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INMUNIDAD NATURAL
· Mediadores solubles:
Interferón (inmunoferón) alfa y beta (INF e INF): Son
producidos por leucocitos y fibroblastos respectivamente, al igual que otras
células y son citoquinas que pueden inducir a las células no infectadas a
resistir la replicación vírica. Se producen en fases muy precoces de la
infección y constituyen la primera línea defensiva frente a muchos virus. Los
INF desempeñan tres funciones principales. En primer lugar, inducen
resistencia a la replicación vírica activando los genes celulares que
destruyen el ARNm e inhiben la traducción de proteínas víricas y algunas del
huésped. En segundo lugar, inducen la expresión del complejo mayor de
histocompatibilidad (MHC) de clase I en la mayoría de las células no
infectadas del cuerpo, aumentando así la resistencia a las células NK y en las
nuevas células infectadas por el virus, haciendo que sean más susceptibles
de eliminación por células T CD8 citotóxicas. En tercer lugar, activan las
células NK que destruyen las células infectadas por el virus de forma
selectiva.
Interleucinas: Son citocinas producidas por los leucocitos. Inducen el
crecimiento y diferenciación de linfocitos y células precursoras
hematopoyéticas. Muchas interleucinas conectan la respuesta inmunitaria
innata con la adaptativa.
Factor de necrosis tumoral (TNF): Se trata de un citoquina
secretada por las células T CD4 inflamatorias y es directamente citotóxica
para algunas células.
Quimioquinas (IL8):
Las citoquinas TNF, IL-1 e IL-6 presentan un amplio espectro de
actividades biológicas que ayudan a coordinar las respuestas del cuerpo a la
infección, hacen lo mismo pero TNF es el más potente. Las IL-1, IL-6 y el
TNFa activan a los hepatocitos para sintetizar proteínas de fase aguda, y al
endotelio de la médula ósea para liberar neutrófilos. Las proteínas de fase
aguda actúan como opsoninas, mientras que la eliminación de los agentes
patógenos opsonizados se incrementa por un reclutamiento amplificado de
neutrófilos desde la médula ósea. Las IL-1, IL-6 y el TNFa son también
pirógenos endógenos que aumentan la temperatura del cuerpo, lo cual
parece contribuir a eliminar las infecciones. Un efecto importante de estas
citoquinas es su actuación en el hipotálamo alterando la regulación de la
temperatura del cuerpo, y en las células musculares y adipositos alterando la
movilización de la energía a fin de aumentar la temperatura del cuerpo. A
temperaturas elevadas, la replicación vírica y bacteriana disminuye,
mientras que la respuesta inmunitaria adaptativa opera de forma más
eficiente. El TNFa estimula la migración de las células dendríticas de sus
localizaciones en tejidos periféricos al ganglio linfático, y su migración a
células presentadoras de antígeno no fagocíticas, pero altamente
coestimuladoras.
Se estudia inmunología por los aspectos metodológicos: ha conseguido crear herramientas como
los anticuerpos monoclonales que permiten la identificación de células y tejidos e incluso se
puede utilizar en otras ciencias de la vida como la farmacología para la administración de
fármacos que nos interesa que actúen en un lugar concreto y específico del organismo y no en
otro, es decir, que el anticuerpo se cargaría con el fármaco y actuaría como una bala mágica que
se dirige al punto concreto donde se quiere que ese fármaco tenga una intervención terapéutica.
Los grandes avances de la inmunología se han conseguido cuando los científicos consiguen
manipular de forma controlada el sistema inmune y de esta manera empezaran a aparecer las
primeras vacunas.
El origen de la inmunología se atribuye a Edward Jenner (1749-1823), que descubrió en
1796 que la viruela vacuna proporcionaba protección frente a la viruela humana, enfermedad a
menudo letal. Jenner tomó líquido de una pústula de una vaquera y lo inoculó a un niño de ocho
años, James Phipps, quien desarrolló la enfermedad vacuna leve. Dos meses después volvió a
inocularlo, pero esta vez con materia procedente de pústulas de viruela humana y el niño no
desarrolló la enfermedad.
En la década de 1880, Louis Pasteur (1822-1895) elaboró una vacuna contra el cólera de las
gallinas y desarrolló una vacuna frente a la rabia que obtuvo un éxito espectacular tras su primer
ensayo en un niño que había sido mordido por un perro rabioso. Pasteur utilizó el virus de la
rabia inactivado (cultivado en un medio en el cual perdió su virulencia) y se convirtió en el
primer gran inmunólogo experimental.
CÉLULAS
Neutrófilos, Eosinófilos y Basófilos Linfocitos T y B
Fagotitos/Macrofagos
NK
MOLÉCULAS CIRCULANTES
Sistema del complemento Anticuerpos
Proteínas de fase aguda
MEDIADORES SOLUBLES
Citoquinas de macrófagos Citoquinas del linfocito T
Inmunoferón alfa y beta Inmunoferón gamma
IL 1, IL 6 Otras interleuquinas
IL 8
TNF alfa
El resto de afirmaciones son correctas ya que la vía alternativa de activación del complemento
dispara las mismas acciones antimicrobianas que la vía clásica, pero sin la demora de 5-7 días
necesaria para la producción de anticuerpos. También es correcto que las tres vías convergen en
la activación de la actividad enzimática C3 convertasa. La IgM y la IgG son exclusivas y
necesarias para la activación de la vía clásica. Por último, las tres consecuencias principales de la
activación del complemento son: la opsonización, reclutamiento de células inflamatorias y la
muerte directa de patógenos.
ESPECÍFICA O ADQUIRIDA
1. Con cual de estos antígenos reaccionaría, con una mayor probabilidad los
linfocitos encargados de la inmunidad celular:
a) Antígenos lipídicos solubles
b) Antígenos lipídicos insolubles
c) Antígenos de naturaleza polisacárida
d) Antígenos proteicos de secuencias peptídicas cortas
e) Antígenos proteicos de secuencias peptídicas largas
Los anticuerpos son los receptores del linfocito B. Cuando se activa el linfocito B, se liberan
anticuerpos al medio que pueden neutralizar al agente patógeno y facilitar la fagocitosis; actuar
como opsoninas recubriendo al microorganismo y producir la fagocitosis; o también pueden
provocar directamente la lisis del patógeno junto con la activación de opsoninas del
complemento.
1. Con cual de estos antígenos reaccionaría, con una mayor probabilidad los linfocitos
encargados de la inmunidad celular:
f) Antígenos lipídicos solubles
g) Antígenos lipídicos insolubles
h) Antígenos de naturaleza polisacárida
i) Antígenos proteicos de secuencias peptídicas cortas
j) Antígenos proteicos de secuencias peptídicas largas
Las células efectoras diferenciadas que derivan de un linfocito activado poseen receptores con
especificidad idéntica a la de las células parentales de las que dichos linfocitos derivan.
4. Acerca de las características de las respuestas inmunitarias adaptativas, ¿cuál de las siguientes
afirmaciones es falsa?:
f) El sistema inmunitario responde de diferentes formas ante diferentes microorganismos.
g) El repertorio global de linfocitos de un individuo es extremadamente amplio.
h) Las respuestas inmunitarias son específicas para los diferentes agentes.
i) Las respuestas inmunitarias normales aumentan de intensidad con el tiempo
después de la estimulación por el antígeno, permitiendo una respuesta más eficaz del
sistema inmune.
j) El sistema inmunitario tiene capacidad para reconocer, responder y eliminar agentes
extraños a la vez que no reacciona perjudicialmente frente a sustancias antigénicas
propias del individuo.
Todos los linfocitos T tienen CD3. Los Th son además CD4+ y los Tc CD8+.
CD: Cluster of Differentiation (Marcador fenotípico). Son proteínas de
membrana que nos permiten reconocer una célula específica.
Células Natural Killer (NK): Son células grandes, con núcleo excéntrico,
con una gran cantidad de gránulos en el citoplasma que llevan perforinas y
granzimas. Son células citotóxicas, que atacan principalmente a líneas
tumorales y a células infectadas por virus. Poseen receptores KIR, KAR y
receptores para la fracción Fc de la IgG.
La NK chequea todas las células que encuentra a su paso, si la célula
es normal se suelta y sigue su camino. En el caso de que la NK reconozca un
célula tumoral, se une fuertemente y vierte los gránulos de perforinas y
granzimas, y la NK se suelta. En este proceso, la célula pierde parte de su
citoplasma e induce la apoptosis de la célula tumoral. Esta NK al perder
parte de ella, es una célula debilitada; en el caso de tumores el paciente
posee una población de células NK muy debilitado debido al combate
continuo con las células tumorales.
A partir de las células madre hematopoyéticas se originan todas las células de la sangre, incluidos
los linfocitos. Estas células pluripotentes se dividen para producir dos tipos de células madre más
especializados:
Progenitor linfoide, que genera los linfocitos T y B. Estos se distinguen por las
localizaciones donde maduran y por sus receptores de antígeno. También a partir de este
progenitor se genera las células Natural Killer (NK).
Progenitor mieloide, que genera los polimorfos nucleares: eosinófilos, neutrófilos y
basófilos, un precursor desconocido que dará lugar a los mastocitos, monocitos que
formarán los macrófagos (glóbulos blancos), eritrocitos (glóbulos rojos) y megacariocitos
que producen plaquetas.
Aún no se conocen los factores que determinan la transformación de la célula madre a los
progenitores linfoide y mieloide.
