EQUIPOS Y MATERIALES USADOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

“Año del Diálogo y la Reconciliación Nacional””

Universidad Nacional Agraria La Molina

Departamento de acuicultura e industrias pesqueras

Curso:
Microbiología Pesquera

Práctica:
1- Equipo y materiales usados en el laboratorio de Microbiologia

Profesora:
Ing. Nancy Martínez Ordinola

Alumno:
Ruth Yupanqui Quispe

Realización de la práctica:
20/03/16

Entrega del informe:

03/04/18

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EQUIPOS Y MATERIALES USADOS EN EL LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA

I.INTRODUCCIÓN

En este trabajo se dan a conocer los instrumentos de laboratorio

microbiológico básicos para manejar y estudiar microorganismos, en
nuestras prácticas.

En el presente informe con los materiales y equipos, siendo necesarios

para trabajar en condiciones de esterilidad.

Los materiales y equipos teniendo en cuenta los conocimientos básicos

teóricos, de manera que podamos utilizarlos de una manera correcta.

El presente trabajo teniendo una información básica y conocimiento

actualizados de los materiales y equipos.

OBJETIVOS
Conocer las características y formas de aplicación de os equipos y
materiales más utilizados en el laboratorio de microbiología

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III.REVISIÓN LITERARIA:

Efecto de campos electromagnéticos sobre la actividad microbiana de un bio-fertilizante

El tratamiento electromagnético de biofertilizantes es una alternativa aplicable en Colombia, donde

se presentan condiciones de sobreuso de fertilizantes de síntesis
Química en el suelo con toda su problemática asociada. Adicionalmente, ésta tecnología podría
optimizar el uso de microorganimos benéficos sobre el suelo, poblaciones y mejorando las
condiciones para el desarrollo de los cultivos. No obstante, se
Recomiendan futuras investigaciones para evaluar el impacto de la respuesta agronómica
De un cultivo a una inducción de 25mT y a lapsos de tiempo menores que los considerados en esta
investigación, para delimitar con mayor precisión tal interacción.
Con mayor precisión tal interacción.
(S., Zuñiga, O., Jiménez, C., Benavides, J. and Torres González,2016)

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III.MATERIALES
AUTOCLAVE
Calor húmedo: Autoclave de vapor
La autoclave fue inventado por Charles
Chamberland en 1879.
Los procesos de esterilización más
comunes son 121ºC (249,8ºF) por 15
minutos, la que presenta una presión de 2
atmósferas; y 134ºC (273,2ºF) por 3
minutos, con una presión de 3 atmósferas
(Nicolás Garrido, 2015)
HORNO DE ESTERILIZACION
Calor seco: Horno esterilizador
Pasteur o poupinal:
El horno es una cámara cerrada
con baldas o rejillas para disponer
el material y una fuente de calor
eléctrica. El vapor de agua es
mejor conductor de calor que el
aire seco, por lo que la
esterilización mediante horno
requiere temperaturas y tiempos
más elevados que la esterilización
con autoclave. Las condiciones
más usuales de trabajo son 140°C
y 180 min, 150°C y 150 min,
160°C y 120 min y 170°C y 60
min. (García Gamiz., Molinero Leyva,
2014)
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ESTUFA INCUBADORA

INCUBADORA DE 37°C INCUBADORA DE 30°C INCUBADORA DE 20°C

En biología, una incubadora es un dispositivo que sirve para mantener y hacer crecer cultivos
microbiológicos o cultivos celulares. La incubadora mantiene la temperatura, la humedad y otras
condiciones en grado óptimo, tales como el contenido de dióxido de carbono (CO2) y de oxígeno en
su atmósfera interior. (MANIATIS, 1982)

Estufas de cultivo. Equipo donde se mantienen los medios para el crecimiento de los organismos a
una determinada temperatura. En el laboratorio de microbiología se encuentran de: 20°C, 30°C,
37°C, 50°C.

REFRIGERADORA

Las neveras o las habitaciones refrigeradas se utilizan

principalmente para: 1.Conservar muestras y reactivos
químicos 2.Conservar los medios de cultivo
preparados o suplementos e ingredientes perecederos.

Las especificaciones que debe cumplir un equipo de

conservación en frio dependen del tipo de producto
que se vaya a almacenar.

