Filamentos Intermedios, Son

proteínas filamentosas que se desarrollan y son parte del cito esqueleto de la célula,

El cito esqueleto lo forman 3 componentes principales, tenemos los filamentos intermedios los
micro túbulos y los filamentos de actina, esto le da soporte mecánico a la célula, otorgando
resistencia a la deformación y flexibilidad. En el caso de los filamentos intermedios, pueden
estirarse, en un 250-350% extra, participan en las uniones intercelulares los desmosomas y
emidesmosomas, el diámetro de los filamentos intermedios es de 10nm, los micro túbulos son
más grandes de 25 nm y los filamentos de actina que contiene la proteína actina es de 7nm. Aquí
se ven los filamentos en el citoplasma de una célula, en este esquema podemos ver monómeros
de actina, con un diámetro de 7nm aquí se observa el núcleo y la membrana celular y los
filamentos propiamente tal(A), vemos los filamentos intermedios en color verde (miden 10nm en
promedio) y los microtubulos que están compuestos por dos proteínas que es la alfa tubulina y la
beta tubulina y que son los mas largos 25nm.
En la estructura de los filamentos intermedios están compuestos por monómeros, dimeros,
tetrámeros y protofilamentos, obviamente los monómeros cuando son del mismo carácter se les
denomina homodimeros y cuando son distintos se les denomina heterodimeros, entonces la unión
de ambos dimeros van a formar el tetrámero y así estos tetrámeros se unirán unos con otros y
formaran los protofilamentos cuando hay una unión de 8 de estos protofilamentos llegan a formar
lo que es el filamento intermedio que tienen un diámetro de 10nm aproximadamente, pero varia
hasta 12nm y los más importante que le otorga flexibilidad y resistencia a la célula esa es la
característica fundamental de los filamentos intermedios
entre los tipos de filamentos tenemos 5 tipos, los tipo 1, que es keratina acida, tipo 2 queratina
básica, tipo 3 vimentina encontrada en los fibroblastos, leucocitos, células endoteliales, también
tenemos la desmina que es otra proteína que forma parte del tipo 3 de los filamentos intermedios
que lo encontramos en musculo, la proteína fibrilar glial acida y la periferia en el tipo 4
encontramos los neurofilamentos y la alfa internexina que ambos lo encontramos a nivel de las
neuronas y por ultimo las tipo 5 que son las láminas nucleares que lo encontramos básicamente
en la membrana o en la envoltura nuclear, cubren la envoltura nuclear y acá se puede ver en esta
imagen que es una célula de riñón de rata y se observa filamentos de tipo 1, tanto en el citoplasma
como en el núcleo
Al tipo 1 y 2 le vamos a llamar cito queratinas las cito queratinas es un grupo de proteínas que
forman el cito esqueleto de células epiteliales participan en la unión intercelular de tipo
desmosoma que es la unión de una célula con otra y en las uniones de las células aquí se ve, es la
unión de una célula con otra célula, a eso se le llama desmosoma es la unión intercelular. Y las
uniones de emidesmosomas que es la unión de la célula con la membrana basal. Las cito
queratinas las podemos clasificar

existen de distintos tipos, según su capacidad funcional y las dividimos en CK acidas y básicas las
CK principalmente detectan los carcinomas. Las acidas van de la 9 a la 20 y las básicas van de la 1 a
la 8.
Según su peso molecular también las podemos dividir tenemos las CK de alto peso molecular que
vendrían siendo la 1, 5, 10 y la 14 y se expresan en células de carácter basal y las CK de bajo peso
molecular que vendrían siendo la 7, 8, 18, 19 que son de las que más se utilizan, se expresan en
células de carácter luminal,