Los linfocitos y las células accesorias las encontramos en los órganos linfoides; y los linfocitos y
las células efectoras se encuentran en los órganos linfoides, sangre y tejidos.
La NK chequea todas las células que encuentra a su paso, si la célula es normal se suelta y sigue
su camino. En el caso de que la NK reconozca un célula tumoral, se une fuertemente y vierte los
gránulos de perforinas y granzimas, y la NK se suelta. En este proceso, la célula pierde parte de
su citoplasma e induce la apoptosis de la célula tumoral. Esta NK al perder parte de ella, es una
célula debilitada; y en casos de tumores crónicos el paciente posee una población de células NK
muy debilitado debido al combate continuo con las células tumorales.
b) Inmunidad humoral:
Fagocitan partículas opsonizadas con anticuerpos: células efectoras de la inmunidad
humoral.
Los macrófagos poseen en su superficie una serie de proteínas que permiten su identificación:
CD14, que es un receptor del lipopolisacárido bacteriano (LPS); CD64, CD32 y CD16, que son
receptor de la fracción Fc de los anticuerpos; CD35, que es el receptor para C3b (proteína del
complemento); y CD11a, b y c, son moléculas de adhesión del macrófago.
3. Las células con receptores de alta afinidad para la parte Fc de las IgE (FceRI) son:
f) Eosinófilos y neutrófilos.
g) Neutrófilos y macrófagos.
h) Histiocitos.
i) Linfocitos T y linfocitos B.
j) Basófilos, mastocitos y eosinófilos.
La respuesta correcta es la 5, ya que las células con FceRI son los basófilos y mastocitos, de
forma constitutiva y los eosinófilos de forma inducible.
El resto de respuestas son incorrectas, ya que:
-Fc?RI (CD64) aparece en macrófagos, neutrofilos, eosinófilos y células
dendríticas.
-Fc?RII-A (CD32) se encuentra en macrófagos, neutrófilos, eosinófilos, plaquetas y células de
Langerhans.
-Fc?RII-B2 (CD32) está en macrófagos, neutrófilos y eosinófilos.
-Fc?RII-B1 (CD32) aparece en células B y mastocitos.
-Fc?RIII (CD16) está en células NK, eosinófilos, macrófagos, neutrófilos, y mastocitos.
-FcaRI (CD89) se encuentra en macrófagos, neutrófilos y eosinófilos.
4. De los siguientes tipos celulares, indique aquellas que son CPA (células presentadoras de
antígeno profesionales):
f) Células T CD8+.
g) Células de Langerhans.
h) Neutrófilos.
i) Células T CD4+.
j) Histiocitos.
De las células que se exponen en las respuestas solo las células de Langerhans son células
presentadoras de antígeno (APC). Las APC son los linfocitos B, las células dendríticas (las
células de Langerhans son células dendríticas de la epidermis) y los macrófagos. Ni los linfocitos
T (CD4+ o CD8+), ni los monocitos ni los neutrófilos son células presentadoras de antígeno
profesionales.
TEMA 4. ANATOMÍA FUNCIONAL DE LOS ÓRGANOS LINFOIDES
· Médula ósea
En la médula ósea hematopoyética, o médula ósea roja, se producen
las células sanguíneas mediante un proceso denominando hematopoyesis.
Esta médula ósea roja se encuentra en el tejido trabecular o esponjoso.
Durante el desarrollo embrionario, la hematopoyesis ocurre en el hígado.
· Timo
Es un órgano bilobulado, situado en el tórax, bajo la parte superior del
esternón. Está rodeado por una cápsula de tejido conjuntivo que forma
invaginaciones denominadas trabéculas. Estas trabéculas dividen al timo en
lobulillos. La vascularización y la inervación discurren por estas trabéculas.
En el timo encontramos en cada lóbulo, una región superficial denominada
corteza y una región más profunda denominada médula.
· Bazo
Este órgano, que ejerce funciones de depuración sanguínea, se
encuentra dentro de la cavidad peritoneal, detrás del estómago y cercano al
diafragma. Todo el bazo se encuentra irrigado por la arteria esplénica, que
forma grandes redes que recubre al órgano. Es un órgano que sangra con
mucha facilidad. Está rodeado por una cápsula conjuntiva que emite
trabéculas hacia el interior y sirven de apoyo a las diferentes células que
forman el parénquima del bazo está constituido por dos tipos de tejidos:
La pulpa roja, donde se destruyen los eritrocitos que han
perdido funcionalidad (aclaramiento sanguíneo). Por lo tanto, los
individuos sin bazo, poseen una mayor cantidad de células en el
torrente circulatorio y por consiguiente una mayor viscosidad y un
mayor riesgo de trombosis.
La pulpa blanca. Es la encargada de filtrar los patógenos
que penetran por vía sanguínea. En cada trabécula se encuentra una
arteriola de la arteria esplénica, y está rodeada por un seno marginal
que posee una lámina linfoide pariarteriolar (PALS) rica en linfocitos T,
y folículos donde se encuentran los linfocitos B. Esta disposición
favorece la presentación del antígeno y la cooperación entre los
linfocitos B y T.
El sistema linfático recoge todo el líquido intersticial en los diferentes tejidos del organismo,
para terminar drenando en el sistema circulatorio sanguíneo a través de la vena cava superior. El
sistema linfático es un sistema paralelo al circulatorio, y es donde se filtran todos los patógenos
que entran en la linfa.
En lo mamíferos, la médula roja se localiza en las cabezas de los huesos largos, como el fémur, y
en los intersticios de los huesos esponjosos, como el esternón, cuerpos vertebrales o la pelvis. En
ella se forman y diferencian la mayoría de las células sanguíneas a partir de una población
común de células madre, indiferenciadas y pluripotenciales. Estas células se consideran:
Células madre, por ser el origen de todas las células sanguíneas
Indiferenciadas, porque no se han especializado en funciones definidas
Pluripotenciales, por poseer el potencial de generar cualquier tipo de célula sanguínea.
La demanda del organismo, según las necesidades, y la actuación de los diferentes
factores de crecimiento, permite la diferenciación de las células sanguíneas.
Los leucocitos se originan en la médula ósea (leucopoyesis), desde donde pasan a la sangre.
Durante más o menos tiempo, según el tipo de células, se mantienen como leucocitos circulantes
que recorren el cuerpo por el torrente circulatorio. Los monocitos abandonan posteriormente la
sangre para establecer en diversos tejidos y cavidades del cuerpo, donde se convierten en
macrófagos. Los linfocitos abandonan, asimismo, el torrente circulatorio para ubicarse en los
distintos órganos linfoides secundarios.
Timo
Es un órgano bilobulado, situado en el tórax, bajo la parte superior del esternón. Está rodeado por
una cápsula de tejido conjuntivo que forma invaginaciones denominadas trabéculas. Estas
trabéculas dividen al timo en lobulillos. La vascularización y la inervación discurren por estas
trabéculas. En el timo encontramos en cada lóbulo, una región superficial denominada corteza y
una región más profunda denominada médula.
En el timo maduran y se educan los linfocitos T. La médula ósea suministra células precursoras
que entraran en el timo para su diferenciación. Cuando llegan a la corteza, se denominan
pretimocitos o timocitos, que son células inmaduras y en proliferación. Además en la corteza,
también encontramos células estromales del timo (células epiteliales y otras células que
intervienen en la diferenciación de los linfocitos como son las células dendríticas y los
macrófagos). Cuando los timocitos pasan de la corteza a la médula van diferenciándose a
linfocitos T, ello implica la existencia de un gradiente de diferenciación desde la corteza hacia la
médula.
La mayoría de los timocitos (>95%) no superan los procesos de selección y mueren dentro del
timo, siendo eliminados por células fagocíticas con función de basurero (corpúsculos de
Hassall). Esta criba se produce a nivel de la frontera cortico-medular., y sólo pasan los timocitos
que no reconocen a lo propio. Los que sobreviven, convertidos en células T maduras,
abandonan el timo para sumarse al torrente circulatorio, a través del endotelio especializado de
las vénulas postcapilares, o por los vasos linfáticos eferentes. Pueden ser linfocitos T helper o T
citotóxicos. Los linfocitos T maduros se dirigen hacia los ganglios linfáticos, el bazo o el MALT.
Los ganglios linfáticos poseen una cápsula que lo envuelve, y emite trabéculas que dividen al
ganglio en lóbulos. Encontramos una corteza, que posee folículos linfoides primarios y
secundarios. Los folículos primarios poseen linfocitos B en reposo, mientras que en los
secundarios se produce la activación del linfocito por la presencia de un antígeno, y aparece un
centro germinal donde los linfocitos B en reposo se activan. También encontramos una zona
paracortical, donde están los linfocitos T; los senos y cordones medulares donde se encuentran
células plasmáticas, células dendríticas y macrófagos. Esta disposición de las células favorece la
presentación del antígeno por la APC tanto al linfocito B como al linfocito T, y también se
consigue esta disposición celular gracias a un proceso que se conoce como homing (que es
distinto del reclutamiento). Cuando hay un proceso inflamatorio, hay un efecto de llamada por
las citoquinas para que las células vayan al foco inflamatorio a defender, pero en este caso las
citoquinas no intervienen en esta disposición, sino que son unas moléculas de adhesión que
hacen que las células estén en esa disposición específica para favorecer la presentación del
antígeno a los linfocitos T y B.
