Laboratorio de Biología General

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE

SAN MARCOS
ESCUELA DE ESTUDIOS GENERALES

Laboratorio de Biología General

Práctica de Laboratorio Nº4

PROTEÍNAS Y ÁCIDOS NUCLEICOS

INTEGRANTES:
Vergara Nunjar, Jennifer Renata
Lalangui, Cárdenas Anthony
Moyano Arocutipa, María Fernanda
Rivas Amado, Raul
Serrano Angulo, Ángel Saul
PROFESORES:
Sánchez Sotomayor, Héctor
Roel Barahona, Indira
Opisso Mejía, Jasmín
Oliveros Rodríguez, Nilda

Fecha de realización: 30-04-2018

Fecha de entrega: 07-04-2018

2018 – I

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ÍNDICE

Introducción .......................................................................................................................3
Marco Teórico ...................................................................................................................4
Resultados y fundamentos .................................................................................................5
Conclusiones......................................................................................................................7
Cuestionario .......................................................................................................................8
Referencias Bibliográficas ...............................................................................................10

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I. Introducción
Proteínas
Las proteínas son sustancias orgánicas nitrogenadas complejas, que se encuentran en las
células de todos los organismos. Están íntimamente relacionadas con la estructura
celular, así como la actividad química de la misma. La arquitectura de las membranas
celulares está constituida por proteínas junto a otros componentes, la estructura de los
pelos, uñas, pezuñas, plumas y colágeno se debe también a las proteínas, así como
enzimas, algunas hormonas, pigmentos respiratorios, anticuerpos, venenos, etc. (Flores ,
2008)

Propiedades Generales:
- Entre los disolventes generales de las proteínas figuran el agua, soluciones
salinas, ácidos y bases diluidas, con excepción de algunos albuminoides
- Las proteínas dan soluciones coloidales

Ácidos Nucleicos
Los ácidos nucleicos son las biomoléculas portadoras de la información genética. Son
biopolímeros, de elevado peso molecular, formados por otras subunidades estructurales
o monómeros, denominados Nucleótidos. (ESTRUCTURA Y PROPIEDADES DE
LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS, 2018)
Desde un punto de vista químico, los ácidos nucleicos son macromoléculas formadas
por polímeros lineales de nucleótidos, unidos por enlaces éster de fosfato, sin
periodicidad aparente.
De acuerdo a la composición química, se clasifican en ADN y ARN que actúan en el
citoplasma. Están formados por largas cadenas de nucleótidos enlazados entre sí por un
grupo fosfato. El grado de polimerización puede llegar a ser altísimo, siendo las
moléculas más grandes que se conocen, con moléculas constituidas por centenares de
millones de nucleótidos en una sola estructura covalente. (ESTRUCTURA Y
PROPIEDADES DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS, 2018)
De la misma manera que las proteínas son polímeros lineales aperiódicos de
aminoácidos, los ácidos nucleicos lo son de nucleótidos. La aperiodicidad de la
secuencia de nucleótidos implica la existencia de información. De hecho, sabemos que
los ácidos nucleicos constituyen el depósito de información de todas las secuencias de
aminoácidos de todas las proteínas de la célula

Propiedades generales:

- Desnaturalización: capacidad que posee la molécula de separar sus dos cadenas.

- Reabsorción: emparejamiento de las cadenas tras quitar el calor al que son
sometidas para la desnaturalización.
- Hibridación: emparejamiento entre cadenas complementarias de origen
diferente.

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II. Marco Teórico:

A) Desnaturalización de proteínas:
Se entiende por desnaturalización de una proteína la pérdida de la conformación
tridimensional nativa de la misma, pérdida que suele ir acompañada de un descenso en
la solubilidad (las cadenas poli peptídicas de la proteína desnaturalizada se agregan unas
a otras y forman un precipitado que se separa de la disolución).
Durante el proceso de desnaturalización se rompen las interacciones débiles que
mantienen estable la conformación pero se mantienen los enlaces covalentes del
esqueleto poli peptídico, es decir, se pierden las estructuras secundaria, terciaria y, en su
caso, cuaternaria, pero permanece intacta la secuencia de aminoácidos.
(ESTABILIDAD Y DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS, 2014)

La desnaturalización puede ser provocada por:

- Aumento de temperatura.- Los aumentos de temperatura provocan una mayor
agitación molecular que hace que las interacciones débiles que mantienen estable la
conformación de la proteína terminen por ceder con la consiguiente desnaturalización.
- Alteración del pH.- Estas alteraciones causan variación en el grado de ionización
19 de distintos grupos funcionales (carboxilo, amino, hidroxilo, etc.) implicados en
interacciones débiles que estabilizan la conformación. Estas variaciones provocan la
rotura de dichas interacciones (sobre todo enlaces iónicos y también puentes de
hidrógeno) y por lo tanto la desnaturalización (debido a ello son tan importantes los
tampones que mantienen estable el pH de los fluidos biológicos).
El proceso de desnaturalización, si se lleva a cabo en condiciones suaves (variaciones
moderadas y graduales de temperatura o pH), es reversible: la proteína puede recuperar
su conformación tridimensional nativa si se restituyen las condiciones iniciales. Este
proceso recibe el nombre de re naturalización. (ESTABILIDAD Y
DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS, 2014)