(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)

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GABINETE MICROBIOLÓGICO
(Cabina extractora de gases o
Cámara de flujo laminar)
El gabinete limpio de flujo laminar
horizontal proporciona un ambiente de
trabajo libre de partículas para la
realización de procedimientos
sensibles estériles y/ o polvo. La
unidad está recomendado para uso en
el montaje de aparatos de ensayo
preparación de medios esterilidad
estéril, llenado estéril y procedimiento
industrial y biomédica relacionada.
(Jaramillo Maza,2015)
ESTUFA DE CULTIVO 110 V
La temperatura de refrigeración.
Equipo que incuba a los
organismos que crecen a una
temperatura de refrigeración
(a 110 v).
Estufa de cultivo son cabinas que
incorporan un sistema de
calentamiento y/o enfriamiento, con
el fin de mantener una determinada
temperatura en su interior dentro de
tolerancia marcados por el mét.
Analítico que se esté aplicando.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
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CUENTA GOTAS
El contador de colonias: Son
aparatos con una pantalla transparente
iluminada, que disponen de una lente
de gran tamaño y bajo aumento .Se
emplean para contarlas colonias
desarrolladas en las placas (sobre la
placa Petri) para evitar el doble
recuento.
Los contadores de colonias
Automáticos, requieren controles
frecuentes de exactitud; para ello, se
suelen utilizar placas Petri con
partículas insertadas en el plástico. EL
tamaño de las partículas debe disimular
el de las colonias en el agar, es
conveniente utilizar varias placas con
diferentes recuentos.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
BALANZA
Balanza
La balanza analítica entrega un alto
grado de precisión, pero que
requiere experiencia y destreza del
operador.
La balanza electrónica debe ser
verificada diariamente empleando
pesas calibradas. También deben
controlarse el cero y la tara antes de
cargar y después de descargar.
La frecuencia de la calibración
dependerá del tipo de balanza, de la
exactitud requerida.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
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BORTEX Y CENTRIFUGA BAÑO MARÍA O ENCUBADORA

CENTRIFUGA: Los baños de agua utilizados para incubar o pre-

calentar medios de cultivo a temperaturas
Es un método por el cual se pueden críticas, generalmente superiores a 37°C, deben
separar solidos de líquidos de diferente
disponer de un control de temperatura que
densidad. La cual el que produce
sedimentación de solidos o de las únicamente permita fluctuaciones mínimas.
partículas de mayor densidad.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
(Andrés Carrerizo, Guerra pelardo,
2014) En el laboratorio se puede utilizar el de la
derecha como incubadora para algunos
VORTEX: experimentos.
Homogeneizador de muestras, también
para tubos pero en este caso se
imprime la agitación en el fondo. El tubo
se sujeta con la mano mientras se
apoya en un dispositivo de goma que
vibra.

(García Bermejo, Colom Valiente,

Jaramillo Sánchez, 2003)

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OTROS EQUIPOS DE LABORATORIO:
Aguja o Mango de Kolle: sirve para
siembra de microorganismos. La aguja se
usa para cuando se recoge un organismo de
un medio sólido; la aguja siempre debe estar
estéril por lo que se pone al fuego del
mechero, al tratarse de una aleación de Ni y
Cr se calienta y enfría rápido [10-15]
segundos. Mientras que el aza es para
recoger los organismos de medios líquidos.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
Microscopios: Los microscopios ópticos,
normalmente están equipados con tres
objetivos (5x, 10x, 40x, y 90/100x), y dos
oculares (5x y 10x). (NF.Lightfoot, E.A.Maier,
2002)
Micropipeta Son aparatos ideales para la
dosificación efectiva de pequeños
volúmenes de líquido del orden de los
microlitos, se puede dosificar ultra micro
volúmenes (1,5 a 10 μL)
(Negroni Marta, 2009)
Licuadora: La función principal de
una licuadora es facilitarnos la elaboración
(moler) de muestras y homogenizarles.
Probetas: preparación de medios.
Pipetas graduadas: posee una escala
numerada que determina el volumen de su
capacidad. Las que se usan comúnmente
están calibradas 1/10, 1/100 o 1/100 mL.
Bombas de succión
Matraces
Lámina porta-cubre objeto
Tijeras, pinzas, bisturí
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
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Tubos de prueba: medios de cultivo en Frascos: útiles para análisis de agua o

forma líquida, deben estar bien sellados diluciones por altas concentraciones de
microorganismos en una muestra.
Tubos de diámetro pequeño: se colocan
dentro de los tubos de prueba para la (NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)
captación de gases (ej: CO2) de los
microorganismos.

