turno.
CAL -31-C ENTREGA DE RESULTADOS DE ESTUDIOS ESPECIALES
Fecha: Día, mes y ano en que se realiza el estudio.

Servicio: Departamento que solicita el estudio.
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Nombre del paciente: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del

paciente.
Estudios solicitados: Prueba Que se solicita se realice
Medico, Nombre, firma, clave: Rubrica o/y firma y clave del personal que recoge
los resultados del estudio.
CAL – 31- G RELACION DE PRODUCTOS ENVIADOS A RADIOTERAPIA
Fecha: Día, mes y ano en que se lleva a radiología.

Tipo de producto: Tipo de producto a radiar (CE, CP)
Grupo: Grupo sanguíneo y Rh del producto a radiar.
Registro: Numero de registro de los productos a radiar.
Hora de entrega: Hora en que se entrega el producto a radiología.
Hora de recoger: Hora en que se puede pasar a recogerlo.
GRUPOS EN EL TURNO VESPERTINO
Fecha: Día, mes y año en que se determino el grupo sanguíneo y Rh al donador.

Muestra: # de registro del donador.
Grupo: Grupo sanguíneo del donador.
Rh: Fenotipo del donador.
Observaciones: ---------------------------
CAL- 31-I PRODUCTOS REGRESADOS
Fecha: Día, mes y año en que se regresa el producto.

Hora: Hora en que se regresa el producto
Registro del producto: # del registro del producto que se regreso.
Grupo: Grupo sanguíneo del producto devuelto.
paciente.
Registro del paciente: # de registro del paciente.
Servicio: Departamento donde se devuelve el producto.
Regresa: Personal que regresa el producto.
Recibe: Químico que recibe el producto.
Causa: Motivos por que el producto es devuelto.
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CAL-31-J BITACORA DE ESTADISTICAS INMUNOHEMATOLOGICAS
Fecha: Día, mes y año en que se realiza la estadística.

M: Turno Matutino.
V: Turno Vespertino.
N: Turno Nocturno
# REQ.: # de requisiciones.
S ABO: # de Pruebas de grupos sanguíneos en el sistema ABO realizadas.
SUB GRUPO: # de subgrupos realizados.
S Rh: # de análisis para conocer el Rh
Fenotipo: # de pruebas para conocer el fenotipo.
Fenotipo otros: # de otras pruebas que se realizaron para conocer el fenotipo.
C.D.: # de Coombs directo realizados.
C.D. ESP.: # de Coombs directo especial realizados.
Rastreo de Ab: # de Rastreo de Anticuerpos que se realizaron.
Titulo de Ab: # de titulaciones de anticuerpos se realizaron
Eluido: # de eluidos realizados.
Adsorciones: # de adsorciones realizadas.
Aglutininas A: # de aglutininas A se realizaron.
Aglutininas B: # de aglutininas B se realizaron.
RPR: # de Pruebas RPR se realizaron.
C.E.: # de Concentrados Eritrocitarios entregados.
C.P.: # de Concentrados plaquetarios entregados
P.F.: # de Plasmas Frescos entregados.
G.A.H.:
F VIII: # de Factor VIII

F IX: Factor IX
ALB. HUMANA: Albúmina humana
C.E. FRACC.: # de Concentrado Eritrocitario que se fraccionaron.
C.P. FRACC.: # de Concentrado plaquetario que se fraccionaron.
C.E. LAVADO: # de Concentrado Eritrocitario que se lavaron.
C.E. FILTRADO: # de Concentrado Eritrocitario que se filtraron.
C.E. REGRESADO: # de Concentrado Eritrocitario devueltos.
P.F. REGRESADO: # de Plasma Fresco devuelto.
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C.P. REGRESADO: # de Concentrados plaquetarios revueltos.

VALORACIONES: Valoraciones realizadas.
RESPONSABLE: Químicos responsables del turno.
CAL-31-K PACIENTES CON PROBLEMAS DE TRANSFUSION
Fecha: Día, mes y año en que se suscita el problema de transfusión.

Reg. pte. : # del registro del paciente.
Nombre pte.: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre (s)del paciente.
Gpo: Grupo sanguíneo del paciente.
Dx: Diagnostico especificado por el Médico.
Gpo a trans: Grupo sanguíneo a transfundir.
Observaciones: Cualquier observación que sea importante en cuanto a la
transfusión realizada.
CAL-31- L BITACORA DE SALIDA DE PRODUCTOS A OTROS BANCOS
La libreta debe incluir el # de registro del producto a salir, el tipo de producto, el

nombre completo del disponente, el volumen del paquete, el grupo sanguíneo y
Rh y la fecha de extracción del producto junto con la de caducidad.
Una vez que el Químico saca la relación le entrega una copia a la Secretaria para
que llene el formato A-14-01 o F-A-14-01.
REGISTROS
Todas las Bitácora de este procedimiento se resguardan en archivo activo durante

1 año y en archivo muerto 5 años.
CAL-02-B
Fecha: 3 Febrero-2010
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento para valoración médica
Nombre: Dr. Carlos E. Cob Nombre: Dra. Margarita L. Nombre: Dra. Dinora V
Sosa Medina Macías Aguilar Escobar
Fecha: 3-Febrero-2010 Fecha: 3-Febrero-2010 Fecha: 3-Febrero 2010
CAL-02-B
Fecha: 3 Febrero 2010
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se cambia formato de Historia Clínica 03 03/02/10

y programa de cómputo
CAL-02-B
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Una vez que al donador se le toman los datos de identificación, se imprime la

Historia Clínica, el candidato a donador firma la carta de consentimiento
informado, se registra en la Bitácora CAL-20 B, se valoran las venas,
somatometría, signos vitales y toma de muestra (Ver procedimiento CAL-20, CAL
20-B, CAL-30 y CAL-43) se procede de la siguiente manera:
CAL-02-B
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El Medico toma del área de recepción la ficha de

identificación del donador M-3-0-23 (y la Historia Cliníca M-
3-0-10-a; sólo en caso de procedimiento manual)
De la ficha de identificación del donador M-3-0-23 observa el nombre

completo del donador, lo llama y le indica que pase al consultorio donde
se le realizará la valoración medica
El médico, supervisa que los parámetros de signos vitales

registrados, por el enfermera, en la ficha de Identificación, esten
dentro de las especificaciones marcadas por la NOM-003-1993, Así
como también que los resultados de la biometría hemática que se
realizó en el área de toma de muestras esté acorde con los
parámetros que establece la NOM-003-1993. Posteriormente
interroga, explora y elabora Historia Clínica (cuando el procedimiento
es manual llena formato de Historia Clínica M-3-0-10-a), ó ingresa
datos en el sistema de cómputo (Programa Winlab)
Médico verifica datos de somatometría, signos vitales e ingresa, los

parámetros emitidos de toma de muestra de la biometría hemática en el
apartado del sistema de cómputo (Datos del Donante) y determina si el
candidato cumple con los requerimientos para donar sangre.
No Apto El médico determina que el

candidato no es apto para donar
sangre y anota causa de rechazo
en la Historia Clínica así como en
el sistema de cómputo busca y
graba la (s) causa (s) por la (s)
cual(es)el donador NO ES APTO
Si es Apto
En el sistema de cómputo (en Datos del Donante) determina que el donador Médico informa causa(s)
es aceptado para donar sangre y lo graba. Deposita en el buzón del área de de la exclusión para donar
Recepción la Histotia Clínica con la Biometría Hemática para que sea sangre
tomado por la recepcionista para asignar número de unidad, imprimir
etiquetas y entregar todos estos documentos a la enfermera para continuar
con el procedimiento de extracción de sangre total o de componentes
sanguíneos por aféresis. (Ver Procedimiento CAL-43).
El Médico informa al
personal de Recepción y
Trabajo social para
evaluación social y
reprogramación de cita.
Les entrega la Historia
Clínica
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FICHA DE IDENTIFICACION DEL DONADOR
CAL-02-B
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HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR
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REGISTROS
Bitácora de entrega y recepción de Historias Clínicas del donador de sangre y

componentes sanguíneos.
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Fecha: 12-Julio-2011
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NOMBRE: DR. ISMAEL NOMBRE: DRA. MARGARITA NOMBRE: DRA. DINORA

HERNÁNDEZ MONTIEL L. MEDINA MACÍAS V. AGUILAR ESCOBAR
Fecha: 12-Juulio-2011 Fecha: 13-Juliol-2011 Fecha: 13-Julio- 2011
CAL-02-B
Fecha: 12 Julio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se integra el sistema Kanban.

04 08/04/11
Se anexa firma de la evaluación de la
biometría hemática así como la
impresión del formato de historia
clínica electrónica M-3-0-10 a y b por
el médico responsable.
Se integra el CAL-64 Procedimiento

de manejo de candidatos a donación
No Aptos del área de selección de
disponentes en este procedimiento,
así mismo se da de baja en la lista
maestra.
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El médico toma la hoja de Ficha de identificación del Kanban ubicado en el área

de recepción y procede de la siguiente manera:
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El Medico toma del Kanban ubicado en el área de valoración médica la ficha

de identificación del donador M-3-0-10-(a y b) y el resultado de la biometría
hemática (BH) en caso de procedimiento manual también se incluye la
Historia Cliníca M-3-0-10-(a y b)
De la ficha de identificación del donador M-3-0-10a el médico observa el

nombre completo del donador, lo llama y le indica que pase al
consultorio donde se le realizará la valoración medica. En caso de
sistema manual los datos los toma de la Historia Clínica
El médico, verifica que los parámetros de signos vitales registrados,

por la enfermera, en la ficha de Identificación, estén dentro de las
especificaciones marcadas por la NOM-003-1993, Así como también
que los resultados de la biometría hemática que se realizaron en el
área de toma de muestras estén acordes con los parámetros que
establece la NOM-003-1993, y anota su nombre, clave y firma.
Posteriormente interroga, explora y elabora la Historia Clínica,
ingresa los datos en el sistema informático de banco de sangre ó
cuando el procedimiento es manual llena formato de Historia Clínica
M-3-0-10-(a y b).
El médico emite el diagnóstico y determina si el candidato cumple con

los requerimientos normativos para realizar la donación de sangre o de
aféresis.
Si el disponente es APTO ó NO APTO lo registra en el sistema
informático de banco de sangre, si es Apto imprime la historia clínica;
anota su nombre, clave y firma de responsable en la ficha de
identificación (formato M-3-0-23) y en la historia clínica (formato M-3-0-
10-a y b) y solicita la firma al disponente
No Apto El médico anota causa de rechazo

en la ficha de identificación formato
M-3-0-23 y en la Historia clínica en
el formato M-3-0-10-(a y b) del
sistema informático de banco de
sangre (y manual)
Si es Apto
El médico informa al
disponente la causa de
rechazo
Deposita en el Kamban del área de Recepción la Ficha de Identificación,

impreso de biometría hemática y la Historia Clínica para que en recepción
se le asigne número de unidad e impresión de etiquetas para
posteriormente colocar todos estos documentos en el Kamban del área de El médico informa trabajo
flebotomía ó aféresis según corresponda y proceder a la extracción de social y a recepción que
sangre total (Ver CAL-46) o de componentes sanguíneos por aféresis. (Ver el disponente no es apto,
Procedimiento CAL-50) para posterior evaluación
social y/o reprogramación
de cita
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FICHA DE IDENTIFICACION DEL DONADOR M-3-0-23 (PROCEDIMIENTO

MANUAL)
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HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR M-3-0-10a

(PROCEDIMIENTO MANUAL)
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HISTORIA CLINICA DE CANDIDATO A DONADOR M-3-0-10b

(PROCEDIMIENTO MANUAL)
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FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE (M-0-3-23) SISTEMA

INFORMÁTICO DE BANCO DE SANGRE
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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HISTORIA CLÍNICA (SISTEMA INFORMÁTICO DE BANCO DE SANGRE)
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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En el caso de los candidatos a donación No Aptos:
 La ficha de identificación y/o la Biometría Hemática impresas, se archivan

durante 3 meses como indica la NOM-003-SSA-1993
 La historia clínica permanece resguardada en el sistema informático de
banco de sangre.
En el sistema quedan registrados los candidatos a donación excluidos

permanentemente que por no cumplir con los requisitos no serán aceptados como
donadores en caso de solicitar nuevamente ser candidatos.
REGISTROS
Bitácora de entrega y recepción de Historias Clínicas CAL-50D se almacena en el

archivo durante 3 meses.
Bitácora CAL-20B (Registro de donadores), se almacena en el archivo durante 3
meses.
Ficha de Identificación (M-3-0-23) (Manual y sistema informático de banco de
sangre), se almacena junto con la historia clínica.
Historia Clínica M-3-0-10-(a y b) (Manual y sistema informático de banco de
sangre). Cuando el donador es Apto dichos registros permanecen durante 5 años
en archivo activo y 5 años en archivo muerto.
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de solicitud y entrega de estudios
en el laboratorio
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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en el laboratorio
Ninguno 0 29/09/03
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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en el laboratorio

Los diferentes estudios que se realizan en el Área de Inmunohematologia del
laboratorio se solicitan de la siguiente manera:
El Médico tratante solicita al Área de Inmunohematologia los estudios con los siguientes documentos:
-El formato A-13-14-07 original y copia donde indica los estudios que requiere
-Y la muestra del paciente identificada (Registro y nombre completo del paciente, fecha y hora de toma de muestra)
La muestra puede ser entregada en el Área de Inmunohematologia por el Médico tratante, Residente, personal paramédico y mensajeros
El personal de Inmunohematologia revisa el original y la copia de los formatos que le entrega y verifica que coincida el nombre que tiene
el formato A-13-14-07 y la muestra , tambien verifica que la muestra sea la adecuada para los estudios solicitados . Si la identificación de
la muestra o el tipo de muestra no es la correcta se procede a retener la muestra y solicitar una nueva muestra identificada correctamente.
El personal de inmunohematologia entrega los formatos al medico, enfermera o mensajero y le pide que anote en la bitácora de solicitud
de productos CAL-28-A los datos que se le solicitan y asigna el # consecutivo del día y una inicial según el horario (M para matutino, V
para vespertino, N para nocturno y E para sabado, domingo o dias festivos) en el formato A-13-14-07 .
Solo en caso de duda se consulta con el Jefe de Laboratorio o con el Médico especialista
SI
Se esta de acuerdo con lo

solicitado lo indica en el
NO formato con un SI en la parte
superior derecha
Se cancela su realización, y se notifica al servicio solicitante
El personal de inmunohematologia realiza las pruebas solicitadas
Una vez que el personal de inmunohematologia realizo los estudios solicitados anota en la bitácora de estudios especiales CAL-42-A los
datos que se le solicita y procede a anotar los resultados en el original y en la copia del formato A-13-14-07 y guardar en el folder de
estudios especiales la copia del formato
Cuando el Médico, enfermera o mensajero solicita los resultados se le indica anote en la Bitacora de entrega de resultados de estudios
especiales CAL-42-B lo que se le solicita y firme de entregado y se le entregan la copia del formato A-13-14-07 con los resultados.
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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en el laboratorio
El formato A-13-14-07 es llenado por el Médico que solicita el producto y se

La bitácora CAL-28-A es llenada por el Médico que solicita el producto y se

muestra en el Procedimiento CAL-28.
El formato A-13-14-07 que se entrega al laboratorio como solicitud del estudio

contiene al frente en la parte superior izquierda un recuadro en blanco donde se
plaquea el carnet o se le escriben los datos de la persona a la que se realizara el
estudio.
Cualquiera de los datos que no se encuentren en el formato A-13-14-07 y no sean

esenciales para realizar el estudio se puede quedar el espacio vació o cancelar
con una raya
La bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia CAL-42-A debido a su

tamaño no se muestra dentro de este procedimiento.
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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en el laboratorio
La bitácora de Estudios especiales de Inmunohematologia CAL-42-A se llena

de la siguiente manera:
Fecha: Día, mes y ano en que se solicita el estudio.

Registro: # asignado por el INP
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre del
paciente o donador a quien se le solicita se le realicen
los estudio.
Edad: Se calcula de la fecha de nacimiento que contiene el
carnet
Sexo: M masculino y F femenino y puede ser obtenido del
carnet.
Depto. y/o servicio: Se encuentra en el formato A-13-14-07
Cama: # de cama donde se encuentra el paciente
Diagnostico: Se encuentra en el formato A-13-14-07
Datos referentes a la madre
G: # de gesta es el paciente
P: # de parto es el paciente
A: # de abortos
RHOGAM: Vacuna anti-D

Transfusión: Si existen transfusiones anteriores
Fecha: Si existe alguna transfusión la fecha en que se le realizo
Estudios de Laboratorio
Bilis: Si se requiere este resultado para los estudios que se
van a realizar debe ser incluido por el medico que
solicita los estudios.
HTO: Si se requiere este resultado para los estudios que se

HB: Si se requiere este resultado para los estudios que se
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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en el laboratorio
RETIS: Si se requiere este resultado para los estudios que se

TP: Si se requiere este resultado para los estudios que se
P/G: Si se requiere este resultado para los estudios que se
SABO
Grupo: Estudio que se puede solicitar al laboratorio.
Subgrupo: Estudio que se puede solicitar al laboratorio.
SRh
D, Du, Rh salino, C,
c, E, e: Estudios que se puede solicitar al laboratorio.
Coombs
IgG-C3d, IgG, C3d,
IgM, Titulo, Potencia: Estudios que se puede solicitar al laboratorio.
Rastreo de anticuerpos irregulares FSABO

Suero, Eluido Absorción ( Positivo o Negativo),
Especificidad, Titulo, Potencia:
Estudios que se puede solicitar al laboratorio.
Fenotipo
P, M, N, S, s, Fya,
Fyb, Jka, Jkb, Lea,
Leb, K, k, Dia: Estudios que se puede solicitar al laboratorio.
RPR
Positivo, Negativo,
Titulo: Estudios que se puede solicitar al laboratorio para el
análisis de sífilis.
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 67 de 7
en el laboratorio
Ab inmunes
Anti A y/o Anti B: Estudios que se puede solicitar al laboratorio para
conocer la presencia de anticuerpos.
La bitácora de Entrega de resultados de Estudios especiales de

Inmunohematologia CAL-42-B se muestra a continuación:
BITACORA DE ENTREGA DE RESULTADOS DE ESTUDIOS ESPECIALES DE INMUNO HEMATOLOGÍA
CAL-42-B
Personal que recoge el
Nombre del Estudio
Fecha Registro resultado
paciente solicitado
Nombre/Firma/clave
La bitácora de Entrega de resultados de Estudios especiales de

Inmunohematologia CAL-42-B se llena de la siguiente manera:
Fecha: Día, mes y año en que se realiza el estudio.

paciente.
Estudios solicitados: Prueba Que se solicita se realice
Personal que recoge el resultado, Nombre, firma, clave: Rubrica o/y firma
y clave del personal que recoge los resultados del estudio.
REGISTROS
El formato A-13-14-07 se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
La bitácora CAL-42-A se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
La bitácora CAL-42-B se debe almacenar 5 año en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
CAL-02-B
Instituto Nacional de Pediatría ISBN: 978-968-9170-17-4
Nivel de Revisión: 04
Página 68 de 6
Procedimiento de toma de muestra
CAL-02-B
Página 69 de 6
Se modifica procedimiento con datos 04 07 de Octubre de 2009

administrativos actualización del
equipo automatizado de Biometría
Hemática.
CAL-02-B
Página 70 de 6
Una vez que al donador se le realiza la valoración DE SIGNOS VITALES Y

SOMATOMETRIA (Ver procedimiento CAL-30), el Químico/Laboratorista del área de
toma de muestras de Banco de Sangre toma la Ficha de Identificación del Donador
(Formato M-3-0-23) del “Buzón de valoración del disponente”, que se encuentra en
recepción y se procede de la siguiente manera:
CAL-02-B
Página 71 de 6
CAL-02-B
Página 72 de 6
El formato F-A-14-26 se muestra a continuación:
BANCO DE SANGRE
CLASIFICACION DE GRUPOS ABO Y Rh0 (D) RESULTADOS

SUBGRUPOS DE A S-RH
No. DE ANTI-
ANTI-A ANTI-B AUTO GR-A1 GR-A2 GR-B GR-O LEC.-A1 ANTI-H ANTI-D CRho GRUPO Hto Hb LEUCO PLAQ RAiFSABO HORA REQ. HORA RES
UNIDAD AB
0
F-A-14-26
CAL-02-B
Página 73 de 6
Resultados:
Hb (Hemoglobina): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY
Hto (Hematocrito): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY
LEUCO (Leucocitos):Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY
PLAQ (Plaquetas): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados del CELL DYN RUBY
Nota 1: En el equipo CELL DYN RUBY se debe correr controles diariamente antes de
su uso (Ver procedimiento CAL-14).
Nota 2: Los tubos deben contener el nombre completo del paciente, número de registro,
número de toma de muestra y fecha.
REGISTROS
F-A-14-26 Se debe almacenar en el archivo activo durante 5 años y en el archivo muerto

5 años.
CAL-02-B
Fecha: 27 Junio del 2011
Página 74 de 5
CAL-02-B
Fecha: 27 de Junio del 2011
Página 75 de 5
Se inserta el nuevo formato M-3-4-10 05 27 de Junio del 2011
CAL-02-B
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Una vez que al donador se le realiza la valoración DE SIGNOS VITALES Y

SOMATOMETRIA (Ver procedimiento CAL-30), el Químico/Laboratorista del área de
toma de muestras de Banco de Sangre toma la Ficha de Identificación del Donador
(Formato M-3-0-23) del “Buzón de valoración del disponente”, que se encuentra en
recepción y se procede de la siguiente manera:
CAL-02-B
Página 77 de 5
CAL-02-B
Página 78 de 5
El formato M-3-4-10 se muestra a continuación:
El formato M-3-4-10 se llena de la siguiente manera:
CAL-02-B
Página 79 de 5
Resultados:
Hb (Hemoglobina): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados
Hto (Hematocrito): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados
LEUCO (Leucocitos):Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados
PLAQ (Plaquetas): Anotar el dato que aparece en la hoja de resultados
Nota 1: En el equipo Automatizado de Biometrías se debe correr controles diariamente

antes de su uso (Ver procedimiento CAL-14).
Nota 2: Los tubos deben contener el nombre completo del paciente, número de registro,
número de toma de muestra y fecha.
REGISTROS
No asociados
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de separación y almacenamiento
de muestras
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 81 de 3
de muestras
Ninguno 0 29/09/03
CAL-02-B
Fecha: 29 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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de muestras
El Personal Auxiliar del laboratorio del Banco de sangre que se encarga de separar y
almacenar las muestras analizadas lleva a cabo el siguiente proceso:
De las muestras obtenidas en el área de sangrado (en enfermería) y que son utilizadas en el área de serologia se
realiza la separación y almacenamiento de la muestra.
Los tubos de sangre total (tapon rojo) se centrifugan en la centrifuga Hettich Eba8s, de 5 a 10 minutos, de 3500 a
5500 rpm, y de 70 a 100% de potencia.
Los tubos de biometría hemática (tapón morado) se separan en la centrifuga Sero-fuge durante 3 minutos a su
máxima velocidad.
Coloca las muestras separadas en una gradilla y las entrega al área de serología.
Para realizar el almacenamiento:
Se marca el criotubo (s) con el números de registro del día y/o Nombre completo del paciente o # del donador
Se toma el tubo que contiene la muestra y se trasvasa al criotubo identificado con ese mismo # o Nombre,
asegurandose solo pase el suero, se cierra y se coloca en una gradilla de unicel
Una vez que se a terminado de vaciar todas las muestras, se saca la gradilla del refrigerador observando que sea la
que contenga la última muestra colocada un día anterior.
Una vez que se encuentran ordenadas se resguardan en el refrigerador a -70 C
El Auxiliar de laboratorio marca las gradillas de unicel para poderlas guardar en el

refrigerador con el # correspondiente visible para que sea posible identificarlas
fácilmente y las coloca por # consecutivo.
REGISTROS
No existen registros asociados a este procedimiento
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de lavado del material
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Ninguno 2 27/07/2006
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El Personal Auxiliar de laboratorio del Banco de sangre encargado del lavado de

los diferentes tipos de material lleva a cabo el siguiente proceso:
El Auxiliar del laboratorio prende el horno a una temperatura aprox. de 120º C.
Se toman los diferentes botes de las áreas de Pruebas cruzadas y grupos sanguineos y se verifica que el material haya estado en
contacto con la solución que contiene el bote. Si no es así se sumergen durante 10-15min. Aproximadamente para que se lleve a cabo
la desactivación.
El bote que contiene las pipetas se vacia en la tarja y se

seleccionan El bote que contiene los tubos se vacia en la tarja y se
-Las rotos: las separo o tiro al contenedor de material seleccionan
peligrosos. -Los rotos: se separan y tiran a una caja de cartón
-Las que tienen presencia de contaminación las pongo al -Los que tienen presencia de contaminación los pone al
chorro del agua y las ordeno para que la punta de todas quede chorro del agua y los talla con el escobillon uno por uno
hacia el mismo lugar. -Los que presentan una contaminación mayor se ponen a
-Las que presentan una contaminación mayor se ponen a remojar en una mezcla de agua/jabón/ cloro
remojar en una mezcla de agua/jabón/ cloro.
Una vez que las pipetas o tubos contaminados se han remojando se enjuagan uno por uno
(si se cree necesario) en el chorro del agua
Si alguno de los tubos presentara algun tipo de marca con plumón se les talla con el sacate hasta borrarla en su totalidad .
Cuando ya se tallarón se enjuagan con agua a presión, se sacuden y se unden en una charola que contiene agua destilada , hasta que
se observe que no contienen jabón.
Las pipetas se sacuden y se colocan boca a arriba en una canastilla y los tubos boca a bajo .
Una vez que se termina el tiempo en la estufa se ponen los guantes adecuados y se saca la canastilla , se deja enfriar y se coloca el
material en su lugar.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Nota: Observar que el material este en contacto con la mezcla agua/jabón/cloro

antes de lavar. Si no fue así hundir durante 30-45 minutos aproximadamente para
desactivarlos.
REGISTROS
No existen registros asociados a este procedimiento.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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INDICACIONES DEL LAVADO DE MATERIAL DEL EQUIPO VITROS ECiQ
1. -Inactivar con alcohol etílico durante 30 minutos
2. Enjuagar con agua de la llave
3. Dejar en una mezcla de agua-jabón al 2 % por aproximadamente 15

minutos.
4. Enjuagar con abundante agua de la llave y posteriormente con agua

destilada.
5. Dejar boca-abajo para escurrir y secar.
6. Colocar el material en el lugar correspondiente.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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TABLA PARA PREPARAR MEZCLA CLORO-AGUA AL 1:10
LTS. AGUA ml CLORO VOL. FINAL

0.900 100 1 LT
1.800 200 2 LT
4.5 500 5 LT
9.0 1000 10 LT
13.5 1500 15 LT
TABLA PARA PREPARAR MEZCLA JABON-AGUA AL 2%
LTS. AGUA ml JABON VOL. FINAL

0.980 20 1 LT
1.960 40 2 LT
4.900 100 5 LT
9.800 200 10 LT
10.780 220 11LT
11.760 240 12LT
REGISTROS
CAL-02-B
Fecha: 05 de Diciembre 2011
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Procedimiento de Extracción Sanguínea
Nombre: Enf. Martha Nombre: Dra. Margarita L. Nombre: Dra. Dinora Aguilar
Concepción Jiménez Martínez Medina Macías Escobar
Fecha: 1de diciembre 2011 Fecha: 5 de diciembre 2011 Fecha: 5 de diciembre 2011
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se detalla el procedimiento de 08 5 de diciembre de 2011

asepsia
Se ajusta el sistema para la toma de 08 5 de diciembre de 2011

muestras para la determinación de
grupo sanguíneo y serología.
Se agrega la captura en la bitácora

electrónica de cada donador. 08 5 de diciembre de 2011
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Una vez que al candidato a donación se le ha realizado la toma de la muestra (Ver

procedimiento
CAL-43) y cumple con las especificaciones publicadas en el área se procede así:
La Enfermera administrativa recibe del área de recepción la Historia clínica de candidatos a donación (cuando
el procedimiento es manual, también el formato M-3-0-10-a y b), la Ficha de Identificación del donador,
formato M-3-0-23, las etiquetas que salen del sistema de cómputo (en procedimiento manual se usa la etiqueta
M-3-0-30), Y hoja de resultado de Biometría Hemática.
De la Historia clinica de candidatos a donación observa el nombre completo del donador, lo llama y le
indica que pase a la sala donde se le realizará recolección sanguínea. Verifica que coincida
Identificación Oficial con el donador y los datos de la Historia Clínica
Las enfermeras solicitan al donador le indique en que brazo le fue tomada la muestra, le pide se
acomode en el reposet
Se le muestra al donador que el material que se va a utilizar esta cerrado , esteril y nuevo. Se le dá a
leer el folleto informativo: El que tenga un amor ….. Que lo cuide.
Las Enfermeras verifican el nombre del donador de la Historia Clínica y Número de Unidad asignado,
coloca las etiquetas en los tubos, lila para la determinación de grupo sanguíneo y rojo para la
serología (ó transcribe los datos a las bolsas cuando el sistema es manual)
La enfermera que realiza la flebotomía corrobora que los datos del donador sean correctos verificándolos con
la identificación con fotografía. Coloca el torniquete en el brazo, identifica la vena en donde se realizará la
flebotomía y realiza el procedimiento de asepsia en el siguiente orden: jabón antiséptico, iodopovidona y
alcohol. Posteriormente realiza la flebotomía y se fija la línea al brazo con tela adhesiva, indica al donador
abrir y cerrar el puño de la mano durante el tiempo que dure la extracción sanguínea.
La pantalla y la alarma de la balanza indica el llenado adecuado de la bolsa (450 a 480 ml +/- el 10%
dependiendo de la bolsa que esté en uso), automáticamente se cierra el sistema y no deja pasar más sangre,
o se pinza la línea de extracción y se retira la aguja y la bolsa (se da máximo 10 minutos y si no se obtiene el
volumen deseado retira la aguja y la bolsa).
Las muestras sanguíneas se tomarán dependiendo de la bolsa que esté en uso al inicio o al final de la
extracción, respectivamente. Primero se toma la muestra del tubo con el tapón color lila (grupo sanguíneo) y
luego el tubo de tapón color rojo o amarillo (serología).
Se pinza la línea y se retira la aguja, colocando inmediatamente una torunda de algodón seca, dando indicación
al donador de que permanezca acostado con el brazo suavemente doblado sin hacer presión hasta que le den la
indicación de levantarse. La enfermera que retiró la aguja sella y corta la línea de la misma así como la línea del
vacutainer, depositando el material punzocortante en el contenedor de RPBI. Anota la hora de inicio y término
del sangrado. Homogeniza la línea 2 veces y en el sellador dieléctrico se realizan las secciones para los pilotos
para su uso en el laboratorio. Se coloca la bolsa en el refrigerador (Temperatura 1 a 6°C) para que el personal
de laboratorio la traslade al mismo.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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La enfermera da las indicaciones a los donadores de permanecer acostados aprox. 10 minutos. Coloca parche adhesivo
en el sitio de la flebotomía y vendaje ligeramente compresivo en el área. Entrega etiqueta de autoexclusión al donador
(ó talón en sistema manual) Para que de acuerdo a lo que leyó del folleto marque lo que considere si su sangre es
segura “si o no”. Pregunta al donador como se siente:
Se suspende la extracción si estuviera en este

¿Se siente proceso e inmediatamente se avisa al médico
Si bien?
No responsable del área quien dará indicaciones
para el manejo del evento
Le indica que se puede levantar y mantenga doblado el brazo durante 20 minutos más, deposite la etiqueta en el
buzón y pase a tomar un refrigerio para posteriormente pasar a recepción y registrar su hora de salida, pedir su
comprobante de donación con la trabajadora social (ver procedimiento CAL-19) , el cual se imprime del sistema de
cómputo (o comprobante con formato M-3-0-25, cuando se emplea sistema manual). Despide al donador y da la
gracias.
La etiqueta (o talón, en procedimiento manual) de autoexclusión, permite al donador,

informar si considera que su sangre es segura o no es segura
¿Mi sangre
SI no
es segura?
Las enfermeras registran la Autoexclusión y el Producto

La enfermera llena la Bitácora CAL-46 A no Conforme por defecto de recolección en la bitácora
(Disponentes y eventos adversos) con los datos CAL-46-B.
de los donadores y coloca la etiqueta de Colocan la etiqueta de Producto No Conforme
autoexclusión en el ángulo superior izquierdo de la inmediatamente en la bolsa de sangre total (etiqueta
ficha de identificación del donador fluorescente) ; Notifican al químico responsable y al
personal de fraccionamiento para que le de el manejo
de producto de conforme.
Al final de la jornada, las enfermeras registran en la Bitácora 46-A los datos de todos los
donadores del día y eventos adversos a la donación (en caso de que se presenten). Captura
los datos en la bitácora electrónica de cada donador y entrega los documentos de los
donadores efectivos al médico asignado.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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VIGILANCIA MÉDICA
En cuanto a la permanencia de los médicos en el área de selección de
disponentes se determina lo siguiente:
1. Durante el procedimiento de toma de muestra, extracción de sangre total y
aféresis cualquier reacción adversa será atendida de manera inmediata por
la persona que realiza el procedimiento. (enfermera o químico)
2. La enfermera o químico, avisará al médico.
3. Los médicos deben permanecer en el área, durante los procedimientos
mencionados.
4. cuando algún médico requiera ausentarse del área, avisará y encargará a
otro médico para que esté pendiente de los donadores.
BITÁCORAS Y FORMATOS RELACIONADOS A ESTE PROCEDIMIENTO
CAL-46-A
BITACORA DE DISPÓNENTES Y EVENTOS ADVERSOS A LA DONACIÓN
Los rubros que contiene la Bitácora CAL-46-A, son los siguientes:
Numero de Sexo HORA DE HORA DE AUTOEXC No de OBSERVACIONES ENFERMERA

FECHA Donadores INICIO TERMINO LUSION UNIDAD Y
Femenino Masculino EVENTOS
ADVERSOS A LA
DONACIÓN
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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BITÁCORA DE REGISTRO DE PRODUCTO NO CONFORME
Los rubros que contiene la Bitácora CAL-46-B, son los siguientes:
Numero de NOMBRE CAUSA DE LA NO NOMBRE Y FIRMA DE NOMBRE Y FIRMA DE LA

FECHA unidad DONADOR CONFORMIDAD ENFERMERA QUE PERSONA DEL
ENTREGA LABORATORIO QUE
RECIBE
Los datos que solicita la Bitácora son los siguientes:

Fecha: se anota la fecha actual, del día en el se esta llevando a cabo el
procedimiento
Número de unidad: se anota el número que se asignó en toma de muestra y
que se encuentra en el extremo superior derecho de la ficha de Identificación
con formato M-3-0-23
Nombre del Donador: se anota el nombre del donador que aparece en la parte
superior de la Historia Clínica y que coincide con el número de unidad que
tiene la etiqueta o talón de autoexclusión.
Causa de la No Conformidad: Se detalla el motivo por el cual no cumple con
los requisitos del producto.
Nombre y firma de la Enfermera que entrega: Se anota el nombre y la firma de
la enfermera quien detectó el producto no conforme.
Nombre y firma del personal de laboratorio que recibe: Se anota el nombre y la
firma de la persona del laboratorio que recibe el producto no conforme.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Talón de autoexclusión se muestra a continuación:
Talón del sistema informático de Talón sistema Manual

Banco de Sangre
El Talón de autoexclusión se debe llenar de la siguiente manera:
DESPUES DE QUE HAYAS

DONADO SANGRE,
DEPOSITALO EN EL BUZON.
MI SANGRE:
SI ES SEGURA (Tacha aquí si consideras que tu

sangre SI es segura)
NO ES SEGURA (Tacha aquí si consideras que tu
sangre NO es segura)
No. DE REGISTRO: Número de unidad asignado

consecutivamente y se encuentra
en la bitácora de ingresos y
egresos.
Nota 1: El Personal del laboratorio debe recoger las muestras

identificadas y el formato M-3-0-30 previamente lleno.
Nota 2: Es importante revisar que la enfermera deje en

recepción los formatos M-3-0-10-a y b, M-3-0-23,
cupón de autoexclusión y el ticket de resultado de
toma de muestra.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 96 de 10
Nota 3: En el Procedimiento CAL-19 se indica como llenar el

formato M-3-0-25.
Nota 4: La bolsa de recolección de sangre no debe contener

burbujas mayores a 3mm de diámetro antes de ser
utilizada. Y debe de contener el sello que indica
PENDIENTE DE ESTUDIOS NO TRANSFUNDIR.
Nota 5: Las unidades marcadas con autoexclusiones

implican su destrucción al llegar a la sección de
fraccionamiento
ASEPSIA: En caso de que algún candidato a donar

Nota 6: sangre refiera ser susceptible a algún componente
que se utiliza para realizar al asepsia, previo a la
venopunción, se modificará el procedimiento,
eliminando la sustancia o solución a la que es
susceptible.
REGISTROS
CAL-46-A Bitácora de control de disponentes.
CAL-46-B.-La bitácora de control de autoexclusión
y efectos adversos a la donación , CAL-46-B No tiene Caducidad.
Cupón de autoexclusión se almacena en el archivo activo durante 5 años y en el
archivo muerto 5 años.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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ANEXO 1
CARACTERISTICAS DE REFRIGERIO A DONADORES
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 31 de Julio 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de Control de Calidad en los
diferentes hemocomponentes procesados en el laboratorio
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 100 de 22
Ninguno 0 31/07/03
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 101 de 22
En el área de Control de calidad aplicado a la sangre y sus componentes

obtenidos en el Banco de sangre del INP se realizan las siguientes pruebas:
A. CONCENTRADOS ERITROCITARIOS:
Determinación de Biometría hemática:
Conteo de leucocitos
Hematocrito
Hemoglobina
Control Bacteriológico
B. CONCENTRADOS PLAQUETARIO Y PLAQUETAFERESIS:

Determinación de Biometría Hemática:
Conteo de leucocitos
Cuenta de plaquetas:
Indices plaquetarios:
ADP
VPM
Control Bacteriológico
Determinación de pH
C. PRODUCTOS LEUCORREDUCIDOS:
Determinación de leucocitos residuales
Determinaciones acorde al tipo de producto estudiado
(Ver incisos A y B)
D. PLASMA FRESCO CONGELADO:

Determinación de Factores de Coagulación:
Factor I
Factor VIII
Factor IX
Determinación de proteínas totales
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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E. PLASMA DESPROVISTO DE FACTOR:

Determinación de Factor IX
Determinación de Proteínas Totales
F. CRIOPRECIPITADOS:
Determinación de Factor I
Determinación de Factor VIII
Este análisis se realiza en 8 productos (8 CE, 8 CP, 8 PFC, 8PSF, 8 GAH) de la

población captada mensualmente y en todo producto anormal.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CONTROL DE CALIDAD DEL CONCENTRADO ERITROCITARIO
El Químico de Control de calidad toma al azar el 1% o 8 Unidades (lo que sea mayor ) de los Concentrados eritrocitarios del mes en cuestión
obtenidos del refrigerador donde se resguardan para ser utilizados
Se colocan las bolsas que contienen el CE en la campana de extracción y se Identifica un tubo por cada producto con el # de registro que
presenta la bolsa que contiene el C.E. a analizar
Se coloca la bolsa que contiene el CE en agitación aproximadamente de 10-15 min. con una velocidad de 100- 120 RPM ( es importante que
la temperatura de la bolsa no suba demasiado).
La bolsa contiene 2 lineas. la que fue utilizada para realizar la extracción de la sangre y la otra es la que unía a las demás bolsas. Esta última
es la que se purga.
La homogenización entre el CE que contiene la bolsa y el que se encuentra en la linea es muy importante por que esta linea sera la vía de
extracción de la muestra. Se toma la punta de la linea de la bolsa con las pinzas de rodillo y se purga (se mueve la pinza en dirección de la
bolsa, para dejar pasar todo el CE que contiene y sin quitar la pinza se agita la bolsa sosteniendola en la palma de la mano) este proceso de
purga y agitación se realiza varias veces.
Se utiliza el conector esteril ( TERUMO STERILE TUBING WELDER TSCD) para unir una bolsa de transferencia con el fin de evitar habrir el
sistema y contaminarlo.
BOLSA DE TRANSFERENCIA BOLSA ORIGINAL CON EL

De la Bolsa de transferencia que contiene VOLUMEN REMANENTE:
aproximadamente con 50 ml se toma una se envia al servicio de bacteriologia
muestra para el estudio para su cultivo.
Se analizan las muestras en el Sysmex

KX-21N observando los resultados obtenidos
en la muestra y el tubo de leucocitos,
hemoglobina y hematocrito.
De la Historia clinica del donador se buscan

los valores iniciales de leucocitos,
hemoglobina y hematocrito para establecer la
eficiencia del producto.
Todos los datos obtenidos durante este

proceso se escriben en la bitácora de Control
de Calidad CAL-47-A y se anexa el ticket
obtenido del Sysmex KX-21N y se escriben
los datos indicados en la bitácora de Control
de Calidad Bacteriológico CAL-47-B
Los CE analizados se mandan al laboratorio

de bacteriología junto con el formato M-3-1-
06-a o el F-A-13-16-06 y
la bitácora CAL-47-B para que el personal de
bacteriología firme de recibido el producto.
Los resultados de bacteriología son enviados

al Jefe del banco de sangre y el Químico de
control de calidad los pasa a la bitácora
CAL-47-A
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Curva de actividad para dosificación de FACTORES en el equipo ORGANON

TEKNIKA COAG-A-MATE
Muestra biológica:
 Estándar liofilizado o
 Pool de plasmas citratados (mínimo 10)
Reactivos:
 Sustrato liofilizado deficiente en factor VIII
 Sustrato liofilizado deficiente en factor IX
 Tromboplastina parcial activad
 Trombina
 Cloruro de clacio 0.025M
 Buffer veronal (Owren)
Material:
 Micropipetas de 50, 100, 200 y 1000 µl
 Cubeta de plástico para el equipo de coagulación
 Gradilla metálica en cubeta de hielo
Condiciones:
 Sustratos, reactivos, controles y muestras de trabajo
mantenerlos en baño de hielo
 Sistema de reacción a 37°C
Nota: el pool de plasmas se obtiene de donadores, se recomienda que sean

mujeres (mayor concentración de factor VIII y/o IX).
En caso de no correr la curva el mismo día de la toma de muestra, se mantiene a -
35°C hasta por un año.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CURVA DE ACTIVIDAD O CONCENTRACION
Tubo 1(dilución 1/5)

Se adiciona 800microlitros de Buffer + 200microlitros de la muestra
Tubo 2 (dilución 1/10)

Se adiciona 500microlitros de Buffer + 500microlitros de la muestra del Tubo 1


se quitan 500microlitros después de homogenizar para que contenga la misma
cantidad que los demás.
Las diluciones utilizadas para la calibración de la curva de Fibrinogeno son las

siguientes:

Se adiciona 200microlitros de la estándar o control (≥360mg%) + 800microlitros de
Tampón Owren
Tubo 2 (dilución 1/10)

Se adiciona 100microlitros de la muestra+ 900microlitros de Tampón Owren

Se adiciona 100microlitros de la muestra + 1.9ml de Tampón Owren

Se adiciona 100microlitros de la muestra+ 2.9ml de Tampón Owren
Reactivos para reconstituir para la curva de Factor VIII, IX y Fibrinogeno:
STA Factor IX se reconstituye en 1ml de agua destilada.

