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INGENIERIA EN BIOTECNOLOGIA
1. Tema
Diseño experimental de la fase de desinfección del cultivo in vitro.
2. Objetivos
3. Marco teórico
CLASIFICACIÓN CIENTÍFICA
Reino: Plantae
División: Magnoliophyta
Clase: Magnoliopsida
Orden: Gentianales
Familia: Rubiaceae
Subfamilia: Cinchonoideae
Tribu: Cinchoneae
Nombre científico Cinchona Officinalis
Nombre común Cinchona
(Soria & Viteri, 1999).
Características Morfológicas:
Arbol de la quina puede ser reconocida dentro de su género por sus hojas que son
generalmente más agudas en el ápice y tienen la domatia predominantemente en la
porción basal (proximal), la extremidad del cáliz muy profundamente lobulado, y sus
frutos con paredes de textura bastante gruesa; mientras en C. calisaya las hojas en su
mayoría son obtusas a redondeadas en el ápice y con las domatias en su mayoría que se
encuentran en la parte superior, la extremidad del cáliz superficialmente lobulada, y sus
frutos con paredes parecidas al papel. Cinchona Officinalis es una de las pocas especies
de este género que Andersson ha diagnosticado como que tienen siempre hoyo de
domatias en las hojas.
Factores tratamiento: son aquellas fuentes cuyo efecto sobre la respuesta es de particular
interés para el experimentador. Tratamiento pueden ser cualitativos o cuantitativos.
Factores “nuisance”: son aquellas fuentes que no son de interés directo pero que se
contemplan en el diseño para reducir la variabilidad no planificada.
Los niveles de un factor tratamiento son los tipos o grados específicos del factor que se
tendrán en cuenta en la realización del experimento (Guitierrez, 2008).
4. Problema de caso
Se necesita una producción masiva de la especie Cinchona Officinalis, utilizando la
raíz como explante, por lo que es necesario identificar un protocolo de desinfección
que me asegure la mayor cantidad de plantas viables.
El cultivo in vitro, como técnica, consiste en cultivar asépticamente una porción aislada
de la planta bajo condiciones de ambiente controlado, para que las células expresen su
potencial intrínseco e inducido.
1.1.Variables
Tabla 3: Variables
Dependiente Independiente
% de contaminación Tiempo
% de Oxidación Concentración del H2O2
Análisis de resultados
Comprobación de la normalidad de los datos del % de contaminación:
Análisis gráfico
Ilustración 1: Histograma con polígono de frecuencia representando los datos del % de contaminación
El histograma y el polígono de frecuencia nos indican que los datos de % de
contaminación poseen una distribución normal ya que tienen la forma característica de
la campaña de Gauss.
Análisis Estadístico
Test Shapiro-Wilk
Prueba de Tukey
Se aplicó la prueba de Tukey que es una prueba no paramétrica ya que nuestros datos no
resultaron tener una distribución normal. Como podemos observar la letra A corresponde
a las mejores opciones siendo el tratamiento 2 el mejor, el cual posee 1% de Hipoclorito
de sodio y es administrado durante un periodo de 30 minutos, esto se determina gracias a
que posee la menor media que corresponde al % de contaminación es la menor.
Análisis gráfico
Se aplicó la prueba de Tukey que es una prueba no paramétrica ya que nuestros datos no
resultaron tener una distribución normal. Como podemos observar la letra A corresponde
a las mejores opciones siendo el tratamiento 2 el mejor, el cual posee 1% de Hipoclorito
de sodio y es administrado durante un periodo de 30 minutos, esto se determina gracias a
que posee la menor media que corresponde al % de contaminación es la menor.
Análisis gráfico
Ilustración 4: Histograma con polígono de frecuencia representando los datos del % de oxidación
El histograma y el polígono de frecuencia nos indican que los datos del % de oxidación
no poseen una distribución normal ya que no tienen la forma característica de la campaña
de Gauss.
Análisis estadístico
Test Shapiro-Wilk
Ilustración 5: Prueba de normalidad de Shapiro-Wilk
Los datos de la Tabla 6 que contienen el % de oxidación fueron analizados con el test de
Shapiro-Wilk, dándonos un p-valor <0,0001 igual que en él % de contaminación, con lo
que podemos establecer que los datos no presentaban una distribución normal.
Prueba de Tukey
Ilustración 6: Prueba de Tukey
La prueba de Tukey se realizó para determinar cuál de los métodos empleados es el mejor
para la desinfección de Cinchona Officinalis, siendo la letra A las mejores opciones, el
tratamiento 2 que corresponde al 1% de Hipoclorito de sodio por 30 minutos es mejor ya
que posee la menor media que corresponde al % de oxidación.
5. Conclusiones y Recomendaciones
6. Cuestionario
Aplicaciones de la bioestadística
Obtiene datos y estadísticos para el Registro y Control de Enfermedades
Evalúa la evolución de una enfermedad en el tiempo
Compara poblaciones (caso-control / sanos-enfermos)
Evalúa tecnología tecnología que sirven de diagnóstico clínico
Evalúa la efectividad de tratamientos médicos
Estima riesgos (Ruggiero, 2012)
¿Qué medidas se deben tomar en cuenta cuando una especie tiene problemas de
bacterias y hongos endógenos?
Se debe emplear bacterioestaticos y fungiestaticos, los más empleados son: cefotaxima,
rifampicina, gentaminicina, anfotericin, benomil, carbendazim,etc.
En todas las ocasiones que se utilicen antibióticos para eliminar los microorganismos
contaminantes deben realizarse pruebas de sensibilidad antes de aplicarlos en el medio de
cultivo o directamente e a los explantes (Alvarado, 1998).
7. Bibliografía