PRÁCTICA N° 1

División Celular: Mitosis - Meiosis

Índice proliferativo Ki67

INTRODUCCIÓN

Ciclo celular.

El ciclo celular es un conjunto ordenado de eventos que conducen al crecimiento de la célula

y la división en dos células hijas. Las células que no están en división no se considera que
estén en el ciclo celular. Las células que se encuentran en el ciclo celular se denominan
«proliferantes» y las que se encuentran en fase G0 se llaman células quiescentes. El ciclo
celular se inicia en el instante en que aparece una nueva célula, descendiente de otra que se
divide, y termina en el momento en que dicha célula, por división subsiguiente, origina dos
nuevas células hijas. La célula puede encontrarse en dos estados claramente diferenciados:

 El estado de división, llamado fase M.

 El estado de no división o interfase. La célula realiza sus funciones específicas y, si está
destinada a avanzar a la división celular, realiza la duplicación de su ADN.

El estado M representa «la fase M», y agrupa a la mitosis (reparto de material genético
nuclear) y citocinesis (división del citoplasma).

Las etapas de la interfase son G1-S-G2. El estado G1 quiere decir "GAP 1"(Intervalo 1). El
estado S representa "Síntesis". Este es el estado cuando ocurre la replicación del ADN. El
estado G2 representa "GAP 2"(Intervalo 2).

MITOSIS

Las células que se reproducen por mitosis son las células eucariotas, que tienen un núcleo
verdadero y la totalidad de la información genética, en el caso de las células humanas, esta
información está contenida en 23 pares de cromosomas.

Durante la fase mitótica del ciclo celular entra en juego un elaborado aparato que asegura
que cada una de las células hijas reciba un juego completo de la información genética. Esto se
consigue mediante un mecanismo que distribuye una cromátide de cada cromosoma en cada
célula hija.

El proceso de mitosis es continuo, pero se distinguen cinco etapas: profase, prometafase,

metafase, anafase y telofase.

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MEIOSIS

La división especial que se produce en las llamadas células germinales que originarán los
gametos, llamada división meiótica, es el eje del proceso de diferenciación celular que
culmina en las células que podrán formar un nuevo individuo de la especie, pues es durante
esta doble división, con una sola duplicación del material genético, que se produce la
reducción del número cromosómico (de diploide a haploide), y el reordenamiento del
material genético procedente de cada uno de los progenitores.

La división meiótica, se produce en las células de las llamadas líneas germinales, en las que
sucede un proceso de diferenciación celular profunda, que genera en los machos los gametos
masculinos (espermatogénesis) y en los individuos hembra los gametos femeninos
(ovogénesis). Los gametos masculinos y femeninos se diferencian a un ritmo diferente. Si
bien la secuencia de los acontecimientos es la misma, su cronología es muy distinta.

La meiosis se caracteriza por presentar dos divisiones sucesivas del material hereditario
(Meiosis I y Meiosis II) precedidas por un único período S (de síntesis de ADN). La meiosis I
se conoce como división reduccional porque en ella se reduce el número de cromosomas de
diploide a haploide, asimismo es la etapa en la que se produce la recombinación genética.

La profase de la primera división meiótica es extremadamente larga pudiendo durar días (en
machos) hasta años (generalmente en hembras). Durante la profase I se produce el
apareamiento de los cromosomas homólogos y la recombinación entre cromátides
homólogas. Para su estudio, se ha dividido en base a la morfología del núcleo celular en
varias etapas: LEPTOTENO, CIGOTENO, PAQUITENO, DIPLOTENO y DIACINESIS.

En metafase I los cromosomas homólogos apareados (bivalentes) se disponen en el plano

ecuatorial.

En anafase I los cromosomas homólogos, previamente recombinados, migran a polos

opuestos.

En telofase I los dos conjuntos haploides de cromosomas se hallan agrupados en los polos
opuestos de la célula.

Después se produce la citocinesis, seguida de una interfase muy corta. Se inicia luego la
segunda división meiótica. Esta se asemeja a una división mitótica convencional con la
excepción de cada célula posee solamente un cromosoma del par homólogo ya recombinado.
Se produce la profase II seguida de la metafase II en la que los cromosomas poseen sus
cromátidas unidas únicamente a nivel del centrómero, ya que la adhesividad a nivel de brazos
se perdió en anafase I. Durante la anafase II los centrómeros se escinden, cada uno de ellos
transportando una única cromátide hacia un polo de la célula, es posible que ambas
cromátides hermanas que se acaban de separar no sean idénticas.
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La telofase II, como la telofase I, comienza cuando los cromosomas alcanzan los polos
opuestos de la célula, luego comienzan a desenrollarse, se forman nuevas membranas
nucleares alrededor de cada grupo de cromosomas y se produce la citocinesis.

En la espermatogénesis, cada espermatogonia diploide genera cuatro espermatozoides

haploides. En la ovogénesis se forman un óvulo haploide y tres cuerpos polares haploides
meióticamente a partir de una oogonia diploide.