Los microorganismos que, por sus factores de virulencia, resisten frente a las defensas existentes
en los ganglios salen de ellos con la linfa y alcanzan la circulación sanguínea que los disemina
por el organismo. Esta infección de la sangre por microorganismos se denomina septicemia.
Según sean los microorganismos infectantes, bacterias, virus u hongos, la septicemia puede
denominarse bacteriemia, viremia o fungemia, respectivamente. Cuando esto ocurre (o cuando
los microorganismos llegan directamente a la sangre), la mayor probabilidad de controlar
inmunológicamente la situación correrá a cargo del bazo.
Bazo
Este órgano, que ejerce funciones de depuración sanguínea, se encuentra dentro de la cavidad
peritoneal, detrás del estómago y cercano al diafragma. Todo el bazo se encuentra irrigado por la
arteria esplénica, que forma grandes redes que recubre al órgano. Es un órgano que sangra con
mucha facilidad. Está rodeado por una cápsula conjuntiva que emite trabéculas hacia el interior y
sirven de apoyo a las diferentes células que forman el parénquima del bazo está constituido por
dos tipos de tejidos:
La pulpa roja, donde se destruyen los eritrocitos que han perdido funcionalidad
(aclaramiento sanguíneo). Por lo tanto, los individuos sin bazo, poseen una mayor
cantidad de células en el torrente circulatorio y por consiguiente una mayor viscosidad y
un mayor riesgo de trombosis.
La pulpa blanca. Es la encargada de filtrar los patógenos que penetran por vía sanguínea.
En cada trabécula se encuentra una arteriola de la arteria esplénica, y está rodeada por un
seno marginal que posee una lámina linfoide pariarteriolar (PALS) rica en linfocitos T, y
folículos donde se encuentran los linfocitos B. Esta disposición favorece la presentación
del antígeno y la cooperación entre los linfocitos B y T.
Los anticuerpos pueden aparecer en la membrana del linfocito B como receptores de membrana;
o en forma secretada, que en el caso de la IgM y de la Ig A forma estructuras pentaméricas y
dimérica, respectivamente. Cuando el anticuerpo se encuentra en la membrana, su función es el
reconocimiento de los antígenos patógenos por medio de la región variable; y cuando está en
forma soluble, tiene una función de reclutamiento de células y moléculas para destruir el
patógeno por medio de la región constante.
Dominios moleculares
Los distintos dominios de los anticuerpos se disponen formando bucles debido a la existencia de
puentes disulfuro intracatenarios, que aparecen entre las cadenas ligeras y pesadas, entre los
residuos de cisteína. Estos dominios han configurado la superfamilia de las inmunoglobulinas.
Regiones hipervariables
Las cadenas variables poseen cierta variabilidad que le sirve para reconocer distintos tipos de
antígenos. Pero esta variabilidad se agrupa en las regiones variables. En estas regiones variables
se distinguen dos tipos de regiones: las regiones marco o FR (framework region) (FR1, FR2,
FR3 y FR4), que son algo más constantes y dan el armazón a las regiones hipervariables, y las
regiones CDR o regiones determinantes de complementariedad (CDR1, CDR2 y CDR3, esta
última es la más hipervariable) que son zonas hipervariables y son las zonas donde se une el
antígeno.
Los dominios constantes y variables de los anticuerpos tienen una disposición fibrilar,
antiparalela, que se conoce como diposción . En el centro de esta disposición aparece un barril,
que se mantiene así debido a la presencia de aminoácidos hidrofóbicos. En el caso de los
dominios variables, y más concretamente los dominios hipervariables se encuentran fuera de este
plegamiento, ya que participan en el reconocimiento del antígeno.
Los calostros, que son las primeras secreciones de leche tras el parto, son muy ricos en IgA. Por
esto se ha de potenciar la lactancia, ya que confiere inmunidad pasiva al lactante. En el caso de la
Ig M, si se encuentra en el niño recién nacido, este ha sufrido una infección intrauterina y ha
tenido que desarrollar una respuesta inmune por si mismo (vía de urgencia), ya que estos no han
podido cruzar la barrera placentaria desde la madre.
En una electroforesis de las proteínas plasmáticas aparecen dos bandas: la albúmina y las
globulinas.
5) Los distintos tipos de inmunoglobulinas llevan a cabo funciones diferentes según la estructura de la
región Fc, puesto que ésta determina la función del anticuerpo. Según esto, ¿cuál de las siguientes
afirmaciones acerca de la función de los distintos tipos de anticuerpos es falsa?:
a) Las IgG e IgM están implicadas en la activación de la vía clásica del complemento.
b) La IgA es responsable de la inmunidad de las mucosas.
c) La IgG está implicada en la opsonización de antígenos para fagocitosis por macrófagos y
neutrófilos.
d) La IgD es responsable de la activación del complemento por la vía alternativa.
e) La IgE induce la desgranulación de los mastocitos en las reacciones de hipersensibilidad cutánea.
La IgD de membrana es utilizada únicamente como receptor para el antígeno en las células B no
estimuladas (vírgenes).
TEMA 6. INTERACCIÓN DEL ANTICUERPO CON EL ANTÍGENO
Neutralización de antígenos.
Se caracteriza porque los anticuerpos pueden neutralizar tanto toxinas
bacterianas como vvirus. El anticuerpo se une a las toxinas bacterianas
para impedir su unión al receptor de membrana, y en el caso del virus, los
anticuerpos se unen a las proteínas de la cápsida del virus impidiendo que
puedan llegar a los receptores de membrana de la célula.
Fracción Fc
- Activación del complemento por IgG e IgM
La fracción Fc de los anticuerpos IgG e IgM activa a la fracción C1q del
complemento, que a su vez activa a C1r y C1s produciéndose la cascada.
Los progenitores linfoides y las células pro-B tempranas se unen a la molécula de adhesión
VCAM-1 en las células estromales a través de la integrina VLA-4 y de otras moléculas de
adhesión celular (CAM). Estas interacciones adherentes promueven la unión del receptor tirocin
quinasa Kit, en la superficie de las células pro-B, al factor estimulante de crecimiento de células
madre (stem-cell factor o SCF) en las células estromales, así activan las quinasa e inducen la
proliferación de los progenitores B. Este contacto hace que la célula estromal libere IL-7, que
actúa de forma autocrina sobre el linfocito B, apareciendo receptores de membrana para la IL-7.
La unión de la IL-7 y su receptor induce el reordenamiento de las inmunoglobulinas, y aparecen
inmunoglobulinas transitorias (linfocito inmaduro). En los últimos estadios aparecen las
inmunoglobulinas definitivas (IgM) y entonces el linfocito B es capaz de abandonar la médula
ósea para dirigirse a los órganos linfoides periféricos. Si conecta con antígenos extraños, el
linfocito B madura, y se transforma a célula plasmática liberadora de anticuerpos.
Para explicar la expresión alélica se realizó el siguiente experimento. Se tomaron dos conejos
homocigotos para la cadena pesada a y b, que sintetizaban dos inmunoglobulinas distintas a y b.
En un individuo heterocigoto, que lleva el alelo a en uno de los cromosomas y el alelo b en el
otro, las células B individuales llevarán inmunoglobulinas de tipo a o de tipo b, pero no de
ambos tipos. Esta exclusión alélica refleja el reordenamiento productivo de uno solo de los dos
alelos Igh parentales.
En cada evento de recombinación de la región V, las señales que flanquean los segmentos
génicos se unen para permitir que la recombinación se produzca. En algunos casos los segmentos
génicos V y J tienen la misma orientación transcripcional, y la yuxtaposición de las secuencias
señales de recombinación genera un bucle hacia el exterior, que contiene el ADN entre ambas
señales. La recombinación se produce en los extremos de las secuencias heptámero, creando una
señal de unión y liberando el ADN intermedio en forma de círculo cerrado. Posteriormente, la
unión de los segmentos génicos V y J crea la unión codificante. En otros casos los segmentos
génicos V y J se hallan inicialmente orientados en direcciones transcripcionales opuestas. LA
unión de los extremos de las dos secuencias heptámero provoca la inversión e integración del
ADN intercalado. De nuevo el ensamblaje de los segmentos V y J crea un exón funcional de
región V.
Las enzimas que intervienen en este proceso de recombinación se denominan recombinasas. Se
caracterizan porque:
1. Reconocen la RSS en un gen y acerca los exones V y J, facilitando la unión del gen.
2. Son específicas del tipo celular, así las recombinasas comprometidas con la síntesis de Ig
sólo se expresan en el linfocito B.
3. Sólo actúan en fases precoces del desarrollo de las células B (inmaduras), evitando así
alterar la especificidad de los anticuerpos.
4. Genes RAG1 y RAG2, codifican las enzimas recombinasas y proteínas reguladoras de su
función. Su déficit produce una ausencia de linfocitos B y T. Los linfocitos B no poseerán
sus receptores de membrana y el linfocito T carecerá de su TCR. Por lo tanto será un
individuo con una inmunodeficiencia.
TOLERANCIA INMUNOLÓGICA
Se encuentra a nivel central y periférico. La tolerancia central: Una célula madre da lugar a una
gran cantidad de linfocitos B, cada uno de ellos con una especificidad diferente. En una etapa del
desarrollo se eliminan los linfocitos que atacan a antígenos propios (autorreactivos). Puede que
en este proceso se escape algún linfocito, entonces los linfocitos pasan a los órganos linfoides
periféricos donde se eliminan estos linfocitos, o se vuelven linfocitos alérgicos (no
respondedores). Esto es la tolerancia periférica.