Entre esos tenemos un coctel de cito queratinas, que se denomina pancito queratina. La pancito
queratina son varias CK entre esos se le llama anticuerpo AE1/AE3. Estas pancito queratinas se van
a utilizar para identificar Carcinomas diferenciados, pobremente diferenciados y tumores de tipo
epiteloide. Acá el clon de la AE1 tenemos las CK de alto peso molecular, acá la sigla esta en ingles
por eso dice HMWCK que están las 10, 14, 15, 16 y las de bajo peso molecular que esta la 19, en el
caso del clon AE3 es lo mismo tenemos un par de CK de bajo peso molecular y hay otras que son
de alto peso molecular como de la 1 a la 6 y también tenemos otro anticuerpo que es el 34beta
E12 que está compuesto por 4 tipos de CK y que también se utiliza para distintos diagnósticos, la
pancito queratina por lo general se utiliza para los tumores indiferenciados por lo general, porque
sabemos cómo tiene tantas CK va a marcar si o si, si es que es un carcinoma

acá hay un ejemplo de la 34betaE12 tinción fibrilar en los queratinocitos y el ejemplo de la CK 20

no se ve muy nítido es tinción globular en tumor neuroendocrino. Se observa un patrón nuclear.
Acá tenemos otro ejemplo es un epidídimo uréter piel hígado, todo marcado con pancito
queratina, no olvidar que este es un coctel de CK tiene muchas tanto de alto como bajo peso
molecular.
Tenemos la de tipo 3, que les había dicho que estaba la vimentina, que son células de origen
mesenquimaticos, tenemos las desminas, células musculares, y las GFAP que son células de la
neuroglia y aquí un ejemplo de vimentina que hay un marcaje de citoplasma basal en células
mesoteliales del epicardio.
 Acá hay un ejemplo musculo liso, musculo cardiaco, musculo esquelético, A y C en estas dos
imágenes, todo está marcado con desmina y el D con actividad muscular específica, CD CK

y acá tenemos una marcación en A con GFAP, B con vimentina y esta de corteza cerebral se
observan astrocitos que se pueden marcar con GFAP las células de shwan, los astrocitos.
En el grupo de los tipo 4 se observan los neurofilamentos, estos están presentes en el citoplasma
de las dendritas y de los axones de las neuronas y se pueden clasificar en 3 que son los livianos
los medianos y los pesados en la imagen A esta marcado con calbindina y se aprecia el soma de
las células de Purkinje y con anti neurofilamentos que es un tejido de cerebelo también está
marcado, se ve ese entramado de todas las prolongaciones nerviosas
 y por ultimo tenemos las tipo 5 que son las láminas nucleares y el soporte filamentoso la capa
interna de la envoltura nuclear, la imagen está marcada con VEGFR-2 y principalmente marca lo
que es envoltura nuclear.
Empezando con los algoritmos diagnósticos, son un diagrama que nos va a permitir dar un
diagnóstico del tumor a diferencia de lo que es que muchas veces se confunden un panel
inmunohistoquimico que viene siendo una tabla que también por un conjunto de varios
anticuerpos podemos diagnosticar un tumor.

Si se nos pregunta, realice un panel inmunohistoquimico para cáncer de mama, nosotros debemos
realizar la tabla, si se nos pregunta por algoritmo, nosotros debemos realizar el diagrama. Es
fundamental.
En resumen teníamos que los filamentos intermedios teníamos distintos tipos, y para poder
realizar un diagnóstico de tumos indiferenciado vamos a utilizar citoqueratinas para diagnóstico de
carcinomas, vimentina para sarcomas, CD45 para hacer diagnóstico de linfoma y S100 para hacer
diagnóstico de melanoma o tumores neurales, esto es lo principal que debemos saber para hacer
un diagnóstico de tumores indiferenciados.

