Abstracto

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Introducción
A principios del siglo XX se publicó un documento provocativo (Richet y
Portier, 1902 ). Louis Pasteur acababa de enseñarle al mundo que la inmunidad no
es solo la suerte de los que sobrevivieron a una epidemia y se protegieron de esa
enfermedad. Se puede inducir deliberadamente y proteger contra todo tipo de
infecciones, por los cambios de una práctica empírica promovida un siglo antes por
Edward Jenner para prevenir la viruela. La inmunidad no es un
privilegio. Cualquiera puede ser vacunadoy así protegido. Pero en 1901, Charles
Richet y Paul Portier hacen una observación inquietante. En lugar de proteger, una
inmunización con una dosis baja de toxina puede inducir un estado de
hipersensibilidad, que mata a un perro en minutos después de una segunda
exposición a la misma dosis inofensiva de toxina. Repiten sus experimentos,
confirman su observación con otra toxina, se convencen de que han desentrañado
un nuevo fenómeno. Lo llaman anafilaxia, es decir, lo opuesto a la profilaxis de
Pasteur. La fama de Pasteur es inmensa, en todo el mundo. Richet y Portier tienen
el coraje intelectual de publicar sus hallazgos: la inmunidad no es necesariamente
protectora, puede ser dañina e incluso matar. Charles Richet fue galardonado con
el Premio Nobel de Fisiología o Medicina en 1913 "por su trabajo sobre la
anafilaxis".
La anafilaxia pronto se entendió como un síndrome alérgico sistémico hiper agudo
y, desde entonces, se buscaron mecanismos únicos para explicar esta respuesta
paradójica del sistema inmunitario que genera enfermedad cuando reacciona a
sustancias del ambiente tan inocuas como el polen, el pelo de gato, la casa polvo,
o incluso comida. En 1910, se descubrió que la histamina, una sustancia aislada
del pin de centeno, reproducía síntomas anafilácticos (Dale y Laidlaw, 1910 ). En la
década de 1950, se encontró histamina en las células presentes como una
población menor en los tejidos (Riley, 1953 ) y, en la década de 1960, se descubrió
que estos mastocitos se desgranulaban y liberaban histamina al desafiarse con
anticuerpo y antígeno (Prouvost-Danon et al. ., 1966 ). En 1966, un únicoLa
inmunoglobulina inductora de la erupción eritema-cutánea (IgE), presente en
cantidades diminutas en plasma (Ishizaka et al., 1966 ) pero, afortunadamente,
secretada en grandes cantidades por un plasmocitoma raro (Johansson y
Bennich, 1967), se describió e informó a cuenta de reacciones alérgicas (Bennich
et al., 1969 ). Se descubrió que las IgE son citotrópicas , es decir, que se unen a
las células (Evans y Thomson, 1972 ), y en la década de 1970 se describió un
receptor con una alta afinidad única por IgE en los mastocitos y los basófilos
(Kulczycki y Metzger, 1974 ). , que se denominó FcεRI, se clonó en 1989 (Blank et
al., 1989 ) y la estructura 3D se resolvió en 1998 (Garman et al.,1998 ). La
secuencia de síntomas clínicos de alérgeno-IgE-FcεRI-mástil-histamina-clínica se
convirtió en el paradigma de una reacción alérgica. Representaba la
hipersensibilidad de Tipo I y estaba incluida en la clasificación de Gell y Coombs
(Gell y Coombs, 1963 ). El término acuñado inicialmente por Clemens von Pirquet
después de las palabras griegas ἂλλoς ἔργoν (allos ergon) para designar la
respuesta alterada a una sustancia dada inducida por un contacto previo con esa
sustancia (von Pirquet, 1906 ), se utilizó cada vez más con su significado
etimológico: la alergia es otra reacción .
A principios de la década de 1950, sin embargo, Zoltan Ovary describió la
anafilaxia cutánea pasiva (PCA) y la utilizó como una técnica sensible
(Ovary, 1952 ) para estudiar los anticuerpos IgG que son responsables de
esta reacción in vivo en cobayas (Ovary et al. 1960 ), conejos (Warner y
Ovary, 1970 ), ratas y ratones (Ovary et al., 1975 ). Luego se demostró que los
mismos anticuerpos IgG activan los mastocitos de rata y ratón in vitro (Vaz y
Prouvost-Danon, 1969 ), y se describieron los receptores de IgG en estas células
(Tigelaar et al., 1971).) Cuando, mucho más tarde, se generaron los primeros
ratones knock-out, un artículo informó que la anafilaxia sistémica activa (ASA)
podría inducirse en ratones con deficiencia de IgE (Oettgen et al., 1994).) IgE no
está solo, y se producen muchos más anticuerpos IgG junto con IgE, cualquiera
que sea el protocolo de inmunización utilizado. Los anticuerpos distintos de IgE
contribuyen a las respuestas alérgicas. Del mismo modo, la evidencia acumulada
de que los mastocitos y los basófilos funcionan conjuntamente con eosinófilos,
neutrófilos, monocitos, células T y células NK para aumentar la inflamación
alérgica. Por el contrario, las células cebadas y la IgE están involucradas en
respuestas biológicas distintas de la alergia. Las cajas de Gell y Coombs no fueron
selladas. Las células de diferentes tipos y anticuerpos de diferentes clases
entraron y salieron furtivamente. Al igual que otras enfermedades inflamatorias
dependientes de anticuerpos, la alergia implica los mismos efectores moleculares y
celulares que la inmunidad protectora.
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Mastocitos más allá de la alergia

Ahora sabemos que tenemos dos sistemas inmunes. El sistema inmune innato
está formado por un gran número de células diferenciadas de varios tipos,
principalmente del linaje mieloide, equipadas con receptores de reconocimiento de
patrones que pueden inducir una variedad de respuestas a los patógenos sin
demora. El sistema inmune adaptativo está esencialmente hecha de un número
limitado de células linfoides equipados con receptores de antígenos, que necesitan
para proliferar y diferenciarse en células efectoras de los diferentes tipos antes de
que puedan actuar sobre los antígenos específicos (Figura (Figura 11 ).

Figura 1
La interacción entre las células mieloides y linfoides en las respuestas
inmunitarias adaptativas . Las respuestas inmunitarias adaptativas se inician
mediante la presentación de antígenos por células dendríticas (DC). Las
interacciones cognitivas con las células presentadoras de antígenos activan las
células T ingenuas que ...

Los mastocitos como efectores de la inmunidad innata

Los mastocitos se han reconocido cada vez más como células efectoras de la
inmunidad innata. Ubicados en todas partes del cuerpo, pero particularmente en
las interfaces con el mundo externo y cerca de los vasos sanguíneos, contribuyen
a proteger contra los patógenos (revisado en Abraham y St John, 2010 ). Ellos son
reclutados más a sitios de infección. Los mastocitos de ratón y humanos expresan
receptores tipo Toll y NOD a través de los cuales los patrones moleculares
asociados con patógenos y los proteoglicanos los inducen a liberar proteasas y a
secretar citoquinas, quimioquinas y factores de crecimiento (Supajatura et
al., 2002 ). Estos, a su vez, reclutan neutrófilos, eosinófilos, células NK y otras
células que forman un infiltrado inflamatorio (Supajatura et al., 2001).) Las células
cebadas de ratón también producen péptidos bactericidas tales como catelicidina
(Di Nardo et al., 2003 ). Estos mecanismos en conjunto dan cuenta de
los roles críticos de protección in vivo de los mastocitos en la infección,
desentrañados por la ligadura del ciego y el modelo de punción de peritonitis
aguda (Echtenacher et al., 1996 ) y por desafío bacteriano (Supajatura et
al., 2001 ). Los mastocitos de rata también se han asociado con la infección por
helmintos durante la cual proliferan en respuesta al factor de células madre (SCF)
y contribuyen a la expulsión del gusano por varios mecanismos (Levy y
Frondoza, 1983 ; Woodbury et al., 1984 ).
Más recientemente, se descubrió que las células cebadas de ratón protegen de los
venenos de abejas melíferas, serpientes, lagartos y escorpiones. Los venenos de
hecho inducen la degranulación de los mastocitos y son degradados por las
proteasas contenidas en los gránulos. Por lo tanto, la carboxipeptidasa A3 hidroliza
el péptido venenoso sarafotoxina 6b (Metz et al., 2006 ) y el péptido
vasoconstrictor de mamífero relacionado endotelina-1 (Maurer et al., 2004 ),
mientras que la proteasa 4 de células cebadas hidroliza el helodermin del veneno
de lagarto y los relacionados péptido vasointestinal de mamífero (Akahoshi et
al., 2011 ).
Con y al igual que las células dendríticas (DC), los mastocitos participan en el
inicio de la inmunidad adaptativa. Las células cebadas de ratón promueven la
diferenciación de DC y, al regular positivamente la expresión de selectina E en
células de endotelio vascular, la afluencia de DC derivadas de monocitos
(Shelburne et al., 2009 ). Los productos de mastocitos de ratón modulan la
activación de DC y la presentación de antígenos (Amaral et al., 2007 ), lo que
conduce a una diferenciación de células Th2 sesgada (Mazzoni et al., 2006 ). Si
los mastocitos en sí mismos pueden presentar antígeno ha sido poco claro ya que
las principales moléculas de histocompatibilidad clase II (MHC-II) no se
encontraron en los mastocitos de ratón peritoneales frescos (Daëron y
Voisin, 1979 ) o en los mastocitos derivados de médula ósea (CMOM) con IL-3
(Frandji et al.,1995 ). Recientemente, sin embargo, se demostró que el MHC-II
podría ser inducido por IFN-γ e IL-4 en los mastocitos peritoneales de ratón y en
los mastocitos derivados de células peritoneales (PCMC; Gaudenzio et al., 2009 ),
un modelo cultivado de mastocitos de tipo seroso maduros que se parecen a los
mastocitos peritoneales (Malbec et al., 2007 ), pero no en BMMC. Cuando se
cargan con antígeno, tales mastocitos MHC-II + cebados con citocinas podrían
establecer interacciones análogas con células T CD4 + para la presentación de
antígenos y la cooperación célula-célula bidireccional (Valitutti y Espinosa, 2010 ),
dando como resultado la activación de células T y una mejor respuesta de
mastocitos a la activación inducida por IgE.