Para demostrar la tolerancia central, se escogieron dos ratones transgénicos que expresaban, uno
la proteína HEL y el otro ratón expresaba anticuerpos contra la proteína HEL. Los ratones se
cruzaron y la descendencia expresaba ambas proteínas. Cuando los linfocitos llegaban a la
médula ósea, las células estromales le presentaban la proteína HEL, y los linfocitos que
expresaban los anticuerpos se eliminaban y los pocos que quedaban se transformaban. En esta
transformación, los linfocitos perdían parte de sus receptores y se volvían poco respondedores,
con lo cual tienen un sistema inmunológico débil (infecciones bacterianas), y además cambiaban
la especificidad del receptor.
El cambio de especificidad se comprobó mediante otro experimento. Se escogieron ratones
transgénicos que expresaban la proteína 2Kb y anticuerpos contra esta proteína. Los linfocitos B
cuando comenzaban a madurar en la médula ósea, reconocían a la proteína Kb como propia y la
mayoría morían. Los linfocitos que sobrevivían, frenan la maduración, y expresan RAG1 y
RAG2 que intentan recuperar las recombinaciones aberrantes que se habían producido en las
cadenas ligeras y de este modo se consigue cambiar la especificidad del receptor. [Los linfocitos
B mueren a menos que adquieran una nueva especificidad de receptor].
A partir del ARNm transcrito primario se puede producir religación de los genes LVDJ y C o
C. Si se produce el primer religamiento aparece la cadena pesada , que dará lugar a la IgM, y
si se produce el segundo se producirá la cadena y dará lugar a la IgD. En algunos casos se
expresan tanto la IgM como la IgD.
2. ¿Cuál de estas sentencias es cierta con respecto a la exclusión alélica de las cadenas pesadas
de las Ig?
Se trata de la inhibición irreversible de los genes de las cadenas del segundo
cromosoma alélico cuando el primer cromosoma ha tenido un reordenamiento productivo.
3. ¿Cuál de estas aseveraciones es correcta respecto a los genes de las cadenas pesadas de las Igs
en configuración germinal?:
a) Se encuentran en el cromosoma 22.
b) Se encuentran en el cromosoma 14.
c) Poseen genes VD, que codifican la porción variable y genes JC, que codifican el
fragmento constante.
d) No poseen genes D (diversidad).
e) a y c son ciertas.
La respuesta correcta es la 2, pues los genes de las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas se
encuentran en el cromosoma 14 y se componen de genes VDJ, que codifican la porción variable
y los genes C, que codifican el fragmento constante.
Cuando la célula pro-B pasa a linfocio B inmaduro ocurren una serie de acontecimientos: la
reorganización de los genes de las cadenas pesadas (exclusión alélica), expresión del pre-
receptor, la célula entra en mitosis y se produce el reordenamiento de los genes de las cadenas
ligeras (exclusión de isotipo), expresión del receptor IgM.
En el paso de linfocito B inmaduro a linfocito B maduro, ocurren ciertos procesos: la selección
de los linfocitos no autorreactivos, tras esta selección los linfocitos expresan dos tipos de
receptores: IgM e IgD. Con todo ello, se produce la generación del repertorio primario del
linfocito.
Pero tras la maduración del linfocito B, ocurren unos eventos que alteran el repertorio primario y
producen el repertorio secundario. La suma de ambos repertorios supone el repertorio
inmunológico del linfocito y del individuo. En la activación de linfocito B a célula plasmática o
de memoria, ocurren ciertos procesos: la co-expresión de formas de membrana y secretadas de
anticuerpos, el cambio de clase o de isotipo, y la maduración de la afinidad. Estos se dan en los
órganos linfoides periféricos.
La formación de una u otra va a depender de la activación del linfocito por el patógeno, con lo
cual hay patógenos que producen la formación de Ig secretadas, y otros que producen Ig de
membrana.
El cambio de isotipo se produce en las regiones constantes de las cadenas pesadas (genes C). El
cambio de isotipo conlleva recombinación entre señales de cambio específicas. Las secuencias
de ADN repetitivo que guían el cambio de isotipo se encuentran por delante de cada gen C, con
excepción del gen . El cambio de isotipo se produce por recombinación entre estas secuencias
repetitivas o señales de cambio, con deleción del ADN que queda entre ellas. El mecanismo
inicial se produce desde la región de cambio (S), pero después de dicha recombinación
pueden verificarse otras entre las señales de cambio que se encuentren por detrás de la recién
recombinada .
CARACTERÍSTICAS DE LAS RECOMBINACIONES DEL CAMBIO DE ISOTIPO Y
DIFERENCIAS CON LAS RECOMBINACIONES SOMÁTICAS DE LA REGIÓN V
1. Todas las recombinaciones para el cambio de isotipo son productivas. No hay
recombinaciones aberrantes.
2. Se utilizan diferentes señales de recombinación (GAGCT, GGGGGT) y diferentes
enzimas.
3. Ocurre después de la estimulación antigénica y no durante el desarrollo de la célula B en
la médula ósea. El cambio de isotipo ocurre en órganos periféricos cuando el linfocito se
ha puesto en contacto con el antígeno.
4. El proceso de cambio de isotipo no es aleatorio sino que está regulado por las células T.
El paso de linfocito IgM a IgG, se lleva acabo gracias a la liberación por parte del
linfocito T helper2 de citoquinas: IL-4, IL-5, IL-6, INF- y TGF-.
Citoquinas IgM IgG3 IgG1 IgG2b IgG2a IgE IgA
IL-4 Inhibe Inhibe Induce Inhibe Induce
Aumenta
IL-5 la
producción
IFN- Inhibe Induce Inhibe Induce Inhibe
TGF- Inhibe Inhibe Induce Induce
IL: Interleucina; IFN-: Inmunoferón ; TGF-: Factor de Crecimiento Transformante .
Esto se demostró mediante el siguiente experimento: Se cogieron tres ratones y se les inyectó un
antígeno. Se analizó las regiones CDR (CDR1, CDR2 y CDR3), tanto de las cadenas pesadas
como de las ligeras). Se sacrificó un ratón a la primera semana, y se observaron las mutaciones
en estas regiones: había pocas mutaciones concentradas en los CDR. En el día 14, se sacrificó al
segundo ratón, se observó un cambio de isotipo (IgM a IgG) y nuevas mutaciones somáticas en
las CDR, y además se realizó una nueva inmunización en el tercer ratón. En el día 21, se analizó
las CDR del tercer ratón observándose que son las regiones más variables. El linfocito que haya
sufrido maduración de la afinidad será el que más se expanda, ya que son las más eficaces.
LINFOCITOS B1.
Constituyen el 5% de los linfocitos B. Se caracterizan porque son CD5+. Son una fuente de
tumores y de enfermedades autoinmunes. Se producen por primera vez en el feto y sufren
autorrenovación (no se reemplazan). Tienen una gran capacidad de producir Ig de manera
espontánea y multirreactividad; estas propiedades hacen que sean células capaces de producir
enfermedades autoinmunes. En el caso de los linfocitos B2 convencionales no es así, ya que
estos sufren un proceso de selección negativa en la médula ósea.
Producen mayor cantidad de IgM que IgG, no sufren hipermutación somática o maduración de la
afinidad. Responden a antígenos carbohidratados y no a antígenos proteicos.
Los linfocitos B1 sufren autorrenovación. Son TdT-, y B1-CD5+ también con capacidad de
autorregulación por la IL-10. La mayoría de las leucemias linfocíticas crónicas que se
diagnostican son debidas a estos linfocitos. Los encontramos en: grasa corporal, hígado y
algunos en la médula ósea.
TUMORES DE CÉLULAS B.
Los tumores de linfocitos B pueden aparecer en los distintos estadios de maduración del este.
Los tumores son más frecuentes en aquellos estadios en donde la célula tiene un mayor número
de transformaciones, ya que durante el reordenamiento de las Ig pueden aparecer roturas en el
ADN, recombinaciones y translocaciones de genes que alteran el control del crecimiento del
linfocito B derivando en un tumor. Los genes translocados con capacidad de producir leucemias
se denominan oncogenes, entre ellos el más conocido es la translocación entre los cromosomas 8
y 14 (cadenas pesadas de las Ig).
3. Las células B presentan dos subpoblaciones, denominadas B-1 y B-2, que presentan
características diferentes. De las siguientes diferencias entre ambas subpoblaciones indique cuál
es falsa:
a) En las células B-1 se produce baja o nula hipermutación somática, a diferencia de las
células B-2, donde se da alta hipermutación somática.
b) Las células B-1 sólo responden a antígenos carbohidratos, mientras que las B-2
responden a antígenos proteicos.
c) Las células B-2 se renuevan mediante reemplazamiento por nuevas células B-2
producidas en la médula ósea, mientras que las células B-1 se autorrenuevan.
d) Los receptores de las células B-1 y los anticuerpos producidos por ellas unen numerosos
ligandos diferentes con relativamente baja afinidad, mientras que las células B-2
presentan monoespecificidad, especialmente después de la inmunización.
e) La síntesis de inmunoglobulinas es muy elevada en las células B-1, predominando el
isotipo IgM, a diferencia de las células B-2, donde la síntesis de inmunoglobulinas es
mucho más baja y predomina el isotipo IgG.
Los receptores de las células B-1 y los anticuerpos producidos por ellas muestran preferencia por
la unión a polisacáridos bacterianos comunes. No obstante, la respuesta a antígenos proteicos es
también posible por parte de las células B-1.