El tumor indiferenciado es el tumor que no se sabe lo que es, entonces se utiliza la herramienta de
la IHQ para saber de qué estirpe viene por lo tanto un tumor indiferenciado tiene diferenciación
de linaje especifico de origen primario incierto, se basa solo en las características morfológicas, no
se sabe de qué estirpe viene y por eso hacemos un panel IHQ primario, por lo tanto en el
diagnóstico de un tumor vamos a tener 2 etapas, la primera etapa es investigar los antígenos con
diferenciación celular para saber de qué estirpe viene y una segunda que vamos a identificar con
marcadores más específicos. Si yo les digo hagamos un panel básico ustedes que van a hacer, van
a pensar al tiro, en una pancito queratina en otra vimentina, CD45 y S100. Si marco con pancito
queratina vamos a saber al tiro que es un carcinoma y a partir del carcinoma uno después la
segunda etapa utilizamos anticuerpos más específicos para saber por ejemplo si es mama o si es
de próstata, etc. (Uno cuando tiene un tumor indiferenciado no se sabe de qué es por eso se
utiliza un panel básico para saber de qué es).Se separan en dos etapas los tumores
indiferenciados, este es el primer algoritmo que se tienen que aprender, el antígeno linfocitario
especifico si me da positivo sabré que es un hepatoma, este es un panel básico, para saber la
estirpe, pero si les preguntamos por un panel para un tumor indiferenciado esto puede ser un
poco más específico de los cuatro principales.

El algoritmo para tumores indiferenciados tenemos el hepatocitario especifico que también

