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CUESTIONARIO DE HISTOLOGÍA I
DOCENTE:
ESTUDIANTE:
NIVEL:
1° “B”
Con el paso de los años, muchos descubrimientos de las ciencias naturales se relacionaron
con el desarrollo de nuevos métodos analíticos. Como ejemplos pueden nombrarse la
invención y el posterior desarrollo de la microscopia óptica, la microscopia electrónica, la
difracción de rayos X, el fraccionamiento celular, la inmunohistoquímica y la tecnología
del DNA. Es necesario contar con ciertos conocimientos sobre los principios
fundamentales de los métodos aplicados para comprender sus posibilidades y
limitaciones y para poder adoptar una postura crítica respecto de la interpretación de los
resultados alcanzados mediante los distintos métodos.
Los métodos histológicos puede clasificarse en dos grupos, a saber: los que se basan en
la observación directa de células y tejidos vivos, y los que analizan material muerto o
inanimado. En la zona gris intermedia se ubican las técnicas de aislamiento de los
componentes de células vivas mediante métodos de centrifugación
2. Realice un cuadro sinóptico con los tipos de microscopios y diga la utilidad de cada
uno de ellos
MICROSCOPIOS
ÓPTICOS
Un microscopio de
Utiliza un pinliole espacial
polarización usa luz polarizada
Los especímenes observados para eltminar a luz
para estudiar las muestras. A
al microscopio de campo Permite identificar células sin desenfocada o destellos de la
la luz polarizada, las ondas de
oscuro se ven blancos y teñir y resulta en particular útil lente en especímenes que son
luz vibran en una dirección; a
brillantes sobre un fondo para células vivas más gruesos que el plano
la luz normal, las ondas de luz
oscuro foca!. Su fuente luminosa es
vibran en direcciones
un rayo láser
aleatonas
MICROSCOPIOS
ELECTRÓNICOS
MICROSCOPIO DE BARRIDO
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE EFECTO TÚNEL (MBET) Y
DE TRANSMISIÓN DE BARRIDOS MICROSCOPIO DE FUERZA
ATÓMICA (MFA)
Es un instrumento que
aprovecha los fenómenos
Permite identificar células sin
físico-atómicos que se
teñir y resulta en particular útil
producen cuando un haz de
para células vivas una técnica
electrones suficientemente es un instrumento mecano-
de microscopía electrónica
acelerado colisiona con una óptico capaz de
capaz de producir imágenes de
muestra delgada detectar fuerzas del orden de
alta resolución de la superficie
convenientemente preparadas los nanonewtons
de una muestra utilizando las
especímenes observados al
interacciones electrón-
microscopio de campo oscuro
materia.s
se ven blancos y brillantes
sobre un fondo oscuro
3. ¿Cuáles son las técnicas o métodos para estudiar los tejidos? Explique brevemente
cada una de ellas
Para el estudio morfológico de las células, tejidos y órganos (histología), que permite
hacer una decripción de la estructura de sus componentes, se recurre a una sene de
métodos para conseguir preparados histológicos permanentes, llamados laminillas o
preparaciones, ya que los órganos son gruesos y es necesario obtener cortes finos,
suficientemente delgados para examinarse al microscopio óptico. Los cortes se efectúan
con un aparato denominado micrótomo, pero antes los tejidos deben pasar por diversos
tratamientos que constituyen la técnica histológica y que consiste en JO etapas:
Obtención de la muestra
Fijación
Deshidratación
Aclaramiento
Premclusión
Inclusión definitiva
Microromia
Adhesión de los cortes
Tinción
Montaje
4. Mencione los pasos de la Técnica de preparación de tejidos conocida como Parafina
1. Para poder examinar la muestra hay que infiltrarla con un medio de inclusión que
permita realizar cortes muy delgados, de 5 a 15 |Xm (1 micrómetro [Jim] equivale
a una milésima parte de un milímetro; véase el Cuadro 1.1).
2. Luego de la fijación, la muestra se lava y se deshidrata en una serie de soluciones
alcohólicas de concentración creciente hasta alcanzar alcohol al 100%.
3. En el paso siguiente, el aclarado, se utilizan solventes orgánicos como xileno o
tolueno, que son miscibles tanto en alcohol como en parafina, para extraer el
alcohol al 100% antes de la infiltración de la muestra con parafina fundida.
4. Cuando la parafina fundida se ha enfriado y endurecido, se empareja para formar
un bloque de tamaño adecuado. Este bloque, llamado “taco”, se coloca entonces
en una máquina cortadora especial, el micrótomo, que lo corta en rebanadas finas
con una cuchilla de acero.