4. Los tumores de las células B se originan a partir de células B en estadios diversos del
desarrollo de las mismas. Diga cuál de las siguientes afirmaciones acerca de los tumores de
células B es falsa:
a) Los linfomas de Burkitt son consecuencia de tumores producidos en células B maduras,
en las cuales se expresan genes V mutados, presentando variabilidad intraclonal.
b) El mieloma múltiple se origina de tumores de células plasmáticas en las cuales los
genes V de las inmunoglobulinas aparecen mutados y presentan variación
intraclonal.
c) La leucemia linfocítica crónica es un tumor originado a partir de células B-1 en las que
los genes V de las inmunoglobulinas no están mutados.
d) La macroglobulinemia de Waldenström se produce a partir de células B secretoras de
anticuerpos IgM, en las cuales aparecen mutados los genes V de las inmunoglobulinas,
pero sin presentar variación intraclonal.
e) La leucemia linfoblástica aguda es un tumor originado de progenitores linfoides y se
localiza en la médula ósea y en la sangre.
Los tumores de células B maduras, como los linfomas de Burkitt, expresan genes V mutados en
los que se encuentran pequeñas variaciones entre las líneas diferentes del linfoma de Burkitt del
mismo paciente, debido a que la hipermutación somática es un proceso activo en estas células
tumorales. Sin embargo, los tumores B de estadios posteriores, como los mielomas múltiples,
contiene genes V mutados pero no presentan variación intraclonal porque en ese estadio del
desarrollo la hipermutación somática ya ha cesado.
TEMA 9. EL COMPLEJO MAYOR DE HISTOCOPATIBILIDAD
Las células presentadoras de antígenos (APC), después de captarlos, degradan sus proteínas a
péptidos más sencillos. Estos péptidos se asocian a las proteínas del complejo mayor de
histocompatibilidad (MHC), quedando expuestas en la membrana plasmática de las células. El
TCR no reconoce al antígeno a menos que se lo presente el MHC, a este hecho se le conoce
como restricción por MHC. El reconocimiento por las células T viene dado por la especificidad
del antígeno por el TCR y además el MHC debe ser propio.
Los genes que codifican la MHC I son B, C y A, y la clase II los genes son DP, DQ y DR. Estos
genes son muy polimórficos. Si sumamos el número de genes, el polimorfismo y la
codominancia, la diversidad es muy alta dentro de la molécula de MHC. La diversidad alélica
dentro del gen de MHC ocurre en sitios concretos y específicos que son los sitios de unión al
péptido; en el caso del MHC I en los dominios 1 y 2 y en el caso del MHC en los dominios
1 y 1. Esta diversidad tiene como finalidad reconocer el mayor número de antígenos.
Los genes del MHC en humanos o HLA se encuentran en el brazo corto del cromosoma 6, y la
2-microglobulina está en el 15. Desde el centrómero al telómero del cromosoma 6
encontramos: los genes de la clase II (DP, genes implicados en el procesamiento del antígeno,
DQ y DR), los genes de la clase III (genes implicados en el sistema del complemento), los genes
de la clase I (B, C y A). Los genes que intervienen en el procesamiento del antígeno encontramos
las tapasinas (TAP1 y TAP2), las moléculas de DMA, DMB y DOB que intervienen en la carga
del péptido en el bolsillo de la molécula de MHC. Después encontramos los genes que codifican
las proteínas del complemento, y otros genes como el TNF (Tumor Necrosis Factor) que es una
interleuquina proinflamatoria que junto con la IL1 produce una inflamación que puede llevar a
un shock séptico que puede llegar a la muerte. La clase I encontramos los genes B, C y A, y
también encontramos otros genes X, E, G y F (se denominan HLA1b) parecidos a los del MHC
tipo I.
REGULACIÓN TRANSCRIPCIONAL
Las moléculas del MHC no son constitutivas en la membrana de la célula, por lo tanto su
expresión dependerá de la situación. En caso de células infectadas por virus se liberan INF, que
aumentan la expresión del MHC entre otros efectos. Es decir, el número de moléculas del MHC
dependerá de la regulación transcripcional.
Esta regulación es a través de los potenciadores (A(KB), ICS y B) situados delante de los
genes de la MHC tipo I. Cuando a estos potenciadores se les une los factores de transcripción se
potencia la expresión de los genes. Cada citoquina produce la activación de un determinado
factor de transcripción. Ej. El TNF y la linfotoxina activan al factor de transcripción NF-kB, que
se une al potenciador A(kB) y produce la expresión del MHC. Los INF activan al factor de
transcripción FIRF1, que se une al potenciador ICS.
En el MHC tipo II, posee los potenciadores S, X1, X2 e Y. Estos potenciadores necesitan de
la activación por los factores de transcripción, que son RFX, X2BP y NF-Y. Estos factores de
transcripción entran en el núcleo y necesitan de la activación en cadena del transactivador CIITA.
A su vez, la activación de CIITA es producida por el INF-.
Las señales que pueden activar a una célula pueden ser: un virus, el TNF, un antígeno o el LPS.
Estos estímulos producen la activación de la quinasa kB, que es inactiva por la presencia de un
inhibidor que al activarse se fosforila y se separa, y posteriormente es degradada por
ubiquitinización y proteosoma. La parte activa de la proteína pasa al interior del núcleo como
factor de transcripción, uniéndose a los potenciadores para dar lugar a la expresión de los genes
del MHC.
PROPIEDADES GENERALES DE LOS FACTORES DE TRANSCRIPCIÓN
1. Están ampliamente distribuidos entre los diferentes tipos celulares y no son específicos
para un gen particular.
2. Sus actividades pueden ser inducidas mediante estímulos externos y pueden relacionarse
con el estado de maduración de la célula.
3. Tienen efectos positivos y negativos cuya interacción determina el nivel neto de la
transcripción genética.
4. Algunos de ellos tienen efectos que son específicos del tipo celular o se regulan en
función del estadio de desarrollo. Esto puede deberse a que los lugares de unión sobre
promotores o potenciadores son únicos y están regulados, o a inhibidores endógenos cuya
actividad está alterada de forma específica por maduración o estimulación celular.
Sistema
monocítico/
Respuesta
IL2 e INF- macrofágico
Patógenos Th1 inmune
Linfocitos NK
extracelulares: celular
T helper Linfocitos T
bacterias,
(CD4+) CD8
Linfocitos parásitos, etc.
Respuesta
T IL4, 5, 6, y
Th2 Linfocito B inmune
10.
humoral
Linfocitos Virus
T Tumores
citotóxicos Bacterias
(CD8+) intracelulares
En el caso de las moléculas de MHC de clase II, los antígenos extracelulares son
fagocitados y los introduce en el interior del endosoma. A esta vesícula se le fusionan lisosomas,
que contienen enzimas hidrolíticas (catesinas S y L) y pasa a denominarse como fagolisosoma.
Se fracciona la proteína extracelular en fragmentos más pequeños que son cargados en el bolsillo
de unión de las moléculas del MHC. De este modo, la molécula cargada sale al exterior para
presentar el péptido al linfocito T.
Las moléculas del MHC se sintetizan en el RE, y es muy inestable con lo cual existe el riesgo de
cargar péptidos no deseados. Para evitar esto, se une la cadena invariante Li que ocupa el
bolsillo de unión al péptido de manera transitoria hasta que se fusiona con la vesícula que
contiene el péptido. En este momento, la cadena invariante Li se fracciona en dos tiempos: en el
primero desaparece la mayoría del péptido excepto una pequeña parte denominado péptido
CLIP que tiene la función de proteger el bolsillo de unión, y cuando se libera CLIP deja libre el
bolsillo para que se una el péptido. Esta cadena es trimérica, de este modo se une a los bolsillos
de tres moléculas de MHC y tiene 30 kDa. La proteína DM, que se encuentra codificada en el
cromosoma 6 junto a los genes del MHC, cataliza la carga de los péptidos en las moléculas de
MHC de clase II.
SUPERANTÍGENOS
El superantígeno es capaz de activar al linfocito T sin la necesidad de que lo presente el MHC.
Se une al dominio variable de la cadena del TCR del linfocito T, no se unen al bolsillo.
Algunos de los superantígenos más importantes son las enterotoxinas de Staphylococos, que
produce intoxicaciones alimentarías que pueden derivar en un shock tóxico; o también el shock
tóxico producido por los tampones. No producen inmunidad adaptativa, y por tanto tampoco
memoria inmunológica. Los superantígenos produce cuadros muy rápidos y muy graves.
Preguntas por temas
1. La calnexina es una proteína que se encuentra en el RE. Cual de las siguientes sentencias es
falsa:
a) Se unen a miembros parcialmente plegados de la superfamilia de las Ig.
b) Se unen a la molécula de MHC II dándole estabilidad.
c) Se une a una cadena trimérica estabilizándola
d) La presencia y unión de la 2-microglobulina al MHC I marca el fin de la función de la
calnexina.
e) La calnexina interviene en la fase precoz de la síntesis de la molécula MHC I.
4. La molécula HLA-DM, cuya función es catalizar la unión del péptido a moléculas de MHC de
clase II, es fundamental en la presentación del antígeno. ¿Podrías indicar qué células de la
respuesta inmune se verían afectadas ante un déficit de HLA-DM?.:
a) Se verían afectadas las células presentadoras de antígeno que no podrían procesar dicho
antígeno.
b) Se verían afectadas las células CD4 que no podrían efectuar el reconocimiento
antigénico.
c) Se verían afectadas las células CD8 que no podrían colaborar en la respuesta inmune.
d) Se verían afectados los linfocitos B que no podrían reconocer el antígeno.
e) Se verían afectadas las células NK que no podrían efectuar su labor de inspección.