B) Extracción de ADN:
Los genes son las unidades de almacenamiento de la información genética, segmentos
de ADN que contienen la información sobre cómo deben funcionar las células del
organismo. Tienen elementos que indican de dónde a dónde se ha de leer y su contenido
determina la composición de las proteínas que se han de formar. (EXTRACCÍON DE
ADN, 2012)

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III. Resultados y fundamentos:

EXPERIMENTO 1

- Clara de huevo
- Un vaso de vidrio
- Alcohol

Como antes se ha mencionado, al desnaturalizar la proteína de la ovoalbúmina se pierde

la estructura tridimensional que se tenía al principio, pero se conserva la estructura
primaria (estructura de aminoácidos), esto mismo ocurriría si se aumenta la temperatura.

Cuando se realizó el experimento, al verter el contenido de la clara y alcohol, se puede

observar una clara diferencia entre los materiales. Se produce una especie de capa con la
clara del huevo. Esto se debe principalmente gracias al solvente agregado, el alcohol.

EXPERIMENTO 2

- Dos vasos de vidrio

- 10 ml de vinagre
- 10 ml de jugo de limón
- 50 ml de leche
- Cucharita de plástico

En ambos vasos se ve la coagulación, desnaturalización de la albúmina por cambios

químicos.
Pero en el vaso del limón (ácido cítrico) ocurre más rápido que en el vaso que contiene
vinagre (ácido acético)
A este proceso también se le conoce como la acidificación del PH de la leche,
precipitación de la caseína.

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EXPERIMENTO 3

-Detergente
-Sal
-Agua
-Alcohol (Etanol 96° Bien frío)
-Medio plátano
-3 fresas

Se escogieron fresas para este experimento debido a que son la fruta con la que se
obtiene más cantidad de ADN y, además, son octoploides, es decir, tienen ocho juegos
idénticos de cromosomas (las células humanas son diploides, es decir, tienen dos juegos
de cromosomas a excepción de los gametos). Estas circunstancias hacen que el ADN de
la fresa sea fácil de extraer y de ver. (El ADN de las fresas, s.f.)

En cuanto a los componentes presentes en la solución de extracción: el jabón ayuda a

disolver las membranas celulares y se añade la sal para romper las cadenas de proteínas
que unen los ácidos nucleicos liberando las cadenas de ADN. Finalmente, se utiliza el
alcohol porque el ADN es insoluble y menos si éste está, como resultado se puede
observar el ADN que vendría a ser la sustancia blanquecina que observaremos en
nuestra mezcla. (El ADN de las fresas, s.f.)

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IV. Conclusiones:

• Con los experimentos n°1(huevo y alcohol) y el n°2(leche y limón/leche y vinagre) se

pudo apreciar la desnaturalización de las proteínas principalmente de la ovoalbúmina y
caseína percatándonos que los agentes que provocan este proceso pueden ser físicos;
calor, químicos; detergente, disolventes orgánicos, pH, etc.
Los cambios que se dan pueden ser en la viscosidad (en el caso del huevo), cambios de
aspecto; textura, sabor, color (el caso de la leche)
• En el experimento n° 3 (extracción del ADN de la fresa y el plátano) que para poder
llegar a precipitar el material genético de estas frutas se llegó varias a una solución y en
varios pasos principalmente a la solución con detergente se pudo disolver las membrana
celular y nuclear para así aislar el material genético y gracias al alcohol frío se pudo
precipitar el material genético por una diferencia de densidades siendo el ADN de
menor densidad.
El producto filamentoso obtenido de la extracción no es ADN puro ya que,
entremezclado con él, hay fragmentos de ARN. Si se añadiera proteasas se podría
extraer el ADN más puro.

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V. Cuestionario:

1. Explicar el fundamento de los experimentos de desnaturalización.

Se puede entender al proceso de desnaturalización de proteínas como el cambio en la

conformación natural debido a diversos factores, en el caso de los experimentos se
puede observar que
 Experimento 1:
El alcohol va desnaturalizando las proteínas del huevo, que se encuentran
principalmente en la clara. Cuando las proteínas se desnaturalizan pierden parte de su
estructura molecular y por eso su aspecto cambia. Casi inmediatamente observamos que
la clara se va volviendo blanca y sólida igual que ocurre cuando cocinamos un huevo.
Y es que el calor también desnaturaliza las proteínas.
A su vez, el huevo se va deshidratando, el agua sale de sus tejidos y el alcohol entra.
Este mismo método de deshidratación se utiliza en medicina para estudiar muestras de
tejidos en el microscopio. Y hay más, porque el alcohol también disuelve los lípidos, las
grasas, que se encuentran sobre todo en la yema pero que también son constituyentes
junto con las proteínas de las membranas celulares.
 Experimento 2:
La mezcla compuesta de detergente, sal y agua (en si los componentes del detergente)
es suficientemente fuerte para desnaturalizar las proteínas presentes en las células de la
fruta (plátano y fresa) debido a esto se observa que los componentes internos de la
célula y salen a flote, observando el resultado una mezcla con varias capas.
 Experimento 3:
En este caso se da la desnaturalización por cambio de pH, se puede observar que al
reaccionar la caseína ( proteína de la leche) con el ácido cítrico y el acético se “corta” ,
es decir que la caseína pierde estructuras, dando como resultado una especie de grumos
que se pueden observar en la superficie.