Factor VIII Deficient plasma se reconstituye en 1ml de agua destilada.
Trombina se reconstituye en 5ml de agua destilada.
PTT Reagent se reconstituye 30min. antes de ser utilizado.
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El Patrón de Fibrinógeno se reconstituye en 1ml de agua destilada.
Coagulación
La Prueba de coagulación se realiza para los siguientes productos:
Al Plasma fresco congelado se le realiza Factor VIII, IX y Fibrinógeno.

Al Plasma sin factor se le realiza Factor IX.
A los Crioprecipitados se les realiza Factor VIII y Fibrinógeno.
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CURVA DE CALIBRACIÓN
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MUESTRA
Cuando la muestra que se va a analizar es un Crioprecipitado se reconstituye con

15ml de solución salina todo el crioprecipitado, se agita durante 15minutos y se
toma una alicuota y diluye con diluyente o tampón 1:5 o 1:10
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A continuación se describe el manejo del Citometro:
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El formato M-3-1-06-a se llena de la siguiente manera:
En el recuadro vacío del lado superior izquierdo se anota el numero de la unidad

que se encuentra en la etiqueta de la bolsa del producto.
El grupo: Grupo sanguíneo del paquete.

El tipo de producto: Hemoderivado enviado (CE, CP, Plasma, etc.)
Servicio : Servicio que solicita el análisis “Banco de sangre”.
Fecha: Día, mes y año en que se solicita el análisis.
El formato F-A-13-16-06 se llena de la siguiente manera:
Dependencia: Institución que requiere el análisis “ INP ”

Servicio : Servicio que solicita el análisis “Banco de sangre”.
Fecha: Día, mes y año en que se solicita el análisis.
En el recuadro vacío del lado superior izquierdo se anota el número de la unidad

que se encuentra en la etiqueta de la bolsa del producto.
El grupo: Grupo sanguíneo del paquete.

El tipo de producto: Hemoderivado enviado (CE, CP, Plasma, etc.)
La bitácora de Control de calidad de Bacteriología CAL-47-A se llena de la

siguiente manera:
Fecha: Día en que se realiza el control de calidad.

Procedencia: Institución de donde se manda realizar el análisis.
Registro: # Unidad
Producto: Tipo de hemoderivado para analizar.
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Anticoagulante: Anticoagulante que contiene la bolsa cuando se realiza el

sangrado, se encuentra especificado en la etiqueta del hemoderivado.
RPM : Velocidad a la que fue fraccionado el hemoderivado (Bitácora de
fraccionamiento)
T°C:Temperatura a la que fue fraccionado el hemoderivado (Bitácora de
fraccionamiento)
Fecha de caducidad del producto: Día, mes y año en que caduca el
hemoderivado esta especificado en la etiqueta.
Hemólisis: Cuando se realiza el conteo en los CE se requiere saber si el
hemoderivado se encuentra hemolizado o no.
pH: Cuando se realiza conteo en CP se requiere conocer el pH
Peso bruto: Se requiere conocer el peso del hemoderivado (Bitácora de
fraccionamiento)
Volumen (ml): Se requiere conocer el volumen del (Bitácora de
fraccionamiento)
PLQ/microlitros: Cuando se realiza conteo en CP (ticket del Sysmex)
PLQ/U: Cuando se realiza conteo en CP (Dilución)
Leucocitos/microlitros: Cuando se realiza conteo en CP y CE (ticket del
Sysmex)
Leucocitos/U: Cuando se realiza conteo en CP y CE
Hematocrito inicial: Cuando se realiza conteo en CE (ticket del Sysmex)
Hematocrito final: Cuando se realiza conteo en CE (ticket del Sysmex)
Control bacteriológico:.Resultados del cultivo en el Laboratorio de
Bacteriología.
Factor VIII %: Se obtiene % de actividad del factor de coagulación en Plasma
y crioprecipitados
Factor IX %: Se obtiene % de factor de coagulación del Plasma y
crioprecipitados
Fibrinógeno (mg/dl) Se obtiene la concentración en mg de Fibrinógeno en
PFC y GAH.
La bitácora de Control de BacteriologiaCAL-47-B se llena de la siguiente manera:
Fecha: Día en que se realiza el control de calidad.

Registro: # Unidad
Producto: Tipo de hemoderivado para analizar.
Grupo: Grupo sanguíneo del hemoderivado (etiqueta del producto)
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Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del donador o

paciente.
Entrega: Nombre completo de la persona que esta solicitando el análisis.
Recibe: Fecha en que recibe y firma de quien lo recibe.
REGISTROS
El formato F-A-13-16-06 se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
El formato M-3-1-06-a se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
La bitácora CAL-47-A se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
La bitácora CAL-47-B se debe almacenar 5 años en archivo activo y 5 años en

archivo muerto.
Laboratorista: ____________________________________
Laboratorista: ____________________________________
Suplente: ____________________________________
Suplente: ____________________________________
Suplente: ____________________________________
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Fecha: 23 de junio 2011
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Procedimiento de Aféresis
Nombre: Dra. DORIS Nombre: Dra. M. LETICIA Nombre: Dra. DINORA

LORDMENDEZ JACOME MEDINA MACÍAS AGUILAR ESCOBAR
Fecha: 23 de junio 2011 Fecha:23 de junio 2011 Fecha:23 de junio 2011
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a) Se modifica el nombre de la
bitácora CAL-46 B (Bitácora de 04 23 de junio 2011
registro de producto no
conforme)
b) Se agregan lineamientos
incluyendo las características
del producto conforme de
Aféresis.
c) Se agrega el formato Control
diario de procedimientos de
aféresis
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El Instituto Nacional de Pediatría requiere la donación de plaquetas en el Banco de
sangre para el diferente aporte transfusional que se lleva a cabo en el mismo, la
cantidad de donadores al procedimiento de aféresis dependerá de la demanda en el
Banco de Sangre.
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El candidato a donador solicita a la Trabajadora social una cita para donar plaquetas
Se presenta el donador el día de su cita, presentando su identificación oficial con fotografía y vigente, pasa a recepción en
donde se registra (Ver procedimiento CAL-20); y se identifica el formato M-3-0-23 de acuerdo al procedimiento de aféresis que
se vaya a realizar (PLAQUETAS, GRANULOCITOS, CÉLULAS TALLO)
Se le realiza la valoración de venas y signos vitales (Ver procedimiento CAL-30), toma de muestra (Ver procedimiento CAL-43) y
la valoración medica (Ver procedimiento CAL-40).
Si el donador se encuentra apto el Médico le proporciona la información sobre el procedimiento y lo ingresa a la sala de Aféresis y
solicita el número de unidad y las etiquetas correspondientes (Ver procedimiento CAL-20) pegando una etiqueta en la hoja de
identificación y desprende otra para que entrega a trabajo social para que sea pegada en el comprobante de donación y anota en
forma manual el motivo de la donación (control interno de trabajo social . Si por necesidades del servicio o por ser producto
dirigido se programará una cita registrándose en la Bitácora de Citas de Aféresis CAL-50-B se le entrega recordatorio CAL-50-C
de cita y se le dan indicaciones generales previas a la donación.
Cita
programada
no
si
Cuando el candidato acude a su cita de donación, el

médico recaba la documentación con resultados en el
área de Serología, y verifica resultado de marcadores
El médico entrega al área de
serológicos
enfermería la documentación
correspondiente, para inicio del
proceso de aféresis
Serologfía
si no
Negativa
Si alguna(s) de las pruebas del candidato a

donador presenta un resultado REACTIVO se
descarta como donador y el área de Serología
notifica al Medico para que se solicite 2da muestra
para realizale la prueba confirmatoria, y una vez
que se tiene el resultado se anexa la hoja de
resultados en su documentacion y el Medico le
informa el motivo de rechazo
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La Enfermera llama al candidato a donación por su nombre completo, le solicita su identificación y le

indica que pase a la sala donde se le realizará el proceso, se le muestra el equipó que será utilizado y
se abre en su presencia haciendo énfasis en que el equipo esta cerrado , estéril y es desechable.
Se le pide al donador que pase al baño y regrese al área para iniciar la donación .
Aproximadamente 30 minutos previos al inicio del procedimiento de aféresis, la enfermera o el médico

encargado del procedimiento administrará de manera profiláctica 2 tabletas de carbonato de calcio
(500mg/tab) por vía oral a cada donador. Se reforzará la información a los donadores sobre los
síntomas iníciales de hipocalcemia por parte del personal médico y de enfermería para asegurar la
comprensión de dicha información.*
Se procede a instalación y purgado de equipo (cebado) (Ver manual del operador del separador en
uso)l e inicia el proceso de donación de Aféresis registrando la información en la hoja de control de
procedimientos de aféresis Bitácora CAL 50-A
Al terminar el proceso de Aféresis, se toman signos Vitales y se colocan parches en las zonas de veno-
punción
Se le entrega al donador el folleto “El que tenga un amor que lo

cuide” y el talón de autoexclusión confidencial La Enfermera notifica
al médico del área de
aféresis, y se
si registra en la
Bitácora CAL 46-B
y se maneja como
AUTOEXCLUSIÓN producto No
no conforme (ver
procedimiento CAL-
09 )
Se le pide al donador pase al comedor para ingerir su refrigerio y al terminar pasar a trabajo
social quien entrega el comprobante de donación y proporciona información del horario para
recoger resultados de exámenes realizados.
Al terminar de retirar el equipo la enfermera identifica las unidades del producto obtenidas (2
bolsas), la ficha de identificación. Una de las etiquetas se pegan en la Bitácora CAL-50-a de
la hoja que corresponde al procedimiento que se lleva a cabo
NOTA: La identificación de las bolsas es provisional hasta la identificación final en Serología .
(Ver CAL- 32 )
Se anota en cada una de las bolsas el número de Aferesis (obtenido de la bitacora CAL-50-A), la
cantidad de concentrados plaquetarios (estimados por la máquina) y el volúmen.
La enfermera lleva las bolsas del producto al área de Inmuno-Hematología – receptores.

Se colocan en el refrigerador correspondiente y se avisa al personal del área .
Se entrega al área de Serología la Historia clinica, la ficha de identificación, el talón de
autoexclusión, los resultados de la biometría PRE.
Al terminar el procedimiento la enfermera registra la información en el sistema informático de

CAL-02-B
banco de sangre .
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*El contenido de la plática de información que deben impartir el personal médico y de

enfermería sobre los potenciales síntomas iníciales de la hipocalcemia secundaria a
efectos adversos por la anticoagulación con citrato son:
Adormecimiento peribucal, vómitos, diarreas y menos frecuentemente contracturas.
Se anexa a la Historia Clínica el siguiente control diario de procedimiento de aféresis:
LINEAMIENTOS O POLÍTICAS:
1.- La información adicional que se anexa a la hoja de identificación del donador no

deberá eliminarse (desprenderse o borrarse).
2.- La obtención de componentes celulares por métodos de aféresis deberán tener

como propósito cubrir la deficiencia específica de dicho componente en un paciente.
3. La realización de los procedimientos para la obtención de plaquetas, eritrocitos y

plasma se justificara en base a las reservas y demandas de dicho componente para
cubrir las necesidades de los pacientes.
4.- Los procedimientos de aféresis para la obtención de leucocitos (granulocitos y/o

células progenitoras hematopoyéticas deberá estar justificada por una solicitud de
interconsulta del servicio y el médico del servicio responsable del tratamiento del
paciente
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5- Los donadores de componentes celulares obtenidos por aféresis deberán cubrir

todos los requisitos normativos de selección.
- Para plaquetas.
Accesos venosos adecuados.
Cuenta plaquetaria mínima de 150x103
No ingesta de medicamentos que contengan acido acetilsaliciclio en
las ultimas 72 h (única toma) o 7 días (tomas repetidas).
- Para leucocitos (granulocitos, neutrófilos).
Accesos venosos adecuados.
Movilización 12 h previas al procedimiento con esteroides y/o factor
estimulante de colonias).
Por los menos dos cuentas leucocitarias con diferencial previas al
procedimiento que permitan valorar la respuesta al estimulo de la movilización.
Para eritrocitos (dobles rojos):

Donador: Genero. Masculino.
Peso: ≥ 65 Kg.
Talla: ≥ 165 cm
Hematocrito: ≥45%
Grupo: Dependerá de las necesidades de pacientes y/o del
faltante de las reservas del banco de sangre.
Para plasma:
Donador: genero: indistinto.
Peso: ≥ 50 Kg.
Proteínas séricas: ≥ 6 g/mL
Dependerá de las necesidades del servicio.
6.-Los concentrados de leucocitos y plaquetas obtenidos al final de cada procedimiento

deberán cumplir con los siguientes requisitos para ser considerado como producto
conforme:
Componente:
Leucocitos
(Neutrófilos)
Volumen (mL variable
Cuenta celular mínima 1x1010 neutrófilos
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Plaquetas
Volumen (mL) 200-250 mL
Cuenta mínima de plaquetas 3.0x1011 de plaquetas
Plasma
450-750 mL Proteínas 60g/L 12 meses congelado

FVIII 1UI/mL
Fibrinógeno 160 mg/dL
Células progenitoras
≥ 50 mL
≥ 2x106/kg de peso de receptor de
células CD34+ Hematopoyéticas
(Alogenico)
≥1.5x106/Kg de peso receptor de células

CD34+
(Autólogo)
Para todos los componentes sanguíneos:
Integridad de los contenedores.

Identificación de la unidad con: Nombre del donador
Número de unidad/Número de aféresis.
Fecha de obtención.
Tipo de componente.
Volumen.
Talón de autoexclusión con respuesta SI ES SEGURA. (EXCEPTO DONADORES

PEDIATRICOS)
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7.- Los componentes celulares obtenidos por aféresis que no cumplan con los criterios
de conformidad deberán ser evaluados conjuntamente con el personal médico y de
laboratorio de banco de sangre cuando el componente sean plaquetas, glóbulos rojos o
plasma Y el coordinador de trasplantes cuando se trate de Células progenitoras
hematopoyéticas, en base a los siguientes criterios:
 Cuando la dosis no sea la óptima se considerara la posibilidad de la realización
de otro procedimiento para poder alcanzar la dosis sumando la dosis anterior.
 El volumen y la concentración de plaquetas sea equivalente como mínimo a un
concentrado de Plaquetas obtenido de sangre total y en el caso de eritrocitos y/o
plasma fresco pueda cubrir una dosis de 10 mL/Kg de peso.
La Bitácora de Aféresis CAL-50-A se llena de la siguiente manera:
Procedimiento: Anotar el procedimiento realizado:

Plaquetaféresis
Después de anotar el procedimiento poner A (significa Aféresis) / número consecutivo

de la bitácora CAL-50-A / los dos últimos números del año.
Fecha: Día, mes y año en que se realiza la aféresis.

Equipo: Indicar el tipo de máquina usada.
Flujo: Indicar el tipo de flujo usado para la aféresis:
Continuo
Discontinuo
I. DATOS DEL RECEPTOR

Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y
Nombre(s) del paciente que requiere el
producto.
Cama: # de la cama donde se encuentra
hospitalizado el paciente.
Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del paciente que va a recibir el
producto.
Diagnostico: Diagnostico principal del paciente para el que
se realiza la donación.
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II. DATOS DEL DONADOR

Nombre(s) del donador.
Edad: # de años que tiene el donador al momento
de realizar el procedimiento.
Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del donador
Parentesco: Relación que existe entre el paciente y el
donador (Amistad, familiar, etc).
Peso El peso del donador expresado en Kg
H.I.V., H.C.V., HbsAg, R.P.R, BRUCELLA, OTROS.
Resultados de las pruebas realizadas al
donador por el Laboratorio del Banco de
sangre tomado de la Historia Clínica.
Nombre y firma de quien realizo las Pruebas

Sello o firma de quien realizo el análisis de las
pruebas.
III. DATOS DEL PROCEDIMIENTO
Hora de inicio: Hora en que se inicio el procedimiento.

Hora de terminación: Hora en que se finalizó el procedimiento
Responsable: Nombre y firma de la enfermera que realiza

el procedimiento.
Otros datos que se registran en la bitácora CAL-50-A anotados por la enfermera

durante el procedimiento:
VELOCIDAD VELOCIDAD VOLUMEN VOLUMEN

TIEMPO DE DE DE DE GOTAS DE SIGNOS VITALES
** SANGRE * PLASMA * SANGRE * PLASMA * ACD ** Y OBSERVAC. ***
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*. Obtenidos directamente de la máquina.

**. Al momento de llenar el registro.
***. Se registran antes, durante y después del procedimiento.
Volumen procesado de sangre: Cantidad de sangre que se proceso al finalizar

el procedimiento, obteniendo este dato
directamente de la máquina, referido como
END-POINT.
Anticoagulante: Cantidad de anticoagulante que se utilizo

durante el procedimiento.
Solución salina: Cantidad de solución salina que se utilizo

durante el procedimiento
NOTA: La enfermera que realizo el procedimiento calcula las cantidades de Solución

salina y Anticoagulante mediante la inspección visual de las bolsas; resta al volumen
inicial marcado en las bolsas el volumen contenido en las bolsas al final del
procedimiento (Las bolsas son graduadas).
IV. RESULTADOS
Volumen de la cosecha: Dato que es obtenido por la enfermera al
pesar cada bolsa que contiene el producto y
restarle el peso de la bolsa vacía (40 ml)
DATOS DE MUESTRA MUESTRA MUESTRA DE LA

BIOMETRIA HEM. PRE POST COSECHA COSECHA FINAL
PLAQUETAS
LINFOCITOS
GRANULOCITOS
HEMATOCRITO
OTROS
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Datos obtenidos de:
Muestras del Donador (PRE Y POST) Equipo automatizado de biometría

hemática
Muestra de la Cosecha Área de Control de Calidad
Cálculo de la cosecha final Médico que supervisa el procedimiento
Nombre y firma del Médico que Firma de quien realizó el

realizo el procedimiento: análisis de la cosecha final .
La Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se muestra a continuación:

DONADOR PACIENTE
MOTIVO DE
FECHA Y FECHA DE PROCEDIMIE OBSERVACI
NOMBRE TELEFONO NOMBRE LA
HORA ESTUDIO NTO ONES
DONACIÓN
La Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se llena de la siguiente manera:
DONADOR
Fecha y hora: Día, mes y año de la cita de donación. Y
Hora y minutos en que se da la cita de
donación.
Nombre : Apellido paterno, Apellido materno y
Nombre(s) del donador.
Teléfono: # telefónico del donador.
Fecha del estudio: Día, mes y año en que se le realizo los
estudios de Serologia.
PACIENTE
Procedimiento: Procedimiento a realizar
Nombre(s) del paciente.
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Motivo de la donación: Diagnostico por el que el Médico justifica el

procedimiento de plaquetaféresis.
Observaciones: Anotar cualquier observación relacionada al

procedimiento (Cancelado, Suspendido,
Reprogramado, No acudió donador, etc.)
El recordatorio de cita de aféresis CAL-50-C es el siguiente:
Favor de permitir el paso al

Sr. (a): Nombre completo del candidato a donar plaquetas.
DONADOR (B) DE PLAQUETAS
El día: Fecha de cita de donación.
A las: Horario de la cita de donación.
Fecha de Estudio: Fecha en que se tomaron muestras para estudio.
Al reverso deberá contener la siguiente información:
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Indicaciones.
El día anterior a la cita:
 No comer de preferencia alimentos con grasa
 No tomar bebidas alcohólicas con un mínimo de 72 hrs previas a la
donación.
 No tomar medicamentos con un mínimo de 72 hrs previas a la
donación.
 Cenar sin grasa y no tomar leche
 Aseo Corporal
 Dormir como mínimo 6 horas
El día de la cita:
 Puede tomar jugo y fruta
 Usar ropa holgada y con manga corta.
La Bitácora de Entrega y Recepción de Historias clínicas CAL-50-D se llena de la

siguiente manera:
Fecha: Día, mes y año en que se entregan las

Historias clínicas al personal de grupos.
# de Historias Clínicas Totales: # final de Historias clínicas del día (donación

de sangre total)
Intervalo de Unidades: # de Unidad inicial y # de Unidad final.
# de Plaquetas: # de donadores de plaquetas del día.

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Firma de quien entrega: Firma del Médico que entrega al personal de

grupos la bitácora.
Firma de quien recibe: Firma del personal de grupos que recibe y

verifica que se encuentren el # de Historias
clínicas que se especifican en la bitácora.
Observaciones: Comentarios con respecto a la entrega de la

documentación.
Nota 1: Se requiere de 2 venas gruesas para que se lleve a cabo la Aféresis.
Nota 2: Existen 3 maquinas Separadoras de células sanguíneas TRIMA para realizar el

procedimiento de aféresis de plaquetas.
*Nota 3: Si las plaquetas se necesitan para una urgencia, se realiza la Aféresis sin
tener los resultados de las Pruebas serológicas, pero no se liberan las plaquetas hasta
que se tienen los resultados de las mismas.
NOTA: ENTREGA DE RESULTADOS DE SEROLOGIA Y COMPROBANTE DE

DONACIÓN LO REALIZA EL MÉDICO COORDINADOR O LA ENFERMERA Y
SOLICITA QUE FIRMA LA BITACORA DE REGISTRO DE ENTREGA DE
RESULTADOS.
FECHA: En que recibe los resultados

NOMBRE: Del donador de aféresis
FIRMA: Del donador de aféresis
COMENTARIOS: Comentarios que el donador quiera aportar
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REGISTROS
Control de procedimientos de Aféresis CAL-50-A clínicas se almacenan durante 5 años

en archivo activo y 5 años en archivo muerto.
Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B se almacena durante 3 meses después de que
se termina el llenado de la última hoja.
Recordatorio de cita de aféresis CAL-50-C se anexa a la historia clínica.
Bitácora de Entrega y Recepción de Historias clínicas CAL-50-D, se almacena durante
3 meses después de que se termina el llenado de la última hoja.
El CAL-50 A y las Historias clínicas se archivan durante 5 años en archivo activo y 5
Bitácora CAL-50-G De entrega de resultados
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Ninguno 0 24/09/03
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Fecha: 24 sep 2003
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Una vez que al candidato a donar se le realizo la valoración médica (Ver

procedimiento CAL-40) y fue considerado apto en el área de toma de muestra sale
impresa la etiqueta para la Biometría Hemática. De donde se toma el Nombre
completo del donador y se corrobora con el de la Ficha de identificación del
candidato y se escribe en la Hoja de toma de muestra F-A-14-26 posteriormente
se pega la etiqueta en el tubo para la Biometría.
La Etiqueta de identificación es la siguiente:
Nombre completo del candidato a donador:

Fecha:
No. Toma:
Nombre de la Prueba:
Número de Toma de muestra:
La Etiqueta contiene los siguiente datos:
Nombre completo del candidato a donador:Apellido paterno, Apellido materno y

Nombre (s) del donador.
Fecha: Día, mes y año en que se toma la
muestra
No. de Toma: Número de candidato a donador, es
consecutivo y el Químico lo escribe
a mano
No. de Toma de muestra: Número que se le asigna en Toma
de muestra.
Fecha: Día, mes y año en que se toma la
muestra.
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Fecha: 24 sep 2003
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REGISTROS
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Fecha: 27 Junio 2011
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Procedimiento de Uso del Equipo Automatizado de Biometría Hemática
Nombre: Q.F.B. MARÍA Nombre: M en C Nombre: DRA. DINORA

TERESA FLORES GUILLERMO ESCAMILLA V. AGUILAR ESCOBAR
CAMACHO GUERRERO
Fecha: 7 DE OCTUBRE DE Fecha: 14 DE OCTUBRE Fecha: 14 DE

2009 2009 OCTUBRE 2009
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Se actualiza procedimiento y se 3 27 de junio de 2011

cambia nombre por Uso del
Equipo Automatizado para
Biometrías Hemática, se
modifican valores de leucocitos
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Una vez que el candidato a donador ha sido valorado por el personal de

enfermería (Ver Procedimiento CAL-30), se calibra el equipo Automatizado de
Biometría Hemática (Ver Procedimiento CAL-14), se le toma la muestra de sangre
(Ver Procedimiento CAL-43) y posteriormente se realiza el análisis
correspondiente de la siguiente manera:
El equipo Automatizado de Biometría Hemática se usa para el procesamiento de

la biometría hemática para determinar los niveles de plaquetas, hematocrito,
hemoglobina, etc. En muestras de sangre. El equipo permite obtener resultados
casi inmediatos y con ello decidir si las condiciones de la sangre son las
adecuadas para llevar a cabo la donación.
El equipo Automatizado de Biometría Hemática se opera de la siguiente manera:
TOMA DE MUESTRA
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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EL QUÍMICO Y/ O
LABORATORISTA ENCIENDE EL
EQUIPO AUTOMATIZADO DE
BIOMETRÍA HEMÁTICA
Verificar Niveles de Reactivos,

de Bote de Desechos ( RPBI) e
Hojas de impresión
Introducir Controles Bajo,

Normal y Alto verificar que
estén dentro del rango
especificado y checar la curva
de L J
Tomar ficha de identificación

de Donador ( M-3-0-23) del
Buzón de Valoración de
Disponentes ubicado en área
de recepción
Anotar # de registro y nombre

en el formato M-3-4-10).
Colocar etiqueta emitida por
recepción en tubos lila para
BH (2), y tubo rojo si es mujer
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Llamar al Donador por su Nombre,

verificando su identidad con su
credencial de elector o documento
oficial con fotografía
Realizar asepsia de la zona a

puncionar, aplicar
Torniquete y puncionar en
el antebrazo seleccionado
Colocar el tubo de Biometría

Hemática en el Rack o de
forma manual según sea el
caso en el equipo de
Automatizado de Biometría
Anotar resultados de BH en
formato M-3-4-10), anexar hoja
en la ficha de identificación de
donador y se coloca en buzón
de valoración Médica
Pegar las etiquetas con el # de

Unidad emitidas por recepción
correspondientes a cada tubo de
Donador cuando este ha sido
aceptado
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ANALIZADOR DE BIOMETRÍA HEMÁTICA
SELECCIONAR
ADMINISTRA- ENCENDER PONER SELECCIONAR
DOR ANALIZADOR CONTROLES ICONO
CHECAR EL TECLEAR QC MUESTREADO
BACKGROUND (CAL)
R CON EL
Y METER
CONTROLES BAJO NUMERO DE
EN MODO MEDIO LOTE DE
ABIERTO ALTO CADA
CONTROL
RESULTADO
IMPRESO CHECAR
CON TABLA DE
VALORES INICIAR
QUE VIENE EN
LAOS CONTROLES
SI
NO
OBSERVAR
SELECCIONAR PUNTOS EN
SISTEMA GRÁFICAS DE L-J Y
CERRADO VERIFICAR QUE REPETIR PROCESO
EXPLORADOR ENTREN EN EL Y/O
PONER RANGO VERIFICAR
MUESTRAS EN REACTIVOS
RACK Y/O
DONADOR CAMBIO DE
CONTROLES
SELECCIONAR
ICONO DE OBSERVAR RESULTADOS
MUESTREADOR EN PANTALLA E IMPRESO
AUTOMÁTICO DE VACIAR RESULTADOS AL
MUESTRAS E FORMATO M-3-4-10
INICIAR ENGRAPAR RESULTADO
EN HISTORIA
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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La aceptación o rechazo de un donador en cuanto a los valores en la Biometría

Hemática se debe de basar en la NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2-
1993 “Para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines
terapéuticos”. INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRÍA
DEPARTAMENTO DE BANCO DE SANGRE
VALORES MÍNIMOS PARA FLEBOTOMÍA EN DISPONENTES

ALOGÉNICOS.
Género.
Altitud sobre el
nivel del mar.
Masculino. Femenino
Hemoglobina. Hematocrito. Hemoglobina. Hematocrito. Leucocitos Plaquetas
0 a 1500 m. 13.5 g/dL. 41 a 56% 12.5 g/dL. 38 a 50%

4.0 a 12.0 150 a 450
x103 μL. x103 μL.
1501 o más. 14.5 g/dL. 44 a 56% 14.0 g/dL. 40 a 50%
La tabla de valores debe permanecer a la vista del personal que realiza las biometrías hemáticas para su consulta.
Autorizado.
Dra. Dinora Aguilar Escobar.
Jefe del Banco de Sangre, I.N.P.
Bibliografía:
Proyecto de Norma Oficial Mexicana PROY-NOM-253-SSA1-2009 para la disposición de sangre humana y sus
componentes con fines terapéuticos
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2-1993 para la disposición de sangre humana y sus componentes con fines
terapéuticos.
Ruiz Argüelles, Guillermo J. Fundamentos de hematología 4ª edición, México, Editorial Médica Panamericana, 2009.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Esta tabla debe encontrarse a la vista del personal que realiza las biometrías
hemáticas para que siga dichos criterios.
Bibliografía
NORMA OFICIAL MEXICANA NOM-003-SSA2-1993
La información que contiene la hoja de resultados es la siguiente:
LEU Leucocitos totales/microlitros

ERI Eritrocitos
HB Hemoglobina
HTC Hematocrito
VCM Volumen Corpuscular Medio
HCM Hemoglobina Corpuscular Medio
CCMH Concentración Media de Hemoglobina Corpuscular
IDE Ancho de Distribución Eritrocitaria (Desviación Estándar
PLT Plaquetas
MPV Volumen Plaquetario Medio
IDP Ancho de Distribución Plaquetaria
LIN % Porciento de Linfocitos
MON % Porciento de Monocitos
GRA % Porciento de Neutrofilos
LIN # Linfocitos totales
MON # Monocitos totales
GRA # Número de Neutrofilos
Nota 1: Los valores que se toman en cuenta para la donación son Hemoglobina,
Hematocrito, Leucocitos y Plaquetas. Los Histogramas de WBC, RBC y PLT son
para observar gráficamente los valores de dichas células.
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
Los Resultados que se observan en la hoja de resultados se reportan en el

formato M-3-4-10 y se engrapan en las formas M-3-0-23 se debe guardar durante
5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto.
CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de entrega del comprobante de donación
Nombre: LIC. TS ANA Nombre: DRA. Nombre: DRA. DINORA

MARIA DORANTES CEH MARAGARAITA LETICIA AGUILAR ESCOBAR
MEDINA MACÍAS
Fecha:7 JUNIO 2011 Fecha: 7 JUNIO 2011 Fecha: 9 JUNIO 2011
CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Se actualiza formato del comprobante 1 9/06/2011

de donación de acuerdo al sistema
informático de banco de sangre
CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Una vez que el donador ha realizado la donación de sangre o aféresis y ha ingerido su

refrigerio (Ver Procedimientos CAL-46 y CAL-50) se le solicita anote en la bitácora
de Registro de entrada y salida de donadores CAL-20-A su hora de salida y su firma,
sobre la misma línea en la que se registró al inicio de la donación, se le entrega su
Comprobante de donación, indicándole que venga por sus resultados de Serología y
Hematología en 8 días y personalmente (a partir de la fecha en que realizó la
donación), con una identificación con fotografía y vigente. El comprobante de donación
tiene una vigencia de 3 meses.
El formato de Comprobante de Donación de Sangre M-3-0-25 (manual) se muestra a

continuación:
CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El formato de Comprobante de donación de Sangre M-3-0-25 (manual) se llena de la

siguiente manera:
Nombre del donador: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s)

del donador.
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s)

del paciente.
Registro número: Número de registro que el INP asigna al

paciente.
Servicio: Área del INP donde fue solicitada la donación.
Fecha: Fecha en que se entrega el comprobante de

donación.
Nombre: Nombre de la Trabajadora Social.
Clave: Clave de la Trabajadora Social.
Firma: Firma de la Trabajadora Social.
Numero de unidad: Número de unidad asignado en recepción una

vez que el donador se considera APTO.
Hora: En que se entrega el comprobante.
El formato de Comprobante de donación de Sangre que se realiza en el sistema

informático del banco de sangre se muestra a continuación:
CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 9 junio 2011
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El formato de Comprobante de donación de Sangre que se realiza en el sistema

informático de banco de sangre contiene lo siguiente:
No. Unidad: Número de unidad asignado en recepción una

vez que el donador se considera APTO.
Fecha y Hora: Fecha y hora en que se imprime el

comprobante de donación.
Donador: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s)

del donador.
Nombre del paciente: Apellido paterno, Apellido materno, Nombre(s)

del paciente.
Registro No.: Número que el INP asigna al paciente.
Nombre: Nombre de la Trabajadora Social que autoriza
Clave: Clave de la Trabajadora Social que autoriza
Firma: Firma de la Trabajadora Social que autoriza.
REGISTROS
Comprobante de donación de sangre (manual) M-3-0-25.
Comprobante de donación en el sistema informático de banco de sangre M-3-0-25
CAL-02-B
Fecha: 5 de Enero 2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de Registro a Disponentes
Nombre: Mireya López Nombre: Dra. Margarita Nombre: Dra. Dinora V.

