Luis E Almagro

Laboratorio Síntesis Orgánica
Facultad de Química
Universidad de La Habana
TRABAJO DE DIPLOMA
Síntesis y caracterización
de nuevos sistemas híbridos del tipo
esteroide- [60]fullereno
Autor: Luis Enmanuel Almagro Rodríguez

Tutores: Msc. Alberto Ruiz Reyes
Dra. Julieta Coro Bermello
Asesora científica: Dra. Margarita Suárez Navarro
La Habana, 2012
Esta Tesis
va dedicada a mi familia y
a todo el que contribuyó
a mi formación profesional
“La gratitud,
como ciertas flores,
no se da en la altura y mejor reverdece
en la tierra buena de los humildes”.
José J. Martí Pérez

Resumen
Resumen
Desde el descubrimiento de los fullerenos, y su preparación a gran escala se han realizado
numerosas investigaciones encaminadas a su transformación y al estudio de sus propiedades
para su uso en la ciencia de los materiales y la química médica. De todos los fullerenos el más
estudiado ha sido el C60, debido a su elevada simetría y mayor abundancia. La principal
limitación para el uso de este alótropo del carbono en sistemas biológicos se centra en su
completa insolubilidad en agua y poca solubilidad en la mayoría de los disolventes orgánicos,
además de formar fácilmente agregados moleculares, lo que incrementa su insolubilidad. Por
este motivo, se le ha prestado vital atención a la funcionalización del C60 con el objetivo de
aumentar su solubilidad. De esta manera se han obtenido diversos compuestos con interesantes
propiedades químicas y biológicas. Entre los derivados fullerénicos más relevantes se
encuentran las fulleropirrolidinas acopladas a moléculas biológicamente activas, que se
obtienen mediante reacciones de cicloadición 1,3-dipolar.
Por otra parte, los esteroides son un grupo de sustancias estructuralmente relacionadas con una
amplia gama de actividad biológica que poseen la habilidad de cruzar la barrera hemato-
encefálica y constituyen el principal componente de las biomembranas, por lo que
consecuentemente se puede predecir que la formación de moléculas híbridas fullereno-
esteroide den lugar a compuestos con una mayor solubilidad y biocompatibilidad en
comparación con las de sus precursores.
En este trabajo se reporta la obtención de novedosos derivados de la Epiandrosterona cloro-

formil sustituidos preparados mediante la reacción de Vilsmeier-Haack. Estos se obtienen
como sólidos amorfos, con buenos rendimientos y constituyen los intermediarios sintéticos
para la obtención de nuevos sistemas híbridos. Estos derivados fueron utilizados para la
síntesis de fulleropirrolidinas mediante la reacción de Prato, con la obtención de dos nuevas
parejas de diasteroisómeros tipo N-metilandrostanpirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno. Todos
los productos obtenidos fueron caracterizados por espectroscopía RMN-1H, RMN-13C y
espectrometría de masas.
Abstract
Abstract
Since the discovery of fullerenes, and large-scale preparation there have been many
investigations to further processing and study of their properties for use in materials science
and medicinal chemistry. Of all the more fullerenes has been studied C60, due to its high
symmetry and high abundance. The main limitation for using this allotrope of carbon in
biological systems focus on their complete insolubility in water and poor solubility in most
organic solvents, besides easily forming molecular aggregates, which increases its insolubility.
For this reason, it has received critical attention to the functionalization of C60 with the aim of
increasing its solubility. This will have obtained several compounds with interesting chemical
and biological properties. Among the derivatives of [60]fullerene most relevant are the
fulleropyrrolidine coupled to biologically active molecules, which are obtained by reaction of
1,3-dipolar cycloaddition.
Moreover, the steroids are a group of structurally related substances with a wide range of
biological activity, possess the ability to cross the blood-brain barrier and are the main
component of biomembranes, so that consequently can be predicted that formation fullerene-
steroids hybrid molecules result in compounds with greater solubility and biocompatibility
compared with those of their precursors.This thesis reports on the synthesis of novel
derivatives of the chlorine-formyl substituted Epiandrosterone prepared by Vilsmeier-Haack
reactions. These are obtained as amorphous solids, with good yields and are used as synthetic
intermediates for the preparation of new hybrid systems. These derivatives were used to
synthesized fulleropyrrolidine by following Prato’s procedure, which had been obtaining as
two new pairs of diastereoisomers N-methylandrostanpyrrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullerenes. All
products were characterized by 1H NMR, 13C NMR spectroscopy and mass spectrometry.
Abreviaturas
CCD Cromatografía de Capa Delgada

o-DCB orto-diclorobenceno
DCC Dicilohexilcarbodimida
DCM Diclorometano
DHEA Deshidroepiandrosterona
1,4-DHPs 1,4-Dihidropiridinas
DMAP N,N-dimetilamino piridina
col. Colaboradores
ESI Electrosprayionization
GABA Ácido γ-aminobutírico
HPLC High pressure liquid chromatography
IUPAC International Union of Pure and Applied Chemistry
Ih Icosahedra
MALDI Ionización mediante desorción por láser asistida por matriz (siglas en ingles)
Me Metilo
min. Minuto
PAs Área bajo los picos
PPP Pentose Phosphate Pathway
Rf Factor de retención
RMN Resonancia Magnética Nuclear
t.f Temperatura de fusión
TFA Ácido triflúor acético
TOF Tiempo de vuelo (siglas en ingles)
tR Tiempo de retención
TMS Trimetilsilano
uma Unidad de masa
VH Vilsmeier-Haack
Índice
Índice
Introducción 1
Capítulo 1: Revisión Bibliográfica 3
1.1 Esteroides. Aspectos estructurales e importancia biológica 5
1.1.1 Epiandrosterona 7
1.2 Funcionalización de esteroides. La reacción de Vilsmeier-Haack 9
1.3 Fullerenos 13
1.3.1 Reactividad del [60] fullereno. Propiedades químico-biológicas de sus derivados 14
1.4 Híbridos esteroide-fullereno 16
1.5 Preparación de furrelopirrolidinas. Reacción de cicloadición [3+2] 18
1.6 Consideraciones generales 21
Capítulo 2: Parte Experimental 23
2.1 Reactivos y disolventes 23
2.1.1 Preparación de reactivos 23
2.2 Equipos y condiciones de registro de espectros 23
2.3 Cromatografía 24
2.4 Síntesis de intermediarios esteroidales 24
2.4.1 Síntesis de 5α-androstan-3β-formiato-17-ona (58) 24
2.4.2 Síntesis de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona (59) 25
2.4.3 Síntesis de 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-androstan-16-en (60) 25
2.4.4 Síntesis de 5α-androstan-3,17-diona (61) 26
2.4.5 Síntesis de 3-cloro-2-formil-5α-androstan-2-en-17-ona (62) 26
2.5 Síntesis de N-metil-2’-pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno sustituidos
(63, 64, 65, 66) 27
2.5.1 N-metil-2’(R)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-16-en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’]
[60] fullereno (63) 27
2.5.2 N-metil-2’(S)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-16-en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’]
[60] fullereno (64) 28
2.5.3 N-metil-2’(R)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-
ona)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (65) 28
2.5.4 N-metil-2’(S)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-
ona)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (66) 28
Capitulo 3: Discusión de Resultados 29
3.1 Obtención de los derivados esteroidales 30
3.1.1 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3β-formiato-17-ona (58) 30
3.1.2 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona (59) 32
3.1.3 Síntesis y caracterización de 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-androstan-16-en
(60) 33
3.1.4 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3,17-diona (61) 36
Índice
3.1.5 Síntesis de 3-cloro-2-formil-5α-androstan-2-en-17-ona (62) 37
3.2 Obtención de los híbridos fullereno-esteroide 40
3.2.1 Síntesis y caracterización de N-metil-2’(R/S)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-
16-en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (63, 64) 40
3.2.2 Síntesis y caracterización de N-metil-2’(R/S)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-ona)
pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (65, 66) 44
3.3 Consideraciones finales 49
Conclusiones 50
Recomendaciones 51
Bibliografía 52
Anexos 60
Introducción
Introducción
Uno de los más fascinantes desafíos para la química orgánica moderna lo constituye la
búsqueda de compuestos que exhiban novedosas propiedades tanto físicas, químicas como
biológicas. Este reto puede ser abordado de diversas maneras: en primer lugar y de forma
tradicional, se han buscado nuevas entidades químicas en la naturaleza, ya sea en la flora o en
la fauna, tanto en la terrestre como, en la marina. Otra posibilidad es la transformación de
estas entidades en otras por medio de modificaciones químicas para mejorar o potenciar la
actividad en cuestión. Una última opción a reseñar, consiste en tomar estas estructuras
presentes en la naturaleza o sus derivados y utilizarlas como moldes de anclaje de otras
entidades también de origen natural (dígase aminoácidos, carbohidratos, esteroides, alcaloides,
entre otros) o de origen sintético, generando de este modo gran diversidad molecular, lo que se
enmarca dentro de la síntesis de sistemas híbridos o conjugados.
Los esteroides han representado excelentes precursores a la hora de abordar la preparación de

sistemas híbridos o conjugados, debido fundamentalmente a sus características de fácil
accesibilidad, quiralidad, lipofilicidad y rigidez, combinado en un simple sistema alifático.
Dentro de esta gran familia de compuestos tenemos la Epiandrosterona, una hormona
esteroidal con actividad anabólica débil encontrada en casi todos los mamíferos, la que ha
constituido un importante intermediario en la obtención de interesantes sistemas moleculares
híbridos, como son los péptido-esteroide, donde el fragmento androstánico se emplea para
imponer cierta rigidez conformacional a determinadas secuencia peptídicas, o en sistemas
heterociclo-esteroide, con difundida actividad como antiepiléptico, antiprotozoario,
antitumoral, entre otras.
Por otra parte, desde el descubrimiento en 1985 de la estructura de los fullerenos, así como la
determinación de sus propiedades químicas y biológicas, estos han adquirido gran importancia
para la química médica y la ciencia de materiales. La accesibilidad de los fullerenos, basada
principalmente en el C60, en cantidades macroscópicas mediante su preparación a escala
multigramo, abrió la oportunidad sin precedentes al desarrollo de una química
“tridimensional” de moléculas de carbono esféricas y polifuncionales; lo que los ha hecho ser
reconocidos como novedosos bloques de construcción en ingeniería molecular, introduciendo
nuevas propiedades químicas, geométricas y electrónicas. Sin embargo, la principal limitación
se centra en su completa insolubilidad en agua y poca solubilidad en la mayoría de los
1
Introducción
disolventes orgánicos, además de formar fácilmente agregados moleculares, incrementando su

insolubilidad.
El desarrollo de la química de los fullerenos con el objetivo de realizar su funcionalización,

tanto para la búsqueda de derivados apropiados para investigaciones biológicas como para sus
aplicaciones en la ciencia de materiales, es de interés actual. Por el contrario, pese a la
multitud de derivados fullerénicos acoplados a relevantes entidades funcionales que han sido
descritos, la síntesis y aplicaciones de híbridos fullereno-esteroide ha sido poco estudiada. En
consecuencia, parte del esfuerzo por desarrollar este tipo de sistemas moleculares está dirigido
a la búsqueda de nuevos procedimientos sintéticos que permitan el acoplamiento eficiente de
fullerenos a esteroides, lo que constituye el problema científico que aborda esta Tesis.
Como hipótesis de trabajo nos planteamos que es posible obtener nuevos sistemas híbridos en
base a fullerenos por su reacción con esteroides convenientemente funcionalizados que
permita el desarrollo de estructuras novedosas con potencial actividad biológica.
De esta manera se plantea como objetivo general emplear metodologías que permitan la
unión de los fullerenos con los esteroides de manera eficiente para la obtención de los nuevos
sistemas híbridos.
Y como objetivos específicos:
1. Sintetizar derivados esteroidales cloro-formil sustituidos en diferentes posiciones en los

anillos del esqueleto esteroidal de la Epiandrosterona empleando la reacción de
Vilsmeier-Haack.
2. Obtener nuevos híbridos tipo fullereno-esteroide mediante el acoplamiento de los

derivados esteroidales cloro formilados al C60, empleando la reacción de Prato.
3. Caracterizar todos los compuestos sintetizados.
2
Revisión Bibliográfica
Capítulo 1: Revisión Bibliográfica