2. ¿Qué aplicaciones tiene el proceso de coagulación?

Este proceso tiene varias aplicaciones lo hacen para agregárselas a alguna vacuna o
pastilla lo que hace que les quita su propósito para uno nuevo, un ejemplo: la creación
de la vacuna contra el H1N1 y se necesitaran proteínas y minerales desnaturalizados
para que el paciente no muera de agotamiento ya que el sistema inmunológico intentara
ayudarse con los anticuerpos que fueron inyectados y con la proteína ayudara a
recobrar fuerza o recobrar sangre cual sea el caso.

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3. Mediante un esquema explicar la acción del detergente en la extracción del

ADN

PASOS DE LA ACCIÓN FRESA + SOLUCIÓN PLATANO + SOLUCIÓN

DEL DETERGENTE
El detergente tiene una
1° zona apolar y otra polar
entonces se puede mezclar
con el agua
Se mezcla la solución más
2° el zumo de fresa y el
detergente actúa
disolviendo las membranas
de la célula tanto nuclear
como la celular
Y para evitar que el ADN
de la fresa se disuelva en la
mezcla de agua y
3° detergente se incorpora
alcohol a 4° C para que por
diferencia de densidades el
material genético precipite
en la parte de arriba de la
mezcla heterogénea.
El detergente tiene una
zona apolar y otra polar
entonces se puede mezclar
con el agua
Se mezcla la solución más
el zumo de plátano y el
detergente actúa
disolviendo las membranas
de la célula tanto nuclear
como la celular
Y para evitar que el ADN
de la fresa se disuelva en la
mezcla de agua y
detergente se incorpora
alcohol a 4° C para que por
diferencia de densidades el
material genético precipite
en la parte de arriba de la
mezcla heterogénea.

4. ¿Qué función cumple la sal en la extracción del ADN?

Para poder extraer el ADN de una célula, primero deben retirarse las membranas y
proteínas asociadas, y después, de manera física separar el ADN. El sodio puede estar
dentro de muchos de los pasos para lograr esta meta.
El ADN cromosómico precipitado y los restos celulares se pueden retirar del ADN
plásmido soluble en una solución por medio de la centrifugación, un proceso donde gira
a alta velocidad que causa que los sólidos entren en el fondo de un tubo como un
perdigón, lo que permite que se separe el líquido arriba con el ADN plásmido.
(Wasserman,2018)

El sodio es un ion cargado positivamente. En una solución de cloruro de sodio, la mesa

de sal, por ejemplo, la molécula de cloruro de sodio se separa en iones de sodio e iones
de cloro. El ADN, por otro lado, tiene altas cargas negativas. La carga altamente
negativa de la molécula de ADN es neutralizada por los iones de sodio positivos en la
solución. Esta neutralización de cargas negativas de ADN permite que se precipite en
alcohol. Sin la sal, el ADN permanece cargado negativamente y estará en la parte
acuosa de la solución. (Wasserman,2018)

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VIII.

Referencias Bibliográficas
Cataluña E A. (30 de Abril de 2018).El ADN de las Fresas Obtenido de
http://labvirtual.iciq.es/es/expcas/ladn-de-les-maduixes/?pdf=742
Barcelona, U. A. (30 de Abril de 2018). EXTRACCIÓN DE DNA. (2018). 6th ed. [ebook] . Obtenido de
http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%ADnez%20Mart%
C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf
Caldas, U. D. (30 de Abril de 2018). [ebook]. Obtenido de EXTRACCÍON DE ADN. (2012). 1st ed. :
https://www.academia.edu/17019047/INFORME_EXTRACCION_DE_ADN
México., U. N. (30 de Abril de 2018). ESTABILIDAD Y DESNATURALIZACIÓN DE PROTEÍNAS. (2014). 3rd
ed. [ebook]. Obtenido de http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/Proteinas2-
Desnaturalizacion_25708.pdf
Valencia, U. d. (30 de Abril de 2018). ESTRUCTURA Y PROPIEDADES DE LOS ÁCIDOS NUCLÉICOS. (2018).
3rd ed. [ebook] . Obtenido de https://www.uv.es/tunon/pdf_doc/AcidosNucleicos_veronica.pdf
Wasserman, R. (05 de Mayo de 2018). ¿Por qué se utiliza sodio en la extracción de ADN? Obtenido de
https://www.geniolandia.com/13180675/por-que-se-utiliza-sodio-en-la-extraccion-de-adn

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