podemos usar el anticuerpo EPAD1 y si me da positivo vamos a confirmar que es un hepatoma el
cual es un tumor benigno, vamos a utilizar pancito queratina si nos da positivo estamos hablando
de que es un carcinoma, CD45 que proviene de un linfoma, actina positivo o musculo especifico
positivo vamos a estar hablando de un sarcoma o también puede ser vimentina pero este es más
específico que la vimentina, S100 positivo HMB-45 positivo vamos a estar hablando de un
melanoma, y PLAP positivo que vamos a estar hablando de un tumor de células germinales, ese es
el algoritmo de tumores indiferenciados que nos debemos aprender.
Después nosotros suponiendo que nos dio positivo en pancito queratina y que estamos en
presencia de un carcinoma realizamos un algoritmo específico para carcinoma. Utilizaríamos el
CK7 y el CK20 que son más específicos, si ambas nos dan positivas vamos a estar en presencia de
un carcinoma de vejiga, en un carcinoma pancreático, de ovario musinoso, si nos da positivo
podemos pensar que pueden ser uno de estos tres carcinomas ahora si no estamos seguros de
que tejido es, lo normal sería saber que tejido es el que estamos analizando. Si nos da CK7 positivo
y CK20 negativo vamos a estar hablando de un cáncer de mama, un carcinoma embrionario, un
adenocarcinoma de pulmón, con un mesotelioma o un carcinoma de ovario no musinoso si se fijan
cuando da ambos positivos hablamos de carcinoma de ovario musinoso en cambio cuando la CK20
da negativo hablamos de carcinoma de ovario no musinoso, hay que tener en cuenta cuando se
clasifique, también podemos decir que puede ser un adenocarcinoma endometrial, carcinoma de
tiroides, carcinoma de de células escamosas de cérvix, en el caso de que CK7 es negativo y CK20
positivos hablamos de carcinoma de colon y carcinoma de células de Merkel, y en el caso de que
CK7 de negativo y CK20 igual negativo, hablamos de un hepatoma, o un carcinoma prostatico o
carcinoma de células renales,
entonces analizando este algoritmo nos damos cuenta que puede ser carcinoma de tiroides, de
mama o de pulmón, por lo tanto se realiza un algoritmo mucho más específico y me encuentro
con este algoritmo que necesito diferenciar si es de tiroides, pulmón o de mama, sabiendo que es
CK7 positivo CK20 negativo , voy a utilizar un anticuerpo que es el TTF1, porque si el TTF1 me da
positivo podemos estar frente a un carcinoma de pulmón o de tiroides, pero como puede ser de
uno de estos dos utilizo otro anticuerpo, la tiroglobulina que es especifica de tiroides entonces
estaríamos hablando que es un cáncer de tiroides. (Se presentó una duda en la clase, esta se
refería a como sé si es positivo TTF1, en este caso uno solo se guía por si se presenta o no la
marcación del anticuerpo, en este caso TTF1 es marcador nuclear entonces si se tiñe el núcleo
quiere decir que es positivo y podría ser carcinoma de pulmón o de tiroides, para salir de la
incógnita de cuál de los dos es, se utilizó tiroglobulina que es especifico de tiroides si esta marca es
positivo o sea que es de tiroides y si no presenta marcación seria de pulmón) Si queremos ser más
específicos podemos saber de qué variante es el carcinoma de tiroides ejemplo si es folicular, y ahí
se van utilizando otros anticuerpos más específicos para saber cuál es la variante. En el caso de
que TTF1 me dé negativo, vamos a estar en presencia de un carcinomas de mama o mesotelioma y
para utilizarlo vamos a utilizar estos anticuerpos igual para diferenciar si es de mama o
mesotelioma,
acá tenemos un algoritmo de cáncer mamario para hacer un análisis diferencial, ya sabemos que
nos encontramos con un cáncer de mama, pero queremos saber qué tipo es, si es ductal, túbulo
lobular o lobular. Aquí se utilizarían otros anticuerpos, en este caso E-cadherina, P120, que si nos
da positivo negativo vamos a hablar de un carcinoma ductal, la E-cadherina cuando me da positivo
en mama siempre será de cáncer que proviene de células dorsales, un carcinoma ductal, en el caso
que me de negativo vamos a hablar de carcinoma lobular (E-Cadherina +ductal, -lobular o
lobulillar). La P120 corrobora que estamos en presencia de carcinoma de mama.
El tumor de células germinales tenemos el PLAP positivo y podemos utilizar de nuevo pancito
queratina para saber si es un seminoma o si nos da positivo vamos a estar en presencia de un
carcinoma embrionario, tumor de saco de yolk y un coriocarcinoma.
Linfomas, acá tenemos linfomas de células B y T, podemos diferencia los linfomas de hodgkin’s y
los de hodgkin y la cantidad de marcadores que podemos utilizar para diferenciarlos, es
importante saber que el CD3 cuando da positivo vamos a estar hablando de linfomas de células T y
cuando hablamos de células B utilizamos el marcador CD20 que da positivo. Acá este +/- quiere
decir que es variable puede ser positivo o negativo, se utiliza un análisis diferenciado con otros
marcadores.
En resumen, en los marcadores generales dijimos que tenemos estirpe de células epiteliales el
tumor va a ser un carcinoma y el filamento intermedio va a ser de queratina, el tejido
mesenquimatico vamos a decir que es un sarcoma y el filamento intermedio o la proteína que
viene después la vimentina, en el caso del tejido muscular vamos a hablar de miosarcoma y el
filamento intermedio es la desmina, el tejido glial el tumor es un glioma y el filamento intermedio
va a ser GFAP, y el tejido neural que el tumor seria el neural y filamento intermedio vendría siendo
el neurofilamento. Resumen de filamentos intermedio de los marcadores generales.
Marcadores de tejido especifico, ejemplo si estamos hablando de un tumor de tiroides vamos a
utilizar tiroglobulina para saber que es tiroides y no otro, el de próstata tenemos el antígeno
prostático específico o fosfatasa acida. En tejido placentario tenemos el marcador placentario
(PLAP) y en mama, mamaglobina y GCDFP-15.
En el Caso de tiroides se utiliza la tiroglobulina, acá podemos ver los folículos tiroideos y va a tener
una marcación intensa del citoplasma de las células foliculares, igual se observa el coloide.
Vamos a tener el PSA, marcador que se utiliza en cáncer de próstata por lo general y su metástasis
y aquí se ve la glándula prostática con marcación citoplasmática.
Fosfatasa alcalina placentaria es para la aplicación de tumores germinales por ejemplo el
seminoma (tumor de testículo) que es lo que observamos en esta imagen, con marcación de
membrana
La fosfatasa prostática específica para aplicación en carcinoma de próstata y también su
metástasis y aquí también vemos la glándula de la próstata marcada con un patrón citoplasmático.