Uno de los más fascinantes desafíos para la química orgánica moderna lo constituye el diseño
de estrategias capaces de proporcionar tanto diversidad estructural como complejidad
molecular, las cuales permitan su uso para el estudio de importantes procesos biológicos, o
para el desarrollo de sistemas supra- y nanomoleculares.1 En este sentido, la síntesis orgánica
ha jugado un papel primordial, y dentro de sus principales objetivos ha estado la obtención de
compuestos que exhiban novedosas propiedades tanto físicas, químicas como biológicas.2 El
desarrollo de este tipo de compuestos se ha potenciado con la obtención de estructuras
híbridas, estrategia que consiste en la síntesis de compuestos constituidos por diversas
entidades quimicas que al ensamblarse generan moléculas funcionales en las que las
características de sus constituyentes son moduladas, amplificadas u originan totalmente
3
nuevas propiedades con relación a sus precursores.
La Naturaleza ha jugado un papel primordial como fuente de inspiración en la búsqueda y

obtención de este tipo de moléculas, ya que muchos productos naturales biológicamente
activos son derivados de la biosíntesis mixta, lo que involucra la integración de diferentes
rutas biosintéticas para generar estructuras de increíble diversidad y complejidad, o concluir
en sencillas conexiones covalentes entre componentes provenientes de diferentes partes.4 La
Estricnina (A), un complejo del tipo indol-alcaloide, el cual es derivado del Triptófano y un
precursor monoterpénico,4 así como glicoproteínas, clorofila (B), antibióticos e.j. la
Vancomicina (C), Vitamina B-12, flavonoides y glicósidos esteroidales e.j. la Dioscina (D),
por mencionar algunos, son ejemplos de productos naturales provenientes de la biosíntesis
mixta, en los cuales varios segmentos de la molécula tienen diferente origen biosintético, pero
están enlazados covalentemente en una sola entidad funcional. (Figura 1.1)
3
Figura 1.1: Productos naturales obtenidos mediante biosíntesis mixta.
Los atributos presentes en este tipo de compuestos; como son las inusuales propiedades que
exhiben cuando los diferentes segmentos moleculares que le dieron origen actúan
cooperativamente para controlar y modular la conformación, el reconocimiento, la
comunicación, el transporte y la solubilidad en diferentes procesos biológicos, podría llevar a
la idea de generar novedosas entidades moleculares por la combinación racional de dos o más
clases diferentes de compuestos tanto de origen natural como de origen sintético,3 que
permitan su aplicación en química médica.
En los últimos cinco años el diseño de tales entidades ha recibido una creciente atención y han
sido referidas en la literatura también como quimeras moleculares y/o conjugados.5,6,7,8La
posibilidad de generar sistemas híbridos con gran diversidad estructural es prácticamente
ilimitada, y la explotación de la potencialidad de estas moléculas, donde se seleccionan
adecuadamente sus componentes para dar lugar a compuestos con mejores propiedades, ha
permitido el rápido descubrimiento de híbridos moleculares biológicamente activos para un
amplio rango de áreas terapéuticas y en un período de tiempo razonable.
Dentro de esta importante temática, los esteroides representan excelentes moldes a la hora de
abordar la preparación de sistemas híbridos o conjugados; debido fundamentalmente a sus
características de fácil accesibilidad y rigidez, existiendo ejemplos en la bibliografía de su
empleo en el desarrollo de sistemas péptido-esteroide,9 carbohidrato-esteroide10 o heterociclo-
esteroide,11 entre otros, con diversas aplicaciones.
4
1.1 Esteroides. Aspectos estructurales e importancia biológica

Los esteroides constituyen una numerosa familia de compuestos estructuralmente
relacionados, ampliamente distribuidos en la naturaleza y encontrados fundamentalmente en la
fracción lipídica de plantas y animales. Son importantes reguladores biológicos que casi
siempre muestran variables efectos fisiológicos cuando son administrados en organismos
vivos.12 Adicionalmente, poseen una amplia aplicación en la práctica médica, debido
principalmente a su amplia gama de actividad biológica e interacción especifica con los
receptores hormonales,13 así como su habilidad de cruzar la barrera hematoencefálica,14 lo que
los hace ser utilizados como poderosos transportadores biológicos en el diseño de fármacos.
Esta importante familia de compuestos, presentan una estructura policíclica básica que consta
de diecisiete átomos de carbono, dispuestos en un esqueleto condensado de cuatro anillos
completamente saturados (A, B, C y D), llamado 2’,3’-ciclopentanoperhidrofenantreno, a lo
que se denomina núcleo esteroidal o gonano, siendo uno de ellos de cinco miembros y los
restantes de seis. La distribución en el espacio es prácticamente plana, en la que los grupos que
se encuentran por encima del plano del sistema anular están orientados hacia la cara β, y los
que están por debajo de este plano se orientan hacia la cara α como se puede apreciar en la
Figura1.2. 12,15
Figura 1.2: Representación espacial del núcleo esteroidal y sistema de numeración.
Los esteroides se clasifican fundamentalmente de dos maneras: la primera, de acuerdo a la

cantidad de átomos de carbono que conforman el esqueleto base (Tabla 1.1), y la segunda,
teniendo en cuenta sus propiedades farmacológicas: en corticosteroides y hormonas sexuales.
5
Tabla 1.1: Clasificación de las diferentes familias de esteroides, según el número de átomos de carbono
presentes en la cadena lateral y sistema de numeración.
No. de carbonos R No. carbonos en R Nombre
-H
C18 (con H remplazando - Estrano
Me-19)
C19 -H - Androstano
C21 2 Pregnano
C24 5 Colano
C27 8 Colestano
C28 9 Ergostano
C29 10 Estigmastano
El esqueleto esteroidal es una fuente accesible de rigidez, quiralidad y lipofilicidad,

combinado en un simple sistema alifático. Tanto la gran rigidez de estos sistemas como la
presencia de los metilos Me-18 y Me-19 que introducen impedimento estérico en la cara β,
influyen en la demostrada estereoselectividad de las reacciones químicas que se realizan en el
esqueleto esteroidal.
La mayoría de los esteroides naturales presentan funciones oxigenadas en su estructura, las

cuales permiten la funcionalización de su esqueleto con el objetivo de buscar nuevas
moléculas con un amplio espectro de propiedades químico-biológicas.15 Un grupo funcional
ampliamente encontrado en los esteroides naturales es el hidroxilo unido al C-3, el cual puede
ser transformado a funciones cetona por oxidación o reemplazado por otros grupos funcionales
a través de activación. Otras funciones químicas de gran utilidad, son las cetonas en los
carbonos C-3, C-6, C-12 y C-17 de diferentes familias de esteroides, las que pueden ser
transformadas fácilmente a diferentes tipos de grupos funcionales. Estas características
químicas de fácil funcionalización en diferentes posiciones y orientaciones, axial y/o
6
ecuatorial, son la base de muchas de las funciones biológicas mostradas por los compuestos
esteroidales, lo que los ha hecho atractivos como plataformas o puntos de partida en el diseño
y síntesis de sistemas híbridos.3,6-7,9,16
Las aplicaciones biológicas de los esteroides se deben principalmente a su función como

hormonas sexuales en mamíferos ej. compuestos 4 y 5, así como de regulación de otros
procesos metabólicos como los mediados por el colesterol 1, los corticosteroides 3, y los
ácidos biliares 2. La diversidad de agentes terapéuticos y agroquímicos de naturaleza
esteroidal que se comercializa en la actualidad se debe en gran medida a la disponibilidad de
esteroides naturales que se utilizan como materias primas en la industria químico-
farmacéutica.15 Estos pueden obtenerse con facilidad tanto de desechos de la producción
animal ej. Colesterol 1 y ácidos biliares 2, como de fuentes vegetales ej. fitosteroles y
sapogeninas como la Hecogenina 6 y de hongos ej. Ergosterol 7, por lo que se dispone de una
amplia variedad de esqueletos esteroidales para su empleo en la química sintética. (Figura
1.3)
Figura 1.3: Representación espacial de esteroides naturales con diversas propiedades biológicas
1.1.1 Epiandrosterona
Dentro de los esteroides se encuentra el 3β-hidroxi-5α-androstan-17-ona, conocido como
Epiandrosterona (8, Figura 1.3), una hormona esteroidal perteneciente al grupo del androstano
con actividad anabólica débil, presente en casi todos los mamíferos.17 Es un metabolito natural
de la deshidroepiandrosterona (DHEA) obtenida vía enzimática por medio de la 5α-reductasa,
y en la industria se puede aislar del proceso de síntesis de Oximetolona a partir de
Hecogenina.18
7
Estudios realizados han demostrado que la Epiandrosterona inhibe la ruta de la fosfato pentosa
(PPP, del inglés pentose phosphate pathway) y dilata los vasos sanguíneos aislados pre-
contraídos por despolarización† parcial. Estos resultados sugieren que este metabolito puede
actuar como antagonista tipo-L del calcio,19 similar a las 1,4-dihidropiridinas (1,4-DHPs)
bloqueadoras de canales de Ca2+, empleadas como fármacos en el tratamiento de
enfermedades cardiovasculares.
Este compuesto y sus derivados son ampliamente empleados como intermediarios en la

síntesis de una amplia gama de compuestos con actividad biológica, como son los
aminoesteroides de la serie 5α-androstano con un amplio espectro de acción farmacológica
como antiarrítmico, hipotensivo, antinflamatorio y antifúngico;20 así como la obtención de
sistemas heterociclo-esteroides tipo piridinas, tiofenos, tiazoles y pirazoles, con potencial
actividad como antiepiléptico, antiprotozoario, antitumorales, entre otras.11 (Figura 1.4)
Figura 1.4: Derivados de la Epiandrosterona: aminoesteroides (9) y heterociclo-esteroides (10).
Por otra parte, la conjugación de cadenas peptídicas bioactivas a esteroides se ha convertido en

los últimos años en una metodología exitosa para reproducir el efecto biológico de
determinadas proteínas y péptidos naturales. En este sentido Banerjee y col.9 desarrollaron una
metodología para la construcción de una pequeña librería de estructuras hibridas tipo
esteroide-espirocetal-péptido, para el diseño de antagonistas de las ανβ3 integrinas, basados en
miméticos de la secuencia tripeptídica RGD (Arg-Gly-Asp)‡, con el objetivo de ser utilizados

como agentes terapéuticos para el tratamiento del cáncer, la osteoporosis y otras
enfermedades. Para ello, utilizan como clave de la síntesis de este tipo de quimeras un
reordenamiento oxidativo de alquilenol éteres a lactonas y ésteres espirocetálicos, tomando
†
La despolarización es una disminución del valor absoluto del potencial de membrana en una célula.
‡
RGD (Arg-Gly-Asp) ‘secuencia activa’ de la familia de proteínas α β integrinas, responsables del proceso de
ν 3
adhesión celular y que tiene un rol fundamental en el proceso de reproducción descontrolada de las células
cancerígenas.
8
como materia prima la Epiandrosterona, la cual se somete a varios pasos de reacciones hasta
obtener los híbridos del tipo 11. (Figura 1.5)
Figura 1.5: Híbridos péptido-esteroide antagonista de las integrinas.