La molécula HLA-DM es una molécula estable localizada en la región del HLA-II, del brazo
corto del cromosoma 6. La misión de la molécula HLA-DM es unirse y estabilizar las moléculas
de MHC-II vacías, que de otra forma se agregarían; además, cataliza la liberación del fragmento
CLIP del complejo MHC-II y la unión de otros péptidos a la molécula de clase II vacía
resultante. Así los antígenos presentados por moléculas MHC-II podrían tener que permanecer en
la superficie de las células presentadoras de antígeno durante algunos días antes de encontrar
células capaces de reconocerlos.
El déficit de HLA-DM hace que la molécula de MHC II permanezca bloqueada por el péptido
clip, con lo cual los antígenos externos endocitados y procesados no pueden unirse a ella y no
pueden ser presentados a la célula T CD4.
5. Señale el grupo de proteínas y sus funciones correctas que participan en algún paso del
procesamiento del antígeno y su unión a las MHC:
a) TAP -1 y TAP-2, degradan el antígeno en el retículo endoplasmático para su unión a la
MHC de clase I.
b) La calnexina y la calreticulina tienen funciones similares estabilizando la MHC de
clase I recién sintetizadas en el retículo endoplasmático.
c) La cadena invariante (Li) evita la unión de péptidos del retículo endoplasmático a la
MHC de clase I.
d) El proteasoma genera pequeños péptidos que se unirán a las MHC de clase II.
e) La HLA-DM permite que el péptido CLIP se despegue de la MHC de clase I,
permitiendo que se pueda cargar el péptido antigénico.
La respuesta correcta es la b, siendo cierto que la calnexina y la calreticulina tienen funciones
similares estabilizando la MHC de clase I recién sintetizadas en el retículo endoplasmático.
Por otro lado es incorrecto que la TAP-1 y TAP-2, degraden el antígeno en el retículo
endoplasmático para su unión a la MHC de clase I, su función correcta es el transporte de
peptidos antigénicos al RE.
La cadena invariante (Li) evita la unión de péptidos del retículo endoplasmático a la MHC de
clase II (y no a la MHC de clase I).
El proteasoma genera pequeños péptidos que se unirán a las MHC de clase I (y no a la MHC de
clase II).
Por último, La HLA-DM permite que el péptido CLIP se despegue de la MHC de clase II (y no
de clase I), permitiendo que se pueda cargar el péptido antigénico.
TEMA 11: EL RECEPTOR ANTIGÉNICO DE LAS CÉLULAS T (TCR)
La diversidad del TCR se genera por mecanismos similares a los de los genes de las Igs, pero
existen diferencias. Una vez que se reordena funcionalmente un gen del TCR no se producen
más cambios genéticos que alteren la especificad o la afinidad del TCR. Por tanto, al contrario
que en los genes de las Igs, no hay hipermutación somática en su proceso de formación. No se
observa, pues, maduración de la afinidad del TCR en las respuestas secundarias de las células T,
como ocurre en las respuestas secundarias de los anticuerpos.
Al igual que ocurre en los anticuerpos, la diversidad en el TCR está concentrada principalmente
en la región determinante de la complementariedad 3 (CDR3) de los dominios a1 y b1. Las
CDR3 interaccionan con el péptido antigénico que presenta la proteínas del MHC.
La ausencia de algunas de las cadenas del complejo CD3, produce la inexpresión del TCR y por
lo tanto ese linfocito T no se transformará en célula efectora y el individuo presentará una
inmunodeficiencia grave.
LINFOCITOS T.
Estos linfocitos son importantes ya que son una fuente de tumores. Son un 5-10% de la
población de linfocitos. No expresan CD4 ni CD8, por lo tanto no son linfocitos helper ni
citotóxicos. Encontramos a estos linfocitos en los órganos linfoides periféricos y tejidos
epiteliales, en concreto en la epidermis e intestino delgado de ratón. Sus funciones no son muy
bien conocidas: intervienen en le reconocimiento del antígeno directamente (sin restricción por
MHC), reconocen antígenos no proteicos y muy genéricos. Poseen un TCR diferente, no poseen
cadenas y , sino que poseen cadenas . Este receptor se denomina TCR tipo 1 (el TCR se
denomina tipo 2), ya que filogenéticamente es anterior. Además este receptor tiene poca
diversidad. Estos linfocitos pueden ser responsables de la unión a superantígenos.
4. Qué cadena invariable del TCR se puede asociar a otras proteínas (FcRIII), además de al
TCR:
a) CD3 g.
b) CD3 d.
c) CD3 e.
d) cadena zz.
e) ninguna.
Tres de las cadenas invariables del complejo TCR son parecidas entre sí y se denominan
colectivamente CD3 (CD3 g, CD3 d, CD3 e). La cuarta cadena invariable la constituye la cadena
z (zeta), que se asocia al complejo TCR en forma de dímeros zz unidos covalentemente. Esta
cadena se asocia a otras proteínas además de al TCR: forma parte, por ejemplo, del receptor para
el fragmento Fc de la IgG en células NK (FcgRIII), para el que también transmite señales.
5. ¿Hay alguna molécula de las que se muestran a continuación que NO expresa CD4 ni CD8?
a) linfocito Th
b) linfocito Tc
c) linfocitos T que expresan TCRab
d) linfocitos T que expresan TCRgd
e) ninguna es correcta
La mayor parte de los linfocitos T utilizan como cadenas variables a las cadenas TCRa y TCRb.
Este es el caso de los linfocitos T cooperadores (CD4+) y citolíticos (CD8+). Una pequeña
subpoblación (menos del 5%) de linfocitos T, sin embargo, utiliza unas cadenas variables
completamente diferentes, denominadas TCRg y TCRd. La mayor parte de los linfocitos con
TCRgd carecen de las moléculas CD4 y CD8 (son CD4- y CD8-).
TEMA 12: MOLÉCULAS ACCESORIAS DE LAS CÉLULAS T
Aparte del complejo formado por el TCR y el CD3 que cumple un papel central en la unión con
el antígeno procesado, la célula T madura cuenta con varias moléculas accesorias de membrana,
con funciones de adhesión a la célula presentadora de antígeno (APC) o a la célula diana,
reforzando la interacción; y (varias de ellas) transducción de señales desde el TCR al citoplasma.
Las moléculas de adhesión dirigen al linfocito hasta la zona donde tiene que actuar. Además
tienen importancia en los individuos politraumatizados y quemados, ya que se produce una
expresión de estas moléculas fijando los linfocitos al endotelio del vaso produciendo una
inmunodeficiencia, siendo el individuo sensible a infecciones oportunistas.
Las moléculas que modulan la expresión de las moléculas de adhesión, en condiciones normales,
son las interleuquinas. Las moléculas de adhesión se expresan débilmente en el linfocito; cuando
se produce una respuesta inmune se expresan las moléculas en la zona de la infección dirigiendo
la migración del linfocito.
El linfocito T necesita del reconocimiento del antígeno por parte del MHC para activarse, y
además la cooperación de las moléculas accesorias. Una vez activado, el linfocito T libera IL-2 e
IL-4, que actúan de forma autocrina produciendo la proliferación del clón. En el torrente
circulatorio, sale del vaso por diapédesis a los órganos linfoides periféricos donde el macrófago
le presenta el péptido. El linfocito T actúa sobre el macrófago aumentando la actividad
bactericida.
Dependiendo del patógeno que haya penetrado, la respuesta va a ser diferente: un linfocito T
activado libera IL2 e IL4, que producen, de forma autocrina, la aparición del receptor para IL2
(IL-2R). Entonces, el linfocito se activa y prolifera. El linfocito T activado libera citoquinas que
actúan:
- Sobre el macrófago, aumentando su capacidad bactericida en el foco de infección.
- Sobre el linfocito B, transformándolo en célula plasmática liberadora de anticuerpos.
- Sobre el PMN, produciendo procesos inflamatorios.
- Sobre el propio linfocito T, diferenciándose a célula de memoria.
- En el caso de una infección por virus, el linfocito T activa al linfocito T citotóxico que
ataca a la célula infectada, induciendo la muerte por apoptosis mediante la liberación de
granzimas y perforinas.
Las quinasas de la familia Src, poseen dominios quinasa, SH2 y SH3. Estos dominios SH2 son
los que se unen a los dominios ITAM de las colas citoplasmáticas. En el caso de la ZAP-70 posee
dos dominios SH2, que se unirá a los fosfatos de los dominios ITAM de los complejos TCR.
- Metabolismo de fosfolípidos-inositol.