Mejía Medina Macías Aguilar Escobar
Fecha: 5 de Enero de 2012 Fecha: 5 de Enero de 2012 Fecha: 5de Enero de 2012
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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 Se homogeniza el término
donador en todo el
procedimiento en donde se 06 5 de enero 2012
menciona.
 Se ajusta el diagrama de
proceso
CAL-02-B
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El departamento de Banco de Sangre lleva a cabo el registro diario de los

candidatos a donación que acuden a estudiarse, así mismo se encarga de hacer
un registro de todos los candidatos para llevar a cabo su rastreabilidad.
El día de la donación el candidato a donador presenta el folleto ¿Cómo solicitar

una cita para donar sangre? (Ver procedimiento CAL-11) para continuar de la
siguiente manera:
CAL-02-B
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El candidato a donador muestra el folleto ¿Cómo solicitar una cita para donar sangre? y la identificación con
fotografía vigente al oficial en turno como pase de entrada al Banco de Sangre y este entrega un portagafete y una
ficha con numeración consecutiva, se les solicita portar el gafete durante su permanencia en el Banco de sangre
La Trabajadora Social da una plática de inducción y sensibilización sobre los facto res de riesgo y el proceso de donación para todos
los candidatos a donadores y sobre la importancia de que la sangre donada sea segura (Ver anexo 2) y/o se les presenta un video
informativo.
Les proporciona una copia del consentimiento informado para que la lean y analicen su contenido ya que posteriormente si está n de
acuerdo lo firmarán o se aclaran dudas al respecto.
NO
SI
TS evalúa la situación del donador para decidir si le programa cita por no

estar registrado ese día o lo acepta. Registra en la bitácora de citas CAL-
Si se corrobora la cita pasa al área de
11-A en el rubro de observaciones los datos que la bitácora solicita
recepción para su registro.
haciendo el señalamiento correspondiente para indicar que fue aceptado
para su valoración el mismo día. En caso necesario programa una nueva
cita para la donación y la registra en dicha bitácora (esto para efectos de
trazabilidad).
La recepcionista solicita el portagafete con su identificación oficial y el folleto ¿Cómo solicitar una cita? Para donador de
sangre, para registrar sus datos personales en el sistema informático de banco de sangre , se imprime la ficha de
identificación que incluye la carta de consentimiento informado (M-3-0-23) , se le solicita al disponente que firme el
consentimiento informado si es que está de acuerdo o si tiene dudas se indica que pase a trabajo social . . Posteriormente
se le devuelve el gafete con la identificación dentro y se le indica que pase a la sala de espera .
Se le indica al donador que espere a que sea llamado para la valoración de venas y somatometría (Ver
procedimiento CAL-30).
La ficha de identificación se coloca en el Kanban de toma de signos vitales.
FIN
CAL-02-B
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FORMATOS RELACIONADOS CON ESTE PROCEDIMIENTO
FICHA DE IDENTIFICACIÓN DEL DONANTE M-3-0-23 se muestra a

continuación:
CAL-02-B
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El formato M-3-0-23 se llena de la siguiente manera:
Nombre: Nombre, Apellido paterno y Apellido materno del candidato a

donar.
Parentesco: Relación que existe entre el candidato a donar y el paciente.
Edad: Años que tiene el candidato.
Fecha de nacimiento: Día, mes y año en que nació el candidato.
Sexo: Indicar el sexo del candidato: Masculino (Hombre) y Femenino
(Mujer)
Estado Civil: Indicar el estado civil del candidato: Soltero (a),
Casado (a), Unión Libre, Viudo, Divorciado.
Escolaridad: Indicar hasta que grado de escolaridad curso el candidato:
Primaria, Secundaria, Preparatoria o equivalente, Universidad,
etc.
Ocupación: Actividad que realiza el candidato.
Domicilio, municipio, código postal: Lugar donde vive actualmente el candidato.
Teléfono: Número telefónico donde se pueda localizar al candidato
(casa, oficina, caseta telefónica, etc.).
Tipo de donación: Se especifica si la donación es:
o Familiar: Donación que se realiza para un paciente familiar (Padre,

Madre, Hermano, Primo, Amigo, etc.).
o Altruista: Donación que no se realiza para un paciente específico.
o Autóloga: Donación que se la realiza para si mismo.
o Dirigida: Donación que se realiza específicamente para un paciente.
o Aféresis: Donación de plaquetas, Leucocitos, Granulocitos, Plasma y
Eritrocitos.
Nombre del paciente: Nombre, Apellido paterno y Apellido materno del paciente
(este dato y los siguientes los puede encontrar en el folleto
¿Cómo solicitar una cita para donar sangre?)
No. de expediente: Número que fue asignado para el paciente por el Instituto
Nacional de Pediatría (corresponde al # de registro).
PLATICA DE INDUCCION AL DONADOR
OBJETIVO: Sensibilizar e informar sobre los procesos a los cuales se someterá el

disponente y la importancia de la seguridad sanguínea.
1.- Introducción
Nombre de la trabajadora social en el Banco de Sangre.
Importancia del consentimiento informado.
Registro en Bitácora.
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2.- Describe los procesos:

Descripción del proceso de donación y probable tiempo de estancia.
Importancia de la sangre segura.
-Documentos necesarios para el registro en el área de recepción.
-Importancia de los datos personales para la ficha de identificación.
-Valoración por el personal de enfermería.
-Toma de muestra por el personal de laboratorio.
-Valoración médica.
-Extracción de sangre total o procedimiento de aféresis.
Importancia de ingerir el lunch posterior a la donación.
Entrega de comprobante de donación.
Acudir por los resultados de sus estudios.
Registro en Bitácora.
Video Informativo.
La bitácora CAL-20-A se muestra a continuación:
BITÁCORA DE REGISTRO DE DONADORES

CAL-20-A
Nombre Nombre Hora Hora
No. Firma Unidad Observaciones
Donador Paciente Entrada Salida
Efectivos
Rechazados
Estudiados para Aféresis
Procedimientos Aféresis
CAL-02-B
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La bitácora CAL-20-A se llena de la siguiente manera:
Número consecutivo en que se van anotando los

No.
donadores
Nombre
Nombre del candidato a donación de sangre
Donador
Nombre Nombre del paciente para el que viene a ser
Paciente donador
Hora Entrada Hora en que se están registrando
Hora en que sale el donador y ya se le entregó
Hora Salida
comprobante
Firma Firma de que recibió comprobante de donación
No. de unidad que se asignó siempre que haya
Unidad
sido donador
Observaciones Motivo de rechazo o diferido, etc.
Efectivos Número de donadores efectivos que pasaron donar
Número de donadores que no fueron aceptados
Rechazados
para donar
Estudiados Cantidad de donadores que se estudiaron para
para Aféresis procedimiento de Aféresis
Procedimientos
Número de procedimientos realizados
Aféresis
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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FORMATO CAL-20-B CONTROL DE REGISTRO DE DONADORES

INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRIA
BANCO DE SANGRE
CONTROL DEL REGISTRO DE DONADORES
FECHA:______________ UNIDAD DE INICIO________________ ULTIMA
UNIDAD_________
CAL-20-B
1 13 25 37
En este formato el personal de recepción registra:

1. Subraya el número de donador que ya ingresó en el sistema de cómputo
2. Anota si algún donador salió diferido, la causa del mismo, información que
permite conocer qué área rechazó al donador.
3. El número de unidad que le asigna a los donadores aceptados.
4. Señala los candidatos a donación que van a ser estudiados para aféresis.
5. Anota los donadores de aféresis y el número de unidad que les
corresponde.
6. Así mismo se registra el número de unidad de inicio y el último número de
unidad asignado del día.
REGISTROS
La bitácora CAL-20-A se almacena durante 1 año.

La Bitácora CAL-20-B se almacena en el archivo durante 3 meses.
M-3-0-23 (Ficha de Identificación) que incluye el Consentimiento informado del
candidato a donador, se almacena en archivo activo 5 años y en archivo muerto 5
años, en los donadores aptos (Ver CAL-40 Procedimiento de valoración médica).
En los donadores diferidos durante 3 meses.
Sistema informático de banco de sangre.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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ANEXO 1.-
MANUAL DEL MANEJO

DEL SISTEMA DE
CÓMPUTO PARA EL
ÁREA DE RECEPCIÓN
CAL-02-B
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CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 69 de 15
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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+
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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ANUAL DE PROCEDIMIENTOS
Procedimiento de Fraccionamiento
CAL-02-B
Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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1. Se incluye procedimiento
alterno en sistema de
fraccionamiento.
2. Se incluye nuevo formato 1 24/02/04
electrónico en la captura de
datos
CAL-02-B
Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Una vez que el donador ha sido sangrado (Ver procedimiento CAL-46) se procede de la
siguiente manera:
El personal de Fraccionamiento checa el estado en que se encuentran cada uno de los equipos que
utiliza para realizar el proceso y anota los resultados en la bitacora de estado de los equipos
CAL-21-A.
Toma del área de sangrado las Bolsas con la ST recolectada al igual que los formatos M-3-0-30 y
los lleva al área de fraccionamiento. El Paquete de Bolsas de muestra contiene: 4 Bolsas.
Una de las bolsa madre contiene la Sangre Total con 63-65 ml de anticoagulante (ACD), otra bolsa
contienen el aditivo (100 ml de SAG-MANITOL o ADSOL), un filtro leucorreductor para concentrado
eritrocitario y las dos bolsas satelites vacias
En el área de fraccionamiento se anota en la bitácora de fraccionamiento CAL-21-B los siguientes

datos: Fecha del día de análisis y Fecha de caducidad de cada concentrado (CE, CP, PCF
y GAH cuando se realiza).
De cada una de las muestras se anotan en la bitácora CAL-21-B los siguientes datos: # que le
corresponde al donador, Peso Bruto del sistema (ST-PB = Bolsa madre con 63-65 ml de
anticoagulante + 450 +/- 10% de sangre más la bolsa con el aditivo (100ml), un filtro leucorreductor
rara concentrado eritrocitario y las dos bolsas satelites); sexo del donador, Peso Neto (ST-PN = PB
menos la suma de la Bolsa Madre con 63-65 ml de anticoagulante con bolsa de aditivo con dos bolsas
satelites) y volumen (V-ST= PN/1.054 o1.057)
Se pesa en una balanza granataria de 2 platos un paquete de bolsas y su peso se equilibra con otro
paquete de bolsas adicionando cualquier objeto de material similar al de las bolsas hasta que el peso
sea el mismo. Todo lo que se encuentre en el plato se cada brazo se mete a un vaso de centrífuga.
El peso en la centrífuga debe estar equilibrado para que el proceso se realice correctamente.
Para introducir las bolsas al vaso de la centrífuga y no sean maltratadas por el mismo movimiento, se
acomodan de la siguiente manera: coloque en la mesa las bolsas satelite y la del aditivo, despues las
lineas de todas las bolsas, forme un “taco” enrrollando las bolsas con las líneas dentro de ellas (para
protección). Para introducirlas en el vaso de la centrifuga: se coloca la bolsa madre con las costuras
de la bolsa alineadas con las muescas de sostén del vaso, a continuación meter el “taco” al frente de
la bolsa madre.
Se revisa que las zonas de conectores para equipos de transfusion estén sin sangre para evitar
contaminación (dar pequeños golpes a los pilotos hasta que ya no tengan sangre), se le coloca una
pinza en la linea que se uso para la extracción de la sangre y se introduce el vaso en la centrifuga
verificando que se oriente la bolsa madre hacia la flecha y el “taco” hacia las paredes de la
centrífuga.,el filtro queda orientado hacia la parte externa de la centrifuga soportado por la zona media
con la boca del vaso Se procede a centrifugar
(Ver procedimiento CAL-23)
Una vez que se termina la centrifugación, se saca el vaso de la centrifuga. Las 4 Bolsas se retiran del
vaso con sumo cuidado para evitar que el plasma se vuelva a mezclar con el
concentrado eritrocitario (CE)
Se revisa que la zona para conectores de equipo de transfusion esten limpios y se transfiere el plasma
rico en plaquetas(PRP) a una bolsa satelite, se sella en la línea que une a la bolsa madre (sellador
dielectrico. (Ver Procedimiento CAL-24)
Al finalizar la extracción del plasma se tienen pinzas colocadas en la bolsa que contiene el plasma rico
en plaquetas (PRP) y en la bolsa satelite si se considera necesario. Se cuelga en el tripié la bolsa que
contiene el aditivo, se rompe el broche de la bolsa de SAG-MANITOL para que pase atraves del
filtro (funciona para purgar el filtro). Se invierte el sistema para filtrar el concentrado eritrocitario (con
cuidado, evitando que pasen burbujas de aire). Se dejan colgadas en un tripie hasta que se termina el
proceso de filtración
Cuando se termina de adicionar el aditivo se procede a la quema de las lineas con el

TUBE SEALER ACS-152 TERUFLEX. Pimero se sella la linea que sale de la bolsa que contiene el
Concentrado Eritrocitario una vez separados, se agita para ayudar a la homogenización del CE y el
aditivo y se pesa.
CAL-02-B
Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El peso bruto del Concentrado Eritrocitario se anota en CAL-21-A en la columna de PB - CE y

posteriormente se resta el peso de la bolsa al valor del CE para obtener el PN-CE. El volumen del CE
se obtiene dividiendo el valor ( PN / 1.093 ) y se apunta en la bitácora CAL-21-A los resultados, se
verifica que se encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993
NO
SI
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CE, el volumen de CE y la caducidad (acorde al Se procede a
anticoagulante empleados) y esta se pega en la bolsa e introduce en el refrigerador a 4° C cuando el desechar la muestra y
procedimiento es manual . se registra el motivo
en la bitácora
CAL-21-A y en la
La Bolsa de PRP y la bolsa satelite se pesan para introducir y equilibrar con pesos iguales y no perder Bitácora de Bajas
la estabilidad que requiere la centrifuga para su uso adecuado (Ver Procedimiento CAL-23). Se CAL-21-C.
acomodan en pares de la siguiente manera para evitar que se rompan en la centrifuga: se coloca en la
mesa primero la bolsa satelite vacia y sobre ella la que contiene el plasma, cuando se introducen en
los vasos de la centrifuga las lineas deben quedar detrás de las bolsas. Una vez en el vaso se le
quitan las pinzas a las dos bolsas.
Al termino del centrifugado se sacan los vasos de la centrifuga y se procede a retirar con sumo
cuidado las bolsas de PRP. Se transfiere a una bolsa satelite vacia la mayor cantidad de plasma
dejando un remanante de 40-60ml para reconstituir el botòn de plaquetas (CP) (con un volumen de
40 a 60 ml) y el PF (volumen de 150-180 ml) en el T-ACE o en su defecto empleando el sistema
manual (plancha para desplasmatizar) (Ver Procedimiento CAL-22)
El Concentrado Plaquetario se pesa y se anota el Peso Bruto en la bitácora CAL-21-A en la columna

PB-CP, en la columna PN-CP el valor del Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-CP el
Volumen (V= PN/1.028), los que se anotan en CAL-21-A .Se verifica que los valores obtenidos se
encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993.
NO
SI
Se procede a desechar
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CP, el volumen de CP y la caducidad (5 días) y esta se
la muestra y se registra
pega en la bolsa, Se mantienen en el incubador entre 20-24 ° C cuando el procedimiento es manual .
el motivo en la bitácora
CAL-21-A y en la
Bitácora de Bajas CAL-
Se continua con el pesado e identificación de PF: el PB se anota en la bitácora CAL-21-A en la 21-C.
columna PF-PB, en la de PN-PF el Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-PF el
Volumen (V= PN/1.028). Se verifica que los valores obtenidos se encuentren dentro de los valores
especificados en la NOM-003-SSA2-1993.
NO
SI
Se procede a
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras PCF, el volumen de PCF y la caducidad (1 año) y esta se desechar la
pega en la bolsa e introduce en el CONGELADOR con rangos de -30 a -70 ° C cuando el muestra y se
procedimiento es manual . registra el motivo
en la bitácora
CAL-21-A y en la
Bitácora de Bajas
A los productos obtenidos en este proceso como son: CE, CP y PCF se les debe anotar con un CAL-21-C.
plumon y pegar una etiqueta con su respectivo grupo sanguineo obtenido de la bitácora de serología
CAL-26-A cuando el procedimiento es manual.
El Personal de fraccionamiento anota en la Bitàcora de producto radiado CAL-21-D la fecha, tipo de

producto, # de registro y el auxiliar de laboratorio antes de entregar el producto anota la hora de
recepcion y solicita anote su Nombre y firma quien lo recibe y al finalizar la radiaciòn de quien entrega
el producto , una vez que el producto se recoge de radiaciòn se coloca en las condiciones
especificadas para su posterior identificaciòn.
Al finalizar el proceso se registra en CAL-21-A el número de donadores, el número de ST, CP, CE,
PCF y GAH obtenidos, el nombre o sello y firma del personal que realizo el fraccionamiento. Se
ingresan datos de volumen y fracciones al sistema de computo TESI.
CAL-02-B
Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El personal de Fraccionamiento checa el estado en que se encuentran cada uno de los equipos que
utiliza para realizar el proceso y anota los resultados en la bitacora de estado de los equipos
CAL-21-A.
Toma del área de sangrado las Bolsas con la ST recolectada al igual que los formatos M-3-0-30 y
los lleva al área de fraccionamiento. El Paquete de Bolsas de muestra contiene: 4 Bolsas.
Una de las bolsa madre contiene la Sangre Total con 63-65 ml de anticoagulante (ACD), otra bolsa
contienen el aditivo (100 ml de SAG-MANITOL o ADSOL) y las dos bolsas satelites vacias
En el área de fraccionamiento se anota en la bitácora de fraccionamiento CAL-21-B los siguientes

datos: Fecha del día de análisis y Fecha de caducidad de cada concentrado (CE, CP, PCF y GAH
cuando se realiza).
De cada una de las muestras se anotan en la bitácora CAL-21-B los siguientes datos: # que le
corresponde al donador, Peso Bruto del sistema (ST-PB = Bolsa madre con 63-65 ml de
anticoagulante + 450 +/- 10% de sangre más la bolsa con el aditivo (100ml) y las dos bolsas satelites);
sexo del donador, Peso Neto (ST-PN = PB menos la suma de la Bolsa Madre con 63-65 ml de
anticoagulante con bolsa de aditivo con dos bolsas satelites) y volumen (V-ST= PN/1.054 o1.057)
Se pesa en una balanza granataria de 2 platos un paquete de bolsas y su peso se equilibra con otro
paquete de bolsas adicionando cualquier objeto de material similar al de las bolsas hasta que el peso
sea el mismo. Todo lo que se encuentre en el plato se cada brazo se mete a un vaso de centrífuga. El
peso en la centrífuga debe estar equilibrado para que el proceso se realice correctamente.
Para introducir las bolsas al vaso de la centrífuga y no sean maltratadas por el mismo movimiento, se
acomodan de la siguiente manera: coloque en la mesa las bolsas satelite y la del aditivo, despues las
lineas de todas las bolsas, forme un “taco” enrrollando las bolsas con las líneas dentro de ellas (para
protección). Para introducirlas en el vaso de la centrifuga: se coloca la bolsa madre con las costuras
de la bolsa alineadas con las muescas de sostén del vaso, a continuación meter el “taco” al frente de
la bolsa madre.
Se revisa que las zonas de conectores para equipos de transfusion estén sin sangre para evitar
contaminación (dar pequeños golpes a los pilotos hasta que ya no tengan sangre), se le coloca una
pinza en la linea que se uso para la extracción de la sangre y se introduce el vaso en la centrifuga
verificando que se oriente la bolsa madre hacia la flecha y el “taco” hacia las paredes de la centrífuga.
Se procede a centrifugar
(Ver procedimiento CAL-23)
Una vez que se termina la centrifugación, se saca el vaso de la centrifuga. Las 4 Bolsas se retiran del
vaso con sumo cuidado para evitar que el plasma se vuelva a mezclar con el concentrado eritrocitario
(CE)
Se revisa que la zona para conectores de equipo de transfusion esten limpios y se transfiere el plasma
rico en plaquetas(PRP) a una bolsa satelite, se sella en la línea que une a la bolsa madre (sellador
dielectrico. (Ver Procedimiento CAL-44)
Al finalizar la extracción del plasma se tienen pinzas colocadas en la bolsa que contiene el plasma rico
en plaquetas (PRP) y en la bolsa satelite si se considera necesario. Se cuelga en el tripié la bolsa que
contiene el aditivo, se rompe el broche de la bolsa para dejarlo pasar al CE.
Cuando se termina de adicionar el aditivo se procede a la quema de las lineas con el

TUBE SEALER ACS-152 TERUFLEX. Pimero se sella la linea que sale de la bolsa que contiene el
Concentrado Eritrocitario una vez separados, se agita para ayudar a la homogenización del CE y el
aditivo y se pesa.
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El peso bruto del Concentrado Eritrocitario se anota en CAL-21-B en la columna de PB - CE y

posteriormente se resta el peso de la bolsa al valor del CE para obtener el PN-CE. El volumen del CE
se obtiene dividiendo el valor ( PN / 1.093 ) y se apunta en la bitácora CAL-21-B los resultados, se
verifica que se encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993
NO
SI
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CE, el volumen de CE y la caducidad (acorde al

anticoagulante empleados) y esta se pega en la bolsa e introduce en el refrigerador a 4° C cuando el
procedimiento es manual .
La Bolsa de PRP y la bolsa satelite se pesan para introducir y equilibrar con pesos iguales y no perder
la estabilidad que requiere la centrifuga para su uso adecuado (Ver Procedimiento CAL-23).
Se acomodan en pares de la siguiente manera para evitar que se rompan en la centrifuga: se coloca
en la mesa primero la bolsa satelite vacia y sobre ella la que contiene el plasma, cuando se introducen
en los vasos de la centrifuga las lineas deben quedar detrás de las bolsas. Una vez en el vaso se le
quitan las pinzas a las dos bolsas.
Al termino del centrifugado se sacan los vasos de la centrifuga y se procede a retirar con sumo
cuidado las bolsas de PRP. Se transfiere a una bolsa satelite vacia la mayor cantidad de plasma
dejando un remanante de 40-60ml para reconstituir el botòn de plaquetas (CP) (con un volumen de
40 a 60 ml) y el PF (volumen de 150-180 ml) en el T-ACE o en su defecto empleando el sistema
manual (plancha para desplasmatizar) (Ver Procedimiento CAL-22)
El Concentrado Plaquetario se pesa y se anota el Peso Bruto en la bitácora CAL-21-A en la columna

PB-CP, en la columna PN-CP el valor del Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-CP el
Volumen (V= PN/1.028), los que se anotan en CAL-21-A .Se verifica que los valores obtenidos se
encuentren dentro de los valores especificados en la NOM-003-SSA2-1993. Se procede a
desechar la
muestra y se
NO registra el motivo
en la bitácora
CAL-21-A y en la
SI
Bitácora de Bajas
CAL-21-C.
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras CP, el volumen de CP y la caducidad (5 días) y esta se
pega en la bolsa, Se mantienen en el incubador entre 20-24 ° C cuando el procedimiento es manual .
Se continua con el pesado e identificación de PF: el PB se anota en la bitácora CAL-21-A en la

columna PF-PB, en la de PN-PF el Peso Neto (PN= PB-peso bolsa satelite) y en la de V-PF el
Volumen (V= PN/1.028). Se verifica que los valores obtenidos se encuentren dentro de los valores
especificados en la NOM-003-SSA2-1993.
NO
SI
Se anotan en la etiqueta M-3-0-30 las letras PCF, el volumen de PCF y la caducidad (1 año) y esta se
pega en la bolsa e introduce en el CONGELADOR con rangos de -30 a -70 ° C cuando el
procedimiento es manual .
A los productos obtenidos en este proceso como son: CE, CP y PCF se les debe anotar con un
plumon y pegar una etiqueta con su respectivo grupo sanguineo obtenido de la bitácora de serología
CAL-26-A cuando el procedimiento es manual.
El Personal de fraccionamiento anota en la Bitàcora de producto radiado CAL-21-D la fecha, tipo de

producto, # de registro y el auxiliar de laboratorio antes de entregar el producto anota la hora de
recepcion y solicita anote su Nombre y firma quien lo recibe y al finalizar la radiaciòn de quien entrega
el producto , una vez que el producto se recoge de radiaciòn se coloca en las condiciones
especificadas para su posterior identificaciòn.
Al finalizar el proceso se registra en CAL-21-A el número de donadores, el número de ST, CP, CE,
PCF y GAH obtenidos, el nombre o sello y firma del personal que realizo el fraccionamiento. Se
ingresan datos de volumen y fracciones al sistema de computo TESI.
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SISTEMA ALTERNO EN BOLSA

TERUMO
RECOGER DEL AREA DE SANGRADO EL PRODUCTO OBTENIDO

(SANGRE TOTAL)
Se pesa el Sistem y se ingresa en la Cal 21-B

(en sistema de computo)
Colocar en las camisas de la centrifuga la ST y balancear por peso
Centrifugar 1800 rpm/10 min

aproximadamente
Separar PG
Separar PRP
CENTRIFUGAR
Pesar e ingresar
Se pasa el PG a la 3500 RPM /15
en el SISTEMA
bolsa de ADSOL y MIN
se sella
Se conceta el filtro
SEPARA EL CP. SEPARA EL PFC.
al PG. Por
PESAR PESAR
gravedad se filtra
y almacena
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El formato de identificación de productos sanguíneos, M-3-0-30 se muestra a

continuación:
El formato M-3-0-30 se llena de la siguiente manera para cada producto:
Nombre del donador: Nombre y apellido completo

Fecha y hora de caducidad: Fecha en que caduca el producto.
Producto: Tipo de producto: ST, CE, CP, PCF.
Volumen: Cantidad en ml que se obtuvo del producto.
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La bitácora de estado de los equipos CAL-21-A se muestra a continuación:
BITÁCORA DE ESTADO DE LOS EQUIPOS

CAL-21-A
Fecha: Observaciones
Nombre o sello del Químico de Fraccionamiento
Centrifuga DAWONDAMON/IEC DIVISION
Temperatura
RPM
Tiempo
Limpieza
Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3
Temperatura
RPM
Tiempo
Limpieza
Centrifuga BECKMAN J6-MC
Temperatura
RPM
Tiempo
Limpieza
Limpieza del Extractor de plasma
Funcionamiento y limpieza de Equipo T-ACE
La bitácora CAL-21-A se llena de la siguiente manera:
Fecha:
Día, mes y año de uso del equipo.
Nombre o sello del Químico
de Fraccionamiento: Nombre(s), Apellido Paterno y Materno
Centrifuga DAWON/IEC Anotar una paloma en el caso de que el

DIVISION,Centrifuga SORVALL equipo se encuentre en buen estado
General-Purpose RC-3 y antes de su uso y una X en caso
Centrifuga BECKMAN J6-MC contrario. :
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Realizar pruebas a diferentes

temperaturas y anotar una paloma en el
Temperatura: caso de que el equipo se encuentre en
buen estado antes de su uso y una X en
caso contrario.
Realizar pruebas a diferentes

revoluciones por minuto y anotar una
RPM: paloma en el caso de que el equipo se
encuentre en buen estado antes de su
uso y una X en caso contrario.
Realizar pruebas a diferentes tiempos y

anotar una paloma en el caso de que el
Tiempo: equipo se encuentre en buen estado
antes de su uso y una X en caso
contrario.
Si el equipo se encuentra limpio anotar

Limpieza del extractor de plasma:
una paloma y en caso contrario una X.
Si el equipo funciona y se encuentra

Funcionamiento y limpieza del
limpio anotar una paloma y en caso
equipo T-ACE:
contrario una X.
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La bitácora de fraccionamiento CAL-21-B se muestra a continuación:
BITACORA DE FRACCIONAMIENTO
CAL-21-B
REGIS ST CE PF CP H. T. FIL.
No. EXTR
H. F. delta T. FIL. INI
FIN DIF
TRO
PB-ST PN-ST SEXO VOL PB-PG PN-PG V PF-PB PF-PN PF-V CP-PB CP-PN CP-V
La bitácora de bajas CAL-21-B debido a su tamaño no se muestra dentro de este

procedimiento.
La bitácora CAL-21-B se llena de la siguiente manera:
No.: # de bitácora de Ingresos y egresos.
REGISTRO: # de unidad
Masculino (M).- Densidad: 1.057

SEXO: Femenino (F).- Densidad: 1.054
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ST-PB: Peso (gr) del sistema de sangrado: la bolsa

madre con 63-65 ml de anticoagulante más la
sangre de la flebotomia (450 gr +/-10%), la
bolsa con el aditivo y las dos bolsas satelites.
ST-PN: Es la diferencia de peso entre el ST-PB

y la suma de la bolsa madre con 63-65 ml de
anticoagulante más la bolsa con 100 ml de
aditivo más las dos bolsas satelites
ST-V: Es el PN entre la densidad de la sangre

(Masculino 1.057 o Femenino 1.054)
CE-PB: Peso del Concentrado eritrocitario más la

bolsa
CE-PN: PB-CE menos el peso de la bolsa

contenedora (47gr para el sistema que
actualmente empleamos)
VOL: PN entre1.093 (densidad del CE)
CP: Peso del Concentrado plaquetario más la

bolsa.
PN: Peso del CP menos 25 que es el peso

la bolsa
VOL: Es el PN entre 1.028 (densidad del CP)
h. extraccion: Hora de extracción
H. F. Hora de termino del sangrado
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delta Diferencia entre inicio y término del sangrado
Tfil ini. Hora de inicio de la filtración

prealmacenaminto
Tfil fi Hora de término de la filtración

prealmacenamaiento
Dfilt Diferencia entre inicio y término del proceso

de filtración
NOMBRE O SELLO: Nombre(s), Apellido Paterno, Apellido

Materno del Químico de Fraccionamiento que
realizo el proceso.
FIRMA: Firma del Químico, Laboratorista, Técnico o

Auxiliar de laboratorio que realizo el
Fraccionamiento
La bitácora de bajas CAL-21-C debido a su tamaño no se muestra dentro de este

procedimiento.
La bitácora de bajas CAL-21-C se llena de la siguiente manera:
Se marca con una paloma o una X el motivo de la baja.
Fecha: Día, mes y año de baja del producto.

Registro: # de bitácora de ingresos y egresos
Nombre: Apellido Paterno, Apellido materno y
nombre(s)
Vol: Volumen desechado en ml o UI.
Tipos de productos:
ST: Sangre Total

CE: Concentrado eritrocitario
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PF: Plasma fresco.

PE: Plasma envejecido
PSF: Plasma sin factor
CP FERESIS: Concentrado plaquetario obtenido por aféresis
abierta o cerrada.
CP: Concentrado plaquetario
CR: Crioprecipitado
CAUSAS DE BAJA
6.7.1 Marcadores Infecciosos:
VIH: Virus de Inmunodefiencia adquirida

VBH: Hepatitis B
VCH: Hepatitis C
VDRL: Sifilis
CHAG: Chagas
BRUC: Brucela
CMV: Citomegalovirus
OTROS: Estudios específicos solicitados.
Otros motivos de baja:

672AUTOEX.: Autoexclusión
673 CAD.: Caducidad
674 Def. conserv.: Deficiente conservación
675 Def. recolec.: Deficiente recolección
676 Roto: Sistema Roto (Bolsa, linea, etc)
677 Cont. erit/Hem.: Contaminación de Eritrocitos y/o Hemólisis.

678 Lipem.: Lipemico
679 Cont./Pic.: Picado (Bolsa, linea, etc)
Control de Calidad: Utilizado en estudios de Control de calidad

Nombre: Nombre Completo o sello del Químico,
laboratorista, técnico o auxiliar de laboratorio
que dio de baja el producto
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Fecha: 24 Feb 2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Nota 1: El uso de guantes para el proceso de fraccionamiento es obligatorio.
Nota 2: El funcionamiento y la limpieza de los equipos deben ser revisados por el

Químico de Fraccionamiento antes de iniciar el proceso.
Nota 3: Se puede utilizar la bolsa vacía para recolectar el PCF o la bolsa que contenía el
aditivo, tomando en cuenta la variación de peso entre cada bolsa para los cálculos.
Nota 4: La temperatura de los refrigeradores es muy importante para el almacenamiento

adecuado de los diferentes tipos de muestras.
Nota 5: Se debe tener la calibración y revisión continua de balanzas, del equipo T-ACE
y centrifugas.
REGISTROS
La bitácora CAL-21-A se debe almacenar 1año.
La bitácora CAL-21-B se guarda 5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto.
La bitácora CAL-21-C se guarda 5 años en archivo activo y 5 años en archivo muerto.
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de operación
del equipo T-ACE
CAL-02-B
Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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del equipo T-ACE
Ninguno 0 24/09/03
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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del equipo T-ACE
Durante el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento CAL-21)

se puede realizar la separación utilizando el Extractor de plasma (Ver
procedimiento CAL-24) o por medio del Equipo T-ACE la siguiente manera:
Verifique en el manometro que se encuentra en la parte de atras baja del equipo que la presion este en 5. (1)
Encienda el equipo con el interruptor (2) que se encuentra en la parte de atras del equipo.
Oprima MENU en el panel de control (3) para seleccionar el programa que desea
Oprima SCROLL (4) para seleccionar el No del programa
Oprima STOP (5) y aparece la siguiente pantalla:
PROGRAMME 5
PRP
phase:05
Colocar la bolsa que contiene el plasma previamente centrifugado en frente de la puerta (7) dentro de dos
piezas de metal (6).
Colocar la bolsa satelite vacia en la balanza (8) que le corresponde
La linea que sale de la bolsa que contiene el plasma se coloca dentro de los clamps marcados con numeros y
de acuerdo al diagrama siguiendo siempre la linea marcada. (9) , (10), (11).
(marcado en el equipo en color rojo)
Cerrar la puerta y el equipo indicara que se puede comenzar y la pantalla sera la siguiente:
BREAK CLICK-TIPS
AND PUSH “START”
Y en el panel de control se observa que el foco del STOP (5) se prende y el del START (12) empieza a
parpadear
Oprimir START (12) para iniciar y las pantallas que se observan son las siguientes:
PROGRAMME 5 PRP
P:08
plasma (g):
PROGRAMME 5 PRP
phase:09
sealing head 1
PROGRAMME 5 PRP
phase:09
sealing head 2
PROGRAMME 5 PRP
close tubing with
plastic clamps
and push STOP
Escuchara el sonido de alarma y en el panel observara el foco del MENU (3) encendido y el STOP (5)
parapadeando y se escucha como sellan los clamps las líneas de plástico e indica que a terminado el
procedimiento
CAL-02-B
Fecha: 24 sep 2003
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del equipo T-ACE
Se abren los clamps
Se ponen los dedos del lado izquierdo de los clamps 1 y 2 (13) y el sobrante de linea se desecha en el bote
correspondiente.
Quitar la bolsa que contiene el PCF y despues la que contiene el plasma teniendo cuidado al sacar las lineas
de los clamps
Equipo T-ACE
4 Obstructores y Cabezales selladores de Alta frecuencia
(10 Y 11)
Balanzas (8)
(13)
(7)
1 Pantalla Digital y un Fácil
Panel de Control (3), (4) ,(5) y (12)
(6)
(1) Motor Regulador de Flujo y un
1 Detector (9)
12 Detectores de Presión
(2)
1 Lector de Código de Barras
Universal
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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del equipo T-ACE
Nota 1: Se requiere el mantenimiento periódico del equipo.
Nota 2: Mantener limpia el área de los clamps.
Nota 3: Realizar la inspección diaria para conocer el estado del equipo.
REGISTROS
No existen registros asociados con este procedimiento.
CAL-02-B
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento general de operación
de centrifugas
Se anexa procedimiento de manejo 1 27/02/04

para la centrifuga SERO - FUGE
Una vez que el donador ha sido sangrado (Ver procedimiento CAL-46) se procede
a realizar el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento
CAL-21) en el que se realizan varias centrifugaciones de la siguiente manera:
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de centrifugas
Centrifuga DAMON/IEC DIVISION
La centrifuga DAMON/ IEC DIVISION se prende con el interuptor que indica MAINWER (1).
Al encender el equipo se ilumina al mismo tiempo el foco naranja que se encuentra arriba del la palabra
anterior y el foco verde donde indica STOPPED (2).
Se establecen las RPM (3) y la Temperatura (4) especificas para cada producto a centrifugar
(Ver Tabla CAL-23-A)
Se abre la tapa de la centrifuga con la palanca que se encuentra en la tapa, la que se giran a la izquierda y se
jala hacia arriba.
Se sacan los vasos de centrifuga
Se introduce la muestra a centrifugar en el vaso (previamente pesada y corroborado que los vasos paralelos
tendran el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga).
Se introducen los vasos que contienen las muestras a la centrifuga
Una vez adentro los 4 vasos de la centrifuga se cierra la puerta y se jala hacia la derecha la palanca.
Se pone el tiempo que se requiere según la muestra introducida.(5)
Se aprieta START (6) y se puede observar que ha iniciado la centrifugación cuando el foco verde que dice
STOPPED (2) se apaga.
Pasado el tiempo de la centrifugación se enciende el foco verde STOPPED (2) lo que indica que ha terminado
de centrifugar y se pueden sacar los vasos de la centrifuga.
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de centrifugas
Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3
La centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 se prende con el interuptor que dice MAIN SWITCH ON
(encender) y OFF (apagar) (1) , cuando la enciendes se prende el foco naranja que dice MAIN POWER (2)
Se establecen las RPM (3) y la Temperatura (4) especificas para cada producto a centrifugar
(Ver Tabla CAL-23-A)
La tapa de la centrifuga se abre jalando la palanca hacia arriba
tienen el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga).
Se incorporan los vasos que contienen las muestras a la centrifuga
Se cierra la puerta de la centrifuga
Se pone el Tiempo (5) que se requiere según la muestra introducida.
Se aprieta START (6) y se prende el foco naranja (7) que indica el inicio de la centrifugación.
Una vez terminada la centrifugación se pueden sacar los vasos de la centrifuga.
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de centrifugas
Centrifuga BECKMAN J6-MC

La centrifuga BECKMAN J6-MC se prende con el interuptor (1) y se observa al encender que se prende un
foco naranja donde dice MAIN POWER (2)
Para introducir las condiciones se siguen los siguientes pasos:
Para poner las RPM se presiona el boton que dice SPEED (3) teclee el valor y presione ENTER/RECALL (4)
para que se fije el dato que metio
Para introducir el tiempo se presiona el boton que dice TIME (5) teclee el valor y presione ENTER/RECALL
(4) para que se fije el dato que metio
Para introducir el valor de la temperatura presione de el boton TEMP (6) teclee el valor y presione ENTER/
RECALL (4) para que se fije el dato que metio. Los valores especificados para cada producto se encuentran
en la Tabla CAL-23-A.
La tapa de la centrifuga se abre empujando la palanca hacia abajo y jalando la tapa.

La tapa de los vasos se abre jalandola hacia arriba y se coloca en la parte interna de la tapa de la centrifuga.
tengan el mismo peso para conservar la estabilidad de la centrifuga).
Se incorporan los vasos que contienen las muestras a la centrifuga
Se pone la tapa de los vasos verificando que entre totalmente y posteriomente se cierra la puerta de la
centrifuga
Se presiona PROGRAM RECALL (7) para verificar que las condiciones. Se presiona START (8) y se prende el
foco verde que indica el inicio de la centrifugación.
Al termino del tiempo suena la alarma y cambia de START (8) a STOP (9)
Se pueden sacar los vaso de la centrifuga.
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de centrifugas
SERO - FUGE
El personal de banco de sangre recibe los tubos para su

separación en tubos 12 x 75mm
Se colocan los tubos con volumen similar en cotraposición
La SERO FUGE es una centrífuga de velocidad constante (3400 rpm

aproximadamente) y con tiempo variable.
El timer que se localiza en la parte frontal se gira en dirección a las manecillas del
relog y se ubica en el timpo deseado.
Al término del tiempo la centrífuga se detiene en automático.

Destapar y sacar los tubo.
La tabla CAL-23-A se muestra a continuación:
Sangre Total Plaquetas
Centrifuga DAMON/IEC DIVISION 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C
Centrifuga SORVALL General-Purpose RC-3 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C
Centrifuga BECKMAN J6-MC 2200RPM 10MIN 18 C 1500RPM 10MIN 18 C
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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de centrifugas
Nota 1: Se requiere el mantenimiento y la calibraron periódica de las balanzas.
Nota 2: Mantener sin golpes y limpios los vasos de la centrifuga.
Nota 3: Realizar la inspección diaria de los equipos de trabajo.
Nota 4: Las centrifugas DAMON/IEC DIVISION y la SORVALL General-Purpose

RC-3 contienen 4 vasos para centrifugar y la BECKMAN J6-MC tiene 6 vasos.
REGISTROS
No existen registros asociados con este procedimiento
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 99 de 3
Procedimiento de operación del
extractor de plasma
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 100 de 3
extractor de plasma
Ninguno 0 24/09/03
CAL-02-B
Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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extractor de plasma
Durante el Fraccionamiento de la muestra recolectada (Ver procedimiento CAL-21)

se utiliza el extractor de plasma de la siguiente manera:
Para realizar la extracción del plasma se requiere introducir la bolsa que contiene el Concentrado eritrocitario
y el Plasma previamente separados por la centrifugación en el Extractor de plasma.
Para introducir la bolsa se baja la palanca (1) que se encuentra en la tapa (2) que ejercera la presión y se
atora en el gancho (3) que se encuentra en la base del extractor, una vez introducida la bolsa se suellta la
palanca de la tapa girando el gancho a la derecha y se inicia la presión sobre la bolsa.
Se coloca una pinza en la línea que va a la bolsa vacía que esta sola y se rompe el seguro de la linea principal
de la bolsa que contiene el producto para dejar salir el plasma.
Dejando un poco de plasma aproximadamente 1cm y finalizada la separación se coloca una pinza en la linea
que va al plasma y se quita la usada en la toma de muestra (si concidera que sea necesario poner una pinza
en la bolsa vacia)
Extractor de plasma:
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Fecha: 24 sep 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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extractor de plasma
REGISTROS
No existen registros asociados con este procedimiento
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Fecha: 03 Dic 2003
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Fecha: 03 Dic 2003
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Ninguno 00 03/Dic/03
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Fecha: 03 Dic 2003
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El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva acabo la valoración

médica de los pacientes para los que solicitan productos del Banco.
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Fecha: 03 Dic 2003
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VALORACION CLINICA DEL

PACIENTE
SOLICITUD A-13-14-07
Se recibe solicitud de producto sanguíneo en ventanilla de sección de

Inmunohematología del Banco de Sangre. Se revisa
SI ok NO
NO SE RECIBE
Se recibe muestra muestra ni solicitud
y solicitud
NO
Se notifica la
Médico adscrito al
Banco de Sangre
para su valoración
El Médico revisa:
Nombre del paciente
Servicio Solicitante
Cama
Fecha de última transfusión
OK SI
Diagnóstico
Hb/Hto
Peso del paciente
Causa de la Urgencia (si existe)
Depués de realizar la valoración Se procede a realizar la

clínica del paciente, se pone una valoración clínica de
nota en la solicitud con los acuerdo a los productos
NO SE ACEPTA
cambios a efectuar en: sanguíneos solicitados,
A).- los productos solicitdos revisando al paciente así
B).- dosis como su expediente clínico
SI
Se realiza una
anotación con la Se da la solicitud al
palabra SI en el personal de laboratorio
ángulo superior para la asignación del
derecho de la producto solicitado
solicitud
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Fecha: 03 Dic 2003
ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
Formato A 13-14-07.- se almacena 5 años en el archivo activo y 5 años en archivo

muerto
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PROCEDIMIENTO DE RECOLECCIÓN DE CÉLULAS PROGENITORAS

HEMATOPOYÉTICAS DE SANGRE PERIFÉRICA
Nombre: Dra. Doris Nombre: Dra. M. Leticia Nombre: Dra. Dinora V.