Como se ha visto hasta ahora, resulta muy interesante desarrollar metodologías eficientes y
sencillas para la conjugación de esteroides a otras moléculas capaces de modular sus
propiedades químicas y biológicas, o producir entidades moleculares con características o
funciones totalmente nuevas. En este caso, la reacción de Vilsmeier-Haack es capaz de
introducir grupos funcionales muy reactivos en una gran variedad de sustratos, lo que permite
su aplicación en la obtención de híbridos esteroidales.
1.2 Funcionalización de esteroides. La reacción de Vilsmeier-Haack

La estructura de los esteroides permite la obtención de entidades moleculares con las más
diversas funciones químicas. La introducción de grupos formilo en diversas posiciones del
esqueleto esteroidal se puede realizar empleando variadas metodologías. En este aspecto, la
reacción de Vilsmeier-Haack ha sido históricamente un tópico de gran interés para los
químicos orgánicos desde su descubrimiento en 1927,21 y en la actualidad continua siendo de
considerable atracción22, producto de su simplicidad y conveniencia en la formilación de
sustratos electrónicamente enriquecidos.
Es bien conocido que haluros de ácido inorgánicos reaccionan con amidas disustituidas para
formar complejos activos (sales de halometilenimino), popularmente referidos como reactivo
de Vilsmeier, el cual ha probado su eficacia para la introducción del grupo formilo en
compuestos aromáticos21 y heteroaromáticos23 activados. Sin embargo, se encuentra también
que hay una gran variedad de sustratos orgánicos, en los que se incluyen alquenos, grupos
metilos y metilenos activados, enamidas, hidrazonas, azinas, compuestos diazo-alifáticos, así
como grupos carbonilos enolizables y sus correspondientes derivados,24 que reaccionan
eficientemente con este reactivo para producir interesantes derivados con alto potencial
sintético.22 Todo esto ha traído como consecuencia el empleo del reactivo de VH en variedad
9
de reacciones como: clorinación,25 cloroformilación,26 aromatización,27 ciclización,28 entre

otras, donde las condiciones de reacción (temperatura, disolventes y cantidad equivalente de
los reaccionantes)29 determinan el producto de formación. Ejemplo de ello lo constituye la
reacción de enamidas esteroidales 12 con la sal de clorometilenimino, reportada por Barthakur
y col.30 en el que mediante un estricto control de la temperatura obtienen el producto de
ciclización 14 a 62 0C y exceso de sal reaccionante, o el producto formilado 13 a temperaturas
más bajas; lo que constituye a su vez un eficiente método de funcionalización de esteroides.
(Esquema 1.1).
Esquema 1.1: Reacción de enamidas esteroidales con el reactivo VH

Por otra parte, el reactivo de VH además de reaccionar con carbonos nucleófilos, también lo
hace con oxígenos y nitrógenos nucleofílicos. Por ejemplo, durante una síntesis multietapas de
un producto, varios grupos son inicialmente protegidos y finalmente desprotegidos, luego de
haberse completado la reacción deseada. La formilación de alcoholes es una de las reacciones
más útiles para la protección de grupos hidroxilos en síntesis orgánica. En este sentido,
Srivastava y col.31 propusieron un método simple y quimioselectivo para la formilación de
sec-esteroles 15 a esteres de formilo 16 por tratamiento con el reactivo de VH. (Esquema 1.2)
Esquema 1.2: Protección de grupos hidroxilos mediante reacción de VH en sec-esteroles.
10
El reactivo de VH es fácilmente preparado por la reacción in situ de una formamida N,N-

disustituida, generalmente N,N-dimetilformamida 17, con un haluro de ácido el más utilizado
oxicloruro de fósforo 18. De esta forma el oxígeno carbonílico de la DMF ataca al POCl3, para
formar el aducto de tipo 19, que se reorganiza posteriormente para dar la sal
clorometilenimino correspondiente 20.21,32 (Esquema 1.3).
Esquema 1.3: Mecanismo de formación del reactivo de VH.
La reacción de compuestos carbonílicos y sus derivados con este reactivo resulta altamente
versátil, ya que se pueden obtener intermediarios multifuncionales potenciales para
aplicaciones en la síntesis orgánica.24,33 La reacción con cetonas enolizables 21 muestra la
formación de sales clorovinilimino tipo 22, las cuales con una hidrólisis básica producen
enaldehídos β-cloro sustituidos 23 (Esquema 1.4).22 Se ha mostrado que el reactivo de
Vilsmeier bajo condiciones moderadas, es capaz de convertir un grupo carbonilo enolizable en
la correspondiente funcionalización clorovinílica, sin que se produzcan subsecuentes imino-
alquilaciones.34
Esquema 1.4: Reacción de cloro-formilación en cetonas enolizables
En este tipo de reacciones con cetonas acíclicas simples, los rendimientos son de moderados a
buenos para la obtención de β-cloroacrilaldehídos. La reacción es llevada a cabo bajo
condiciones suaves, con la adición lenta de la cetona al reactivo en DMF o cloroformo, entre
0-5 0C de temperatura de trabajo, utilizando generalmente un exceso de reactivo (~ 5 eq.). A
altas temperaturas se producen múltiples imino-alquilaciones y se obtienen mezclas de
reacciones complejas.24 En el caso de cetonas cíclicas los resultados son similares,22 y se han
obtenido por este método importantes intermediarios sintéticos para la obtención de
conjugados novedosos.35,36
11
Para sustratos esteroidales con grupos carbonilo, Sciaky y Pallini 37 estudiaron su reacción con
el reactivo VH obteniendo los derivados β-cloroenaldehídos correspondientes. Así, para el
acetato de 5β-androstan-17β-ol-3-ona 24 se obtiene un producto que presenta un grupo
formilo en la posición cuatro del anillo esteroidal 25, mientras que la reacción con su isómero
5α 26 bajo condiciones similares da el producto con el grupo formilo en posición dos 27
(Tabla 1.2, Entradas 1 y 2). De forma similar, la reacción con el acetato de la
Deshidroepiandrosterona 28 también da el producto cloro-formilado 29 (Entrada 3).
Tabla 1.2: Cloro-formilación de derivados esteroidales

Entrada Sustrato Producto
Estos derivados esteroidales poseen un patrón de sustitución muy reactivo, los que constituyen
intermediarios sintéticos útiles en la obtención de sistemas híbridos, como por ejemplo
heterociclo-esteroide que contienen anillos fusionados al esqueleto esteroidal. En
consecuencia, la fusión de heterociclos al esqueleto esteroidal en diferentes posiciones o su
anclaje de forma exocíclica, en ocasiones lleva a cambios en sus características fisiológicas, lo
que se traduce en la aparición de nuevos comportamientos biológicos interesantes. Siguiendo
esta línea, esteroides heterocíclicos con anillos de pirazol o pirimidínico fusionados en
diferentes posiciones de anillos esteroidales son dotados con interesante actividad biológica,38
por lo que su preparación y posterior transformación son de gran importancia. En este sentido,
Siddiqui, y col.39 reportan la obtención de este tipo de híbridos esteroidales. Estos fueron
sintetizados mediante la utilización del intermediario cloroformil sustituido (29, Tabla 1.2)
obtenido en estudios anteriores,37 con rendimiento del 62 %. Este derivado se hace reaccionar
con diferentes tipos de hidracinas y de ureas para producir finalmente los correspondientes
esteroides heterocíclicos 30 y 31. (Figura 1.6).
12
Figura 1.6: Heterociclos fusionados a esteroides tipo Androsten [17,16-d]

pirazoles y Androsten [17,16-e] pirimidinas.
1.3 Fullerenos
Desde el descubrimiento de la estructura de los fullerenos,40 así como el conocimiento de sus
propiedades químicas y biológicas estos han adquirido gran importancia para la química
médica y la ciencia de materiales, lo que ha dado como resultado la obtención de diversos
compuestos denominados organofullerenos, entre los que se encuentran las fulleropirrolidinas
acopladas a varios tipos de moléculas, incluyéndose esteroides.
Los fullerenos son moléculas altamente simétricas en forma de jaulas cerradas, constituidas
exclusivamente por átomos de carbono41 (Figura 1.7). Forman parte de la familia del grafito y
del diamante; sin embargo, mientras que éstos poseen estructuras reticulares que se extienden
indefinidamente, los fullerenos poseen una estructura molecular, es decir, son moléculas
discretas formadas por un número definido de átomos de carbono, constituyendo así la tercera
forma alotrópica conocida del carbono como elemento químico.
Figura 1.7: Estructura de algunos fullerenos importantes
El fullereno más estudiado es el C60 32, según IUPAC (C60-Ih)[5,6]fullereno, que está
constituido por 30 dobles enlaces carbono-carbono, semejando un icosaedro formado con 12
pentágonos y 20 hexágonos. Aunque inicialmente se consideró una molécula
“superaromática” ya que los átomos de carbono en el fullereno están todos conjugados, más
tarde se encontró que poseen una estructura poliénica, con todos los enlaces localizados en los
anillos de seis eslabones. Esto hace que la estructura pueda describirse como una esfera
construida a partir de subunidades de [5]radialeno y 1,3,5-ciclohexatrieno fusionados, dando
13
lugar a que todos los átomos de la esfera sean equivalentes. La difracción de rayos-X
determinó que existen dos tipos de enlace en su estructura: enlace [6,6] o “enlaces cortos”
(1.38 Å) en la unión entre dos hexágonos y enlaces [5,6] o “enlaces largos” (1.45 Å) en la
unión entre un hexágono y un pentágono, por lo que el diámetro de la molécula es de 7.10 ±
0.07 Å.42 (Figura 1.8)
El C60 fullereno es insoluble o muy poco soluble en la

mayoría de los disolventes y forma muy fácilmente
agregados moleculares, incrementando su insolubilidad.43
Se ha descrito como un sólido de van der Waals, es decir,
un sólido con débiles interacciones intermoleculares en el
que las moléculas esféricas se encuentran rotando Figura 1.8:Representación
esquemática del (C60-Ih)
libremente a temperatura ambiente. Este hecho justifica su
baja solubilidad, ya que la energía requerida para romper las interacciones del disolvente no se
compensa con la interacción entre el soluto y el disolvente.44 Por este motivo, se le ha prestado
mucha atención a la funcionalización del C60 con el objetivo de aumentar su solubilidad, lo
que ha dado como resultado la obtención de diversos compuestos que muestran interesantes
propiedades químicas y biológicas.41,45,46
1.3.1 Reactividad del [60] fullereno. Propiedades químico-biológicas de sus derivados

La accesibilidad de los fullerenos en cantidades macroscópicas mediante su preparación a
escala multigramo,47 abrió la oportunidad sin precedentes al desarrollo de una química
“tridimensional” de moléculas de carbono esféricas y polifuncionales lo que los ha hecho ser
reconocidos como novedosos bloques de construcción en ingeniería molecular, con nuevas
propiedades químicas, geométricas y electrónicas.
El desarrollo de la química de los fullerenos se ha basado principalmente en el C60, debido a su

mayor abundancia. Además, la adición de una molécula orgánica conduce a la formación de
un único isómero debido a su elevada simetría, lo que no ocurre con el C70 33 y los fullerenos
superiores 34 y 35.45 (Ver Figura 1.7)
La química del fullereno C60 se caracteriza por la ausencia de átomos de hidrógeno en su

estructura, por consiguiente, las reacciones de sustitución características de muchos
compuestos orgánicos aromáticos, no son posibles en los fullerenos. Esto conduce a tres tipos
básicos de transformaciones químicas sobre la molécula de C60: las reacciones de transferencia
14
electrónica, las reacciones de apertura y degradación, y las reacciones de adición. El estudio

de estas últimas indica que la reactividad de los fullerenos es análoga a la de una poliolefina
electrodeficiente con los pares electrónicos muy localizados, lo que trae como consecuencia su
reacción con diferentes tipos de nucleófilos y que sus enlaces [6,6] actúen como buenos
dienófilos.46 Así, el C60 experimenta una variedad de cicloadiciones (Esquema 1.5), con
formación de cicloaductos estables, los cuales han sido ampliamente reportados en la
literatura.41,45,46
Esquema 1.5: Reacciones de cicloadición típicas del fullereno C60
Entre las reacciones de cicloadición que resultan de mayor interés están: la ciclopropanación,
las cicloadiciones [4 + 2] como la de Diels-Alder, y las cicloadiciones [3 + 2] del tipo 1,3-
dipolares, dado que los fullerenos funcionalizados que han sido obtenidos a partir de ellas
presentan interesantes propiedades biológicas. De este modo se hace posible la introducción
de grupos funcionales hidrofílicos, los que incrementan grandemente la solubilidad del C60 en
disolventes polares, haciéndolo más biocompatible y reduciendo sus efectos tóxicos en medios
biológicos48. En este sentido, investigaciones biológicas de varios derivados fullerénicos
solubles en agua han revelado selectivos y potentes efectos farmacológicos en órganos,
células, enzimas y ácidos nucleicos, lo que potencia sus futuras aplicaciones biomédicas.41
Así, se ha encontrado que derivados de fullerenos del tipo 36 son capaces de escindir el ADN
y que además pueden ser utilizados en la terapia fotodinámica, ambas aplicaciones están
basadas en la misma propiedad, la escisión fotoinducida.49 Por otra parte, Mashino y col.50
identificaron que los derivados del tipo 37 constituyen eficientes inhibidores de la VIH-
15
transcriptasa inversa, siendo más activos que el Nevirapine,§ mostrando adicionalmente

actividad contra las ARN-polimerasas del virus de la Hepatitis C. (Figura 1.9).
Adicionalmente, la habilidad del C60 y sus derivados de secuestrar un gran número de

radicales por molécula51 indica su gran actividad antioxidante, lo que los hace potencialmente
utilizables como fármacos en la prevención o tratamiento de patologías en las que el daño
oxidativo está implicado: dígase enfermedades cardiovasculares52 y neurodegenerativas.53 Por
ejemplo, el ácido trismalónico54 (38, Figura 1.9) constituye el compuesto líder dentro de un
programa de desarrollo de fármacos, el cual muestra actividad contra un espectro de
desórdenes neurodegenerativos en modelos animales, que replican muchas de las
enfermedades encontradas en humanos, en las que se incluyen Esclerosis Amiotrópica Lateral
y Enfermedad de Parkinson, las cuales tienen actualmente una gran incidencia en la población
mundial.
Figura 1.9: Derivados fullerénicos con propiedades biológicas.
1.4 Híbridos esteroide-fullereno