Después del reconocimiento antigénico por parte del TCR, la ZAP-70 activa a la PLC1,
mediante fosforilación en un residuo de tirosina. Una vez activada la PLC1 induce la hidrólisis
del fosfatidilinositol bifosfato (PIP2), generándose inositol trifosfato (IP3) y diacilglicerol
(DAG). El IP3 se une a un receptor específico (IP3R) localizado en unas estructuras específicas
del retículo endoplásmico facilitando la liberación del calcio intracelular de sus compartimentos
y aumentando la concentración de estos iones en el espacio libre intracelular. El calcio
intracelular puede estimular la enzima calmodulina, que es una serina/treonina cinasa que puede
activar a su vez a la fosfatasa calcineurina, que activa al factor de transcripción NFAT. Además
de la activación del sistema calmodulina/calcineurina, los niveles altos de calcio intracelular
también ayudan a la activación de otras cinasas como la proteín cinasa C (PKC) y posiblemente
algunas quinasas activadas por mitógenos (MAPKs). El otro metabolito de la hidrólisis del PIP2,
el diacilglicerol es el principal responsable de la activación de las enzimas proteín quinasa C, que
activa al factor de transcripción NF-kb. Estos factores de transcripción actúan en el núcleo
activando la transcripción de los genes de la IL-2.
Los niveles de calcio citoplasmáticos aumentan, y se unen a la calmodulina que a su vez se une a
la calcineurina. La calcineurina se activa y desfosforila al factor de transcripción NFAT, que entra
en el núcleo promoviendo la síntesis de IL-2 y de sus receptores.
En el caso de las Ras-MAP quinasas y Rac-SAP-quinasas. Las Rac-SAP quinasas se activa por
CD28, mientras que las Ras-MAP quinasas se activa por ZAP-70, que producen una cascada de
proteínas que finalizan en la activación de los factores de transcripción Fos y AP-1 promoviendo
la síntesis de IL-2.
Los primeros genes que se expresan son c-Fos, seguido del ligando CD40 y de la IL-2. Esta
expresión de IL-2 produce la expresión del receptor para IL-2. Esto promueve la síntesis de ADN
y finaliza con la expresión de genes de moléculas de adhesión como VLA-4,5,6. Toda esta
respuesta puede tardar semanas, ya que el linfocito T interviene en la respuesta adaptativa.
Estos genes de transcripción pueden ser clasificados en inmediatos, precoces y tardíos. Los
inmediatos y precoces están preformados y se liberan antes de que el linfocito entre en mitosis, y
los tardíos se sintetizan de novo y tienen una liberación post-mitótica. Entre los genes precoces
destacamos, los genes de las citoquinas y de sus receptores y genes de algunos proto-oncogenes
como c-Fos.
Existen algunos fármacos que inhiben la activación del linfocito T, en concreto la ciclosporina A
y el FK506 que se utilizan para inmunosuprimir a un individuo tras un transplante, para que no
se produzca rechazo. Si frenamos la activación del linfocito T evitamos la probabilidad de que se
produzca un rechazo, pero el individuo es sensible a cualquier infección por ello se coloca en
boxes de aislamiento. Estas moléculas se unen a unas proteínas del citoplasma como la
ciclofilina y FKBP, que se unen a la calcineurina e impiden la activación del NFAT, y por lo tanto
se evita la activación del linfocito.
3. Cual es el dominio de las tirosin quinasas de la familia de la Src que se unen a las colas
citoplasmáticas de los receptores de la célula T
a) Dominios quinasa
b) Dominios SH2
c) Dominios SH3
4. Si los TCR se unen a los complejos péptido-MHC en una célula presentadora de antígeno, y si
la adhesión y las interacciones de las moléculas de coestimulación también se ponen en marcha,
el linfocito T es activado y sufre una serie de respuestas funcionales. Según esto, indique qué
afirmación de las siguientes es correcta respecto de las acciones que lleva a cabo un linfocito T
activado:
a) Secreción de citoquinas.
b) Proliferación del linfocito T mediante una vía autocrina, actuando la IL-2.
c) Disminución de las respuestas de las células T cuando el antígeno es eliminado por las
células efectoras.
d) Parte de la progenie de células T estimuladas por el antígeno se convierte en células de
memoria específicas del antígeno.
e) Todas las afirmaciones anteriores son ciertas.
El timo se encuentra especialmente desarrollado en los niños, ya que es donde el linfocito T tiene
un mayor desarrollo. Sin embargo, a partir de los 11 años, el timo involuciona a un reducto capaz
de desarrollar los linfocitos T en el adulto.
Los linfocitos T inmaduros cuando penetran en el timo son CD3, CD4 y CD8 negativos. Estos
pretimocitos tienen la capacidad de transformarse en los timocitos T y linfocitos T (CD3+,
CD4- y CD8-), dependiendo de las cadenas de su TCR. Los linfocitos T son CD3+, CD4+ y
CD8+, y poseen un TCR inmaduro. Estos linfocitos doblemente positivos, se encuentran en el
torrente circulatorio en individuos quemados, que liberan estos linfocitos para producir una
respuesta a la desesperada. Los linfocitos doblemente positivos, que poseen una cadena
sustituta (TCR inmaduro), sufren un proceso de selección negativa y mueren por apoptosis el
95%. Estas células muertas son eliminadas por los corpúsculos de Hassal. El 5% que consigue
sobrevivir y son CD4+y CD8+, y en la médula sufren el proceso de maduración hacia linfocitos
CD4+ o CD8+ vírgenes, ya que no se han expuesto a antígenos externos. Estos linfocitos salen
del timo hacia los órganos linfoides secundarios.
Los timocitos inmaduros entran en el timo y se ponen en contacto con las células epiteliales de la
corteza, que permiten el reordenamiento del TCR en el linfocito. También se ponen en contacto
con células dendríticas. A medida que estas células proliferan y maduran a timocitos dobles
positivos, migran hacia zonas más profundas de la corteza. Por último, la médula sólo contiene
linfocitos T maduros positivos sencillos, que eventualmente abandonan el timo y penetran en el
torrente circulatorio.
GENERACIÓN DE LA DIVERSIDAD
1. Diversidad de unión. La capacidad de recombinación debido a la existencia de distintos
genes.
Regiones V 75 25 7 11
Regiones D 0 2 0 2
Regiones J 50 12 2 2
APOPTOSIS EN LINFOCITOS
En el timo se produce la muerte de una gran cantidad de linfocitos T. La apoptosis se caracteriza
por:
- Daños en el ADN
- Condensación y fragmentación del núcleo
- Alteraciones en la membrana plasmática
- Cambios en la distribución de los lípidos de membrana
- Separación de las células de la matriz extracelular
- Fagocitosis, producida por los corpúsculos de Hassal.
La muerte por apoptosis puede ser activa o pasiva. Si el linfocito ya ha realizado su función, no
recibe señales de supervivencia y libera de la mitocondria el citocromo c, que induce la muerte
por apoptosis. También puede ocurrir que el linfocito T no consiga destruir un antígeno, en
consecuencia aparecen las proteínas Fas y Fas-Ligando (Fas-L) que se unen y activan a las
caspasas produciéndose la muerte del linfocito.
2. La expresión de MHC, por parte de las células epiteliales del timo. Se realizó un
experimento para comprobar su importancia: se cogieron ratones knock-out para el MHC
tipo I y tipo II. Cuando el bloqueo es para el MHC tipo I, no se desarrollan los linfocitos
CD8 pero sí los CD4. Cuando se bloqueaba el MHC tipo II, no se desarrollan los CD4.
3. La expresión de TCR, por parte de los timocitos doblemente positivos. Se tomaron los
plásmidos para un TCR que tenía la capacidad de reconocer el MHC H-2Db y el
péptido H-Y como propio. Los plásmidos se transfectaron a tres ratones:
- Un ratón macho que tenía la capacidad de sintetizar el péptido H-Y como propio.
Los linfocitos reconocían el MHC propio (selección positiva) y además
reconocían el antígeno como propio (selección negativa), con lo cual los linfocitos
eran inducidos a muerte por apoptosis.
- Una hembra que expresaba un MHC distinto: H-2Dk, con lo cual los linfocitos
entraban en apoptosis al no reconocer el MHC propio.
- Una hembra que expresaba el MHC H-2Db y no expresaba el antígeno H-Y. Así
que los linfocitos proliferaban (selección positiva).
TUMORES DE CÉLULAS T
Los tumores de las células T pueden aparecer en cualquiera de los estadios de su maduración. El
tipo de marcador que presentan las células determina el tipo de tumor y el tratamiento.
- Podemos encontrar tumores en la médula ósea, debido a la proliferación incontrolada de
las células madre pluripotenciales, que darán lugar a los progenitores linfoides.
Encontramos el CD34 en su membrana, mediante técnicas de inmunofluorescencia.
- Progenitores linfoides: Leucemia linfoblástica aguda común, que se da en los niños.
Puede ser debido a los linfocitos B o T. Los marcadores de superficie son el CD10, CD19
y CD20, y se encuentran en el timo.
- Células estromales del timo o células epiteliales: Timoma. Se encuentran en el timo.
Presentan citoqueratinas en su superficie.
- Timocito: Leucemia linfoblástica aguda. Es muy frecuente en los niños. Se encuentra en
el timo. El marcador de superficie es el CD1.
- Célula T: Leucemia linfocítica crónica, que se da en adultos. También es conocida como
el síndrome de Sèzary o micosis fungoide. Se caracteriza porque afecta a la piel y
órganos internos (incluyendo los órganos linfoides periféricos). Presentan en su superficie
CD3, CD4 y CD8.
- Enfermedad de Hodgkin. Es un tumor de las APC y afecta a los órganos linfoides
periféricos, aunque también afecta a otros. El marcador es el CD30.
