UNIVERSIDAD NACIONAL

FEDERICO VILLAREAL

FACULTAD DE OCEANOGRAFIA, PESQUERIA Y CIENCIAS

ALIMENTARIAS

CURSO: OCEANOGRAFÍA QUÍMICA Y BIOLÓGICA

TEMA: DETERMINACION DE NITRATOS Y FOSFATOS (NO3 Y PO4)

PROFESOR: ING. HINOJOZA

ESCUELA: ING. PESQUERA

AÑO: 4°

ALUMNOS: HUAMANI ESPINOZA CHRISTIAN JAVIER

2014
OBJETIVO:

 Determinar los nitratos presentes en el agua de mar.

 Preparar la solución hija de 10 ppm (NH3 a 1000 ppm)
 Determinar mediante ensayos sencillos y directos el NO3¯ , presentes en muestras de agua
de mar.
 Determinar mediante ensayos sencillos y directos el PO4¯, presentes en muestras
de agua de mar.

FUNDAMENTO TEORICO:

El fundamento teórico para la determinación de los nitratos se fundamenta en una reacción de rojo
grosella ;el cual es sometido en la columna de cadmio el cual contiene Cd y Cu , luego se compleja
con sulfanilamida (complejo de diasotación); para luego acomplejarlo con naftiletilendiamida
(copulación); y así hallar su respectiva absorbancia.

MARCO TEORICO:

Nitrógeno del mar:

El nitrógeno aparece en el mar, básicamente, en forma de nitratos, nitritos y amoníaco (NO 3-NO2-
NH3), aunque suelen aparecer en mayor cantidad los nitratos. Sus porcentajes son:

Nitratos:------1-600-microgr/litro
Nitritos------:0.1-50-microgr/litro
Amoníaco:- 5 - 500 microgr/litro

Nitratos:

Los nitratos son más abundantes en zonas superficiales, ocurriendo al revés en el caso de los
nitritos, que aparecen en mayor cantidad cerca del fondo, pudiendo faltar en superficie en zonas
poco profundas. La concentración de amoníaco en profundidad es escasa pero se presenta de modo
uniforme a lo largo de toda la columna de agua.
 Los nitratos del agua del mar se van a regenerar a partir de organismos muertos que caen al fondo o
a partir de sus excretas.

Determinación de los nitritos:

- SORIANO, María y VERDÚ, Ana (2002):
Fundamenta la determinación de nitratos, método del acido fenol 2-4 disulfonico. La concentración
de nitratos se ha determinado mediante la técnica instrumental de Espectrofotometría en la región
visible mediante el acido fenol 2-4 disulfonico

- GARCÍA, Carlos (2003):

Da observaciones, una variante más sencilla del método espectrofotométrico anterior es
la determinación de nitratos por el método de la segunda derivada (Sempere et al.. 1993). Al
tratarse de un método más simple y rápido.

Fosfatos:

Los fosfatos son las sales o los ésteres del ácido fosfórico. Tienen en común un átomo de fósforo
rodeado por cuatro átomos de oxígeno en forma tetraédrica.Los fosfatos primarios y secundarios
contienen hidrógeno y son sales ácidas. Los fosfatos secundarios y terciarios son insolubles en agua,
a excepción de los de sodio, potasio y amonio; los primarios son más solubles.
Los fosfatos son importantes para el metabolismo de animales y plantas. Los huesos contienen
fosfato de calcio, Ca3 (PO4)2, y el primer paso en la oxidación de la glucosa en el cuerpo es la
formación de un éster de fosfato. Para aportar fosfatos al ganado, se usa el hidrogeno fosfato de
calcio hidratado, CaHPO4 · 2H2O, como suplemento alimenticio. El fosfato primario de calcio,
Ca(H2PO4)2, se emplea como ingrediente en fertilizantes para plantas.
Los fosfatos también estimulan el crecimiento de las algas lo que puede ocasionar un crecimiento
rápido de las algas. Los crecimientos rápidos de algas se pueden reconocer con facilidad como
capas de limo verde y pueden eventualmente cubrir la superficie del aguar.

Ortofosfatos:

Los fosfatos más avanzados son los ortofosfatos (Con el prefijo "orto" se suelen denominar los
ácidos más hidratados). Contienen el anión PO43-. Los ortofosfatos se encuentran ampliamente
distribuidos en la naturaleza.
 Los fosfatos forman una parte importante de la carga en las aguas residuales. Pueden ser
eliminados por métodos fisicoquímicos precipitándolos con cloruro ferrico (FeCl3) o son retenidos
en los fangos activos que se separan y luego pueden ser reconvertidos en compost para abonos
orgánicos

Determinación de los fosfatos:

Se aplicará el método de adiciones estándar para eliminar interferencias con otros

compuestos. Los abonos inorgánicos están constituidos por diversas clases de fosfatos
solubles, los más comunes de los cuales derivan de los aniones meta-(PO-3), piro- (P2O7-4) y
ortofosfato (PO4-3). Debido a su elevada solubilidad, estos aniones son arrastrados
fácilmente por las aguas superficiales hacia ríos, acuíferos, etc. Otra fuente de fosfatos la
constituyen los vertidos urbanos que contienen detergentes: para aumentar su eficacia,
algunos detergentes utilizan fosfatos inorgánicos en su composición como agentes
alcalinizadores.