Como se ha visto hasta ahora, uno de los aspectos más importantes para la química de los
fullerenos es la búsqueda de métodos que permitan obtener derivados de estas moléculas
apropiados para investigaciones biológicas. En este sentido, producto de que los esteroides
constituyen un componente principal de las biomembranas y presentar una amplia gama de
actividad biológica, el acoplamiento de estos a unidades de fullerenos pudiera provocar
cambios en las propiedades físico-químicas de estos últimos, aumentando su solubilidad y
biocompatibilidad.6
§
Nevirapine: Inhibidor no nucleósido de la Reverso Transcriptasa del VIH-1, perteneciente al grupo de las
benzodiazepinas, utilizado como poderoso agente retroviral.
16
Sin embargo, pese a la multitud de derivados

fullerénicos acoplados a relevantes entidades
funcionales encontrados en la literatura científica,
muy pocas publicaciones han sido desarrolladas
basadas en conjugados del tipo fullereno-
esteroides. Uno de los primeros reportes en esta
área fue realizado por Shinkai y col.55 que
involucra la síntesis de bisaductos
esteroide[60]fullereno quirales tipo 39, mediante
el empleo de moldes esteroidales funcionalizados.
Figura 1.10: Bisaductos esteroide-C60 quirales.
(Figura 1.10).
Entre los reportes más interesantes se encuentran aductos esteroides-fullerenos del tipo 40
anclados directamente al anillo esteroidal (Figura 1.11) preparados a través de la reacción de
Diles-Alder, a los cuales se les evaluaron su influencia en la actividad de la Ca2+-ATPasa del
retículo sarcoplasmático y su efecto en la supervivencia de la células cancerígenas A549 del
adenocarcinoma pulmonar humano, mostrando que inhibe la proliferación de este tipo de
células de cáncer de pulmón.56 Así, se han realizado investigaciones para llevar a cabo la
síntesis de novedosos híbridos fullerenoporfirinas 41, en los cuales el fullereno y el anillo
porfirínico se acoplan a través de diferentes sistemas, en los que se incluyen los esteroides.57
Estos híbridos son diseñados en el contexto de la aplicación en la terapia fotodinámica en la
lucha contra el cáncer.
Figura 1.11: Conjugados fullereno-esteroidales obtenidos mediante reacciones de cicloadición
La síntesis de derivados esteroidales de fullerenos en los cuales, el colesterol o sus derivados

están enlazados a través de enlaces éster, amida o éter del anillo pirrolidínico de fullerenos, ha
sido bien descrita.58 La entidad esteroidal puede conferir solubilidad, útil en componentes de
17
fluidos biológicos y/o portadores farmacológicamente aceptables, y pueden también afectar la

biodistribución del fullereno, lo que hace a estos derivados útiles en el diagnóstico y
tratamiento, o manejo de enfermedades. En este sentido, Bjelakovic y col.59 sintetizaron
derivados de fulleropirrolidinas incorporando el ácido γ-amino butírico (GABA por sus siglas
en ingles) y su correspondiente esterol mediante el protocolo de Prato,60 obteniendo cuatro
nuevos derivados conjugados covalentes esteroide-fullereno del tipo 43 con rendimientos entre
43 y 58%. Estudios antioxidantes in vitro mostraron actividad antioxidante de dos a tres veces
más alta para los productos obtenidos que la reportada por el fullereno, y valores similares a
los reportados para un antioxidante patrón como el BHT (2,6-di-tert-butyl-4-methylphenol).
(Esquema 1.6).
Esquema 1.6: Conjugados fullereno-esteroidales con propiedades antioxidantes. Reactivos y condiciones de reacción:
i) C60, CH2O, tolueno, reflujo por 15 min., 40%; ii) TFA/DCM, temperatura ambiente por 1 hora,
cuant.; iii) esterol, DCC, DMAP/DCM, benceno, temperatura ambiente por 36h.
1.5 Preparación de furrelopirrolidinas. Reacción de cicloadición [3+2]

Las cicloadiciones [3+2] se han utilizado frecuentemente para funcionalizar el C60. Se han
reportado adiciones de alquil y arilazidas,61 óxidos de nitrilo,62 iluros de pirazolidino,63
nitronas,64 entre otras. Dentro de estas reacciones, las que han dado lugar a un mayor número
de derivados son la adición de iluros de azometino y la adición de diazocompuestos.65
La cicloadición 1,3-dipolar entre iluros de azometino y C60 fue introducida inicialmente por
Maggini y Prato60 para la obtención de fulleropirrolidinas del tipo 47, (Esquema 1.7). Este se
ha convertido en uno de los métodos más empleados para la funcionalización de fullerenos
como consecuencia de su alta selectividad, ya que la cicloadición ocurre siempre en el enlace
[6,6] del C60, así como el amplio rango de grupos funcionales que permite utilizar.
18
Esquema 1.7: Obtención de fulleropirrolidina por cicloadición [3+2] de iluros de azometino con C60.
En esta reacción, conocida como reacción de Prato, el iluro de azometino 46, que constituye el
intermediario 1,3 dipolar, es generado in situ por descarboxilación de la sal de imino resultante
de la condensación de α-aminoácidos con aldehídos o cetonas. El primer ejemplo, descrito en
1993, involucra la síntesis de la N-metilfulleropirrolidina 47 por reacción de sarcosina 44 y
formaldehído 45 en reflujo de tolueno con C60, que constituye el dipolarófilo, obteniéndose
con rendimiento del 41%. (Esquema 1.7). La gran variedad de iluros de azometino sustituidos
que pueden generarse, y la elevada reactividad de estas especies frente a olefinas deficientes
de electrones, como clasifica el [60]fullereno, permite la obtención de fulleropirrolidinas
altamente funcionalizadas con relativa facilidad.66 Esto de debe, a que la introducción de
sustituyentes en tres posiciones diferentes del anillo pirrolidínico depende del aldehído o
cetona utilizado y el respectivo aminoácido. La reacción con aldehídos funcionalizados
proporciona fulleropirrolidinas sustituidas en posición dos del anillo pirrolidínico que se
genera, mientras que la reacción con glicinas N-sustituidas (ej. N-metilglicina) conducen a
fulleropirrolidinas N-sustituidas.41
Por otra parte, otros derivados pirrolidínicos del tipo 49 han sido sintetizados por la adición
del correspondiente iluro de azometino, generado por la apertura térmicamente asistida del
anillo de la aziridina 48 o similares.67 (Esquema 1.8 A). Siguiendo esta línea, recientemente
se ha reportado la cicloadición estereoselectiva de iluros de dibenzoxazepino 51a-c al C60,
para obtener las fulleropirrolidinas tipo 52a-c con configuración cis de los hidrógenos en el
anillo pirrolidínico como producto estereoisómero principal.68 En este caso, se empleó tanto
asistencia térmica como radiación por microondas para la apertura de los correspondientes
anillos de aziridina 50a-c, obteniéndose rendimientos comparativamente equivalentes por
ambas vías, pero con tiempos de reacción mucho menores para el método no convencional, lo
que demuestra la gran viabilidad de este tipo de reacción. (Esquema 1.8 B).
19
Esquema 1.8: Obtención de fulleropirrolidinas por apertura de aziridinas.
En nuestro grupo de investigación se han realizado estudios encaminados al desarrollo de

metodologías para la obtención de organofullerenos. Recientemente se ha llevado a cabo la
síntesis estereoselectiva de derivados del [60]fullereno y del [70]fullereno, utilizando la
catálisis con sales metálicas y ligandos quirales, lo que permitió realizar la cicloadición de
iluros de azometinos N-metalados, obteniendo los estereoisómeros trans- o los cis-5-aril-2-
alcoxicarbonilpirrolidino[3,4:1,2]fullerenos con una alta diastereoselectividad y
enantioselectividad.69, 70
También hemos reportado la obtención de conjugados esteroide-[60]fullereno tipo 53 a través

de reacciones de ciclopropanación,6 así como la de isoxazolinofullerenos 5471 empleando las
reacciones de cicloadición 1,3-dipolar de iluros de azometinos a fullerenos. (Figura 1.12).
Figura 1.12: Derivados del [60]fullereno
20
Siguiendo esta metodología de la reacción de Prato, se han sintetizado fulleropirrolidinas tipo

57 que contienen el anillo de dihidropiridinas,72,73 a través de la reacción entre el C60 y el iluro
de azometino correspondiente 56, generado in situ a partir de la sarcosina y las
correspondientes 1,4 DHPs cloro-formil sustituidas 55a-g obtenidas vía reacción de
Vilsmeier-Haack. (Esquema 1.9).
Esquema 1.9: Obtención de híbridos 1,4-DHPs-fulleropirrolidinas.
Esta reacción se llevó a cabo en cantidades equimolares de los reaccionantes y exceso de

sarcosina, a reflujo de o-DCB, obteniéndose rendimientos entre 30 y 40%. Estos compuestos
se obtienen como mezclas de diasteroisómeros, producto de la presencia del átomo de cloro en
el C-2 del anillo de 1,4-DHP, el cual interactúa estéricamente con la molécula de C60,
provocando la formación de un eje quiral por la restricción en la rotación de este enlace
simple, dando lugar a la formación de dos isómeros, conocidos como atropoisómeros.
1.6 Consideraciones generales

Como se muestra en este capítulo, la búsqueda de compuestos que exhiban novedosas
propiedades tanto físicas, químicas como biológicas, es una temática que ha cobrado un gran
auge e importancia en la actualidad.El desarrollo de este tipo de compuestos se ha potenciado
con el diseño y obtención de moléculas híbridas, o sea, moléculas constituidas en su conjunto
por diferentes bloques moleculares que se combinan en una sola entidad funcional, donde las
características de sus componentes son moduladas, amplificadas u originan totalmente nuevas
propiedades con relación a sus precursores.
En la química macromolecular actual adquieren gran importancia los fullerenos dada sus
propiedades químicas y biológicas. La literatura con relación a estas moléculas es amplia, y el
estudio de sus propiedades ha traído como consecuencia la obtención de un gran número de
21
compuestos del tipo organofullerenos, los cuales poseen variadas aplicaciones. Entre las
reacciones más empleadas para la obtención de estos compuestos se encuentran las reacciones
de cicloadición, y dentro de estas, la cicloadición 1,3-dipolar de iluros de azometino ha
generado el mayor número de derivados, debido a su alta selectividad y amplio rango de
grupos funcionales que permite utilizar, obteniéndose fulleropirrolidinas acopladas a
diferentes entidades moleculares. Sin embargo, la preparación de sistemas híbridos fullereno-
esteroide ha sido poco estudiada por esta vía.
Del análisis realizado de la literatura, se encontró que derivados de la androsterona cloro-

formil sustituidos en diferentes posiciones de los anillos esteroidales obtenidos mediante la
reacción de Vilsmeier-Haack, han probado ser excelentes intermediarios sintéticos en el
desarrollo de nuevos sistemas anulares fusionados a heterociclos. Sin embargo, a pesar de
conocerse la versatilidad de esta reacción de formilación para la introducción de grupos muy
reactivos, no existen evidencias del empleo de estos derivados esteroidales para su
acoplamiento a fullerenos mediante la reacción de Prato, constituyendo este trabajo de tesis el
primer reporte sobre esta importante temática.
22
Parte Experimental
Parte Experimental
Capítulo 2: Parte Experimental
2.1 Reactivos y disolventes
Los reactivos y disolventes utilizados para la síntesis y purificación de los productos fueron de
calidad para síntesis o análisis según el caso, procedentes de las firmas Merck, Fluka y
Aldrich. Se empleó como materia prima la Epiandrosterona 8 purificada (Figura 2.1) para la
síntesis de los intermediarios esteroidales, suministrada por el Centro de Química
Biomolecular. Posee una temperatura de fusión de 173-174 C y sus señales espectroscópicas
características se muestran en Anexo I.
Figura 2.1: Estructura del 5 -androstan-3 -ol-17-ona (8)
2.1.1 Preparación de reactivos

Reactivo de Jones: Para su preparación se disolvieron 26.72g de óxido crómico (CrO3) en
40mL de agua, se le añadió en frío 23mL de ácido sulfúrico concentrado y se completó con
agua hasta 100mL.
2.2 Equipos y condiciones de registro de espectros