Lordméndez Jácome Medina Macías Aguilar Escobar
Fecha: 8-Julio-2011 Fecha: 8 Julio 2011 Fecha: 8 de Julio 2011
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 Se elimina la sección de
cuantificación de células tallo (CD 1 08-07/11
34+) por citometría, ya que esto
se describe en otro procedimiento
(CAL-66 Citometría).
 Se agrega el diagrama de flujo de
este procedimiento.
 Se agregan lineamientos
incluyendo las características del
producto conforme de Aféresis.
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El donador/paciente acude a su cita se registra en el área de recepción presentando su identificación con fotografía y vigente, si
es menor de edad acude con el padre o tutor y se identifica el formato M-3-0-23 con la leyenda CÉLULAS TALLO)
La enfermera toma del Kanban de recepción la ficha de identificación y llama al donador para toma de signos vitales,
somatometría y toma de muestra de biometría hemática la cual es procesada por el quíco encargado del área de toma de
muestra.
El médico toma del Kanban de recepción la ficha de identificación con resultado de la biometría hemática y realiza la historia
clínica (Ver procedimiento CAL-40). Lo ingresa a la sala de Aféresis y solicita el número de unidad y las etiquetas
correspondientes (Ver procedimiento CAL-20) pegando una etiqueta en la hoja de identificación y se procede a realizar la
recolecciónm de células tallo.
Se procede a instalación y purgado de equipo (cebado) (Ver manual del operador del separador en uso) e inicia el proceso de
recolección de células tallo conectando el equipo desechable instalado en el separador al catéter deldonado/paciente con
técnica estéril*, registrando la información en la hoja de control de procedimientos de aféresis Bitácora CAL50-A.
Se administra gluconato de calcio y solución salina (1gr./10 Kg) en infusión continua en la línea de retorno como profilaxis para
prevenir la toxicidad por citrato.
Al terminar el proceso de recolección de células tallo se toman signos Vitales y se desconecta el equipo desechable
de las líneas del cateter, se cierran las líneas del mismo dejándose heparinizados.( con técnica estéril).
Se le proporciona un refrigerio y al terminar se envía al servicio de trasplantes para seguir indicaciones y se

programa para una segunda recolección al día siguiente (solo en caso de no haberse obtenido la dosis terapéutica).
Al terminar de retirar el equipo la enfermera identifica las unidades del producto obtenidas (2 bolsas),
la ficha de identificación. Una de las etiquetas se pegan en la Bitácora CAL -50-a de la hoja que
corresponde al procedimiento que se lleva a cabo
NOTA: La identificación de las bolsas es provisional hasta la identificación final en Serología . (Ver
CAL- 32 )
Se anota en cada una de las bolsas el número de Aferesis (obtenido de la bitacora CAL-50-A), y el
volúmen.
La enfermera lleva las bolsas del producto al área de Inmuno -Hematología – receptores. Se colocan
en el refrigerador correspondiente y se avisa al personal del área .
Se entrega al área de Serología la Historia clinica , la ficha de identificación, el talón de
autoexclusión, los resultados de la biometría PRE.
Al terminar el procedimiento la enfermera registra la información en el sistema informático de banco

de sangre .
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1.-PROPOSITO:
Obtener células progenitoras de sangre periférica de donadores alogénicos o

autólogos en cantidades terapéuticas que garanticen el injerto satisfactorio de las
mismas en los pacientes que lo reciban.
2.-ALCANCE:
Desde la aceptación del paciente en protocolo de Trasplante de células progenitoras

hematopoyéticas de sangre periférica (TCPH-SP), el estudio/valoración del donador
alogénico o autólogo en el banco de sangre, control de la movilización de CPH, hasta la
recolección de las CPH por medio de procedimientos de aféresis.
PERSONAL INVOLUCRADO Y RESPONSABILIDADES.
- COORDINADOR DEL COMITÉ DE TRASPLANTE DE CÉLULAS PROGENITORAS

HEMATOPOYÉTICAS.
Informar a miembros del comité sobre los pacientes aceptados para el protocolo de
trasplante de células progenitoras hematopoyéticas.
Elaborar solicitudes para estudios a realizar en Banco de Sangre (BS). (Ver
procedimiento de elaboración de solicitudes de estudios en BS).
Administrar estimulo al donador para movilización.
Solicitar unidades de CPH-SP para su infusión.
- JEFE DEL DEPARTAMENTO DE BANCO DE SANGRE.
Enlazar las actividades del BS con la coordinación del comité de TCPH.
Coordinar actividades relacionadas a la recolección en el Banco de sangre.
Solicitar apoyo para la criopreservación de las CPH-SP si no se dispone del recurso en
el BS.
- COORDINADOR (A) DE LA UNIDAD DE AFERESIS.
Informar y orientar al familiar, sobre el proceso de recolección de CPH-SP y
apoyo transfusional peri trasplante
Recoger, verificar los resultados de los estudios realizados e informar al jefe del
departamento, al coordinador del comité de TMO sobre los resultados de los estudios
realizados en BS.
Programar los procedimientos de recolección de CPH-SP
Supervisar los procedimientos de recolección de CPH-SP.
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Informar a la jefatura de BS y a la Coordinación del comité de TCPH sobre cualquier

eventualidad de los procedimientos.
Coordinar con el laboratorio de BS la existencia de componentes sanguíneos dirigidos
para los pacientes en caso de utilizarse durante el procedimiento de
recolección.
JEFE DEL LABORATORIO DEL BANCO DE SANGRE.

Coordinar la realización de los estudios de los donadores y/o pacientes en protocolo de
TCPH.
Proporcionar de manera oportuna, a la coordinación de aféresis los resultados de los
estudios de laboratorio realizados a los donadores, pacientes en protocolo de TCPH.
Coordinar la realización del control de la movilización en sangre periférica de los
donadores (BH, cuantificación de células mononucleares (CMN) y/o CD34+)
Coordinar la realización del control de calidad a las cosechas de CPH-SP obtenidas en
los procedimientos de recolección.
Mantener bajo resguardo las CPH y supervisar la adecuada conservación de las CPH-
SP obtenidas.
Proporcionar las unidades de CPH-SP cuando se lo soliciten.
RECEPCION. (Ver CAL-20 Procedimiento de registro a disponentes)

Ingresar datos personales del donador en el sistema e imprimir etiquetas para
identificación de tubos de muestras de sangre y asignar número de unidad.
ENFERMERA.
Valora accesos venosos, somatometría y signos vitales de los candidatos a donadores
de CHP-SP (Ver CAL- 30 valoración de venas y somatometría).
Realiza procedimiento de recolección de células (Ver Manual Operativo del separador
celular)
QUIMICO
Procesar muestra de sangre para BH (Ver CAL-16 Uso del equipo automatizado de
Biometría Hemática) y cuantificación de CD34.
3.-DESARROLLO DEL PROCEDIMIENTO.
Se realiza en 4 fases que son:

1.- Presentación de pacientes al programa de Trasplante de medula ósea (TMO).
Se realizan reuniones quincenales en donde se comentan los casos (Ver Minutas).
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2.- Estudio de donador, donador/paciente en banco de sangre (Ver Cal-25

Procedimiento de grupo sanguíneo y anticuerpos y Cal-26 Procedimiento de serología).
Valoración en la unidad de aféresis.
Se realiza valoración clínica del donador de acuerdo a edad:
A) Mayores de edad solicita cita a TMS de BS para estudio como donador
habitual.
B) Si es menor de edad llena historia clínica de disponentes de sangre, se toman
signos vitales y somatometría y se valora la utilización de concentrado
eritrocitario para el cebado del equipo desechable del separador celular.
Se programa procedimiento de acuerdo a características específicas de cada donador.
Se proporciona al padre o tutor o al donador la carta de consentimiento bajo
información donde se describen las características del procedimiento: como, donde y
quien lo realiza y quien supervisa, preparación (movilización), duración y frecuencia,
efectos adversos y posibles complicaciones; y solicita su firma de autorización para la
realización del mismo. (Ver Carta de consentimiento bajo información).
3.- Movilización.
Inicia 4 días antes del inicio de la recolección con la administración de citocinas,
quimioterapia, citocinas/quimioterapia y/o radioterapia, según protocolo de TMO.
El donador o paciente/donador acude al servicio de oncología para la administración
del estimulo cada 24 h incluyendo los días de recolección de CPH-SP.
Simultaneo a la administración del estimulo, se toma una muestra de sangre en tubo de
BH para el control de la movilización, de acuerdo a el incremento de la formula blanca
(leucocitos totales, % y total de CMN).y se envía al BS el tubo con la muestra de
sangre para el conteo de células CD34+.
4.- Recolección de células hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica.
El donador acude al BS al 4º ó 5º día del inicio de la movilización, presenta la solicitud

de BH y CD34+.
La recepcionista ingresa la información en el sistema, le proporciona la hoja ficha de
identificación de donador (M-3-0-23) la cual ha identificado con la leyenda células tallo,
y solicita la firme el donador o el padre /tutor.
La recepcionista solicita al familiar o al donador se anote en la Bitácora de
Disponentes Atendidos (CAL-46-B), y pase a la sala de espera.
La enfermera toma la hoja de identificación del Kanban ubicado en la zona de
recepción. Lo llama para tomar signos vitales. Nota: Si no tenemos resultado de
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biometría hemática y cuenta de CD34 previas, se tomarán en ese momento las

muestras correspondientes.
Pide al donador o al familiar que lleve al menor de edad que acudan a tomar un
desayuno ligero.
El químico procesa la citometría hemática y entrega el resultado a la enfermera y/o
médico y posteriormente se realiza la cuantificación de células CD34+.
El médico encargado del procedimiento valora los resultados de la biometría hemática
y de la cuantificación de CD34+ si se tienen disponibles del día anterior y decide la
realización o no del procedimiento de acuerdo a lo programado de acuerdo a las
características clínicas del donador valoradas previamente.
La enfermera procede instalar el equipo desechable en el separador celular según las
instrucciones del Manual del operador.
El médico supervisa permanentemente el procedimiento, las condiciones clínicas del
paciente y da instrucciones si se presentan problemas técnicos y/o clínicos
relacionados con el paciente.
Nota: La conección y desconección de las líneas del catéter al equipo desechable
deberá realzarse utilizando técnicas de asepsia y antisepsia y se tomarán las muestras
pre y post procedimiento necesarias para el control del mismo (biometría hemática,
hemocultivo, tiempos de coagulación, etc.).
Al finalizar el procedimiento la enfermera o el médico solicita al área de recepción las
etiquetas de identificación de unidades y documentación, y las pega en las bolsas de
recolección de CPH, plasma, bitácora, historia clínica y hoja de identificación.
La enfermera entrega el o los productos obtenidos al área de inmunohematología para
su almacenamiento hasta que se soliciten para su infusión.
LINEAMIENTOS O POLÍTICAS:
1.- La información adicional que se anexa a la hoja de identificación del donador no

deberá eliminarse (desprenderse o borrarse).
2.- La obtención de componentes celulares por métodos de aféresis deberán tener

como propósito cubrir la deficiencia específica de dicho componente en un paciente.
3.- Los procedimientos de aféresis para la obtención células progenitoras

hematopoyéticas deberá estar justificada por una solicitud de interconsulta del servicio
y el médico del servicio responsable del tratamiento del paciente.
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4.- Los donadores de células hematopoyéticas obtenidas por aféresis deberán cubrir
los requisitos normativos:
Accesos venosos adecuados (preferentemente catéter venoso central)
Estudios de inmunohematología (grupo ABO, Rh), antígenos eritrocitarios, aglutininas
en caso específicos (incompatibiloidad mayor)
Estudios de serología del donador: VIH, HB, AgsHB, Brucella, Chagas, CMV IgM.
Consentimiento informado.
Control de movilización con biometría hemática y/o cuantificación de células CD34+.
Células progenitoras
≥ 50 mL
≥ 2x106/kg de peso de receptor de
células CD34+ Hematopoyéticas
(Alogénico)
≥1.5x106/Kg de peso receptor de células

CD34+
(Autólogo)
Para el producto final:

Integridad de los contenedores.
Identificación de la unidad con: Nombre del donador
Número de unidad/Número de aféresis.
Fecha de obtención.
Tipo de componente.
Volumen.
5.- El producto final que no cumpla con los criterios de conformidad deberá ser
evaluado conjuntamente con el personal médico y de laboratorio de banco de sangre y
el coordinador de trasplantes, en base a los siguientes criterios:
 Cuando la dosis no sea la óptima se considerara la posibilidad de la realización
de otro procedimiento para poder alcanzar la dosis sumando la dosis anterior.
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DESCRIPCIÓN DEL LLENADO DE LA BITÁCORA CAL-50-A (Control de

procedimientos de Aféresis)
Una vez firmada la carta de consentimiento bajo información ya sea para disposición
Alogénica o Autóloga (Ver Anexo 1 y Anexo 2) se procede a realizar la recolección de
células progenitoras hematopoyéticas de sangre periférica.
Registrándose la información en la bitácora CAL 50 A (Control de procedimientos de
aféresis), que contiene la siguiente información:
HOJA DE CONTROL DE PROCEDIMIENTOS DE AFÉRESIS
M-3-4-06 a
No. De Aféresis: Con la letra A para identificar que es procedimiento de aféresis, el
número consecutivo del procedimiento, se inicia el No. 1 con el primer procedimiento
del año y finaliza el 31 de diciembre, y el año en curso.
No. De Unidad: Asignado por el sistema informático de banco de sangre en forma
consecutiva.
Procedimiento: Según el componente(s) que se va(n) a obtener.
Fecha: Día, mes y año en que se realiza la recolección.
Equipo: Elegir las opciones (Abierto o Cerrado).
Flujo: Establecer si es continuo o discontinuo
Máquina: Se refiere al separador que se utiliza.
Cámaras: NA (No aplica)
I. DATOS DEL RECEPTOR.
Nombre: Apellido paterno, apellido materno y nombre (s)

Registro: No. de registro otorgado por el INP
Cama: En caso de que el paciente se encuentre hospitalizado, se anotará el número
de cama correspondiente.
Grupo sanguíneo: Se anotará solo si se tiene disponible.
Edad: En años
Sexo: Se refiere a género femenino ó masculino.
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II. DATOS DEL DONADOR
Nombre: Apellido paterno, Apellido materno y Nombre(s) del donador.
Edad: # de años que tiene el donador al momento de realizar el procedimiento.
Grupo sanguíneo: Tipo de sangre del donador
Parentesco: Relación que existe entre el paciente y el donador (Amistad, familiar, etc).
Peso: En kilogramos.
SEROLOGIA: Se refiere a los resultados de los siguientes exámenes:
- H.I.V.
- H.C.V.
- AgS HB
- R.P.R.
- BRUCELLA
- OTROS
Nombre y firma del químico que realizó las pruebas: El químico anota su nombre y
firma.
III. DATOS DEL PROCEDIMIENTO
Hora de inicio: Hora en que se inicio el procedimiento.

Hora de terminación: Hora en que se finalizó el procedimiento.
Nombre y Firma de la enfermera que realiza el procedimiento
Otros datos que se registran en la bitácora CAL-50-A anotados por la enfermera

durante el procedimiento:
VELOCIDAD DE VELOCIDAD DE VOLUMEN VOLUMEN SIGNOS VITALES

SANGRE(ml/min) PLASMA DE DE Y OBSERVACIONES ***
TIEMPO ** * (ml/min)* SANGRE (ml) * PLASMA (ml)* ACD (ml)**
PRE TRANS POST
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*. Obtenidos directamente de la máquina.

**. Al momento de llenar el registro.
***. Se registran antes, durante y después del procedimiento.
Volumen procesado de sangre: Cantidad de sangre que se proceso al finalizar el

procedimiento, obteniendo este dato directamente de la máquina.
Anticoagulante: Cantidad de anticoagulante que se utilizo durante el procedimiento.
Solución salina: Cantidad de solución salina que se utilizo durante el procedimiento
IV. RESULTADOS
Volumen de la cosecha: Dato que es obtenido por la enfermera al
pesar cada bolsa que contiene el producto y
restarle el peso de la bolsa vacía (40 ml)
C.P. Estimados: El cálculo que se realiza para programar la

plaquetaféresis.
DATOS DE BIOMETRIA
HEMATICA MUESTRA PRE MUESTRA POST MUESTRA DE LA COSECHA COSECHA FINAL
PLAQUETAS
LINFOCITOS
GRANULOCITOS
HEMATOCRITO
OTROS
Nombre y firma del médico que supervisó el procedimiento: El médico anota su nombre
y firma.
M-3-4-06 b
Reacciones adversas durante el procedimiento: (RAP)
Presentó RAP: Se anota afirmativa o negativamente
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Tipo de RAP: Se anota el tipo de reacción presentada.

Medidas Tomadas: Se anota el manejo que se dio a la reacción.
Observaciones: Se anota algún comentario adicional si es que existiera.
Fallas técnicas durante el procedimiento: (FTP)
Tipo de falla: Se anota las características de la falla técnica que hubo durante el
procedimiento.
Medidas tomadas: Se anotas las acciones tomadas para tratar de resolver la falla.
Observaciones: Se anota algún comentario adicional si es que existiera.
ESPACIO LIBRE PARA ADHERIR ETIQUETA DEL EQUIPO.
ANEXO 1: CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION (Autólogo)

DEPARTAMENTO BANCO DE SANGRE
PROGRAMA DE RECOLECCIÓN DE CELULAS PROGENITORAS

HEMATOPOYETICAS
(Autólogo)
CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION.
México, D.F A día mes año-
Yo NOMBRE DEL PADRE O TUTOR acepto que mi hijo (a) NOMBRE Y APELLIDOS
DEL PACIENTE de edad en años y meses de edad, con número de registro ----------
done células hematopoyéticas progenitoras obtenidas de sangre periférica a través del
método de aféresis, para que le sean transfundidas, ya que se encuentra en el
protocolo de trasplante de células hematopoyéticas progenitoras y quién tiene el
diagnóstico -------------------------------------------------. Se me explicó que el procedimiento
de aféresis consiste en la extracción de sangre del organismo a través de un equipo
plástico, desechable y de uso único. Inmediatamente al salir la sangre del organismo
es mezclada con un anticoagulante con la finalidad de que no se coagule. Por medio
de un equipo de centrifugación integrado a la máquina que separará de la sangre las
células hematopoyéticas progenitoras con una pequeña cantidad de sangre y plasma
que le sirve para su conservación, el resto de la sangre ya mezclada con el
anticoagulante es retornada a su organismo.
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Todo esto requiere que antes del procedimiento haya cubierto varios requisitos que
son:
a) Acudir a una valoración de su estado de salud actual, realizada por el médico
tratante, y los servicios interconsultados por el mismo, incluyendo banco de sangre
En el banco de sangre le realizaran:
estudios para conocer su grupo sanguíneo ABO Y Rh, antígenos eritrocitarios, y todas
las pruebas que se consideren necesarias para evitar o disminuir posibles
complicaciones inmunohematológicas como consecuencia de transfusiones previas y/o
secundarias al trasplante.
b) Pruebas para la detección de infecciones que puedan trasmitirse por medio de
la sangre, y que de estar presente en su organismo de manera latente puedan
reactivarse como consecuencia de la baja de defensas que presentará durante el
trasplante y que garanticen su seguridad, la del personal que trabaja con su sangre y
de la persona (s) que se encuentra (n) atendiéndola(o).
c) Valoración de sus signos vitales.
La aplicación de un medicamento (factor estimulante de colonias) durante 4-6 días
previos a la realización del procedimiento para la obtención de las células
hematopoyéticas progenitoras, con el propósito de movilizarlas de la medula ósea
hacia la periferia y puedan ser separadas de esta mediante el procedimiento en
cantidad suficiente para alcanzar la cantidad necesaria (dosis terapéutica).
Puede presentar efectos adversos a la administración del medicamento (factor
estimulante de colonias) como seria: dolor óseo (huesos), escalofríos, elevación leve
de la temperatura corporal (menor de 38 grados C) dolor de cabeza (cefalea) los cuales
son leves y ceden generalmente con la administración de medicamentos que calmen
el dolor o controlen la fiebre, si a pesar de estos persisten las molestias, se considerara
la suspensión del procedimiento.
d) Toma de muestras para la realización de estudios de laboratorio (biometría
hemática) que se consideren necesarios para valoración de la respuesta a la
aplicación del que sirvió para movilizar las células.
Pueden ser necesarios 2 o más procedimientos de recolección de células
hematopoyéticas para alcanzar la dosis que mí paciente requiera.
Se me informó también que:
- El procedimiento será realizado por una enfermera especialista en el manejo de la

máquina y por un médico que supervisará la realización del mismo. Para asegurar una
buena tolerancia del procedimiento tomarán constantemente sus signos vitales:
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frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, tensión arterial, temperatura y llevaran un

registro de la
Cantidad de sangre procesada, la cantidad de anticoagulante administrado y el tiempo
en que se realiza.
Puede presentar efectos adversos como son: dolor y/o moretones al momento o
después de las punciones y en el sitio de las mismas, por efecto del anticoagulante
las molestias pueden ser: adormecimiento de los labios u hormigueo en diferentes
partes del cuerpo, ocasionalmente mareos, vómito, mismas que serán atendidas de
manera inmediata por el médico supervisor del Banco de sangre, quién dará las
instrucciones pertinentes para corregir estos efectos o suspender el procedimiento si
considera conveniente por ser de riesgo para el paciente continuarlo.
Existe el riesgo excepcional de que la máquina deje de funcionar por una falla de la
corriente eléctrica, esto no condiciona riesgo ya que el equipo cuenta con dispositivos
de seguridad para estas situaciones y que son implementadas por el personal al cargo
de las mismas.
Existe un riesgo mínimo (1:10,000) de muerte secundaria al procedimiento.
Se me recomendó que después del procedimiento debo mantener a mi paciente en
reposo relativo y no realizar actividades intensas.
He recibido información amplia sobre el procedimiento de donación de células

hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica, con respuesta a todas mis
preguntas y estoy satisfecho(a) con la explicación. Por ello acepto que mi hija(o) done
las células hematopoyéticas progenitoras por el método de aféresis, enterado de los
beneficios y de los riesgos de la realización de este procedimiento, liberando de toda
responsabilidad al personal médico y paramédico del Banco de Sangre.
ATENTAMENTE
Nombre Madre o tutor del paciente) ----------------------------------- Firma___________________
Coordinador (a) de Aféresis---------------------------------------------Firma_____________________
Responsable del Banco de Sangre------------------------------------------ Firma____________________
Testigo--------------------------------------------------------------------------Firma___________________
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ANEXO 2: CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION (Alogénico)

DEPARTAMENTO BANCO DE SANGRE
PROGRAMA DE RECOLECCIÓN DE CELULAS HEMATOPOYETICAS

PROGENITORAS.
Alogénico
CARTA DE CONSENTIMIENTO BAJO INFORMACION.
México, D.F A día de mes de año
Yo NOMBRE DEL DONADOR (A) acepto donar células hematopoyéticas progenitoras

obtenidas de sangre periférica para que mi parentesco NOMBRE Y APELLIDOS DEL
PACIENTE de 1edad en año y meses, (del paciente) con número de registro -------
(del paciente) a través del método de aféresis, para que le sean transfundidas, ya que
se encuentra en el protocolo de trasplante de células hematopoyéticas progenitoras y
quién tiene el diagnóstico de diagnostico del paciente.
Se me explicó que el procedimiento de aféresis consiste en la extracción de sangre del
organismo a través de un equipo plástico, desechable y de uso único. Inmediatamente
al salir la sangre del organismo es mezclada con un anticoagulante con la finalidad de
que no se coagule. Por medio de un equipo de centrifugación integrado a la máquina
que separará de la sangre las células hematopoyéticas progenitoras con una pequeña
cantidad de sangre y plasma que le sirve para su conservación, el resto de la sangre ya
mezclada con el anticoagulante es retornada a mi organismo.
Todo esto requiere que antes del procedimiento haya cubierto varios requisitos que
son:
Acudir a una valoración de mi estado de salud actual, realizada por el médico tratante,
y los servicios interconsultados por el mismo, incluyendo banco de sangre
En el banco de sangre me realizaron:
a) estudios para conocer mi grupo sanguíneo ABO Y Rh, antígenos eritrocitarios, y
todas las pruebas que se consideren necesarias para evitar o disminuir posibles
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complicaciones inmunohematológicas como consecuencia de transfusiones previas y/o

secundarias al trasplante.
b) Pruebas para la detección de infecciones que puedan trasmitirse por medio de la
sangre, y que de estar presente en mi organismo de manera latente puedan reactivarse
como consecuencia de la baja de defensas que presentará durante el trasplante y que
garanticen su seguridad, la del personal que trabaja con su sangre y de la persona (s)
que se encuentra (n) atendiéndola(o).
Valoración de sus signos vitales.
La aplicación de un medicamento (factor estimulante de colonias) durante 4-6 días
previos a la realización del procedimiento para la obtención de las células
hematopoyéticas progenitoras, con el propósito de movilizarlas de la medula ósea
hacia la periferia y puedan ser separadas de esta mediante el procedimiento en
cantidad suficiente para alcanzar la cantidad necesaria (dosis terapéutica).
Puede presentar efectos adversos a la administración del medicamento como seria:
dolor óseo (huesos), escalofríos, elevación leve de la temperatura corporal (menor de
38 grados C) dolor de cabeza (cefalea) los cuales son leves y ceden generalmente con
la administración de medicamentos que calmen el dolor o controlen la fiebre, si a pesar
de estos persisten las molestias, se considerara la suspensión del procedimiento.
- Toma de muestras para la realización de estudios de laboratorio (biometría hemática)
que se consideren necesarios para valoración de la respuesta a la aplicación del que
sirvió para movilizar las células.
Pueden ser necesarios 2 o más procedimientos de recolección de células
hematopoyéticas para alcanzar la dosis que el paciente requiere.
Se me informó también que:
- El procedimiento será supervisado por una enfermera especialista en el manejo de la

máquina y por un médico que supervisará la realización del mismo. Para asegurar una
buena tolerancia del procedimiento tomarán constantemente mis signos vitales:
frecuencia cardiaca, frecuencia respiratoria, tensión arterial, temperatura y llevaran un
registro de la cantidad de sangre procesada, la cantidad de anticoagulante
administrado y el tiempo en que se realiza.
Puedo presentar efectos adversos como son: dolor y/o moretones al momento o
después de las punciones y en el sitio de las mismas, por efecto del anticoagulante
las molestias pueden ser: adormecimiento de los labios u hormigueo en diferentes
partes del cuerpo, ocasionalmente mareos, vómito, mismas que serán atendidas de
manera inmediata por el médico supervisor de Banco de Sangre, quien dará las
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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instrucciones pertinentes para corregir estos efectos o suspender el procedimiento si

considera conveniente por ser de riesgo para el paciente continuarlo.
Existe el riesgo excepcional de que la máquina deje de funcionar por una falla de la
corriente eléctrica, esto no condiciona riesgo ya que el equipo cuenta con dispositivos
de seguridad para estas situaciones y que son implementadas por el personal al cargo
de las mismas.
Existe un riesgo mínimo (1:10,000) de muerte secundaria al procedimiento.
Se me recomendó que después del procedimiento debo mantenerme en reposo relativo
y no realizar actividades intensas.
He recibido información amplia sobre el procedimiento de donación de células

hematopoyéticas progenitoras de sangre periférica, con respuesta a todas mis
preguntas y estoy satisfecho(a) con la explicación. Por ello acepto donar las células
hematopoyéticas progenitoras por el método de aféresis, enterado de los beneficios y
de los riesgos de la realización de este procedimiento, liberando de toda
responsabilidad al personal médico y paramédico del Banco de Sangre.
ATENTAMENTE
Nombre Madre o tutor del paciente) ----------------------------------- Firma___________________
Coordinador (a) de Aféresis---------------------------------------------Firma_____________________
Responsable del Banco de Sangre------------------------------------------ Firma____________________
Testigo--------------------------------------------------------------------------Firma___________________
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
Bitácora de Aféresis CAL-50-A

Bitácora de Cita de Aféresis CAL-50-B
El CAL-50 A y las Historias clínicas se almacenan durante 5 años en archivo activo y 5
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica de Coombs Directo
Elaborado por:
Revisado por: Aprobado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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NINGUNO 00 3-mayo-2004
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo estudios especiales
como el de Coombs Directo
COOMBS DIRECTO
TÉCNICA DIANAGEL D.C. Scan
Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita por medio del

formato A-13-14-07 señalando el Coombs Directo, o cuando el Médico del
banco de sangre o el personal mismo lo considera adecuado por el
dignóstico del paciente.
Se realiza la centrifugación del tubo que contiene la muestra del paciente

para separar el Paquete eritrocitario. Se recomienda lavarlo una vez.
Preparar una suspensión de hematíes al 1 % (1 mililitro de Diana Sol 2 más 10

microlitros del paquete eritrocitario).
De esta suspensión de eritrocitos se agregan 50 microlitros a cada uno de los
pozos de la tarjeta, que deberá estar previamente identificada con los datos del
paciente.
Centrifugar en la centrífuga Dianafuge.
Leer e interpretar los resultados.
NEGATIVO POSITIVO
Identificar si es por complemento o
Registrar resultado en el por una IgG. Se requiere titularlo
Formato A-13-14-07, y en para poder reportarlo en el
Bitácora CAL-31-B de Formato A-13-14-07 y en la libreta
CAL-02-B
Estudios Especiales de Estudios Especiales
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
FORMATO.- A-13-14-07
Bitácora.- CAL-31-B.-De Estudios Especiales
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Elaborado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El Laboratorio del Banco de Sangre lleva a cabo un protocolo especial para la técnica
de Coombs en Neonatos.
Determinación de antígenos del sistema ABO, Rh y prueba de Coombs Directo

en recién nacidos con el DianaGel Neonatal 2D.
Este procedimiento se realiza cuando el Médico lo solicita por medio del

formato A-13-14-07 señalando el Coombs Directo, o cuando el Médico del
banco de sangre o el personal mismo lo considera adecuado por el diagnostico
del paciente.
Se realiza la centrifugación del tubo que contiene la muestra del paciente para
separar el Paquete eritrocitario. Se recomienda lavarlo una vez.
Preparar una suspensión de hematíes al 1 % (1 mililitro de Diana Sol 2 más 10

microlitros del paquete eritrocitario).
De esta suspensión de eritrocitos se agregan 50 microlitros a cada uno de los
pozos de la tarjeta, que deberá estar previamente identificada con los datos del
paciente.
Centrifugar en la centrífuga Dianafuge.
Leer e interpretar los resultados.
NEGATIVO POSITIVO
Identificar si es por complemento o por una
Registrar resultado en la IgG. Se requiere titularlo, y realizar un
Formato A-13-14-07, y eluido para identificar el posible anticuerpo
Bitácora CAL-56-A de pegado a los eritrocitos y así poderlo
Estudios Especiales reportaren el formato A-13-14-07 y en la
libreta de Estudios Especiales
CAL-02-B
Fecha: 3-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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REGISTROS
FORMATO A-13-14-07
Bitácora CAL-56-A.- De Estudios Especiales
CAL-02-B
Fecha: 10-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica para
Anemia Hemolítica en el Recién Nacido
Elaborado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 10-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 10-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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ENFERMEDAD HEMOLIÍTICA DEL RECIEN NACIDO (EHRN)
La EHRN es un proceso inmunológico que afecta al feto y al recién nacido, y se
caracteriza por un cuadro de anemia hemolítica inmune debido a la incompatibilidad
entre el grupo sanguíneo de la madre y el de su descendiente.
Clasificación de la EHRN según la causa desencadenante:
1. EHRN debido a sensibilización a otros antígenos del sistema Rh-Hr: D, C, E, c, e.

2. EHRN por incompatibilidad con el sistema ABO.
3. EHRN causada por la sensibilización a otros antígenos: Kell, Duffy, Kidd, Diego, etc.
ENFERMEDAD HEMOLÍTICA DEL RECIEN NACIDO

EXAMENES DE LABORATORIO DEL BANCO DE SANGRE PARA SU
DETERMINACIÓN
RECIEN NACIDO (RN) MADRE

Determinación del Sistema ABO y Rh-Hr Determinación del Sistema ABO y Rh-Hr
(fenotipos completos del sistema). (fenotipos completos del sistema).
Coombs Directo (CD) Rastreo de Anticuerpos Irregulares (RAI)
RN: grupo A, B, AB y Rh positivo. RN: grupo A, B, AB, O, y Rh positivo

CD positivo o negativo. CD positivo o negativo.
Madre: O positivo, RAI negativo. Madre: O negativo, RAI positivo o negativo.
Probable incompatibilidad por Sistema ABO Probable incompatibilidad por sistema Rh-Hr
Titular el CD del RN si es positivo. Titular el CD del niño si es positivo.

Realizar un eluido para Sistema ABO. Realizar un eluido para Ac irregulares
fuera de Sistema ABO.
CAL-02-B
Fecha: 10-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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En caso de que se requiera exanguinotransfusión el RN seleccionar la sangre

de acuerdo con la tabla CAL-57-A
REGISTROS
No existen registros
CAL-02-B
Fecha: 24-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica de Prueba Rápida
para Coombs Directo
Elaborado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 24-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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para Coombs Directo
CAL-02-B
Fecha: 24-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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para Coombs Directo

El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo pruebas rápidas en
tubo para Coombs Directo, la cual está indicada en:
a. Todos los mcasos de anemia o enfermedad hemolítica del recién nacido.
b. Estudios de la sangre de pacientes con anemia hemolítica.
c. Reacciones hemolíticas transfusionales.
PRUEBA RÁPIDA EN TUBO
La muestra de los eritrocitos del paciente en estudio, deberá obtenerse en un tubo

de Biometría Hemática
Se centrifuga la muestra y se separan los eritrocitos.

En un tubo de ensayo se vierten aproximadamente 0.5 ml de eritrocitos, o una
cantidad menor, dependiendo del tamaño de la muestra; se lavan 3 veces con
solución salina fisiológica. Un minuto a 3000 rpm.
Después de cada lavada se retira con cuidado la solución salina fisiológica.
Se prepara una suspensión aproximadamente al 2% en salina fisiológica de los

eritrocitos lavados.
En un tubo de ensayo se coloca una gota de suero Anti- Humano (Coombs),

poliespecífico (IgG-C3d), y se le añade una gota de la suspensión al 2% de las
células lavadas
Centrifugar durante 20 segundos a 3000 rpm (velocidad máxima de una Sero- Fuge).
Agitar el tubo suavemente para suspender el concentrado de eritrocitos y

observar perfectamente si hay presencia de aglutinación.
CAL-02-B
Fecha: 24-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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para Coombs Directo
Una prueba negativa se reconocerá por la suspensión homogénea de todas las

células.
Una prueba positiva mostrará eritrocitos aglutinados visibles macroscópicamente.
Registrar resultados en el
Formato A-13-14-07, (ver forma de
llenado en proc. CAL-42) Y
Bitácora CAL-31-A de Estudios
Especiales (Ver forma de llenado
en el procedimiento CAL-31)
REGISTROS
Formato A-13-14-07.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5

Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5

CAL-02-B
Fecha: 18-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica DE Elución por Calentamiento
Elaborado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 18-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica de Elución por Calentamiento
CAL-02-B
Fecha: 18-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Técnica de Elución por Calentamiento

El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo la técnica de
ELUCIÓN POR CALENTAMIENTO (Landsteiner y Miller)
1. Lavar el volumen de células con un exceso de salina por 6 veces. Después del
último lavado, conservar una alícuota de salina para investigar anticuerpos
libres. Si persisten, significa que los lavados no han sido suficientes y deben
practicarse lavados adicionales hasta que el residuo de salina no muestre
anticuerpos.
2. Después del último lavado, empaquetar bien las células y agregarle igual
volumen de albúmina bovina al 6%. La cual se prepara mezclando 2 ml de
albúmina al 30% para 8 ml de salina, o 3 ml de albúmina al 22% para 8 ml de
salina. Mezclar bien.
3. Llevar al baño María a 56ºC durante 10 minutos, mezclando periódicamente.
4. Centrifugar a altas velocidades por 5 minutos.
5. Separar el sobrante rosado en un tubo aparte e identificado adecuadamente.