Los mastocitos como efectores de la inmunidad adaptativa

Los mastocitos están involucrados no solo en la fase de inducción, sino también en

la fase efectora de la inmunidad adaptativa. Las respuestas inmunes adaptativas
generan células y moléculas efectoras. Las células incluyen células T que
expresan el receptor de antígeno, dotadas de diversas funciones efectoras, y
capaces de secretar numerosas citocinas antígeno-no específicas tras
interacciones análogas con antígeno específico. Células plasmáticas derivadas de
células B no tienen receptor de antígeno, pero que secretan altas cantidades de
anticuerpos específicos de antígeno que alcanzan el torrente sanguíneo y difusa
en el cuerpo entero (Figura (Figura 11 ).
Los anticuerpos, sin embargo, no tienen actividad biológica por sí mismos. Sus
porciones de Fab se pueden unir a antígenos con una especificidad y afinidad
variables, pero excepto en casos raros, la unión al antígeno tiene pocas o ninguna
consecuencia biológica. Los anticuerpos terapéuticos generados contra receptores
(Li et al., 2005 ) o ligandos (Ellis y Hicklin, 2008 ) pueden prevenir las interacciones
ligando-receptor y algunos anticuerpos anti-receptor pueden simular agonistas
(Shan et al., 2000 ). Sin embargo, recientemente se demostró que para
"neutralizar" toxinas bacterianas (Joller et al., 2010 ) o virus (Mallery et al., 2010)),
los anticuerpos requieren que su porción Fc se una a los receptores celulares que
transportan los complejos inmunes a los compartimentos intracelulares donde se
degradan. Para que los anticuerpos afecten a los antígenos, de hecho no solo
necesitan unirse a los antígenos a través de sus porciones Fab, sino también
interactuar a través de su porción Fc con los sistemas efectores. Entre ellos se
encuentran las muchas células, principalmente de origen hematopoyético, que
expresan receptores para la porción Fc de anticuerpos (FcR). FcR proporciona
estas células, que no tienen receptores de antígenos, con inmunorreceptores
similares a receptores de células B y una especificidad inmunológica de buena
fe(Daëron, 1997).) Es importante destacar que esta especificidad es una propiedad
intrínseca ni de la célula ni de la FcR, sino de anticuerpos. Cuando la unión a FcR,
los anticuerpos específicos se inscriben las células efectoras de la inmunidad
innata en la inmunidad adaptativa (Figura (Figura 1).1 ). Los mastocitos son tales
células.
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Receptores de anticuerpos expresados por mastocitos y otras

células mieloides
FcR son inmunorreceptores del tercer tipo. Si el BCR permite a las células B
interactuar con el antígeno nativo y si el TCR permite que las células T interactúen
con los péptidos derivados del antígeno asociados con las moléculas del MHC,
FcR permite que diversos tipos de células interactúen con el antígeno bajo la forma
de complejos inmunes. Esto puede estimular y / o controlar una variedad de
respuestas biológicas que dependen principalmente del tipo de célula. Además de
los receptores de IgE de alta afinidad, los mastocitos y los basófilos comparten
varios receptores de anticuerpos con otras células mieloides.

FcR de alta y baja afinidad

Los anticuerpos se unen a FcR con una afinidad variable (Hulett y
Hogarth, 1994 ). Una proporción de FcR de alta afinidad, que puede unir
inmunoglobulinas monoméricas en ausencia de antígeno, se ocupan in
vivo mientras que FcR de baja afinidad, que puede unir anticuerpos como
complejos inmunes multivalentes solamente, no son a pesar de la alta
concentración de inmunoglobulinas circulantes. .
Los FcR de alta afinidad incluyen IgA (FcαRI, en humanos), IgE (FcεRI, en
humanos y ratones), y receptores de IgG (FcγRI, en humanos y ratones, y FcγRIV,
solo en ratones). Los FcR de baja afinidad incluyen IgE (FcεRII, en humanos y
ratones) y receptores de IgG (FcγRII y III, en humanos y ratones). Los seres
humanos tienen tres FcγRII (FcγRIIA, B y C) y dos FcγRIII (FcγRIIIA y B) mientras
que los ratones tienen un solo receptor de cada tipo (FcγRIIB y FcγRIIIA)
solamente. La diversidad de Fc? RII humana y III se incrementa aún más por los
polimorfismos de residuos específicos en sus dominios extracelulares
(Figura (Figura 22 ).

Figura 2
Receptores murinos y humanos para la porción Fc (FcR) de IgE e IgG . Esta
figura esquematiza FcR para IgE y para IgG expresada por células mieloides de
ratón y humanas.

La constante de afinidad ( K a ) del Fc \ varepsilon RI de ratón y humano para IgE

es 10 9 - 10 M - 1 (Kulczycki y Metzger, 1974 ; Metzger, 2004 ); los de las subclases
IgG de ratón humanos y ratón Fc? R humano y, respectivamente, Span de ± 10 5 a
10 8 M -1 (Figura (Figura 3;3 ;. Bruhns et al, 2009 ). Notablemente, se han descrito
las interacciones de baja afinidad entre los receptores IgE e IgG. La IgE de ratón
puede unirse a FcγRIIB y FcγRIIIA de ratón con una K a ± 2 × 10 4 M -1 (.
Takizawa et al, 1992 ) y para FcγRIV con una K un ± 3 × 10 5 M -1 (MANCARDI et
al,. 2008 ; Figura Figura 33 ).

figura 3
Afinidad de FcR de ratón y humano para subclases IgE e IgG
homólogas . Las constantes de afinidad se determinaron mediante análisis de
resonancia de Plasmon. (Dierks et al., 1993 ; Hibbert et al., 2005 ; Nimmerjahn y
Ravetch, 2005 ; Mancardi et al., 2008 ; Bruhns et al., 2009 ...
Señales FcR

FcR no desencadena ninguna señal cuando se unen inmunoglobulinas. Señalan

cuando se agregan en la membrana celular mediante anticuerpos y antígenos
plurivalentes (Maeyama et al., 1986 ; Metzger, 1992 ). Aunque el resultado es el
mismo, la secuencia de eventos que conducen a la agregación del receptor es
diferente para FcR de alta afinidad y baja afinidad. Los anticuerpos monoméricos
se unen primero a FcR de alta afinidad que se agregan cuando un antígeno
plurivalente se une a los anticuerpos unidos al receptor. Los anticuerpos se unen
primero al antígeno, generando complejos inmunes que pueden unirse y, por lo
tanto, agregar simultáneamente FcR de baja afinidad.
FcR puede activar señales de activación y / o señales de inhibición. La naturaleza
de las señales depende principalmente de los motivos moleculares contenidos en
los dominios intracitoplásmicos de FcR o de las subunidades de receptores con los
que se asocia FcR. Se identificaron dos de estos motivos. Los motivos de
activación basados en tirosina de inmunorreceptor (ITAM) consisten en dos
motivos YxxL separados por una secuencia de aminoácidos variable de seis a
ocho (Reth, 1989 ). Los motivos de inhibición basados en tirosina de
inmunoreceptor (ITIM) consisten en un único motivo YxxL precedido por un residuo
a menudo hidrofóbico conservado libremente en la posición Y-2 (Vivier y
Daëron, 1997 ).
La activación de FcR es FcαRI, FcεRI, FcγRI, FcγRIIA, FcγRIIC, FcγRIIIA y
FcγRIV. FcγRIIA y FcγRIIC son receptores monocatenarios cuyos dominios
intracitoplásmicos son idénticos y contienen un ITAM. FcαRI, FcεRI, FcγRI,
FcγRIIIA y FcγRIV se asocian con la subunidad FcR común de FcR
(Daëron, 1997 ). FcRγ es un homodímero que contiene dos ITAM (Orloff et
al., 1990 ). FcεRI también se asocia con otra subunidad denominada FcRβ (Kinet
et al., 1988 ). FcRβ es un tetraspanin que contiene un ITAM. Tras la agregación
del receptor, ITAM se fosforila por las tirosina quinasas de la familia src (Pribluda
et al., 1994 ), lo que inicia la constitución de signalosomas intracelulares dinámicos
(Kent et al., 1994).) en el que las señales de activación son dominantes sobre las
señales de inhibición (Malbec et al., 2004 ).
Los receptores inhibidores son FcγRIIB. FcγRIIB son receptores monocatenarios
cuyo dominio intracitoplasmático contiene un ITIM (Daëron et al., 1995a ). A
diferencia de los receptores de activación, FcγRIIB no desencadena señal
intracelular tras la agregación. Activan señales negativas cuando se combinan con
receptores activadores por complejos inmunes (Daëron et al., 1995b ). En estas
condiciones, el ITIM de FcγRIIB se fosforila por la misma tirosina quinasa src-
familia que fosforila ITAM en receptores activadores (Malbec et al., 1998 ). Las
moléculas inhibidoras de FcγRIIB fosforiladas reclutan en los signalosomas. Esto
hace que las señales de inhibición dominen las señales de activación (Lesourne et
al., 2005 ; Daëron y Lesourne,2006 ).

Respuestas biológicas inducidas por FcR y su distribución tisular

La activación de FcR puede desencadenar una variedad de respuestas celulares,

incluyendo la endocitosis de complejos inmunes solubles, la fagocitosis de
complejos particulados, la exocitosis de mediadores granulares preformados,
incluyendo aminas vasoactivas, enzimas proteolíticas y / o moléculas citotóxicas, la
producción de lípidos recién formados mediadores proinflamatorios derivados o la
secreción de citoquinas, quimiocinas y factores de crecimiento recién
transcritos. La naturaleza de las respuestas biológicas desencadenadas por
anticuerpos a través deFcR depende principalmente del tipo de célula. De hecho,
están determinados por el repertorio funcional de la célula y, por lo tanto, por la
distribución tisular de FcR. Excepto las células NK que expresan solamente
FcγRIIIA, las células B que expresan solamente FcγRIIB y las células T que no
expresan ninguna, otras células de origen hematopoyético expresan
conjuntamente varios FcR y, en la mayoría de los casos, FcR activante e
inhibidor. FcγRIIB, sin embargo, tiene una distribución tisular más restringida en
humanos que en ratones. En ambos ratones y seres humanos, mastocitos y
basófilos expresar constitutivamente no sólo de alta afinidad Fc RI, sino también
de baja afinidad Fc? R de varios tipos (Figura (Figure44 ).