Placas Petri: medios de cultivo en forma

sólida

(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)

Jarra anaeróbico: La atmosfera anaerobia se consigue al

introducir nitrógeno en presencia de un catalizador de platino. En
estas condiciones, el oxígeno del aire reacciona con el hidrogeno
de una mezcla de gases formada por H, CO2 y N, se produce agua
y se reduce el nivel de oxígeno atmosférico. (NF.Lightfoot,
E.A.Maier, 2002)

Termómetros: se utilizan en la microbiología para la medida y

registro de la temperatura. Los termómetros de bulbo relleno de
líquido pueden llegar a ser de una gran fiabilidad, presentando
una desviación al nominal de tan sólo 0,02°C. (NF.Lightfoot,
E.A.Maier, 2002)

PHmetros: La determinación del pH es un parámetro

fundamental en el control de calidad de la preparación de medios
de cultivo, ya que el pH influye en el comportamiento del cultivo.
(NF.Lightfoot, E.A.Maier, 2002)

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VI.CONCLUSIONES
Se concluye que el uso de los equipos y materiales del laboratorio de microbiología es de sumo cuidado, en
precaución de provocar fallas en el método de preparación de cultivos o de malograr algún equipo y/o material.

Todos los materiales son esenciales y cada uno tiene su propia función ya que ayudan a llevar a cabo de manera
eficiente investigaciones y experimentos que sean necesarios

Los procesos de esterilización se hacen a una temperatura de 121ºC siendo este eficiente en el Equipo
de autoclave.

Se concluye que Los equipos son específicos según el cultivo con el que se va a desarrollar la práctica.

V.RECOMENDACIONES
Se recomienda que mientras el usuario de estos materiales recién se encuentre en etapa de aprendizaje tenga
un supervisor. En caso de dudas, consultar con el profesor a cargo de laboratorio.

El lugar de trabajo debe estar siempre limpio y ordenado. Antes de comenzar cada práctica es conveniente
desinfectar la superficie de trabajo. Los desinfectantes más habituales para esto son la lejía y el alcohol (etanol
96°).

El trabajo en Microbiología se realiza mayoritariamente en la atmósfera que rodea a una llama de mechero
bunsen). Es importante trabajar con concentración y llevar cuidado para no provocar llamaradas ni sufrir
quemaduras. Hay que apagar siempre el mechero bunsen cuando se va a abandonar la mesa de trabajo.

·Al finalizar el trabajo del día, se debe recoger el material y limpiar la mesa sustituyendo el papel de filtro si es
necesario. El mantenimiento de la mesa de trabajo es responsabilidad de los alumnos/as durante todo el periodo
de prácticas.

VI.CUESTIONARIO

1. ¿Qué es la esterilización?

Es el proceso mediante el cual se alcanza la muerte de todas las formas de vida microbianas, incluyendo
bacterias y sus formas esporuladas altamente resistentes, hongos y sus esporos, y virus. Se entiende por
muerte, la pérdida irreversible de la capacidad reproductiva del microorganismo.
Se trata de un término absoluto, donde un objeto está estéril o no lo está, sin rangos intermedios.
Los procesos de esterilización y/o desinfección son diariamente llevados a cabo, no solamente en el
laboratorio, donde son fundamentales para evitar la contaminación de medios, cultivos, placas etc., sino
también en otros ámbitos tales como los hospitales, donde fallas en estos procedimientos aumentan la
morbimortalidad de los pacientes.
(Vignoli, R. 2002).

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2. Describa las principales formas de esterilización. Material y equipos.

Métodos de esterilización: según (Vignoli, R. 2002)

Métodos físicos: calor seco y calor húmedo.

Métodos químicos: líquidos y gaseosos (óxido de etileno).

Métodos físico-químico: vapor a baja temperatura (formaldehído) y gas plasma (peróxido de hidrógeno).