Este método ofrece buenos resultados para eluir anticuerpos anti – A y anti – B,
pero no es recomendable para otros anticuerpos.
Registrar el resultado en el
Formato A-13-14-07, Ver forma de llenado
en proc. CAL-42) y Bitácora CAL-31-A de
Estudios Especiales (Ver forma de llenado
en el procedimiento, CAL-31)
REGISTROS
Formato A-13-14-07.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5
Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en el Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5

CAL-02-B
Fecha: 25-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento de la Prueba de Coombs Directo
para Titular Eritrocitos Problema Positivos.
Elaborado por:
Nombre:
Nombre: Nombre:
CAL-02-B
Fecha: 25-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CAL-02-B
Fecha: 25-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo la Prueba de
Coombs para titular eritrocitos problemas positivos.
PRUEBA DE COOMBS DIRECTO PARA TITULAR ERIOTROCITOS PROBLEMA POSITIVOS.
MATERIAL.-
1. Sangre problema anticoagulada con EDTA (eritrocitos problema)
2. Eritrocitos sensibilizados con IgG (testigo positivo de Coombs)
3. Eritrocitos no sensibilizados (testigo negativo de Coombs)
4. Suero de Coombs poliespecífico IgG-C3d
Preparación de los eritrocitos.-

a. Se requieren 3 tubos de 12 X 75 mm, en uno de ellos se coloca 1 gota de eritrocitos problema, en
otro 1 gota de testigo positivo de Coombs, y en el tercero 1 gota de testigo negativo de Coombs.
b. Lávelos con Solución Salina Fisiológica (SSF) tres veces, llenando el tubo.
c. Resuspéndalos al 2.5% con SSF (25 microlitros de eritrocitos en 1 ml de SSF)
Preparación de la dilución del suero de Coombs.-

1. Numere 4 series de tubos de 10 X 75 mm o de 12 X 75 mm del 1 al 8.
2. La serie 1 se utilizará para hacer la dilución del Suero de Coombs, en los tubos No 1 y 2, se
colocan 8 gotas de suero de Coombs.
3. A partir del tubo 2 hasta el No 8, coloque 8 gotas de Solución Salina Fisiológica.
4. Mezcle el contenido del tubo No 2 y pase 8 gotas al tubo No 3 y así sucesivamente hasta el No 8
donde se descartan 8 gotas.
5. Del tubo No 8 , pasar con una pipeta limpia m2 gotas a los tubos 8 de la serie 2, 8 de la serie 3, 8
de la serie 4.
6. Pase el tubo No. 7, 2 gotas a los tubos 7 de la serie 2, 7 de la serie 3, 7 se la serie 4, y así
sucesivamente hasta los tubos No 1 de la serie 2, 1 de la serie 3, 1 de la serie 4.
7. Con una pipeta limpia se pone una gota de los eritrocitos problema a todos los tubos de la serie 2.
1 gota de eritrocitos sensibilizados a todos los tubos de la serie 3 y una gota de eritrocitos no
sensibilizados a la serie 4.
8. Mezcle cuidadosamente cada serie.
9. Centrifugue todos los tubos a 3000 rpm durante 20 segundos.
10. Lea cuidadosamente cada uno de los tubos, comenzando del tubo No 8 al No 1.
11. Los resultados positivos se reportan en cruces, 4+ para el más positivo, 1+ para el menos positivo.
12. El título se reporta de acuerdo a la dilución que resulte más elevada.
CAL-02-B
Fecha: 25-mayo-2004
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Registrar resultado en el
Formato A-13-14-07, (ver forma de
llenado en proc. CAL-42) y Bitácora
CAL 31-A de Estudios Especiales
(Ver forma de llenado en el
procedimiento CAL-31)
REGISTROS
Formato A-13-14-07.- Se almacena en Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5

Bitácora CAL-31-A.- Se almacena en Banco de Sangre 5 años en archivo activo y 5

CAL-02-B
Fecha: 10 Enero 2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Procedimiento para manejo de Condonaciones
Lic. TS Ana María Dorantes Dra. Margarita Leticia Dra. Dinora V. Aguilar
Ceh Medina Macías Escobar

10-enero-2012 10-enero-2012 10-enero-2012
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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 Se elimina el inciso 3 de los 01 10-enero-2012

requisitos para la condonación
 Se establece tiempo de
resguardo del formato A-14-33-
A
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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DESCRIPCIÓN DEL PROCESO
Dentro del Instituto Nacional de Pediatría se solicitan donaciones de sangre, según

el manual de procedimientos del Departamento de Trabajo Social (Ver Manual de
Procedimientos de Trabajo Social para la donación de sangre y procedimiento CAL-11,
del Banco de Sangre) y lleva a cabo la condonación de sangre para los pacientes que
lo ameriten. Dichas propuestas de condonación se llevan a cabo en Trabajo Social del
Banco de Sangre y en Trabajo social de Hospitalización, y son autorizados por la
Trabajadora Social del Banco de Sangre y por el Jefe del Departamento del Banco de
Sangre o quien este a cargo del departamento.
CONDONACIONES EN EL BANCO DE SANGRE
El Banco de Sangre del Instituto Nacional de Pediatría lleva a cabo condonaciones

de donación de sangre cuando la situación socio-económica de los pacientes lo amerite
y bajo las siguientes situaciones:
1. Cuando son pacientes que forman parte de algún protocolo de investigación.
2. Cuando el paciente este bajo protección institucional.
3. Por diagnóstico conocido del paciente y/o de los padres.
Dicha determinación se basa en el estudio social del área de Trabajo Social del
Banco de Sangre y es autorizado por el Jefe del Departamento del Banco de
Sangre.
Si el Jefe del Departamento autoriza la Condonación de Sangre, La Trabajadora

Social realiza el llenado del Formato de Condonación A-14-33-A, (ver abajo) y
entrega a los padres la parte correspondiente y se queda en el Banco de Sangre la
parte que registra la condonación realizada, así mismo se acompaña de una breve
descripción del motivo de condonación.
El Formato de Condonación A-14-33-A, es almacenado por el Banco de Sangre en

el archivo del área de recepción.
La Trabajadora Social de Hospitalización da indicaciones a los padres del paciente

para que pase a Trabajo Social del Banco de Sangre y entregue el motivo social
para sugerir que se condone la donación de sangre y/o documento que ampara la
protección institucional del paciente.
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Notifica al jefe del Departamento de Banco de Sangre y llena el Formato de

Condonación con clave A-14-33-A, esto con la finalidad de que El Banco de Sangre
lleve un registro y evidencia de las condonaciones que se realizan en el Instituto.
Llenado del Formato de Condonación A-14-33-A, la Trabajadora Social del Banco

de Sangre, lo pasa a autorización con el Jefe del Departamento, o el responsable
del Departamento que se encuentre en ese momento.
FORMATOS RELACIONADOS A ESTE PROCEDIMIENTO

Formato A-14-33-A
INSTITUTO NACIONAL DE
INSTITUTO NACIONAL DE PEDIATRÍA PEDIATRÍA
BANCO DE
BANCO DE SANGRE SANGRE No
Nombre del
Nombre del Paciente:________ paciente:_______________________
Reg:______ Servicio:______
Reg.___ Servicio:___Cama:____ Cama_______
Se condonó Sangre: Se condonó sangre:
1Donación ( ) 2
1Donación ( ) 2 Donaciones ( ) Donaciones ( )
Motivo:_______________________
____________________________________ JEFE DEL BANCO DE SANGRE
A-14-33-A
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Forma de Llenar el Formato A-14-33-A
Nombre del Nombre del paciente para el que se solicita la

Paciente: donación
Número de expediente que tiene el paciente en el
Registro: INP
Servicio para el que le estan solicitando la
Servicio donación sangre
Cama en la que esta hospitalizado niño, o referir
Cama: si es externo
Se condonó sangre:
Tachar en el espacio correspondiente a la
1Donación ( ) 2
cantidad de donaciones condonadas
Donaciones ( )
Describir brevemente la razón por la que se
Motivo:
decide condonar la donación de sangre
REGISTROS
A-14-33-A se almacena en el Banco de Sangre, en el archivo del área de Recepción,
durante 5 años.
ANEXO 1.- MANUAL DE PROCEDIMIENTOS DE TRABAJO SOCIAL, AUTORIZADO

INSTITUCIONALMENTE
CAL-02-B
Banco de Sangre Código: CAL- 65
ISBN: 978-968-9170-17-4
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PROCEDIMIENTOS DE CARGA VIRAL

VHC Y VIH-1
Nombre: Pilar Sánchez S. Nombre: Guillermo Escamilla Nombre: Dinora Escobar

02 Enero 2012 02Enero 2012 02 Enero 2012
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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VHC Y VIH-1
CAMBIO DE EQUIPO COBAS

AMPLICOR A TAQ MAN 02 ENERO 2012
01
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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VHC Y VIH-1
Después de que las muestras de los pacientes que resultaron positivas, al Virus de
Inmunodeficiencia Humana (VIH-1) ó al Virus de la Hepatitis C, se continuará el seguimiento
clínico con determinaciones de la carga viral de manera periódica solicitándola al Banco de
Sangre.
OBTENCION DE LA MUESTRA (CAL-76) Y CENTRIFUGACION DE LA MISMA
Campana de Flujo Laminar

OBTENER ALICUOTA DE 550 uL DE PLASMA (de ser posible dos ), IDENTIFICAR Y
GUARDAR EN EL CONGELADOR DE -20 C A -80 C A

PROCESO DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS
Software AMPLINK / Equipo Taq Man
CREACION DE SERIE ANALITICA
Software AMPLINK / Equipo Taq Man
AMPLIFICACION Y DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS
Software AMPLILINK
VALIDACION DE RESULTADOS Y GENERACION DE ARCHIVO (RESPALDO

ELECTRONICO)
IMPRESIÓN DE RESULTADOS Y DESCARGAR AL SIBS (Sistema Informático de Banco de

Sangre)
LOS REPORTES IMPRESO GENERADOS SE GUARDAN 5 AÑOS EN ACTIVO Y 5 AÑOS

EN ARCHIVO MUERTO
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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VHC Y VIH-1
Carga viral del Virus de Inmunodeficiencia Humana (VIH)
La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1, para uso con el sistema de alta pureza (HPS) es una
prueba in vitro de amplificación del ácido nucleico para la determinación cuantitativa de ARN
del virus de inmunodeficiencia humana de tipo 1 (HIV-1) 1 en plasma humano con EDTA,
utilizando el kit para ácido nucleico vírico del sistema de alta pureza para la preparación
manual de las muestras y el analizador COBAS® Taq Man® 48 para la detección y
amplificación automática.
La prueba está indicada para usarse conjuntamente con la presentación clínica y otros
marcadores analíticos de progreso de la enfermedad para el tratamiento clínico de los
pacientes infectados por HIV-1. La prueba puede utilizarse para evaluar la prognosis del
paciente mediante la medición de la concentración de referencia (antes de iniciar el
tratamiento) de ARN del HIV-1 o para controlar los efectos de la terapia antirretrovírica
mediante la medición de los cambios en las concentraciones de ARN del HIV-1 en plasma
en el curso del tratamiento antirretroviral.
La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1 no está indicada para utilizarse para detectar la
presencia de HIV-1 en sangre o hemoderivados ni como prueba diagnóstica para confirmar la
existencia de una infección por HIV-1.
Utiliza la tecnología PCR para lograr una sensibilidad máxima y un intervalo dinámico para la
detección cuantitativa del ARN del HIV-1 en plasma anticoagulado con EDTA.
La prueba puede cuantificar el ARN del HIV-1 en un intervalo de 47 - 10.000.000 copias/ml.
Una copia de ARN del HIV-1 es equivalente a 1,7 UI basándose en el estándar de la OMS
(Código NIBSC 97/656).
NOTA: Para mayor información consulta el inserto
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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VHC Y VIH-1
Principios del ensayo
La prueba COBAS® TaqMan® HIV-1 está basada en tres procesos principales:

1. Preparación manual de las muestras para obtener el ARN del HIV-1
2. Transcripción reversa automática del ARN del objetivo para generar un ADN
complementario (ADNc).
3. Amplificación simultánea del ADNc del objetivo con iniciadores complementarios
específicos del HIV-1, y la detección de sondas de detección oligonucleótidas marcadas con
dos colorantes fluorescentes que permiten la determinación cuantitativa del producto
amplificado del objetivo del HIV-1 (amplicón) y del ARN del estándar de cuantificación del
HIV-1, que se procesa, amplifica y detecta simultáneamente con la muestra.( Ver inserto)
Obtención de la muestra y centrifugación:
Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-76 de

recolección y toma de muestras de pacientes.
En este proceso se utilizan únicamente muestras con EDTA.
La sangre obtenida con EDTA se puede almacenar a una temperatura de 2 a 28°C hasta 6
hrs. a partir de su obtención.
Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes mediante
centrifugación a 800-1600g por 20 minutos a temperatura ambiente. Separar e identificar el
plasma en tubos de rosca en (uno ó dos) alícuotas de 550 µL y almacenar de -20°C a -80°C
en caso de no ser usado de inmediato.
Para mayor información referirse a la pagina 11 del inserto)
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VHC Y VIH-1
EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS PARA MUESTRAS Y CONTROLES PARA VIH-1
1) Descongelar las muestras.

2) Preparar los siguientes reactivos:.
a) Inhibitor Removal Buffer (IRB)

IRB
Etanol
No Test (negro)
(mL)
(mL)
12 test 8.25 5
Conservar a 15-25 C
Estabilidad 30 días
24 test 16.5 10
48 test Todo 20
Mezclar por inversión (5 a 10 veces)

b) Wash Buffer
Wash
Etanol
No Test Buffer
(mL)
(azul) (mL)
12 test 5 20
Conservar a 15-25 C
24 test 10 40 Estabilidad 30 días
48 test Todo (20) 80

c) Elution Buffer (ELB). Incubar a 70°C. 75 ul por muestra
No Test ELB (mL)
12 test 5
24 test 10
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VHC Y VIH-1
Isopropanol
No Test
d) Isopropanol en tubo Falcon (mL)
12 test 5
24 test 10
e) CAR (Blanco) f) PK (Magenta)

Para 24 tests: 0,5 ml ELB en Para 24 tests: 5 ml ELB en frasco
frasco CAR. Mezclar por PK. Mezclar por inversión y
inversión y vortex. vortex.
Conservar a -20°C hasta 28 días. Conservar a -20°C hasta 28 días.
3) Vórtex a muestras, controles y QS.
4) Tener Lysis Rack blanco listo con marca orientación de primera

muestra y N de rack.
5) Preparar la Lysis Binding Working Solution en tubo Falcon agregando los

reactivos en el siguiente orden. Cuando se agrega el QS y PK mezclar
inversión (no vortex).
Reactivo 12 Test 24 Test
Lysis Binding 7 mL 14 mL
CAR RNA 140 µL 280 µL
HIV-1 QS 84 µL 168 µL
PK 1.4 mL 2.8 mL
6) Agregar inmediatamente 625 μl de la Lysis Binding Working Solution

preparada en cada well del Lysis Rack (blanco).
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VHC Y VIH-1
7) Agregar 500 μl de muestra y controles a sus respectivos wells del

Lysis Rack. Vortex el Rack 10 seg.
8) Incubar el Lysis rack a 50 C – 10 minutos en baño de agua (5 cm

altura de agua).
9) Secar el Rack y centrifugar 20 sec a 4600 g.
10) Agregar 350 μl de isopropanol a cada well (1 por vez). Mezclar el Rack por inversión y luego vortex 10 seg.
11) Centrifugar 20 sec a 4600 g.
12) Preparar el Filter Tube Rack (amarillo) con su Waste Rack.

Colocar las marcas de orientación y N de Rack.
13) Transferir 750 μl de cada well al well correspondiente del Filter

Tube rack (amarillo) con su Waste Rack ajustado. Tener en cuenta las
marcas de muestras.
14) Centrifugar 2 min a 4600 g.
15) Transferir el remanente de cada well del Lysis rack (blanco ) a su

correspondiente well en el rack amarillo. Descartar el Lysis Rack
blanco.
16) Centrifugar 2 min a 4600 g.» Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo.
17) Abrir los wells con el gripper. Agregar 400 μl del IRB preparado por la pared del well sin tocar la pared.
19) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer preparado por la pared del well sin tocar.
20) Centrifugar 2 min a 4600 g. » Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo.
21) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer por
la pared del well sin tocar.
22) Centrifugar 3 min a 4600 g. Descartar el Waste Rack. Colocar Elution Rack (base azul).
23) Abrir los wells con el gripper. Agregar 75 μl de ELB a 70 C a

cada well (en el centro del filtro sin tocarlo).
24) Incubar 3 min a Temp amb.
25) Centrifugar 3 min a 4600 g. » Descartar el Filter Tube Rack (amarillo) y poner el Cover Rack (azul). Respetar
las marcas de orientación.
26) Utilizar 50 μl del eluido para la PCR. Agregar a los K-tubes con
la MMX de trabajo. Mezclar por pipeteo 3 veces , evitando la
formación de burbujas. Estabilidad eluido en el Rack: 2 horas a 4-30 C
27) Iniciar la PCR dentro de 1hora de agregadas las muestras a la

MMX de trabajo.
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VHC Y VIH-1
22) Centrifugar 3 min a 4600 g. Descartar el Waste Rack. Colocar Elution Rack
(base azul).

25) Centrifugar 3 min a 4600 g. » Descartar el Filter Tube Rack (amarillo) y poner el
Cover Rack (azul). Respetar las marcas de orientación.

MMX de trabajo.
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VHC Y VIH-1
Preparación de Master Mix (MMX)

1) Sacar los reactivos de la MMX de la heladera y estabilizar a Temperatura
ambiente 30 minutos. Proteger de la luz. Limpiar los K-carriers y K-carrier holders
con isopropanol 70%.
2) Colocar el K-carrier (gradilla) en el K-carrier Holder.
3) Colocar los K-tubes en el K-carrier sin tocar las paredes del tubo.
Posiciones obligatorias: 1-2-5-20-23-24

4) Preparar la MMX de trabajo:
12 tests
24 tests
Reactivo En tubo 1,5
En vial MMX
ml
HIV-1 MMX (μl) 700 Todo el vial de HIV-1 MMX
CTM Mn 2+ (μl ) 85 170
Mezclar por inversión. No usar vortex.
Usar dentro de las 2 horas de preparada (proteger de la luz).
5) Destapar los K-tubes con el destapador y colocar las tapas en su gradilla.
6) Agregar 50 μl de la MMX preparada a cada K-tube.
Agregar 50 µL del eluído de muestras y controles a cada K-tube mezclar por pipeteo 3 veces
sin producir burbujas.
Llevar al equipo de PCR.
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VHC Y VIH-1
Software Amplilink/Taq Man
Encender: Escritorio
CPU Usuario:_____ Icono
Monitor Pasword_____ AMPLILINK
Impresora
Pestaña Icono System Encender el

Service Equipo
Due Taq Man
Perform Al finalizar:
Siga las Creación de Serie Analítica
instrucciones Done
1)Icono
2) Pestaña Orders
K-Carrier
3) New
Icono System
4) Ingresar la 5) Escoger el
identificación de Test 6) Save
las muestras
Introducir al termociclador
el K-Carrier con ayuda de
transportador
Open
Star
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VHC Y VIH-1
RESULTADOS
Cálculo de resultados
El analizador COBAS® TaqMan® 48 determina de forma automática la concentración de ARN

del HIV-1 para la muestra o el control. La concentración de ARN del HIV-1 se expresa en
copias/ml. El factor de conversión entre copias/ml de HIV-1 y unidades internacionales UI/ml
es de 0,6 copias/UI, utilizando el material de referencia de la OMS para el HIV-1B 97/65635.
El analizador COBAS® TaqMan® 48:

• Determina el valor umbral del ciclo (Ct) para el ARN del HIV-1 y el ARN del estándar de
cuantificación del HIV-1.
• Determina la concentración de ARN del HIV-1 basándose en los valores Ct del ARN del HIV-
1 y el ARN del estándar de cuantificación del HIV-1, así como los coeficientes de calibración
específicos de cada lote.
• Determina que las concentraciones calculadas en copias/ml para el HIV-1 L(+)C y HIV-1
H(+)C se encuentran dentro de los intervalos asignados.
Validación de la serie
Compruebe la ventana de resultados del software AMPLILINK o la impresión en busca de

avisos y comentarios para asegurarse de que la serie es válida.
La serie es válida si no aparecen avisos para los controles

La serie no es válida si aparece alguno de los siguientes avisos en los controles
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VHC Y VIH-1
Si la serie no es válida, repita toda la serie incluyendo la preparación de las muestras y los
controles, transcripción reversa, amplificación y detección.
Interpretación de resultados:
Para obtener una serie válida, compruebe cada una de las pruebas por si presentan avisos o
comentarios en la impresión de resultados. Interprete los resultados de la siguiente manera:
Una serie válida puede incluir resultados de muestras válidas y no válidas dependiendo de si
los avisos y/o los comentarios se obtienen para las muestras individuales.
Los resultados de las muestras se interpretan de la siguiente manera:
NOTA: Las muestras por encima del intervalo del ensayo también pueden producir un resultado no
válido con un aviso “QS_INVALID“. Si se desean resultados cuantitativos, la muestra original
debería diluirse con plasma humano con EDTA negativo para la presencia de HIV-1 y repetirse la
prueba. Multiplique el resultado notificado por el factor de dilución.
Nota: Para mayor información referirse al Inserto y al Manual.
Anotar los resultados en la bitácora CAL-65-A
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VHC Y VIH-1
VALIDACION DE RESULTADOS
1)Icono Results
Usuario:___
Pasword___
3) Número de 2) Número de
K-Carrier Review
(doble click)
4) Revisar 5) Revisar
7)Yes
RESULTADOS RESULTADOS 6) Accept
8) Ir a System
10) Apagar el equipo 9) Close Open
11) En barra de (Interruptor lado Retirar el K-Carrier
menús Izquierdo)
File
13) Cerrar
12) Shut Down Windows
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VHC Y VIH-1
Carga viral del Virus del Hepatitis C (VHC)
La prueba está indicada para su uso conjunto con la presentación clínica y otros indicadores
de laboratorio como una ayuda en la evaluación de la respuesta vírica frente al tratamiento
antivírico a través de la determinación de cambios en los niveles séricos o plasmáticos de
ARN del HCV. Datos recientes parecen indicar que las variaciones tempranas en los niveles
de ARN de HCV en suero/plasma pueden pronosticar respuestas a largo plazo del tratamiento
con interferón1.
El virus de la hepatitis C está considerado como el principal agente etiológico responsable del
90 al 95% de los casos de hepatitis post-transfusional no A y no B. El HCV es un virus ARN
monocatenario de sentido positivo con un genoma de aproximadamente 10.000 nucleótidos
que codifican 3.000 aminoácidos. Como virus transportado en sangre, el HCV es transmisible
a través de la sangre y los productos hemoderivados. La adopción más o menos generalizada
de medidas de detección sistemática del HCV en sangre ha reducido de forma considerable el
riesgo de hepatitis asociado a las transfusiones.
La prueba puede cuantificar el ARN del VHC en un intervalo de 25 – 391, 000,000 UI/ml en
plasma conservado en EDTA y suero
Principios del ensayo
La prueba COBAS® Taq Man® HCV, v2.0 se basa en tres procesos principales: (1)
preparación manual de las muestras para obtener el ARN del HCV; (2) transcripción reversa
automática del ARN diana para generar un ADN complementario (ADNc); (3) amplificación
mediante PCR del ADNc diana utilizando primers complementarios específicos del HCV, y
detección simultánea de sondas oligonucleótidas marcadas con doble marcador fluorescente
escindido que permiten la determinación cuantitativa del producto amplificado de la diana del
HCV (amplicón). Ver Inserto
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VHC Y VIH-1
Obtención de la muestra y centrifugación:
Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-76 de

recolección y toma de muestras de pacientes.
En este proceso se utilizan muestras con EDTA ó suero.
La sangre obtenida con se puede almacenar a una temperatura de 2 a 28°C hasta 6 hrs. a
partir de su obtención.
Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes mediante
centrifugación a 800-1600g por 20 minutos a temperatura ambiente. Separar e identificar el
plasma en tubos de rosca en (uno ó dos) alícuotas de 550 µL y almacenar de -20°C a -80°C
en caso de no ser usado de inmediato.
Para mayor información referirse a la pagina 13 del inserto)
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VHC Y VIH-1
EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS PARA MUESTRAS Y CONTROLES PARA VHC
1) Descongelar las muestras.

2) Preparar los siguientes reactivos:.
a) Inhibitor Removal Buffer (IRB)

IRB
Etanol
No Test (negro)
(mL)
(mL)
12 test 8.25 5
Conservar a 15-25 C
Estabilidad 30 días
24 test 16.5 10
48 test Todo 20

b) Wash Buffer
Wash Buffer Agua

No Test Etanol (mL)
(azul) (mL) desionizada(mL)
12 test 5 12.5 7.5

Conservar a 15-25 C
24 test 10 25 15 Estabilidad 30 días
48 test Todo (20) 50 30

c) Elution Buffer (ELB). Incubar a 70°C. 75 ul por muestra
No Test ELB (mL)
12 test 5
24 test 10
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VHC Y VIH-1
Isopropanol
No Test
d) Isopropanol en tubo Falcon (mL)
12 test 5
24 test 10
e) CAR (Blanco) f) PK (Magenta)

Para 24 tests: 0,5 ml ELB en Para 24 tests: 5 ml ELB en frasco
frasco CAR. Mezclar por PK. Mezclar por inversión y
inversión y vortex. vortex.
Conservar a -20°C hasta 28 días. Conservar a -20°C hasta 28 días.
3) Vórtex a muestras, controles y QS.
4) Tener Lysis Rack blanco listo con marca orientación de primera

muestra y N de rack.
5) Preparar la Lysis Binding Working Solution en tubo Falcon agregando los

reactivos en el siguiente orden. Cuando se agrega el QS y PK mezclar
inversión (no vortex).
Reactivo 12 Test 24 Test
Lysis Binding 7 mL 14 mL
CAR RNA 140 µL 280 µL
HCV QS 56 µL 112 µL
PK 1.4 mL 2.8 mL
6) Agregar inmediatamente 625 μl de la Lysis Binding Working Solution

preparada en cada well del Lysis Rack (blanco).
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VHC Y VIH-1
7) Agregar 500 μl de muestra y controles a sus respectivos wells del

Lysis Rack. Vortex el Rack 10 seg.
8) Incubar el Lysis rack a 50 C – 10 minutos en baño de agua (5 cm

altura de agua).
9) Secar el Rack y centrifugar 20 sec a 4600 g.
10) Agregar 250 μl de isopropanol a cada well (1 por vez). Mezclar el Rack por
inversión y luego vortex 10 seg.
11) Centrifugar 20 sec a 4600 g.
12) Preparar el Filter Tube Rack (amarillo) con su Waste Rack.

Colocar las marcas de orientación y N de Rack.
13) Transferir 750 μl de cada well al well correspondiente del Filter

Tube rack (amarillo) con su Waste Rack ajustado. Tener en cuenta las
marcas de muestras.
15) Transferir el remanente de cada well del Lysis rack (blanco ) a su

correspondiente well en el rack amarillo. Descartar el Lysis Rack
blanco.
16) Centrifugar 2 min a 4600 g.» Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo.
17) Abrir los wells con el gripper. Agregar 400 μl del IRB preparado por la pared del
well sin tocar la pared.
19) Abrir los wells con el gripper. Agregar 700 μl de Wash Buffer preparado por la
pared del well sin tocar.
20) Centrifugar 2 min a 4600 g. » Reemplazar el Waste Rack por uno nuevo.
(base azul).

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MMX de trabajo.
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VHC Y VIH-1
(base azul).


MMX de trabajo.
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VHC Y VIH-1
Preparación de Master Mix (MMX)

1) Sacar los reactivos de la MMX de la heladera y estabilizar a Temperatura
ambiente 30 minutos. Proteger de la luz. Limpiar los K-carriers y K-carrier holders
con isopropanol 70%.
2) Colocar el K-carrier (gradilla) en el K-carrier Holder.
3) Colocar los K-tubes en el K-carrier sin tocar las paredes del tubo.
Posiciones obligatorias: 1-2-5-20-23-24

4) Preparar la MMX de trabajo:
12 tests
24 tests
Reactivo En tubo 1,5
En vial MMX
ml
HIV-1 MMX (μl) 700 Todo el vial de HIV-1 MMX
CTM Mn 2+ (μl ) 85 170
Mezclar por inversión. No usar vortex.
Usar dentro de las 2 horas de preparada (proteger de la luz).
5) Destapar los K-tubes con el destapador y colocar las tapas en su gradilla.
6) Agregar 50 μl de la MMX preparada a cada K-tube.
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VHC Y VIH-1
Encender:
CPU Usuario:_____ Escritorio Usuario:_____
Monitor Pasword_____ Icono AMPLILINK Pasword_____
Impresora
Pestaña Icono System Encender el

Service Equipo
Due Taq Man
Perform Al finalizar:
Siga las Creación de Serie Analítica
instrucciones Done
1)Icono
2) Pestaña Orders
K-Carrier
3) New
Icono System
4) Ingresar la 5) Escoger el
identificación de Test 6) Save
las muestras
Introducir al termociclador
el K-Carrier con ayuda de
transportador
Open
Star
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VHC Y VIH-1
RESULTADOS
Cálculo de los resultados

El analizador COBAS® Taq Man® 48 determina automáticamente el título del ARN del
HCV para la muestra o el control. El título del ARN del HCV se expresa en unidades
internacionales (UI)/ml según el segundo estándar internacional de la OMS para ensayos
NAT de ARN del HCV (código NIBSC 96/798).
El analizador COBAS® Taq Man® 48:

• Determina el valor de ciclo umbral (Ct) correspondiente al ARN del HCV y al ARN del
estándar de cuantificación del HCV.
• Determina el título del ARN del HCV según los valores Ct para el ARN del HCV y el ARN
del estándar de cuantificación del HCV y los coeficientes de calibración específicos del
lote.
• Determina si las UI/ml calculadas para HCV L(+)C, v2.0 y HCV H(+)C, v2.0 están dentro
de los intervalos asignados.
Validación de la serie analítica

Compruebe la ventana de resultados del programa AMPLILINK o la impresión de los
posibles avisos y comentarios para asegurarse de que la serie es válida.
La serie será válida si no aparecen avisos para los controles de HCV .
La serie no es válida si aparece cualquiera de los avisos siguientes para los controles de
HCV :
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VHC Y VIH-1
CAL-02-B
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VHC Y VIH-1
Si la serie no es válida, repítala por completo incluyendo los pasos de preparación de las
muestras y los controles, transcripción reversa, amplificación y detección.
Interpretación de los resultados:

Para determinar si una serie es válida, compruebe los posibles avisos o comentarios
asociados a cada muestra en la impresión de los resultados. Interprete los resultados de la
siguiente manera:
Una serie válida puede incluir resultados de muestras tanto válidos como no válidos según
los avisos o comentarios asociados con cada una de las muestras.
Los resultados de las muestras se interpretan como se indica a continuación:
NOTA: Las muestras por encima del intervalo del ensayo también pueden producir un resultado no
válido con un aviso “QS_INVALID“. Si se desean resultados cuantitativos, la muestra original
debería diluirse con plasma humano con EDTA negativo para la presencia de HIV-1 y repetirse la
prueba. Multiplique el resultado notificado por el factor de dilución.
Nota: Para mayor información referirse al Inserto y al Manual.
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VHC Y VIH-1
1)Icono Results
Usuario:___
Pasword___
3) Número de 2) Número de
K-Carrier Review
(doble click)
4) Revisar 5) Revisar
7)Yes
RESULTADOS RESULTADOS 6) Accept
8) Ir a System
10) Apagar el equipo 9) Close Open
11) En barra de (Interruptor lado Retirar el K-Carrier
menús Izquierdo)
File
13) Cerrar
12) Shut Down Windows
REGISTROS
La bitácora CAL-65-A Se debe almacenar en el archivo activo durante 5 años y en el

archivo muerto 5 años.
CAL-02-B
Fecha: 01 Noviembre 2011
Página 78 de 8
CUANTIFICACION DE
CELULAS TALLO (CD 34+) POR CITOMETRIA
CAL-02-B
Página 79 de 8
CUANTIFICACION DE
En la calibración y lectura en el equipo 1 01/11/11
CAL-02-B
Página 80 de 8
CUANTIFICACION DE
Cuantificar el número de células CD 34+ y determinar el porcentaje de viabilidad

de las mismas en la cosecha de células Células Tallo recolectadas por aféresis
para el Protocolo de Transplante de Médula.
PROCESO:
1. Recepción de muestra:
a. Biometría Hemática
b. Cosecha
2. Cuantificación de cantidad de leucocitos empleando citometría en equipo

de Biometría Hemática
3. Ajuste del número de células: ≤ 10,000 µl
4. Preparación de muestra acorde a inserto
5. Antes de usar el citómetro de Flujo, se recomienda:
a. Proceso de lavado largo

b. Calibración
c. Usar en cada corrida un control normal (ver viabilidad)
CAL-02-B
Página 81 de 8
CUANTIFICACION DE
A.- Preparación de muestras para conteo de células CD34+
CAL-02-B
Página 82 de 8
CUANTIFICACION DE
B.- Lavado previo al uso del equipo
CVE: BDIS
LAVADO
ENCENDER
REVISAR
ANALIZADOR (LO +
PRESION
Cambiar de PRIME ; OBSSERVAR
BURBUJAS)
VENT-TANK CHANGE LOADER
A CPU
MANAGER MAINTENANCE
VENT-RUN MONITOR
DILUYENTE : LLENAR
IMPRESORA
MAX ¾
DESECHOS: VACIAR
TEST OPTION
COLOCAR LOS TUBOS ESCOGER
EN EL RACK COMO SE
INDICA LONG
EN LAS POSICIONES: O
EQUIPO 39.. FAC’S CLEANE SHORT

40. FAC’S RINSE CLEAN
RUN HI
COLOCAR EL RACK
EN EL EQUIPO
MONITOR
RUN
RUN
ESPERAR A QUE
TERMINE EL FILE
QUIT
LAVADO DONE
CAL-02-B
Página 83 de 8
CUANTIFICACION DE
Realizar Calibración
CAL-02-B
Página 84 de 8
CUANTIFICACION DE
Llevar las muestras al equipo para proceder a su lectura
CITOMETRO CD34 AL FINALIZAR LA CORRIDA REALIZAR UN

LAVADO LARGO (LONG) DEL EQUIPO.
CD34
APARECE EL
Plantillas ACQUIRE CONECTAR ACQUIRE
PANTALLA ULTIMO
RESULTADO CITOMETRO
PRINCIPAL ISHAGE
OBTENIDO
(Doble Click)
PARAMETERS
PRESIONAR
DESCRIPTION
LA TECLA COMAND
PESTAÑA INGRESAR LOS
COUNTER S DATOS DEL
JALAR LA
CYTOMETER ACQUIRE PACIENTE
CALIBRACIO
N L.N.W
( Y SIN SOLTAR
PRESIONAR 1, 2 Y 3
INTRUMENTS Calib.File.LNW
SETTINGS INTRUMENT
OPEN FAC’STATION BD FILES
DESKTOP S SETTINGS
MOVER COLOCAR LOS TUBOS CHECAR QUE EN

LOS EN EL ORDEN QUE THRESHOLD ESTE SET
TUBOS DONE
SE INDICA. Y EN LAS SELECCIONADO FL 1 Y
CON EL
CONTROL
EQUI POSICIONES ESTE EN UN RANGO DE
38. H 2 O 350-360
ADOR
M,ANUAL
PO 39.. FAC’S CLEANE
RUN HI 40 . FAC’S RINSE
COLOCAR EL RACK
EN EL EQUIPO IMPRIMIR
RESULTAD
PAU
ACQUISITION SAVE OS
DESPUES DE SE
ACQUISITION CONTROL
ACQUI 5 MIN
CONTROL PAUSE ABORT
RE SET UP
SET UP QUIT CELL QUEST
DON´T
SAVE
CAL-02-B
Página 85 de 8
CUANTIFICACION DE
Resultados
Obtención de resultados impresos en automático ó vaciar en el formato
LOTE____________ PERLAS BOLSA

_________________
NOMBRE PESO: _______

Muestra:
CD 34+ viables
CD34+ total
CD 45+ viables
CD45+ total
Perlas
G6
G7
Dilución
Cuenta total
CD 34+/µl
CD34+/Kg paciente
(Células CD34+ viables) / (# perlas) X (# perlas en el tubo) / (50 µl muestra) X dilución
Viabilidad de 34+: (CD 34+ viables)(100) / CD34+ Viabilidad de 45+: (CD 45+ viables)(100) / CD45+
REGISTROS
Ningún registro asociado
CAL-02-B
Banco de Sangre
Código: CAL- 68
Fecha: 26 de Marzo 2008
Página 86 de 6
AGLUTININAS INMUNES

Q.F.B. JUDITH M. en C. GUILLERMO DRA. DINORA
RODRIGUEZ HERNANDEZ ESCAMILLA GUERRERO AGUILAR ESCOBAR
CAL-02-B
Página 87 de 6
AGLUTININAS INMUNES
CAL-02-B
Página 88 de 6
AGLUTININAS INMUNES
OBJETI VO
Cuantificar la concentración de un Ac presente en una muestra de suero con fines terapéuticos, de

investigación y en la elaboración y control de calidad de los reactivos.
MATERIAL Y EQUIPO
Suero en estudio, hematíes conteniendo el Ag correspondiente al Ac a titular, pizeta con SSF,
guantes quirúrgicos, programador o gradilla, lápiz graso, pipeta de Pasteur de igual calibre, bulbo
de goma, tubos de ensaye 12 x 75 mm, termoblock temperatura variable (37, 56 a 70° C),
termómetro, centrifuga, antiglobulina humana (Coombs).
METODO
A.- Titulación de Ac anti "A" y anti "B" naturales. Realizar titulo de Ac naturales del sistema
ABO, según grupo sanguíneo:
Si es grupo "0" titular anti "A" y anti "B"
Si es grupo "A" titular anti "B"
Si es grupo "B" titular anti "A"
1. Utilizar guantes quirúrgicos
2. Obtener el suero en estudio
3. Realizar diluciones doble seriadas (solución salina / suero problema) según se requiera.
4. Colocar 100 µl de solución salina a partir del tubo número 1. Añadir 100 µl de suero.
5. Mezclar y pipetear el contenido del tubo 1 y transferir 100 µl al tubo 2, asi
sucesivamente hasta la dilución deseada.
6. Se preparan tres series: para aglutininas A, aglutininas B y un testigo
7. A la primer serie se le agregan 50 µl de eritrocitos A, a la segunda 50 µl de eritrocitos B
y a la tercera: 50 µl de eritoctios O.
8. Mezclar y centrifugar a tiempo y revoluciones (30” / 3500 RPM) .
9. Leer y anotar resultados en cruces, tubo en mano en formato correspondiente.
CAL-02-B
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AGLUTININAS INMUNES
INTERPRETACION DE RESULTADOS
A1/2 A1/4 A1/8 A1116 A1/32 A1/64 A1/128 A1/256 A1/512 A1/102
4+ 4+ 3+ 2+ 1+ 1/2+
B1/2 B1/4 B1/8 B1/16 B1/32 B1/64 B1/128 B1/256 B1/512 B1/102
4+ 4+ 3+ 3+ 2+ 1+ 1/2+
Re s ul t ad o del ti t ul o a nti "A " y a nti "B "

Anti "A" 64
Anti "B" 128
B. Titulación de anti "A" y anti "B" inmunes
Técnica para neutralizar el suero:

1. Utilizar guantes quirúrgicos.
2. Neutralizar el suero en estudio, utilizar una dilución de 1/4, 3 gotas de solución salina
fisiológica mas 1 gota de suero en estudio; adecuar esta proporción para obtener mayor
numero de gotas. ya que se debe comprobar si ocurrió a no la neutralización de los
anticuerpos naturales, utilizando pipetas de Pasteur o agregar a los tubos 1/2 de cada hilera
cuatro gotas del suero en estudio con pipeta de Pasteur o automatizada
3. Incubar el contenido de la dilución preparada de entre 56°C a 70°C por 30 minutos.
4. Retirar el contenido de la dilución neutralizada del baño de Maria y dejar reposar por 10
minutos.
5. Marcar dos tubos 12 x 75 mm como A y B.
6. Agregar a cada tubo 2 gotas de suero, posiblemente inactivado.
7. Al tubo A agregar eritrocitos "A," y al tubo "B" agregar eritrocitos B.
8. Mezclar y centrifugar a tiempo y velocidad establecida.
9. Leer y observar aglutinación.
10. Repetir los pasos 6, 7, 8, 9 y 10, si da negativo demuestre que los anticuerpos naturales han
sido neutralizados, procediendo a investigar anticuerpos inmunes.
11. Colocar dos tubos anteriores previamente neutralizados a 37°C por 30 a 60 minutos.
12. Lavar ambos tubos cuatro veces con SSF, y añadir dos gotas de suero de Coombs, mezclar y
centrifugar.
13. Leer y anotar resultados en cruces, tubo en mano en formato correspondiente. Si hay
aglutinación existe presencia de anticuerpos inmunes, proceder a realizar titulación.
CAL-02-B
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AGLUTININAS INMUNES
Interpretación:
Si se observa aglutinación, la neutralización ha sido insuficiente, se debe incubar el tubo con el

contenido de la dilución preparada durante 10 min. a 56°C a 70°C para que se termine de
neutralizar.
B.1 Título del suero
1. Identificar dos (2) hileras de tubos 12 x 75 mm, con la letra A 1 /2, A 1 /4 hasta A 1 /
1024 y proceder igualmente con la hilera B
2. Agregar a cada hilera un tubo adicional con Al 1, 1311.
3. 3. Colocar en ambas hileras excepto en el tubo numero 11, cuatro gotas de SSF con
pipeta de Pasteur.
4. Añadir a los tubos Al /2 y B 1 /2, cuatro gotas de suero en estudio, previamente
neutralizada.
5. Mezclar y pipetear el contenido del tubo A1/2 y transferir cuatro gotas al tubo A1/4 y
así sucesivamente hasta el tubo numero 11.
6. Repetir el paso numero 5 con la hilera B.
7. Agregar a la hilera A, excepto en el tubo numero 11, una gota de hematíes "A1".
8. Agregar a la hilera B, excepto en el tubo numero 11 una gota de hematíes "B".
9. Mezclar e incubar ambas hileras en baño Maria a 37° C durante 30 a 60 min.
10. Lavar todos los tubos, de ambas hileras con SSF por cuatro veces consecutivas
resuspendiendo en cada lavado, con una pequeña alícuota de SSF.
11. Agregar a cada tubo dos gotas de reactivos antiglobulina humana (Coombs).
12. Centrifugar a tiempo y revoluciones establecidas.
13. Leer, desprendiendo suavemente el botón celular, observando hemólisis o aglutinación,
comenzando de la mas alta dilución (1/2) a la menor sobre una fuente de luz.
14. 14. Anotar los resultados en cruces, tubo en mano en el formato correspondiente.
lnterpretación de resultados
A1/2 A1/4 A1/8 A1/16 A1/32 A1/64 A1/128 A1/256 A1/512 A1/1
4+ 4+ 3+ 2+ 1+ 1/2+
*12 12 10 8 5 2 Sc
B1/2 B1/4 B1/8 B1/16 B1/32 B1/64 B1/128 B1/256 B1/512 B1/1
4+ 4+ 3+ 3+ 2+ 1+ 1/2+
*12 12 10 10 8 5 2 Sc
Titulo ' Score