Figura 4
Distribución tisular de FcR de ratón y humano para IgE e IgG . La figura
muestra la expresión relativa de los receptores IgE e IgG activadores (rojo) e
inhibidores (azules) de la superfamilia de inmunoglobulinas por las células
hematopoyéticas humanas y murinas. Las barras grises muestran ...

El FcR multicadena necesita asociarse con FcRγ para alcanzar la membrana

plasmática. Su dominio intracitoplasmático de hecho contiene un sitio de retención
que secuestra el polipéptido en el retículo endoplásmico, a menos que se asocie
con FcRγ (Lobell et al., 1993 ; Letourneur et al., 1995 ). La expresión de estos
receptores, por lo tanto, depende de la distribución tisular de FcRγ, y los ratones
deficientes en FcRγ no tienen FcR activador (Takai et al., 1994 ). El FcεRI del
ratón, pero no el FcεRI humano, también necesita asociarse con FcRβ
(Kinet, 1999 ). Como FcRβ se expresa por mastocitos y basófilos solo en ambas
especies, la expresión de FcεRI se restringe a estas células en ratones pero no en
humanos (Gounni et al., 1994 , 2001).; Joseph et al., 1997 ). Notablemente, el
FcγRIIIA del ratón, cuya expresión requiere FcRγ pero no FcRβ, se asoció con
ambas subunidades en los mastocitos (Kurosaki et al., 1992 ).
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Efectos diferenciales de anticuerpos IgG en mastocitos y

basófilos
El patrón de expresión de FcR permite que los mastocitos se activen no solo por
IgE, sino también por anticuerpos IgG. Las respuestas inducidas por IgE de
mastocitos y basófilos son bien conocidas. Las respuestas de los mastocitos
inducidas por IgG son menos conocidas. Del mismo modo, los basófilos
coexpresan receptores para IgE e IgG. A diferencia de los mastocitos, sin
embargo, los basófilos no son activados por IgG.

Respuesta de mastocitos a anticuerpos IgG

Además de FcεRI, los mastocitos de ratón expresan constitutivamente, FcγRIIB y

FcγRIIIA (Benhamou et al., 1990 ). Como FcεRI y FcγRIIIA se expresan en
asociación con las mismas subunidades en células cebadas de ratón, pueden
desencadenar las mismas respuestas biológicas. Se demostró que la agregación
de FcγRIIIA de ratón desencadena tanto la liberación de serotonina (Daëron et
al., 1992 ) como la secreción de TNF-α (Latour et al., 1992 ) cuando se expresa en
la leucemia basófila de rata (RBL) 2H3 transfectantes. Del mismo modo, la
participación de FcγRIIIA en BMMC o en PCMC desencadenó una liberación de β-
hexosaminidasa y una secreción de TNF-α (Malbec et al., 2007).) Las respuestas
dependientes de FcεRI y FcγRIIIA de BMMC fueron cualitativamente similares
(liberaron los mismos mediadores granulares y secretaron las mismas
citoquinas). Las respuestas inducidas por IgE e IgG fueron cuantitativamente
similares en los mastocitos peritoneales de ratón y en PCMC.
Aunque BMMC y PCMC de ratón expresan cantidades similares de FcγRIIB y
FcγRIIIA, PCMC puede activarse fácilmente por complejos inmunes de IgG, pero
no por BMMC. La razón es que FcγRIIB tiene un potente efecto inhibidor sobre la
activación dependiente de FcγRIIIA en BMMC, pero una mucho más leve en
PCMC. El BMMC deficiente en FcγRIIB respondió de manera similar a los
complejos inmunes IgG como PCMC deficiente en FcγRIIB, y ambos tipos de
mastocitos contenían cantidades similares de inositol fosfatidil 5-fosfatasa SHIP1
que contiene el dominio SH2 que representa la regulación negativa dependiente de
FcγRIIB (Ono et al. 1996 ; Huber et al., 1998 ). La diferencia fue que, por una
razón desconocida, BMMC usa SHIP1 más eficientemente que PCMC (Malbec et
al., 2007 ).
Además de FcεRI, las células cebadas de la piel humana expresan constitutivamente FcγRIIA

(Ghannadan et al., 1998 ; Zhao et al., 2006 ). Sin embargo, todas las células cebadas humanas pueden

no expresar FcγRIIA ya que se informó que las células cebadas del pulmón son negativas para CD32

(Agis et al., 1996 ). Se informó que los mastocitos derivados de la sangre del cordón umbilical ((Zhao et

al., 2006).) Debido a que residen en los tejidos, las células cebadas no son fácilmente accesibles en los

humanos. Las muestras tisulares obtenidas después de la cirugía son la única fuente disponible de

mastocitos humanos maduros. Aunque, como BMMC de ratón, son células inmaduras que no tienen

equivalente fisiológico conocido, el CBMC se ha usado con mayor frecuencia. CBMC expresa FcγRIIA

(nuestra observación no publicada) y FcγRIIB (Kepley et al., 2004 ). La línea de mastocitos humanos

HMC-1 también expresa FcγRIIA, pero no FcεRI. La agregación de FcγRIIA con anticuerpos específicos

indujo la liberación de serotonina por los transfectantes RBL-2H3 (Daëron et al., 1995a ). El compromiso

de FcγRIIA por complejos inmunes de IgG desencadenó células cebadas peritoneales y PCMC de

ratones transgénicos FcγRIIA para desgranular y liberar histamina (Jönsson et al.,2011b ). Finalmente, los

anticuerpos anti-FcγRIIA activaron los mastocitos derivados de la piel humana para liberar histamina

(Jönsson et al., 2011b ) y para secretar mediadores derivados de lípidos y citoquinas (Zhao et al., 2006 ).

Además de los receptores de IgG de baja afinidad, los receptores de IgG de alta afinidad (FcγRI) podrían

ser inducidos por IFN-γ en células humanas (Okayama et al., 2000 ), pero no en ratones (Tan et

al., 2003 ), y se encontró en los mastocitos de piel de las lesiones de pacientes con psoriasis (Tkaczyk et

al., 2002 ) y en los mastocitos intestinales de pacientes con enfermedad de Crohn (Kobayashi et

al., 2007 ). Estos receptores están asociados con la subunidad FcRγ en células cebadas humanas

tratadas con IFN-γ. Si también se asoció con FcRβ es desconocido. La agregación de FcγRI indujo la

liberación de histamina, la producción de prostaglandina D2 y leucotrieno C4, y la secreción de IL-3, IL-13,

TNF-α y GM-CSF por mastocitos humanos tratados con IFN-γ (Okayama et al. ., 2001; Tkaczyk et

al., 2002 ).

Humanos Ratones Expresan No Expresan caussa

 CCP FcεRI, FcγRIIA

FcγRIIA

(CCPulm) (-)

CD32

CBMC pero FcγRIIB FcγRIIA residen en los

no los tejidos, NO

mastocitos accesibles

humanos

derivados de

la piel

Respuestas basófilas a anticuerpos IgG

Además de FcεRI, los basófilos de ratón expresan constitutivamente FcγRIIIA y
FcγRIIB, es decir, el mismo FcR que los mastocitos de ratón. A diferencia de
PCMC, pero al igual que BMMC, no responden a los complejos inmunes de
IgG. Esta ausencia de respuesta resulta de una inhibición activa de las señales de
activación dependientes de FcγRIIIA por FcγRIIB. Los basófilos de ratones wt de
hecho secretaron IL-4 en respuesta al compromiso de FcγRIIIA por anticuerpos
específicos de FcγRIIIA o por complejos inmunes de IgG cuando se bloquearon
FcγRIIB por un anticuerpo específico de FcγRIIB. Confirmando estos resultados,
los basófilos de ratones deficientes en FcγRIIB secretaron grandes cantidades de
IL-4 en respuesta a complejos inmunes de IgG. Por lo tanto, FcγRIIB evita que los
basófilos de ratón respondan a los anticuerpos IgG (nuestros datos no publicados).

Además del FcεRI, los basófilos humanos expresan constitutivamente FcγRIIA,

FcγRIIB (Kepley et al., 2000 ) y pequeñas cantidades de FcγRIIIB (Meknache et
al., 2009 ). Los basófilos de donantes normales podrían activarse fácilmente,
según se evaluó mediante la regulación positiva de CD203c y la liberación de
histamina, tras el acoplamiento de FcεRI con fragmentos F (ab ') 2 de anticuerpos
anti-IgE. No se activaron de forma detectable tras el acoplamiento de FcγRIIIB
por fragmentos F (ab ') 2 de anticuerpos anti-FcγRIIIB (Meknache et al., 2009).) Si
la ausencia de respuesta al compromiso de FcγRIIIB se debe a la muy baja
expresión de este receptor en basófilos (10 a 100 veces menor que en neutrófilos)
o a la incapacidad de este receptor glicosilfosfatidil anclado de desencadenar
señales de activación por sí mismo no está claro . Los basófilos normales también
pueden ser activados por F (ab ') 2fragmentos de anticuerpos anti-FcγRIIA,
especialmente cuando las células se cebaron mediante una incubación durante la
noche con IL-3 humana, pero mucho menos que con anti-IgE. No respondieron de
manera detectable cuando se desafiaron con complejos inmunes de IgG o IgG
humana agregada por calor, incluso si se cebaban con IL-3. La pobre respuesta de
los basófilos a los anticuerpos anti-FcγRIIA y su ausencia de respuesta a los
complejos inmunes de IgG pueden explicarse por la expresión relativa de FcγRIIA
y FcγRIIB, respectivamente. De hecho, encontramos que los basófilos humanos se
encuentran entre las células sanguíneas que muestran los niveles más bajos de
FcγRIIA, y que expresan más FcγRIIB que cualquier otra célula sanguínea
(nuestros datos no publicados).