Los espectros de RMN-1H y RMN-13C, se registraron a 25 ºC en un espectrómetro Bruker
Avance III (700 MHz-1H, 175 MHz-13C) empleando como disolvente CDCl3 y TMS como
referencia interna. Los corrimientos químicos se registraron en la escala (ppm) y las
constantes de acoplamiento (J) en Hz. La multiplicidad de las señales para los protones se
designó de la siguiente manera: singlete (s), doblete (d), doblete de triplete (dt), triplete de
doblete (td) y multiplete (m). El tipo de carbono se determinó empleando la técnica DEPT.
Los espectros de masa HRMS-ESI se obtuvieron con una equipo FTMS APEX Q-IV a 4.7 T,
y los espectros HRMS-MALDI (ditranol como matriz) en un equipo Applied Biosystem 4700
Reflector, registrándose los espectros en modo positivo y/o negativo, describiéndose en
unidades de relación masa/carga (m/z). Los microanálisis fueron realizados en un instrumento
2400 CHN.
23
Parte Experimental
2.3 Cromatografía
La mayor parte de los productos se purificaron por cromatografía en columna flash empleando
sílica gel (60 Å, 32–63 µm) como fase estacionaria. Para seguir el curso de las reacciones, se
utilizó la cromatografía de capa delgada CCD con placas de gel de sílice (230-400 mesh) con
espesor de capa de 0.25mm. Los sistemas de disolventes utilizados se especifican en los
métodos de síntesis. La observación de los cromatogramas se efectuó en dos condiciones:
inicialmente se realiza bajo luz ultravioleta a 254 nm, y posteriormente son revelados con
disolución acuosa de ácido sulfúrico al 50 % y calentamiento a 105 °C por 5 minutos. Las
cromatografías HPLC para el análisis de la pureza de los compuestos se realizaron en un
equipo Agilent 1100, utilizando una columna BuckyPrep (dimensiones: 4.6 x 250 mm;
velocidad flujo: 1.0mLmin–1, volumen de inyección: 15µL, mezcla eluente tolueno:
acetonitrilo 9:1). Los tiempos de retención (tRs) y las áreas de los picos (PAs) reportadas, son
determinadas con longitud de onda de 320 nm.
2.4 Síntesis de intermediarios esteroidales

2.4.1 Síntesis de 5α-androstan-3β-formiato-17-ona (58)
En un balón de dos bocas se colocaron 1,10mL (13 mmol) de N,N-dimetilformamida y se
añadieron 0,93mL (13 mmol) de oxicloruro de fósforo, manteniendo la temperatura por debajo
de 10 ºC. Terminada la adición, la mezcla se agitó por 30 minutos, Pasado este tiempo se
adicionó una disolución de 1g (3,4 mmol) de Epiandrosterona en 20mL de DCM, manteniendo
la agitación durante 3 horas a temperatura ambiente. La reacción se siguió por CCD (n-
hexano: acetato de etilo 3:1). Posteriormente se añadió una disolución acuosa de acetato de
sodio (12g en 40mL) y se continuó agitando durante una hora. La mezcla de reacción se
extrajo con DCM, y la fase orgánica resultante se lavó tres veces con porciones de agua y se
secó posteriormente con sulfato de sodio anhidro. El extracto orgánico resultante se
rotoevaporó, y el producto obtenido se recristalizó de metanol aislándose como un sólido
blanco. Rendimiento: 0,3g (0,9 mmol, 27 %). t.f: 110-113 oC
24
Parte Experimental
2.4.2 Síntesis de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona (59)
En un balón de una boca se mezclaron 2mL (2,2g; 27,6 mmol) de piridina, 10mL (12g; 117,1
mmol) de anhídrido acético y 2g (6,9 mmol) de Epiandrosterona. La mezcla se agitó por 5
horas a temperatura ambiente, controlándose el avance de la reacción por CCD, empleando
como disolventes la mezcla n-hexano: acetato de etilo (3:1).Pasado este tiempo se vertió todo
el contenido sobre agua con hielo. El sólido se filtró, se lavó con abundante agua y se
recristalizó de metanol. Rendimiento: 1,8g (5,5 mmol, 80 %). t.f: 103-104 oC
2.4.3 Síntesis de 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-androstan-16-en (60)

En un balón de tres bocas de 100mL provisto con un termómetro y condensador se
adicionaron 10mL de POCl3 (96,3 mmol) a 10mL de DMF (96,3mmol) lentamente y agitando,
manteniendo la temperatura entre 0 y 5 ºC. Terminada la adición se añadieron 2g (6,0 mmol)
de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona 59 disueltos en 40mL de cloroformo. Terminada la
adición se dejó ascender la temperatura hasta temperatura ambiente, y seguidamente se puso a
reflujar durante 5 horas en atmósfera de nitrógeno, monitoreándose la reacción por CCD (n-
hexano: acetato de etilo 4:1). Pasado este tiempo se vertió la mezcla de reacción en una
disolución de NaAcO (40g en 100mL de agua) y se dejó agitar durante una hora. La mezcla se
extrajo con DCM, y la fase orgánica resultante se lavó tres veces con porciones de agua y
secado posterior con sulfato de sodio anhidro. El extracto orgánico se concentró y el producto
obtenido se purificó por cromatografía de columna empleando como fase móvil, n-
hexano/acetato de etilo (60:1), aislándose un sólido blanco. Rendimiento: 1,5g (3,9mmol,
65 %), t.f: 130-132 ºC.
9.
25
Parte Experimental
2.4.4 Síntesis de 5α-androstan-3,17-diona (61)
En un balón de 100mL se disolvieron 2g (6,9 mmol) de 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-
androstan-16-en 60 en 50mL de acetona. Posteriormente se añadieron 2mL (0,5g; 5,2 mmol)
de reactivo de Jones, previamente preparado. Terminada la adición se continuó agitando por
unos minutos, y se realiza control por CCD tomando sistema de disolvente n-hexano: acetato
de etilo (4:1). El exceso de reactivo de Jones se eliminó con adición de 2-propanol.
Posteriormente se evaporó la acetona y se adicionó agua destilada. La mezcla se filtró y lavó
con abundante agua. El producto se recristalizó de metanol: agua (1:1) aislándose un sólido
blanco. Rendimiento: 1,7g (5,9 mmol, 85 %), t.f: 130-132 ºC.
2.4.5 Síntesis de 3-cloro-2-formil-5α-androstan-2-en-17-ona (62)

En un balón de tres bocas de 50mL provisto con un termómetro y trampa de gases se
adicionaron 1,6mL (17,2 mmol) de POCl3 a 1,3mL (17,2 mmol) de DMF lentamente y
agitando, manteniendo la temperatura entre 0 y 5 ºC. Terminada la adición se añadieron 1,3 g
(4,3 mmol) de 5α-androstan-3,17-diona 61 disuelto en 20mL de DCM. Terminada la adición
se dejó ascender la temperatura hasta temperatura ambiente y se agitó la mezcla resultante
durante 18 horas en atmósfera de nitrógeno, monitoreándose la reacción por CCD (n-hexano:
acetato de etilo 4:1). Pasado este tiempo se vertió la mezcla de reacción en una disolución de
NaAcO (40g en 100mL de agua), agitándose durante una hora. La mezcla se extrajo con
DCM, y la fase orgánica se lavó tres veces con porciones de agua y secado posterior con
sulfato de sodio anhidro. El extracto orgánico se rotoevaporó y el sólido resultante se purificó
por cromatografía en columna, empleando como fase móvil n-hexano/acetato de etilo (60:1).
El producto fue aislado como un sólido blanco. Rendimiento: 1,1g (3,4 mmol, 78 %),
t.f: 140-142 ºC.
26
Parte Experimental
2.5 Síntesis de N-metil-2’-pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno sustituidos (63, 64, 65, 66)
En un balón equipado con un condensador de reflujo se mezclaron 0,1g (0,2 mmol) de C60,
0.1g (0,8mmol) de la N-metilglicina y el correspondiente esteroide cloroformilado 60 ó 62 en
tolueno (250mL) La mezcla de reacción se reflujó durante 5 o 6 horas bajo atmósfera de N2 y
en ausencia de luz. El color de la reacción cambió de púrpura a carmelita. Al cabo de este
tiempo se eliminó el disolvente a presión reducida y el sólido obtenido se purificó por
cromatografía en columna sobre silica gel, utilizando CS2 para eluir el C60 que no reaccionó y
mezclas de diferentes disolventes para eluir en cada caso los correspondientes
pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullerenos. Se realizó una purificacion adicional de estos compuestos
por repetitivas precipitaciones y centrifugación, utilizando hexano, metanol y eterdietílico
como disolventes.
2.5.1 N-metil-2’(R)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-16-en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]
fullereno (63)
Rendimiento: 28 % (36% tomando en cuenta el C60 recuperado). Sólido carmelita.
27
Parte Experimental
2.5.2 N-metil-2’(S)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-16-en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]
fullereno (64)
2.5.3 N-metil-2’(R)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-ona)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno
(65)
2.5.4 N-metil-2’(S)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-ona)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno
(66)
28
Discusión de Resultados
Capitulo 3: Discusión de Resultados

Como se mostró en la Revisión Bibliográfica, los conjugados fullereno-esteroides se definen
como quimeras moleculares con potenciales aplicaciones químico-biológicas derivadas de la
unión de ambas familias de moléculas, cada una aportando características estructurales que
definen las propiedades del híbrido resultante. Sin embargo, estos sistemas han sido poco
estudiados, evidenciándose por los escasos ejemplos de fullerenos conjugados a esteroides
reportados en la literatura científica, fuera de la multitud de otros tipos de derivados
fullerénicos que han sido ampliamente publicados.
Resultó de interés el desarrollo de nuevas entidades moleculares del tipo fullereno-esteroide

que permitieran integrar la química de los esteroides con la de los fullerenos. Teniendo esto en
cuenta, la metodología de conjugación desarrollada en esta tesis consiste en el empleo de la
reacción de Prato entre iluros de azometino generados a partir de N-metilglicina y aldehídos
esteroidales, con el [60]fullereno, para obtener compuestos híbridos nunca antes reportados en
la literatura científica.
Para el desarrollo de este procedimiento fue necesario dividir el trabajo en dos partes
fundamentales: a) funcionalización de los esteroides mediante la introducción de grupos
formilo en diversas posiciones del esqueleto de la epiandrosterona, mediante el empleo de la
reacción de Vilsmeier-Haack, y b) realizar el acoplamiento de estos derivados a la molécula de
fullereno para la obtención de los híbridos correspondientes.
La utilización de la Epiandrosterona como punto de partida en la síntesis de estos derivados
esteroidales fue seleccionada fundamentalmente, no solo por las interesantes propiedades que
posee, sino también porque es un producto fácilmente accesible y comercial.
Para el cumplimiento de los objetivos propuestos, se llevó a cabo el siguiente esquema de

síntesis (Figura 3.1).
A continuación se describe el desarrollo de cada una de estas partes del trabajo experimental,
con los aspectos más significativos de cada uno de los procesos de síntesis utilizados y la
caracterización espectroscópica de los compuestos obtenidos, mediante RMN-1H, RMN-13C, y
espectrometría de masas.
29
Figura 3.1. Ruta sintética para la obtención de los híbridos esteroidales
3.1 Obtención de los derivados esteroidales

Uno de los objetivos de este trabajo es la obtención de derivados esteroidales formilados para
su posterior conjugación a moléculas de fullerenos. Como fue expuesto en el Capitulo 1 de
esta tesis, la incorporación de grupos formilo en diferentes posiciones del núcleo esteroidal
puede realizarse mediante la reacción de Vilsmeier-Haack con cetonas esteroidales. Sin
embargo, es conocido que el reactivo de VH reacciona con oxígenos nucleofílicos, por lo que
se hace necesario la protección del hidroxilo en posición 3 del 5 -androstan-3 -ol-17-ona,
antes de llevar a cabo la transformación en los compuestos objeto de estudio, empleándose
para ello dos variantes como se muestran a continuación.
3.1.1 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3β-formiato-17-ona (58)