Anti A = 64 Anti A = 49
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AGLUTININAS INMUNES
TÉCNICA ALTERNA
Técnica del 2- -mercaptoetanol
La prueba es de utilidad en la investigación serológica en la investigación de enfermedad hemolítica del

recién nacido, donde sólo las IgG son capaces de atravesar la placenta. Se emplea esta técnica también
el la demostración de anti-A y anti-B no neutralizables.
Los anticuerpos de naturaleza IgM al ser tratados con 2- -mercaptoetanol sufren la ruptura de los
puentes de disulfuro en su molécula afectandose así su función o actividad serológica. Bajo condiciones
similares, las IgG no sufren daño.
Método:
1. Adicione 1 ml de suero problema a una solución recién preparada del 2- -
mercaptoetanol 0.1 M en buffer a pH 7.4.
2. Se prepara un control con suero normal en forma similar
3. Incubar los tubos a 37°C durante 2 horas.
4. Dialice durante la noche buffer pH 7.4. o aplique método pertinente a fín de eliminar el
reactivo 2- -mercaptoetanol
Interpretación
En titulación no se observa mucha diferencia entre el suero tratado del no tratado. Aquellas
muestras que contienen mezcla de IgG/IgM muestran una disminución sensible al ser reducidas con el
2- -mercaptoetanol.
CAL-02-B
Fecha: 15 JUNIO 2009
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Limpieza y manejo de RPBI
Nombre: GUILLERMO Nombre: MARGARITA Nombre: DINORA

ESCAMILLA GUERRERO LETICIA MEDINA MACIAS AGUILAR ESCOBAR
CAL-70
ISBN: 978-968-9170-17-4
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LIMPIEZA Y MANEJO DE RPBI
CAL-70
ISBN: 978-968-9170-17-4
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En este procedimiento se describen los métodos de limpieza que se utilizan en las

diferentes áreas y la metodología para la recolección de los residuos peligrosos
biológicos infecciosos, los materiales, equipos y utensilios a emplear en cada
actividad, así como la asignación de responsables a realizar dicho procedimiento,
la frecuencia con que se debe realizar.
TECNICAS DE LIMPIEZA / DESINFECCIÓN APLICABLES
La descripción de las actividades para la limpieza de las áreas y su supervisión se

desglosan en el formato CAL-70-A y este se publica en cada una de las áreas
para que sean del conocimiento de todo el personal y puedan ser consultadas por
los mismos cada vez que sea necesario.
Una vez que el personal asignado para la limpieza conozca la descripción de ésta
actividad, deberá realizarla conforme a lo descrito y para ello será monitoreado
por:
A. Planta Baja: Jefa de enfermería.
B. Laboratorio: Jefe del Laboratorio.
a. Turno matutino: auxiliar asignado
b. Turno vespertino: auxiliar asignado
c. Turno nocturno: personal de guardia nocturna
d. Turno especial: auxiliar de turno
El reporte de cada turno en el área de laboratorio se remite a la jefatura del

laboratorio para elaborar reporte de informe semanal que será entregado a la
jefatura del Departamento de Banco de Sangre
El formato CAL-70-A se muestra a continuación:
CAL-70
ISBN: 978-968-9170-17-4
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S UPE RVIS ION DE L IMPIE ZA

FE C HA
NOMBR E DE L S UPE R VIS OR
MATUTINO
VE S PE R TINO
TURNO
NOC TUR NO
E S PE C IAL
AR E A BANC O DE S ANGRE
C ONC E PTO M R B M R B M R B M R B
LIMPIE ZA Y DE S INFE C C ION DIAR IA TR APE ADO
FR E C UE NC IA
C ONTINUO
PR ODUC TOS GE R MIC IDA - J ABON NE UTR O
PIS OS Y MUR OS
MAQ. LAVADOR A/AC C S C E PILLOS DE R AIZ,
INS TR UME NTOS C R UC E TAS , R E C OGE DOR , C UBE TAS ,
TR APE ADOR E S MANGO GR IS
FR E C UE NC IA LIMPIE ZA DIAR IA Y LAVADO C ADA OC HO DIAS
PR ODUC TOS GE R MIC IDA - DE S E NGR AS ANTE
PUE R TAS
E S C ALE R A, FR ANE LA, GR IS , C UÑAS DE
INS TR UME NTOS
MADE R A, C UBE TA, ATOMIZADOR
FR E C UE NC IA LIMPIE ZA Y DE S MANC HADO DIAR IO
PR ODUC TOS DE S E NGR AS ANTE
VIDR IOS
ATOMIZADOR , C R UC E TA, FR ANE LA GR IS ,
INS TR UME NTOS
C UBE TA, C E PILO
FR E C UE NC IA LIMPIE ZA DIAR IA Y LAVADO C ADA OC HO DIAS
PR ODUC TOS DE S E NGR AS ANTE
MUE BLE S DE OFIC INA
ATOMIZADOR , FIBR A DE NY LON, FR ANE LA
INS TR UME NTOS
GR IS
LIMPIE ZA DIAR IA (S UPE R VIS ION DE L
FR E C UE NC IA
PE R S ONAL ME DIC O)
E QUIPO ME DIC O
PR ODUC TOS GE R MIC IDA-DE S E NGR AS ANTE
INS TR UME NTOS
FR E C UE NC IA LAVADO DIAR IO Y TR APE ADO C ONTINUO
PR ODUC TOS GE R MIC IDA-DE S E NGR AS ANTE
S ANTIAR IOS
ATOMIZADOR , FR ANE LA R OJ A, FIBR A NY LON,
INS TR UME NTOS
GUANTE S DE HULE , C UBE TA, C UBR E BOC A
FR E C UE NC IA TR APE ADO Y BAR R IDO UNA VE Z POR TUR NO
PR ODUC TOS GE R MIC IDA
E S C ALE R AS
TR APE ADOR MANGO GR IS , DOS C UBE TAS ,
INS TR UME NTOS
C R UC E TA
R E C OLE C C ION DE BAS UR A TR E S VE C E S POR TUR NO
R E C OLE C C ION DE R PBI DOS VE C E S POR DIA
C OME NTAR IOS :

TOTAL
M MALO
R R E GULAR
B BUE NO
CAL-70-A
El formato CAL-70-A se elabora de acuerdo a las necesidades de las áreas del

laboratorio de la siguiente manera:
ÁREA: Se escriben las diferentes áreas del Banco de Sangre que

se deben limpiar y/o desinfectar.
FRECUENCIA: Se indica la frecuencia con la que se debe realizar la

actividad mencionada
CAL-70
ISBN: 978-968-9170-17-4
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PRODUCTOS: Se lista los productos necesarios para realizar la limpieza

y/o desinfección del área en cuestión
INSTRUMENTOS: Se lista los instrumentos y/o materiales necesarios para

realizar la limpieza y/o desinfección del área en cuestión
M: Malo, calificación de la actividad
R: Regular, calificación de la actividad
B Bueno, calificación de la actividad
FECHA: Fecha en que se realiza la supervisión
NOMBRE DEL
SUPERVISOR: Nombre de la persona encargada de la supervisión
TURNO: Turno en que se realiza la supervisión, cruzar el espacio

adecuado
RESPONSABLES: Se indica quien o quienes van a ser los responsables de

llevar a cabo la actividad mencionada.
COMENTARIOS: Anexar comentarios extras, si es necesario
TOTAL: Puntaje total de columnas M, R y B
Es responsabilidad de los jefes de laboratorio elaborar el programa mensual

de limpieza y verificar que las actividades se realicen.
Importante:
 El material de limpieza de cada área incluyendo las soluciones debe

guardarse limpio y seco en el lugar asignado, para evitar un uso indebido
en otras áreas.
 No se debe dejar equipo de limpieza fuera de los lugares asignados para

ello.
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 Las precauciones a seguir para el manejo de los químicos de limpieza y

sanitización serán las descritas por el proveedor cada producto.
MANEJO DE RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO INFECCIOSOS
1. IDENTIFICACIÓN DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO-

INFECCIOSOS
Clasificación.
Se deben clasificar los residuos peligrosos biológico infecciosos (RPBI) que se

generan en el laboratorio, así como el nivel de establecimiento que le corresponde
al mismo de acuerdo con lo que indica la norma NOM-087- ECOL-SSA1-2002.
2. ENVASADO DE LOS RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICO-

INFECCIOSOS
Los contenedores para RPBI se clasifican de acuerdo al tipo de RPBI y los

mismos deben de cumplir con lo requerimientos especificados en la NOM-087-
ECOL-SSA1-2002.
ESTADO
TIPO DE RESIDUOS ENVASADO COLOR
FISICO
Recipientes
1 Sangre Líquidos Rojo
herméticos
2 Cultivos y cepas de agentes Bolsas de
Sólidos Rojo
infecciosos polietileno
Bolsas de
Sólidos Amarillo
polietileno
3 Patológicos
Recipientes
Líquidos Amarillo
herméticos
Bolsas de
Sólidos Rojo
polietileno
4 Residuos no anatómicos
Recipientes
Líquidos Rojo
herméticos
Recipientes
5 Objetos punzocortantes Sólidos rígidos Rojo
polipropileno
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Durante el envasado, los RPBI no deben mezclarse con ningún otro tipo de
residuos municipales o peligrosos.
Los contenedores de los diferentes tipos de RPBI deben de cumplir con las
siguientes especificaciones:
a) Contenedores para residuos sólidos (bolsas de polietileno)
Las bolsas deberán ser de polietileno color rojo de calibre mínimo 200 y
color amarillo calibre mínimo 300 , impermeables
Los materiales utilizados deberán estar libres de metales pesados y cloro,
mientras que los colorantes deberán ser fisiológicamente inocuos.
Resistentes.
Destruibles por medios fisicoquímicos.
Etiquetados con la leyenda “Peligro, residuos sólidos biológico infecciosos”
y con el símbolo universal de riesgo biológico.
b) Contenedores para residuos punzocortantes.
Deben ser rígidos

De polipropileno color rojo
Resistentes a fracturas y perdidas del contenido al caerse.
Destruibles por medios físicos.
Esterilizables.
Resistencia a la penetración en todas partes.
Tener tapa con y sin separador de agujas.
Abertura para depósito con dispositivo para cierre seguro.
Etiquetados con la leyenda “Peligro, residuos punzocortantes biológico
infecciosos” y con el símbolo universal de riesgo biológico.
Una vez llenos los recipientes no deben ser abiertos o vaciados.
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c) Contenedores herméticos para residuos líquidos.
Deben ser rígidos.

Herméticos.
De polipropileno color rojo o amarillo
Resistentes a fracturas y perdidas del contenido al caerse.
Destruibles por medios físicos.
Etiquetados con la leyenda, “Peligro, residuos peligrosos líquidos biológico
infecciosos”.
Marcados con el símbolo universal de riesgo biológico.
A continuación se muestra el símbolo universal de riesgo biológico
3. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE INTERNO.
El manejo interno del material de residuos biológico – infeccioso, será exclusivo

del área de Intendencia, utilizando el equipo de protección que se les ha asignado
(bata, guantes, lentes protectores y cubrebocas).
Estos pasos comprenden la recolección de las diferentes áreas de laboratorio del

material residuo biológico infeccioso, el área de almacenamiento temporal y su
transporte por personal capacitado al lugar de su eliminación.
Para la recolección interna se siguen las siguientes normas:
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Los residuos nunca deben ser compactados.

Las bolsas y contenedores recolectados deben estar llenos al 80% de su
capacidad y no más.
Una vez cerrados los contenedores estos no deben ser abiertos.
Se utilizaran carritos para uso exclusivo de residuos biológico infecciosos.
Los carritos deberán ser lavados y desinfectados diariamente.
La persona que realiza esta labor deberá contar con equipo de protección
personal individual.
Se deben utilizar las rutas de evacuación diseñadas y señaladas con los
símbolos que marcan el manejo de RPBI.
TRANSPORTE INTERNO
1. El personal responsable recolectara diariamente todos los depósitos de RPBI

sólidos, identificándolos.
2. Se deberá identificar a simple vista que los RPBI se encuentren clasificados
debidamente, informando cualquier anomalía detectada al responsable en
turno.
3. El recorrido se llevara a cabo con las máximas precauciones y utilizando
siempre el material de protección asignado.
4. La ruta de RPBI podrá identificarse por flechas de color verde y las siglas RPBI
así como el símbolo universal de RPBI.
5. El transporte se realizara hasta el Almacén temporal, este deberá contar con
los señalamientos indicados de manejo de Precaución RPBI, así como el
símbolo universal de RPBI.
4. ALMACENAMIENTO TEMPORAL DE RPBI
A. Destinar un área exclusiva para el almacenamiento temporal de los RPBI y

debe de cumplir con las características establecidas en el punto 6.3.5 de la
norma NOM-087- ECOL-SSA1-2002, excepto para los establecimientos
incluidos en el nivel 1.
B. El Almacén temporal deberá contar con un candado de seguridad al cual solo

tendrán acceso el personal asignado.
C. Este solo será abierto para el depósito y transporte externo de RPBI por la
empresa contratada para su eliminación.
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D. El periodo de almacenamiento temporal esta sujeto al nivel del establecimiento,

como sigue:
Nivel I: Máximo 30 días

Nivel II: Máximo 15 días
Nivel III: Máximo 7 días
E. Los residuos patológicos, humanos o de animales (que no estén el formol)

deben conservarse a temperatura de refrigeración no mas de 4°C
5. RECOLECCIÓN Y TRANSPORTE EXTERNO.
El transporte externo y la disposición final de los RPBI será efectuado por una
empresa contratada para este propósito, misma que se encuentra autorizada para
este fin por SERMANAT y en cumplimiento de la NOM-087-ECOL-SSA1-2002
para la disposición final de RPBI.
La empresa en el momento de la recolección emite un reporte de la cantidad de

RPBI recolectados, la cual es firmada por el responsable de laboratorio en turno.
Se encuentra establecida y actualizada una bitácora de la gestión de los residuos

biológico-infecciosos a fin de evaluar el desempeño de la gestión, así como para
mostrar el cumplimiento de la normatividad.
6. ACCIDENTE CON RESIDUOS PELIGROSOS BIOLÓGICOS INFECCIOSOS.
Se debe entender como accidente con residuos peligrosos biológico infecciosos

los siguientes:
Punciones y cortaduras.
Salpicaduras con residuos líquidos.
Inhalación de gases producidos por los escurrimientos.
Derramamientos, caídas o fracturas de bolsas y contenedores.
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a) En el caso de derrames. Se debe estar en posibilidad de descontaminar y

limpiar el sitio contaminado. Para ello se puede emplear una solución de cloro
inorgánico al 0.5 por ciento que representa una dilución de 1:10 del blanqueador
doméstico habitual; el cual tiene actividad esporicida, tuberculocida, inactiva
bacterias vegetativas, es fungicida y virocida. Se sugiere consultar al experto en
control de agentes infecciosos y la exclusión del movimiento de personas en el
área durante el proceso de desinfección y de limpieza.
Se debe disponer de un paquete de materiales de desinfección que incluya:

el desinfectante
el material absorbente de líquidos
las bolsas rojas para contener los materiales de limpieza
el equipo de seguridad para la protección de los trabajadores de limpieza.
Se deben establecer procedimientos para la contención y limpieza de derrames

que incluyan:
Salida inmediata del área para prevenir exposición

Determinación de si ocurrió exposición.
Identificación del residuo derramado.
Restricción de acceso al área.
Proporcionar el equipo de protección para limpieza.
Rociado de los materiales derramados con el desinfectante.
Remoción del material derramado.
Desinfección, enjuague y limpieza del área.
Disposición de los materiales de desinfección y limpieza.
Remoción del equipo de protección.
Lavado extenso de manos y piel expuesta.
Reemplazo de los materiales usados del paquete.
b) Incidentes de exposición: El seguimiento adecuado y estricto de los

procedimientos que atiendan los casos de exposición de trabajadores durante el
manejo de los RPBI como resultado de un derrame o salpicadura, podrán
minimizar las complicaciones que deriven de ello. El seguimiento pos exposición
es requerido para atender oportunamente cualquier infección.
Para ello es importante el uso y seguimiento del material de protección
proporcionado y el seguimiento estricto de los puntos tratados en este manual de
procedimientos.
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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Para el personal a cargo se deberán seguir los siguientes pasos:
Evaluación médica posterior a la exposición.

Documentar como ocurrió el accidente.
Identificar y documentar la fuente de sangre o muestra contaminada que
causó el accidente.
Notificar al empleado los resultados de las pruebas y que se hagan las
recomendaciones pertinentes.
Obtener el consentimiento del empleado, para hacer la determinación del VIH
y VHB; tan pronto como sea posible documentar los resultados del análisis.
Si el empleado no da el consentimiento para el análisis serológico, conservar
la muestra de sangre y convencerlo de la necesidad de realizar las pruebas.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
PRUEBA DE ACIDOS NUCLEICOS (NAT)
CAL-70
Fecha: 11-Enero-2012
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PROCEDIMIENTO
1. Se incluye trabajo no conforme

2. Se incluye formato CAL-71-a
3. Se incluye bitácora de trabajo 01
11/01/2012
CAL-71-b
4. Se incluye formato CAL-71-c
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
OBJETIVO GENERAL
La realización del tamizaje de las muestras de plasma de los donadores en

forma de pool para la detección del Virus de la Hepatitis C(VHC), el Virus de
inmunodeficiencia Humana (VIH) y el Virus de la Hepatitis B (VHB)
Resumen:
El VHC está considerado como el principal agente etiológico responsable del 90% al
95% de los casos de hepatitis postransfusional no A no B. El VHC es un virus ARN
monocatenario de sentido positivo con un genoma de aproximadamente 10,000
nucleótidos que codifican 3 000 aminoácidos. Como es un virus transportado por la
sangre, el VHC puede ser transmitido por la sangre y los productos sanguíneos.
Los ensayos serológicos han conseguido reducir en gran medida la transmisión, pero no
se ha eliminado por completo
El virus de la hepatitis B (HBV) está considerado como uno de los principales agentes
etiológicos causantes de la hepatitis crónica, aguda, cirrosis y carcinoma hepatocelular.
El virus HBV es un virus ADN circular parcialmente bicatenario con un genoma de
aproximadamente 3200 bases que contiene cuatro marcos de lectura abiertos
solapantes que codifican todas las proteínas víricas. Como virus transportado en sangre
el HBV es transmisible, con un riesgo más alto que el HCV y el HIV, a través de la
sangre y los productos hemoderivados.
El virus de la inmunodeficiencia humana (HIV) es el agente etiológico del síndrome de

Inmunodeficiencia adquirida (SIDA). La infección por el HIV puede transmitirse por
contacto sexual, exposición a sangre o productos sanguíneos infectados o por
transmisión de la madre infectada al feto. Dentro de las tres a seis semanas a partir de la
exposición al HIV, los individuos infectados generalmente desarrollan un síndrome
agudo, breve, caracterizado por síntomas de tipo gripal y asociado con valores elevados
de viremia en la sangre periférica.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
El ARN del HIV puede determinarse cuantitativamente en el plasma utilizando las

técnicas de amplificación del ácido nucleíco, entre ellas la reacción en cadena de la
polimerasa (PCR).
La prueba COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR, versión 1.5, usa la técnica de la PCR
para lograr un máximo de sensibilidad y de límites dinámicos para la detección
cuantitativa del ARN del HIV-1 en plasma anticoagulado con EDTA o ACD.
PRINCIPIOS DEL ENSAYO
La prueba consta de cuatro procesos principales para HBV: preparación de la muestra;

amplificación del DNA objetivo usando iniciadores complementarios específicos para el
HBV; hibridación de los productos amplificados con sondas oligonucleótidos especificas
para los objetivos; detección de los productos amplificados fijados a las sondas mediante
determinación colorimétrica.
Para el caso del HIV y HCV la prueba se basa en cinco procesos principales:
preparación de la muestra; transcripción reversa del RNA objetivo para generar ADN
complementario(ADNc),amplificación por PCR del ADNc objetivo usando iniciadores
complementarios específicos para cada marcador; hibridación de los productos
amplificados con sondas oligonucleótidas especificas para los objetivos y por ultimo
detección de los productos amplificados fijados a las sondas mediante determinación
colorimétrica.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
PROCESO GENERAL
OBTENCION DE LA MUESTRA Y CENTRIFUGACION DE LA MISMA
Software DATA SCREEN
FORMACION VIRTUAL DE POOLS Y EMISION DE ETIQUETAS Y LISTA
Software AT WIN / Equipo HAMILTON
FORMACION FISICA DE POOLS Y PLACA DE ARCHIVO
PROCESO DE EXTRACCION DE ACIDOS NUCLEICOS
Software AMPLINK / Equipo COBAS
AMPLIFICACION Y DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS
Software AMPLILINK
VALIDACION DE RESULTADOS Y GENERACION DE ARCHIVO

(RESPALDO ELECTRONICO)
OBTENCION DE ARCHIVOS PARA INTERPRETACION DE RESULTADOS

Y EXPORTACION AL SIBS (Sistema Informático de Banco de Sangre)
LOS REPORTES IMPRESO GENERADOS SE GUARDAN 5 AÑOS EN ACTIVO Y 5 AÑOS

EN ARCHIVO MUERTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
OBTENCION DE LA MUESTRA Y CENTRIFUGACION
Se pueden utilizar muestras con EDTA, CPD, CPDA-1, CP2D, ACD-A y citrato de sodio
al 4%. Siga siempre las instrucciones del fabricante de los tubos de muestras.
Para la obtención de la muestra se procederá de acuerdo al procedimiento CAL-43 para

la obtención de muestras de donadores.
En este proceso se utilizan muestras con EDTA.
La sangre obtenida con EDTA se puede almacenar a una temperatura de 2 a 30°c

(máximo 72 hrs) a partir de su obtención.
Una vez obtenida la muestra se procederá a separar el plasma de los hematíes

mediante centrifugación a 1600g por 20 minutos.
TRABAJO NO CONFORME:
Se considera trabajo no conforme muestra con:

1. Lipemia
2. Hemolisis
3. Volumen insuficiente
4. Discrepancia en la identificación
5. No se haya tomado la muestra
En estos casos se tomara un piloto del producto plaquetario o se le llamara al donador

para la toma de la muestra; se realiza la observación en la bitácora de trabajo CAL-71-b.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
FORMACION VIRTUAL DE POOLES DE 6 DONADORES, EMISION DE ETIQUETAS

Y LISTA DE TRABAJO
Se ingresa a Data Screen siguiendo los pasos:
1. Encienda la computadora que contiene el software Amplilink.

2. Encienda el equipo Hamilton.
3. Encienda la computadora que contiene el software Data Screen y ATwin.
4. Etiquete los tubos de donadores de acuerdo al sistema de laboratorio.
5. Para abrir el software de Data Screen dar doble clic sobre el icono que se encuentra
en la computadora.
6. Escriba su nombre de usuario (INP)y contraseña (INP) para ingresar al sistema.
7. Dar clic sobre la opción muestras x 6
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
8. Para crear una nueva placa de archivo que contendrá nuevos pools, dar clic en la
opción” Nuevo”.
9. Teclear el código de la placa de archivo que se utilizara (código predeterminado). Este

número está compuesto de los últimos cinco dígitos que conforman la etiqueta para
placas de archivo.
10. Elegir el número de pools que se desea realizar en la opción “No de posiciones”
11. A continuación aparecerán en la pantalla el número de tubos correspondientes al

número de pools que se desea realizar.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
12. Pasar por el escáner los tubos de los donadores que formaran parte de un solo pool
y colocarlos en el primary rack en la posición que indica en la pantalla de la
computadora.
13. cuando todos los tubos han sido escaneados, las imágenes de los tubos de pools
deberán aparecer con los puntos de amarillo, lo cual indica que la posición ha sido
ocupada por un donador.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
14. Dar clic en el botón de grabar.
15. Cuando el archivo es grabado la opción código será activada. Dar clic en códigos
para imprimir las etiquetas que identificaran a los pools.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
16. Pegar las etiquetas de los pools sobre dos tubos Sarstedt.
17. Llenar los datos y pegar las etiquetas en la hoja de trabajo (CAL- 71 a).
CAL-71a
18. Dar click en listados para imprimir el listado de todos los donadores a estudiar.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
19. Salir de Data Screen.
Software AT WIN / Equipo HAMILTON
FORMACION FISICA DE POOLS Y PLACAS DE ARCHIVO
1. . Colocar el primary rack en el equipo Hamilton.
2. Entrar al software dando doble clic en el icono AT Win, escribir su usuario asignado y su
contraseña (ADMIN para ambos casos).
3. Colocar en la placa primaria los tubos de los donadores (tubos primarios) del renglón
A al F y del 1 al 10, los tubos Sarstedt en el región H del 1al 10 identificados con sus
respectivas etiquetas.
4. Colocar la placa de archivo, identificada con sus respectivas etiquetas.
5. Asegurarse que estén colocadas las suficientes puntas para trabajar.
6. Realizar el Boot Run que sugiere el sistema dar clic en Yes
7. Posteriormente ir al menú de Execute y dar clic en la opción Run Next Method si

se quiere seguir usando el mismo método en caso contrario dar Reset Method
(esto borrará el anterior y se podrá elegir otro método deseado).
8. Aparecerá la pantalla, en la parte inferior izquierda encontrara el icono Reduce el

cual oprimirá encaso de no realizar los 12 pools (si trabaja solo 10 pools), de lo
contrario oprimirá el icono START y el sistema se iniciará a trabajar.
9. Si eligió el icono Reduce aparecerá otra ventana donde tendrá que elegir (dar
click) los renglones que no serán procesados, estos cambiarán a color gris y
posteriormente oprimirá el icono Reduce.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
10. Regresará a la ventana inicial, en este momento oprimirá START y el equipo

iniciará a trabajar.
11. Al terminar la corrida aparecerá una ventana pidiendo escanear automáticamente

o manualmente la identificación de los donadores o pools que no leyó el escáner
del equipo Usted eligirá la opción manual y aceptar. Usted leerá con el escáner
estos números.
Con esto termina el proceso de obtención de pooles. Ir a la campana de flujo laminar.
Cualquier duda consultar el manual del equipo.
CAMPANA DE FLUJO LAMINAR
PROCESO DE EXTRACION DE ACIDOS NUCLEICOS
El proceso de extracción puede ser de dos formas:
 Pre-PCR Preparación de múltiples muestras.
 Pre-PCR Preparación de muestras individuales (Proceso que usará en caso de

que algún pools fuese positivo se haría la apertura para la identificación
individual de la muestra positiva).
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
Diagrama del Equipo Cobas
Preparación de reactivos para el equipo COBAS
Se preparan reactivos:
Específicos
Genéricos
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
Reactivos Especificos
Reactivos Genéricos
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
VALIDACION DE RESULTADOS
Revisar los resultados generados en los Cobas, por cada control y muestra el equipo
genera dos resultados uno detecta el virus humano (H) y el otro detecta el control interno.
NC= control negativo

PC= control positivo
M0JXRZA= nombre del pol
RESULTADO
INTERPRETACION
DEL RESULTADO
NUMERO
DEL MUESTRA (S) O
ANILLO CONTROL(C)
NUMERO DE
POSICION EN EL
ANILLO
CONTROL HIV HCV HBV

HIH AII ACH ACI ABH ABI
- CN - + - + - +
+ CP + + + + + + CORRIDA
VALIDADA
- CN + + + + + +
+ CP - + - + - +
Cualquier otro resultado la corrida se invalida (se repite el proceso)
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
PROCEDIMIENTO DE CONTROL DE CALIDAD
1. Por cada prueba se deben procesar al menos un control Multiprep (-) y uno (+), y para
cada control su correspondiente control interno.
Para que el Control Negativo sea válido, la Absorbancia a 660 nm para el MP (-)
C debe ser < 0.1 y la obtenida para el control interno MP IC asociado ≥ 0.2.
Para que el Control Positivo sea válido, la Absorbancia a 660 nm para el MP (+)
C debe ser < 0.1 y la obtenida para el control interno MP IC asociado ≥ 0.2.
Resultado para CI (HCV, HIV-

Resultado para:
1,HBV) :
HCV HIV-1,HBV
A660 A660 Comentario A660 Comentario
Control
<0.1 <0.2 Negativo ≥ 0.2 Valido
Negativo
Control
≥ 1.0 ≥ 1.0 Positivo ≥ 0.2 Valido
Positivo
En caso de no cumplir con algunos de estos criterios se invalida la prueba y se

tendrá que repetir todo el proceso de extracción, amplificación, desnaturalización
y detección.
Nota: para información más detallada consultar los insertos correspondientes.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
INTERPRETACION DE RESULTADOS:
Resultados para HCV Resultados para CI

Interpretación
A660 Comentario A660 Comentario
< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ARN del HCV
Resultado no válido, repita el todo procedimiento
< 0.2 NEGATIVE < 0.2 INVALID
para la muestra no válida
≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ARN del HCV
Resultados para HIV-1 Resultados para CI

Interpretación
< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ARN del HIV-1
Resultado no válido, repita el todo procedimiento
para la muestra no válida
≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ARN del HIV-1
Resultados para HBV Resultados para CI

Interpretación
< 0.2 NEGATIVE ≥ 0.2 VALID La muestra es negativa para ADN del HBV
Resultado no válido, repita el procedimiento para
la muestra no válida
≥ 0.2 POSITIVE CAL. VALID La muestra es positiva para ADN del HBV
Nota: para información más detallada consultar los insertos correspondientes.
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
VALIDACION, INTERPRETACION Y EXPORTACION DE RESULTADOS
CAL-70
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PROCEDIMIENTO
CAL-71-c
Terminado este proceso se procederá de forma manual o automática (interfaz) el ingreso de los
resultados al SIBS.
Documento asociado CAL-43
CAL-70
Fecha:01 Noviembre 2011
Página 131 de 11
CUANTIFICACION DE SUBPOBLACIONES
LINFOCITOS
CAL-70
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LINFOCITOS
Diagramas de flujo 1 01/11/11
CAL-70
Página 133 de 11
LINFOCITOS
Introducción
El monitoreo de pacientes de diagnóstico conocido es llevado a cabo por la

conjugación de la determinación de subpoblaciones de linfocitos CD4+; CD8+;
CD3+ & CD 45+ y determinando el porcentaje de ellos, así mismo, establecer el
radio CD8+/CD4+.
Principio de estudio
Anticuerpos monoclonales conjugados con diferentes cromógenos con

especificidad conocida se desafían con células de fenotipo desconocido a fin de
establecer la presencia o ausencia con el empleo de citometría de flujo de los
marcadores CD 4+, CD8+, CD45+ y CD3+
Responsabilidades
Jefe del Dpto

Jefe del Lab.
Medico de
B.S.
Químico
Laboratorista
Auxiliar
Material……..
a) Tubos trucount
b) Pipeta semiautomática (25 µl, 50 µl, 1000 µl)
c) Puntas para pipeta semiautomática
CAL-70
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LINFOCITOS
Tipo de muestra:
a) Biometría hemática
PROCESO:
6. Recepción de muestra:
a. Biometría Hemática
7. Cuantificación de cantidad de leucocitos empleando citometría con equipo

para Biometría Hemática
8. Preparación de muestra acorde a inserto
9. Antes de usar el citómetro de Flujo, se recomienda:
a. Proceso de lavado largo

b. Calibración
c. Usar en cada corrida un control
CAL-70
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LINFOCITOS
A.- Lavado previo al uso del equipo

CVE: BDIS
LAVADO
ENCENDER
REVISAR
ANALIZADOR (LO +
PRESION
Cambiar de PRIME ; OBSSERVAR
BURBUJAS)
VENT-TANK CHANGE LOADER
A CPU
MANAGER MAINTENANCE
VENT-RUN MONITOR
DILUYENTE : LLENAR
IMPRESORA
MAX ¾
DESECHOS: VACIAR
TEST OPTION
COLOCAR LOS TUBOS ESCOGER
EN EL RACK COMO SE
INDICA LONG
EN LAS POSICIONES: O
EQUIPO 39.. FAC’S CLEANE SHORT

40. FAC’S RINSE CLEAN
RUN HI
COLOCAR EL RACK
EN EL EQUIPO
MONITOR
RUN
RUN
ESPERAR A QUE
TERMINE EL FILE
QUIT
LAVADO DONE
CAL-70
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LINFOCITOS
B.- Realizar Calibración

CALIBRACION (DIARIO O EN CADA USO DEL
INSTRUMENTO)
3) Ir A:
1) PREPARAR DOS TUBOS CON:

ICONO DE FAC´COMP
A) 1 mL de Fac´s Flow
B) 3 mL de Fac´s Flow
Mezclar suavemente las microesferas
CALIBRITE y añadir una gota (invertir INGRESAR NOMBRE DEL USUARIO
completamente el vial) como se
indica en la siguiente tabla
FAC´S FROM
INGRESAR Y/O VERIFICAR CADA UNO
DE LOS # DE LOTE
DE LA SEGUNDA COLUMNA DE LA
CAJA DEL CALIBRADOR (ETIQ.
NARANJA) Y DEL APC ( ETIQ. VERDE)
EN EL CARRUSEL PONER LOS TUBOS

sin tapón EN LAS SIGUIENTES
POSICIONES:
1. TUBO A
2. TUBO B
39. FAC´S CLEAN
40. FAC´S RINSE
2) Mezclar por inversión .
EN SOFTWARE :
RUN
CLEAN
NOTA: Es necesario revisar el

inserto para mayor detalle y en QUIT
caso de alguna modificación.
CAL-70
Página 137 de 11
LINFOCITOS
C.- Preparación de muestras para conteo de células CD4+
CD4/CD8 (AUTOMATICO) EQUIPO
ICONO Checar que en

BARRA OPERADOR ACEPTAR
PANTALLA WORLIST el recuadro
IZQUIERDA
PRINCIPAL MANAGER derecho este
Multiset
CD 4 (Un solo INGRESAR SKIP FAC’S

tubo) LOS COMP (Si ya se
ID Rack Assign
MULTISET DATOS DE realizó la ACEPTAR
Rack LINFOS T / B
Ingresar # LAS calibración
(cuando son
del Rack MUESTRAS previamente)
tres tubos)
COLOCAR LOS
TUBOS EN EL
ORDEN QUE
SE INDICA. Y
EN LAS
EQUIPO
POSICIONES
RUN HI
ACEPTAR RUN
39.. FAC’S
CLEANE
40. FAC’S RINSE AL FINALIZAR LA CORRIDA DEL

COLOCAR EL PROGRAMA SE REALIZA EN
RACK EN EL AUTOMATICO UN LAVADO DEL
EQUIPO EQUIPO.
CAL-70
Página 138 de 11
LINFOCITOS
EQUIPO
CD4/CD8 (MANUAL)
ICONO
PANTALLA BARRA OPERADOR ACEPTAR
PRINCIPAL IZQUIERDA MULTISET
PANTALLA SET UP Abri---USUARIOS---

banco sangre2---
MAYO 2008
Data Source Automatics SavingOption
Data Files SELECCIONAR
Fac´station: USUARIOS. banco sangre 2 Location MAYO 2008
FAC’S COMP ACEPTAR Laboratorio Location SELECCIONAR

From Cytometer:Aquisition with Analysis
MAYO 2008
Entry Level NamePrefix
Physician Report Location
Sample name viewReports
LAUNCH SKIP CAMBIAR LA FECHA SI PERDER
FAC’S COMP Until “Next” Button Pressed LA TERMINACION
Summary Report Location
Use Date Generated File Name 020508.sum
CAMBIAR LA FECHA SI PERDER
QUIT Export Document Location LA TERMINACION
Use Date Generated File Name 020508.exp
Continue
INTRODUCIR Panel
Absolute Counts Sample ID # Muestra
Bead ACCEPT NOMBRE.FECHA Linfos T CD4,CD8 y
SAVE # registro Linfos B
Ejemp.:
Lot IDs # lote SOLIS.020508
# De Perlas COLOCAR LOS TUBOS EN
EL ORDEN COMO SE RUN TEST
INGRESARON
(CD4-CD8-CD19). Y EN LAS
MOVER LOS
EQUIPO POSICIONES
SUBIR EL TUBOS CON EL
SUBIR EL ACQUIRE PRIMER TUBO CONTROLADOR RUN HI 39.. FAC’S CLEANE
SEGUNDO TUBO P/CD4 MANUAL
P/CD8 40 . FAC’S RINSE
AGITAR
PRIMERO COLOCAR EL RACK EN
ACQUIRE EL EQUIPO
SUBIR EL COPIAR AL FINALIZAR LA CORRIDA DEL PROGRAMA SE

SEGUNDO TUBO RESULTADOS QUIT Don´t Save
P/CD19 ACQUIRE REALIZAR UN LAVADO LARGO DE FORMA
MANUAL.
CAL-70
Página 139 de 11
LINFOCITOS
Resultados
Obtención de resultados impresos en automático ó vaciar en el formato
CAL-70
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LINFOCITOS
LAVADO EXHAUSTIVO
DESCONECTAR LA
REVISAR
TUBERIA QUE VA AL
EL EL TUBO DE LA ENCENDER
FILTRO Y CONECTAR EL EQUIPO
CANULA 3 ML DE FAC´S
PRESION LA TUBERIA
RINSE
BLANCA(DEL FAC´S
VENT-TANK CHANGE
FLOW)
DILUYENTE : LLENAR
MAX ¾ DE SOL FAC´S RUN HI
RINSE
DESECHOS: VACIAR
ESPERAR POR
DESPRESURIZAR 15 MIN.
VENT-TANK CHANGE
EL EL TUBO DE LA DILUYENTE : LLENAR

ENCENDER CANULA 3 ML DE AGUA MAX ¾ DE AGUA
DESIONIZADA APAGAR EL EQUIPO
EL EQUIPO DESIONIZADA
DESECHOS: VACIAR
RUN HI
ESPERAR POR
REVISAR ENCENDER
20 MIN.
PRESION ANALIZADOR (LO +
PRIME ; OBSSERVAR
VENT-TANK CHANGE
APAGAR EL EQUIPO BURBUJAS)
DILUYENTE : LLENAR PANTALLA
CPU PRINCIPAL
MAX ¾ DE SOL FAC´S
FLOW MONITOR
DESECHOS: VACIAR IMPRESORA
REGISTROS
Ningún registro asociado
CAL-70
Página 141 de 10
Procedimiento de recolección y toma de
muestras de pacientes
CAL-02-B
Banco de Sangre Código: CAL 76
Página 142 de 10
CAL-02-B
Página 143 de 10
Para el Banco del Instituto Nacional de Pediatría, una muestra primaria es una muestra de
sangre tomada a un paciente o a un candidato a donar para ser enviada o tomada en el
Banco de Sangre y la cual está destinada para practicarle un examen en el laboratorio del
mismo.
Se le conoce como muestra primaria debido a que es la muestra de la cual se parte para
generar alícuotas para practicar los exámenes
La toma de muestra primaria se efectúa por personal del Banco de Sangre especialista en
toma de muestra en base a lo especificado en la solicitud de trabajo.
Para la toma de muestra primaria se toman en cuenta las siguientes consideraciones:
Nombre de la prueba para la que se toma la muestra primaria

Condiciones en las que se debe presentar el paciente previas a la toma de muestra
Tipo y cantidad a tomar de la muestra primaria, con descripciones de los contenedores
de la misma y cualquier aditivo necesario.
El horario más adecuado para la toma de muestra, si se requiere
La información clínica, autorización y/o consentimientos cuando se requiera
Las condiciones de preservación de la muestra primaria
Los requisitos de acondicionamiento de la muestra
Los detalles de transportación desde los sitios de toma de muestra hasta las áreas
analíticas
Los criterios de aceptación para las muestras primarias.
MATERIAL
- Tubos tipo vacutainer con anticoagulante (EDTA y citrato) y sin anticoagulante.