Como los basófilos de ratón pero, probablemente no por la misma razón, los
basófilos humanos no responden a los anticuerpos IgG. Se deduce que FcγR no
ejerce las mismas funciones en los mastocitos y los basófilos: cuando los
complejos inmunes de IgG comprometen FcγR, la activación es dominante en los
mastocitos, mientras que la inhibición es dominante en los basófilos.

Ir:
Mastocitos y basófilos en modelos in vivo de alergia y
autoinmunidad
En contraste con las propiedades in vitro de mastocitos y basófilos, su contribución
a enfermedades humanas o incluso a modelos murinos de enfermedades
humanas ha sido más difícil de delinear. Una razón es que, hasta hace muy poco,
no había una media satisfactoria para investigar las contribuciones de los
mastocitos y los basófilos in vivo .
Fortalezas y debilidades de las herramientas disponibles utilizadas
para evaluar la contribución de los mastocitos y los basófilos
en modelos in vivo de enfermedades inflamatorias
Las herramientas químicas, los llamados estabilizadores de mastocitos, como el
cromolín, el ketotifeno o el tranilast, se han usado para tratar a pacientes
asmáticos y otros alérgicos durante casi tres décadas (Patalano y Ruggieri, 1989 ;
Ruggieri y Patalano, 1989 ). A veces se han usado también como inhibidores
farmacológicos de las funciones de los mastocitos (Costa-Pinto et al., 2007 ; Kano
et al., 2008 ). El mecanismo por el cual estas drogas inactivan las células cebadas
es poco conocido y la cromolina también afecta a los eosinófilos y neutrófilos. Los
resultados obtenidos usando tales herramientas son, por lo tanto, difíciles de
interpretar (Moqbel et al., 1986 ).
Más importante aún, los ratones con deficiencia de mastocitos se han utilizado
ampliamente para investigar la participación de mastocitos in vivo , en una
variedad de modelos experimentales de enfermedades humanas. Hay varios de
esos ratones. Los ratones WCB6F1 / J-Kitl Sl / Kitl Sl-d (Sl / Sl-d) no expresan SCF
de membrana en fibroblastos y otras células (Zsebo et al., 1990 ). Los ratones
WBB6F1-Kit W / Kit W-v (W / Wv) son mutantes compuestos para el kit del receptor
SCF (un alelo es nulo, el otro está deteriorado). C57BL / 6-Kit W-shLos ratones
(Wsh) transportan una inversión de un elemento regulador, que conduce a la
deficiencia de Kit, pero también a una alteración del gen que codifica la proteasa
transmembrana corina que se expresa en los cardiomiocitos y regula la presión
sanguínea (Nigrovic et al., 2008) Se propuso que las enfermedades
experimentales que fueron anuladas o más leves en estos ratones que en ratones
wt dependieron de las células cebadas. Sin embargo, los datos obtenidos con
estos ratones deben interpretarse con precaución. Si son deficientes en
mastocitos, estos ratones muestran numerosas anormalidades adicionales. La
razón es que Kit se expresa no solo por los mastocitos, sino también por las
células progenitoras hematopoyéticas, las células germinales y algunas células
diferenciadas, como los melanocitos y las células Cajal intestinales. Por lo tanto,
los ratones Sl / Sl-d y W / Wv son estériles y anémicos. Los ratones W / Wv son
neutropénicos, carecen de células Cajal y células T intraepiteliales γδ, son
parcialmente sordos y propensos a dermatitis y gastritis. Los ratones Wsh son
completamente fértiles, pero con frecuencia desarrollan proliferación mieloide y
megacariocítica en el bazo y la médula ósea, lo que produce
neutrofilia.2011 ). Ilustrando el problema, se observaron resultados discrepantes
en modelos de hipersensibilidad de contacto en ratones W / Wv y Wsh (van
Loveren y otros, 1983 , Galli y Hammel, 1984 ; Mekori y Galli, 1985 ; Biedermann
et al., 2000 ; Grimbaldeston et al., 2007 ).
En vista de las muchas anormalidades que afectan a los ratones Kit-mutantes, la
conclusión de que un proceso experimental depende de mastocitos porque no
ocurre en tales ratones generalmente se confirma con la demostración de que
puede restaurarse si los ratones deficientes se reconstituyen con mastocitos. . Las
conclusiones extraídas de estos experimentos deben, sin embargo, tomarse con
precaución. Los mastocitos cultivados, es decir, esencialmente BMMC, se usan
comúnmente para reconstituir ratones deficientes en mastocitos, y la reconstitución
requiere largos períodos de tiempo (generalmente 8-12 semanas). La
reconstitución rara vez se completa y varía mucho con el sitio anatómico
(Grimbaldeston et al., 2005).) Además, BMMC son células inmaduras, e incluso
después de una diferenciación prolongada en cultivos que contienen IL-3, pueden
contener progenitores hematopoyéticos pluripotentes residuales. Lo que les
sucede a estas células después de que se les inyecta se desconoce, y no se
puede excluir la posibilidad de que ocurra una diferenciación in vivo en células
distintas a los mastocitos.
Otro enfoque para determinar los roles in vivo de los mastocitos y los basófilos
consiste en reducir estas células inyectando ratones con anticuerpos
específicos. Por lo tanto, los estudios que usaron el mAb MAR-1 FcεRI anti-ratón o
el mAb ACK2 anti CD117 (Kit) de ratón, llevaron a la conclusión de que los
mastocitos, que expresan tanto FcεRI como Kit, son necesarios para la diarrea oral
experimental inducida por alérgenos (Brandt et al., 2003 ). La depleción de
mastocitos inducida por anticuerpos tiene varios inconvenientes. De hecho, no hay
anticuerpos específicos de mastocitos disponibles. MAR-1 se ha utilizado
ampliamente para eliminar basófilos (Denzel et al., 2008 ; Sokol et
al., 2008 , 2009 ; Perrigoue et al., 2009 ; Yoshimoto et al., 2009).) Como se dirige a
las células que expresan FcεRI, sin embargo también agota las células
cebadas. Además, su especificidad es cuestionable ya que agota también a DC
(Hammad et al., 2010). ACK2 se dirige a todas las células que expresan Kit, es
decir, células cebadas, células de Cajal y células madre
hematopoyéticas. Asimismo, se informó que el anticuerpo anti-CD200R3 Ba103
eliminó selectivamente basófilos cuando se inyectó por vía intravenosa (Obata et
al., 2007 ). Sin embargo, CD200R3 se expresa no solo por los basófilos, sino
también por los mastocitos (Obata et al., 2007 ). CD200R3 funciona como un
receptor activador cuyo dominio transmembrana contiene un residuo de lisina que
es probable que medie su asociación con una subunidad que contiene ITAM como
FcRγ o DAP12 y, de hecho, Ba103 activa tanto los basófilos como los
mastocitos.in vitro (Kojima et al., 2007 ). Cómo se agotan los basófilos es
desconocido. Se piensa que la depleción celular inducida por mAb implica la
activación de células efectoras que expresan FcγR a través de la citotoxicidad
mediada por células dependiente de anticuerpos (ADCC). Uno puede preguntarse
si, después de la ADCC intensiva, la función de estas células, que son críticas en
la inflamación, podría no modificarse para experimentos posteriores. Finalmente,
uno también puede preguntarse acerca de las consecuencias in vivo de una
liberación masiva de reservas de moléculas biológicamente activas en los gránulos
de células cuando las células cebadas y los basófilos son activados o destruidos
sistémicamente por ADCC.
Debido a las muchas dificultades discutidas anteriormente, optamos por utilizar
otro enfoque para investigar las contribuciones in vivo de los mastocitos y otras
células mieloides en la anafilaxia. Este enfoque consiste en utilizar ratones cuyos
mastocitos y basófilos están normalmente presentes, pero no pueden responder a
un estímulo dado porque carecen de los receptores necesarios. Por lo tanto, los
mastocitos y los basófilos no pueden responder a los anticuerpos IgG en ratones
FcγRIIB - / - FcγRIIIA - / - , pero las células que, a diferencia de los mastocitos,
expresan FcγRIV, y / o FcγRI pueden. La distribución tisular diferencial de los
diversos FcR (Figura (Figure4)4 ) por lo tanto puede ser explotado para
diseccionar la relativa in vivo contribuciones de diferentes tipos de células en
modelos experimentales de enfermedades inflamatorias.
Recientemente, ratones modificados genéticamente se han generado que permiten
a los mastocitos y / o basófilos a ser dirigidos selectivamente usando promotores
de proteasas expresadas específicamente en un tipo de célula o el otro
(Tabla (Tabla 1).1 ). Mcpt5 (Scholten et al., 2008 ), Cpa3 (Feyerabend et
al., 2009 , 2011 ; Lilla et al., 2011 ) o quimasa (Musch et al., 2008 ) se utilizaron
para detectar mastocitos, mientras que Mcpt8 (Ohnmacht) et al., 2010 ; Wada et
al., 2010 ; Sullivan et al., 2011) se usó para atacar basófilos. La eliminación celular
fue inducible o constitutiva. Las células que expresan el receptor de toxina diftérica
(DTR) se agotaron después de la inyección de toxina diftérica-α (DTA), mientras
que las células que expresan DTA se eliminaron constitutivamente. Otro sistema,
basado en el uso de la recombinasa Cre , dio lugar a la destrucción constitutiva
selectiva de células que expresan altos niveles de Cre , debido a latoxicidad
de Cre . Los mastocitos y los basófilos son tales células cuando Cre está bajo el
control del Cpa3 (Feyerabend et al., 2011 ) o Mcpt8 (Ohnmacht et al., 2010).)
promotores, respectivamente. Recientemente se informó de una variación de este
sistema, en la que se eliminó un factor antiapoptótico flojo en mastocitos y
basófilos que expresaron Cre bajo el control de Cpa3 (Lilla et al., 2011 ). Usar el
promotor Mcpt5 para controlar la expresión de DTR o DTA, condujo al agotamiento
selectivo de mastocitos peritoneales y de la piel, es decir, de mastocitos de tejido
conectivo (CTMC; Dudeck et al., 2011 ), mientras que usaron el promotor Cpa3
para controlar Cre expresión condujo al agotamiento de CTMC y mastocitos de la
mucosa (MMC; Feyerabend et al., 2011 ; Lilla et al., 2011).) Este último sistema
también condujo al agotamiento de una proporción significativa de
basófilos. Cuando estaba bajo el control del promotor de quimasa, Cre se expresó
selectivamente en MMC (Musch et al., 2008 ). Estos ratones deberían permitir que
uno agote MMC solo cuando se cruza con ratones que expresan DTR o
DTA. Usando el promotor Mcpt8 para controlar la expresión de DTR (Wada et
al., 2010 ), DTA o Cre (Ohnmacht et al., 2010 ) condujo a la depleción selectiva de
los basófilos (Tabla (Tabla 11 ).

tabla 1
Comparación de ratones genéticamente modificados con mastocitos y / o
basófilos .