Esta reacción consistió en la protección del grupo hidroxilo 3 del sustrato de partida,
mediante la formación del producto O-formilado, bajo las condiciones del propio reactivo de
30
Vilsmeier-Haack, como muestra el Esquema 3.1, el cual según lo expuesto en el Epígrafe
1.2, también ha probado su versatilidad para estos tipos de transformaciones.
Esquema 3.1: Obtención del producto 58
Dicho producto fue purificado por recristalización de metanol, obteniéndose un rendimiento

del 27%, el cual puede considerarse bajo en comparación con sustratos esteroidales similares
O-formilados bajo estas condiciones de reacción. Sin embargo, esta variante podría constituir
una vía opcional de protección de grupos hidroxilos en secuencias sintéticas complejas, ya que
su desesterificación puede efectuarse selectivamente en presencia de otros grupos ésteres
protectores, como por ejemplo acetatos y/o benzoatos74
Dicho producto fue caracterizado espectroscópicamente mediante RMN-1H y
AR4
13
C y sus
8.048
7.286
4.845
2.476
2.464
2.448
2.436
2.103
2.089
2.075
1.831
1.827
1.823
1.814
1.809
1.794
1.774
1.684
1.680
1.673
1.670
1.666
1.582
1.576
1.571
1.569
1.565
1.560
1.518
1.460
1.443
1.368
1.362
1.349
1.343
1.331
1.325
1.319
1.312
1.307
1.303
1.301
1.294
1.285
1.279
1.277
1.267
1.261
1.248
1.243
1.230
1.076
1.074
1.068
1.018
1.012
0.880
0.743
espectros correspondientes aparecen en la Figura 3.2.
H-20 Me-18
Me-19
CDCl3
221.29
160.80
73.49
54.27
51.35
47.79
44.65
36.64
35.86
35.64
35.01
33.89
31.51
30.79
28.24
27.39
H-3α
8.0 7.5 7.0 6.5 6.0 5.5 5.0 4.5 4.0 3.5 3.0 2.5 2.0 1.5 1.0 ppm
0.95
0.42
1.00
31.53
CDCl3
C-18
C=O
Formiato C-3 C-19
C=O
220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 ppm
Figura 3.2: Espectros de RMN-1H y 13C del compuesto 58
31
En el espectro protónico se observan como señales principales la presencia de un singlete muy
intenso alrededor de 8 ppm, característica del protón del grupo formiato -O-COH introducido,
ya que la señal protónica de aldehídos del tipo -C-COH se encuentra por encima de 9 ppm. Por
otra parte, la señal correspondiente al multiplete del H-3α aparece más desblindada 4,85 ppm
con relación a la señal de este mismo protón en la Epiandrosterona 3,59 ppm, evidenciando la
variación en su entorno químico producto de la nueva sustitución y, por lo tanto, que ha
ocurrido reacción en esta posición. El espectro de RMN-13C corroboró lo antes expuesto,
mostrando una señal típica para carbonos de grupos ésteres 160,8 ppm y una señal en 221,3
ppm correspondiente al grupo carbonilo de cetona de la posición diecisiete, presente en el
producto de partida.
Teniendo en cuenta el análisis anterior, se puede decir que ha ocurrido la formilación en el
hidroxilo de la posición C-3, produciéndose el formiato de epiandrosterona 58.
3.1.2 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona (59)

Teniendo en cuenta que se obtuvo un rendimiento bajo en la síntesis del 5α-androstan-3β-
formiato-17-ona 58, se decidió utilizar un método clásico de esterificación para la protección
del 3β hidroxilo. Para ello se llevó a cabo una reacción de acetilación con anhídrido acético y
piridina sobre la Epiandrosterona a temperatura ambiente. (Esquema 3.2).
La reacción es monitoreada por CCD utilizando como sistema de disolvente la mezcla n-

hexano: acetato de etilo (3:1). Al poco tiempo de comenzada la reacción se observa en el
cromatograma la aparición de una mancha de mayor valor Rf con relación al sustrato de
partida, debido a la disminución de la polaridad por la esterificación del alcohol. Se determinó
que la reacción transcurre en 3 horas debido a que desaparece el producto de partida. La
relación molar de anhídrido acético respecto al esteroide es de 17:1, lo que se deriva de su
doble función como reactivo y como disolvente. Por su parte, la piridina es empleada para
activar el grupo carbonilo del anhídrido, formándose un carbocatión activado N-acetilpiridino
deficiente de electrones, el cual es atacado por el grupo hidroxilo para obtener el compuesto
32
esperado. El crudo de reacción se purifica por recristalización en metanol obteniéndose como
producto final un sólido blanco con un 80 % de rendimiento. Este rendimiento se atribuye a
que el 3β-OH se encuentra en una posición ecuatorial y extrema de la molécula, donde no
existen impedimentos estéricos que dificulten la introducción del agente acetilante. Así,
siguiendo la metodología reportada13 se obtuvo para esta síntesis mejor rendimiento, que el
obtenido para la O-formilación de la Epiandrosterona.
La confirmación del producto acetilado se observa en los espectros de RMN-1H y RMN-13C

registrados para este compuesto (Anexo II). Del análisis de estos, para el caso del espectro
protónico se observa una señal correspondiente al H-3α en 4,71 ppm, marcada por un
desblindaje producido por el grupo acetato introducido con relación a esta propia señal en el
producto de partida. Además se observa la presencia de un singlete intenso que integra tres
protones a 2,03 ppm, el cual se corresponde con la señal del metilo de este sustituyente, así
como las señales correspondientes al Me-18 y al Me-19 del esqueleto esteroidal. Por otra
parte, el espectro RMN-13C ratifica lo anteriormente planteado, apareciendo una nueva señal a
170,1 ppm característico para carbonilos de ésteres, observándose además las señales de los
carbonos provenientes del esqueleto de la Epiandrosterona, por lo que se puede afirmar que se
ha obtenido el compuesto 59.
3.1.3 Síntesis y caracterización de 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-androstan-16-en (60)

Una vez protegido el hidroxilo unido a C-3 del esteroide, la obtención del derivado cloro-
formilado se lleva a cabo mediante la reacción de 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona 59, que
posee un grupo carbonilo en posición diecisiete, con el reactivo de VH, empleando cloroformo
seco como disolvente. La reacción transcurre a reflujo en atmósfera inerte de N2 durante un
tiempo de 5 horas, determinado este último por el análisis de la CCD, donde se observa en el
cromatograma la desaparición del producto de partida y la formación de una mancha
mayoritaria de mayor valor de Rf, debido a la disminución de la polaridad del compuesto
formado. Una posterior hidrólisis básica con acetato de sodio origina el derivado cloro-formil
sustituido 60 en el anillo D del esqueleto esteroidal como un sólido blanco, previamente
purificado por cromatografía en columna flash, obteniéndose un rendimiento final del 65 %.
(Esquema 3.3)
33
Las condiciones en las que transcurre esta reacción fueron llevadas a cabo según reportes en la
literatura para este tipo de sustrato esteroidal.39,75 La obtención del producto cloro-formilado se
realiza sobre el lado más estéricamente impedido, cara β, del anillo D del esteroide, generado
por la presencia del Me-18 vecino al carbonilo C-17, por lo que un aumento de la temperatura
mediante reflujo de cloroformo facilita la transformación en el producto deseado.
Esta reacción puede ocurrir a través de un mecanismo en varias etapas, el cual se representa en
el Esquema 3.4. En la primera etapa ocurriría la formación del reactivo electrofílico 20, a
partir de la N,N-dimetilformamida 17 y el oxicloruro de fósforo 18. Posteriormente este
reactivo es atacado por la forma enólica del compuesto 59, produciendo la especie (i) que
establece un equilibrio con la sal (ii). La reacción de ésta última con el POCl3 puede dar lugar
a la sal (iii), la que por pérdida de una molécula de HOPOCl2, produciría (iv), que
posteriormente origina el 3β-acetoxy-17-cloro-16-formil-5α-androstan-16-en 60 por medio de
una hidrólisis básica.
Esquema 3.4: Mecanismo de reacción propuesto para las cetonas esteroidales.
34
La caracterización de este producto se realizó a través de los espectros, RMN-¹H y ¹³C, de
masas, y análisis elemental. En la Figura 3.3 se muestra el espectro de RMN-¹H, en el que se
puede comprobar la transformación del 5α-androstan-3β-acetoxy-17-ona 59 en el derivado 17-
cloro-16-formil sustituido 60. La aparición de una señal alrededor de los 10 ppm
correspondiente al protón aldehídico, y la desaparición de la señal en forma de multiplete de
los protones de la posición C-16 del compuesto de partida, confirma lo planteado.
Adicionalmente, las señales de los protones restantes del esqueleto esteroidal son mantenidas
con ligeras variaciones en sus desplazamientos químicos.
Me-21
Me-18
Me-19
H-20
CDCl3
H-3α
CDCl3
C-19
C-18
C3
C=O C-16
Ac C-17 Sp2
Sp2
CHO
Figura 3.3: Espectros de RMN-1H y 13C del compuesto 60
A través del espectro RMN-¹³C también se pudo comprobar la formación de este

intermediario. En él se observa la señal correspondiente al grupo carbonilo del aldehído
alrededor de los 188 ppm. Por otra parte desaparece la señal que se encontraba en 221 ppm
correspondiente al grupo cetónico del C-17 presente en el producto de partida, mientras que se
35
mantiene la señal de carbonilo del grupo acetato alrededor de 170 ppm. También es
característico la aparición de señales asignables a carbonos sp2 en 136 ppm y 162 ppm para C-
16 y C-17 respectivamente, provenientes del patrón vinílico introducido durante la reacción,
como muestra la Figura 3.3.
Por otra parte la espectrometría de masa de alta resolución HRMS-ESI muestra un pico de m/z
+
= 401,1854 uma correspondiente al ión molecular [M+Na] , que coincide con la fórmula
molecular calculada para C22H31ClNaO3: 401,1900, además se observa un pico a 403,1824
uma con relación de intensidades 3:1 respecto al ión molecular, que se corresponde con la
presencia de los isótopos 35Cl y 37Cl respectivamente (Figura 3.4)
[M+Na]+
m/z = 401.19 [M + Na]+

Calculado para C21H31ClNaO3.
Figura 3.4: Espectros de masa (HRMS-ESI) del derivado 60 registrados en modo positivo
3.1.4 Síntesis y caracterización de 5α-androstan-3,17-diona (61)

El siguiente paso de síntesis consistió en la obtención del producto oxidado de la
Epiandrosterona 61, lo cual permitió la obtención de un grupo carbonilo en el C-3 del anillo A
del esqueleto esteroidal. Esto permite obtener un nuevo producto cloro-formilado bajo las
condiciones de la reacción de VH en un paso siguiente.
En el Esquema 3.5 se muestra la secuencia sintética empleada. La oxidación del grupo

hidroxilo de la posición C-3 de la Epiandrosterona se realiza por tritración con el reactivo de
Jones (preparado previamente), empleando para ello acetona como disolvente. La reacción
transcurre muy rápido a temperatura ambiente, y casi inmediatamente después de adicionado
el oxidante la CCD muestra una mancha de mayor valor de Rf al del producto de partida,
debido a la menor polaridad del grupo cetónico formado. Se obtiene finalmente un sólido
36
blanco previamente purificado por recristalización de metanol:agua (1:1) con rendimiento del
85 %, correspondiente al derivado dicetónico esteroidal. Este presenta una temperatura fusión
de 130-132 0C, que corresponde con el reportado para este compuesto, 129-131 0C.76
En el Anexo III se reportan los espectros RMN-1H y RMN-13C del compuesto 61. Como
señales características se observa en el espectro de RMN-13C una nueva señal en 211 ppm
asignable a grupos carbonilos de cetona, así como se mantiene la señal de 220 ppm del
carbonilo de la posición C-17 del producto de partida. Por otra parte, el espectro protónico
muestra la desaparición de la señal del H-3α a 3,61 ppm de la Epiandrosterona, lo que indica
la formación del producto dicetónico esperado 61.
3.1.5 Síntesis de 3-cloro-2-formil-5α-androstan-2-en-17-ona (62)