5. Luego, los cortes obtenidos se montan sobre portaobjetos de vidrio a los que
antes se les ha añadido una pequeña cantidad de medio de montaje (albúmina,
pineno o resinas acrílicas) para que sirva de adhesivo.
5. De la FIJACION diga: objetivos , agentes químicos más utilizados y describa
brevemente este paso
Objetivos:
Agente químico: El fijador de uso más común es la formalina: una solución acuosa de
formaldehído al 37%, en diluciones variadas y en combinación con otras sustancias químicas
y amortiguadores, el glutaraldehido, el tetraóxido de osmio, etc
Descripción del paso: La fijación, en general obtenida mediante el empleo de sustancias
químicas individuales o mezclas de estas sustancias, conserva la estructura del tejido de forma
permanente para permitir el tratamiento ulterior. Las muestras tienen que sumergirse en el
fijador inmediatamente después de extraerse del organismo.
Agente químico: Estas sustancias son la parafina, que se utiliza en microscopía óptica, y las
resinas sintéticas, que se utilizan en microscopía electrónica
Descripción del paso: El agua que contiene el tejido se sustituye por una sustancia que le da
rigidez y evita que se deforme. Esto se logra introduciendo el material a procesar en alcoholes
de gradación creciente, lo que irá sustituyendo el agua por el alcohol. Después el alcohol es
sustituido por un solvente orgánico como es el xilol, la acetona, etc., para de esta forma
terminar incluyendo el tejido en una sustancia que es miscible en este solvente orgánico
7. ¿Cuál es el tercer paso para la preparación del tejido, cuál es su utilidad y cuáles son
los colorantes más usados?
Dado que los cortes en parafina son incoloros, la muestra todavía no está lista para su examen
bajo el microscopio óptico. Para colorear o teñir los cortes histológicos, la parafina debe
disolverse y extraerse, de nuevo con xileno o tolueno, y los tejidos deben rehidratarse
mediante el uso de una serie de alcoholes de concentración decreciente. Luego, el tejido
sobre los portaobjetos se tiñe con hematoxilina en agua. Como el colorante de contraste, la
eosina, es más soluble en alcohol que en agua, se vuelve a deshidratar la muestra en
soluciones alcohólicas de concentración creciente y después se tiñe con eosina en alcohol.
Luego de la coloración, la muestra se hace pasar por xileno o tolueno y se le coloca un medio
de montaje no acuoso antes de cubrirla con un cubreobjetos para lograr un preparado
permanente. Ejemplos: Hematoxilina, Eosina, tricómico de masson, tinción de orceína, tinción
de verhoeff, hematoxilina férrica, tinción de wright
8. ¿Qué técnica de coloración usamos para visualizar otras estructuras como las fibras
elásticas, fibras reticulares y tejidos ricos en lípidos?
Cuando se desea estudiar estos componentes pueden utilizarse otros métodos de tinción, en
su mayoría selectivos, que incluyen la coloración con orceína y fucsinaresorcina para el
material elástico y la impregnación argéntica para las fibras reticulares y las membranas
basales
Los colorantes se combinan en forma desigual con diversos componentes de células y tejidos,
hasta crear cambios relativos de densidad óptica y color, de tal manera que pueden
distinguirse unos de otros. En esto radica la importancia de las coloraciones en la técnica
histológica. Ejemplos: Hematoxilina, Eosina, tricómico de masson, tinción de orceína, tinción
de verhoeff, hematoxilina férrica, tinción de wright
12. ¿Cuáles el cuarto paso de la preparación de tejidos, que instrumento se usa para este
paso?
Una vez incluido el material se realiza el corte utilizando equipos especiales, los cuales
presentan una cuchilla que corta "lascas" del material. Para microscopía óptica se utilizan
cuchillas de acero y el equipo recibe el nombre de micrótomo. En microscopía electrónica se
utilizan los ultramicrótomos, que emplean cuchillas de vidrio o diamante.
BIBLIOGRAFÍA
Ross, M. H., & Pawlina, W. (2013). Histología. Texto y Atlas. 6ta. Edición. Ed. Médica
Panamericana.
Brüel, A., Christensen, E. I., Tranum-Jensen, J., Qvortrup, K., & Geneser, F.
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Sepúlveda Saavedra, J. (2013). Texto atlas de histología: biología celular y tisular.
McGraw Hill Mexico.