TINCIÓN DE WRIGHT

INTRODUCCIÓN
Para el estudio satisfactorio del frotis sanguíneos, es necesario colorearlos. En
la mayoría de los laboratorios los colorantes más empleados para la tinción
hematológica se basan en el de Romanowsky constituido fundamentalmente
con la mezcla de eosina (ácido) y azul de metileno (básico). Además se han
incorporado el empleo de derivados por oxidación del azul de metileno que se
conoce con el nombre de azures (A, B, C). Son los azures los responsables de la
coloración púrpura o roja de ciertas estructuras. Tanto la eosina como el azul
de metileno son muy sensibles a las variaciones de pH de las diferentes
estructuras celulares, de forma que las que tienen carácter básico fijan la
eosina mientras que las que poseen propiedades ácidas fijan principalmente el
azul de metileno. Esto explica que las estructuras basófilas se tiñan de color
azul mientras que los competente acidófilas adquieren un color rosado. La
diferente afinidad de ciertas granulaciones citoplasmáticas por dichos
colorantes permite clasificar a los leucocitos polimorfonucleares.

Esta coloración es conocida como policromática debido a que produce varios

colores. Es una solución de alcohol metílico de un colorante ácido (eosina) y
otro básico (azul de metileno). El alcohol sirve como un fijador del frotis
sanguíneo al portaobjetos. El amortiguador, que consiste en una solución
tamponada, mantiene el pH del colorante y favorece la mejor absorción por los
diferentes componentes celulares.

La tinción Wright es de gran trascendencia clínica ya que gracias a ella es

capaz de identificarse diversas estructuras en una célula así como la
morfología y en su caso patología celular no solo de las células del sistema
inmunológico sino de todas aquellas que componen la sangre ya sea en un
paciente sano o con un estado patológico

Materiales:
 Colorante de Wright: para 100 mL de alcohol metílico se requiere de
colorante de Wright (0.3g).

 Solución amortiguadora tamponada: en un litro de agua destilada se

agregan 3.76 g de hidrofosfato disódico (Na2HPO4* 2H20) y 2.10g de fosfato
de potasio dihidrogenado (KH2PO4). Mezclar todos los reactivos y guardar en
frasco de vidrio en lugar fresco. Ajustar el pH a 7,2 o en algunos casos se
utiliza solo agua destilada

 Rejilla horizontal o soporte de tinción.

 Materiales para extracción de muestra:

 Guantes
 Algodón
  Ligadura
 Tubo lila con EDTA
 Sistema Vacutainer
 Alcohol
 Marcador o Plumón

EQUIPO:

 Microscopio Óptico Binocular

MUESTRA:

 Sangre Periférica

EXTRACCIÓN DE LA MUESTRA SANGUÍNEA

Cuando el paciente esté cómodo echamos un vistazo a sus brazos para decidir
un sitio para la punción. El brazo debe ser extendido y lo relajado posible.

 Palpamos la vena para averiguar sus características (tamaño, elasticidad o

rigidez, determinar si de desplaza o no) y su curso.

 Limpiamos con alcohol la zona elegida para la punción.

 Colocamos el torniquete, este puede ayudarnos para decidir dónde pincha,

pedir al paciente de cerrar el puño para aumentar el volumen de sangre
intravenosa (Un tiempo de compresión demasiado largo causa la acumulación
de sangre y ciertas sustancias en la vena que pueden alterar el resultado de
algunas de las pruebas.)

 Tomamos la aguja con el bisel hacia arriba y puncionamos la piel muy suave y
rápido movimiento. Pedimos al paciente que abra la mano.

 Cuando hemos llenado y quitado el tubo, soltamos el torniquete y colocamos

una gaza o algodón sobre el sitio de la punción. Retiramos con cuidado la
aguja. Cuando ésta haya salido del brazo del paciente ejercemos presión en la
gaza para impedir que salga la sangre.

 Y Por último rotulamos adecuadamente el tubo

 PREPARACION DEL
FROTIS:
 Obtenida la muestra sanguínea procedemos a:
 Preparar todo nuestro material y equipos de trabajo.
 Limpiamos la lámina porta objeto para evitar grasas.
 Con un gotero o un capilar obtenemos la muestra, y procedemos a
colocar una gota sobre el porta objeto y con otra lámina (biselada)
realizamos el frotis de esta.
 El extendido debe tener cabeza, cuerpo y cola.
 Rotulamos la lámina
 Dejamos secar la lámina con el extendido sobre ella a medio
ambiente

TÉCNICA:
RESULTADOS:
 Los eritrocitos se observarán de color naranja o rosado.

 El citoplasma de los monocitos presentará una tonalidad azul grisácea con

gránulo rojizos bastante finos y sus vacuolas características. El citoplasma de
los linfocitos presentará varias tonalidades azules.
  Los núcleos de los linfocitos y neutrófilos aparecerán de color púrpura oscuro.
Los núcleos de los monocitos de color púrpura algo más claros (lila).

 Los gránulos de los eosinófilos son de color rojo-anaranjado intenso. Los

gránulos de los basófilos púrpura azulado muy oscuro. Los gránulos de los
neutrófilos se aprecian de color lila, bastante finos.

 Las plaquetas toman coloración violeta o púrpura.

OBSERVACIONES:
 Los tiempos varían de acuerdo a cada lote o tiempo de maduración del
colorante. De ahí que si los frotis recién teñidos resultan demasiado pálidos se
corrige aumentando el tiempo de tinción o disminuyendo el tiempo de lavado.

 De desconocer si la preparación del colorante Wright es la correcta utilizar la

técnica “ensayo-error” de tal forma que permitirá identificar que la
preparación ha sido la correcta.

 Durante la tinción el tampón fosfato controla el pH. Si en la preparación se

observa precipitados de colorante puede ser debido a varias causas: lavado
insuficiente al final del proceso, utilización de láminas sucias, mala distribución
del colorante.