Las aguas naturales contienen normalmente cantidades de fosfatos por debajo de 1 mg/l.
Cantidades superiores de estos nutrientes favorecen el crecimiento de algas que consumen
el oxígeno del medio acuático y provocan la desaparición de especies vegetales y animales.

MATERIALES:

 Gradilla  4 Pipetas.
 13 Probetas  Vaso precipitado
  Fiola 100 ml
 Peras de goma
 2 Pisetas
 Marcador
 Muestra de mar

SOLUCIONES:

 Reactivo I (sulfaminamida)
 Reactivo II (N-naftil etilendiamida)
 Complejo diazo de color rojo grosell.

SOLUCIONES:

 Solución emética (tartatico amónico potasio)

 Ácido sulfúrico
 Ácido ascorbico
 Amonio molibdato
PARA NITRATO

Preparar la solución hija:

 Tomar 1ml de la solución madre ó solución estándar (1000ppm) con ayuda de la pipeta
volumétrica.
 Verter el 1 ml de la solución estándar a la fiola
 Enrasar la fiola de 50 ml.
 Obtener una solución de 10 ppm.

Para las muestras de mar y las estándares:

 Marcar 4 probetas con los números romanos (I, II, III, IV).
 Verter las alícuotas de la solución hija a las probetas; I (o ml), II (o.2 ml), III (0.4ml) y IV
(0.8ml) respectivamente.
 Agregar 50 ml de agua destilada a las probetas I, II, III, y IV.
 Agregar 50 ml de agua de mar a las probetas 1,2,3,4,5,6,7,8, y 9.

Para la regularización de la columna de cadmio y cobre:

 Regularizar la columna de cadmio de 20 a 25 min.

 Regularizar el goteo 1 ml (7 a 10 ml).
 Verter agua destilada a la columna.
 Mantener que no se acabe el agua destilada.

Para los estándares:

 Verter 20 ml de la muestra blanca a la columna de Cd.

 Observar que lleva a la marcación de color negro que existe en material.
 Verter lo restante de la muestra en blanco.
  Recuperar los 25 ml de la muestra blanca (I).
 Realizar el mismo procedimiento para las siguientes muestras de los estándares (I, II,
III, IV).
 Llevar al espectrofotómetro y registrar las absorvancias.
 Realizar la gráfica de absorvancia y concentración.
 Determinar la ecuación y el R.

“Recordar que los primeros 20 ml vertidos a la columna son para lavar los residuos
que han quedado.”

Para la muestra:

 Marcar 9 probetas con los números arabicos (1 al 9) con las profundidades de cada
muestra.
 Agregar 50 ml de agua de mar a las probetas 1,2,3,4,5,6,7,8, y 9.
 Agregar agua destilada para lavar la columna, en cual haya quedado residuos de las
muestras anteriores.
 Agregar 25 ml de la muestra 1 para lavar otra vez la columna.
 Verter los 25 ml restantes.
 Recuperar los 25 ml de la muestra 1.
 Agregar agua destilada para lavar la columna.
 Verter 20 a 25 ml de la muestra 2 a la columna de cd.
 Verter los 25 ml restantes.
 Recuperar los 25 ml de la muestra 2.
 Realizar la misma metodología para las muestras restantes (3,4,5,6,7,8, y 9)
 Llevar la muestra al spectrophotometer, el cual medirá la absorvancia.
 Llevar las muestras a 540 nm
 Registrar las absorvancias.
 Calcular la concentración de las muestras 1,2,3,4,5,6,7,8, y 9.
 Realizar la gráfica de absorvancia- concentración.
 Determinar la ecuación y el R.
 RESULTADOS:

- MUESTREO
Muestra Absorbancia c
I ESTÁNDAR 0 0
II ESTÁNDAR 0.021 0.04
III ESTÁNDAR 0.043 0.08
IV ESTANDAR 0.072 0.16

x y CURVA DE CALIBRACION
0 0 0.08
0.04 0.021 0.07 y = 0.4486x + 0.0026
R² = 0.9884
0.08 0.043 0.06
absorvancia

0.16 0.072 0.05

0.04
y
0.03
0.02 Lineal (y)
0.01
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2
concentracion

0.2
x y 0.18
0.10120374 0.048 0.16 y = 0.4486x + 0.0026
0.37761926 0.172 0.14 R² = 1
absorvancia

0.00757914 0.006 0.12

0.03209987 0.017 0.1
y
0.08
0.06 Lineal (y)
0.04
0.02
0
0 0.1 0.2 0.3 0.4
concentracion
ARA FOSFATOS

- Preparar la solución hija:

 Tomar 10 ml de la solución madre ó solución estándar ( 1000ppm) con ayuda de la

pipeta volumétrica.
 Verter el 10 ml de la solución estándar a la fiola
 Enrasar la fiola de 100 ml.
 Obtener una solución de 100 ppm.

