Elucidación estructural a partir de espectroscopia RMN

Valencia V. (1439807), valencia.valeria@correounivalle.edu.co

Miguel B. (1720062), miguelandres95@hotmail.com
Bryan D. (1728150), brayan.duque@correounivalle.edu.co

Departamento de Química, Facultad de Ciencias Naturales y Exactas, Universidad del Valle

Docente, Jose Hipolito Isaza

Resumen
Se realizó la elucidación de un compuesto desconocido de tipo flavonoide a partir de espectroscopia RMN, de
acuerdo a los resultados la formula molecular del compuesto es C15H10O7 y el nombre IUPAC propuesto es (3,6-
dihidroxi-2-2,3,5-trihidroxifenil)-4H-cromen-4-ona .

Introducción

Los flavonoides contienen en su estructura química un número variable de grupos hidroxilo fenólicos y excelentes
propiedades de quelación del hierro y otros metales de transición, lo que les confiere una gran capacidad
antioxidante. Por ello, desempeñan un papel esencial en la protección frente a los fenómenos de daño oxidativo, y
tienen efectos terapéuticos en un elevado número de patologías, incluyendo la cardiopatía isquémica, la
aterosclerosis o el cáncer1.

Estructura química

Los flavonoides son compuestos de bajo peso molecular que comparten un esqueleto común de difenilpiranos (C6-
C3-C6), compuesto por dos anillos de fenilos (A y B) ligados a través de un anillo C de pirano (heterocíclico).

Los átomos de carbono en los anillos C y A se numeran del 2 al 8, y los del anillo B desde el 2' al 6'12 (fig. 1). La
actividad de los flavonoides como antioxidantes depende de las propiedades redox de sus grupos hidroxifenólicos
y de la relación estructural entre las diferentes partes de la estructura química13. Esta estructura básica permite
una multitud de patrones de sustitución y variaciones en el anillo C. En función de sus características estructurales
se pueden clasificar en:
1. Flavanos, como la catequina, con un grupo -OH en posición 3 del anillo C.
2. Flavonoles, representados por la quercitina, que posee un grupo carbonilo en posición 4 y un grupo -OH en
posición 3 del anillo C.
3. Flavonas, como la diosmetina, que poseen un grupo carbonilo en posición 4 del anillo C y carecen del grupo
hidroxilo en posición C3.
4. Antocianidinas, que tienen unido el grupo -OH en posición 3 pero además poseen un doble enlace entre los
carbonos 3 y 4 del anillo C. Tres características estructurales son importantes para su función: a) La presencia en el
anillo B de la estructura catecol u O-dihidroxi; b) La presencia de un doble enlace en posición 2,3; c) La presencia
de grupos hidroxilo en posición 3 y 514. La quercitina presenta las tres características, mientras que la catequina
solo presenta la segunda y la diosmetina la primera A los flavonoles y las flavonas se unen azúcares,
preferentemente a la posición C3 y con menor frecuencia al C7 del anillo A, de forma que estos compuestos se
encuentran comúnmente como O-glicósidos, siendo la D-glucosa el residuo azúcar más frecuente. Otros residuos
de azúcares son la D-galactosa, la L-ramnosa, la L-arabinosa, la D-xilosa, así como el ácido D-glucurónico. La parte
sin azúcares de la molécula flavonoide se llama aglicona. Los glicósidos son más solubles en agua y menos reactivos
frente a radicales libres que su aglicona o flavonoide respectivo2.
Análisis y discusión de resultados

A partir de los espectros RMN 1H, 13C, HSQC y HMBC se propone como estructura del compuesto desconocido la
mostrada en la figura 1.

Figura 1. (3,6-dihidroxi-2-2,3,5-trihidroxifenil)-4H-cromen-4-ona (nombre IUPAC). C15H10O7

Espectro RMN 1H

En el espectro se observan 10 señales que indican la presencia de 10 protones con ambientes químicos diferentes
los cuales se especifican en la estructura. El protón a es el que se encuentra más desplazado a campo bajo debido,
además del enlace directo al átomo electronegativo de oxigeno, a la posibilidad de formar enlaces de hidrogeno con
el grupo –OH en posición orto a él y el oxígeno perteneciente al éter. Las demás señales a campo bajo entre 11 y 9
ppm corresponden a los H de los grupos hidroxilos. Las señales de los protones fenólicos generalmente se
encuentran en un rango de 4-8 ppm pero debido a la posibilidad de formación de enlaces de hidrogeno son
desplazados a campo bajo1.

Por otro lado los protones entre 6 y 8 ppm corresponden a los protones aromáticos que se encuentran a campo
bajo debido al desampantallamiento que genera el doble enlace entre los carbonos a los que están unidos. Los
protoneshy g son vecinos por lo que sus señales son dobletes debido al desdoblamiento ocasionado por el protón
vecino2.

Gracias a los valores de los acoples se pudo determinar que el protón g está en posición orto con h y meta respecto
a f, además los protones i y j se encuentran en posición meta entre si. Según la tabla suministrada, al doblete de
dobletes correspondientes a g le corresponden dos constantes de acoplamiento J=2.22 Hz y J=8.48 y viendo las
constantes J= 8.49 Hz para h y J=2.20 Hz para f, se pudo determinar lo afirmado anteriormente, revisando las tablas
de constantes de acoplamiento.2
 Figura 2. Espectro RMN protónico.

Analisis bidimensional HSQC

El análisisHSQC muestra la correlación entre un protón y átomo de carbono directamente enlazados, por lo tanto
un carbono cuaternario no aparece en el análisis. La estructura presenta 5 protones enlazados directamente a un
átomo de carbono lo que explica que hallan 5 señales en la figura 3, estos protones son f, g, h , i y j
f
h i j
g

Figura 3. Espectro bidimensional HSQC

Análisis de la disposición estructural de los carbonos

En el espectro de la figura 4 se observan 15 picos correspondientes a 15 átomos de carbono con diferentes
ambientes químicos dentro de la estructura.

Figura 4. Espectro 13C-NMR

Los carbonos identificados desde el 10 al 15 corresponden a los carbonos de los anillos aromáticos que no poseen
enlace con hidroxilos puesto que se encuentran más 'protegidos' y por lo tanto desplazados hacia campo alto con
respecto a los carbonos 1-9. Los carbonos 10-12, 14 y 15 muestran correlación con protones en el HSQC, por lo que
estos se etiquetaron de acuerdo a la disposición de los hidrógenos f-j.

El C-1 por ser el más desplazado hacia campo bajo se asoció con el carbonilo característico de los flavonoides3

Los carbonos 2 al 9 fueron asignados según las correlaciones en el HMBC

 Figura 5. Espectros HMBC

Figura 6. Propuesta de la disposición estructural de los 15 carbonos

Bibliografia

(1) Aherne SA y O'Brien NM.: Dietary flavonols: chemistry, food content, and metabolism. Nutrition, 2002,
18:75-81.
(2)Havsteen B: Flavonoids. A class of natural products of high pharmacological potency. Biochem
Pharmacol, 1983, 32:1141-1148.
(3) Reich, H. J. (2012) NMR Spectroscopy.
(4) Pretsch, E., Bühlmann, P., and Badertscher, M. (2005) Structure Determination of Organic Compounds.
Org. Chem.
(3) Bone, K., and Mills, S. (2013) Principles and Practice of Phytotherapy, in Principles and Practice of
Phytotherapy 2nd ed., pp 17–82. Churchill Livingstone, Saint Louis.