- Guantes
- Torundas con alcohol
- Agujas estériles de calibre 20 y 21
- Jeringas de 5 y 10 ml
- Agujas tipo vacutainer
CAL-02-B
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- Camisas para tubo vacutainer

- Ligaduras
- Gradillas
- Contenedor para desechos punzo-cortantes
- Mezclador para biometría.
PROCEDIMIENTO
1. Solicitar al paciente o donador una identificación con fotografía y corroborar los

datos con los de la solicitud y etiqueta y colocarla en el tubo.
2. El personal de laboratorio solicita al paciente y/o donador que tome asiento en la

silla de toma de muestra, y selecciona la vena asignada para puncionar.
NOTA
En caso de observar alguna lesión dérmica como datos de múltiples venopunciones (que
podría ser sospechoso de antecedente de administración de drogas intravenosas,
donación reciente), huellas de rascado (que podría ser sospechoso de reacción alérgica
activa o proceso infeccioso local), o dermatitis local (condicionada por infecciones virales
como herpes, verrugas), lo informará al médico que valorará al candidato a donador para
aceptación o rechazo de acuerdo a su criterio.
3. El personal encargado de tomar la muestra se coloca guantes para la toma de

muestra, realiza la asepsia, en un área de 5 cm. aproximadamente en zona de
punción, realizando una limpieza vigorosa de arriba hacia abajo sin invertir el
orden, utilizando jabón/ alcohol/isodine dejando secar, se liga inmediatamente y no
se vuelve a tocar el área ya preparada para la punción, inmediatamente después
se realiza la punción de la vena.
MÉTODO 1 CON JERINGA:
1. Ligar el brazo e introducir la aguja en la vena, para que el sangrado sea más rápido,
se le pide al paciente o donador que apriete el puño y que no mueva ni doble el brazo.
2. Quitar la ligadura antes de retirar la jeringa, pidiendo al paciente o donador que abra
su puño.
CAL-02-B
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3. Al retirar la aguja, colocar una torunda con alcohol en el sitio de punción presionando
gentilmente, pidiendo al paciente o donador que mantenga su brazo doblado de 3 a 5
minutos.
4. Trasvasar puncionando la parte central del tapón, vaciar primero las muestras en los
tubos que contienen anticoagulante y después las muestras en los tubos sin
anticoagulante.
5. Desechar la aguja o jeringa directamente en el contenedor sin taparla.
NOTA: Por ningún motivo se deben tomar muestras solo con aguja, en caso de pacientes
pediátricos se debe solicitar apoyo al servicio de pediatría.
MÉTODO II VACUTAINER:
1. La aguja para el vacutainer es especial ya que se fija a la camisa en forma de tornillo.
2. Al pinchar la vena lo único que se sujeta es la camisa, para así tener un apoyo al
introducir los tubos en la camisa. se toman primero las muestras que no requieran
anticoagulante y después las que requieren de éste, sacar el tubo sin retirar la aguja
de la vena, en caso de muestras con anticoagulante, colocarla en el mezclador de
biometrías. Procurar no hacer movimientos bruscos para evitar lastimar al paciente o
donador. así mismo nunca se saca la aguja sin haber retirado el tubo totalmente.
3. Al terminar de tomar la última muestra se retira la ligadura y pedir al donador o

paciente que abra el puño, retirar la aguja y presionar la vena gentilmente con una
torunda de algodón con alcohol indicándole que mantenga el brazo doblado de tres a
cinco minutos aproximadamente.
4. La aguja se desecha en un envase rígido de plástico (contenedor) que no ofrezca

ningún peligro.
CAL-02-B
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TIPOS DE PRUEBAS, TUBOS EN LOS QUE SE RECOLECTA LA SANGRE Y

VOLUMEN REQUERIDO
VOLUMEN
TUBOS PARA TIPO DE PRUEBA REQUERIDO TEMPERATURA
RECOLECTAR LA (ml)
MUESTRA
Las muestras se conservan a temperatura ambientes mientras

Biometría Hemática 6
Grupo sanguíneo
4-6
NAT 4-6
Tubo morado
se pasan al laboratorio para su análisis

(anticoagulante EDTA)
CD4/CD8
4-6
CARGA VIRAL 4-6
Tubo rojo (sin

anticoagulante) o Tubo SEROLOGIA 4-6
dorado
Una vez que el especialista en toma de muestras obtiene la muestra primaria, la identifica
de manera única (ID para donadores o nombre del paciente) incluyendo la identificación
de quién tomó la muestra, la fecha y hora de la toma.
CAL-02-B
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Nota: Cualquier desviación a las condiciones pre analíticas para la obtención de una
muestra adecuada para análisis, se debe informar al donador y/o paciente y en su
caso repetir la toma, o anotarse en la solicitud.
Los materiales empleados par la toma, son desechados en los contenedores que les
corresponda según lo marca la norma NOM-087 aplicable a los residuos peligrosos
biológico – infecciosos.
Las muestras son inspeccionadas por el personal que las recibe y en caso de ser
aceptadas para su procesamiento se ingresan en la bitácora y en el sistema de
informático del laboratorio. Las que no cumplen los criterios de inspección se tratan como
PRODUCTO NO CONFORME.
La temperatura de almacenamiento dependerá del tipo de estudio a realizar:

Área de red fría de 1 a 6 ºC, -18°C o menor en refrigeradores, congeladores o
ultra congeladores.
Área de temperatura ambiente
TRASNPORTE DE MUESTRAS
Es responsabilidad del personal del Banco de Sangre el transporte hasta el área de

laboratorio del Banco de Sangre de las muestras tomadas en las secciones de:
a) Toma de Muestras perteneciente al Laboratorio Central
b) Toma de Muestras del Banco de Sangre
c) Sección de flebotomía del Banco de Sangre
procederán de la siguiente forma:
 Usando hieleras de plástico o unisel, el personal coloca las muestras previamente

tapadas e identificadas, en la gradilla que se encuentra dentro de la hielera.
 La hielera es propiedad del Banco de Sangre, por lo que está identificada como:
CAL-02-B
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Los recipientes secundarios deben llevar las etiquetas de:

 Riesgo biológico
 Riesgo secundario (según caso)
 Datos del laboratorio al que van referidos
 Datos de orientación
 Señal de orientación
CAL-02-B
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NOTA: Para la recepción de muestras es necesario el uso de guantes.
Quien recibe los contenedores de las muestras verifica que estén bien cerrados.
1. Revisa que se encuentren a la temperatura correspondiente.
2. Revisa que las muestras estén correctamente identificadas.
3. Revisa el correcto llenado de la solicitud de cada muestra.
De detectar anomalías en esta inspección no se recibirán las muestras afectadas.
INSPECCION DE LA MUESTRA
El personal Químico/Técnico que recibe de muestras primarias, lleva a cabo la inspección

de las mismas según el estudio solicitado tomando como base los siguientes criterios de
aceptación:
a) Tipo de muestra:
El tipo de muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a realizar.
CAL-02-B
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b) Volumen:
El volumen de muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a
realizar. Una cantidad excedente o deficiente puede provocar problemas para la
realización del (los) examen(es) por lo que en este caso se procede a consultar con el
encargado de realizar al(s) prueba(s).
c) Contenedor
El contenedor en el que se recibe la muestra debe cumplir con lo indicado en la
especificación del estudio a realizar .
d) Aditivo
El aditivo de la muestra debe cumplir con lo indicado en la especificación del estudio a
realizar.
e) Temperatura de transportación y preservación de la muestra

La temperatura a la que se recibe la muestra debe cumplir con lo indicado en la
especificación del estudio a realizar.
f) Identificación de la muestra
Las muestras deben estar identificadas por lo menos con el nombre del paciente, el cual
debe coincidir con el nombre que aparece en la solicitud de estudios.
Si alguna muestra no cumple con los criterios definidos en la especificación del estudio a
realizar y/o no está identificada, no se recibe en el laboratorio y se le informa al cliente la
razón de ello.
Si la muestra cumple con los criterios, se recibe en el laboratorio, con la solicitud

correspondiente y se registra su entrada en la bitácora y en el sistema de informática del
laboratorio (SIL)-.
REGISTROS
F-A-14-26
CAL-02-B
Fecha: 02- enero-2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 1 de 40
PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN

EBC Ma. Teresa de Lourdes M. en C. Guillermo Escamilla Dra. Dinora V. Aguilar
Flores Camacho Guerrero Escobar
CAL-02-B
Fecha: 02-enero- 2012
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 2 de 40
1. Modificación de crioprotectores
2. Requisitos de recepción de
Células Tallo
3. Se incluye flujograma de
preparación de equipo para el
01 2 de enero 2012
proceso.
4. Se incluye flujograma de
RECEPCIÓN Y PROCESO
5. Se incluye manejo de PNC
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
Página 3 de 40
ABREVIATURAS
CPH Células Progenitoras Hematopoyéticas

CPHSP Células Progenitoras Hematopoyéticas de Sangre Periférica
SP Sangre periférica
MO Médula Ósea
CMN Células Mononucleares
ºC Grados Centígrados Celsius
DMSO Dimetilsulfoxido
NaCl Cloruro de Sodio
N2L Nitrógeno Líquido
U. V. Ultra violeta
BH Biometría Hemática
Hb Hemoglobina
Hto Hematocrito
EDTA Anticoagulante, Etilendiaminotetraacético disódico
Kg Kilogramo
μl Microlitro
SSF Solución Salina Fisiológica al 0.9%
Dx Diagnostico clínico
Tx Tratamiento
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ISBN: 978-968-9170-17-4
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Propósito y Alcance
1.1 Propósito
Criopreservar las Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH) obtenidas mediante

procedimientos de Aféresis y en el quirófano; conservando su viabilidad, esterilidad y
funcionalidad.
1.2 Alcance
Todos los usuarios podrán seguir este procedimiento para la criopreservación y el

trasplante de CPH.
2. Responsables
Personal Responsable del Cumplimiento de este Documento

Puesto Departamento
Banco de Sangre
Jefe del Laboratorio
Banco de Sangre
Personal adscrito al Laboratorio
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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3. Introducción
3.1 Antecedentes
La logística de trasplantes de Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH)

incluye en la mayoría de casos, una etapa de criopreservación a temperaturas de —
196°C y en condiciones óptimas garantizan su almacenamiento durante el tiempo que
sea necesario, con la mínima pérdida de sus capacidades de autorregulación y
diferenciación. Las técnicas de congelación más extendidas utilizan DMSO como
crioprotector para optimizar la viabilidad y funcionalidad de las células reduciendo la
proporción de agua congelada y la deshidratación intracelular durante el proceso de
congelación.
La presencia del crioprotector hace que las suspensiones celulares
descongeladas sean hipertónicas y como las células responden importando y
exportando agua frente a un cambio de osmolaridad, el retorno a condiciones
isotónicas puede resultar en la superación de los límites mecánicos de las membranas
plasmáticas por una entrada masiva de agua al citoplasma (choque osmótico). Este
fenómeno es de especial importancia durante la reconstitución y manipulación de
células descongeladas debido a que la membrana celular es un conjunto de lípidos y
proteínas organizados que por debajo de los 20°C pierde fluidez, limitando su
resistencia y por tanto su capacidad de respuesta osmótica.
3.2. Condiciones generales para la preservación de la ultra estructura y función

celular
La resistencia al frío –y al congelamiento – depende de un gran número de diferentes

factores. En primer lugar el descenso repentino de la temperatura puede tener un
efecto adverso en ciertas células: una forma de CHOQUE TÉRMICO, que puede ocurrir
tanto por arriba y por debajo del punto de congelamiento. También, la FORMACIÓN DE
CRISTALES DE HIELO, dentro y fuera de las células pueden acarrear un gran DAÑO
FÍSICO.
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Otra consecuencia de la formación del hielo es un cambio del medio ambiente

extracelular, en donde el congelamiento del agua tiene como resultado un
INCREMENTO EN LA CONCENTRACIÓN DE SALES de la solución, elevándose a un
nivel específico que corresponde al punto.
Un incremento tal en la concentración de los electrolitos permite la DESHIDRATACIÓN

CELULAR. Es de notar que las células que son más resistentes, son las mismas que
son más resistentes en bajar su temperatura.
3.3 Choque térmico
El choque térmico puede ocurrir cuando ciertas células son enfriadas demasiado
repentinamente, incluso en la ausencia de cristalización. El rango crítico oscila entre +
15 ºC y 0 ºC, aunque también puede ocurrir entre 0 ºC y - 80 ºC. El choque térmico
comienza en la membrana como un resultado de:
● Contracción diferencial de varios componentes de la membrana
● Rompimiento mecánico
● Cambios conformacionales en la topografía de la membrana
El daño infligido no es dependiente significativamente del perfil CATIONICO en el fluido

extracelular, sin embargo, el perfil ANIÓNICO es mucho más importante. Los aniones
más importantes, desde el menos dañino al más dañino, son el acetato, cloruro, nitrato,
yoduro y sulfato.
El choque térmico pude ser minimizado por:

● Agentes crioprotectores
● La presencia de ciertos fosfolípidos (fosfatidil serina)
● Enfriamiento lento
● Acondicionamiento previo en medios de alta concentración de sales
3.4 Umbral de deshidratación
La mayoría de las células de los vertebrados son susceptibles incluso a una

deshidratación parcial (tanto a una temperatura normal o baja). Dependiendo del tipo
celular específico y de la especie, las células no pueden tolerar la pérdida de más del
20 al 80% de su línea basal de contenido de agua, estableciéndose así un límite del
umbral de deshidratación, en el cual las estructuras celulares sufren un daño
irreversible. La correlación entre la resistencia de las células a la deshidratación y su
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resistencia a las bajas temperaturas es un reflejo de los efectos en el balance iónico.

Esto es, el incremento en la concentración de sales que acompaña a la cristalización es
el responsable de los efectos más dañinos.
El incremento en la concentración de sales induce la precipitación de proteínas

dañando la estructura lipoproteína de la membrana. Al mismo tiempo, la cristalización
de los amortiguadores electrolíticos puede inducir grandes cambios del pH. El
incremento en la concentración de ciertos iones y compuestos tiene efectos tóxicos en
el interior celular.
El congelamiento también puede afectar la naturaleza coloidal del medio intracelular,

un efecto que puede ser reversible o irreversible. El sistema coloidal puede separase
en dos fases distintas con moléculas de agua asociadas, siendo eliminadas de las
macromoléculas orgánicas de tal manera que posteriormente se agregan y se vuelven
vitrificadas.
3.5 Velocidad de congelamiento y calentamiento
El método ideal del congelamiento y la velocidad óptima de enfriamiento dependen de

varios factores conflictivos, muchos de los cuales son pobremente entendidos. Las
condiciones ideales son a menudo determinadas por pruebas de ensayo y error, dando
como resultado protocolos, en donde se establece la velocidad del enfriamiento; sí la
temperatura debería de ser disminuida en intervalos de tiempo; qué agente
crioprotector es empleado; etc. El objetivo es prevenir el choque térmico, los efectos
adversos de la excesiva concentración de sales, y el daño al medio coloidal de la
célula. En las velocidades de enfriamiento para uso rutinario, la CRISTALIZACIÓN y el
INCIO (SEEDING) siempre comienzan en el compartimiento extracelular. Esto significa
que el balance osmótico de la célula es perturbado, provocando una deshidratación
inicial. Una vez que el hielo ha empezado a formarse, un factor importante, con
respecto en mantener la viabilidad durante la subsecuente congelación, es el
VELOCIDAD DEL CAMBIO DE TEMPERATURA. Esto determina:
● La extensión del tiempo de las células durante el punto eutéctico, por ejemplo, el
tiempo transcurrido en que son expuestas a una alta concentración de sales
● La velocidad de congelamiento intracelular
● El tamaño y la forma de cualquier cristal de hielo formado.
Si el enfriamiento es lento, el crecimiento de los cristales de hielo en el compartimiento

extracelular es de tal manera que las células se contraen y son expuestas a altas
concentraciones de sales. Subsecuentemente, la fase líquida se congela a la
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temperatura eutéctica. Si el enfriamiento es muy rápido, el agua en el interior de las

células forma pequeños cristales de forma irregular que son relativamente inestables.
Si las células son descongeladas subsecuentemente muy lentamente, estos cristales
se agregarán a una forma más grande, formando cristales más estables, los cuales
pueden causar daño. El incremento en la concentración de sales que acompaña al
proceso de congelamiento causa contracción celular, y si continúa por encima de cierto
umbral, permite la permeabilización de iones en la membrana. Por ello, la VIABILIDAD
CELULAR depende de la velocidad de enfriamiento. La MAYOR SOBREVIDA a una
cierta velocidad disminuirá conforme esta velocidad se incrementa. La VELOCIDAD
IDEAL es disminuyendo lentamente la temperatura, que permita a las células perder
suficiente agua para prevenir el congelamiento intracelular prematuro. Sin embargo, si
la velocidad es demasiadamente lenta, las células serán expuestas a altas
concentraciones de sales por un largo periodo de tiempo. Además, el rango ideal de
enfriamiento depende del VOLUMEN CRÍTICO de las células que es definido por:
● La permeabilidad de la membrana celular al agua
● El área de la superficie de la membrana
● La superficie de la célula a su radio de volumen.
En resumen, podría decirse que la más simple explicación por el cual una velocidad
ideal de enfriamiento existe para ello, es porque la viabilidad celular depende de dos
factores conflictivos, los cuales dependen de la velocidad del reenfriamiento.
El factor principal que causa la perdida de la viabilidad es la formación de cristales de

hielo intracelularmente, y especialmente la agregación de estos cristales durante el
descongelamiento. A una velocidad lenta de enfriamiento la alta concentración de sales
resultante ejerce efectos adversos cuando el agua intracelular –que tiene un alto
potencial químico- difunde hacia el exterior celular y se congela en el compartimiento
extracelular.
Los PORCENTAJES MÁS ALTOS DE SOBREVIDA son obtenidos en una variedad de
velocidades de enfriamiento referida como la ZONA DE TRANSICIÓN, en el cual el
efecto de ambos mecanismos es mínimo.
3.6 Fenómeno a temperaturas bajas
Hay un gran consenso de información acerca de los cambios biofísicos y bioquímicos

que ocurren en las células vivientes en temperaturas inferiores a los 0 ºC. Se puede
concluir que, a no ser que la temperatura de almacenamiento sea demasiada baja,
algunas células continuarán viviendo y su tiempo de sobrevida dependerá de su radio
metabólico residual que será lentamente desacelerado a una mayor o menor extensión.
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A temperaturas entre 0 ºC y - 40 ºC, que no es lo suficientemente baja para la

preservación eficientemente de ciertos tipos celulares, la difusión procede y esto puede
modificar el balance iónico en el medio. A temperaturas más bajas, estas soluciones de
electrolitos son solidificados en eutéticos.
La estructura cristalina del hielo puede cambiar también (con el crecimiento de cristales
o recristalización) resultando en un serio daño físico a estructuras biológicas
importantes.
3.7 Preservación a temperaturas bajas
En el mundo de los seres vivos, la temperatura de -70 ºC es considerada el umbral de

temperatura más bajo en el cuál ningún proceso vital esta permitido. Cuando se
contempla el almacenamiento a largo o muy largo plazo, temperaturas por debajo de
este umbral deben de ser empleadas.
Muchos investigadores, conservan células almacenadas en la presencia de algún

agente crioprotector (por ejemplo, Dimetilsulfoxico [DMSO] o glicero, HES, Albúmina),
para prevenir cualquier daño, al momento en que son almacenadas a temperaturas
inferiores de -130 ºC. En al práctica, es difícil creer que cualquier proceso dañino puede
ocurrir todavía a esta temperatura que corresponde en la cual el agua se vuelve
vitrificada. Algunas células particularmente lábiles, pueden necesariamente
almacenarse a temperaturas extremadamente bajas de -196 ºC, como es el caso del
NITROGENO LIQUIDO (N2L).
3.8 Medición de la Temperatura
Debido a que la velocidad de congelamiento y descongelamiento pueden tener un

mayor impacto en la viabilidad de las células y tejidos, deben de ser medidas en una
forma cuantitativa. La mejor manera de realizarlo es generar una curva completa que
describa el proceso de congelamiento y descongelamiento. Para esto, lo siguiente
puede ser determinado:
● El enfriamiento antes de que el congelamiento inicie (1)

● El tiempo de super-enfriamiento (*) y sus parámetros (2)
● El inicio de la cristalización y la duración de la meseta de la fase de transición (3)
● El rango en el cual la temperatura desciende después de la fase de transición (4)
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Esta curva es referida como el PERFIL DE LA TEMPERATURA del sistema en

consideración y puede ser normalizada a una referencia medible para su fácil
manipulación. El parámetro más posible de estimar el rango de enfriamiento, es el
tiempo en que la temperatura cae desde 5 ºC, (al punto en el cual la mayor parte del
cambio de fase o eutéctico procede, con su correspondiente liberación del calor latente
de fusión) hasta -50ºC. Sobre este rango, la temperatura tiende a volverse lineal en
función del tiempo. Ver figura 1.
(*) SUPER-ENFRIAMIENTO: Durante el proceso de congelamiento, el super-

enfriamiento constituye una fase importante y crítica del perfil de temperatura. En
términos prácticos, la manera en que una solución es enfriada por debajo de su punto
de congelación puede determinar cómo ocurrirá el inicio de la formación de cristales de
hielo y por ende la forma de cristalización.
Figura 1. Perfil de la temperatura durante el proceso de congelamiento controlado.
Congelamiento
ideal
Incremento en la
velocidad de enfriamiento
3.9 Agentes crioprotectores
Las causas principales de la destrucción celular son la formación de hielo intracelular, y

la exposición a altas concentraciones de sales. El éxito durante el congelamiento
depende en mantener un volumen de agua suficiente en la fase líquida, tanto en los
compartimientos intracelular y extracelular, para mantener los electrolitos en solución.
El INICIO y la subsecuente CRISTALIZACIÓN pueden ser inhibidas por la inactivación
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del punto del potencial de condensación por medio de un ENVENENAMIENTO

QUÍMICO. Los agentes usados para este fin son capaces de unirse a las moléculas del
agua a través de puentes de hidrógeno y son referidos como CRIOPROTECTORES,
son muy diversos en estructura química pero todos actúan de la misma manera.
Cualquiera que sea su estructura, todos son muy solubles en agua y por su capacidad
de formar puentes de hidrógeno con las moléculas de agua, disminuyen el punto de
congelamiento de cualquier solución en la cual son incluidos.
La segunda propiedad importante de estos agentes es de que no son tóxicos a las

células. La toxicidad en este caso es más difícil redefinir a consecuencia de
condiciones externas, tan opuestas a la naturaleza de producto en sí mismo. En la
práctica, la toxicidad depende de la concentración del agente crioprotector, la tonicidad
del medio, y de cómo las células están en contacto con el agente. Las otras variables
que determinan la extensión a la cual un aditivo en particular será capaz de proteger
las células de un sistema biológico dado dependen de factores tales como el peso
molecular del compuesto y su habilidad de atravesar la membrana celular.
En términos generales los agentes crioprotectores modulan las propiedades
eutécticas de una solución de tal manera que la cantidad de hielo formado y en
consecuencia, la concentración de sales es reducida. Por disminuir el punto de
congelamiento del fluido extracelular, ellos inhiben el flujo de agua intracelular,
previniendo así la disminución del volumen celular a su mínimo volumen crítico. Por
reducir la retracción celular, estos agentes atenúan la hiperconcentración del fluido
intracelular y por ello inhiben la precipitación de las proteínas.
En la práctica, una solución salina isotónica (9 gramos de NaCl por litro) en la

presencia de 1% de DMSO alcanzará una concentración de 50 g/L a una temperatura
de -5 ºC. En la presencia de 5% de DMSO, esta concentración no será alcanzada
hasta que la temperatura haya descendido a -20 ºC y a una concentración de 10% de
DMSO no se alcanzará hasta los -50 ºC.
La cantidad del daño inducido en las células durante el congelamiento depende de dos
factores conflictivos, y ambos dependen de la velocidad de enfriamiento: a velocidades
que son demasiado lentas, altas concentraciones de sales serán generadas, ya
velocidades que son demasiado rápidas, el hielo se formará en el interior de las
células. La máxima viabilidad es obtenida por el enfriamiento a una velocidad en la
zona de transición en el cual el efecto combinado de ambos mecanismos es
minimizado.
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Como regla general, el agente crioprotector parece proteger a las células a velocidades
de enfriamiento lento en el cual el daño asociado con los EFECTOS DE SOLUCIÓN
predominan. Basadas en observaciones empíricas, se ha demostrado que el resultado
de incrementar la concentración de un agente crioprotector (por ejemplo, glicerol o
DMSO) en la suspensión celular siendo enfriada a diferentes velocidades, es trasladar
el radio óptimo más inferior acoplado con un incremento del rango general de
sobrevida, y se ha documentado que los problemas asociados con el congelamiento
intracelular no son afectados por la presencia del agente crioprotector.
Con referencia a la idea de la zona de transición descrita anteriormente, se pude decir

que el agente crioprotector presente durante el congelamiento, traslada la zona entera
en la dirección de rangos más bajos por disminuir el umbral asociado con el daño
causado por la combinación de las altas concentraciones de sales y del hielo
intracelular.
4. Instrucciones y procedimiento
Los factores críticos en este procedimiento son:

 La suspensión celular:
o La suspensión inicial de una muestra de CPH obtenida de sangre
periférica movilizada no debe de exceder de 2-3 x 10 7 células/ ml.
 El medio crioprotector:
o El medio crioprotector puede variar, se recomienda que contenga una
fuente nutritiva (albúmina humana, suero o plasma), en una concentración
final del 10%.
o El agente crioprotector de elección es el DMSO a una concentración final
del 10%.
o Se parte de una solución crioprotectora con DMSO al 20%. Se mezclan
un volumen de cosecha de CPH con uno de solución crioprotectora. La
concentración final del DMSO será 10%.
 NOTA: La adición del DMSO debe de realizarse lentamente y a
una temperatura de 4 ºC.
o Una vez terminada la mezcla, se transfiere a una bolsa de congelamiento
de material plástico no lipofílico (poliolefina/ o teflón-kapton) para evitar el
daño a las membranas celulares, y además debe de ser lo
suficientemente resistente a bajas temperaturas (-196 ºC).
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o La bolsa se introduce en un soporte de aluminio que mantenga

comprimidas ambas superficies, proporcionando así un espesor y forma
homogénea de la muestra que facilite un correcto intercambio de calor.
 El programa de congelamiento:
o El programa de congelación puede variar, pero en términos generales
debe incluir primero una fase de estabilización a una temperatura de 4 ºC,
seguida de un descenso constante de la misma a un ritmo de 1-2 ºC/min.
En el momento previo al punto eutéctico, se debe de inducir un descenso
prolongado de la temperatura de la cámara para compensar la liberación
del calor latente de fusión e inducir el proceso de nucleación. Una vez
superada la fase de transición, el ritmo de enfriamiento debe de
permanecer constante entre 1-2 ºC/min.
 El sistema de almacenamiento:
o Las células congeladas pueden almacenarse en un contenedor de N2L, en
su fase líquida, donde la temperatura se mantiene constante a –196 ºC.
Si la muestra se mantiene en la fase gaseosa, la temperatura puede
oscilar entre –100 ºC y –140 ºC.
 NOTA: El tiempo máximo de almacenamiento bajo estas
condiciones se desconoce con exactitud (pero se han llegado a
reinfundir productos almacenados durante 15 años, con resultados
satisfactorios).
4.1 Observaciones
El dimetilsulfoxido es potencialmente tóxico para las células en temperaturas por arriba

de 0 ºC, por ello la adición del DMSO y los pasos subsecuentes deben de realizarse lo
más rápido posible y todo el procedimiento, tanto en la preparación de los reactivos,
como en la preparación de las muestras biológicas se deben de mantener a una
temperatura de 4 ºC y con asepsia en la campana de flujo laminar.
En el laboratorio se han realizado experimentos de criopreservación usando la prensa

para la bolsa criogénica, incluida en el equipo CryoMed Freezeer, el casete de aluminio
(canister), y los sensores de temperatura, superficial o dentro de la muestra, con lo cual
hemos observado que el proceso se ve afectado por estas configuraciones y por tal
motivo es necesario elegir el programa adecuado al momento de criopreservar las CPH
según la manera que se elija al congelar las muestras.
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4.2 Material y equipo requerido para criopreservar CPH

1. Bata quirúrgica
2. Cubre bocas
3. Gorro quirúrgico
4. Guantes estériles
5. Campos estériles
6. Tijeras inoxidables estériles
7. Pinzas inoxidables estériles (Rocher)
8. Gasas estériles
9. Torundas de algodón (jabón, alcohol, isodine)
10. Alcohol isopropilico al 70%
11. Desinfectante (glutaraldehído, fenol al 5%, o formaldehído)
12. Isodine
13. Frascos estériles (100 ml) o matraz Elermeyer de 250 ml
14. Probeta graduada estéril (100 ml)
15. Acopladores para toma de muestras (Sampling Site Couplers, Fenwal 4C-2405)
16. DMSO estéril (Sigma, Cat D-2650) o USP (Sigma, Cat. D-1435)
17. Jeringas desechables estériles de 5, 10, y 20 ml
18. Agujas estériles del No, 18 G
19. Bolsa criogénica de 250 ml (OriGen, Cryostore, Cat. CS 250n)
20. Casete de aluminio (Canister) para bolsa criogénica a 4º C
21. Equipo para congelamiento controlado CrioMed Freezer
22. N2L a baja presión (22 PSI dewars)
23. Guantes criogénicos
24. Frascos para hemocultivo y de hongos/micoplasma (pediátricos, 1-3 ml)
25. Tubos para Biometría Hemática (BH)
26. Hielo fräppe
27. Refrigerantes envueltos en papel
28. Azul Tripano al 0.4%
29. Cubre y porta objetos
30. Microscopio óptico
31. Sellador dieléctrico
32. Bolsas para desechos
33. Etiquetas de identificación
34. Crioviales estériles
35. Campana de Flujo Laminar
36. Depósito para almacenamiento con N2L, Cryoplus 2
37. Formato del material necesario para criopreservar CPH (Formato I)
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38. Formato de registro del procedimiento para criopreservar CPH (Formato II)
39. Marcos metálicos (Racks) numerados
40. Diagrama del sitio de almacenamiento en el depósito de N2L.
41. Pipetas automáticas de 200 y 1000 μl
42. Puntas para pipetas automáticas de 200 y 1000 μl
43. Solución Salina Fisiológica
4.3 Espécimen a criopreservar
● Células progenitoras hematopoyéticas (alogénicas o autólogas) movilizadas de

sangre periférica y obtenidas mediante aféresis.
● Médula ósea autóloga obtenida en quirófano.

Si es necesario, la suspensión celular es primero concentrada en forma manual o por
una técnica automatizada (seguir el procedimiento apropiado).
4.4 Procedimientos previos a la criopreservación de CPH
4.4.1 Realizar la limpieza y desinfección de la campana de flujo laminar.
4.4.2 Realizar la esterilización con Luz ultravioleta (U.V.) del material que no se puede
esterilizar con vapor usado en la campana de Flujo laminar (por ejemplo, bolsas
criogénicas, DMSO, tubos de BH, etc.), dejar 15 minutos dentro de la campana de flujo
laminar y encender la lámpara de luz U.V. Colocar un letrero que indique que la luz
U.V. está encendida.
4.4.3 Solicitar el plasma del paciente (aprox. 100 ml) obtenido durante la aféresis al
equipo de enfermería y mantenerlo a 4 ºC.
4.4.4 Rotular las bolsas criogénicas y el casete de aluminio (canister).
4.4.4.1 Colocar una etiqueta de identificación en la porta-etiqueta de la bolsa

criogénica. Sellar con el sellador dieléctrico en varios puntos la porta-
etiqueta sin sellarlo completamente.
4.4.4.2 La información de la etiqueta debe contener:

 Nombre del donador
 No. de unidad o identificación (por ejemplo, expediente)
 Fecha
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 Producto celular (por ejemplo, CPHSP alogénica, MO o CPHSP autóloga

reducida), si es autóloga: SOLO PARA USO AUTOLOGO
 No. de secuencia de la bolsa criogénica, (por ejemplo, 1 de 3)
4.4.4.3 Apartar las bolsas criogénicas hasta que se necesiten.
4.4.4.4 Rotular una bolsa criogénica como bolsa control y apartarla hasta su uso.
4.4.4.5 Rotular los frascos de cultivo, BH y crioviales con la información del paciente.
4.4.4.6 Rotular el casete de aluminio (canister) con una etiqueta con la información
de paciente.
4.4.4.7 Verificar el nivel de N2L. Abrir la válvula del N2L, y encender el equipo de
congelamiento y elegir el programa que va ser utilizado.
4.4.4.8 Colocar el casete de aluminio (canister) en el congelador hasta su uso.
4.4.4.9 Anotar el número de lote, la fecha de caducidad y la casa comercial del DMSO
y de las bolsas criogénicas en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE
CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II).
4.5 Procedimiento para criopreservar
4.5.1 Pesar la bolsa que contienen las CPHSP al terminar su recolección. Restar el
peso de la bolsa vacía (bolsa transfer de 600 ml de equipo CobeSpectra = 32 g; bolsa
de recolección de equipo CS-3000 = 25 g) y dividir el resultado entre la densidad
específica de las CPH (d= 1.066) para obtener el volumen aproximado de la cosecha
de CPH. Con este valor se puede calcular la cantidad de bolsas criogénicas que serán
necesarias para la criopreservación de CPHSP.
Ejemplo, Peso de la bolsa con CPHSP = 133 g

Peso de la bolsa transfer de 600 ml = 32 g
- __________
101 g CPHSP
÷
Densidad específica de las CPHSP = 1.066 g/ml
__________
94.74 ml de CPHSP
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En la siguiente tabla se muestran el volumen mínimo y máximo permitido al

criopreservar CPH en las bolsas criogénicas de diferentes capacidades (Nota. Los
datos fueron tomados de las bolsas Cryostore de Origen Biomedical, pero se puede
aplicar a cualquier bolsa con las mismas dimensiones y capacidades).
Volumen, a
Código del Volumen Largo, Ancho,
congelar
Producto Nominal cm cm
Min - Max
CS 50 10 a 20 50 11.4 7.6
CS 250 30 a 70 250 15.2 12.7
CS 500 55 a 100 500 19.0 12.7
Tomando en cuenta la capacidad de las bolsas criogénicas, el volumen de CPH se

dividiría en 3 bolsas criogénicas con un volumen de 31.58 ml (más un volumen igual de
solución crioprotectora con DMSO al 20%).
4.5.1.1 Si el volumen de la cosecha es mayor a 140 ml, el volumen deberá ser

reducido, según el protocolo establecido en el Servicio de Medicina
Transfusional.
4.5.2 Si el volumen de la cosecha es igual o menor a 140 ml, colocar la bolsa dentro de
la campana de flujo laminar. Realizar la asepsia de uno de los puertos de entrada y
colocar un acoplador de toma de muestra en el puerto y realizar su asepsia
correspondiente. Si no se cuenta con dicho acoplador, realizar la asepsia del tubo de
recolección de la bolsa de CPH para puncionarlo con una jeringa con aguja del calibre
18 G. En este momento se puede realizar la asepsia de los puertos de entrada de las
bolsas criogénicas y de los frascos de hemocultivo. De igual forma, realizar la asepsia
de un extremo de tubo de la bolsa del plasma para poder tomar el volumen indicado
para preparar la solución crioprotectora.
4.5.3 Usando una jeringa de 5 ml con aguja del calibre 18G retirar 2 ml de la
suspensión celular y depositar 1 ml en un tubo de BH (Tubo morado con EDTA),
rotulado previamente. Realizar el recuento celular en el equipo CellDyn 3500 y
determinar el número de células Mononucleares en la muestra. Inocular 1 ml de la
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suspensión celular a un frasco de hemocultivo, rotulado previamente como pre-

congelamiento o pre-DMSO.
4.5.4 Tomar las jeringas de 20 ml con aguja del calibre 18G y llenar completamente a
un volumen de 20 ml cada una. Usar las jeringas necesarias para recolectar el volumen
total de CPHSP. La última jeringa contendrá menos de 20 ml.
4.5.5 Tapar la aguja con su capuchón cuidadosamente y retirar la aguja de la jeringa

(desechar la aguja en un contenedor de punzo cortantes). Unir cada jeringa a una bolsa
criogénica. Dispensar la suspensión celular hacia la bolsa, dejando la jeringa unida.
Comenzar con la bolsa criogénica # 1.
4.5.6 Repetir el procedimiento con las otras jeringas y bolsas criogénicas como en el
paso 4.5.4.
4.5.7 Anotar el volumen de cada bolsa criogénica en el formato del REGISTRO DEL
PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II).
4.5.8 Dispensar a la bolsa control un volumen igual al de la bolsa de CPH con mayor
cantidad de la solución control (se puede utilizar plasma).
4.5.9 Colocar las bolsas criogénicas entre los refrigerantes e incubar durante 30
minutos.
4.5.10 Calcular la cantidad de la mezcla crioprotectora (plasma autólogo con DMSO al

20%) para que al ser mezclada 1:1 con las CPH su concentración final sea del DMSO
al 10%.
4.5.10.1 Volumen de cosecha de CPH + volumen bolsa control = volumen de

solución crioprotectora + 10 ml de excedente. Ejemplo: 70 ml para CPH + 20 ml
para la bolsa control = 100 ml de solución crioprotectora (90 ml para bolsas + 10 ml
excedente). Por lo tanto se prepara de Solución crioprotectora = 80 ml de plasma
+ 20 ml DMSO.
En la siguiente tabla se muestran los cálculos de diferentes volúmenes de solución

crioprotectora:
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Valores de DMSO-Plasma para la medición exacta del DMSO al 20%

