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CULTIVO DE ROTÍFEROS

PHYLUM ROTÍFERA
 Grupo de organismos filtro alimentadores microscópicos
(pluricelulares).
 Rotatoria (=Rotífera).
GÉNERO BRACHIONUS

 Entre los rotíferos del género


Brachionus se encuentra la especie
plicatilis

 Esta especie comprende en realidad


dos especies eurihalinas:
 Tipo S (pequeña), Brachionus
rotundiformis. Longitud de la
loriga: 100-210 μm
 Tipo L (grande), Brachionus
plicatilis. Longitud de la loriga:
130-340 μm

Diferentes morfotipos de rotíferos:


A) B. plicatilis y B) B. rotundiformis
GÉNERO BRACHIONUS
B. ROTUNDIFORMIS B. PLICATILIS

TIPO “S” TIPO “L”

RANGO RANGO RANGO


RANGO
PARAMETRO
ACEPTABLE
OPTIMO ACEPTABLE OPTIMO

TOC 28 – 35 29 18-25 24

O.D. (MG/L) 2 5-7 2 5–7

SALINIDAD (O/OO) 10 – 20 15 32 – 35 15-25

PH 6.6 -8.0 7.5 6.6 -8.0 7.5

AMONIO (MG/L) <0.1 0 <0.1 0

FOTOPERIODO 16h luz / 8h oscuridad 24h luz 16h luz / 8oscuridad 24 h luz

Parámetros físico-químicos recomendados para el


cultivo de B. plicatilis y B. rotundiformis.
BRACHIONUS PLICATILIS

Primer alimento para larvas de peces marinos


 tamaño pequeño
 natación lenta
 capacidad de mantenerse suspendido en la columna
de agua
 puede ser cultivado en altas densidades
 alto índice reproductivo
 puede ser enriquecidos para mejorar su composición
EL CICLO DE VIDA DE B. PLICATILIS

Brachionus presenta dos modos de reproducción:


R. sexual y R. asexual.
SISTEMA DE CULTIVO

El proceso de cultivo consta de dos fases


distintas:

 Mantenimiento de un stock
(volúmenes pequeños) .

 Cultivo masivo (cultivo en gran


volumen).
SISTEMA DE CULTIVO
Mantenimiento de un stock

 La cepa se mantiene en volúmenes pequeños (tubos de fondo cónico de 50


ml) con densidad de 1 rotífero por ml -1rot/ml-) y se inoculan a volúmenes
mayores hasta alcanzar una densidad de 100 rot/ml.

 Alimentado con mezcla de microalgas (Tetraselmis, Isochrysis y


Nannochloropsis)
SISTEMA DE CULTIVO

Cultivo masivo

 Cultivo de recolección completa (cultivo “batch” o en tandas)


 Consiste en inocular el cultivo y una vez que se ha alcanzado
densidad máxima se realiza la cosecha completa.
 Aumentamos el volúmen, manteniendo la concentración en 100
rot/ml.

DIAS DE CULTIVO TIPO DE ALIMENTACIÓN


 Alimentación con mezcla de 0 Microalga
1
microalgas (Tetraselmis, Microalga
2 Microalga
Isochrysis y Nannochloropsis +
3 Microalga + Levadura
levadura (1g/mill. rot.) 4 Levadura
5 Cosecha y Re-siembra
SISTEMA DE CULTIVO

Cultivo masivo

Cultivo masivo de rotíferos a) inóculo inicial 1L b)


inónulo de 3L c) inóculo de 20L d) bolsas de 140 L
COSECHA Y LAVADO DE ROTIFEROS
 La cosecha y lavado se realiza cada 5 días, para desdoblar el
cultivo, escalar la producción, y remover los sedimentos y
contaminantes del cultivo.
 Primero pasan los rotíferos por un tamiz de 200µm para quitar
basura y partículas grandes, recibiéndose finalmente en un tamiz de
50 µm para su lavado.
CONTEO DE ROTIFEROS
En un porta objetos excavado o cámara de Sedgwick-Rafter de hasta 5 ml, bajo
estereoscopio o microscopio.
RUTINA DIARIA

 Registro diario de parámetros físico-químicos (temperatura, oxigeno,


salinidad y pH) y anotar en bitácora.

 Conteos poblacionales diarios en los tanques de cultivo de rotíferos y


anotar en bitácora.

 Alimentación de rotíferos con microalga y levadura (en su caso).

 Cosecha diaria de tanques de rotíferos, según sea el tanque que


corresponda cosechar.

 Lavar y desinfectar los tanques cosechados.

 Inocular y/o reinocular el tanque que se requiera.

 Lavado y desinfección de materiales y piso del área.


MEDIDAS DE HIGIENE
 Presentar buen estado de salud, evitar hablar mientras se realizan los desdobles y evitar
estornudos.

 Desinfectarse las manos con alcohol 70% antes de agitar las cepas y al realizar los
inóculos.

 Desinfectar el material con solución desinfectante de cloro o ácido.

 Utilizar material estéril para inocular tubos de ensayo y matraces.

 Mantener tapados los cultivos, para evitar la contaminación con otros microorganismos.

 Aislar el material sucio, ya que este puede ser tomado accidentalmente y ser utilizado
para inocular cultivos de distinta especie.

 Realizar los cultivos por separado.

 Mantener libre de adherencia las mangueras de aireación, asearlas frecuentemente.

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