UNIVERSIDAD CENTRAL DEL ECUADOR

FACULTAD DE INGENIERÍA QUÍMICA

CARRERA DE INGENIERÍA QUÍMICA
LABORATORIO DE BIOTECNOLOGÍA INDUSTRIAL

1. TEORÍA
1.1. .Dilución seriada.

Según Vega A;Rodrigues A ,2016, Afirma que :

Estas diluciones son aquellas en las cuales se parte de una solución

concentrada (cultivo debacterias, un reactivo químico, un jugo, etc.) y se va diluyendo
en forma secuencial, cada una a partir de la anterior, manteniendo constante el factor de
dilución. Las diluciones seriadas son también muy útiles en pruebas de rutina clínica e
investigación, pág. 50.

1.2. Aislamiento.

“El aislamiento es una etapa importante en el estudio de microorganismos y comprende

la separación de un microorganismo determinado de las poblaciones mixtas que existen
en la naturaleza y el cultivo presentes en la misma muestra” (Castillo Y; Rugama F,
2010, pág. 47.

1.3. Técnicas de Aislamiento.

Según Luna G; Jiménez J., 2001, Afirma que :
1.3.1. El aislamiento por estría cruzada.- establece un gradiente de dilución por
medio de las estrías cruzadas en la superficie de un medio sólido, dando origen
a colonias aisladas, con esta técnica no se puede contar, solo nos permite aislar
y analizar la morfología colonia
1.3.2. El aislamiento por diluciones decimales.- establece un gradiente de dilución
decimal en un medio líquido, lo cual permite aislar los microorganismos en las
diluciones más altas, y para poner de manifiesto a los microorganismos
aislados se utilizan dos técnicas: el vaciado en placa y la extensión con varilla
de vidrio
1.3.3. La técnica por vaciado en placa.- se utiliza para obtener colonias aisladas y
para contar número de bacterias en la muestra. La técnica consiste en colocar
una alícuota de la dilución de la muestra en un medio sólido fundido y
mantenido a 45°C, se homogeniza y se deja gelificar, posteriormente se incuba
a una temperatura adecuada hasta obtener crecimiento visible. Los
microorganismos se desarrollan sobre la superficie e incluidas en el medio de
cultivo
1.3.4. La técnica por extensión con varilla de vidrio.-se utiliza para aislar, contar y
analizar morfología colonial de las bacterias. La técnica consiste en colocar una
alícuota de la dilución sobre un medio de cultivo previamente gelificado, la
cual se distribuye uniformemente sobre la superficie del medio de cultivo con
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una espátula de vidrio estéril. Los microorganismos solo se desarrollan en la

superficie del medio de cultivo.
1.3.5. El aislamiento por la Técnica de Hungate.- establece un gradiente de
dilución en medio de cultivo sólido fundido contenido en un tubo de Hungate y
mantenido a 45°C, el cual es posteriormente rotado bajo enfriamiento para que
las colonias aisladas queden embebidas en el medio de cultivo gelificado y
adherido a la pared del tubo. Esta técnica se utiliza para aislar y contar número
de bacterias en la muestra, pág. 25-26.
1.4. Dilución seriada en la industria.
1.4.1. Industria Alimenticia

Según Tomas F., 2015, Afirma que:

Las diluciones decimales de un alimento se preparan mezclando una parte de la muestra

con nueve partes del diluyente que habitualmente es disolución salina fisiológica o agua
de peptona [47; 48]. Trabajando en condiciones asépticas (campana microbiológica),
coloque el material enfrente de forma alcanzarlo fácilmente, pág. 44.

1.4.2. Serología

Según Vigliotti L, 2007, Afirma que :

En serología se utiliza ampliamente el proceso de dilución seriada para la realización

de diversas pruebas de rutina clínica y de investigación. Muchas pruebas serológicas
consisten en estimar, de modo semicuantitativo, la cantidad relativa de anticuerpos
séricos contra un determinado antígeno, en un individuo. Para esto se realiza una serie
de diluciones de su suero (u otros tipos de muestras) con un solvente apropiado para la
prueba, y luego se enfrenta cada dilución contra el antígeno de interés, mediante algún
tipo de reacción inmunológica. A mayor concentración de anticuerpos en la muestra,
mayor será la dilución capaz de dar una reacción positiva a la prueba, pág. 20.

1.4.3. Industria Agrícola

Según la Facultad de Ciencias Agropecuarias, 2015, Afirmó que:

Sirve para estimar la población de microorganismos viables en muestras de suelo,

agua o alimentos. La metodología de la técnica se basa en la siembra de volúmenes
secuenciales de base 10 (diluciones) de la muestra pura o 1 mL de las diluciones
decimales. El número de diluciones dependerá de la cantidad de microorganismos
presentes en la muestra (a mayor cantidad de microorganismos mayor cantidad de
diluciones),pág. 37.
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2. Bibliografía
2.1. Vega A;Rodrigues A .(2016.) Inmunología Veterinaria: Manual de prácticas. Recuperado
de
http://asesorias.cuautitlan2.unam.mx/fondo_editorial/comite_editorial/manuales/Inmun
ologiaVeterinaria.pdf
2.2. Castillo Y; Rugama F.(2010). Un enfoque práctico para la inocuidad alimentaria.
Recuperado de:
https://avdiaz.files.wordpress.com/2010/02/documento-microbiologia.pdf
2.3. Luna G; Jiménez J.(2001). Manual de Laboratorio de Microbiología Ambiental.
Recuperado de :
http://www.biblioteca.upibi.ipn.mx/Archivos/Material%20Didactico/MICROBIOLOGIA/Ma
nual%20MICAMB-250511[1].pdf
2.4. Tomas F.(2015). Comparación de Métodos de Siembra en el Análisis Microbiológico de
Pescado. Recuperado de :
http://repositorio.ucm.ac.mz/bitstream/123456789/98/1/LETICIA-TOMAS_TFM.pdf
2.5. Vigliotti L. (2007). Manual de Métodos Inmunológicos. Recuperado de :
file:///C:/Users/Public/Documents/biotecnologia/2007_Manual_Metodos_Inmunologicos
_completo_web.pdf
2.6. Facultad de Ciencias Agropecuarias.(2015). Microbiología Agrícola. Recuperado de:
http://agro.unc.edu.ar/~microbiologia/wp-content/uploads/2014/04/Guia-de-Trabajos-
Practicos.pdf