Método Físico:
Calor seco
Tipos de estufas o Poupinell
Estufa de convección por gravedad Está compuesta por una cámara revestida de resistencia eléctrica
en su pared interior y posee un canal u orificio de drenaje de aire en la pared superior. La circulación
depende de las corrientes producidas por la subida de la temperatura y el choque con las diferencias
de temperaturas. Por ello su proceso es más lento y menos uniforme.
Estufa de convección mecánica Este equipo posee un dispositivo que produce el rápido movimiento
de un volumen grande de aire caliente, facilitando la transmisión del calor directamente a la carga o
paquete. Se utiliza menos tiempo y ofrece un equilibrio térmico.
Calor húmedo o esterilización a vapor
Tipos de esterilizadores a vapor

Autoclaves de desplazamiento de gravedad o gravitacional

En estos equipos el aire es removido por gravedad, ya que el aire frío es más denso y tiende a salir
por un conducto colocado en la parte inferior de la cámara cuando el vapor es admitido. Este proceso
es muy lento y favorece la permanencia residual del aire. 85 Estos equipos varían en tamaño.
Esterilizadores de pre-vacío
Estos equipos tienen una bomba de vacío, o sistema de Venturi, para retirar el aire de la cámara
rápidamente en forma de pulsos, de modo que el vapor ingrese a la cámara a mayor velocidad,
mejorando la eficiencia del autoclave al eliminar las bolsas de aire e incrementar la velocidad del
proceso, incluso cuando operan a la misma temperatura que los esterilizadores de desplazamiento
de gravedad (121°C ó 132º C).
Autoclaves instantáneas (flash)
Son esterilizadores especiales de alta velocidad que generalmente los ubican entre los quirófanos
para procesar los instrumentos desempaquetados y para usos de extrema urgencia. Estos
esterilizadores operan a 134°C durante 3 ó 4 minutos. Este método de esterilización debe ser evitado,
ya que el material es esterilizado sin embalaje y el ciclo elimina el secado; por lo tanto, la
recontaminación del mismo se verá favorecida

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Fuente: (Vignoli, R. 2002)

Métodos químicos
Químicos líquidos
Glutaraldehído
Este desinfectante que puede ser ácido o alcalino, se utiliza como un desinfectante de alto nivel, y
puede usarse en una concentración del 2 % para fines de esterilización. La duración del tiempo de
contacto necesaria para esterilizar es de aproximadamente 10 horas. Tiene un amplio espectro de
actividad antimicrobiana, es activo ante la presencia de materia orgánica e inactiva rápidamente
los microorganismos, excepto las esporas. Fáciles de usar, son relativamente no corrosivos.
Peróxido de hidrógeno
Es un desinfectante muy poco utilizado por no existir comercialmente en el mercado. En general,
el peróxido de hidrógeno a una concentración del 6% es esporicida pero muy corrosivo cuando se
utiliza en instrumentos delicados y endoscopios de fibra óptica.
Formaldehído
El uso del formaldehído está dirigido a todos los materiales que se utilizan para hemodiálisis. La
esterilización se consigue a la concentración del 8% por 24 horas de inmersión. El formaldehído ha
sido cuestionado en la actualidad debido a su alta toxicidad.
Ácido peracético
Este agente que puede considerarse como un derivado del peróxido de hidrógeno manifiesta una
actividad microbiana conocida desde principios de siglo. Al respecto, hay que señalar la existencia
de formulaciones recomendadas de ácido peracético con peróxido de hidrógeno que, en
concentraciones altas (40%), es inflamable y que debe ser manipulado con extrema precaución,
pues constituye una solución muy corrosiva e inestable

Químicos gaseosos
Esterilización química por óxido de etileno
El óxido de etileno (en inglés, ETO), éter 1-2 epoxi-etano, es un agente 93 alquilante. El proceso por
el cual el óxido de etileno destruye los microorganismos es por alquilación: reemplazando el átomo
de hidrógeno en una molécula del organismo con un grupo alquilo, evitando que la célula realice su

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metabolismo o se reproduzca. Su presentación es líquida y se volatiliza formando un compuesto

gaseoso
Métodos Físico-Químicos
Gas de vapor de formaldehído (FO) o Vapor a baja temperatura con formaldehído (VBTF)
El gas de formaldehído (metanol o aldehído fórmico) es una alternativa a la esterilización por ETO
para la esterilización de equipos y materiales que no resisten altas temperaturas.
Plasma de peróxido de hidrógeno
Este método usa peróxido de hidrógeno como precursor de plasma. El plasma, que está considerado
como un cuarto estado de la materia, diferente al líquido, sólido y gaseoso, está compuesto por iones
reactivos, electrones y partículas atómicas neutras.

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VII.REVISIÓN BIBLIOGRAFICA
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PAGINA BLOGS:

o Equipos y Materiales de laboratorio - Acequilabs. Bogotá D.C – Colombia (2018). Acequilabs.

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https://acequilabs.com.co/cuenta-colonias-microbiologia/

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