Debido a las limitaciones discutidas anteriormente de los enfoques utilizados

previamente para estudiar la función de los mastocitos in vivo , algunas
conclusiones sobre el papel de los mastocitos en la inflamación alérgica y
autoinmune han sido cuestionadas por otros enfoques, y deben reconsiderarse.

Mastocitos en la inflamación autoinmune

La evidencia indirecta sugiere que la activación de los mastocitos dependiente de

FcγR es crítica en las enfermedades autoinmunes inducidas por IgG, tanto en
modelos de ratón como en pacientes. Numerosas células cebadas se encuentran
en placas de esclerosis múltiple, la triptasa específica de mastocitos está elevada
en el líquido cefalorraquídeo (Rozniecki et al., 1995 ) y las transcripciones de FcεRI
y triptasa están reguladas positivamente en las lesiones (Pedotti et al., 2003).) Del
mismo modo, se descubrió que los mastocitos se acumulan en lesiones cerebrales
en la encefalomielitis alérgica experimental (EAE), un modelo de esclerosis
múltiple inducida inmunizando ratones con péptidos derivados de mielina o
mielina. Los síntomas clínicos se redujeron marcadamente, así como los infiltrados
de células T y la producción de IFN-γ en ratones W / Wv, y pudieron recuperarse
mediante BMMC de ratones wt, pero no de ratones deficientes en FcRγ o FcγRIIIA
(Tanzola et al. 2003 ).
Los mastocitos también han sido implicados en artritis reumatoide, síndrome de
Sjögren, esclerosis sistémica y tiroiditis en humanos (Hebbar et al., 1995 ; Tetlow y
Woolley, 1995 ; Akimoto et al., 1998 ; Skopouli et al., 1998 ; Toda la vida al., 2000 ;
Hueber et al., 2010 ). La artritis inducida por K / BxN en suero, un modelo de ratón
de artritis reumatoide pasiva (Monach et al., 2007 ), fue abrogada en ratones
deficientes en FcRγ (Kyburz et al., 2000 ). También se abrogó en W / Wv o en
ratones Sl / Sl-d, y se restauró transfiriendo BMMC de ratones wt (Lee et
al., 2002 ). Zhou et al. ( 2007) sin embargo, informaron que la artritis mediada por
anticuerpos no se vio afectada en ratones Wsh. Podríamos confirmar este
resultado en la artritis K / BxN usando Wsh, pero también en ratones que carecen
de activación de FcR en los mastocitos (Mancardi et al., 2011 ). Finalmente, Tsuboi
et al. ( 2011 ) informaron que una transferencia de neutrófilos fue suficiente para
restaurar la artritis K / BxN en ratones W / Wv.
Muy recientemente, se descubrió que tanto la artritis K / BxN como la EAE se
desarrollan normalmente en ratones Cpa3 Cre / + que carecen tanto de tipo conectivo
como de MMC (Feyerabend et al., 2011 ). Este resultado desafía fuertemente la
conclusión previamente extraída de que los mastocitos son obligatorios para las
enfermedades autoinmunes experimentales inducidas por IgG. No excluye que los
mastocitos estén involucrados, pero su función es desconocida y su presencia en
las lesiones puede ser una consecuencia más que una causa. Junto con
resultados previos obtenidos en ratones Kit-mutantes, estos resultados recientes
también indican que la deficiencia de un kit es más crítica en la artritis experimental
y la encefalomielitis que en los mastocitos, y probablemente, en una deficiencia de
basófilos.

Mastocitos y basófilos en alergia

El papel de la activación de los mastocitos dependiente de FcεRI inducida por IgE

en la anafilaxia experimental (Metcalfe et al., 2009 ; Kalesnikoff y Galli, 2010 ) y en
la alergia (Galli y Tsai, 2010 ) es bien conocido y documentado. Recientemente se
confirmó en nuevos ratones con deficiencia de mastocitos, ya que la anafilaxia
sistémica pasiva inducida por IgE (PSA) se derogó en ratones Cpa3 Cre / + y pudo
restaurarse después de la reconstitución con wmc BMMC (Feyerabend et
al., 2011 ). El papel de la activación de mastocitos dependiente de FcγR inducida
por IgG no es tan claro en todos los modelos experimentales.
La anafilaxia cutánea pasiva es un modelo que muy probablemente depende
únicamente de los mastocitos, tanto cuando se inducen con IgE como con
anticuerpos IgG. Se anuló PCA inducida por IgE (IgE-PCA) en ratones deficientes
en FcεRI (Dombrowicz et al., 1993 ), en ratones W / Wv (Wershil y col., 1987 ;
Arimura et al., 1990 ), en ratones Wsh ( Zhou et al., 2007 ), y en ratones con
deficiencia de histidina decarboxilasa que tienen números reducidos de mastocitos
que no contienen histamina (Ohtsu et al., 2002). Podría restaurarse mediante una
reconstitución a corto plazo de ratones deficientes en mastocitos con mastocitos
inyectados intradérmicamente (Wershil et al., 1987 ). Recientemente, se descubrió
que IgE-PCA se abrogó en Cpa3 Cre / +ratones (Feyerabend et al., 2011 ). La PCA
inducida por IgG se abrogó en deficiencia de FcγRIIIA (Hazenbos et
al., 1996 ). Descubrimos recientemente que la PCA inducida por IgG humana
inducida por IgG1 o agregada por calor de ratón se anuló en múltiples ratones
deficientes en FcR, cuyos mastocitos no expresaban FcγR. Sin embargo, se
observó PCA si estos ratones se cruzaron con ratones transgénicos FcγRIIA,
cuyos mastocitos expresaron este receptor humano, pero no si los ratones Wsh se
cruzaron con los mismos ratones transgénicos FcγRIIA (Jönsson et al., 2011b ).
Como se esperaba, se demostró que el PSA inducido por IgG1 de ratón depende
de FcγRIIIA en ratones (Miyajima et al., 1997 ). Inesperadamente, se descubrió
que no se abrogó en ratones con deficiencia de mastocitos y, por lo tanto, no
dependía de los mastocitos (Miyajima et al., 1997 ). El agotamiento de los basófilos
por Ba103, sin embargo, abolió el PSA evaluado por la caída de la temperatura
corporal, lo que lleva a la conclusión de que los basófilos, pero no los mastocitos,
representan el PSA inducido por IgG1 (Tsujimura et al., 2008 ). Esta conclusión,
sin embargo, pronto se vio desafiada por el hallazgo de que el PSA inducido por
IgG1 todavía se producía en ratones Mcpt8-Cre deficientes en basófilos
(Ohnmacht et al., 2010) Usando ratones deficientes en FcR que expresan
receptores para IgG2 pero no receptor para IgG1, podríamos demostrar que el
PSA puede ser inducido por anticuerpos IgG2, que el PSA inducido por IgG2
puede ocurrir en ausencia de activación de FcR en mastocitos y basófilos, y que
los neutrófilos contribuyen en gran medida a esta reacción (Jönsson et al., 2011a ).
La última observación demuestra que la anafilaxis puede no depender solo de
mastocitos o basófilos. Si, de hecho, estas células se encuentran entre las células
mieloides involucradas en la inflamación, ya sea fisiológica o patológica, y en el
último caso, ya sea alérgica o autoinmune, no están solas. Es necesario evaluar la
contribución de las células distintas de los mastocitos y los basófilos en ambos
tipos de enfermedades. Utilizando ratones deficientes en FcR cuyos mastocitos y
basófilos no expresan FcR activante, encontramos un papel inesperado de los
neutrófilos en la anafilaxia sistémica (Jönsson et al., 2011a ).
Ir:

Neutrófilos en anafilaxia
La anafilaxia pasiva es un medio altamente sensible y conveniente para estudiar
los anticuerpos anafilácticos. Los animales ingenuos inyectados con anticuerpos
específicos, sin embargo, difieren marcadamente de los animales inmunizados
activamente. Por lo tanto, investigamos mecanismos moleculares y celulares que
dan cuenta de ASA utilizando ratones deficientes en FcR.

ASA no requiere FcεRI ni FcγRIIIA

Primero encontramos que cuando se inmunizaron con antígeno en adyuvante de

Freund, los ratones produjeron no solo cantidades elevadas de IgG1 específica y
cantidades (mucho) inferiores de IgG2 sino también algo de IgE, mientras que los
ratones inmunizados con antígeno en alumbre produjeron grandes cantidades de
IgG1 y algo de IgE , pero no hay IgG2 detectable. Sorprendentemente, los ratones
que carecen de receptores IgE (tanto FcεRI como FcεRII) o FcγRIIIA sufrieron
choques similares a los ratones wt cuando se inmunizaron con antígeno en
adyuvante de Freund y se expusieron al antígeno por vía intravenosa. Aún más
sorprendentemente, cuando se inmunizaron y desafiaron en las mismas
condiciones, los ratones quincuple inactivados (5KO) que carecían de FcεRI,
FcεRII, FcγRI, FcγRIIB y FcγRIIIA, también experimentaron descargas
anafilácticas de intensidad similar y que condujeron a una mortalidad similar a los
ratones wt.