Una vez obtenido el compuesto 61, el cual presenta dos grupos cetónicos en diferentes
posiciones C-3 y C-17 del esqueleto esteroidal, se procedió a su transformación en el derivado
cloro-formil sustituido en el anillo A androstánico. Para ello se hace reaccionar el 5α-
androstan-3,17-diona 61 con el reactivo de VH, a través de un mecanismo de reacción similar
al descrito previamente para la obtención del derivado (60, Esquema 3.4). En este caso las
condiciones de reacción son diferentes, llevándose a cabo a temperatura ambiente durante 18
horas, utilizando como disolvente DCM. (Esquema 3.6). Una posterior hidrólisis básica
origina el derivado cloro-formil sustituido 62, el cual es purificado por cromatografía en
columna, obteniéndose un sólido blanco con un 78% de rendimiento.
37
Cuando se analiza el sustrato de partida, podría esperarse la formación del producto
diformilado correspondiente en los anillos A y D simultáneamente, pero al llevarse a cabo la
reacción a temperatura ambiente solo se favorece la formación del derivado cloro-formilado
en el anillo A. Esto puede explicarse por la mayor reactividad que posee el carbonilo de la
posición C-3 del anillo A en comparación con el carbonilo de C-17 del anillo D, que como se
explico anteriormente posee un gran impedimento estérico por la presencia vecina del Me-18.
Además, se emplea una relación molar de reactivo respecto al esteroide (4:1), que no es
suficiente para formar la cantidad necesaria de agente formilante reportada en reacciones de
cloro-formilación de cetonas esteroidales en anillos impedidos estéricamente. Todo esto se
evidencia mediante el análisis de la CCD, en la que se observa, al poco tiempo de comenzada
la reacción, una mancha como producto mayoritario, de mayor valor de Rf con relación al
sustrato de partida, sin que se observen otras manchas de importancia.
La caracterización de este producto se realizó a través de los espectros, RMN-¹H y ¹³C, de

masas, y análisis elemental. Cuando se analiza el espectro de RMN-1H para este compuesto
(Figura 3.5), se observa una señal en 10,18 ppm correspondiente al protón aldehídico, así
como la desaparición de la señal proveniente del H-3α del producto de partida, debido al
patrón de sustitución introducido.
Me-18
Me-19
H-1β H-1α
H-20
CDCl3
Figura 3.5: Espectro de RMN-1H del compuesto 62
Para confirmar la presencia del grupo formilo sobre el C-2 se analizaron las señales
correspondientes a los protones de C-1. Estas se observaron como dobletes en 1,75 ppm y 2,56
ppm para el H-1α y H-1β respectivamente, ambos con una J=17 Hz, indicando el
38
acoplamiento geminal entre ellos, debido a que se convierten en protones diasterotópicos por
la cercanía del carbono quiral C10, haciéndolos no equivalentes. Este resultado confirma la
presencia del grupo formilo en la posición referida. Además según se expuso en el Capitulo 1,
la reacción de VH con esteroides de la serie 5α que presentan grupos carbonilos en C-3,
producen los derivados cloro-formil sustituidos con el grupo aldehído en C-2.
Del mismo modo, el espectro obtenido para la RMN-13C (Figura 3.6), muestra el patrón
correspondiente a la sustitución cloro-formil en el anillo A, señal de aldehído a 191,4 ppm, y
señales correspondientes a carbonos vinílicos en 133,0 ppm y 149,6 ppm asignadas a C-2 y C-
3 respectivamente, y una señal a 220,9 ppm correspondiente al carbonilo de C-17.
CDCl3
C-19
C-18
C-3 C-2
C=O Sp2 Sp2
CHO
Figura 3.6: Espectro de RMN-13Cdel compuesto 62
El espectro de masas MS-ESI muestra un pico de m/z = 357,20 uma que indica la formación
+
del ión molecular [M+Na] , que coincide con la fórmula molecular calculada para
C20H27ClNaO2: 357,16, mientras que se observa un pico a 359.3 uma con relación de
intensidades 3:1 respecto al ión molecular, que indica la presencia del átomo de cloro en la
molécula. (Figura 3.7)
39
[M+Na]+
367.2
m/z = 357.16 [M + Na]+

Calculado para C20H27ClNaO2
Figura 3.7: Espectros de masa MS-ESI del derivado 62 registrados en modo positivo.
3.2 Obtención de los híbridos fullereno-esteroide

La metodología de obtención de los híbridos fullereno-esteroide consistió en la síntesis de
fulleropirrolidinas acopladas a derivados de esteroides, las que se obtienen mediante
cicloadiciones 1,3-dipolar entre el [60]fullereno e iluros de azometino generados in situ a
partir de la reacción entre la N-metilglicina y los correspondientes aldehídos esteroidales 60 y
62 previamente sintetizados. El procedimiento general empleado en la obtención de los
híbridos fue el mismo para ambos casos, y a continuación se brindan los aspectos más
significativos de las síntesis con sus caracterizaciones.
3.2.1 Síntesis y caracterización de N-metil-2’(R/S)-(3β-acetoxy-17-cloro-5α-androstan-16-

en)pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (63, 64)
La reacción se llevó a cabo añadiendo un equivalente del derivado esteroidal cloro-formil
sustituido 60 y cinco equivalentes de N-metilglicina, a una disolución de 0,9 equivalentes de
C60 en tolueno. La mezcla se reflujó durante 5 horas en ausencia de luz y bajo atmósfera de
N2. (Esquema 3.6)
Esquema 3.6: Obtención de los híbridos 63 y 64.
40
El seguimiento de la reacción se realizó por CCD, observándose en los cromatogramas la
formación de dos manchas con mayor Rf que las correspondientes para los productos de
partida. El tiempo de reacción es de 5 horas, ya que a partir de este tiempo comienzan a
aparecer derivados polisustituidos y las poliadiciones pueden dar un gran número de
estereoisómeros y hacen que disminuya el rendimiento obtenido para los monoaductos de
interés.
Una vez culminada la reacción, se hizo pasar el crudo de reacción por HPLC, utilizando para
ello una columna BuckyPrep, diseñada especialmente para fullerenos. En la Figura 3.8 se
muestra el cromatograma obtenido en este caso, en el que se observan dos picos principales
bien resueltos con tR de 5.87min.y 6.67 min., los cuales se corresponden con las manchas
observadas por CCD. Mediante las áreas de los picos PAs se pudo determinar que ambos
compuestos se encuentran en una relación 26/74 respectivamente. Además, fue detectado un
pico a 3 min. que corresponde al C60 que quedó sin reaccionar.
C60
Figura 3.8: Cromatograma obtenido por HPLC para el análisis del crudo de reacción.
La purificación de los productos se llevó a cabo mediante cromatografía de columna flash en

sílica gel. El C60 que quedó sin reaccionar se eluye primeramente, utilizando disulfuro de
carbono. Posteriormente es utilizado un gradiente de polaridad de n-hexano:DCM desde (4:1)
hasta (2:1) para eluir los dos productos de la reacción, fulleropirrolidinas monosustituidas 63 y
64. Estos dos compuestos fueron adicionalmente purificados por repetidos procesos de lavados
y centrifugación con hexano, metanol y éter dietílico, obteniéndose como sólidos carmelitas.
Los rendimientos finales se reportan en la Tabla 3.1, señalándose adicionalmente entre
paréntesis los rendimientos teniendo en cuenta el fullereno recuperado.
41
Tabla 3.1 Rendimientos de los compuestos aislados.
Compuesto Rendimiento
63 28 % (36 %)
64 47 % (66 %)
La elucidación estructural de los híbridos obtenidos fue realizada mediante las
caracterizaciones espectroscópicas RMN-1H y 13C, así como por espectrometría de masas. Los
resultados obtenidos mostraron que los compuestos aislados poseen masas molares iguales
pero con algunas diferencias en las corrimientos químicos para las señales en los espectros de
RMN, indicando su relación como diasteroisómeros.
En los espectros de masas obtenidos mediante la técnica MALDI-TOF, se observan los picos
correspondientes a los iones moleculares [M + H]+para cada compuesto, 1126,2450 uma para
el compuesto 63 y 1126.2507 uma en 64, los cuales coinciden con la masa teórica calculada
C84H37ClNO2: 1126,250. En la Figura 3.9 se muestra el espectro de masa para el producto 63.
[M+H]+
Figura 3.9: Espectro de masadel produto 63
En los espectros de RMN-1H para ambos compuestos, no se observaron diferencias

significativas, solamente aparecen algunas señales correspondientes al mismo sistema de
espines con ligeros cambios en sus desplazamientos químicos, lo que se corresponde con la
variación en sus entornos provocado probablemente por el cambio de la configuración en el C-
2 del anillo pirrolidínico (Configuración R para el producto 63 y S para 64).
En la Figura 3.10 se muestran los espectros de RMN-1H y -13C del compuesto 63.
42
CDCl3
Me-21
Me-19
CH3-N
Me-18
H-2’ H-5’ H-5’

H-3α
CDCl3
C-5´
Csp3 Csp3
C60 C-2´ C60
Csp2 C 19
C3 C 18
C=O
(Ac)
Figura 3.10: Espectros de RMN-1H y RMN-13C del hibrido 63 (R).
En el espectro protónico se observan como señales características hacia las zonas más
desblindadas del espectro, el sistema de espines pertenecientes al anillo de pirrolidina,
mostrándose como un singlete poco intenso a 5,05 ppm, asignable al CH-2’, así como dos
dobletes en 4,18 ppm y 4,90 ppm, con J = 9,7 Hz correspondientes a los protones del grupo
CH2-5’. La señal correspondiente al metilo de este anillo aparece como un singlete intenso en
2,83 ppm, mientras que se mantienen otras señales correspondientes al fragmento esteroidal,
como los singletes de los Me-18 y Me-19 a 1,08 ppm y 0,87 ppm respectivamente, así como el
multiplete del H-3α a 4,65 ppm. Por su parte, el espectro para 13C muestra como significativo
la presencia de numerosas señales en la zona de carbonos con hibridación sp2, producto de la
pérdida de la geometría icosaédrica de la molécula de C60, el cual muestra en su espectro de
43
RMN-13C una sola señal a 143 ppm. Las señales correspondientes a los carbonos sp3 del anillo
de pirrolidina C-5’ y C-2’ así como C-3’ y C-4’ provenientes del enlace [6-6] del C60 se
observan a de 70,0 ppm y 76,2 ppm, y a 69,8 ppm y 75,9 ppm respectivamente, como
muestra la zona ampliada del espectro en la Figura 3.10. Se observa el mantenimiento de la
señal del carbonilo de C-17 a 170,6 ppm, así como todos los carbonos alifáticos
correspondientes al resto del esqueleto androstánico en la región de bajas frecuencias.
3.2.2 Síntesis y caracterización de N-metil-2’(R/S)-(3-cloro-5α-androstan-2-en-17-ona)

pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno (65, 66)
Para la obtención de estas fulleropirrolidinas se empleó la misma metodología sintética vista
para la obtención de los híbridos 63 y 64, pero con la utilizacion en este caso del derivado
esteroidal 62 como el producto formilado, obteniendose al igual que para el caso anterior una
mezcla de dos diasteroisómeros. (Esquema 3.7)
Esquema 3.7: Obtención de los híbridos 65, 66.
El seguimiento de la reacción se realizó por CCD, observándose en los cromatogramas la

formación de las dos manchas correspondientes a los productos de síntesis. El tiempo de la
reacción fue 6 horas, ya que a partir de ese tiempo comienzan a aparecer los derivados
polisustituidos.
El análisis por HPLC del crudo de reacción, bajo las mismas condiciones reportadas
previamente, mostró los picos correspondientes para los híbridos obtenidos, con tR superiores
a los mostrados para los compuestos 63 y 64, mientras que la proporción relativa determinada
para estos estereoisómeros denominados 65 y 66 fue de 57/43 respectivamente. (Figura 3.11)
44
C60
Figura 3.11: Cromatograma obtenido por HPLC para el crudo de reacción.

La purificación de los productos fue realizada por cromatografía de columna flash en sílica
gel, empleado el CS2 para eluir el C60 sin reaccionar, mientras que para aislar las
correspondientes fulleropirrolidinas fue utilizado un gradiente de polaridad de éter de
petróleo:DCM desde (6:1) hasta (1:3) como fase móvil. Estos fueron adicionalmente
purificados por repetidos procesos de lavados y centrifugación con hexano, metanol y éter
dietílico, obteniéndose como sólidos carmelitas con rendimientos de 42 % y 57 % en base al
C60 recuperado para el hibrido 65(R), y de 31 % y 43 % en base a C60 recuperado para 66(S),
los cuales son similares a los obtenidos en el Epígrafe 3.2.1
Estos conjugados también fueron caracterizados mediante RMN-1H y 13
C, y por
espectrometría de masas. La Figura 3.12 muestra comparativamente los espectros RMN-1H
registrados para ambos compuestos. En estos se observa la presencia de los protones
pertenecientes al anillo de pirrolidina como un singlete a 5,30 ppm asignables al CH-2´ y dos
dobletes a 4,90 ppm y 4,18 ppm, con constantes de acoplamiento 9,3 Hz y 9,4 Hz,
correspondientes al acoplamiento geminal del CH2-5’. Los protones correspondientes a los
metilos de este anillo aparecen como singletes en 2,80 ppm, mientras que en las zonas más
blindadas del espectro se encuentran las señales provenientes de los protones del fragmento
esteroidal, donde se aprecian ligeros cambios en los desplazamientos químicos para cada
distereoisómero, producto de tener cada compuesto diferente disposición espacial. Por otra
parte, aparece una señal en el zona de 2,90 ppm a 3,2 ppm como un doblete, J= 16,5-17,7 Hz
para cada uno de los conjugados, que se corresponde con el H-1β del anillo A esteroidal, la
cual aparece ligeramente hacia regiones de mayor frecuencia del espectro con relación a la
45
señal de este protón en el derivado 62, donde aparece a 2,56 ppm, evidenciando la variación
en su entorno químico cercano producto de la nueva sustitución sobre el C-2.
CDCl3
CH3-18
CH3-N CH3-19
H-2’ CH3-19
H-5’ H-5’ H-1β CH3-18
CH3-N
H-2’
H-5’ H-5’
H-1β
Figura 3.12: Espectros de RMN-1H de los compuesto 65 y 66
En los espectros de RMN-13C se observa la aparición de numerosas señales en la región de