- Para las muestras de mar y las estandares:

 Marcar 4 probetas con los números romanos ( I,II,III,IV).

 Verter las alícuotas de la solución hija a las probetas; I (o ml) , II (o.2 ml), III (0.4 ml) y
IV ( 0.8ml) respectivamente.
 Agregar 25 ml de agua destilada a las probetas I,II,III, y IV.
 Agregar 25 ml de agua de mar a las probetas 1,2,3,4,5,6,7,y 8.

- Prepara la solución del reactivo:

 Verter 30 ml de de acido sulfúrico a la probeta.

 Verter 9 ml de amonio molibdato.
 Verter 18 ml de acido asrcorbico.
 Verter 3 ml de solución emética
 Reposar la solución de reactivo por 20 min
 Observar la formación del color
- Para las estándares:
-
 Marcar 4 probetas con los números romanos ( I,II,III,IV).
 Verter las alícuotas de la solución hija a las probetas; I (o ml) , II (o.2 ml), III (0.4 ml) y
IV ( 0.8ml) respectivamente.
 Agregar 25 ml de agua destilada a las probetas I,II,III, y IV.
  Verter 4 ml de la mescla de reactivo.
 Reposar el estándar por 20 minuto.
 Observar la coloración.
 Llevar las muestras al espectrofotómetros a 690nm.
 Leer las absorvancias
 Registrar las absorvacias
 Realizar la curva de calibración

- Para la muestra:

 Marcar 8 probetas con los números arabicos (1 al 8) con las profundidades de cada
muestra.
 Agregar 25 ml de agua de mar a las probetas 1,2,3,4,5,6,7, y 8
 Agregar 4 ml de la mezcla de reactivos.
 Reposar la muestra por 20 min
 Llevar las muestras al spectrophotometer, el cual medirá la absorvancia.
 Llevar las muestras a 690 en el espectrofotometro
 Registrar las absorvancias.
 Calcular la concentración de las muestras 1,2,3,4,5,6,7,8, y 9.
 Realizar la gráfica de absorvancia- concentración.
 Determinar la ecuación y el R.
 RESULTADOS:

MUESTREO
Muestra Alicuotas Absorvancia c
I ESTÁNDAR 0 0
II ESTÁNDAR 0.2 0.039 0.8
III ESTÁNDAR 0.4 0.072 1.6
IV STANDAR 0.8 0.145 3.2

curva de calibracion
0.16 y = 0.7421x + 0.0158
x y
R² = 0.905
0 0 0.14
0.04 0.054 0.12
absorvancia

0.08 0.094 0.1

0.16 0.123 0.08
y
0.06
0.04 Lineal (y)
0.02
0
0 0.05 0.1 0.15 0.2
concentracion

0.08
y = 0.7421x + 0.0158
0.07 R² = 1
x y
0.06
0.02991511 0.038
absorvancia

0.05
0.0097022 0.023
0.02317747 0.033 0.04
y
0.07438351 0.071 0.03
Lineal (y)
0.02
0.01
0
0 0.02 0.04 0.06 0.08
Título del eje
RECOMENDACIONES:

 Preparar la solución hija de 100 ppm del NH3 -1000ppm- cuidadosamente para cuando se
realice la práctica.
 Verter las soluciones exactas al momento de la experimentación porque puede alterar las
absorvancias.

CONCLUSIÓN:

En la siguiente práctica se ha basado en la determinación de los fosfatos en el agua de mar por el

método colorimétrico. Este método se realiza a través del nivel de ortofosfato el cual se determina
por un método colorimétrico. El molibdato de amonio y el tartrato de antimonio de potasio,
reaccionan en un medio ácido con el ortofosfato para formar un complejo fosforomolibdato, que se
reduce a azul de molibdeno de intenso color debido al ácido ascórbico. La intensidad de color azul
de la solución determina la concentración de fosfato. Una vez realizado este procedimiento llevamos
la muestra al espectrofotómetro el cual medira las absorbancias en una longitud de onda de 690 nm.
Cabe recalcar que los fosfatos también estimulan el crecimiento de las algas lo que puede ocasionar
un crecimiento rápido de las algas
Por consiguiente las masas de agua con altos niveles de fosfatos generalmente tienen niveles altos
de DBO debido a las bacterias que consumen los desechos orgánicos de las plantas y
posteriormente a los niveles bajos de OD.

1. BIBLIOGRAFÍA:

 milksci.unizar.es/adit/fosfa.html

 Procedimientos Simplificados de Análisis Químicos de Aguas Residuales (2da Edición)

María Luisa C. de Esparza.

 Análisis de las Aguas, J.Rodier

 http://www.upo.es/depa/webdex/quimfis/docencia/TAQ/TAQP1_0506.pdf