ASA puede ser inducido por anticuerpos IgG2 a través de FcγRIV

Los únicos FcR conocidos expresados por ratones 5KO son FcRn y FcγRIV. La
evidencia de que FcγRIV fue responsable de los choques se obtuvo utilizando
anticuerpos bloqueantes específicos de FcγRIV que derogó tanto los síntomas
clínicos como la mortalidad. Los FcγRIV son receptores de alta afinidad que se
unen a IgG2, pero no a IgG1 (Nimmerjahn et al., 2005 ; Mancardi et
al., 2008 ). Esto sugirió que los anticuerpos IgG2, pero no IgG1, eran responsables
de ASA en ratones 5KO inmunizados con antígeno en adyuvante de Freund. De
hecho, los ratones 5KO no se sometieron a ASA si se inmunizaron con antígeno
en alumbre.
Los neutrófilos son necesarios y suficientes para el ASA dependiente
de FcγRIV

Los FcγRIV se expresan por monocitos / macrófagos y neutrófilos, pero no por

mastocitos, basófilos o eosinófilos. Por lo tanto, investigamos la posible
contribución de estos dos tipos de células. La depleción de monocitos /
macrófagos por liposomas que contienen clodronato o la inactivación por gadolinio
no tuvo efecto sobre ASA en ratones 5KO inmunizados en adyuvante de
Freund. Sin embargo, la depleción de neutrófilos con anticuerpos anti-Gr1 abrogó
ASA en estos ratones. Notablemente, la depleción de neutrófilos fue transitoria, y
ASA se restableció espontáneamente a medida que los números de neutrófilos
volvieron a la normalidad. Apoyando esta correlación, se pudo observar una
liberación sistémica rápida de mieloperoxidasa en ratones 5KO inyectados con
luminol por vía intraperitoneal antes de ser expuestos a ASA. Finalmente,
demostrando el papel de los neutrófilos, ASA, que fue derogado en ratones
deficientes en FcRγ,

Los neutrófilos desempeñan un papel dominante en ASA en ratones wt

Si los neutrófilos representan ASA en ratones 5KO, pueden no ser críticos en

ratones wt. Por lo tanto, examinamos el efecto de la reducción de neutrófilos,
basófilos o ambos en ASA en ratones wt. La depleción de basófilos tuvo un efecto
leve sobre la caída de la temperatura corporal y sobre la mortalidad observada
después de la exposición al antígeno. El agotamiento de los neutrófilos tuvo un
efecto más marcado en la disminución de la temperatura y la mortalidad. El
agotamiento de neutrófilos y basófilos tuvo un efecto más marcado sobre la caída
de temperatura y el mismo efecto sobre la mortalidad. Por lo tanto, ambos tipos de
células contribuyen a ASA en ratones wt, pero los neutrófilos juegan un papel
dominante.

Los neutrófilos pueden inducir IgG-PSA

Si como se discutió anteriormente, los mastocitos son las células efectoras del
PSA inducido por IgE (Metcalfe et al., 2009 ; Kalesnikoff y Galli, 2010).), las células
responsables de IgG1-PSA no se han identificado formalmente. Encontramos que
los neutrófilos pueden jugar un papel importante en IgG-PSA. Los complejos
inmunes hechos de GPI y anticuerpos policlonales IgG anti-GPI o de DNP-HSA y
anticuerpos monoclonales IgG2b anti-DNP podrían inducir anafilaxia cuando se
inyectan iv en ratones 5KO. Este IgG2-PSA dependiente de FcγRIV se derogó
después de la depleción de neutrófilos pero no de monocitos / macrófagos. Por lo
tanto, los neutrófilos no solo son capaces de inducir ASA, sino que también
pueden inducir IgG2-PSA. No se investigó si pueden contribuir a IgG1-PSA. Es
una posibilidad probable, ya que Fc? RIIIA, cuya eliminación bastado para abrogar
esta reacción (nuestros datos no publicados) y que se unen IgG1 eficientemente
complejos inmunes (Figura (Figura 3),3), Se expresan en los neutrófilos de ratón
(Figura (Figure44 ).

Los neutrófilos humanos pueden inducir ASA

Notablemente, ASA podría restaurarse inyectando ratones inmunodeficientes

activamente con FcRγ no solo con neutrófilos de ratón, sino también con
neutrófilos humanos de donantes normales poco antes de la exposición al
antígeno. No se indujo choque en ratones no inmunizados, excluyendo que los
neutrófilos humanos se activaron de forma no específica en sangre de ratón, y la
magnitud de la caída de temperatura fue proporcional a la cantidad de neutrófilos
humanos inyectados en ratones inmunizados. Apoyando estos hallazgos in vivo ,
los neutrófilos humanos podrían ser activados in vitro por complejos inmunes
preformados hechos con IgG1 o IgG2 de ratón, según se evalúa mediante la
regulación por disminución de la expresión de CD62L.

FcγRIIA puede desencadenar anafilaxia

Los neutrófilos humanos no expresan FcγRIV que no existe en humanos. Sin

embargo, expresan dos receptores de IgG: el FcγRIIA de cadena sencilla que
contiene ITAM y el FcγRIIIB anclado a GPI que no existen en ratones. Debido a
que FcγRIIA, pero no FcγRIIIB, tiene capacidades de activación celular y porque
FcγRIIA, pero no FcγRIIIB, se une a complejos inmunes hechos con anticuerpos
IgG de ratón, investigamos el papel de FcγRIIA en ASA.

Para este fin, cruzamos ratones transgénicos FcγRIIA humanos (FcγRIIA Tg ) con
ratones deficientes en FcRγ. Es importante destacar que, debido a que se colocó
bajo el control de su propio promotor, FcγRIIA tenía la misma distribución de tejido
en ratones transgénicos que en humanos. Cuando inmunizados y desafiados con
el antígeno de forma activa, gamma de FcR - / - Fc? RIIA Tg ratones se sometieron a
ASA de magnitud comparable como ratones WT (Figura (Figura5),5 ), y ambos
caída de temperatura y la mortalidad fueron abrogadas por el tratamiento de
ratones con el bloqueo anti-Fc? RIIA anticuerpo IV.3. Por lo tanto, ASA puede ser
activado por FcγRIIA. Las células responsables de ASA dependiente de FcγRIIA
no se identificaron. Se observaron resultados similares en FcRγ - /
- FcγRIIA Tgratones inmunizados con antígeno en adyuvante de Freund, que induce
anticuerpos IgG1 e IgG2, o con antígeno en alumbre, que induce solo anticuerpos
IgG1. FcγRIIA tiene una afinidad por IgG1 e IgG2 de ratón (nuestros datos no
publicados).

Figura 5
Propiedades anafilácticas de FcγRIIA Tg en ratones FcR-KO . La figura muestra
la expresión de FcR en ratones FcgRIIA Tg utilizados en nuestros estudios
(izquierda) y la magnitud de sus respuestas en cuatro modelos de anafilaxia
(derecha).

Para investigar más a fondo el papel de FcγRIIA en la anafilaxia, cruzamos ratones

FcγRIIA Tg con ratones 5KO o 3KO (que carecen de FcγRI, FcγRIIB y
FcγRIIIA). Una ventaja de los dos últimos ratones mutantes es que expresan
FcγRIV, mientras que los ratones FcRγ - / - FcγRIIA Tg no expresan FcγRIV . Este
receptor activador puede usarse para experimentos de depleción con anticuerpos
IgG2, pero no se utilizará si se utilizan anticuerpos IgG1 para la anafilaxia. A la
inversa, gamma de FcR - / - Fc? RIIA Tg ratones expresan Fc? RIIB mientras 3KO-
Fc? RIIA Tg y 5KO-Fc? RIIA Tg ratones no lo hacen. Reacciones inducidas-IgG por
lo tanto no son enviadas a la inhibición FcyRIIB dependiente en estos ratones
(Figura (Figura55 ).
IgG-PSA podría inducirse tanto en ratones Tg 3KO-FcγRIIA Tg como en ratones 5KO-
FcγRIIA y, como se esperaba, los choques observados en estos ratones fueron
más graves que los choques observados en ratones FcRγ - / - FcγRIIA Tg . Del
mismo modo, IgG-PCA podría ser inducida en 5KO-Fc? RIIA Tg ratones inyectados
con IgG humana policlonal agregada por calor o con OVA-ratón IgG1 complejos
inmunes anti-ova id (Figura (Figura5).5 ). De acuerdo con estos hallazgos, PCMC
de 3KO-FcγRIIA Tgratones degranularon, liberaron mediadores granulares y
secretaron mediadores lipídicos tras la exposición con ova-IgG1 anti-ova o con
GPI-IgG anti-GPI inmunocomplejos. Para confirmar que, como sugieren estos
resultados, los mastocitos son responsables de la PCA dependiente de FcγRIIA,
los ratones Tg 3KO y 3KO-FcγRIIA se cruzaron con ratones Wsh. PCA no se
observó ni en 3KO-Wsh ni en ratones 3KO- FcγRIIA Tg Wsh, mientras que se
produjo en ratones Tg 3KO-FcγRIIA .
Ir:

Otras células mieloides en la alergia

Macrófagos / monocitos en PSA

En contraste con estos resultados que en conjunto indican que los mastocitos son
el tipo de célula que da cuenta de PCA dependiente de FcγRIIA, el PSA
dependiente de FcγRIIA se desarrolló normalmente en los ratones
3KO- FcγRIIA Tg Wsh. La depleción de basófilos con Ba103 no afectó al PSA
dependiente de FcγRIIA en 3KO-FcγRIIA Tgratones. Por lo tanto, tanto los
mastocitos como los basófilos son prescindibles para el PSA dependiente de
FcγRIIA. Sin embargo, el PSA inducido por el complejo inmune GPI-IgG anti-GPI
se redujo después de la depleción de neutrófilos con anticuerpos anti-Gr1 o anti-
Ly6G en los mismos ratones. También se redujo después de la depleción de
monocitos / macrófagos con liposomas que contenían clodronato o la inactivación
con gadolinio, y se anuló después del agotamiento tanto de neutrófilos como de
monocitos / macrófagos. Los neutrófilos, pero también los monocitos / macrófagos,
por lo tanto, contribuyen al PSA dependiente de FcγRIIA. Ambos tipos de células
expresan altos niveles de Fc? RIIA en los seres humanos (Figura (figure44 ).
Una contribución de los macrófagos en un modelo de anafilaxia activa se informó
anteriormente. En este modelo, los ratones inmunizados con anticuerpos IgD de
cabra anti-ratón, que indujeron respuestas de IgG anti-cabra robustas, así como la
mastocitosis, se expusieron a IgG de cabra usada como antígeno. La anafilaxia
inducida bajo estas condiciones fue de magnitud similar en ratones wt, en ratones
deficientes en IgE o FcεRI, y en ratones W / Wv. Se redujo en ratones tratados con
gadolinio, pero no o en ratones inyectados con neuraminidasa, que agota las
plaquetas, o en ratones a los que se les inyectó un mAb anti-granulocito IgG2b de
rata. La conclusión fue que los macrófagos, pero no los mastocitos, las plaquetas o
los granulocitos explicaron esta reacción anafiláctica (Strait et al., 2002 ).