2. ¿Cuál de estos eventos se lleva a cabo en el reordenamiento génico de los genes del TCR?:
a) Exclusión alélica de la cadena
b) Exclusión alélica de la cadena
c) Mutaciones somáticas
d) Maduración de la afinidad
e) Cambio de isotipo
5. De las siguientes afirmaciones sobre los procesos de selección de los timocitos durante su
desarrollo, elige la correcta:
a) El mecanismo de selección positiva es el rescate de los timocitos de una ruta de
apoptosis por defecto, inducido por una interacción débil del TCR con los MHC
propios con péptidos propios o extraños.
b) En la apoptosis pasiva intervienen el receptor Fas y su ligando Fas-L, y la apoptosis
activa es dependiente del citocromo-c.
c) La selección se lleva a cabo en la médula del timo y se hace sobre el repertorio de
especificidades del TCR.
d) En la selección negativa se induce a apoptosis a las células T que tienen un TCR que
reconocen el MHC extraño con antígenos propios con gran avidez.
e) En los procesos de selección sólo un pequeño número de timocitos mueren. La gran
mayoría llegarán a linfocitos T maduros.
En esta pregunta, sólo la respuesta 1 es correcta, pues el mecanismo de selección positiva es el
rescate de los timocitos de una ruta de apoptosis por defecto, inducido por una interacción débil
del TCR con los MHC propios con péptidos propios o extraños. Sin embargo el resto de
respuestas son erróneas. La apoptosis pasiva es dependiente del citocromo-c, y la apoptosis
activa intervienen el receptor Fas y su ligando Fas-L. En la respuesta b) se afirma al contrario.
La respuesta c) afirma que la selección se lleva a cabo en la médula del timo y se hace sobre el
repertorio de especificidades del TCR. En realidad ocurre en la corteza profunda del timo y no en
la médula.
En la selección negativa se induce a apoptosis a las células T que tienen un TCR que reconocen
el MHC propio (no extraño como se dice en la respuesta d) con antígenos propios con gran
avidez.
A su vez, la activación de los dominios ITAM, activa a la fosfolipasa C. Una vez activada la
PLC1, esta hidroliza al fosfatidilinositol bifosfato (PIP2), generándo inositol trifosfato (IP3) y
diacilglicerol (DAG). El IP3 se une a un receptor específico (IP3R) localizado en unas
estructuras específicas del retículo endoplásmico facilitando la liberación del calcio intracelular
de sus compartimentos y aumentando la concentración de estos iones en el espacio libre
intracelular. El calcio se puede unir a la calmodulina y posteriormente a la calreticulina,
activando a los factores de transcripción Myc y NFAT. Además el DAG junto con los niveles de
calcio activan a la proteín quinasa C (PKC), que provoca la activación de los factor de
transcripción NFAT y NF-kb.
Todos estos factores de transcripción penetran en el interior del núcleo y se unen a determinados
promotores que inducen la transcripción de genes que intervienen en la respuesta inmune de la
célula.
Una vez que el linfocito B es estimulado por las citoquinas liberadas por el linfocito T,
vuelve al centro del folículo primario y comienza a proliferar. Esta proliferación da lugar a la
aparición de una serie de linfocitos B con distinta afinidad por el antígeno, estos vuelven a
ponerse en contacto con el antígeno por medio de las células dendríticas que existen en el centro
germinal. Aquellos linfocitos B que reconocen al antígeno con poca afinidad son inducidos a
muerte por apoptosis, y los que poseen mayor afinidad van a proliferar (maduración de la
afinidad).
Los linfocitos con alta afinidad por el antígeno son mantenidos vivas para que proliferen
y se transformen en células plasmáticas.
Se cree que la diferenciación hacia célula plasmática es debida a las señales recibidas por el
linfocito B a través del correceptor CD19/CD21/CD81 desde la molécula CD23 expresada en la
membrana de las células dendríticas foliculares o liberada de forma soluble al medio por estas
mismas células. Va acompañada de importantes cambios en la morfología, fenotipo y función de
la célula que se diferencia.
La diferenciación hacia células de memoria dependería de las señales recibidas por el linfocito B
a través de CD40 desde su ligando en los linfocitos T, requiriendo, por tanto, nuevos contactos
con linfocitos Th.
TEMA 17: CITOXICIDAD MEDIADA POR CÉLULAS T.
En el caso de infección por virus, los antígenos son detectados por linfocitos T CD8
mediante MHC tipo II, induciéndose la muerte de la célula por apoptosis.
El linfocito T citotóxico produce la lisis de las células infectadas mediante varios pasos:
- La célula diana expone los epítopos antigénicos del virus y los muestra al linfocito T
citotóxico, y se activa.
- El linfocito T citotóxico al activarse, libera los gránulos de granzimas y perforinas. Una
vez, liberados los gránulos el linfocito T se suelta, ya que las sustancias liberadas pueden
dañar su propia membrana.
Las perforinas producen poros en la membrana por donde penetra agua y calcio,
produciendo una hipoosmosis en la célula, que finaliza al estallar la célula.
A través de los poros, las granzimas penetran en la célula activando a las caspasas
(caspasa 8) que activa la apoptosis.
La aparición de Fas y Fas-ligando, que llevan dominios de muerte citoplasmaticos
que al unirse, se activan y producen la muerte de la célula por apoptosis.
17.6. Papel de las células Th2 en la regulación de la inmunidad mediada por células
Los linfocitos CD4 o helper puede ser de dos tipos: Th1 o Th2, que son iguales y solo se
diferencian en la interleuquinas que liberan. Estas interleuquinas hacen que cada uno tenga
funciones distintas.
1. El Th1 libera TNF que aumenta los procesos inflamatorios, e IFNg que aumenta la
capacidad bactericida del macrófago (reacciones de hipersensibilidad retardada).
2. El Th2 libera citoquinas (IL10, IL4 e IL13) que inhiben los efectos del TNF (procesos
inflamatorios) e inhiben los efectos del IFNg.
3. Los macrófagos activados producen proteínas que desencadenan funciones efectoras como la
trombosis, destrucción de microorganismos, remodelación tisular, inflamación, etc. Indique de las
relaciones siguientes cuál es falsa:
a) Aumento de moléculas del MHC -- Presentación de antígenos potenciada.
b) Factor tisular -- Remodelación tisular.
c) Citoquinas -- Inflamación.
d) Oxidasa fagocítica -- Destrucción de microorganismos.
e) Aumento de coestimuladores -- Presentación de antígenos potenciada.
En los macrófagos, el aumento de las moléculas del MHC y las moléculas coestimuladoras potencia la
presentación de antígenos, la síntesis de las enzimas oxidasa fagocítica y óxido nítrico sintasa fomenta la
destrucción de microorganismos, las citoquinas producen inflamación al ser liberadas, los factores de
crecimiento y los angiogénicos producen la remodelación tisular, y el factor tisular produce trombosis.
Para que se produzcan las IgE es necesario un cambio de isotipo en el linfocito B, por
acción del linfocito T helper 2, que libera IL-4. Esta IgE encuentra receptores en la membrana
del mastocito, con lo cual se activa el mastocito y se desgranula. Se libera el contenido rápido
produciendo una reacción inmediata; a las 24 se sintetizan citoquinas, se liberan y mantienen el
proceso inflamatorio.
En el caso de la picadura de insecto, lo primero que ocurre es una lesión del vaso
liberando factores titulares que actúan dilatando el vaso, con esto se consigue que la sangre vaya
más lenta y empiecen a salir líquido intersticial y células al foco. Es decir, se produce un proceso
inflamatorio (dolor, tumor, rubor y calor).
La alergias tienen un factor hereditario.
2. Si transferimos suero de un individuo alergia o a un individuo que no lo es, este produce una
reacción de hipersensibilidad.
3. Indica con que nombre científico se conoce al individuo que monta una reacción de
hipersensibilidad inmediata ante cualquier alérgeno: atópico.
4. En relación con los receptores de alta afinidad para la parte Fc de las IgE (FceRI), indique la
respuesta errónea:
a) Consta de cuatro cadenas: una cadena , una cadena y dos cadenas ?.
b) Lo presentan en superficie, mastocitos, basófilos y eosinófilos.
c) Las cadenas a tienen dos dominios de la superfamilia de las inmunoglobulinas, y
entre éstos se una la IgE por su región Fab.
d) Las cadenas ? tienen, en sus regiones citosólicas, un motivo ITAM cada una.
e) La cadena ß tiene cuatro dominios transmembrana y un motivo ITAM en su región
citosólica.
El receptor de alta afinidad para la parte Fc de las IgE (FceRI), consta de cuatro cadenas: una
cadena a una ß y dos cadenas ?. La cadena a carece de motivos ITAM, cada cadena ? la cadena ß
tiene un motivo ITAM.
La cadena a tiene dos dominios de la superfamilia de las inmunoglobulias. Entre estos dominios
se una la IgE por su región Fc. La respuesta 3 es la incorrecta ya que afirma que se une la IgE
por su región variable Fab.
5. ¿Qué ocurriría en una infección por helmintos en la que se desencadena una respuesta de
hipersensibilidad inmediata?:
a) Aumento de la concentración de IgA.
b) Aumento de la concentración de IgG.
c) Aumento de la concentración de IgE.
d) Aumento de la concentración IgM.
e) Disminución de la concentración de IgA.
Los anticuerpos IgE reconocen el antígeno en la mayoría de las reacciones de hipersensibilidad
inmediata. La IgE circula como un anticuerpo bivalente y normalmente está presente en el
plasma en concentraciones inferiores a 1 pg/ml. En condiciones patológicas, como en las
infecciones por helmintos y en la atopía grave, esta concentración puede aumentar por encima de
1000 pg/ml