Csp2 debido a la pérdida de la geometría icosaédrica que presenta el C60, como se ha reflejado
anteriormente, así como las provenientes de C-2 y C-3 del esteroide. El carbonilo
perteneciente al C-17 se mantiene en 220 ppm, mientras que se observan cuatro señales
correspondientes a los carbonos sp3 del anillo de pirrolidina y los del enlace [6-6] del C60, que
forman parte de este anillo, en la zona comprendida entre 70 ppm y 80 ppm. Se muestran
además, en las mismas zonas, todos los carbonos alifáticos correspondientes al fragmento
androstánico. (Figura 3.13).
46
CDCl3
Csp2 Csp3 C 18 C 19
C-2´C-5´ C60
C=O Csp3
C60
Figura 3.13: Espectro de RMN-13C del compuesto 62 tomado como ejemplo.
En los espectros de masas MS-ESI, se observan los picos correspondientes a los iones
moleculares, los cuales coinciden con la masa teórica calculada para cada uno de los
compuestos sintetizados. A manera de ejemplo, en la Figura 3.14 se muestra el espectro de
masas para el hibrido 65 registrado en modo positivo.
El espectro obtenido en modo positivo muestra un pico de m/z = 1082,22424 uma, indicando
+
la formación del ión molecular [M+H] , que coincide con la fórmula molecular calculada para
C82H33ClNO: 1082,22454. Para confirmar la presencia del átomo de cloro en la estructura, se
observa que del grupo de picos isotópicos correspondientes al ión molecular, aparece uno con
+
relación de intensidad 3:1 respecto al [M+H] a 1085,22658 uma, que debe corresponderse con
la presencia del isótopo 37Cl más un protón.
En el caso del espectro de masas registrado en modo negativo para este compuesto, muestra un
ión molecular [M-H]- con m/z = 1081,18888 uma, que experimentan en la primera etapa de
fragmentación la pérdida de una molécula de cloruro de hidrógeno (36 Da) y formación de un
ión a 1045,21318 uma. La presencia de un pico con m/z = 719,98761 uma indica que
finalmente se produce el C60, observándose la retrocicloadición de la fulleropirrolidina.
47
m/z = 1082.22454 [M + H]+

Calculado para C82H33ClNO. 1082.22454
[M - H]-
∙-
C60
Figura 3.14: Espectros HRMS-ESI del híbrido 65, registrados en modo positivo y negativo respectivamente
Una vez obtenidos estos resultados, el mecanismo postulado para estas reacciones es el que se
muestra en el Esquema 3.8. Estas reacciones se basan en la adición del iluro de azometino
correspondiente IV, formado por la descarboxilación de la sal de imino III resultante de la
condensación de la N-metilglicina 46 con el grupo aldehído presente en los derivados
esteroidales I, al doble enlace [6,6] del C60, mediante una reacción de cicloadición 1,3-dipolar,
según lo expuesto en el Capítulo 1.
Esquema 3.8: Mecanismo propuesto para la cicloadición 1,3-dipolar de iluros de azometino al C60.
48
3.3 Consideraciones finales
La presente tesis constituye un aporte al desarrollo de la química tanto de los esteroides como
de los fullerenos. Para ello se llevaron a cabo métodos de síntesis que permitieron obtener dos
nuevos derivados de la Epiandrosterona cloro-formil sustituidos del tipo 3β-acetoxy-17-cloro-
16-formil-5α-androstan-16-en y 3-cloro-2-formil-5α-androstan-2-en-17-ona mediante la
reacción de Vilsmeier-Haack, la cual ha sido empleada satisfactoriamente en nuestro
laboratorio para la obtención de intermediarios sintéticos muy reactivos, utilizados en el
diseño y síntesis de sistemas moleculares híbridos.
Estos derivados esteroidales permitieron la obtención de cuatro nuevos conjugados del tipo N-
metil-2’-pirrolidin[3’,4’:1’,2’][60]fullereno acopladas a estos fragmentos esteroidales
mediante la reacción de Prato, con rendimientos semejantes a los obtenidos para reacciones
similares.(Tabla 3.3)
Tabla 3.3: Híbridos fullereno-esteroide obtenidos en este trabajo.
Aldehído esteroidal Híbridos
El trabajo sintético en general dió lugar a la obtención de nueve compuestos finales de los
cuales seis son novedosos. Así mismo, se realizó un estudio espectroscópico de todos los
compuestos sintetizados que permitió dilucidar sus estructuras y establecer una base de datos
espectroscópicos para futuros sistemas moleculares híbridos del tipo fullereno-esteroide.
49
Conclusiones y Recomendaciones
Conclusiones
Conclusiones
1. El empleo de una metodología de síntesis basada en la reacción de Vilsmeier-Haack
permitió la obtención de dos nuevos derivados de la Epiandrosterona cloro-formil
sustituidos en los anillos A y D del esqueleto esteroidal, con rendimientos de 78% y 65%
respectivamente. Ambos compuestos fueron caracterizados de forma inequívoca por
RMN-1H, RMN-13C y espectrometría de masas.
2. A partir de los derivados esteroidales, que presentan una configuración conocida, se

obtuvieron cuatro nuevos híbridos del tipo N-metilandrostanpirrolidin[3’,4’:1’,2’]
[60]fullereno por reacción con el C60, dos conjugados por el anillo A y dos por el anillo D.
En ambos casos se obtienen como parejas de diastereoisómeros fácilmente separables, los
cuales fueron caracterizados por técnicas espectroscópicas.
50
Recomendaciones
Recomendaciones
1. Continuar el estudio de la reacción de Prato con el objetivo de mejorar el rendimiento

de los híbridos obtenidos.
2. Realizar ensayos de actividad antioxidante a los nuevos híbridos esteroide-

[60]fullereno sintetizados.
51
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59
Anexos
Anexos
Anexo I: Espectros de RMN-1H y RMN-13C de la Epiandrosterona (8) a 700 y 175 MHz

respectivamente en CDCl3, asi como sus señales espectroscópicas características.
CH3-18
CH3-19
CDCl3
H-3α H-9
CDCl3
C-18
C-3
C-19
C=O
RMN 1H ( ppm): 0.71 (m, 1H, H-9), 0.85 (s, 3H, CH3-19), 0.88 (s, 3H, CH3-18), 2.45 (m,
1H, H-15), 3.61 (m, 1H, H-3α).
RMN 13
C (CDCl3,  ppm): 12.2 (C-19), 13.8 (C-18), 20.4 (C-11), 21.7 (C-15), 28.3 (C-6),
30.8 (C-7), 31.3 (C-2), 31.5 (C-12), 35.0 (C-8), 35.6 (C-10), 35.8 (C-16), 36.9 (C-1), 37.9 (C-
4), 44.8 (C-5), 47.8 (C-13), 51.4 (C-14), 54.4 (C-9), 71.1 (C-3), 220.8 (C-17).
60
Anexos
Anexo II: Espectros de RMN-1H y 13C de compuesto 59 a 700 y 175 MHz respectivamente en
CDCl3.
CH3-18
CH3-19
CH3-21
CDCl3
H-3α
CDCl3
C-19
C-3
C-18
C=O
Acetato
C=O
61
Anexos
Anexo III: Espectros de RMN-13C y RMN-1H a 175 y 700 MHz respectivamente para el
producto de oxidación 61.en CDCl3,
CH3-18 CH3-19
CDCl3
CDCl3
C-18
C-19
C=O C=O
62

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Laboratorio Síntesis Orgánica

Autor: Luis Enmanuel Almagro Rodríguez

José J. Martí Pérez

En este trabajo se reporta la obtención de novedosos derivados de la Epiandrosterona cloro-

CCD Cromatografía de Capa Delgada

Los esteroides han representado excelentes precursores a la hora de abordar la preparación de

disolventes orgánicos, además de formar fácilmente agregados moleculares, incrementando su

El desarrollo de la química de los fullerenos con el objetivo de realizar su funcionalización,

Y como objetivos específicos:

1. Sintetizar derivados esteroidales cloro-formil sustituidos en diferentes posiciones en los

2. Obtener nuevos híbridos tipo fullereno-esteroide mediante el acoplamiento de los

3. Caracterizar todos los compuestos sintetizados.

Capítulo 1: Revisión Bibliográfica

La Naturaleza ha jugado un papel primordial como fuente de inspiración en la búsqueda y

Figura 1.1: Productos naturales obtenidos mediante biosíntesis mixta.

1.1 Esteroides. Aspectos estructurales e importancia biológica

Figura 1.2: Representación espacial del núcleo esteroidal y sistema de numeración.

Los esteroides se clasifican fundamentalmente de dos maneras: la primera, de acuerdo a la

No. de carbonos R No. carbonos en R Nombre

El esqueleto esteroidal es una fuente accesible de rigidez, quiralidad y lipofilicidad,

La mayoría de los esteroides naturales presentan funciones oxigenadas en su estructura, las

Las aplicaciones biológicas de los esteroides se deben principalmente a su función como

Este compuesto y sus derivados son ampliamente empleados como intermediarios en la

Figura 1.4: Derivados de la Epiandrosterona: aminoesteroides (9) y heterociclo-esteroides (10).

Por otra parte, la conjugación de cadenas peptídicas bioactivas a esteroides se ha convertido en

miméticos de la secuencia tripeptídica RGD (Arg-Gly-Asp)‡, con el objetivo de ser utilizados

Figura 1.5: Híbridos péptido-esteroide antagonista de las integrinas.

1.2 Funcionalización de esteroides. La reacción de Vilsmeier-Haack

de reacciones como: clorinación,25 cloroformilación,26 aromatización,27 ciclización,28 entre

Esquema 1.1: Reacción de enamidas esteroidales con el reactivo VH

Esquema 1.2: Protección de grupos hidroxilos mediante reacción de VH en sec-esteroles.

El reactivo de VH es fácilmente preparado por la reacción in situ de una formamida N,N-

Esquema 1.3: Mecanismo de formación del reactivo de VH.

Esquema 1.4: Reacción de cloro-formilación en cetonas enolizables

Tabla 1.2: Cloro-formilación de derivados esteroidales

Figura 1.6: Heterociclos fusionados a esteroides tipo Androsten [17,16-d]

Figura 1.7: Estructura de algunos fullerenos importantes

El C60 fullereno es insoluble o muy poco soluble en la

1.3.1 Reactividad del [60] fullereno. Propiedades químico-biológicas de sus derivados

El desarrollo de la química de los fullerenos se ha basado principalmente en el C60, debido a su

La química del fullereno C60 se caracteriza por la ausencia de átomos de hidrógeno en su

electrónica, las reacciones de apertura y degradación, y las reacciones de adición. El estudio

Esquema 1.5: Reacciones de cicloadición típicas del fullereno C60

transcriptasa inversa, siendo más activos que el Nevirapine,§ mostrando adicionalmente

Adicionalmente, la habilidad del C60 y sus derivados de secuestrar un gran número de

Figura 1.9: Derivados fullerénicos con propiedades biológicas.

1.4 Híbridos esteroide-fullereno

Sin embargo, pese a la multitud de derivados

Figura 1.11: Conjugados fullereno-esteroidales obtenidos mediante reacciones de cicloadición

La síntesis de derivados esteroidales de fullerenos en los cuales, el colesterol o sus derivados

fluidos biológicos y/o portadores farmacológicamente aceptables, y pueden también afectar la

1.5 Preparación de furrelopirrolidinas. Reacción de cicloadición [3+2]

Esquema 1.8: Obtención de fulleropirrolidinas por apertura de aziridinas.

En nuestro grupo de investigación se han realizado estudios encaminados al desarrollo de

También hemos reportado la obtención de conjugados esteroide-[60]fullereno tipo 53 a través

Figura 1.12: Derivados del [60]fullereno

Siguiendo esta metodología de la reacción de Prato, se han sintetizado fulleropirrolidinas tipo

Esquema 1.9: Obtención de híbridos 1,4-DHPs-fulleropirrolidinas.

Esta reacción se llevó a cabo en cantidades equimolares de los reaccionantes y exceso de

1.6 Consideraciones generales

Del análisis realizado de la literatura, se encontró que derivados de la androsterona cloro-

Figura 2.1: Estructura del 5 -androstan-3 -ol-17-ona (8)

2.1.1 Preparación de reactivos

2.2 Equipos y condiciones de registro de espectros