La mamaglobina específico para cáncer mamario y su metástasis y acá vemos un carcinoma de

mama con patrón citoplasmático
y GCDFP-15 proteína del líquido de la enfermedad quística, se utiliza para carcinoma mamario y su
metástasis especifico de mama.
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Marcadores tumorales, para melanoma tenemos el HMB 45, Melan-A(melanositos), S100.

En el caso de tumor de ovario tenemos el CA-125(citoplasmático), en Colon en CEA y en tumores

germinales es AFP. Antigeno carcinoembrionario (CEA), se aplican para carcinoma de colon y
pulmón
acá tenemos una glándula donde se marca citoplasma.
Alfa fetoproteína (AFP) se aplica para hepatocarcinomas(carcinoma de hígado) y algunos tumores
germinales. En esta imagen se observa un carcinoma hepatocelular, con una tinción
citoplasmática.

También tenemos marcadores de tipo endoteliales factor de von willebrand,CD31 , actina musculo
liso, CD34, CD117. Se aplica a tumores de tipo vascular.
Acá estamos viendo un tejido de estómago humano con marcación citoplasmático
en el caso del CD31 también es utilizado para tumores vasculares vemos un vaso alargado
y el CD34 que es un carcinoma ductal de mama.

En el caso de los marcadores neuroendocrinos tenemos la sinaptofisina, Enolasa neurono

específica, la cromogranina y calcitonica, todos estos son específicos para tumores
neuroendocrinos.
 La sinaptofisina, en este caso vemos un carcinoma de mama con diferenciación neuroendocrina,
con marcación citoplasmática.
Enolasa neurono específica se observa tejido nervioso marcado.
Cromogranina marcación parecida a sinaptofisina se tiende a confundir, pero cuando uno tiene un
tumor neuroendocrino, uno utiliza los 2 anticuerpos.

Marcadores para detección muscular, y entre esos tenemos desmina, actina, mioglobina y todos
los terminados en ina, para distintos tipos musculares,
en este caso tenemos la desmina con un patrón citoplasmático, el tejido es musculo esquelético
humano

la actina que también es un marcador para detección muscular y en el caso de la actina nos va a
diferenciar entre tumores de músculos lisos y estriados, en este caso es un leiomiosarcoma.
La mioglobina, en este caso estamos en presencia de musculo esquelético humano, y la marcación
de la mioglobina citoplasmático.

Miogenina para rabdomiosarcoma, esta es de patrón nuclear

MyoD1 también para rabdomiosarcoma pero este no se va a expresar en musculo esquelético
maduro, por lo tanto va a ser un marcador diferencial ya que si no se expresa en musculo
esquelético maduro, si me da positivo, podemos estar hablando de musculo liso.

También tenemos los marcadores de hormona, receptores y proteínas reguladas por hormonas y
entre esos tenemos receptores de estrógeno, progesterona, testosterona, la tiroestimulante,
insulina, entre otros.
En este caso estamos hablando de receptores de estrógeno en mama, el receptor de estrógeno es
un marcador nuclear

el receptor de progesterona igual se expresa en el núcleo

y también para cáncer de mama, el HCG se utiliza para la aplicación de tumores de origen
germinal. En esta imagen se ve una placenta humana con una marcación de tipo citoplasmática.

Marcadores de histiocitos, tenemos lisozimas, CD68, alfa-antitripsina.

CD68 se va a aplicar para tumores de macrófagos y estudios de casos inflamatorios, acá vemos una
imagen de un hígado de rata.

Marcadores de linfositos o CD45 y CD68.