Aktivitas Enzim Substilisin FS33

Aktivitas dari ensim fibrinolitik Sebstilisin FS33 diiukur dengan

menggunakan spektrofotometri dengan menggunakan substrat sintetik, yaitu
S7388, V7127, V6258 dan P7021. Larutan terdiri dari 100 μL, pH 8,0 yang
mengandung berbagai kosentrasi substrat sintetik (0,02 sampai 0,15 mM) dan 5
μL larutan enzim, diinkubasi pada microplate pada suhu 37oC. Pada berbagai
interval waktu jalannya reaksi, absorbansi dari larutan diukur pada 405 nm. Laju
kinetic dari reaksi diukur dengan menggunakan plot Hanes–Woolf (Wang et al.,
2006). Hasil pengukuran aktivitas enzim dapat dilihat dalam tabel berikut.

Tabel 2.x. Hasil pengukuran aktivitas Enzim Substilisin FS33 pada substrat
sintetik (Wang et al., 2006).

Dari hasil diatas, diperoleh S7388 (N-Succ-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA) merupakan

substrat sintetik dari Substilisin yang dihidrolisis secara efektif dengan Km 0.21
mM, kcat/Km 1,76×105 S-1M-1 dan aktivitas 22,2 μmol.min-1.l-1. Enzim Sibstilisin
FS33 juga mendegradasi V7127 dan P7021, namun tidak mendegradasi V6258
(Wang et al., 2006).

Dapus
Wang. C.T., Bao P. J., Bo Li R.N., Ping. L.L., Hong. J dan Long. F.C. 2006.
Purification and characterization of a fibrinolytic enzyme of Bacillus subtilis
DC33, isolated from Chinese traditional Douchi. J Ind Microbiol
Biotechnol. 33: 750–758