Eosinófilos en el asma

Los eosinófilos residen en los tejidos de la mucosa. Están bien caracterizados

como células efectoras en las infecciones por helmintos (Klion y Nutman, 2004 ),
durante las cuales liberan una panoplia de diferentes citocinas, tales como TGF-β,
mediadores lipídicos como el factor activador de plaquetas (FAP), leucotrieno C4
(LTC4). ) y otras moléculas efectoras tales como la proteína básica principal (MBP)
y la peroxidasa de eosinófilos (EPO; Kita, 2011 ). Estas funciones hacen del
eosinófilo un arma poderosa contra los parásitos, sin embargo, su activación a
menudo se asocia con efectos perjudiciales en el entorno del huésped. Dos
condiciones alérgicas se han asociado con la activación de eosinófilos: asma
bronquial alérgica y esofagitis eosinofílica (EOE).
El asma bronquial alérgica se caracteriza por hiperreactividad de las vías
respiratorias (AHR), broncoobstrucción y aumento de la producción de moco, lo
que resulta en una inflamación crónica y, en última instancia, en la remodelación
de las vías respiratorias. Desde Ehrlich ( 1879)) describieron eosinófilos en tejido y
esputo de pacientes con asma, estas células se han identificado como el principal
objetivo de la intervención terapéutica en el asma bronquial. De hecho, los
eosinófilos han sido implicados en todos los aspectos de la patogénesis del
asma. Mientras que MBP y EPO pueden causar destrucción tisular y AHR, PAF y
LTC4 son potentes broncoconstrictores y aumentan la producción de moco, y se
cree que el TGF-β contribuye a la remodelación de las vías respiratorias. Varias
estrategias que interfieren con el reclutamiento, la activación y la supervivencia de
los eosinófilos han demostrado ser exitosas en modelos animales de asma
experimental. Estas estrategias incluyeron la inhibición del reclutamiento y
activación de eosinófilos dirigiéndose a la IL-5 (Foster et al., 1996 ; Yoshida et
al., 1996 ; Lee et al., 1997).), CD131 (Nicola y col., 1996 ; Sun y col., 1999 ),
CD300a (Munitz y col., 2006 ), CD23 (Dasic y col., 1999 , Haczku y col., 2000 ),
CD48 (Munitz et al. al., 2007 ), CCR-3 (Pope et al., 2005 ; Wegmann et al., 2007 ),
o señalización de PGD2 (Sugimoto et al., 2003 ; Uller et al., 2007 ; Shichijo et
al., 2009 ; Stearns et al., 2009 ). Otras estrategias destinadas a reducir los
números de eosinófilos mediante el uso de mAbs anti-CCR-3 (Justice et al., 2003 )
o mAbs anti-Siglec F (Song et al., 2009)) Aunque todos estos enfoques mejoraron
los síntomas del asma experimental en ratones, los primeros ensayos clínicos
dirigidos a IL-5 (Leckie et al., 2000 ; Flood-Page et al., 2003 , 2007 ), CD23
(Rosenwasser y Meng, 2005 ). CCR-3 (Pease y Horuk, 2009 ) y / o CD131
(Gauvreau et al., 2008 ) no cumplieron con las expectativas terapéuticas. Esto
podría deberse al hecho de que los modelos experimentales de asma en ratones a
menudo dependen estrictamente de la hipereosinofilia de las vías respiratorias y,
por lo tanto, pueden no reflejar el asma humana. Recientemente, sin embargo, dos
estudios informaron una mejoría significativa del asma altamente eosinófilo
refractario a corticosteroides graves, usando un mAb anti-IL-5 (Haldar et
al.,2009 ; Nair et al., 2009 ).
La esofagitis eosinofílica es una enfermedad atópica relacionada con alergenos
ingeridos e inhalados. Se caracteriza por un infiltrado eosinofílico en la mucosa del
esófago que puede dar como resultado una luz esofágica estrecha (Liacouras et
al., 2011 ). Los pacientes sufren de disfagia, ardor de estómago o dolor en el
pecho. En la mayoría de los casos, la EoE se asocia con otras formas de alergia,
como asma, fiebre del heno o eczema. Los tratamientos comunes consisten en la
eliminación de la dieta y la administración tópica de corticosteroides o propionato
de fluticasona, que moviliza el infiltrado eosinofílico y mejora los síntomas
(Remedios et al., 2011 ). MAb anti-IL-5 (Assa'Ad et al., 2011 ) y antagonistas de
los receptores de leucotrienos (Lucendo et al., 2011) también se han utilizado con
éxitos variables.
Ir:

Mast Cells and Company

Teniendo en cuenta la variedad de anticuerpos, receptores, y las células que se
encontraron estar involucrado en modelos experimentales de la anafilaxia
(Tabla (Tabla2),2 ), el paradigma / / mastocitos IgE Fc RI aceptado desde hace
tiempo, en el que la definición de hipersensibilidad inmediata es basada en la
clasificación de Gell y Coomb, y de la que dependen la mayoría de los enfoques
terapéuticos de la alergia, parece demasiado reduccionista. Uno debe considerar
no solo IgE sino también anticuerpos IgG, no solo FcεRI, sino también FcγR de los
diferentes tipos, no solo mastocitos y basófilos sino también neutrófilos, monocitos,
macrófagos, eosinófilos y posiblemente otras células mieloides.

Tabla 2
Anticuerpos, receptores y células involucradas en la anafilaxia experimental .

IgE / mastocitos y IgG / células mieloides en la anafilaxia

La conclusión más sorprendente de los trabajos discutidos en esta revisión es que

el paradigma IgE / FcεRI / mastocitos probablemente tiene una contribución menor,
si es que existe, en ASA. De hecho, ASA se desarrolló normalmente en ausencia
de IgE, en ratones deficientes en FcεRI y en ratones que carecían de
mastocitos. Los anticuerpos IgG (no solo IgG1, sino también IgG2), FcγR (no solo
FcγRIIIA cuya deleción no evitó ASA, sino también FcγRIV) y granulocitos (no solo
los basófilos cuyo agotamiento apenas disminuyó la magnitud de ASA, sino
esencialmente neutrófilos) aparecieron como los principales jugadores que
participaron y representaron ASA. Se puede argumentar que esta conclusión se
basa en los resultados de experimentos realizados en modelos murinos que
pueden no simular fielmente los shocks anafilácticos observados en pacientes. Los
ratones se inmunizaron mediante inyecciones repetidas de cantidades
relativamente altas de antígeno en adyuvante de Freund o en alumbre, lo que
favorece las respuestas de IgG en lugar de las respuestas de IgE. El papel de los
anticuerpos IgG2 podría desenredarse utilizando ratones que expresan
únicamente receptores de IgG2, y esta subclase de anticuerpos es
cuantitativamente menor en las respuestas inmunitarias de los ratones. El bloqueo
de FcγRIV, sin embargo, redujo el ASA, aunque fue menor que la deleción de
FcγRIIIA que se une tanto a IgG1 como a IgG2, en ratones wt inmunizados con
antígeno en adyuvante de Freund. IgG1 es varias veces más abundante que IgG2
en suero de ratones normales e inmunizados, incluso después de la inmunización
en adyuvante de Freund. Son mucho más abundantes que la IgE en ratones,
cualquiera que sea el protocolo de inmunización utilizado, pero también en
humanos, incluso en pacientes alérgicos. que favorece las respuestas IgG en lugar
de las respuestas IgE. El papel de los anticuerpos IgG2 podría desenredarse
utilizando ratones que expresan únicamente receptores de IgG2, y esta subclase
de anticuerpos es cuantitativamente menor en las respuestas inmunitarias de los
ratones. El bloqueo de FcγRIV, sin embargo, redujo el ASA, aunque fue menor que
la deleción de FcγRIIIA que se une tanto a IgG1 como a IgG2, en ratones wt
inmunizados con antígeno en adyuvante de Freund. IgG1 es varias veces más
abundante que IgG2 en suero de ratones normales e inmunizados, incluso
después de la inmunización en adyuvante de Freund. Son mucho más abundantes
que la IgE en ratones, cualquiera que sea el protocolo de inmunización utilizado,
pero también en humanos, incluso en pacientes alérgicos. que favorece las
respuestas IgG en lugar de las respuestas IgE. El papel de los anticuerpos IgG2
podría desenredarse utilizando ratones que expresan únicamente receptores de
IgG2, y esta subclase de anticuerpos es cuantitativamente menor en las
respuestas inmunitarias de los ratones. El bloqueo de FcγRIV, sin embargo, redujo
el ASA, aunque fue menor que la deleción de FcγRIIIA que se une tanto a IgG1
como a IgG2, en ratones wt inmunizados con antígeno en adyuvante de
Freund. IgG1 es varias veces más abundante que IgG2 en suero de ratones
normales e inmunizados, incluso después de la inmunización en adyuvante de
Freund. Son mucho más abundantes que la IgE en ratones, cualquiera que sea el
protocolo de inmunización utilizado, pero también en humanos, incluso en
pacientes alérgicos. El bloqueo de FcγRIV, sin embargo, redujo el ASA, aunque
fue menor que la deleción de FcγRIIIA que se une tanto a IgG1 como a IgG2, en
ratones wt inmunizados con antígeno en adyuvante de Freund. IgG1 es varias
veces más abundante que IgG2 en suero de ratones normales e inmunizados,
incluso después de la inmunización en adyuvante de Freund. Son mucho más
abundantes que la IgE en ratones, cualquiera que sea el protocolo de inmunización
utilizado, pero también en humanos, incluso en pacientes alérgicos. El bloqueo de
FcγRIV, sin embargo, redujo el ASA, aunque fue menor que la deleción de
FcγRIIIA que se une tanto a IgG1 como a IgG2, en ratones wt inmunizados con
antígeno en adyuvante de Freund. IgG1 es varias veces más abundante que IgG2
en suero de ratones normales e inmunizados, incluso después de la inmunización
en adyuvante de Freund. Son mucho más abundantes que la IgE en ratones,
cualquiera que sea el protocolo de inmunización utilizado, pero también en
humanos, incluso en pacientes alérgicos.