OBJETIVOS

1. Reconocer las diferentes fases de la mitosis normales y anormales encontradas en

preparados histológicos de carcinoma de cuello uterino y carcinoma de pulmón
2. Reconocer las células en mitosis con el marcador de inmunohistoquímica Ki-67 y
establecer el índice de proliferación de una neoplasia.
3. Identificar en figuras, las distintas fases de la mitosis en células del meristemo de la
raíz de la cebolla y las fases de la meiosis en testículos de ortópteros, señalando sus
características.
4. Comparar la mitosis y la meiosis, en relación a sus procesos y a su significado
biológico.

MATERIAL Y MÉTODO

Materiales

- Microscopio de luz.
- Láminas de preparados histológicos humanos.
- Fotografías de láminas de preparados de testículo.

Método

- Observe las láminas con objetivo 40x, reconozca el tejido; elija zonas donde se aprecie
las distintas fases de la mitosis, recorra el campo hasta ubicar cada una de ellas.
Esquematice sus observaciones.

- Realizar el conteo del número de mitosis en 10 campos de gran aumento (400x).

- Observe las láminas testículo humano, identifique las fases iniciales de la meiosis en el
epitelio seminífero. Esquematice sus observaciones.
- Observe las láminas de tejido procesado con el marcador de inmunohistoquímica Ki-
67 identifique las células en mitosis y establezca el índice de proliferación de la
neoplasia.
- Observe las imágenes de mitosis en raíz de cebolla, identifique las fases.
- Observe las fotografías de meiosis en testículo de ortóptero, identifique las fases.

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TAREAS A REALIZAR
1.- ¿Qué tipos de tejido se ha observado?
2.- Graficar y señalar todas la fases de la mitosis observadas.
3.- Anotar el número de mitosis en 10 campos de gran aumento (400X).
4.- Graficar y señalar las mitosis anormales.
5.- Explicar qué es el marcador de inmunohistoquímica Ki-67.
6.- Graficar un preparado histológico con el Ki-67.
7.- ¿Que significa índice de proliferación de una neoplasia?
8.- ¿Cuál es el índice proliferativo de buen pronóstico de un carcinoma de mama?
9.- ¿Cuál es el índice proliferativo de mal pronóstico de un carcinoma de mama?
10.- En el siguiente esquema que representa células del meristemo de la raíz de cebolla,
colocar en orden secuencial las fases de la división celular con las células señaladas. Indicar
en cada fase 02 características distintivas.

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11.- En las siguientes imágenes de la espermatogénesis en Chorthippus jucundus (especie de
ortóptero), explicar los eventos de mayor trascendencia en cada una de las fases de la
meiosis observadas.

Profase I. Paquiteno medio Profase I. Diploteno tardío-diacinesis

Intercambio de fragmentos entre Se hacen visibles los quiasmas, cesa la
cromatides homologas. síntesis de ARN, desaparece la membrana
nuclear y el nucléolo.

Metafase I
Anafase I
Los cromosomas se alinean en el
Los cromosomas recombinados migran
ecuador formando una doble placa
hacia los polos y como consecuencia
ecuatorial.
desaparece el uso.

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 Telofase I Intercinesis/Profase II
Los cromosaomas recombinados llegan a Se prepara a la célula para la segunda
los polos, se forma el anillo de clivaje, división pero el ADN no se duplica.
reaparece la membrana nuclear y se
forman las dos células con n cromosomas
cada una.

12.- Compare la mitosis y la meiosis:

MITOSIS MEIOSIS
Duplica orgánulos y material Duplica orgánulos y material
INTERFASE
genético. genético.
Los cromosomas homólogos se
Los centriolos migran a los unen longitudinalmente, hay
PROFASE
polos opuestos. recombinación entre cromátidas
hermanas
Desaparece la membrana
PROMETAFASE Desaparece la membrana nuclear.
nuclear.

METAFASE Se forma la placa ecuatorial. Se forma una placa ecuatorial doble.

Las cromatides migran a los Los cromosomas recombinados

ANAFASE
polos. migran a los polos.

TELOFASE Células iguales a la madre. Células con ADN recombinado.

13.- Explicar las características de cada fase y el proceso de transformación del cromosoma
durante el ciclo celular a partir del siguiente gráfico.

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14.- Explicar los mecanismos moleculares implicados en la formación y segregación de los
cromosomas durante la mitosis. Cohesinas, separinas, securinas.

15.- Explicar los mecanismos moleculares implicados en la formación y segregación de los

cromosomas durante la meiosis. Shugosinas

16.- Analizar el proceso de Regulación del ciclo celular en eucariotas. Reloj molecular.
Estímulos externos. Activación de la división celular. Frenos a la división celular.

17.- Elabore un esquema de las interacciones moleculares del ciclo celular.

18.- Explicar la función de los Telómeros, el proceso de Apoptosis, y la relación entre

Regulación y cáncer.
Telomero : parte distal de un cromosaoma que evita que este se adiera a otro.
Apoptosis: muerte celular programada genéticamente no hay daño tisular.
Regulacio y cáncer : la regulación es el proceso mediante el cual se contrala el tipo ya la
cantidad de divisiones de una determinada celula, si este proceso falla la celula estaría en
constante división incontrolada lo que generaría una neoplasia (cáncer)

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19.- Explicar el significado biológico de la mitosis y la meiosis.
Mitosis : se da en células somaticas permite crecimiento y regeneración de tejidos.
Meiosis : se da en células germinativas permite la variabilidad genética y la evolución.