Volumen Total (ml) = DMSO + Plasma
5 1 4
10 2 8
15 3 12
20 4 16
25 5 20
30 6 24
35 7 28
40 8 32
45 9 36
50 10 40
55 11 44
60 12 48
65 13 52
70 14 56
75 15 60
80 16 64
85 17 68
90 18 72
95 19 76
100 20 80
105 21 84
110 22 88
115 23 92
120 24 96
125 25 100
130 26 104
135 27 108
140 28 112
145 29 116
150 30 120
160 32 128
170 34 136
180 36 144
190 38 152
200 40 160
250 50 200
300 60 240
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4.5.10.2 Anotar el volumen de la solución crioprotectora de cada bolsa criogénica en

el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE CRIOPRESERVACIÓN DE
CPH (Formato II).
4.5.10.3 Anotar el volumen total de cada bolsa en el Formato del REGISTRO DEL
Volumen Total = volumen de CPH + volumen de solución crioprotectora.
4.5.11. Colocar un reloj con alarma a los 30 minutos y otro a los 20 minutos.
4.5.12 A la alarma de los 20 minutos preparar la solución crioprotectora. Con la probeta

estéril medir la cantidad del plasma autólogo frío (a 4 ºC) y depositarlo en un frasco
estéril en hielo. Con una jeringa de 20 ml tomar la cantidad necesaria de DMSO y
adicionar al plasma mezclando perfectamente para evitar desnaturalizar las proteínas
del plasma debido a la reacción exotérmica.
4.5.13. Iniciar el programa correspondiente del congelador programable y permitir que

se enfríe a 4 ºC.
4.5.14 A la alarma de los 30 minutos tomar con una jeringa de 20 ml la cantidad

necesaria de la solución crioprotectora. Retirar la jeringa vacía de la suspensión de
CPH, y en su lugar colocar la jeringa de la solución crioprotectora: Secuencialmente y
con prontitud adicionar la solución crioprotectora en cada bolsa criogénica, empezando
con la bolsa control y posteriormente a las bolsas con las CPH, mezclar perfectamente
las células. Usar el émbolo de la jeringa para retirar la mayor cantidad posible de aire y
tomar aproximadamente 2.5 ml de la mezcla. Colocar 0.5 ml en un criovial rotulado, 1
ml en el tubo de BH, rotulado previamente como post-DMSO, para corroborar su
viabilidad. Mantener el tubo a 4 ºC. Inocular 1 ml de la mezcla en el frasco de
hemocultivo, rotular como post-DMSO.
4.5.15 Sellar la línea de la bolsa criogénica que contiene la jeringa tres veces con un
sellador dieléctrico. Cortar con unas tijeras en medio de la línea sellada y desechar la
línea unida y la jeringa. Secar rápidamente cada bolsa criogénica y colocarlas adentro
del casete de aluminio (canister) previamente enfriado a -20 ºC; por ejemplo, colocar la
bolsa #1 en el casete (canister) #1. Cuando corte la línea sea cuidadoso en no dejar
cualquier gota de CPH en el área de sellado. Las células en un extremo abierto de la
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línea después del sellado debe de ser evitado a causa de que puede contaminar el N2L
en el tanque de depósito. Ver observaciones para otras opciones para congelar las
bolsas criogénicas usando una prensa para congelamiento del equipo CryoMed
Freezer.
4.5.16 Colocar los casetes de aluminio (canister) y el criovial en la cámara de

enfriamiento. Distribuir individualmente los casetes de aluminio (canister) en una
gradilla metálica para que se lleve a cabo el proceso en las mismas condiciones el
congelamiento.
4.5.19 Coloque la bolsa control dentro de un casete de aluminio (canister) e inserte el

sensor de la temperatura en uno de los puertos de muestreo. Tener cuidado de no
dejar aire para evitar un registro inadecuado del proceso de congelamiento. Cerrar con
cuidado el casete de aluminio (canister) para evitar maltratar el sensor de la
temperatura, y colocarlo en la gradilla metálica. Ver observaciones para otras
opciones para congelar las bolsas criogénicas usando una prensa para
congelamiento del equipo CryoMed Freezer.
4.5.20 Cerrar la puerta de la cámara de enfriamiento y oprimir el botón de RUN del

equipo. Registrar el programa utilizado para el congelamiento controlado y el tiempo de
inicio en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE
CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II).
4.5.21 Al final del proceso de congelamiento presionar el botón STOP para silenciar la
alarma del equipo. Registrar el tiempo final en el Formato del REGISTRO DEL
4.5.22 Abrir la puerta de la cámara de enfriamiento, remover los casetes de aluminio

(canister) y el criovial de las CPH y colocarlos en el depósito de almacenamiento con
N2L en la fase de líquida o de vapor. Anotar el No. del marco metálico (rack), el lugar
en el marco metálico (rack), la fase de almacenamiento de N 2L, y el sitio dentro del
depósito de N2L en el Formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE
CRIOPRESERVACIÓN DE CPH (Formato II), según el siguiente diagrama:
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Esquema de la localización dentro del contenedor de N2L:
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Esquema de la localización dentro del marco metálico (Rack):
4.5.23 Imprimir la gráfica del registro de temperatura y rotular con la identificación del
paciente. La carta de congelamiento será parte del registro permanente del proceso. La
gráfica del congelamiento no deberá mostrar un cambio inusual o inesperado en la
temperatura. La curva apropiada del calor latente de fusión deberá de estar por debajo
de 0ºC.
4.5.24 Cerrar la puerta de la cámara de enfriamiento y accionar el botón de

calentamiento (warm) para descongelar la cámara. Al terminar, retirar la bolsa control y
almacenarla a -20 ºC y apagar el equipo de congelamiento.
4.5.25 Limpiar la campana de flujo laminar y tirar todo el material desechable en las
bolsas correspondientes.
4.6 Procedimiento para determinar el No. De CMN de las CPH
4.6.1 Encender el equipo para Biometría Hemática.
4.6.2 Evaluar los controles alto, normal y bajo, y establecer si el equipo no muestra
valores fuera del rango para dichos controles. Si algún valor está por afuera de estos
rangos será necesario calibrar el equipo según el manual del usuario.
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4.6.3 Procesar por duplicado la muestra rotulada como pre-DMSO que se obtuvo de la
cosecha de CPH. Si los valores están por encima del rango de detección del equipo
diluir la muestra de CPH 1:10 con SSF. Obtener el promedio de los valores y
reportarlos en el formato del REGISTRO DEL PROCEDIMIENTO DE
CRIOPRESERVACIÓN DE CPH
4.6.4 Calcular el No. De CMN presentes en la muestra y la dosis / Kg de peso, como

sigue:
Leucocitos Totales = valor de leucocitos obtenido del Cell-Dyn (K/μl) x 1000000 x
Dilución (si se realiza) x Volumen de la cosecha.
CMN Totales = % de Linfocitos Cell-Dyn + % de Monocitos Cell-Dyn ÷ 100 x Leucocitos
Totales.
Dosis de CMN/Kg = CMN totales ÷ peso del donador.
Anotar los resultados en el formato del REGISTRO DEL
4.7 Procedimiento para determinar la viabilidad celular de las CPH
4.7.1 Material requerido:

1. Portaobjetos
2. Microscopio óptico
3. Pipeta automática de 50 μl
4. Puntas para pipeta automática
5. Tubos de ensayo de 12 x 75 mm
6. Cámara de Neubauer
7. Cubreobjetos para cámara de Neubauer
4.7.2 Reactivos
Azul de Tripano al 0.4 %
4.7.3 Procedimiento
4.7.3.1 Verificar que el material este completamente limpio.
4.7.3.2 Rotular un tubo de ensaye de 12 x 75 mm con el nombre Donador y CPH-

cosecha Donador.
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4.7.3.3 Rotular otro tubo de ensaye de 12 x 75 mm con el nombre del Donador y CPH
post-DMSO.
4.7.3.4 Adicionar a cada tubo 50 μl de la CPH de la cosecha y de la muestra post-

DMSO, respectivamente.
4.7.3.5 Adicionar en cada tubo 50 μl de la solución de Azul Tripano al 0.4% y mezclar

perfectamente.
4.7.3.6 Adicionar la muestra en la cámara de Neubauer y contar el número de células

vivas y muertas con el microscopio óptico (40X). En caso de no mtener marcador de
viabilidad o anticuerpo monoclonal 7 ADD.
4.7.3.7 Reportar el porcentaje de viabilidad de las muestras.
4.8 Limpieza y asepsia de la campana de flujo laminar
Debido a que las CPH son recolectadas en un ambiente “abierto” y porque muchos de
los pasos de su procesamiento no pueden ser realizados en un sistema completamente
cerrado, hay numerosas oportunidades para la contaminación con microorganismos.
Por esto, se debe asumir un método estricto de asepsia que deberá de ser realizado en
el área de trabajo dentro de la campana de flujo laminar. Cultivos bacterianos y de
hongos deberán de ser realizados en las diferentes etapas del procesamiento para
determinar si cualquiera de las técnicas y/o materiales en uso están comprometiendo la
pureza del las CPH.
4.8.1 Material y equipo requerido

1. Solución de limpieza Dextran-Hipoclorito de Sodio
2. Solución desinfectante PRESEPT (Code Nr. SPW50, Johnson &
Johnson). Disolver una tableta de 5 g en 3 litros de agua.
4. Alcohol al 70%
5. Fenol al 5 %
6. Guantes desechables
7. Cubrebocas
8. Lentes de Protección.
9. Gasas estériles
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4.8.2 Procedimiento
4.8.2.1 Encender la luz de la campana de flujo laminar y realizar la limpieza de la

superficie del piso, techo y paredes de la campana con la solución de Dextrán-
Hipoclorito de Sodio.
4.8.2.2 Realizar la desinfección de las cuatro paredes de la campana con la solución

PRESEPT.
4.8.2.3 Humedecer las gasas estériles con etanol al 70 % y pasar por toda el área de
trabaja dentro de la campana.
4.8.2.4 Con la ayuda de las gasas estériles desinfectar toda el área de la campana con
la solución de Fenol al 5 %. Dejar actuar por 15 minutos.
4.8.2.5 Encender el motor de la campana y dejar durante 30 minutos como mínimo.

Posteriormente encender la luz U.V. y dejar actuar durante 15 minutos. Colocar un
letrero indicando que la luz U.V. está encendida.
4.8.2.6 Apagar la Luz U.V. A partir de este momento se puede trabajar en la campana
de flujo laminar, procurando evitar salirse del área estéril, así como también, evitar
movimientos bruscos para no provocar flujo de aire hacia el interior de la campana.
4.9 Verificación de la esterilidad del proceso
Mantener la esterilidad es una consideración importante en el procesamiento y

criopreservación de las CPH. Se ha reportado contaminación en pacientes que han
recibido trasplantes alogénicos y autológos. Los microorganismos identificados fueron
flora normalmente encontrada en la piel.
La contaminación puede ocurrir durante la colección de las CPH y en varias etapas

durante el procedimiento. La disponibilidad de sistemas semicerrados de recolección
reduce oportunamente la contaminación, sin embargo la esterilidad debe de ser
monitoreada con cultivos bacterianos y de hongos. La identificación del organismo
y su sensibilidad debería de ser realizada en los cultivos que resultaran positivos.
Aunque el mayor propósito de esta prueba es la protección del paciente, también
suministra información epidemiología útil acerca de las actividades de laboratorio y del
trasplante en general.
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4.10 Procedimiento para descongelar CPH criopreservadas
Las CPH criopreservadas son descongeladas en un baño maría a 37 – 40 ºC

inmediatamente antes de infundirlas y administrarlas a través de un catéter central. Es
posible diluir y/o lavar las CPH antes de la infusión en orden de remover el DMSO, pero
esta operación es rara vez realizada. Aunque la infusión de DMSO ha sido asociada
con cierta toxicidad incluyendo nauseas, vómitos, rubor, incremento en la frecuencia
cardiaca y presión sanguínea, y elevación de las transaminasas en suero, muchos
investigadores creen que la manipulación de las CPH descongeladas pueden resultar
en la pérdida celular inaceptable. Las CPH pueden ser tanto infundidas directamente
de la bolsa a través de un equipo de administración, o removidas de la bolsa con una
jeringa e inyectada hacia la línea central.
4.10.1 Material necesario
Baño María
Cronómetro
Agua estéril
Solución de limpieza Dextran-Hipoclorito de Sodio
Solución desinfectante PRESEPT (Code Nr. SPW50, Johnson & Johnson)
Disolver una tableta de 5 g en 3 litros de agua.
Alcohol al 70%
Fenol al 5 %
Refrigerantes
Tubos de vidrio de 12x75 mm
Frascos para Hemocultivo y Hongos
Microscopio Óptico
Porta y cubre objetos
Azul de tripano al 0.4%
Campos quirúrgicos
Contenedor de N2L portátil
Ropa quirúrgica
Gasas estériles
Tijeras estériles
Acoplador para toma de muestra
Jeringas desechables estériles de 10 y 20 ml
Agujas estériles del calibre 18 G
Torundas de alcohol e isodine
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Guantes estériles
Cubrebocas
4.10.2 Procedimientos previos para descongelar las CPH
4.10.2.1 Localizar en el depósito de almacenamiento de N2L las bolsas criogénicas con

las CPH correspondientes al paciente que va a ser reinfundido. Verificar perfectamente
que los datos de las bolsas concuerden con los datos del paciente que se va a
transfundir,
4.10.2.2 Determinar la cantidad de CMN y/o células CD34 de cada bolsa criogénica.
4.10.2.2 Transferir los casetes de aluminio (canister) de la fase líquida a la fase

gaseosa del depósito de N2L, por lo menos 12 horas antes de la reinfusión.
4.10.3 Procedimiento
4.10.3.1 Realizar la limpieza del Baño María con la solución de Dextran-Hipoclorito de

sodio.
4.10.3.2 Realizar la desinfección del Baño María con la solución desinfectante

PRESEPT con la ayuda de gasas estériles.
4.10.3.3 Realizar la asepsia del Baño María con una solución de Fenol al 3 %. Dejar
actuar por espacio de 30 minutos.
4.10.3.4 Cubrir el Baño María con un campo quirúrgico y trasladar el baño a pie de
cama del paciente al que se van a reinfundir las CPH.
4.10.3.5 Localizar las CPH criopreservadas y acomodar las bolsas de mayor a menor
concentración de CPH en el depósito de N2L portátil, el cual contiene N2L Trasladar el
contenedor al área donde se llevará a cabo la reinfusión.
4.10.3.6 En el área donde se llevará a cabo la reinfusión, conectar el Baño María a una
toma de corriente eléctrica. Adicionar agua estéril al baño y dejar que alcance la
temperatura de 40 ºC. Adicionar al un antiséptico.
4.10.3.7 A la indicación del Médico responsable, seleccionar la primera bolsa con

mayor concentración de CPH del contenedor portátil de N 2L y verificar una vez más los
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datos de identificación de la bolsa y del paciente. Introducir la bolsa al Baño María y

con una leve agitación dejar que se descongele aproximadamente 1 minuto y 50
segundos. Este tiempo puede variar según el volumen de las CPH y de las
características de la bolsa criogénica. NOTA: No descongelar completamente las
CPH, sino hasta el punto en que se note la apariencia de una moneda de 10
pesos en el centro de la bolsa.
4.10.3.8 Retirar la bolsa criogénica del Baño María y colocarla entre dos refrigerantes.
Realizar la asepsia de uno de los puertos de entrada con las torundas de alcohol e
isodine e insertar el equipo de transfusión para su reinfusión en el paciente. Otra opción
sería, colocar un acoplador de toma en el puerto de entrada y con la ayuda de una
jeringa de 20 ml con aguja del calibre 18 G, tomar las CPH e iniciar la reinfusión en
alguna de las líneas de soluciones que tenga el paciente.
4.10.3.9 Vigilar los signos vitales y reacciones que pudiera presentar el paciente.
4.10.3.10 Realizar el mismo procedimiento, pasos 4.10.3.6 a 4.10.3.8, para cada una
de las bolsas criogénicas restantes.
4.10.3.11 En cada una de las bolsas realizar la asepsia de una esquina y cortar con las
tijeras estériles un extremo de las bolsas. Tomar el sobrenadante remanente de las
CPH para realizar los cultivos bacterianos (hemocultivo y hongos) y la viabilidad de las
CPH después de descongelarlas. El DMSO es toxico para las CPH a temperaturas
mayores de 4 º, por tal motivo, conservar todas las muestras en los refrigerantes.
Requisitos de recepción de Células Tallo
Una vez que llega la bolsa de recolección el área de criopreservación deberá de

traer:
1.- Nombre del Donador

2.-Nombre de Paciente
3.- Número de la unidad asignada
4.- Volumen de obtenido
5.- Equipo en donde fue recolectada
6.- Marca de la bolsa de recolección
7.- Fecha de caducidad
8.- Número de Lote
9.- Tubo de biometría hemática previa a la recolección
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10.- Resultado de la biometría Hemática

11.- Resultado de CD 34, CD 45 y 7 ADD
12.- Resultado de Serología
o Nota estos requisitos son indispensables para la separación automática y

manual
METODO MANUAL PARA LA REDUCCIÓN DE VOLUMEN
Este método lo usaremos en caso que el Sepax no pueda ser utilizado debido a que
tenemos mayor volumen de muestra que rebase las especificaciones del fabricante.
Es muy importante pesar la bolsa de recolección vacía y llena

En la campana de flujo laminar previa limpieza con alcohol al 70% e irradiación de 15 a
20 min llevar la bolsa de recolección para limpiar toda la bolsa especialmente las líneas
Poner el acoplador a la bolsa de recolección (jeringa de 60 mí de preferencia) se extrae

un volumen y se vacía en tubos Falcon de 50 ml, estériles, se tapa y se centrifuga por
15 min a 4 ° C a 3500 RPM.
En la campana, abrir la tapa de tubo Falcon extraer el Plasma dejando alrededor de 5

ml. Dar pequeños golpecitos para despegar las células de la pared del tubo y
resuspender con un poco de plasma, tratando de recuperar el mayor número de células
posibles . Con una jeringa de 60 0 20 ml y aguja lila (16 G) se pasan las células a la
bolsa de criopreservación a través de la línea de la bolsa (pueden ser más bolsas
dependiendo del volumen que tengamos) de 250 ml y poner en el refrigerador.
Prepa en un tubo Falcon de 50 ml la solución Crioprotectora
DMSO al 10 % -------------------------------------------------10 ml
HEST (Hidroxietilalmidon) si es al 10 %…………….……30 ml
Albúmina Humana al 20% o 25%--------------------------10 ml
En el caso que el HEST sea del 6% ------------------------35ml
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Albúmina Humana del 20% o 25% -----------------------5 ml
Poner en el refrigerador la solución de DMSO por 15 minutos a 4°C, pues este debe
estar frío a la hora de ponerlo a las células
Encender el congelador minutado el cual deberá contener una sensor y a falta de este
una bolsa con la mezcla de DMSO como control y en cuanto llegue a una Temperatura
de 4°C
En lo que el congelador minutado llega a la Temperatura deseada se prepara la

Cosecha en la campana de flujo laminar con las solución crioprotectora la cual debe
ser agregada poco a y en frio mezclando al mismo tiempo que se va adicionando
lentamente.
Eliminar el aire y burbujas con una jeringa de la criobolsa, conservando 1.5 ml de

muestra, 500µl en un tubo criovial debidamente identificado y el resto de divide para
realiza hemocultivos viabilidad con citometria o azul de tripan
Se sella la bolsa con un sellador automático el cual también debe estar limpio y cerca
de la campana de flujo laminar
REACTIVOS PARA CRIOPRESERVACION

INSUMOS
La siguiente lista son reactivos indispensables para realizar la criopreservación de
Células Progenitoras Hematopoyéticas (CPH), procedentes de Sangre Periférica,
Medula Ósea y Cordón Umbilical
1.- Dimethyl Sulfoxide (DMSO) grado clínico Sigma –Aldrich

2.- Hidroxietil almidon al 10% (HES) PISSA Fresniere
3.- Seroalbumina Humana al 20 %
4.- Etanol al 70% (desinfectante)
MATERIAL PARA CRIOPRESERVACION
1. Bolsas de 250ml Congelación Cryostoic Biomedica

2. Acopladores ( Sampling Site Copler ) ( en caso de no tener suplir con llave de
tres vias) Baxter
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3. Sepax Cell Separetion Kitt Biosafe

4. Crioviales de Nitrógeno liquido de 2ml Labcon
5. Tubo Falcon de 50 ml
6. Jeringas (propulsor o perfusor) DE 60 ml
7. Jeringas de 20 ml
8. Agujas Insyde 14 G 1.7 sin 2.1x45mm
9. Agujas 16 G 1 ½
10. Pipetas de plástico de 25 ml estéril
11. Bolsas Estériles para descongelación ( syplog )
12. Pipetas con filtro desechables de 10 ml
13. Puntas para 200 µl
14. Puntas desechables para 1000 µl
15. Cubre bocas
16. Guantes Estériles
17. Guante manejo de temperaturas extremas (bajas)
EQUIPO
1. Congelador Programable
2. Tanque de almacenaje
3. Cajas y Marcos para almacenar bolsas y criobiales
4. Placas de Presión
5. Campana de Bioseguridad Clase II
6. Pipetor Automático
7. Sellador Automático
8. Tanques de Nitrógeno Líquido
9. Balanza Digital
10. Pinzas de Rodillo
11. Sellador dieléctrico
12. Conector estéril
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PREPARACION DE EQUIPO PARA EL PROCESO
LIMPIEZA Y LIMPIEZA DE CAMPANA DE FLUJO LAMINAR

DESINFECCIONJ DEL COMO SE MENSIONA EN ESTE MANUAL EN EL
AREA BLANCA DE PUNTO 4.8.2
PROCESAMIENTO
VERIFICAR Y LIMPIAR CON COLOCAR EL MATERIAL

ALCOHOL AL 70% EL REQUERIDO PARA EL
CONGELADOR MINUTADO, PROCESO EN LA CAMPANA Y
TENER LOS CANESTER A COMO JERINGAS GASAS
OCUPAR LIMPIOS Y SECOS TUBOS SELLADOR ETC. DEJAR
15 MIN CON UV
VERIFICAR QUE LAS BOLSAS CHECAR QUE HAYA

CRIOPROTECTORAS TENGAN SUFICIENTE NITROGENO PARA
BUENA CADUCIDAD Y EL TODO EL PROCESO DE
CASO DE USO DE SEPAX CONGELACION
LIMPIARLO
LIMPIEZA Y DESINFECCION DE
CENTRIFUGA REFRIGERADA
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RECEPCION Y PROCESO
LA BOLSA OBTENIDA DE CELULAS PROGENITORAS HEMATOPOYETICAS, YA SEA

DE MEDULA OSEA O SANGRE PERIFERICA DEBERA SER ENTREGADA CON NUMERO
DE UNIDAD ASIGNADA POR EL BANCO DE SANGRE, RESULTADOS DE SEROLOGIA,
NOMBRE DE EL DONADOR, NOMBRE DE RECEPTOR, PESO DEL RECEPROR, EDAD,
VOLUMEN DE LA COSECHA, BIOMETRIA HEMÁTICA , VOUMEN OBTENIDO,
NOMBRE DE EQUIPO UTILIZADO PARA SU OBTENCION Y RECUENTO DE CD 34 Y
VIABILIDAD
UN TUBBO DE BH CON MUESTRA DE LA COSECHA
L
ROTULAR FRASCOS DE HEMOCULTIVO, CRIOVIALES, CON NUMERO DE
UNIDAD Y NOMBRE
OBTENER EL PESO DE LA BOLSA VACIA Y DE BOLSA LLENA PARA

CALCULAR EL VOLÚMEN REAL DE LA COSECHA
MEZCLAR BIEN LAS CELULAS CON MOVIMIENTO SUAVE ASI COMO

TAMBIEN LAS LÍNEAS DE LA BOLSA CON AYUDA DE PINZAS, PONER UN
CAMPO ESTÉRIL EN LA CAMPANA DE FLUJO LAMINAR Y LIMPIAR BIEN LAS
VÍAS, DE ESTAS DARLE UN PILOTO A CITOMETRIA Y OTRO
PARABACTERIOLOGIA
SI EL PROCESO SE VA A REALIZAR DE FORMA MANUAL PONER EL

ACOPLADODR A LA BOLSA DE RECOLECION Y CON JERINGA DE 60 ML DE
PEREFERENCIA EXTRAER TODO EL VOLÚMEN Y VACIAR A 2TUBOS FALCON
ESTÉRILES DE 50 ML, TAPAR Y CENTRIFUGAR POR 15 MINUTOS A 4 ° C SIN
FRENO
SACACAR CON MUCHO CUIDADO LOS TUBOS FALCON Y LLEVARLOS A

LA CAMPANA DE FLUJO LAMINAR, EXTRAEER EL PLASMA Y PASARLO A
OROS TUBOS FALCON ESTÉRILES.
MEDIR EL VOLÚMEN DE CÉLULAS QUE NOS QUEDARON CON JERINGA
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PONER EN LA CAMPANA LAS BOLSAS CRIOPROTECTORAS LIMPIARLAS

CON ALCOHOL
CON JERINGAS DE 20 ML EXTRAEER TODAS LAS CELULAS DE LOS TUBOS
FALCON, PONER UN POCO DE PLASMA PARA DEJAR LO MENOS POSIBLE
DE CELULAS EN EL TUBO, CONECTAR A LA LINEA HEMBRA DE LA BOLSA
DE CRIOPRESERVACION Y TRASVASARLAS A LA BOLSA.
RETIRAR LAS JERINGAS Y CERRAR LA LÍNEA
ES IMPORTANTE TOMAR EN CUENTA EL VOLÚMEN QUE SE TIENE Y
REPARTIRLO EN LAS BOLSAS QUE SEAN NECESARIAS TOAMDO EN
CUENTA EL VOLUMEN QUE SE AÑADIRÁ DE SOLUCION
CRIOPROTECTORA DE MANERA QUE NO VAYAN A QUEDAR MUY LLEAS
PUES SE CORRE EL RIESGO DE QUE SE ROMPAN A LA HORA DE
CRIOPRESERVAR O DESCONGELAR
PREPARAR LA SOLUCION CRIOPROTECTORA EN HIELO O EN UN MEDIO QUE

ESTÉ A 4 ° C
Prepa en un tubo Falcon de 50 ml la solución crioprotectora
DMSO al 10 % -------------------------------------------------10 ml
HEST (Hidroxietilalmidon) si es al 10 %…………….……30 ml
Albúmina Humana al 20% o 25%--------------------------10 ml
En el caso que el HEST sea del 6% ------------------------35ml
Albúmina Humana del 20% o 25% -----------------------5 ml
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ENCENDER EL CONGELADOR MINUTADO EN UTILIZANDO EL PROGRAMA # 6 PARA QUE

LLEGUE A UNA TEMPERATURA DE – 4 °C, MIENTRAS SE PREPARA LA SOLUCION Y SE
ENFRIA
PONER EN EL REFRIGERADOR LOS TUBOS CON LA SOLUCION DE DMSO POR 15 MIN A 4 °C
PUES DEBE DE ESTAR FRIO A LA HORA DE PONERLO A LAS CÉLULAS
SUPONIENDO QUE SE OBTIENEN 2 BOLSAS CON 25 ML DE CÉLULAS CADA UNA SE

ADICIONARAN 25 ML DE SOLUCION CRIOPROTECTORA A CADA BOLSA
SE PONEN LAS BOLSAS DE LAS CÉLULAS ENTRE 2 BOLSAS DE GEL CONGELDO

PARA ADICIONAR LENTAMENTE CON UNA JERINGA LA SOLUCION
CRIOPROTECTORA LENTAMENTE Y MOVIENDO LAS BOLSAS SUAVEMENTE PARA
MEZCLAR, SE ADICIONAN DE 2EN 2 ML HASTA TERMIAR LA SOLUCION SIEMPRE
MEZCLANDO
LAVAR LAS JERINGAS SIN DESCONECTAR CON LA MUESTRA DE TAL MODO QUE
EN LAS LÍNEAS NO QUEDE SOLO SOLCION.
CON LA MISMA JERINGA Y LAS CÉLULAS YA MEZCLADAS DEJAR ALRREDEDOR DE

5 ML DE MUESTRA PARA PONER:
EN 4 CRIOVIALES PONER 500 MICROLITORS DE MUESTRA, UNO PARA CITOMERIA,

3 PARA CRIOPRESERVAR, DOS JUNTO CON LAS BOLSAS Y OTRO PARA CONTROL
LOS OTROS 3 ML VACIAR EN FRASCO DE HEMOCULTIVO
DAR A EL AREA DE CTOMETRIA UN CRIOVIAL O TUBO CON LA MUESTRA PARA

QUE REALICE DETERMINACI0N DE CD 34 Y VIAVILIDAD PARA ASI OBTENER EL
VUMERO FINAL DE CELUALS A CRIOPRESERVAR ASÍ COMO CONTOL DEL
MANEJO CON LOS CRIOPROTECTORES
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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ANTES DE DESCONECAR LAS JERINGAS SACAR TODO EL AIRE DE LAS BOLSAS DE

TAL MANERA QUE NO QUEDE NADA DE AIRE DENTRO Y SEGUIR MANTENIENDOLAS
EN FRIO
YA LISTO EN CONGELADOR PONER LAS BOLSAS EN LAS PRENSAS PARA

CONGELAR JUNTO CON UN CRIOBIAL PROCURANDO QUE EL SENSOR DE
EL EQUIPO QUEDE ENTRE UNO DE LAS PRENSAS PARA QUE MIDA LA
TEMPERATURA REAL DE CONGELACION DE LA BOLSA Y TAMBIEN
PONER LOS 3 CRIOVIALES EN EL CONGELADOR HASTA QUE TERMINE EL
PROCESO A LOS – 80°C
SACAR Y DESPEGAR CON CUIDADO LAS BOLSAS, COLOCARLAS EN LOS

CANESTER RESPECTIVOS JUNTO CON EL CRIOVIAL QUE DEBE ESTAR LO
MAS FRIO POSIBLE
EL CRIOVIAL DE CONTROL PONERLO EN LA CAJA DE CONTROLES
PONER EL CANESTER EN EL PORTACANESTER E INTRODUCIRLO EN EL

TANQUE DE CRIOPRESERVACION QUE ESTARÁ A – 196 °C
LLENAR LA HOJA DE REGISTRO CON TODOS LOS DATOS TANTO DE

UBICACIÓN EN EL TANQUE, BH, CONTEO CELULAR, CD34, VIAVILIDAD
NOMBRE Y EDAD DE PACIENTE DIAGNOSTICO PESO FECHA DE PROCESO
TAMBIEN SE DEBE TENER EL REGISTRO EN ELECTRONICO LA

UBICACIÓN EN EL TANQUE CON FECHA Y NOMBRE
Todos los datos que resultan de este procedimiento se concentran en la Bitácora CAL-
77-A, que se muestra a continuación:
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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Bitácora CAL-77-A HOJA DE REGISTRO DE CÉLULAS TALLO

CRIOPRESERVADAS
NUM DE UNIDAD --------------- FECHA PROCESO: ___________________
TIPO DE TRANSPLANTE -------------------------------------------------
NOMBRE DE RECEPTOR---------------------------------------------------------------- NUM. DE EXPEDIENTE -------------
EDAD DE RECEPTOR------------------------------------- PESO DE RECEPTOR---------------------------
NOMBRE DE DONADOR---------------------------------------------------- PARENTESCO-----------------------------
DIAGNOSTICO ----------------------------------------------------------------------
GRUPO SANGUINEO DONADOR-------------------
GRUPO SANGUINEO RECEPTOR--------------------------
SEROLOGIA
HCV-------------- AgSHB ----------------- SIFILIS----------------- BRUCELLA--------
HIV---------------- CMV-IgM------------------- CHAGAS-----------
NAT: HIV:-_________ HCV:_____________ HBV:__________
LEUCOCITOS TOTALES = WBC K/min L X 1000 X VOL DE BOLSA--------------------------------

8
DOSIS DE LEUCOS = LEUCOCITOS TOTALES X 10 / Kg DE DONADOR ------------------------------------
CMN% = LINFOCITOS% + MONOCITOS % -----------------------------------------------------

8
DOSIS DE CMN = CMN% X LEUCOCITOS TOTALES X 10 / Kg / 100 --------------------------------------------
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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CD 34 Cel / µl ------------------------------------
VIABILIDAD -------------------------------------
6
DOSIS DE CD 34 X DILUCION X 1000X VOL / PESO DE RECEPTOR =--------------------X 10
VOL STEM CELLS CONCENTRADAS EN mL. --------------------------------------------------------
VOL SOL. CRIOPRESERVADORA--------------------------------------------------------------------
VOL TOTAL DE BOLSA CRIOPRESERVADA------------------
POSICION DE CRIOVIALES---------------------------------
´POSICION DE BOLSA EN TANQUE -----------
CULTIVO BACTERIOLOGICO:
HEMOCULTIVO PRE CRIOPRESERVACION-----------------
HEMOCUTIVO POS CRIOPRESERVANTES----------------------
VIABILIDAD POS DMSO-----------------
VIABILIDAD POST- DESCONGELACION--------------------
FECHA DE DESCONGELACION Y ENVIO: ______________
CD 34---------------------
REALIZO ------------------------------
CAL-02-B
ISBN: 978-968-9170-17-4
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PRODUCTO NO CONFORME
Producto no conforme debido a mala operación o mal manejo del producto durante el
proceso
 Producto entregado con bolsa rota, fuga en las líneas
 Mal sellado de líneas
 Células tallo para Trasplante Alogénico con células CD 34+ < 2 x 106 / Kg de
peso de receptor.
 Células tallo para Trasplante Autólogo con células CD 34+ < 1.5 x 106 / Kg
de peso del receptor
REGISTROS
Bitácora CAL-77-A hoja de registro de células tallo criopreservadas
CAL-02-B
NUM DE UNIDAD --------------- FECHA
PROCESO:_______________________
TIPO DE TRANSPLANTE -------------------------------------------------
NOMBRE DE RECEPTOR---------------------------------------------------------------- NUM. DE
EXPEDIENTE -------------
EDAD DE RECEPTOR------------------------------------- PESO DE
RECEPTOR---------------------------
NOMBRE DE DONADOR---------------------------------------------------- -PARENTESCO---
--------------------------
DIAGNOSTICO ----------------------------------------------------------------------
GRUPO SANGUINEO DONADOR-------------------

GRUPO SANGUINEO RECEPTOR--------------------------
SEROLOGIA
HCV-------------- AgSHB ----------------- SIFILIS----------------- BRUCELLA-------

-
HIV---------------- CMV-IgM------------------- CHAGAS-----------
NAT: HIV:-_________ HCV:_____________ HBV:__________
LEUCOCITOS TOTALES = WBC K/min L X 1000 X VOL DE BOLSA----------------------------

----
DOSIS DE LEUCOS = LEUCOCITOS TOTALES X 10⁸ / Kg DE DONADOR -----------------

-------------------
CMN% = LINFOCITOS% + MONOCITOS % -----------------------------------------------------
DOSIS DE CMN = CMN% X LEUCOCITOS TOTALES X 10 ⁸ / Kg / 100 -----------------------

---------------------
CAL-02-B
CD 34 Cel / µl ------------------------------------
VIABILIDAD -------------------------------------
DOSIS DE CD 34 X DILUCION X 1000X VOL / PESO DE RECEPTOR =--------------------X

10⁶
VOL STEM CELLS CONCENTRADAS EN mL. -------------------------------------------------------

-
VOL SOL. CRIOPRESERVADORA--------------------------------------------------------------------
VOL TOTAL DE BOLSA CRIOPRESERVADA------------------
POSICION DE CRIOVIALES---------------------------------
´POSICION DE BOLSA EN TANQUE -----------
CULTIVO BACTERIOLOGICO:
HEMOCULTIVO PRE CRIOPRESERVACION-----------------
HEMOCUTIVO POS CRIOPRESERVANTES----------------------
VIABILIDAD POS DMSO-----------------
VIABILIDAD POST- DESCONGELACION-------------------- FECHA DE

DESCONGELACION Y ENVIO:______________
CD 34---------------------
REALIZO ------------------------------
CAL-02-B

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Banco de Sangre Código: CAL-01

Instituto Nacional de Pediatría Nivel de Revisión: 03

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Nombre: Nombre: Nombre:

Firma: Firma: Firma:

Fecha: Fecha: Fecha:

Elaborado por: Revisado por: Aprobado por:

Nombre: Nombre: Nombre:

Firma: Firma: Firma:

Fecha: Fecha: Fecha:

CAMBIO REVISIÓN FECHA

DESCRIPCION DEL PROCESO

Una vez que al donador se le toma la muestra (Ver procedimiento CAL-43) se

Los métodos para realizar estos ensayos (a excepción de las Hemolisinas)

Las pruebas de aglutinación establecen:

 HEMOLISIS: Indica una reacción positiva para la

 AGLUTINACION: la presencia del par Antígeno y/o

INTERPRETACION Y PONDERACIÓN DE LAS AGLUTINACIONES

DESCRIPCION GRADO PONDERACION

1.- DETERMINACION DEL GRUPO SANGUINEO

La prueba consiste de dos etapas:

 Prueba inversa o sérica: suero estudiado desafiado

Se realiza la prueba directa y la prueba inversa

Para la prueba directa se requiere lo siguiente:

Adicionar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

Marcar 4 tubos con las letras A1, A2, B y O

TUBO A1 TUBO A2 TUBO B TUBO O

Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.

Se realiza un ligera agitación para desprender el botón de celulas

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

Formato F-A-14-26 que es llenado por el personal de área de donadores:

ANTIGENOS PRESENTES EN LOS ANTICUERPOS PRESENTES EN

Se realiza la prueba directa y la prueba inversa

Empleo de tira del DianaGel Donors/Donantes

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

S.ABO S.Rho AT INVERSA

2. SUBGRUPOS SANGUINEOS (SISTEMA ABO)

Para realizar la prueba de Lectina A1 y H se requiere lo siguiente:

Marcar 1 tubo con la letra A1 (Anti-A1) y otro con la letra H (Anti- H)

Agregar una gota de la suspensión de eritrocitos del donador

Se introducen en la centrifuga durante 30 segundos. Las rpm estan establecidas en la centriifuga.

Se realiza la lectura macroscópica para aglutinación y se interpretan los resultados

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

abla # 2 Subgrupo SABO

3.- DETERMINACION DEL FACTOR Rh

GRUPO SANGUIENO Rho

Marcar un tubo con la letra Rh (anti D) y otro con la letra C (control)

Agregar una gota de suspensión al 2-5% de eritrocitos del donador

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

SI la prueba Anti-D es NEGATIVA

Se lavan las celulas 3 veces con salina fisiologica.

Agregar una gota de suero de Coombs poliespecífico (anti IgG-C3d)

Registrar resultados en el formato F-A-14-26

La determinación del grupo ABO en la tarjeta de Gel conlleva la

Los resultados de Rh negativo en gel se confirman con el Anti D Totem

5. FENOTIPO Rho (EeCc) :

Marcar la tarjeta con el número del donador que le corresponde

Hacer un suspensión de los eritrocitos 2-3% (1ml de Diana-1 + 25 l de muestra)

Añadir 25 microlitros de la suspensión de eritrocitos 2-3% en los microtubos que indican C, c, E, e

Centrifugar en DianaFuge y leer manual (Tabla 3A, 3B, 3C)

Registrar los resultados en el formato F-A-14-23