ASA y PSA

Otro hallazgo inesperado es que el PSA no aparece como un modelo preciso de

ASA. La anafilaxis pasiva (PSA en animales de experimentación y, más tarde, la
reacción de Prausnitz-Küstner, su equivalente en humanos) se desarrolló poco
después de Richet ( 1907).) demostró que la sensibilización anafiláctica podría ser
transferida pasivamente por el suero de animales inmunizados activamente. Una
diferencia importante es que el sistema inmune de los animales inyectados con
anticuerpos no ha "visto" el antígeno antes del desafío, mientras que el de los
animales inmunizados ha montado previamente una respuesta inmune adaptativa
específica, con todos sus efectores, y reacciona por segunda vez al antígeno , con
estos efectores, cuando se desafía con el antígeno. Otra diferencia es que se ha
generado una matriz completa de anticuerpos, con concentraciones respectivas
relativamente bien definidas, en animales inmunizados, mientras que los
anticuerpos de una sola clase se inyectan habitualmente en receptores,
especialmente desde que se dispuso de anticuerpos monoclonales. En estas
condiciones, los FcR específicos están dirigidos por anticuerpos de una u otra
clase y, en la mayoría de los casos, tipos celulares específicos, según el FcR que
expresen. Por lo tanto, la IgE dirigida pasivamente se dirige principalmente a Fc \
varepsilon RI que se expresa exclusivamente por mastocitos y basófilos en
ratones. Por qué las células cebadas, pero no los basófilos, explican que el IgE-
PSA no esté claro. Los anticuerpos IgG1 se dirigen a FcγRIIIA, que son los únicos
FcR activadores que se unen a esta subclase de anticuerpos en ratones. Las
células de ratón expresan ampliamente FcγRIIIA, y no solo por mastocitos y
basófilos. Por qué no se desconocen las células cebadas ni, posiblemente, los
basófilos, parecen ser responsables del IgG1-PSA, así como el tipo de célula
responsable. Los anticuerpos IgG2 también se dirigen a FcγRIIIA, pero también a
FcγRIV que se expresan solo por monocitos / macrófagos y neutrófilos. ¿Por qué
IgG2-PSA implica neutrófilos, pero no monocitos / macrófagos, que también
expresan FcγRIIIA y FcγRIV, ni mastocitos o basófilos, que expresan FcγRIIIA,

Activando FcR y FcR inhibitorio

Los anticuerpos IgG activan tanto a los receptores activadores como a los
inhibidores, dependiendo del tipo de célula, que puede modular no solo las
respuestas inducidas por IgG, sino también por IgE. Esta regulación no ocurre
cuando se inyecta IgE monomérica purificada para preparar ratones para PSA. Un
ejemplo de inhibición dependiente de FcγRIIB es el siguiente. Los monocitos y
neutrófilos de ratones wt expresan el mismo FcR: FcγRIIB, FcγRIIIA, FcγRIV, y
posiblemente FcγRI. Los monocitos y neutrófilos de ratón pueden inducir
anafilaxia. Sin embargo, los neutrófilos, pero no los monocitos, explicaron el PSA
inducido por suero anti-GPI en ratones wt, mientras que los monocitos, más que
los neutrófilos, explicaron la misma reacción en ratones FcγRIIA Tg . La
contribución dominante de neutrófilos en ratones wt puede explicarse por la menor
expresión de FcγRIIB en neutrófilos que en monocitos (Figura(Figure4).4 ). Por lo
tanto, las señales de activación inducidas por anticuerpos IgG de una magnitud
similar podrían ser inhibidas por FcγRIIB más eficientemente en monocitos que en
neutrófilos. A diferencia de los ratones WT, 3KO-, y 5KO-Fc? RIIA Tg ratones no
expresan Fc? RIIB. Sus neutrófilos y sus monocitos expresaron niveles similares
de FcγRIIA transgénica cuyas señales de activación no fueron inhibidas por
FcγRIIB y pudieron inducir reacciones anafilácticas de magnitudes comparables.

El árbol y el bosque

Finalmente, los hallazgos y conclusiones discutidos en esta revisión son menos

provocadores de lo que parecen. El PSA inducido por suero es un mejor modelo
de ASA que el PSA inducido por anticuerpos monoclonales. La razón es que
ambos ensayos implican los mismos anticuerpos policlonales. De hecho, el suero
anti-GPI, que contiene una matriz completa de anticuerpos policlonales de las
diversas clases y subclases, indujo PSA que involucraba los mismos receptores
(FcγRIIIA y FcγRIV) y las mismas células (principalmente neutrófilos) que ASA en
ratones de tipo wt ( Tabla (Tabla 2).2) El PSA inducido por suero, se describió
inicialmente, y luego se usó para demostrar que ASA depende de anticuerpos,
antes de que se usaran anticuerpos purificados, primero y, posteriormente,
anticuerpos monoclonales para PSA. Sin embargo, si no recapitula ASA, el PSA
inducido por anticuerpos monoclonales sigue siendo una poderosa herramienta
analítica que se dirige a células y receptores.
Nuestros hallazgos tienen sentido si uno simplemente tiene en cuenta que los
neutrófilos son 100 veces más numerosos que los basófilos en la sangre y que los
anticuerpos IgG son 10 5 a 10 6 veces más abundantes que los anticuerpos IgE en
el plasma. El árbol IgE / mastocito / basófilo estaba de alguna manera ocultando el
bosque de células IgG / mieloides. Este cambio de perspectiva puede tener
consecuencias importantes.
Ir:

Observaciones finales
De hecho, la alergia no es otra reacción. No se debe a efectores únicos, ya sean
moleculares o celulares, que sean exclusivamente patógenos, sino a las mismas
células y moléculas que coinciden con las respuestas inmunes protectoras. La
alergia es una reacción inflamatoria adaptativa aguda iniciada por anticuerpos. La
inflamación es una respuesta de defensa fisiológica. Asocia los mecanismos de
destrucción y reparación que son fundamentales para la curación de heridas y la
protección contra la infección. La inflamación también es potencialmente dañina,
pero en condiciones normales, se mantiene bajo el control de mecanismos
reguladores eficientes.
La inflamación inducida por anticuerpos depende de una multitud de
parámetros. (1) Depende en primer lugar de la presencia de antígeno. No se
puede inducir ningún efecto en ausencia de antígeno, incluso si hay anticuerpos
presentes. (2) Depende de la disponibilidad de anticuerpos. Los anticuerpos están
presentes en concentraciones relativamente altas en sangre y en órganos
hematopoyéticos, pero en concentraciones más bajas en tejidos periféricos, como
la piel, por ejemplo. Las concentraciones locales de anticuerpos (por ejemplo, IgE)
pueden, sin embargo, ser altas. Un ejemplo son los pólipos nasales que están
asociados con la rinitis alérgica y que contienen células plasmáticas secretoras de
IgE (Takhar et al., 2005).) (3) Depende de la composición isotípica de los
complejos inmunes en un momento dado y en un lugar determinado. Esta
composición está conformada por la naturaleza y la cantidad de antígeno
inmunizante, por adyuvantes, por la ruta y el modo de inmunización. (4) Depende
de la disponibilidad de FcR en una celda determinada. La FcR de alta afinidad
puede estar ocupada, al menos en parte, por anticuerpos de una especificidad
diferente. Algunos FcR son inducibles solamente, otros pueden ser regulados
hacia arriba y hacia abajo por citoquinas. (5) Depende de la expresión relativa de
FcR, especialmente de FcR activante frente a inhibidor, en células mieloides que
están presentes en el mismo sitio. (6) Depende del repertorio funcional de cada
uno de los tipos de células implicados y del cóctel de mediadores proinflamatorios
que pueden liberar o secretar. (7) Depende de la disponibilidad y de la proporción
de células de los diferentes tipos que están presentes inicialmente y que se
reclutan en el infiltrado inflamatorio. (8) Finalmente depende de los mediadores
que son liberados por las células efectoras tras la activación y en las células diana
que expresan receptores para estos mediadores presentes en el entorno.

Las alergias son notablemente polimórficas en su expresión clínica. Este

polimorfismo generalmente se explica por el lugar donde ocurre la reacción aguda
y en las células diana que responden a los mediadores liberados y
secretados. También puede depender de la naturaleza de las células efectoras que
se activan por anticuerpos y, por lo tanto, en las clases y subclases de
anticuerpos. Si esta visión es correcta, se puede considerar que varias entidades
nosológicas están posiblemente ocultas detrás de la alergia. Por lo tanto, uno
puede imaginar que los enfoques terapéuticos de las alergias se diversifiquen,
sean sintomáticos o etiológicos, y se adapten a las células y moléculas efectoras
implicadas. Un tratamiento antihistamínico, por ejemplo, puede ser eficiente en una
reacción dependiente de mastocitos, pero mucho menos en una reacción
dependiente de neutrófilos.

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Declaracion de conflicto de interes

Los autores declaran que la investigación se realizó en ausencia de relaciones
comerciales o financieras que pudieran interpretarse como un posible conflicto de
intereses.

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Expresiones de gratitud
Las obras de nuestro laboratorio discutidas en esta revisión fueron apoyadas por el
Instituto Pasteur, el Instituto Nacional de Salud y de la Investigación Médica
(INSERM), la Agence Nationale pour la Recherche (ANR), la Fondation Recherche
Médicale (FRM), la Société Française d'Allergologie (SFA) y la empresa
Balsan. Friederike Jönsson recibió una beca de FRM; Marc Daëron es Directeur de
Recherche de classe exceptionnelle(DRE) en INSERM y Chef de Laboratoire en
Institut Pasteur.